SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

Selección de Salmonella y Shigella (APHA) UNE-EN ISO 6579:2003

COMPOSICIÓN

  • Peptona pancreática de carne 5,00 g
  • Extracto de carne                  5,00 g
  • Sales biliares                         8,50 g
  • Citrato sódico                       10,00 g
  • Tiosulfato sódico                  8,50 g
  • Citrato férrico amoniacal      1,00 g
  • Lactosa                                 10,00 g
  • Rojo neutro                           25,00 mg
  • Verde brillante                      0,33 mg
  • Agar‑agar                              15,00 g
SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Calentar agitando hasta ebullición para su disolución.

Mantener la ebullición durante 2 minutos.

Autoclavar 116 ºC durante 5 minutos. El color final del medio es rojo-naranja.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES

DESHIDRATADO CODIGO: DMT107

Nueva imagen (2)

 

 

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Rosáceo

PREPARADO: Estéril, Rojo‑naranja

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

  • Salmonella abony MKTN 6017, Colonias incoloras con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Colonias incoloras, buen crecimiento.
  • E.coli MKTA 25922, Inhibición parcial o total, puede crecer en 48 h.
  • Enterococcus faecalis MKTN 775, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
  • Proteus mirabilis MKTA 14153, Bueno, Colonias incoloras.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio selectivo utilizado para aislamiento de Salmonella y Shigella. Distingue a los fermentadores de lactosa de aquellos que no lo son. Las sales biliares y el verde brillante inhiben el crecimiento de las bacterias Gram (+). El citrato y thiosulfato sódico limitan el desarrollo de los coliformes y previenen la invasión por Proteus.

SIEMBRA

Fundir un tubo o frasco para elaborar placas sin sobrecalentar. Dejar enfriar. Sembrar en superficie 1 ml del medio de enriquecimiento incubado. Incubar a 37-42 ºC aproximadamente, durante 24-72 horas.

INTERPRETACIÓN

Salmonella, no fermenta la lactosa, sus colonias aparecen incoloras, transparentes, con o sin centro negro debido a la producción de sulfuro de hidrógeno. Shigella, aparece con colonias incoloras. Los coliformes que hayan conseguido crecer, formarán colonias rojas o rosadas.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

E. SAKAZAKII CROMOKIT  IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Norma ISO/TS 22964:2006, optimizada en 7/2013.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                         7,0 g
  • Cloruro Sódico               5,0 g
  • Extracto de levadura      3,0 g
  • Desoxicolato Sódico       0,60 g
  • Thiosulfato sódico            1,0 g
  • Mix cromogénico          0,15 g
  • Cristal Violeta                0,002 g
  • Agar-Agar cromogénico         15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 31,75 gramos en 1 litro de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El color del medio es púrpura, a veces floculado por el tipo de agar-agar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT315.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado

PREPARADO: Estéril, Púrpura, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 41°C aproximadamente:

  • Enterobacter (=Cronobacter)  sakazakii  MKTA 12868, Excelente, colonias verde-azuladas. Crece más del 50% del valor inóculo.
  • Escherichia coli  MKTA 25922, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterobacter aerogenes  MKTA 13048, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterococcus faecalis  MKTA 29212, Inhibido.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias verde-azuladas, que son presuntivas para E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.  Ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación, sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias (mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

E. SAKAZAKII CROMOKIT  IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

 Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Norma ISO/TS 22964:2006, optimizada en 7/2013.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                         7,0 g
  • Cloruro Sódico               5,0 g
  • Extracto de levadura      3,0 g
  • Desoxicolato Sódico       0,60 g
  • Thiosulfato sódico            1,0 g
  • Mix cromogénico          0,15 g
  • Cristal Violeta                0,002 g
  • Agar-Agar cromogénico         15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 31,75 gramos en 1 litro de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El color del medio es púrpura, a veces floculado por el tipo de agar-agar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT315.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado

PREPARADO: Estéril, Púrpura, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 41°C aproximadamente:

  • Enterobacter (=Cronobacter)  sakazakii  MKTA 12868, Excelente, colonias verde-azuladas. Crece más del 50% del valor inóculo.
  • Escherichia coli  MKTA 25922, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterobacter aerogenes  MKTA 13048, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterococcus faecalis  MKTA 29212, Inhibido.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias verde-azuladas, que son presuntivas para E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.  Ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación, sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias (mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros  E. SAKAZAKII CROMOKIT  IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

RAPPAPORT VASSILIADIS SOJA BROTH PHARMACOPEA

RAPPAPORT VASSILIADIS SOJA BROTH PHARMACOPEA

Pharmacopea armonizada 2008

Enriquecimiento selectivo de Salmonella.

COMPOSICIÓN

  • Peptona de soja                      4.5 g
  • Cloruro sódico                       8.0 g
  • DihidrógenoFosfato potásico          0.6 g
  • Cloruro de magnesio              29.0 g
  • Oxalato de verde malaquita             0.036 g
  • Fosfato dipotásico                  0.4 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,2 ± 0,2

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PREPARACIÓN

Disolver 42,5 gramos en 1 l de agua bidestilada. Una posible ebullición espontánea es normal y característica en este medio. Autoclavar a 115 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es azul turquesa.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

De izquierda a derecha: Rappaport sin inocular, E. coli, Shigella, y Salmonella.

De izquierda a derecha: Rappaport sin inocular, E. coli, Shigella, y Salmonella.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo fino, Azul

PREPARADO: Estéril, Azul turquesa

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Correcto, a las 48 h. El medio se vuelve lechoso.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Crece bien, a las 48 h. El medio se vuelve lechoso.
  • Escherichia coli MKTA 25922, parcialmente inhibido.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, parcialmente inhibido.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 0.1 ml del pre-enriquecimiento en 10 ml de este medio. Incubar 21-27 horas a 37 ºC aproximadamente o, para mayor selectividad para Salmonella, a 40,5-42,5 ºC aproximadamente, incluso 24 horas más. Para tener un mínimo de certeza en la detección de Salmonella, NO SE PUEDE enriquecer sólo en caldo Rappaport, ya que, en ese caso, y en función de las distintas matrices y las distintas cepas,  podrían obtenerse hasta un 47,4 % de falsos negativos!!! Realizar un paralelo en caldo Mueller Kauffmann Tetrationato (DMT086),  o en Selenito (DMT111) o en SS Broth (DMT067). Sembrar en placas selectivas.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros RAPPAPORT VASSILIADIS SOJA BROTH PHARMACOPEA rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SALMONELLA-SHIGELLA BROTH (SS BROTH)

SALMONELLA-SHIGELLA BROTH (SS BROTH)

Versión caldo del medio SS Agar UNE-EN ISO 6579:2003

 Enriquecimiento selectivo de Salmonella y Shigella con máxima recuperación

COMPOSICIÓN

  • Peptona de carne    5,00 g
  • Extracto de carne   5,00 g
  • Sales biliares          8,50 g
  • Citrato Sódico      10,00 g
  • Tiosulfato Sódico   8,50 g
  • Citrato Fe-Amoniacal 1,00 g
  • Lactosa                 10,00 g
  • Rojo Neutro      25,00 mg
  • Verde Brillante    0,33 mg

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,1

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De izquierda a derecha: SS Broth sin nocular, E. coli, Shigella (turbio), y Salmonella (negro)

De izquierda a derecha: SS Broth sin nocular, E. coli, Shigella (turbio), y Salmonella (negro)

PREPARACIÓN

Disolver 48 g en 1 l de agua bidestilada.

Hervir 1 minuto a 100  ºC. No autoclavar o, mejor aún, esterilizar por filtración. El aspecto grumoso-filamentoso del medio preparado es normal.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

Nueva imagenMANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES

 

DESHIDRATADO CODIGO: DMT067

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, rosado.   PREPARADO: Estéril, rojo intenso con precipitado filamentoso que NO ES contaminación.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 42°C aproximadamente:

  • Salmonella abony MKTN 6017: Correcto, Amarillento y ennegrece el medio.
  • Escherichia coli MKTA 25922: Inhibido, Puede llegar a crecer en 48 h.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Inhibido.
  • Proteus mirabilis MKTA 14153, Bueno.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Bueno.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Escaso.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS, FRASCOS PREPARADOS, KITS P/A.

NOTA: Medio ideal para el enriquecimiento selectivo de Salmonella y Shigella; presenta la ventaja, sobre el Caldo Selenito-Cystina, de no ser tóxico; y sobre el Caldo Rappaport Vassiliadis, de permitir el crecimiento de las Shigella. Casi toda la flora Gram positiva queda inhibida (excepto algunas cepas de Bacillus cereus, Enterococcus durans y Staphylococcus epidermidis); y gram parte de la flora Gram negativa también es inhibida (excepto algunas cepas de E. coli, Pseudomonas aeruginosa, y el grupo KES -Klebsiella, Enterobacter y Serratia-). Estas cepas quedarán luego descartadas en los agares selectivos XLD y SS (sustituya este último por Chromosalm si sólo busca Salmonella) y con las pruebas inmunológicas (KMB501) y bioquímicas. En los servicios intercompartivos SEILALIMENTOS de los ultimos 7 años, este medio demuestra ser el que mejor recupera las diferentes cepas de Salmonella y de Shigella en todo tipo de matrices (lácteos, cárnicos, pescados, vegetales…)

 SIEMBRA

Agitar para resuspender las nubes, precipitados y flóculos. Inocular 0,1 ml de caldo de pre-enriquecimiento (Buffered peptone Water) en un tubo de 9 ml, o bien 1 ml en un frasco de 100 ml. Incubar 48 horas a 42 ºC aproximadamente.

 INTERPRETACIÓN

Llevar a los medios sólidos selectivos XLD Agar y SS-Agar (sustituya éste por Chromosalm si sólo busca Salmonella) y, sembrando en superficie por agotamiento, cualquier caldo turbio o con viraje de color. Los medios con precipitado cristalino o flóculos son normales y no indican crecimiento.

ATENCIÓN, MÉTODO RÁPIDO PARA SALMONELLA: Uniendo este avance a un enriquecimiento mixto acelerado (mezclando los medios del preenriquecimiento revitalizador y neutralizante: 225 ml Buffered Peptone Neutralizing Water de MICROKIT  DMT011+ enriquecimiento selectivo 18 ml SS Broth concentrado [x5] de MICROKIT DMT067) e incubándolos juntos en las 18 h previas; permite la detección fiable de Salmonella en sólo 36 h desde la muestra inicial. Por todo ello, este método acortado es la herramienta que estaban esperando todas las fábricas de productos alimenticios para poder liberar lotes gracias a la detección precoz de este patógeno, que les retrasaba hasta ahora el resultado global del laboratorio microbiológico a 3-5 días.

 BIBLIOGRAFÍA

FSanchis, J. 09-2014: XIX Congreso Nacional de Microbiología  de los Alimentos. Doble enriquecimiento simultáneo para detección de Salmonella. J. Sanchís. MICROKIT.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

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SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

Selección de Salmonella y Shigella (APHA) UNE-EN ISO 6579:2003

COMPOSICIÓN

  • Peptona pancreática de carne 5,00 g
  • Extracto de carne                  5,00 g
  • Sales biliares                         8,50 g
  • Citrato sódico                       10,00 g
  • Tiosulfato sódico                  8,50 g
  • Citrato férrico amoniacal      1,00 g
  • Lactosa                                 10,00 g
  • Rojo neutro                           25,00 mg
  • Verde brillante                      0,33 mg
  • Agar‑agar                              15,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,1

SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Mantener la ebullición durante 2 minutos. Autoclavar 116 ºC durante 5 minutos. El color final del medio es rojo-naranja.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES

Nueva imagen

 

 

DESHIDRATADO CODIGO: DMT107

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Rosáceo

PREPARADO: Estéril, Rojo‑naranja

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

  • Salmonella abony MKTN 6017, Colonias incoloras con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Colonias incoloras, buen crecimiento.
  • E.coli MKTA 25922, Inhibición parcial o total, puede crecer en 48 h.
  • Enterococcus faecalis MKTN 775, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
  • Proteus mirabilis MKTA 14153, Bueno, Colonias incoloras.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio selectivo utilizado para aislamiento de Salmonella y Shigella. Distingue a los fermentadores de lactosa de aquellos que no lo son. Las sales biliares y el verde brillante inhiben el crecimiento de las bacterias Gram (+). El citrato y thiosulfato sódico limitan el desarrollo de los coliformes y previenen la invasión por Proteus.

SIEMBRA

Fundir un tubo o frasco para elaborar placas sin sobrecalentar. Dejar enfriar. Sembrar en superficie 1 ml del medio de enriquecimiento incubado. Incubar a 37-42 ºC aproximadamente, durante 24-72 horas.

INTERPRETACIÓN

Salmonella, no fermenta la lactosa, sus colonias aparecen incoloras, transparentes, con o sin centro negro debido a la producción de sulfuro de hidrógeno. Shigella, aparece con colonias incoloras. Los coliformes que hayan conseguido crecer, formarán colonias rojas o rosadas.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

E. SAKAZAKII CROMOKIT CSA-DFI AGAR

E. SAKAZAKII CROMOKIT  CSA-DFI AGAR

 Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Norma CSA y DFI.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                                   15,0 g
  • Peptona de soja                       5,0 g
  • Cloruro Sódico                         5,0 g
  • Desoxicolato Sódico             0,60 g
  • Thiosulfato sódico                  1,0 g
  • Mix cromogénico                 0,11 g
  • Agar-Agar cromogénico      15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,2

3 colonias azuladas: E.sakazakii. Colonias de otros colores: Flora acompañante

3 colonias azuladas: E.sakazakii.
Colonias de otros colores: Flora acompañante

PREPARACIÓN

Disolver 42 gramos en 1 litro de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El color del medio es crema-rosado, a veces floculado por el tipo de agar-agar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT314.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado

PREPARADO: Estéril, Crema-rosado, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 41°C aproximadamente:

  • Enterobacter sakazakii  MKTA 12868, Excelente, colonias azules. Crece más del 50% del valor inóculo.
  • Escherichia coli  MKTA 25922, Excelente, colonias amarillas.
  • Enterobacter aerogenes  MKTA 13048, Excelente, colonias verdes.
  • Klebsiella pneumoniae MKTA 13883 Excelente, colonias amarillas o verdes, grandes, mucosas.
  • Enterococcus faecalis  MKTA 29212, Inhibido.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias azules, que son presuntivas para E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.  Ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación, sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias (mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros  E. SAKAZAKII CROMOKIT  CSA-DFI AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SABOURAUD POLIMICOLOGICAL BROTH

SABOURAUD POLIMICOLOGICAL BROTH

Enriquecimiento selectivo de levaduras y mohos, aislamiento más sensible por MF.

COMPOSICIÓN

  • Polipeptona micológica     10 g
  • Dextrosa                           20 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,7 ± 0,2

Aspergillus niger en placa con cartón absorbente

Aspergillus niger en placa con cartón absorbente

PREPARACIÓN

Disolver 30 g en 1 litro de agua destilada. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO  EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT105

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Parcialmente inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Parcialmente inhibido.
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas floculando o flotando en 5 días.
  • Candida albicans MKTA 10231, Correcto.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS 9 ml, FRASCOS 100 ml, VIALES PARA FILTRACIÓN DE MEMBRANA, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Preparado como modificación de la USP para enriquecer muestras pobres en hongos y ricas en flora acompañante (ideal para detección en cosméticos) y para detectar levaduras y mohos por la técnica de Filtración de Membrana.

 SIEMBRA

Añadir 1 ml o 1 gramo de muestra al tubo o al frasco. Incubar a 21 ºC aproximadamente, durante 3 días (levaduras) o 5 días (mohos). Los viales se añaden sobre cartones absorbentes previamente colocados en placas de Petri de 55 mm de diámetro, y se deposita encima la membrana de filtración.

INTERPRETACIÓN

La turbidez en tubos o frascos indica presencia de hongos. Averiguar por crecimientos coloniales en medios agarizados de qué especies se trata. En el caso de la MF, las colonias aparecidas son de levaduras (colonias no filamentosas) y mohos (colonias filamentosas) aunque a menudo aparecerán colonias de bacterias acompañantes al no ser el medio altamente selectivo.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros  SABOURAUD POLIMICOLOGICAL BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

SABOURAUD MALTOSE AGAR

SABOURAUD MALTOSE AGAR

Aislamiento de hongos. Obtención de cultivos masivos.

COMPOSICIÓN

  • Polipeptona  micológica         10 g
  • Maltosa                         40 g
  • Agar‑agar                      15 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,6 ± 0,2

Colonias lobulado-asteroides,  entre otras, procedentes de arena de playa

Colonias lobulado-asteroides, entre otras, procedentes de arena de playa

PREPARACIÓN

Disolver 65 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. No sobrecalentar.

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Penicillium candidum. Polvo blanco (falsa harina) procedente de embutidos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT106

Escaso poder selectivo del medio: Invasión bacteriana de muestra con abundante flora  mixta, anterior al crecimiento de los hongos

Escaso poder selectivo del medio: Invasión bacteriana de muestra con abundante flora
mixta, anterior al crecimiento de los hongos

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Parcialmente inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Parcialmente inhibido.
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas en 5 días.
  • Candida albicans MKTA 10231, Correcto.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio para cultivo de hongos con máxima obtención de biomasa.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Sembrar en superficie e incubar 2-5 días a 21-25 ºC aproximadamente. Se obtienen cultivos masivos.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Crecimiento mixto procedente de arena fangosa de una playa.

Crecimiento mixto procedente de arena fangosa de una playa.

Si desea más información sobre nuestros SABOURAUD MALTOSE AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

SABOURAUD DEXTROSE CAF (CLORANFENICOL) AGAR

SABOURAUD DEXTROSE CAF (CLORANFENICOL) AGAR

Recuento selectivo de Levaduras y Mohos UNE 34 821:1986 e ISOS cosméticas: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco),  ISO 16212 (recuento de hongos), ISO 18416 (Candida albicans).

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Aspergillus flavus, máximo productor de aflatoxinas

Aspergillus flavus, máximo productor de aflatoxinas

Sacharomyces cerevisiae, levadura del pan, cerveza, vino…

Sacharomyces cerevisiae,
levadura del pan, cerveza, vino…

Candida albicans, levadura oportunista en mucosa

Candida albicans,
levadura oportunista en mucosa

Rhizopus stolonifer, primitivo moho del  pan

Rhizopus stolonifer, primitivo moho del pan

COMPOSICIÓN

Nueva imagen

 

 

 

  • Polipeptona micológica 10,00 g
  • Dextrosa    40,00g
  • Cloranfenicol       0,50g
  • Agar‑agar   15,00g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,6 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 65,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución. Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos, o mejor 116 ºC durante 10 minutos evitando el sobrecalentamiento.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT102

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema       PREPARADO: Estéril, Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Inhibido.
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas en 5 días. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 73-475 %, pero de forma selectiva.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 95-170 %, pero de forma selectiva.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 122-144 %, pero de forma selectiva.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 y 250 ml, MEDIO DESHIDRATADO, DESINFECTEST-LM, PLAQUITAS HERMETICAS MF

NOTA: Medio de uso muy extendido para el aislamiento y recuento de hongos (levaduras y mohos) en la industria alimentaria. Es más útil para cultivo rápido que para recuento (para éste es mejor el Rosa Bengala CAF Agar).

El cloranfenicol actúa como antibacteriano termoestable de amplio espectro, lo que da al medio una excelente selectividad con respecto al Sabouraud Dextrose Agar. El medio se incuba a 20-25 ºC aproximadamente, durante 3-5 días.

 SIEMBRA

Con los tubos 20 ml y los frascos se preparan placas. En éstas se siembra en superficie, extendiendo con un triángulo de vidrio flameado.

INTERPRETACIÓN

Las levaduras aparecen como colonias no filamentosas, a menudo mucosas. Los mohos crecen con colonias filamentosas y de margen difuso. Identificar al microscopio los mohos y con YEAST-IDENT las levaduras.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Crecimiento masivo de Rhodotorula glutinis, exclusivo de este medio Sabouraud Dextrosa Agar.

Crecimiento masivo de Rhodotorula glutinis, exclusivo de este medio Sabouraud Dextrosa Agar.

Flora mixta de levaduras y mohos, vista desde abajo.

Flora mixta de levaduras y mohos, vista desde abajo.

Si desea más información sobre nuestros  SABOURAUD DEXTROSE CAF (CLORANFENICOL) AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16