Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

INTER ALIMENTOS SEILALIMENTOS-PLUS, MUCHO MAS QUE UN INTER

Presentamos el primer servicio  intercomparativo  microbiológico  de alimentos diseñado, elaborado y coordinado en España, desde Julio de 1998, bajo Norma UNE 66543-1:1999 IN sobre Ensayos de Aptitud por Intercomparación de Laboratorios, y según las directrices de las guías ENAC sobre participación en programas de intercomparación.

Y ¿cómo no ha de seguir la ISO 17043 sobre ensayos de aptitud, cuando ésta no deja de ser un calco de nuestros informes de hace dos décadas?

Todo ello coordinado por  una empresa líder en diseño y fabricación de medios y kits, cuyo alcance de certificación internacional ISO 9001 los incluye y avala, garantizando su buen hacer en cada auditoría anual de AENOR-TÜV Rheinland-SGS.

Y lo mismo por parte de PRYSMA para la ISO 17043.

Laboratorios MICROKIT acepta el reto de mantener este servicio desde 2023, cuando la tendencia del mercado involuciona a seguir con servicios e informes de estadística obsoleta (ISO 17043: z-scores, test de Grubs…) nacidos hace casi 3 décadas, que solo sirven para dar una falsa sensación de que todo está bien analizado, cuando no es así.

El nivel de calidad de los laboratorios de autocontrol del siglo XXI requería una evolución en el planteamiento de los inter, y eso es lo que ofrece en la actualidad, SEILA: no es solo otro inter, es además el único inter que:

  1. Compara métodos y medios, concluyendo tendencias de los que se demuestran más efectivos, lo que permite al laboratorio de autocontrol mantener su razón de ser: usar los métodos más fiables y que a su vez liberan más rápidamente los lotes fabricados, sin dejarse llevar por las mafias de certificación/validación creadas por los mayores proveedores de laboratorio
  2.  Compara detecciones y recuentos con herramientas mucho más serias que las z-scores y no excluye laboratorios que lo hacen mejor que la media solo porque el test de Grubs lo indique. Aplicamos el mismo criterio que emplea la norma ISO 11133-2 en cuanto a fertilidad de medios, pero aquí en la exactitud y precisión de los resultados de cada laboratorio respecto al valor consensuado medio y además teniendo en cuenta el valor inóculo. Lo cual nos evita caer en la misma trampa de mediocridad de las z-scores y de exclusión de laboratorios que trabajan mejor que la media.
  3. Somos los primeros en ayudarle a conocer el efecto matriz de sus fabricados y así poder corregirlo, ya que en cada ronda, añadimos a la muestra (y su réplica), otros tres inóculos ciegos para que pueda añadirlos a tres de sus propios fabricados y comprobar si su método es capaz de detectar/enumerar tan adecuadamente como lo hace con la matriz común de cada ronda.

SEILA ha permitido ya a más de 100 laboratorios re-VALIDAR  en continuo sus procedimientos de análisis microbiológicos y demostrar de rutina que la calidad de sus análisis está correctamente controlada de forma externa e independiente.

Este servicio busca la presencia (con o sin recuento, a gusto del usuario) o la ausencia de los siguientes microorganismos, de los que cada laboratorio analizará sólo los que le interesen (sin rebaja de coste, al ser el inóculo e informe comunes para todos los participantes):

1) Salmonella spp.

2) Bacillus cereus

3) Escherichia coli (cualquier cepa  no-VTEC)

4) Listeria monocytogenes

5) Clostridium perfringens

6) Staphylococcus aureus (coagulasa +)

7) Recuento de Hongos (levaduras y mohos)

8) Recuento de Acidolácticas (lactobacilos y demás)

9) Recuento de Aerobios mesófilos

10) Recuento de Enterobacterias

11) Recuento de Coliformes

SE INCLUYEN TAMBIEN CEPAS INTERFERENTES Y NATIVAS (SALVAJES) PARA OPTIMIZAR LA REALIDAD

Gracias a una estabilidad y a una homogeneidad sin precedentes del inóculo (cepas en lentículas cuantitativas deshidratadas), el día de inicio del análisis no es una fecha crítica para la obtención de resultados equivalentes, como sucede en la mayoría de inters.

Ni siquiera la temperatura y tiempo de transporte son críticos, siempre que el envío llegue antes de la fecha de caducidad de la ronda.

Este servicio desde 2023 es de 3 rondas al año (Marzo, Junio y Octubre)

Devuelva sus resultados en dicha tabla actualizada, adjunta a cada envío, antes del 1 de Mayo, del 1 de Septiembre y del 1 de Diciembre, de modo que tiene nada menos que casi 2 meses para realizar el análisis (por si está de vacaciones, baja, acúmulo de trabajo…).

Poco después (aprox. en otro mes y medio)  recibirá confidencialmente EN SU EMAIL el completo informe con la valoración de sus resultados con respecto a los propios de control de calidad interno del laboratorio piloto (valor inóculo) y a los de los demás participantes (valor consensuado), con los comentarios pertinentes que se deriven desde nuestro punto de vista técnico.

Como mejora respecto a otros servicios, además recibirá las No Conformidades detectadas en su método (si nos lo envió), con lista de comprobación para cada parámetro y con tablas comparativas de métodos y medios, que facilitan una visión global de la sensibilidad de cada uno de ellos, así como la calificación global del rendimiento de su laboratorio.

Los resultados de los inóculos ciegos en sus propias matrices sólo son útiles para Ud, pero si nos los adjunta, los añadiremos en un anexo del informe, para que le sirvan de prueba ante auditores e inspectores y pueda demostrar que su laboratorio está muy por encima de la media, al tener en cuenta el estudio del efecto matriz de sus propias muestras.

REFERENCIA SMT003.  El precio por muestra incluye hasta 11 parámetros, la muestra con su réplica (y sus dos inóculos ciegos) y 3 inóculos ciegos adicionales para sus propios fabricados!

Contenido: Con las tablas actualizadas de presentación de resultados, en el folleto de instrucciones, recibirá 3 artículos:

100 g de Matriz cruda pero estéril (esterilizada por rayos gamma para evitar interferencias imprevisibles por parte de una flora inicial desconocida). Y su réplica. Esto le permite, desde 2016, estudiar su repetitividad intralaboratorial En cada laboratorio participante, una muestra debería analizarla un  analista y la otra otro analista; en caso de solo tener un analista para microbiología, el mismo debería analizar una muestra un día y la otra muestra otro día. Y enviar ambas tablas de resultados.

Tubo de inóculo con los microorganismos inoculados en forma de lentículas cuantitativas desecadas, con estabilidad y homogeneidad contrastadas, recuentos y precisión conocidas y certificadas  (almacenar  a -20/+10ºC hasta comenzar el análisis). 5 tubos idénticos con el mismo inóculo mixto: 2 para el inter y 3 para 3 de sus propias matrices

Y tubo con 10 ml de caldo revitalizador del inóculo, válido para revitalizar TODOS los microorganismos de SEilalimentos. 5 tubos revitalizantes, uno para cada inóculo ciego.

Esto le permite, desde 2021, conocer el efecto matriz de sus propios fabricados (3 por ronda), e implantar las mejoras necesarias para neutralizar los problemas que detecte.

Inscripción: solicite en microkit@microkit.es la ficha de inscripción actualizada, que es similar a la siguiente:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/pdf/SEILA-INTERCOMPARATIVOS.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf

 

EFECTO MATRIZ EN ALIMENTOS

efecto matriz en alimentos, averigüe cuales de sus alimentos inhiben y dejan patógenos en letargia: no se detectan ¡pero siguen viables!

 

El efecto matriz en alimentos, al contrario que en cosméticos o en aguas cloradas, es algo de lo que se habla poco, y no se resuelve.

Casi todos los alimentos incorporan conservantes (bien a propósito o bien como saborizantes cuyo efecto secundario es la inhibición de ciertos microorganismos) que dificultan la detección de algunos microorganismos. Y esto convierte la microbiología de alimentos en una auténtica caja negra. Y dispara la incertidumbre de los resultados a niveles cientos de veces superiores a la incertidumbre calculada según Normas ISO.

Algunos autores defienden ¿Y si un alimento es inhibitorio, por ejemplo para Listeria, para qué necesito detectar si el alimento la contiene? No es un argumento válido. Es una pregunta que ya nunca se hace nadie que trabaje en microbiología  cosmética o en aguas de consumo humano o de piscinas, con cloro. Porque si el microorganismo está presente en un alimento, subletal-letárgico, pero viable, las BPFs y el sentido común exigen que sepamos que está, ya que en tal caso, cuando el consumidor lo ingiera, el efecto conservante se va a diluir y el microorganismos se va a revitalizar, provocando una toxiinfección alimentaria.

MICROKIT ha desarrollado desde 2021 el primer servicio que permite a los fabricantes de alimentos averiguar para qué microorganismos son inhibitorias sus matrices. Y mostrar sus logros para conseguir detectarlos desde entonces. Bien empleando Buffered Peptone Neutralizing Water (BPNW, APTN) o bien, además, partiendo de la dilución -2 del alimento.

Acompañado de servicio intercomparativo, en el que MICROKIT es pionero desde hace ya más de 2 décadas, el servicio Seilalimentos-Plus permite a cada fábrica de alimentos no sólo detectar qué microorganismos son inhibidos en sus matrices, sino además resolver el problema de falsos negativos que ello supone, analizando de nuevo, una vez aplicadas las soluciones para detectarlos (los mismos inóculos ciegos) y resolver definitivamente este poblema «oculto» de la microbiología alimentaria.

De paso, es un intercompartivo de élite, porque no está sometido a obsoletas Normas ISO sobre coordinación de ensayos intercomparativos, ni a sus más que permisivos valores «Z», ni a su eliminación de laboratorios con resultados supuestamente aberrantes (que en realidad no lo son, y lo parecen por aplicar estadística barata, en vez de microbio-estadística). Nosotros aplicamos criterios más acordes a la ISO 11133-2 de «control de calidad de medios de cultivo», extendida a «control de calidad  de procedimientos analíticos en microbiología de alimentos».

No lo dude, si fabrica o analiza alimentos, esta es la herramienta que necesita. Y si los auditores desconocen el efecto matriz y sus gravísimas consecuencias sobre los falsos negativos, el problema es de ellos, no de Ud. Defienda su postura y no se vea sometido a tener que añadir, además, uno de esos obsoletos servicios intercomparativos acreditados con z-scores y test de Grubbs o de Cochram, que ni siquiera se plantean acabar con el problema del efecto matriz. Puede que el mercado sí, pero la microbiología no funciona así.

https://www.microkit.es/

Solicítenos folleto técnico y calendario de rondas (3 al año)  de Seilalimentos-Plus.

En cada ronda podrá analizar, aparte del alimento común intercomparado (por duplicado, por dos de sus analistas), 3 de sus alimentos (ó mas si así lo contrata)

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf

 

Quanti-P/A Clostricult para recuento fiable de Clostridium perfringens en aguas

Recuento fiable de Clostridium perfringens en aguas de consumo humano sin necesidad de filtración ni de atmósfera de anaerobiosis. Tambien disponible kit para Clostridios sulfito-reductores. Recuento fiable Clostridium aguas.

El recuento fiable de Clostridium perfringens es la asignatura pendiente en microbiología de aguas. La legislación ha cambiado del medio mCP Agar (tan querido por unos pocos y tan aborrecido por la mayoría), a TSC Agar, el medio que funciona muy bien en alimentos. Y todos esperaban un cambio para bien con este cambio de medio. Pero los resultados intercomparativos siguen demostrando que el problema no es el medio, es algo más general. Que provoca innumerables resultados falsamente negativos. Y en los positivos, provoca reducciones en los recuentos de 1-3 log desde el valor real.

En MICROKIT sabemos donde está el problema, y por eso hemos buscado la solución adecuada. Porque diseñamos el medio cromogénico para Clostridium perfringens (colonias naranjas) y va genial en alimentos y cosméticos, pero en aguas sigue dando falsos negativos.

El problema es que estamos oxigenando, mediante la técnica de filtración de membrana, el agua que contiene microorganismos anaerobios estrictos. Pruebe a filtrar medio FTM tioglicolato, que tiene un indicador de oxigenación (resazurina, que vira a rosado en presencia de oxígeno). Verá como la membrana de filtración se vuelve rosa al filtrar a través de ella.

Es justo lo contrario, pero análogo, a que nosotros, aerobios estrictos, cayéramos en un armario cerrado al fondo del mar. ¿Cuántos minutos aguantaríamos sin perecer por falta de oxigeno?

Estamos olvidando desde los primeros instantes del análisis, que trabajamos con anaerobios estrictos: seres que mueren en presencia del oxígeno del aire. Y por eso su hábitat natural son los fangos, las aguas profundas y el tracto digestivo de los animales. Y los estamos colocando en la atmósfera adecuada de anaerobiosis, durante la incubación. Demasiado tarde, cuando muchas (o todas) las células se han hecho ya inviables durante el proceso de la filtración.

Por eso vimos que no era un problema de medios, era un problema de métodos. E inventamos el método que acaba con todos los problemas del recuento, hasta ahora incierto, de Clostridium perfringens en aguas.

En primer lugar, hacía falta un método de inclusión en masa para recuento en 100 mL, no en 1 mL como las DryPlates y otras placas deshidratadas pensadas para muestras de alimentos o cosméticos.

En segundo lugar, hacía falta un método que no expusiera a las células de anaerobios al oxígeno del aire, como hace gravemente la filtración de membrana.

Tras emular nuestras DryPlates (que recuentan en masa sin tener que fundir medios), combinadas con 100 mL de la muestra de agua, y la atmósfera de anaerobiosis, surgió la patente Quanti-P/A Clostricult. Útil tanto para C.perfringens con TSC Agar, como para Clostridios sulfito-reductores con SPS Agar.

Ambos medios necesitaban la adición de nuestro famoso hidragar para mezclar el medio con los anaerobios presentes, y solidificar el agua de muestra sin tener que estar fundiendo medios.

Y tambien ambos medios necesitaban el generador de la atmósfera de anaerobiosis, lo cual fué posible agregar directamente al medio.

Sólo nos faltaba encontrar el recipiente adecuado para la mezcla de la muestra de agua con el medio, que fuese 100% hermético. Que permitiera luego amasarlo, para homogeneizar. Y plancharlo, para que la capa de medio fuese fina y permitiese un buen recuento.

Lo encontramos gracias a las bolsas con tapón a rosca donde hemos introducido el TSC Agar en polvo con hidragar y generador de anaerobiosis, conjunto que llamamos Quanti-P/A Clostricult.

Tambien ofrecemos el mismo kit con SPS Agar en polvo con hidragar y generador de anaerobiosis, para recuento fiable de clostridios sulfito-reductores en 50-100 mL de agua.

El tamaño de la bolsa elegida es muy superior al de la placa de filtración para membranas de 47 mm de diámetro, lo cual permite aumentar drásticamente el límite superior de cuantificación. Porque pasamos de los 1.590 mm2 de la membrana a 18.600 mm2 de la bolsa Quanti-P/A.

Lo cual permite leer 11 veces más colonias por muestra de 100 mL en la bolsa, que en la membrana estándar.

Por fin, el tapón a rosca permite recuperar colonias para su confirmación posterior, ya que el medio es más blando que un agar estándar. Y se pueden «pescar» colonias con asa de siembras, desde el tapón abierto.

Recuento fiable Clostridium aguas. Método diseñado por MICROKIT y protegido por patente. https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult.pdf

Linealidad del método QPA-CP
Recuento en el rango medio en QPA-CP
Colonias típicas (negras con burbuja) de Clostridium perfringens en QPA-CP
https://youtu.be/9ACxFVKJhrM
 
Por fin un recuento fiable de clostridium perfringens en aguas

https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf 

ASPARAGINE PSEUDOMONAS BROTH

ASPARAGINE BROTH caldo APHA/CENAN para detección y enumeración NMP presuntivas de Pseudomonas aeruginosa en aguas embotelladas, refrescos…

COMPOSICIÓN
Fosfato monopotásico 10,0 g
Fosfato dipotásico 1,0 g
Asparagina 2,0 g
Sulfato magnésico 0,5 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN
Disolver 13,5 gramos en 1 litro de agua bidestilada que contenga 8 ml de glicerol. Agitar hasta su completa disolución. Autoclavar a 121° C durante 15 minutos. Para obtener el caldo a doble concentración, disolver 27 g en 1 litro de agua bidestilada que contenga 16 ml de glicerol. El color final del medio es paja-verdoso.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT346

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO ASPARAGINE BROTH:
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema
PREPARADO: Estéril, Paja-verdoso

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 35-37°C aproximadamente:
Pseudomonas aeruginosa MKTA 27853, Correcto, turbidez.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 10145, Correcto, turbidez.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P Inhibido

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN ASPARAGINE BROTH
Medio que permite el correcto enriquecimiento de Pseudomonas aeruginosa por ser estrictamente mineral, con la Asparagina como única fuente de nitrógeno y la glicerina como única fuente de hidratos de carbono. Los demás componentes tamponan y proporcionan minerales. En principio, sólo los Gram negativos no fermentadores pueden crecer en estas condiciones.
Se recomienda para la enumeración NMP mediante 5 tubos/series inoculando 10 ml, 1 ml y 0,1 ml de muestra.
Los tubos se incuban a 35 °C durante 24-48 horas.
Pseudomonas aeruginosa hidroliza la asparagina, convirtiéndola en ácido aspártico. La aparición de crecimiento mediante turbidez (aparezca o no pigmentación fluorescente) se considera presuntiva de la presencia de Pseudomonas aeruginosa. y/o de otros Gram negativos No fermentadores. Mediante el NMP se determina su concentración en la muestra.

Confirmar los tubos turbios añadiendo una alícuota de cada uno en sendos tubos de caldo Acetamida (DMT003) que virarán, tras incubarse y añadir reactivo Nessler (SDA002), a amarillo-pardo, si la presencia de Pseudomonas aeruginosa es auténtica.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro ASPARAGINE PSEUDOMONAS BROTH o cualquier otro producto no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

https://www.microkit.es/fichas/CETRIMIDE-CN-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf

 

ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH

ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH caldo para detectar microorganismos alterativos resistentes al calor, acidez y presión osmótica

Caldo para recuento total de microorganismos acidotermófilos y osmotolerantes en alimentos. Detecta los heterotrofos osmoacidotolerantes que fermentan la glucosa con producción de gas.

BOTE 500COMPOSICIÓN
Peptona de Carne 5,0 g
Extracto de Levadura 5,0 g
Glucosa 40,0 g (Fórmula por litro)
pH final: Ajustar hasta 3,8 ± 0,2

PREPARACIÓN
Disolver 50 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Ajustar pH a 3,8. Calentar, agitando, hasta ebullición, para su total homogeneización.
Añadir 10 ml por tubo con campana Durham. Autoclavar a 121ºC durante 15 minutos. Incubar 2-7 días a la temperatura óptima para los microorganismos buscados, en general 20-35°C. Contar por el método NMP o bien, para detección, dar como positivo todo tubo turbio con gas retenido en la campana.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. DESHIDRATADO
CODIGO: DMT223

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema Zygosaccharomyces pombe MKTA 24751, Correcto, turbidez y producción de gas.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTHr o cualquier otro producto no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

https://www.microkit.es/fichas/ACIDOTERMOFILOS-OSMOTOLERANTES-GPY-BROTH.pdf

CROMOKIT MAXIM-PCA CROMOGÉNICO

Plate Count Agar CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO es un PCA cromogénico dopado para recuperar el máximo posible de microorganismos.

Recuento total con máxima recuperación en alimentos, aguas y cosméticos, basado en PCA (FIL,IDF,AOAC,APHA,ICMSF), diferenciando las colonias, incluso las más diminutas, de las partículas y del medio.
Recuperación superior (122%) al PCA y 116% respecto al TSA.Cromokit Maxim-agar
COMPOSICIÓN
Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g
Glucosa 1,0 g
Factores doping MICROKIT 8,0 g
Agar-agar 10,5 g
Cromógeno termoestable c.s.
(Fórmula por litro)
pH final: 6,8 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a 116°C durante 15 minutos. No sobrecalentar ni mantener fundido mucho tiempo. Refundir sólo una vez. El color final del medio es blanco-crema. A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna al crema cuando se vuelve a enfriar el medio, lo cual no afecta los resultados.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: BCD515

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-48 h a 37 ºC o mejor 72 h a 30 ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT: E. coli MKTA 25922, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 90-184 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-164 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA. Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-129 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente, Colonias rojas en 48 h, crecen mucho más rápido y mejor que en TSA, y mejor a temperatura ambiente.
Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-191 % *de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, colonias rojas. * Esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
Recuento total standard de bacterias aerobias en alimentos, aguas, productos farmacéuticos, cosméticos y otros productos. Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja, purpura…. sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los aerobios). El color no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en masa. Incubar a 30 ºC aproximadamente durante 48 horas. Con flora psicotrofa, incubar a 6 ºC aproximadamente durante 10 días y con flora termófila, incubar a 55 ºC aproximadamente durante 48 horas.
Contar todas las colonias. La recuperación supera el 20% por encima de la obtenida en PCA y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a ciertos factores doping de aerobios descubiertos y agregados por MICROKIT. Esta fórmula, con menos agar, aumenta la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación del fondo. Este medio está diseñado para siembra en masa. Si desea sembrar en superficie, añada 3-5 g/l de Agar-Agar (BCB006), o utilice 30-32 g/l de este mismo medio. Para minimizar la desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas (SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de autoclavar. Para contar por separado las bacterias, de las levaduras y mohos, añadir a un duplicado, enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de Cicloheximida (SKM200): En la placa con CEX sólo crecerán las bacterias y en la placa sin CEX , la suma de bacterias + levaduras y mohos.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO o cualquier otro producto no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-MAXIM-AGAR-CROMOGENICO.pdf

 

AEROMONAS AGAR (BILE SALT IRGASAN BRILLIANT GREEN AGAR)

AEROMONAS AGAR (BILE SALT IRGASAN BRILLIANT GREEN AGAR) es un Agar selectivo para el aislamiento y la enumeración de Aeromonas spp. en alimentos, aguas,  ambiente y muestras clínicas.

PREPARACIÓN
Disolver 45,5 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta ebullición. No  autoclavar! No sobrecalentar! El color final del medio es púrpura. No refundir!

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS  OMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT316

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª,  cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, púrpura PREPARADO: Estéril, púrpura
CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 horas a 37°C aproximadamente: Aeromonas hydrophila MKTA 49140, Excelente, colonias rosas traslúcidas de 0,5-3 mm. Pseudomonas aeruginosa MKTA 10662, Excelente, colonias rosas traslúcidas de 0,5-1 mm. Staphylococcus aureus MKT 6571, Inhibido. E.coli MKT 9001, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Basando su selectividad en el verde brillante e irgasan, no inhibe las cepas de Aeromonas sensibles a la ampicilina que es empleada en otros medios.
SIEMBRA E INTERPRETACIÓN: En muestras clínicas, sembrar en superficie, en estría para aislar colonias. En muestras ambientales de agua, sembrar la membrana filtrada evitando la aparición de burbujas o de pliegues.
En muestras de alimentos incubar previamente 18-24 horas a 37°C en agua de peptona alcalina (DMT151) y sembrar después un inóculo enriquecido en estría. El uso de este enriquecimiento en la investigación de Aeromonas spp. aumenta su frecuencia de detección hasta en un 40% de los casos.
Incubar 18-24 horas a 37°C.
Examinar las colonias típicas de Aeromonas: rosas y transparentes de 0,5-3 mm de diámetro. Identificarlas mediante la oxidasa (KOT050) y el medio O/F (DMT095): Aeromonas es oxidasa  positiva y muestra ambos metabolismos (oxidativo y fermentativo), mientras Pseudomonas, que también es oxidasa positivo, no tiene metabolismo fermentativo. También pueden diferenciarse mediante TSI Agar (DMT127) porque Aeromonas crece con fondo ácido (amarillo) y pico alcalino (rojo) o inalterado (naranja), mientras Pseudomonas crece con fondo y pico inalterados (naranja).
Identificar la especie con galerías adecuadas.
NOTA: Por lo general, las Aeromonas pueden crecer bien sobre los medios de cultivo convencionales en el laboratorio, tales como agar MacConkey, agar Hektoen, agar xilosa-lisina-desoxicolato (XLD), agar Salmonella-Shigella (SS) y agar nutriente sin adición de sales. Sin embargo estos medios no son selectivos para ellas y los coliformes acompañantes enmascaran y dificultan su detección. Diferentes medios de cultivo y métodos para el aislamiento de Aeromonas sp. de aguas se han propuesto: (APHA, 1989; Havelaar et al., 1987; Nishikawa y Kishi, 1987; Kersters et al., 1996), Agar Ampicilina Dextrina (ADA), Agar Sangre con Ampicilina (ASA), Agar CIN (Cefsulodina-Irgasan- Novobiocina, originalmenter creado para Yersinia enterocolitica). Este ultimo
permite el crecimiento de la mayoría de las especies y, en algunos estudios, consigue un incremento del 35% en las tasas de aislamiento. Sin embargo lo ideal para el estudio de las bacterias pertenecientes a la familia Aeromonadaceae es seguir los esquemas de Janda y col. y Satcher: se inocula un tubo con agua peptonada alcalina a pH 8,4 (Ref: DMT151), con el fin de incrementar el desarrollo de especies de los géneros Aeromonas y Plesiomonas, este caldo se incuba a 37°C durante 4 a 6 horas en condiciones de aerobiosis, al cabo de ese tiempo se siembra en Agar Nutritivo, Agar Ampicilina-Almidón, Agar Almidón-Sales Biliares-Verde Brillante (BBGS) según Nishikawa y Kishi o mejor el presente agar Aeromonas Irgasan-Sales Biliares-Verde Brillante (Ref: DMT316), incubando a 37°C, en condiciones de aerobiosis durante 24 a 48 horas. Se valoran las colonias obtenidas y se purifican las colonias de interés para su identificación bioquímica o molecular (Ref: SFI004+).
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro AEROMONAS AGAR (BILE SALT IRGASAN BRILLIANT GREEN AGAR) no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

https://www.microkit.es/fichas/AEROMONAS-AGAR.pdf

SALMOQUICK: Detección rápida y fiable de Salmonella spp. en alimentos

Detección rápida fiable Salmonella: Salmoquick detecta Salmonella en sólo 36 horas , sin necesidad de aparataje especial alguno

El método ISO 6579 tiene como desventajas la lentitud de obtención de resultados y la no
neutralización de los conservantes de la muestra, que conlleva a resultados falsamente negativos. En dicha Norma se realiza un pre-enriquecimiento revitalizador de 25 g de la muestra, 18-24 h a 35-37ºC en 225 ml de Agua de Peptona Tamponada (BPW). Al día siguiente se toma una alícuota y se incuba por duplicado en un post-enriquecimiento selectivo en 10 ml de Rappaport VS Broth y en 10 ml de MK Tetrationato Broth otras 18-24 h. Y de ahí se estría por duplicado, en XLD y en otro medio de elección por el laboratorio, incubando otras 18-24 h. De modo que todas las muestras (incluso las negativas) llevan un mínimo de 3 días (72 h) de demora en la obtención de los resultados presuntivos. Se emplean en total 5 medios, de los cuales uno (Rappaport) es tan selectivo que inhibe muchas cepas de Salmonella, por lo que se ha de usar otro en paralelo (MK Tetrationato). Otro, el BPW, no inactiva los conservantes, ni los metabolitos creados por la flora acompañante, permitiendo la aparición a menudo de resultados falsamente negativos.
SALMOQUICK ha sido diseñado por Laboratorios MICROKIT, basándose en la Norma ISO 6579 pero optimizándola; el método varía, ahorrando un medio y acortando el tiempo de obtención de resultados a la mitad: sólo 36 horas! En este caso se realiza el pre-enriquecimiento revitalizador (e inactivador de conservantes y de metabolitos generados por el resto de la flora acompañante, que podrían interferir en el crecimiento de Salmonella en un sinfín de matrices alimentarias) de 25 g de la muestra en 225 ml de Agua de Peptona Tamponada Neutralizante (BPNW), 2-20 minutos a temperatura ambiente. Se añaden al mismo 18 ml de SS Broth a [x5], se mezcla y se incuba el conjunto 18 h a 35- 37ºC, constituyéndose así en un solo paso la revitalización de las Salmonella dañadas, la inactivación de los graves problemas que no contempla la ISO 6579 y el aumento de la selectividad para la multiplicación de las Salmonella presentes. En este medio mixto, las muestras con Salmonella ennegrecen el caldo, por lo que de entrada en las primeras 18h ya tenemos una alerta de posible presencia de Salmonella si el caldo está negro. Pero algunas otras enterobacterias también pueden ennegrecer, por lo que hay que continuar con el segundo paso: Al día siguiente se estría por duplicado, en XLD y en Cromosalm, incubando otras 18h. De modo que las muestras sin crecimientos típicos de Salmonella (colonias negras en XLD y colonias verdes en Cromosalm) son liberadas en sólo 36h.
La validación de SALMOQUICK ha sido realizada con los cuatro medios indicados, y de la marca Microkit. Cualquier variación sobre los medios o la marca invalida nuestra validación.

SALMOQUICK es una herramienta simple, rápida y fiable, diseñada especialmente para simplificar y agilizar al máximo el control de alimentos con contaminación por Salmonella, que es uno de los puntos más críticos y que más retrasan la liberación del lote en la industria alimentaria.

SIMPLE: Ahorra un medio de cultivo de dudosa utilidad (Rappaport) y cambia dos medios mediocres (BPW y MK-T Broth) por los más modernos y eficientes (BPNW y SS Broth)

RÁPIDA: De la muestra a la liberación del lote en sólo 36 horas (frente a las 72 h habituales); además alerta de la posible presencia de Salmonella en las primeras 18 h (vira a negro).

FIABLE: Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140 por el método de pares frente a la Norma ISO 6579, con inóculos muy bajos de distintas cepas de Salmonella, variada flora interferente, matrices inhibitorias y 100% de eficiencia (ver publicación en bibliografía).

Se presenta de dos formas: como kit preparado y listo para usar y como un conjunto de los 4 medios de cultivo deshidratados necesarios para que el mismo laboratorio se lo pueda preparar.

a) SALMOQUICK-Estéril, kit listo para emplear: los 3 medios neceSalmoquicksarios para detección rápida de Salmonella (en sólo 36h), en presentación estéril y lista para su uso. 3×20 Tubotes prepesados y estériles BPNW para añadir a 225 ml de agua estéril (Ref: KBB002), 3×20 tubos SS Broth 18 ml [x5], 60 DryPlates-SAL preparadas con Agar Cromosalm. No se incluyen las placas XLD, para no acortar su año de caducidad. No necesita nevera. Conservar en lugar fresco y seco, con una temperatura de entre 5ºC y 25ºC, eso sí, al abrigo de la luz. No congelar. Kit de 60 test, ref: KMT037.

b) SALMOQUICK-Iniciación, conjunto de  los 4 medios deshidratados necesarios para detección rápida de Salmonella (en sólo 36 h), para que cada laboratorio se lo prepare: 1x 500g BPNW (para hacerse 62 frascos o bolsas Stomacher con 225 ml), 1x500g SS Broth (para hacerse 111 tubos de 18 ml a [x5], 1x500g XLD Agar (para hacerse 522 placas) y 1×100 g Cromosalm (para hacerse 156 placas).
En conjunto es mucho más económico (entre 2 y 3 €) que la adquisición de cada uno de los 4 medios por separado, para que el laboratorio se inicie en este método y pueda pedir después por separado los medios conforme vaya necesitando cada uno. Ref: KMT038.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
1.- Tomar 25 g del alimento en una bolsa Stomacher o en un frasco
2.- Añadir 225 ml de Agua Peptonada Tamponada Neutralizante (Microkit DMT011)
3.- Homogeneizar durante 2 minutos y dejar reposar hasta un máximo de 20 minutos
4.- Añadir 18 ml de SS Broth (Microkit DMT067) a concentración [x5]
5.- Homogeneizar e incubar 18 h a 35-37ºC
6.- Pueden leerse los resultados presuntivos desde las primeras 18 horas: el viraje del caldo a negro es presuntivo de presencia de Salmonella; pero debe confirmarse con el siguiente paso:
7.- Estriar sobre placas de XLD Agar (Microkit DMT142) y de Cromosalm Agar (Microkit DMT500)
8.- Incubar ambas placas 18 h a 35-37ºC
9.- La aparición de colonias negras, rojas o incoloras en XLD, o bien de colonias verdes en Cromosalm, es altamente presuntiva de presencia de Salmonella. Las colonias sospechosas deben confirmarse en laboratorio mediante los kits bioquímicos e inmunológicos habituales (Referencias a elegir: Enterotubos 49578619, Antisueros ZC01, ZC02, PL6100, Látex KMB501, Látex que serogrupa KWD096…). Muchas colonias presuntivas de la mayoría de medios de aislamiento de Salmonella (incluidos la mayoría de medios cromogénicos) acaban siendo confirmadas como Proteus o Citrobacter; esto no sucede en Cromosalm, donde Salmonella crece con colonias verdes, Proteus con colonias incoloras y Citrobacter con colonias negras.

Detección rápida fiable Salmonella: Salmoquick detecta Salmonella en sólo 36 horas , sin necesidad de aparataje especial alguno

BIBLIOGRAFÍA:
Norma ISO 6579: Microbiología de los alimentos para consumo humano y alimentación animal. Método horizontal para la detección de Salmonella. Sanchis, J. Doble enriquecimiento simultáneo para detección rápida de Salmonella. XIX Congreso SEM de Microbiología de los alimentos. Zaragoza, X-2014.
El usuario es el único responsable de la destrucción de los microorganismos generados en el interior del kit durante su uso, de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Sumerja en lejía o alcohol, o mejor autoclávelos, antes de desecharlos a la basura. Mantener fuera del alcance de los niños. No ingerir. Diseñado y fabricado por MICROKIT desde el 27 de Octubre de 2014.

Si desea más información sobre nuestro SALMOQUICK no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o  en nuestro telefono 91-897 46 16.


https://www.microkit.es/pdf/Listeriquick-Salmoquick.pdf


https://www.microkit.es/monograficos/5-Salmonella-y-Shigella-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf 

M-IDENT®- Rhamnosa/Xylosa Listeria

Rhamnosa/Xylosa confirmación Listeria monocytogenes a partir de colonias sospechosas verdes y con halo crecidas en Ottaviani & Agosti Agar, para distinguirla de colonias idénticas de L.ivanovii

M-IDENT®- Rhamnosa/Xylosa Listeria es un Kit de confirmación de colonias de presunta Listeria monocytogenes en O&A en alimentos s/Norma UNE 11290:2004.

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PRESENTACION DEL PRODUCTO:
KIT DE 10 TEST para la confirmación de colonias sospechosas de Listeria monocytogenes crecidas en Agar Ottaviani & Agosti (Chromocytogenes).
– 10 tubos Rhamnosa Broth (TPL014)
– 10 tubos Xylosa Broth (TPL015)

EL KIT NO INCLUYE:
– Medio Ottaviani & Agosti (Chromocytogenes)
–  Cepas de reserva (CRIOSTRAINS o SALVAJES), de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
– Participación en servicios intercomparativos como SEILALIMENTOS, SEILAGUA® y SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios

VENTAJA: Su extremadamente larga caducidad, de 1 año asegurado. También puede pedir el medio base y los dos azúcares suplementos, para ahorrar el coste del kit, pero al ser dos suplementos sumamente termolábiles, deberá esterilizarlos por filtración y añadirlos asépticamente al medio base una vez ya autoclavado.

Rhamnosa/Xylosa confirmación Listeria monocytogenes a partir de colonias sospechosas verdes y con halo crecidas en Ottaviani & Agosti Agar, para distinguirla de colonias idénticas de L.ivanovii.

https://www.microkit.es/fichas/Listeria-Rhamnosa-Xylosa-M-IDENT-KIT.pdf

Si desea más información sobre nuestro M-IDENT®- Rhamnosa/Xylosa Listeria no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

 

M-IDENT®-SALMONELLA EN LÁTEX

Salmonella látex M-Ident permite confirmar colonias de Salmonella por sus antígenos somáticos, capsulares y flagelares en un solo gotero

Este kit  es un látex para detección y confirmación de Salmonella en caldo de enriquecimiento.

El género Salmonella contiene cerca de 2.400 serotipos, que causan gastroenteritis agudas frecuentemente asociadas a intoxicaciones alimentarias.
Gracias a su elevado valor predictivo de resultados negativos, el kit es ideal para screening de muestras en la industria alimentaria. El kit detecta la mayoría de los más comunes serotipos de Salmonella, incluidas S. enteritidis y S. typhimurium. Aunque reacciona preferentemente con los antígenos flagelares, también detecta la mayoría de cepas inmóviles de Salmonella S. pullorum y S. gallinarum. No precisa aparataje alguno, y el procedimiento es muy simple, sin manipulaciones complicadas.

La sensibilidad detectada es del 100%; es decir, no hay falsos negativos!; por tanto, el valor predictivo negativo del M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX en caldos de enriquecimiento es del 100%.

Deje que los reactivos se atemperen de la nevera al ambiente del laboratorio justo antes de usarlos. Utilice cepas de reserva (CRIOSTRAINS), de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
Participe en servicios intercomparativos como SEILALIMENTOS, SEILAGUA o SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios

El kit se suministra en cajas con todo lo necesario para realizar 50 test. Ref.: KMB501
Debe almacenarse a 4-8 ºC, sin congelar.

M-Ident SalmonellaSi desea más información sobre nuestro M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX, no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.eso por teléfono en el nº 91-897 46 16.

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-M-IDENT-RAPID-SCREENING-LATEX-UE-2-2019-alimentos.pdf

Ver tambien nuestro látex policromado Salmonella Wellcolex Colour para confirmar y serogrupar colonias de Salmonella