Archivo del Autor: microkit

DryPlates TC-R2

DryPlates® TC-R2 (DPP004)
Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento
de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio delmedio clásico para siembra por inclusión en masa.
Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde
fabricación.


El Agar R2A es el medio de cultivo oficial de recuento de aerobios en aguas oligotróficas (Pharmacopea medio S), tanto farmacéuticas como cosméticas; en algunos países también es el medio oficial de recuento de aerobios en
aguas de consumo humano. Este medio suele obtener recuperaciones hasta 10 veces superiores que los demás medios de aerobios, en aguas oligotróficas, extremo que no suele suceder en aguas de consumo, donde los recuentos suelen ser muy similares. Por ello debe tenerse precaución a
la hora de implantar valores de aceptabilidad si se emplea este medio. La adición de un cromógeno termoestabilizado permite obtener las colonias de aerobios de color rojo, que de este modo contrastan mucho mejor con el medio o con la membrana. El medio es válido para muestras de aguas,
aunque también es útil para alimentos, cosméticos…

MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la placa en una superficie horizontal, sin inclinaciones. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
    Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra,
    previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto sea heterogéneo).
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 22 ó 35ºC durante 2-3 días; sin embargo en este formato, aparecen ya resultados preliminares de alerta desde las primeras 18h

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Prehidrate el disco nutriente en la placa con 1 ml de agua estéril (o de la misma agua de muestra). Recuerde, siempre el disco sobre el agua centrada y nunca el agua sobre el disco nutritivo.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® TC-R2.
  4. Si pre-hidrató el disco con 1 ml agua de muestra y filtró por ejemplo 100 ml, recuerde que su recuento será en 101 ml, aunque este 1% es irrelevante en microbiología.

MODO DE EMPLEO para ambientes interiores (superficies y aires)

Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre la DryPlates® TC-R2, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua centrada y nunca el agua sobre el disco nutritivo).

También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua centrada y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire). El Agar R2 no es el más adecuado para este uso particular, ya que a la inversa de lo que sucede en aguas oligotróficas, en muestreos de aire suele obtener recuentos muy inferiores a los del PCA-cromogénico.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO
Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).

Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos, en bebidas alcohólicas), Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos), Enterobacterias (VRBG o cromogénico), Coliformes, Coliformes y E.coli, E.coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir), Salmonella spp. (Cromosalm y XLD), Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica, Antiobiograma cromogénico, UTIs… Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

DryPlates-VIBRIO

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.


Bilis Esculina Azida es el Agar confirmativo oficial (ISO7899), donde los Enterococos fecales crecen con colonias negras o marrones en sólo 18h. Raramente otros microorganismos pueden crecer en este medio, pero en tal caso lo hacen con colonias de otros colores. El medio es válido para muestras de aguas, alimentos, cosméticos, ambientes… Ver también las DryPlates® del otro medio oficial (Slanetz-Bartley Agar), aunque tarda mucho más en obtener resultados (48h en vez de 18h).

MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la placa en una superficie horizontal, sin
    inclinaciones. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
    Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto sea heterogéneo).
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (como“base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Si va en placa redonda y no en cassette, lo ideal para prevenir su desecación es meter cada DryPlate® sembrada, en una bolsa autosellable y cerrarla muy bien. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 18-24h. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda.
  5. Leer los resultados buscando sólo las colonias diana: Enterococos fecales, colonias marrones, ocre o negras. Las DryPlates® ETC obtienen una recuperación de enterococos fecales muy superior respecto a los medios similares agarizados en placa clásica (incluido Slanetz-Bartley Agar, Bilis Esculina Azida Agar, Medio cromogénico para Enterococos fecales y KAA Agar).

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:Prehidrate el disco nutriente en la placa con 1 ml de agua estéril (o de la misma agua de muestra). Recuerde, siempre el disco sobre el agua centrada y nunca el agua sobre el disco nutritivo.Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® ETC.
Enterococos fecales, colonias marrones en Dryplates®-ETC
Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
 (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: microkit@microkit.es
Web: http://www.microkit.es Blog: www.medioscultivo.com
Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997
MCC P/ACOSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM DRY PLATES®PLAQUIS®KITPRO-PLUSDESINFECTEST® M-IDENT® NEOGRAM CCCNTMBSSEILAGUA® ENVIROCOUNTSALMOQUICKMUGPLUSCROMOKIT®AIRESANO
2Si pre-hidrató el disco con 1 ml de agua de muestra (en vez de agua estéril) y filtró por ejemplo 100 ml, su recuento será en tal caso en 101 ml, aunque este 1% en microbiología es irrelevante.También puede resembrar la membrana con colonias rojas, procedente de DryPlates® SB


MODO DE EMPLEO para ambientes interiores (superficies y aires) y para detección de patógenos tras enriquecimiento

Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, o con un asa con caldo enriquecido, sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrado y no al revés). El viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio.También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y nunca el agua sobre el disco nutritivo), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO
Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).
Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos, en bebidas alcohólicas), Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos), Enterobacterias (VRBG o cromogénico), Coliformes, Coliformes y E.coli, E.coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales (SB ó BEA a elegir), Salmonella spp. (Cromosalm y XLD), Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica, Antiobiograma cromogénico, UTIs… Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura. Diseño y fabricación 100% españoles.


DryPlates BCPT

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinaria caducidad (1 año desde fabricación).


El Agar BCPT es el medio más empleado para detección y recuento selectivos de Burkholderia cepacia en aguas, biofilms, cosméticos y medicamentos. La adición de un cromógeno intensifica el contraste entre las colonias y el medio, evitando que pasen desapercibidas como suele suceder en el medio clásico. Las colonias crecen de color fucsia o rojo, con viraje alrededor del medio salmón a fucsia.


DryPlates® BCPT es la herramienta que estaban esperando todas las fábricas de productos farmacéuticos y cosméticos para la detección de este patógeno emergente.

MODO DE EMPLEO para detección de patógenos tras enriquecimiento (y para ambientes interiores: superficies y aires)

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la base de la placa en una superficie horizontal, sin inclinaciones, y aséptica (cabina o Bunsen).
  3. Añadir al centro de la base de la placa 1 mL de agua estéril (ej: MICROKIT RPL001)
  4. Dejar caer el disco nutritivo sobre el mL de agua, desde la tapa de la placa donde lo colocó. Dejar embeber unos segundos.
  5. Puede estriar un asa con caldo enriquecido (o también un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies), sobre cualquier DryPlates® hidratada con agua estéril. Tras incubar (ver punto 2.4), el viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio.
    Las DryPlates son las únicas placas deshidratadas que permiten la siembra en ESTRÍA y por tanto, detectar patógenos de la forma más fiable: tras el enriquecimiento de la muestra. En cambio sembrar 1 ml de caldo enriquecido, como indican los otros fabricantes, casi siempre da falsos negativos (millones de ufcs generadas tras el enriquecimiento, compiten por el sustrato en placa y crean millones de microcolonias diminutas, invisibles, con un cambio de color de todo el medio, que a menudo resulta demasiado tenue, indetectable).
  6. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrada y nunca al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS con placas convexas Envirocount para obtener recuentos por m3 de aire)

MODO DE EMPLEO para recuento en muestras de 1 ml

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa) o de la dilución de la muestra sólida, bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con el disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
    Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto sea heterogéneo).
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (como“base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 1-5 días. Las cepas de B. cepacia que no estén en estado subletal o estresado, crecerán desde las primeras 24-48h con colonias fucsia. Si no hay crecimiento, siga incubando hasta 5 días para garantizar que no había ni siquiera células letárgicas del patógeno. Las DryPlates®-BCPT obtienen un 199 % de recuperación respecto a medio clásico agarizado TSA. Las colonias se diferencian mucho mejor de la flora interferente, que en el caso de las DryPlates®-BCPT es muy escasa.
  5. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda. Leer los resultados buscando sólo las colonias diana: B.cepacia crece con colonias rojas (no confundir con eventuales artefactos de los componentes del medio, que son violetas y no viran el medio), colonias que viran el medio salmón de su alrededor, a fucsia.

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Prehidrate el disco nutriente incluido en la placa con 1 ml de agua estéril (o de la misma agua de muestra). Recuerde, añada el disco sobre el ml de agua centrado y nunca el agua sobre el disco nutritivo.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 ó de 0,22 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® BCPT, evitando la formación de burbujas entre ambos. Evite estresar las posibles células de Burkholderia cepacia retenidas en la membrana: es conveniente enjuagar/revitalizar la membrana una vez recién filtrada la muestra, filtrando acto seguido por ella 100 ml de, por ejemplo, Buff.Peptone ClNa Solution pH 7,0 Pharmacopea (MICROKIT RPL115, DMT206); apague la bomba en cuanto se haya terminado el líquido del embudo de filtración y deposite la membrana sin demora sobre la DryPlates® BCPT prehidratada.
  4. Si pre-hidrató el disco con 1 ml de agua de muestra (en vez de agua estéril) y filtró por ejemplo 100 ml, su recuento será en tal caso en 101 ml, aunque este 1% en microbiología es irrelevante.
    CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO: Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: VRB747).

Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos, en bebidas alcohólicas), Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos), Enterobacterias (VRBG o cromogénico), Coliformes, Coliformes y E.coli, E.coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir), Salmonella spp. (Cromosalm y XLD), Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica, Antiobiograma cromogénico, UTIs… Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

DryPlates-SAL

DryPlates® SAL (Detección de Salmonella spp.)

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinaria caducidad (1 año desde fabricación).


El Agar DCA (Pharmacopea medio J) es un medio excelente (selectivo y diferencial) para detección selectiva de Salmonella spp. en muestras farmacéuticas, cosméticas, alimentarias, acuáticas y clínicas. La adición de dos sustratos cromogénicos muy específicos (X-alfa-Gal y CHE-Gal) lo convierten en el ya clásico Agar CromoSalm de MICROKIT, que supera en sensibilidad y especificidad incluso a los más modernos medios cromogénicos diseñados para Salmonella spp. en las últimas décadas.

En formato DryPlate®, este medio permite la rápida detección de Salmonella spp. en sólo 16h tras el enriquecimiento. Uniendo este avance a un enriquecimiento mixto acelerado (mezclando los medios del preenriquecimiento revitalizador y neutralizante: 225 ml Buffered Peptone Neutralizing Water de MICROKIT DMT011+ enriquecimiento selectivo 18 ml SS Broth concentrado [x5] de MICROKIT DMT067) e incubándolos juntos en las 18 h previas; permite la detección fiable de Salmonella en sólo 34 h desde la muestra inicial. Las colonias crecen verde-azuladas, y al proceder necesariamente de enriquecimiento, suelen ser tantas que sólo se suelen apreciar mediante el viraje del medio a color verde-azulado. De modo que es mejor prehidratar la DryPlates con 1 ml de agua estéril y sembrar acto seguido el enriquecimiento en estría. Por todo ello, DryPlates® SAL es la herramienta que estaban esperando todas las fábricas de productos alimenticios para poder liberar lotes gracias a la detección precoz de este patógeno, que les retrasaba hasta ahora el resultado global del laboratorio microbiológico de 3 a 5 días.

Para abarcar todas las cepas de Salmonella, duplicar la estría en DryPlates® SAL, con estría en DryPlates® XLD.

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para detección de patógenos tras enriquecimiento y para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar con un asa con caldo enriquecido (ideal SS Broth Microkit, ya que es un caldo que funciona mucho mejor que Rappaport o MKT, sea cual sea el medio posterior de aislamiento), sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrado y no al revés). O también un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies. El viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio. Ver modo de empleo completo en el siguiente apartado (muestras de 1 ml)
    Las DryPlates son las únicas placas deshidratadas que permiten la siembra en ESTRÍA y por tanto, detectar patógenos de la forma más fiable: tras el enriquecimiento de la muestra. En cambio sembrar 1 ml de caldo enriquecido, como indican los otros fabricantes, casi siempre da falsos negativos (millones de ufcs generadas tras el
    enriquecimiento, compiten por el sustrato en placa y crean millones de microcolonias diminutas, invisibles, con un cambio de color de todo el medio, que a menudo resulta demasiado tenue, indetectable).
    2. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua y nunca el agua sobre el disco nutritivo), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire). Ver modo de empleo completo en el siguiente apartado (muestras de 1 ml).

MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la placa en una superficie horizontal, sin inclinaciones. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
    Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto sea heterogéneo).
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (como“base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 16-24 (48)h. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda. Las cepas de Salmonella spp. que no estén en estado subletal o estresado, crecerán desde las primeras 16h como colonias, virajes o estrías verde-azulados (detección precoz). Si no aparecieran estos cambios en 16h, siga incubando para revitalizar las células dañadas sub-letalmente durante la fabricación del producto, hasta las 48 h. Los resultados de las DryPlates®-SAL son mucho más rápidos (16h respecto a 24-48h) que los de los medios agarizados clásicos.
  5. Leer los resultados buscando sólo el color diana: Salmonella spp. crece de color verde-azulado (sean colonias aisladas, sean estrías, sean zonas del medio o sea el medio completo), mientras otras enterobacterias pueden crecer, pero con colores negros (ej: Citrobacter spp.) o crema (ej: Proteus spp.).

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Prehidrate el disco nutriente incluido en la placa con 1 ml de agua estéril (o solución salina, Ringer, Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing, LPT Broth…). Recuerde, añada el disco sobre el ml de agua y no al revés.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 ó de 0,22 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® SAL , evitando la formación de burbujas entre ambos. Evite estresar las posibles células de Salmonella spp. retenidas en la membrana: es conveniente enjuagar/revitalizar la membrana una vez recién filtrada la muestra, filtrando acto seguido por ella 100 ml de, por ejemplo, Buff.Peptone ClNa Solution pH 7,0 Pharmacopea (MICROKIT RPL115, DMT301); apague la bomba en cuanto se haya terminado el líquido del embudo de filtración y deposite la membrana sin demora sobre la DryPlates® SAL prehidratada.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO
Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: VRB747).
Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos, en bebidas alcohólicas), Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos), Enterobacterias (VRBG o cromogénico), Coliformes, Coliformes y E.coli, E.coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir), Salmonella spp. (Cromosalm y XLD), Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica, Antiobiograma cromogénico, UTIs… Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.

DryPlates X-Staph

DryPlates® X-STAPH

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.

CROMOKIT® X-STAPH Agar es el medio cromogénico diseñado por MICROKIT®, donde Staphylococcus aureus crece con colonias violetas o azul oscuro, índigo, mientras otros Gram positivos (S.epidermidis, Bacillus spp.) lo hacen con colonias azul claro, turquesa. Medio válido para muestras de aguas, alimentos, cosméticos…
¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para detección de patógenos tras enriquecimiento y para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar con un asa con caldo enriquecido (o bien un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies), sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrado y no al revés). El viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio.
    Las DryPlates son las únicas placas deshidratadas que permiten la siembra en ESTRÍA y por tanto, detectar patógenos de la forma más fiable: tras el enriquecimiento de la muestra. En cambio sembrar 1 ml de caldo enriquecido, como indican los otros fabricantes, casi siempre da falsos negativos (millones de ufcs generadas tras el enriquecimiento, compiten por el sustrato en placa y crean millones de microcolonias diminutas, invisibles, con un cambio de color de todo el medio, que a menudo resulta demasiado tenue, indetectable).
  2. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua centrada y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

NOTA DESDE 11-2017: No resulta recomendable este medio en DryPlates para recuentos, dado que la molécula cromogénica es enorme y un alto porcentaje de la misma escapa de la red textil, pudiendo dar lugar a resultados falsamente negativos por empobrecimiento del color de los microorganismos allí crecidos. En cambio la DryPlates-XStaph es muy útil para detección tras enriquecimiento, porque tras enriquecer, los microorganismos están muy concentrados y las colonias originadas se evidencian muy bien en la estría, que queda muy nítida con su color azul sobre el disco blanco. Para recuentos es mejor utilizar este medio cromogénico, pero en cualquiera de sus demás versiones: polvo deshidratado para autoclavar, placas preparadas, plaquitas herméticas, tubos o frascos, ya que en ellos al hidratarse el cromógeno, se reparte homogéneamente en el 100% de la superficie del medio.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO
Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).
Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (en alimentos y cosméticos, en aguas y en aguas oligotróficas), Hongos (levaduras y mohos), E.coli y demás coliformes, Enterobacterias, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales, Salmonella spp., Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica… Otros medios en formato DryPlates®: consúltenos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.
Medio validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones muy superiores (hasta el 280%) a la de Baird Parker, rpf y Mannitol Salt Agar, evitando los falsos positivos y falsos negativos de los dos primeros, y los falsos positivos del tercero.
DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L.

DryPlates TC-WATER

DRYPLATES TC-WATER 18h

Dryplates para recuento de aerobios en aguas

 

DryPlates® TC-Water: DPP003- (caja 60 u) y DPP003+ (caja 1200 u)
Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.

Yeast Extract Agar-YEA, Agar Nutriente para aguas o PCA-water son tres formas de denominar al Agar oficial de recuento de aerobios en aguas de consumo humano (ISO 6222). La adición de un cromógeno termoestabilizado permite obtener las colonias de aerobios de color rojo, que de este modo contrastan mucho mejor con el medio o con la membrana. El medio es válido para muestras de aguas, aunque también es útil para alimentos, cosméticos, ambientes…

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

 

MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la placa en una superficie horizontal, sin inclinaciones. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
    Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto sea heterogéneo).
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (como“base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) estándar son: 22ºC, 3 días ó 35ºC, 2 días; pero en este kit, aparecen ya la inmensa mayoría de colonias rojas, desde las primeras 18h de incubación ¡Detección precoz en las primeras 18h a ambas temperaturas! Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda.
  5. Leer los resultados contando las colonias rojas. Si no se ven colonias pero aparecen virajes del medio a color rosa, se debe sospechar que hay una inmensa concentración de microorganismos en la muestra (miles o millones de microcolonias): repetir en otra DryPlate®-TC Water a mayor dilución.

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades
  2. Prehidrate el disco nutriente en la placa con 1 ml de agua estéril (o de la misma agua de muestra). Recuerde, siempre el disco sobre el agua centrada y nunca el agua sobre el disco nutritivo.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® TC Water.
  4. Si pre-hidrató el disco con 1 ml agua de muestra y filtró por ejemplo 100 ml, recuerde que su recuento será en 101 ml, aunque este 1% es irrelevante en microbiología.

MODO DE EMPLEO para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre la DryPlates® TC-Water, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua centrada y nunca el agua sobre el disco nutritivo).
  2. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).
Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos y en bebidas alcohólicas, según la Normativa vigente en cada producto), Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos), Enterobacterias (VRBG o cromogénico), Coliformes, Coliformes y E.coli, E.coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir), Salmonella spp. (Cromosalm y XLD), Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica, Antiobiograma cromogénico, UTIs… Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características. Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones similares al mismo medio clásico agarizado.
DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L. Texto elaborado el 04/Junio/2014, actualizado el 7/02/2020

MICROKIT P/A CROMOKIT 2019

MICROKIT® P/A CROMOKIT 2019

En Julio de 2019 lanzamos dos nuevos medios cromogénicos P/A CROMOKIT que no generan gas, para que puedan usarse en cubetas miniaturizadas cerradas de NMP. Ambos medios están adaptados para poder usarse también en agua de mar. Nuestro PSEUDOCULT P/A clásico ya podía usarse desde su creación en cubetas miniaturizadas cerradas NMP y en agua de mar, con la ventaja de proporcionar viraje de color muy evidente a rosa, no sólo fluorescencia.

 

COLICULT-PLUS ( ONPG+MUGChrom)
COLIFORMES / Escherichia coli
Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua continental o marina

El medio COLICULT-PLUS (ONPG-MUGChrom) en viales P/A alerta de la presencia y/o recuento de E.coli (viraje a verde) y demás coliformes (viraje a amarillo-naranja). La ventaja sobre el medio ISO ISO 9308-2:2012 es el derivado cromogénico del MUG del Siglo XXI, que hemos denominado “MUGChrom” y que en vez de fluorescencia en presencia de E.coli, genera viraje del agua a verde. Los demás coliformes, gracias al ONPG cromogénico, generan viraje del agua a amarillo anaranjado. De modo que el medio detecta simultáneamente la enzima β-galactosidasa de los coliformes y la enzima β-glucuronidasa de E. coli.

MODO DE EMPLEO: Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen.

  1. Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar
  2. Añadir todo el contenido de un vial sobre el agua; en el caso de los botes de 100g de polvo estéril
  3. Añadir una cucharadita rasa sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar
  4. Incubar 18-28 horas a 35-37° C (Coliformes totales y E.coli) ó a 44° C (Coliformes Fecales y
    E.coli). La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubarinmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para agua de mar (AM), al tratarse de un sustrato que inhibe el crecimiento de estas bacterias, diluir 10 ml de AM en 90 ml de agua destilada estéril antes de utilizar el medio. Multiplicar por 10 los resultados.
Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos
cucharaditas por muestra.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: El viraje a color amarillo-naranja (β-galactosidasa-ONPG)
demuestra la Presencia de Coliformes en la muestra de agua. El viraje a verde (β-glucuronidasa-MUGChrom) demuestra la presencia de E.coli en la muestra de agua (confirmar con 0,5 ml de KOVACS-SBH056): anillo rojo de Indol en superficie es prueba positiva. E.coli O157 H7 se detecta por ser β-galactosidasa + (vira a amarillo-anaranjado), de acuerdo con la definición moderna de coliforme; aunque es una cepa β-glucuronidasa – (no vira a verde a pesar de ser E.coli); y es indol + (anillo rojo).

 

ENTEROCULT X-Enterococcus Broth
Enterococos fecales
Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua continental o marina

El medio CROMOKIT® X-Enterococcus Broth en viales P/A alerta de la presencia y/o recuento de Enterococos fecales (viraje a azul marino). La ventaja sobre el clásico Enterocult es el sustrato cromogénico del Siglo XXI, que hemos denominado “ETCChrom” y que en vez de ennegrecer en presencia de los Enterococos fecales, genera viraje del agua a azul. Medio acorde a la EPA.

MODO DE EMPLEO: Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen.

  1. Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar
  2. Añadir todo el contenido de un vial sobre el agua; en el caso de los botes de 100g de polvo estéril, añadir una cucharadita rasa sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar.
  3. Incubar 18-28 horas a 35-37° C ó a 44° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para agua de mar (AM), al tratarse de un sustrato que inhibe el crecimiento de estas bacterias, diluir 10 ml de AM en 90 ml de agua destilada estéril antes de utilizar el medio. Multiplicar por 10 los resultados.
Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos cucharaditas por muestra.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: El viraje a color azul demuestra la Presencia de Enterococos fecales en la muestra de agua.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.
EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA LOS VIALES O EL BOTE BIEN CERRADOS EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR LOS VIALES O EL BOTE BIEN CERRADOS EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

PRESENTACIÓN:
COLICULT-PLUS ONPG-MUGChrom: DMT575 (500 g de polvo no estéril), DMTI575- (100 g de polvo esterilizado), FPA575 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 100 ml de muestra de agua)
ENTEROCULT X-Enterococcus Broth: DMT580 (500 g de polvo no estéril), DMTI580- (100 g de polvo esterilizado), FPA580 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 100 ml de muestra de agua)
PSEUDOCULT: DMT908 (500 g de polvo no estéril), DMTI908- (100 g de polvo esterilizado), FPA908 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 100 ml de muestra de agua), FPA903 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 250 ml de muestra de agua)

CUBETAS NMP MINIATURIZADAS PARA RECUENTO: CONSULTAR
Si desea seguir el Reglamento UE 2-2019 que entrará en vigor en 2021 mediante el cual los lobbies del laboratorio han conseguido barrer la innovación que aporta el milagro mediterráneo (la PIME), al exigirnos a los inventores de productos/métodos para industria alimentaria, el inviable pago de cientos de miles de € a AOAC, AFNOR o similar por cada referencia innovadora; nos puede pedir CCA Agar ISO 9308-1:2014 (Ref: DMT400 en deshidratado, TPL400 en tubo, ECOP23J en Ecoplacas, ECOPQ08J en Ecoplaquis MF…), ya que de este modo no es un método alternativo y por tanto ningún inspector ni auditor puede impedirle emplearlo. Aunque perderá el valor añadido del kit: su extraordinario poder de detección sin falsos negativos, el ahorro de filtración de membrana…. La mejor solución sería realizar una proporción residual pero razonable de muestras con el medio ISO en formato clásico, para presentar sus informes a inspección de Sanidad, y asi poder seguir usando internamente en paralelo este kit en esas y en las demás muestras, para la mejora, fiabilidad y rapidez de sus resultados de autocontrol. A fin de cuentas, este reglamento que corta de cuajo el I+D que no provenga de multinacionales, no es nada nuevo: los kits de autocontrol nunca han servido para obtener resultados oficiales, pero ayudan a la industria a tomar las mejores decisiones.El usuario es el ún ico responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

 

KOSMELABS

KOSMELABS

KosmLabs nace de MICROKIT, con la idea de ofrecer otros servicios al laboratorio tras la experienica acumulada de 30 años:

  • Validaciones microbiológicas
  • Optimizaciones de métodos y protocolos microbiológicos
  • Análisis cosméticos, aguas y ambientes
  • Test de eficiencia antimicrobiana
  • Otros

¿Necesita externalizar sus análisis microbiológicos de cosméticos y sus materias primas? Haga click en el siguiente enlace: Análisis microbiológicos KosmLabs baja resolución

COSMETIKIT® WATER

COSMETIKIT® WATER

KIT COMPLETO PARA MICROBIOLOGÍA DE AGUAS DE USO COSMÉTICO

COSMETIKIT® WATER es un KIT COMPLETO  para análisis directo de recuento de aerobios y de Presencia/Ausencia de patógenos en frascos toma-muestras, sin necesidad de aparato de filtración. Contiene inactivadores del cloro. Para control completo de las aguas empleadas en la fabricación de productos cosméticos

COSMETIKIT WATER

INTRODUCCIÓN

El control microbiológico del agua  es de la máxima importancia en la elaboración de productos cosméticos porque se trata de una de las materias primas usadas en mayor cantidad y también por usarse para tareas de limpieza, enjuague de envases, equipos, etc.

Una calidad deficiente en el agua de uso cosmético puede causar contaminaciones en el producto final con serias repercusiones en la salud del usuario final y en la estabilidad del producto.

La actual legislación garantiza la calidad del agua a la salida de la potabilizadora y a la salida de los grifos públicos, pero NO a la salida de los grifos privados que utilizan el consumidor y las industrias. Las continuas obras públicas, así como las internas de los edificios, ponen en grave peligro la seguridad final del agua, a menudo por infiltración de aguas fecales en la red potable; por ello es imprescindible su re-control privado.

Los kits P/A de MICROKIT han sido validados en España, comparando durante años los datos de decenas de laboratorios mediante análisis clásico por Filtración de membrana y los resultados obtenidos mediante esta cómoda técnica. En nuestra página Web (www.laboratoriosmicrokit.com) encontrará las 4 publicaciones que respaldan esta validación y demuestran que el método no sólo es tan bueno como el de Filtración de membrana, sino incluso mejor. Además, es mucho más sencillo y rápido de manejar, ahorrando el uso de aparatos de filtración y dejando el análisis microbiológico del agua al alcance de todo usuario, sin necesidad de un laboratorio especial.

Realice un análisis semanal (para mayor seguridad, uno diario) para verificar que el agua que sale de la potabilizadora municipal llega pura a sus instalaciones y se mantiene limpia en ellas, sin infiltración de aguas residuales ni otros serios problemas microbiológicos.

Según la reglamentación actual (R.D.140 de 2003) un agua sólo es apta para consumo humano o para uso en fábricas de alimentos, si no contiene patógenos o sus indicadores (Coliformes- E. coli, Enterococos fecales, Clostridium perfringens y sus esporas) en 100 ml y si el recuento total de aerobios asociados al hombre es inferior a 20 ufc/1 mililitro (incubando 24 h a 37 ºC) y el recuento total de aerobios saprófitos es inferior a 100 ufc/1 mililitro (incubado 72 h a 22 ºC), en ambos casos en medio nutritivo YEA. Sin embargo, no existen criterios específicos para aguas de uso cosmético.

Dada la especial idiosincrasia de la industria cosmética, la prudencia exige el control de los microorganismos que más frecuentemente dan problemas en el sector. Hemos elegido para este kit como único indicador fecal la detección de Enterococos fecales, ya que es el parámetro que demuestra ser mejor detectado en los laboratorios que participan en los intercomparativos SEILAGUA®. La detección de Coliformes y E.coli puede considerarse redundante, ya que si están presentes, también lo van a estar los Enterococos fecales, que además nos indican una contaminación más amplia en el tiempo (E.coli en aguas sólo es viable 24 h mientras los Enterococos fecales resisten 1 semana). No obstante si desea añadir este parámetro a su control, utilice además el kit P/A RPL303. Los clostridios son indicadores de posible presencia de enterovirus y protozoos en aguas naturales tratadas, lo cual no resulta muy probable de encontrar en el sector cosmético. No obstante si emplea aguas de pozo, utilice además el kit P/A RPL308. Hemos elegido como parámetros adicionales en el kit, la detección de Pseudomonas aeruginosa y la detección de Burkholderia cepacia, los dos patógenos que dan problemas habituales tanto en aguas tratadas como en aguas purificadas. Por fin, añadimos los dos recuentos de aerobios totales en las cómodas CompactDryPlates®, medios preparados pero deshidratados, validados por AOAC y por Microval, que absorben directamente 1 ml del agua de muestra sin necesidad de fundir medios sólidos. 

 

MODO DE EMPLEO DEL MICROKIT® DRINK WATER KIT

1. Presencia o Ausencia de Enterococos fecales, de Pseudomonas aeruginosa y/o
de Burkholderia cepacia:

Añadir 100 ± 1 ml del agua de muestra a cada uno de los
tres frascos (RPL301, RPL302 y RPL323), sin llenar para dejar una cámara de aire,
agitando suavemente para diluir su contenido concentrado. Cerrar el tapón e incubar
18-72 horas a 35-37ºC. Si el frasco de Enterococos (ámbar con menisco azul) se
vuelve negro y pierde su iridiscencia (Fig.1, izquierda), hay contaminación fecal por
infiltración de aguas residuales. Si el frasco de Pseudomonas aeruginosa (incoloro)
se vuelve rosa o rojizo (Fig.2, izquierda), y/o el de Burkholderia cepacia
(anaranjado) se vuelve rojo vino tinto (Fig.3, izquierda), estos patógenos se han
infiltrado en nuestras aguas. La presencia de cualquiera de estos microorganismos
impide el uso del agua para fabricación de productos cosméticos. Añada cloro o lejía
hasta el borde de los botes usados, o bien autoclávelos, antes de desecharlos.

+ Fig.1 –                                                    + Fig.2 –                                                + Fig.3 –

2.Recuento de aerobios a dos temperaturas:

Añadir con una pipeta estéril 1 ml del
agua de muestra en el centro de una placa vacía y depositar encima el disco Dry-
Plate®-TC-R2. Dejar embeber el medio deshidratado y cerrar. Repetir la operación
con otra Dry-Plate®-TC-R2. Incubar una placa 24 h a 35 ºC aprox. y otra 48-72 h a
22 ºC aprox. Si se emplean incubadores, no voltear las placas, no dejar que toquen el
metal de la estufa (suelo, paredes y techo) y poner a incubar junto a un vaso lleno de
agua. Contar todas las colonias, que gracias al cromógeno, crecen con colores de la
gama del rojo (rosa, naranja, rojo, Fig.4). Para que el agua pueda considerarse apta
para consumo, debe haber menos de 20 colonias en la placa incubada 1 día a 35°C y
menos de 100 colonias en la placa incubada 2-3
días a 22°C.

Fig.4 (>100 colonias)

 

 CONTENIDO DEL KIT,

CODIGO: KMT450                              

 PARA 10 TEST COMPLETOS de los 5 parámetros:

  • 10 Jeringas 50 ml estériles (sin aguja).

  • 10 Pipetas Pasteur estériles.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Pseudomonas aeruginosa, patógeno procedente de aguas mal purificadas.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Burkholderia cepacia, patógeno procedente del biofilm de aguas estancadas.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Enterococos, los mejores indicadores a largo plazo (1-7 días) de infiltración de aguas fecales.

  • 20 Compact Dry Plates ® TC para recuento total de aerobios a 22°C  y a 35 °C.

MANTENER LOS KITS A TEMPERATURA AMBIENTE (4-25ºC). ES MUY IMPORTANTE MANTENERLOS AL RESGUARDO DE LA LUZ.

MATERIAL CONVENIENTE NO INCLUÍDO:
  • Estufas a 22 y a 35ºC (VRP001) (imprescindibles).
  • Zona aséptica: Lámpara de alcohol (VLM068) o Portabunsen (ME2195) y Envirostéril (VJM002), si no se  dispone de cabina de flujo laminar.
  • Test confirmativos de frascos sospechosos (todos disponibles consultando en MICROKIT).
  • Cepas certificadas (ver lentículas cuantitativas MICROKIT).
  • Servicios  intercomparativos (SEILAGUA®).
  • Frascos  P/A STAPH para Staphylococcus aureus si se utilizan aguas de muy dudosa calidad (RPL320).
  • Frascos P/A MCC para Coliformes y E.coli si se desea saber si la contaminación por infiltración de aguas fecales es muy reciente (de hace sólo unas horas): RPL303
  • Frascos P/A Clostricult si el agua procede de pozos profundos y desea controlar la contaminación por clostridios, indicadores de enterovirus y patógenos (RPL308).
  • Si utiliza este kit a diario (o una o dos veces por semana), no es necesario realizar más análisis microbiológicos de las aguas, pero si lo utiliza sólo una vez al mes, añada al menos un control semanal (o mejor diario) de recuento de aerobios a ambas temperaturas mediante las Compact Dry Plates ® TC  (Ref: 1000166).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro COSMETIKIT® WATER no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.

COSMETIKIT-ISO

COSMETIKIT ®-ISO: 100% 

ACORDE  A LAS normas ISO SOBRE  MICROBIOLOGÍA COSMÉTICA

Con este kit cosmetikit-iso y la simple ayuda de un Baño María y una estufa de cultivos, toda industria cosmética puede realizar el análisis microbiológico completo en 20 muestras diferentes, de la forma oficial (Normas ISO cosméticas). Referencia: KMT460.

CONTENIDO (CADUCIDAD APROX. 1 AÑO DESDE FABRICACION)

*20 Jeringas 20ml estériles (sin aguja)

*20 Pipetas Pasteur estériles

*2 x 10 Frascos 90ml c/perlas para tratamiento de la muestra (Eugon LT100 Broth ISO 21148, ref: RPL026P)

*20 Tubos para recuento total (TSA ISO 21149, ref: TPL077)cosmetikitiso

*20 Tubos para levaduras y mohos (SDA Caf. ISO 16212 ref: TPL073)

*20 Tubos para Pseudomonas aeruginosa (Cetrimide Agar ISO 22717 ref: TPL100)

*20 Tubos para E.coli y demás Coliformes (EMB Agar ISO 21150 ref: TPL088)

*20 Tubos para Staphylococcus aureus (Mannitol Salt Agar ISO 22718 ref: TPL066)

*20 Tubos inclinados para Candida albicans (Biggy Agar ISO 18416 ref: TPL062)

*20 Tubos para Burkholderia cepacia (BCPT Agar ISO 22717 ref: TPL005)

*120 Placas Petri  estériles de 90 mm.

 

MATERIAL NECESARIO NO INCLUÍDO
-Estufa a 35-37 ºC (VRP001), Baño María, baño hervidor o microondas
-Zona aséptica: Lámpara de alcohol (VLM068) o Portabunsen (ME2195+ME2196) y Envirostéril (VJM002) si no se dispone de cabina de flujo laminar.
-Test confirmativos de colonias sospechosas (todos disponibles consultando en MICROKIT).
-Cepas de referencia, de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados (Ver lentejas cuantitativas estables de MICROKIT)
-Participar en servicios intercomparativos como SEILA-PARFUM para validar procedimientos y analistas.

 

MODO DE EMPLEO COSMETIKIT- ISO

1.- Añadir con una jeringa estéril, asépticamente, 10 gramos o 10 ml de muestra a un Frasco 90ml Eugon LT100 Broth con perlas. Cerrar el tapón. Mezclar agitando y dejar actuar no menos de 20 ni más de 30 minutos a 21-25°C aproximados. Así se obtiene la solución madre (muestra tratada).

2.- Con la ayuda de una Pipeta Pasteur estéril añadir de inmediato 1 ml de la muestra tratada recién agitada a una placa Petri estéril, en condiciones asépticas. Repetir la operación en otra placa, con la misma pipeta y para la misma muestra. Es conveniente realizar duplicados (Pida TPL077 y TPL073).

3.- Fundir al Baño María un tubo de TSA y otro de SDA Caf. hasta que estén  totalmente licuados (si duplica las placas, funda dos tubos de cada medio por muestra).

4.- Cuando se hayan enfriado lo suficiente para no quemar la mano, pero sigan líquidos, añadir cada uno a una placa con el mililitro de muestra tratada. Los mohos tambien se pueden sembrar en superficie, 0,1-0,33 ml mediante asa de Digralsky. Mejor sembrar en masa 1ml y en superficie 0,1ml.

5.- Hacer girar las placas sobre la mesa 10 veces en cada sentido para asegurar la mezcla del medio con la muestra, con cuidado para que no rebose el líquido ni llegue a la tapa de la placa. Dejar solidificar sin tocar (si la temperatura ambiente no es elevada, 10-15 minutos serán suficientes).

6.- Incubar las placas en posición invertida y en total oscuridad, 3-5 días a 30-35 ºC (TSA) y (3)-5 días a 20-25 ºC (SDA Caf.).

7.- A la vez que esas placas, incubar el resto de muestra tratada en Eugon LT100 Broth durante 48 h a 30-35°C para obtener la muestra tratada y enriquecida,  necesaria para la búsqueda de patógenos. O bien pueden pasarse 10 ml a un frasco TSB (pida ref: RPL043) y 10 ml a un frasco Lactose Broth  LB (pida ref: RL017) e incubar éstos, pero entonces la ausencia de patógenos será sólo en 1 g, no en 10g.

8.- Añadir unas gotas (tras enriquecer no hace falta más precisión) de la muestra enriquecida, recién agitada, a un tubo inclinado Biggy Agar Candida, con una misma pipeta estéril y repartir, volteando.

9.- Añadir unas gotas de muestra tratada enriquecida, recien agitada, a una placa Petri estéril, en condiciones asépticas, que será para el Mannitol Salt Agar. Si se enriqueció en TSB y LB, del TSB se inocula en todas las placas menos en la de EMB Levine Agar, en la que se inocula desde LB.

10.- Fundir al Baño María un tubo de EMB Levine.Agar, otro de Mannitol Salt Agar, otro de Cetrimide Agar y otro de BCPT Agar hasta que estén totalmente licuados.

11.- Cuando se hayan enfriado lo suficiente para no quemar la mano, pero sigan líquidos, añadir el contenido del Mannitol Salt Agar a la placa con las gotas de muestra enriquecida.

12.- Hacer girar la placa sobre la mesa 10 veces en cada sentido para asegurar la mezcla del medio con la muestra, con cuidado para que no rebose el líquido ni llegue a la tapa de la placa. Dejar solidificar sin tocar. Esta siembra en masa es imprescindible en estafilococos.

13.-Verter el contenido del EMB, del Cetrimida y del BCPT en sendas placas Petri estériles y dejar solidificar. Sembrar en zigzag sobre la superficie de cada una de ellas, una gota de la muestra enriquecida recién agitada.

14.- Es una buena práctica sembrar además en otra placa de TSA, en zigzag, una gota del enriquecimiento recién agitado para aislar colonias e identificarlas (¡no para contarlas!), a fin de aumentar la sensibilidad para cepas  estresadas, que podrían no crecer en los medios selectivos. Pida tubos adicionales de TPL077.

15.- Incubar las placas en posición invertida, y los tubos de Candida albicans en posición vertical, durante 24-72 horas a 30-35 ºC. No apilar más de 5 placas y dejar espacio entre las pilas, y entre éstas y las paredes de la estufa.

INTERPRETACION DE RESULTADOS COSMETIKIT-ISO

El recuento total (placas de TSA) no debe ser superior a 100///1000 ufc/ml ó gramo de muestra inicial, según las exigencias (cosmética infantil y de inmunodeprimidos///general). De modo que no deben aparecer más de 10-100 colonias por placa, dada la dilución 1/10 efectuada en la solución madre. Lo mismo para recuento de levaduras (colonias convexas) y mohos (colonias filamentosas) (Placas SDA Caf).  De lo contrario, y siempre que no haya patógenos, se puede reprocesar el lote. No debe aparecer ninguna colonia de Escherichia coli (colonias metalizadas en placas de EMB; las demás colonias en este medio son indicadoras de coliformes, que sin ser patógenos, ni indicadores exclusivos de contaminación fecal, suelen provocar alteraciones en la muestra), de Pseudomonas aeruginosa (colonias amarillas-verdosas o pardo-rojizas en placas de Cetrimida), de Burkholderia cepacia (colonias blancas o salmón, con medio virado a fucsia, en BCPT), ni de Staphylococcus aureus (colonias amarillas en placa de Mannitol), patógenos procedentes de contaminación fecal, del agua, del biofilm del agua y de operarios-aire, respectivamente. Si aparece alguna colonia parda (que no provoque viraje de color del medio a pardo-negro) en el tubo de Biggy, será de Candida albicans, lo que demuestra contaminación por mucosas de operarios portadores. Si aparece cualquiera de los 5 patógenos, hay que destruir el lote.

 

Si desea más información sobre nuestros COSMETIKIT-ISO rellene nuestro formulario de contacto https://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16