Archivo de la categoría: Microbiologia de Cosmeticos

Optimización en los análisis microbiológicos de
COSMÉTICOS. Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

CROMOKIT UNIVERSAL PATHOCHROM AGAR (CUP-12 Agar) para detectar los patógenos cosméticos que casi nadie estaba buscando

Patógenos cosméticos CUP12 Agar

Agar cromogénico para aislamiento selectivo de los patógenos más típicos que provocan retiradas de mercado de cosméticos. Por fin podrá cumplir con el Reglamento UE 1223/2009 en lo que concierne a la seguridad microbiológica de cada lote.

Diferentes patógenos que han provocado retiradas de mercado de cosméticos, detectados en el medio CUP12A. De izda a dcha y de arriba abajo: E.coli, P.aeruginosa, S.aureus, C.albicans, B.cepacia, Pluralibacter gergoviae, Klebsiella pneumoniae, Enterococcus faecalis, Aspergillus fumigatus, Salmonella enteritidis

Con este nuevo medio de cultivo diseñado por MICROKIT, podrá por fin cumplir con la legislación en materia de seguridad microbiológica de cada uno de sus lotes.

CUP12 Agar detecta, por estría tras enriquecimiento, todos los patógenos emergentes que han ido provocando retiradas de mercado de cosméticos en los ultimos años. Y que no tienen asociada ninguna Norma ISO. Tal es el caso de Burkholderia cepacia complex, Pluralibacter gergoviae, Enterococcus faecalis, Aspergillus spp, Klebsiella spp, Enterobacter spp, Proteus spp, Salmonella spp, Serratia spp, Pseudomonas putida… Tambien detecta 2 de los 4 microorganismos con Norma ISO: Pseudomonas aeruginosa y E.coli.

Con la implantación de CUP12A ahorrará 2 de los 4 medios de cultivo que emplea para patógenos (Cetrimida y MacConkey Agar), lo cual reducirá su tiempo de trabajo y su necesidad de espacio de almacén y de residuos. Pero lo importante de este nuevo medio es que, además de sustituir esos dos medios por uno solo (ahorro económico, de trabajo y de espacio), detectará desde ahora también los demás patógenos emergentes que están provocando problemas en numerosas fábricas de todo el mundo. Porque no los estaban buscando y son patógenos, lo cual incumple la exigencia legal de la seguridad microbiológica del cosmético.

Simplemente añada este medio a su rutina, enriquezca como es habitual, estríe también en este medio y si aparece cualquier colonia roja, la probabilidad de que sea un patógeno es del 99,5%: Identifique la colonia para estar 100% seguro de que se trata de un patógeno. En MICROKIT le informamos, como cliente de CUP12A, si la especie que identifica se considera o no oficialmente patógeno: escriba su pregunta a consultastecnicas@microkit.es. También podemos identificarla por Ud. de la forma más fiable que existe: secuenciación genética y comparativa Genbank; en este caso en nuestro informe ya le indicamos directamente si la especie (identificada con más del 99,5% de identidad) es o no considerada oficialmente un patógeno.

CUP12A es el milagro que todos necesitábamos en microbiología cosmética. No sólo ahorrará medios, es que además detectará todos los patógenos que, por interpretación subjetiva del Reglamento CE 1223/2009, hasta ahora no estaba buscando. Patógenos cosméticos CUP12 Agar.

Además, si desea una detección fiable de uno de los patógenos «ISO» que no abarca el CUP12A: Staphylococcus aureus, ya puede hacerlo gracias al nuevo Baird Parker cromogénico (BPX19A) de MICROKIT, con una fiabilidad excepcional, por el ahorro tanto de falsos positivos como de falsos negativos propios de los otros medios que había hasta ahora para este microorganismo.

Y para el cuarto patógeno con Norma ISO asociada, Candida albicans, le recomendamos el Agar Biggy Nickerson, mucho más eficiente que el Sabouraud o que los medios cromogénicos para Candida, ya que son medios diferenciales de uso clínico, no validados para cosméticos (es más, invalidados en intercomparación).

Por fin, si desea acelerar el recuento de aerobios y el de hongos, sustituya el TSA por TSA/PCA cromogénico de MICROKIT, y el Sabouraud por Rapid YM Agar de MICROKIT.

Por supuesto, si ha participado en intercomparación, ya sabe que el mejor caldo neutralizante y de enriquecimiento en cosmética no es el Eugon LT100 ni el Letheen Modificado, es el LPT Neutralizing Broth de MICROKIT.

Patógenos cosméticos CUP12 Agar

https://www.microkit.es/

KOSMLABS

KOSMLABS
KosmLabs nace de MICROKIT, con la idea de ofrecer otros servicios al laboratorio tras la experiencia acumulada de 33 años:

  • Cursos y Validaciones microbiológicas
  • Auditorías/Consultorías para la optimización de métodos y protocolos microbiológicos
  • Cursos de iniciación al autocontrol microbiológico en fábricas de cosméticos
  • Análisis microbiológicos de cosméticos, aguas y ambientes. Los análisis más completos: encontramos patógenos que nadie más busca pero le crearían retiradas de mercado si estuvieran en sus productos
  • Test de eficiencia antimicrobiana
  • Creación de medios de cultivo MICROKIT más adecuados para microbiología de cosméticos, donde los microorganismos se encuentran subletales a causa de los conservantes y a pesar de la neutralización de los mismos: LPT Neutralizing Broth, PCA+TSA cromogénico, Rapid YM Agar, MugPlus Agar, Rapid Cetrimide Agar, Baird Parker cromogénico (BPX19 Agar), CUP12A para el resto de patógenos cosméticos que han provocado retiradas de mercado.
  • Primer laboratorio de España con 100% de aciertos en las 3 rondas intercomparativas en las que ha participado en 2022 (GSC e ielab).

¿Necesita externalizar sus análisis microbiológicos de cosméticos y sus materias primas? 

https://cosmlab.wixsite.com/cosmlab

Análisis microbiológicos de cosméticos

COSMETIKIT-ISO

COSMETIKIT ®-ISO: 100% 

ACORDE  A LAS normas ISO SOBRE  MICROBIOLOGÍA COSMÉTICA

Con este kit cosmetikit-iso y la simple ayuda de un Baño María y una estufa de cultivos, toda industria cosmética puede realizar el análisis microbiológico completo en 20 muestras diferentes, de la forma oficial (Normas ISO cosméticas). Referencia: KMT460.

CONTENIDO (CADUCIDAD APROX. 1 AÑO DESDE FABRICACION)

*20 Jeringas 20ml estériles (sin aguja)

*20 Pipetas Pasteur estériles

*2 x 10 Frascos 90ml c/perlas para tratamiento de la muestra (Eugon LT100 Broth ISO 21148, ref: RPL026P)

*20 Tubos para recuento total (TSA ISO 21149, ref: TPL077)cosmetikitiso

*20 Tubos para levaduras y mohos (SDA Caf. ISO 16212 ref: TPL073)

*20 Tubos para Pseudomonas aeruginosa (Cetrimide Agar ISO 22717 ref: TPL100)

*20 Tubos para E.coli y demás Coliformes (EMB Agar ISO 21150 ref: TPL088)

*20 Tubos para Staphylococcus aureus (Mannitol Salt Agar ISO 22718 ref: TPL066)

*20 Tubos inclinados para Candida albicans (Biggy Agar ISO 18416 ref: TPL062)

*20 Tubos para Burkholderia cepacia (BCPT Agar ISO 22717 ref: TPL005)

*120 Placas Petri  estériles de 90 mm.

 

MATERIAL NECESARIO NO INCLUÍDO
-Estufa a 35-37 ºC (VRP001), Baño María, baño hervidor o microondas
-Zona aséptica: Lámpara de alcohol (VLM068) o Portabunsen (ME2195+ME2196) y Envirostéril (VJM002) si no se dispone de cabina de flujo laminar.
-Test confirmativos de colonias sospechosas (todos disponibles consultando en MICROKIT).
-Cepas de referencia, de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados (Ver lentejas cuantitativas estables de MICROKIT)
-Participar en servicios intercomparativos como SEILA-PARFUM para validar procedimientos y analistas.

 

MODO DE EMPLEO COSMETIKIT- ISO

1.- Añadir con una jeringa estéril, asépticamente, 10 gramos o 10 ml de muestra a un Frasco 90ml Eugon LT100 Broth con perlas. Cerrar el tapón. Mezclar agitando y dejar actuar no menos de 20 ni más de 30 minutos a 21-25°C aproximados. Así se obtiene la solución madre (muestra tratada).

2.- Con la ayuda de una Pipeta Pasteur estéril añadir de inmediato 1 ml de la muestra tratada recién agitada a una placa Petri estéril, en condiciones asépticas. Repetir la operación en otra placa, con la misma pipeta y para la misma muestra. Es conveniente realizar duplicados (Pida TPL077 y TPL073).

3.- Fundir al Baño María un tubo de TSA y otro de SDA Caf. hasta que estén  totalmente licuados (si duplica las placas, funda dos tubos de cada medio por muestra).

4.- Cuando se hayan enfriado lo suficiente para no quemar la mano, pero sigan líquidos, añadir cada uno a una placa con el mililitro de muestra tratada. Los mohos tambien se pueden sembrar en superficie, 0,1-0,33 ml mediante asa de Digralsky. Mejor sembrar en masa 1ml y en superficie 0,1ml.

5.- Hacer girar las placas sobre la mesa 10 veces en cada sentido para asegurar la mezcla del medio con la muestra, con cuidado para que no rebose el líquido ni llegue a la tapa de la placa. Dejar solidificar sin tocar (si la temperatura ambiente no es elevada, 10-15 minutos serán suficientes).

6.- Incubar las placas en posición invertida y en total oscuridad, 3-5 días a 30-35 ºC (TSA) y (3)-5 días a 20-25 ºC (SDA Caf.).

7.- A la vez que esas placas, incubar el resto de muestra tratada en Eugon LT100 Broth durante 48 h a 30-35°C para obtener la muestra tratada y enriquecida,  necesaria para la búsqueda de patógenos. O bien pueden pasarse 10 ml a un frasco TSB (pida ref: RPL043) y 10 ml a un frasco Lactose Broth  LB (pida ref: RL017) e incubar éstos, pero entonces la ausencia de patógenos será sólo en 1 g, no en 10g.

8.- Añadir unas gotas (tras enriquecer no hace falta más precisión) de la muestra enriquecida, recién agitada, a un tubo inclinado Biggy Agar Candida, con una misma pipeta estéril y repartir, volteando.

9.- Añadir unas gotas de muestra tratada enriquecida, recien agitada, a una placa Petri estéril, en condiciones asépticas, que será para el Mannitol Salt Agar. Si se enriqueció en TSB y LB, del TSB se inocula en todas las placas menos en la de EMB Levine Agar, en la que se inocula desde LB.

10.- Fundir al Baño María un tubo de EMB Levine.Agar, otro de Mannitol Salt Agar, otro de Cetrimide Agar y otro de BCPT Agar hasta que estén totalmente licuados.

11.- Cuando se hayan enfriado lo suficiente para no quemar la mano, pero sigan líquidos, añadir el contenido del Mannitol Salt Agar a la placa con las gotas de muestra enriquecida.

12.- Hacer girar la placa sobre la mesa 10 veces en cada sentido para asegurar la mezcla del medio con la muestra, con cuidado para que no rebose el líquido ni llegue a la tapa de la placa. Dejar solidificar sin tocar. Esta siembra en masa es imprescindible en estafilococos.

13.-Verter el contenido del EMB, del Cetrimida y del BCPT en sendas placas Petri estériles y dejar solidificar. Sembrar en zigzag sobre la superficie de cada una de ellas, una gota de la muestra enriquecida recién agitada.

14.- Es una buena práctica sembrar además en otra placa de TSA, en zigzag, una gota del enriquecimiento recién agitado para aislar colonias e identificarlas (¡no para contarlas!), a fin de aumentar la sensibilidad para cepas  estresadas, que podrían no crecer en los medios selectivos. Pida tubos adicionales de TPL077.

15.- Incubar las placas en posición invertida, y los tubos de Candida albicans en posición vertical, durante 24-72 horas a 30-35 ºC. No apilar más de 5 placas y dejar espacio entre las pilas, y entre éstas y las paredes de la estufa.

INTERPRETACION DE RESULTADOS COSMETIKIT-ISO

El recuento total (placas de TSA) no debe ser superior a 100///1000 ufc/ml ó gramo de muestra inicial, según las exigencias (cosmética infantil y de inmunodeprimidos///general). De modo que no deben aparecer más de 10-100 colonias por placa, dada la dilución 1/10 efectuada en la solución madre. Lo mismo para recuento de levaduras (colonias convexas) y mohos (colonias filamentosas) (Placas SDA Caf).  De lo contrario, y siempre que no haya patógenos, se puede reprocesar el lote. No debe aparecer ninguna colonia de Escherichia coli (colonias metalizadas en placas de EMB; las demás colonias en este medio son indicadoras de coliformes, que sin ser patógenos, ni indicadores exclusivos de contaminación fecal, suelen provocar alteraciones en la muestra), de Pseudomonas aeruginosa (colonias amarillas-verdosas o pardo-rojizas en placas de Cetrimida), de Burkholderia cepacia (colonias blancas o salmón, con medio virado a fucsia, en BCPT), ni de Staphylococcus aureus (colonias amarillas en placa de Mannitol), patógenos procedentes de contaminación fecal, del agua, del biofilm del agua y de operarios-aire, respectivamente. Si aparece alguna colonia parda (que no provoque viraje de color del medio a pardo-negro) en el tubo de Biggy, será de Candida albicans, lo que demuestra contaminación por mucosas de operarios portadores. Si aparece cualquiera de los 5 patógenos, hay que destruir el lote.

 

Si desea más información sobre nuestros COSMETIKIT-ISO rellene nuestro formulario de contacto https://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO

CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO Recuento total con máxima recuperación en alimentos, aguas y cosméticos, basado en PCA (FIL,IDF,AOAC,APHA,ICMSF), diferenciando las colonias, incluso las más diminutas, de las partículas y del medio.
Recuperación superior (122%) al PCA y 116% respecto al TSA.Cromokit Maxim-agar
COMPOSICIÓN
Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g
Glucosa 1,0 g
Factores doping MICROKIT 8,0 g
Agar-agar 10,5 g
Cromógeno termoestable c.s.
(Fórmula por litro)
pH final: 6,8 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a 116°C durante 15 minutos. No sobrecalentar ni mantener fundido mucho tiempo. Refundir sólo una vez. El color final del medio es blanco-crema. A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna al crema cuando se vuelve a enfriar el medio, lo cual no afecta los resultados.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: BCD515

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-48 h a 37 ºC o mejor 72 h a 30 ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT: E. coli MKTA 25922, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 90-184 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-164 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA. Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-129 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente, Colonias rojas en 48 h, crecen mucho más rápido y mejor que en TSA, y mejor a temperatura ambiente.
Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-191 % *de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, colonias rojas. * Esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
Recuento total standard de bacterias aerobias en alimentos, aguas, productos farmacéuticos, cosméticos y otros productos. Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja, purpura…. sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los aerobios). El color no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en masa. Incubar a 30 ºC aproximadamente durante 48 horas. Con flora psicotrofa, incubar a 6 ºC aproximadamente durante 10 días y con flora termófila, incubar a 55 ºC aproximadamente durante 48 horas.
Contar todas las colonias. La recuperación supera el 20% por encima de la obtenida en PCA y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a ciertos factores doping de aerobios descubiertos y agregados por MICROKIT. Esta fórmula, con menos agar, aumenta la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación del fondo. Este medio está diseñado para siembra en masa. Si desea sembrar en superficie, añada 3-5 g/l de Agar-Agar (BCB006), o utilice 30-32 g/l de este mismo medio. Para minimizar la desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas (SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de autoclavar. Para contar por separado las bacterias, de las levaduras y mohos, añadir a un duplicado, enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de Cicloheximida (SKM200): En la placa con CEX sólo crecerán las bacterias y en la placa sin CEX , la suma de bacterias + levaduras y mohos.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO o cualquier otro producto no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

SEILAMBIENTE

SEILAMBIENTE: detección de microorganismos en Superficie+Aire

Laboratorios MICORKIT les ofrece el Primer servicio intercomparativo microbiológico diseñado, elaborado y coordinado en España, desde Enero de 2006, bajo Norma UNE 66543-1:1999 IN sobre Ensayos de Aptitud por Intercomparación de Laboratorios, para el  «Control de ambientes interiores, Industria Farmacéutica, Quirófanos…» SEILAMBIENTE.

Sabíamos cómo apreciarían este servicio los clientes de Control de ambientes interiores, Industria Farmacéutica, Quirófanos… que precisan de herramientas externas de control de calidad para sus validaciones, y aquellos que desean tener mayor confianza en sus resultados analíticos, y que hasta ahora estaban desamparados por la ausencia de servicios comparativos microbiológicos para estas matrices (aire y superficies). Lamentamos no poder ofrecer este servicio fuera de la Union Europea ni en Canarias, Ceuta o Melilla. Nuestra experiencia desde 1999 en este tipo de servicios para otras matrices (alimentos, aguas y cosméticos), el conocimiento profundo de la UNE 100012 sobre higienización de sistemas de climatización y el de la Norma ISO 17025 sobre acreditación de laboratorios, creemos nos hace candidato ideal para coordinar este servicio. Máxima confidencialidad: Sólo cada laboratorio conoce su código secreto

El Servicio Intercomparativo MICROKIT para muestras ambientales, SEILAMBIENTE, incluye el recuento total (SIN PATÓGENOS) de los siguientes indicadores:

SELAMBIENTE

Este servicio es anual: Recibirá sus muestras la tercera semana de Noviembre.

En cada muestra hay varios productos, además del folleto actualizado con protocolo  y tabla de presentación de resultados:

  • 6 botes de desinfectante ambiental Airesano (almacenar entre 15 y 25°C).
  • FRASCO pulverizadorSELAMBIENTE 2
  • 1 TUBO con LENTÍCULAS CUANTITATIVAS de 1os microorganismos inoculados “INÓCULO SEILAMBIENTE”. No se incluyen patógenos.
  • FRASCO con Solución Ringer

(No incluye las placas Rodac ni los laminocultivos necesarios)

 

INSCRIPCION.

Adjunte el comprobante de la transferencia que realice a la cuenta que le proporcionaremos si no trabaja a través de distribuidor ni es cliente habitual de MICROKIT, por el valor indicado en nuestra lista de precios vigente + 7% IVA, junto con sus datos (empresa, persona, dirección completa, teléfono, fax, CIF…), al fax 91-897 46 41 o al email microkit@microkit.es. Fecha límite de la inscripción: finales de Octubre. Las solicitudes posteriores se tramitarán para el siguiente año. REF: SMT006. Déjese becar fidelizando su consumo de medios y kits MICROKIT. A solicitud de los estimados usuarios, en vez de uno podemos realizar 2 ó 3 circuitos SEILAMBIENTE al año, siempre que haya suficientes participantes.

Si usted está interesado en inscribirse a nuestro programa SEILAMBIENTE 2014, dese prisa y póngase en contacto con nosotros, aún está a tiempo de inscribirse.

Si desea más información sobre nuestro Servicio SEILAMBIENTE, rellene nuestro formulario de contacto https://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

M-IDENT®- Pseudomonas aeruginosa

M-IDENT®- Pseudomonas aeruginosa es un Kit de confirmación de Pseudomonas aeruginosa en aguas por Filtración de Membrana s/Norma UNE 12780:2002 y en cosméticos.

Pseu-aeruginosa3PRESENTACION:
KIT DE 9 TEST para la confirmación de colonias sospechosas de Pseudomonas aeruginosa:
– 9 tiras estables para el test de la Citocromo-oxidasa (KOT051-)
– 9 tubos líquidos de Caldo Acetamida, incoloro (TPL113).
– 1 gotero de 5 ml de Reactivo Nessler, suficiente para las 9 pruebas (SMT007).
– 9 tubos sólidos de Agar King B inclinado, de color crema (TPL012)
EL KIT M-IDENT®- Pseudomonas aeruginosa NO INCLUYE:
– Cepas de reserva (CRIOSTRAINS o SALVAJES), de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
– Participación en servicios intercomparativos como SEILALIMENTOS, SEILAGUA® y SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios
– Lámpara de luz ultravioleta de 366 nm (ver Linterna MICROKIT VMT050)
Si desea más información sobre nuestro M-IDENT®- Pseudomonas aeruginosa no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.