DryPlates® LIS

DryPlates® LIS. Detección de Listeria spp. y presunción de L.monocytogenes

dry plate lis

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente  mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinaria caducidad (1 año desde fabricación).

El Agar Ottaviani & Agosti (ISO 11290:2004, llamado Cromocytogenes en Microkit) es un medio excelente (selectivo y diferencial) para detección selectiva de Listeria spp. (colonias verdes) y de L.monocytogenes (colonias verdes con halo) en muestras alimentarias, ambientales y de otros tipos. El sustrato cromogénico detecta la beta-glucosidasa, enzima común en todas las especies de Listeria y unas raras cepas de Enterococos y Bacilos, provocando la aparición de colonias verde-azuladas. Un sustrato adecuado detecta la fosfolipasa propia de L.monocytogenes, provocando un halo de lisis/precipitación alrededor de sus colonias. Dado que algunas cepas de L.ivanovii también son capaces de provocar halo, se requiere confirmación de las colonias presuntivas con halo, con la simple prueba: Rhamnosa +/Xylosa – (Kit completo KMT012, también disponible en tubos preparados, TPL014, TPL015, y también en medio deshidratado DMT167 + suplementos DMT169 y DMT171). Ahorre el coste de las galerías de identificación!

Cuando el inóculo procede de enriquecimiento (cuando no es para recuento de Listeria), suelen ser tantas las microcolonias formadas que sólo se suelen apreciar mediante el viraje de la totalidad del medio al mismo color verde-azulado.

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra enriquecida y dejar caer encima el disco nutriente (con pinzas o simplemente cerrando la tapa con disco sobre la base de la placa), nunca al revés. Cerrar la placa. De esta forma y en caso de presencia de Listeria, no debemos aspirar a obtener colonias aisladas, sino grandes biomasas que virarán la placa a azul-verdoso. Para recuento en 1 ml, actuar de igual modo pero con 1 ml de muestra no enriquecida, y en tal caso sí se podrán observar y contar colonias verdes con halo.
  3. O bien añadir al centro de la base de la placa 1 ml de agua estéril (o solución salina, Ringer, Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing, LPT Broth…) y dejar caer encima el disco nutriente. Estriar encima el caldo enriquecido, con estría lo más larga posible, para conseguir colonias aisladas. El disco una vez empapado se adhiere muy bien a la placa, por lo que se puede estriar sin problemas. Cerrar la placa.
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (basta con dejar un vaso de agua lleno en la estufa), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue nada de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (o el tapón naranja incluido como “base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 24-48 h. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda. Las cepas de Listeria spp. que no estén en estado subletal o estresado, crecerán desde las primeras 24h como colonias, virajes o estrías verde-azulados (detección precoz). Si no aparecieran estos cambios en 24h, siga incubando para revitalizar las células dañadas sub-letalmente durante la fabricación del producto, hasta las 48 h.
  5. Leer los resultados buscando sólo el color diana: Listeria spp. crece de color verde-azulado (sean colonias aisladas, sean estrías, sean zonas del medio o sea el medio completo). Si se aprecian halos alrededor de dichas colonias, se trata con alta probabilidad de Listeria monocytogenes y debe confirmarse con Xylosa/Rhamnosa como indicamos antes.

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Prehidrate el disco nutriente incluido en la placa con 1 ml de agua estéril (o solución salina, Ringer, Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing, LPT Broth…). Recuerde, añada el disco sobre el ml de agua y no al revés.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 ó de 0,22 µm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® LIS , evitando la formación de burbujas entre ambos. Evite estresar las posibles células de Listeria spp. retenidas en la membrana: es conveniente enjuagar/revitalizar la membrana una vez recién filtrada la muestra, filtrando acto seguido por ella 100 ml de, por ejemplo, Buff.Peptone ClNa Solution pH 7,0 Pharmacopea (MICROKIT RPL115, DMT301); apague la bomba en cuanto se haya terminado el líquido del embudo de filtración y deposite la membrana sin demora sobre la DryPlates® LIS prehidratada.

 

MODO DE EMPLEO para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua y no al revés).
  2. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

dry plate lis 2

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: VRB747).

Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (en alimentos y cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas), Levaduras y Mohos, E.coli y demás coliformes, Enterobacterias, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Salmonella spp, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales, Clostridium perfringens, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae, Flora acidoláctica. Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos a dos empresas: Laboratorios MICROKIT, S.L. (Madrid) y BC Aplicaciones Analiticas, S.A (Barcelona) tras más de 8 años de ensayos y mejoras en sinergia para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.

DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L.

Si desea más información sobre nuestras DryPlates®  LIS, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

MICROKIT® P/A-CLOSTRICULT

Laboratorios MICROKIT les ofrece el KIT MICROKIT®P/A-CLOSTRICULT en viales de polvo prepesado. SELECTIVO-ESPECÍFICO-CÓMODO-ECONÓMICO.

El parámetro de ausencia de Clostridium perfringens y sus esporas es fundamental como indicadorP-A3 de ausencia de enterovirus y protozoos en un agua potable. En los países civilizados adquiere la máxima importancia este parámetro, al haber disminuido drásticamente, gracias a la implantación de los parámetros de control coliformes- E. coli, la transmisión hídrica de enfermedades bacterianas (Vibrio, E. coli O157:H7, Shigella, Salmonella…) y tomar el protagonismo estas otras enfermedades víricas/protozoarias. Afortunadamente, la Directiva Comunitaria Europea 98/83 de 3/12/1998 y los consecuentes R.D. 1074/2002 y R.D.140/2003 le dan gran protagonismo al parámetro “ausencia de Cl.perfringens y sus esporas” en aguas de consumo humano.

Gracias al NUEVO polvo MICROKIT® P/A-CLOSTRICULT, diseñado a partir de caldo en Base a TSC más concentrado, de color paja,  (en CLOSTRICULT-1 la base era m-CP con SPS , de color lila, como en el kit-frascos y en CLOSTRICULT-2 era en base a TSC pero menos concentrado), el análisis de ausencia de esporas y formas  vegetativas de Cl.perfringens, en aguas potables es ahora posible de la forma más cómoda y fiable conocida. Los viales de polvo irradiado no contienen Tiosulfato Sódico, por ser altamente higroscópico. Si usa éstos en vez del medio preparado, trate la muestra previamente con Tiosulfato.

FOTO PA CLOSTRI

Añada a 100 ml de agua de muestra, 1 vial de 3g del polvo estéril CLOSTRICULT-3. Cierre el bote y trabaje en condiciones asépticas para no contaminarlo con falsos positivos.

Voltear sin agitar/oxigenar a temperatura ambiente hasta la completa disolución. Si fuese necesario, en muestras de agua muy fría, calentar el conjunto a 25-37°C. No calentar por encima de 37°C, ya que no se requiere ni se debe esterilizar. Si se buscan esporas, realizar un duplicado, que debe calentarse un instante hasta 75°C para que germinen las esporas y mueran las formas vegetativas. Ello, además, facilitará la disolución del polvo. El líquido resultante ya no es lila, como en Clostricult-1, sino ámbar (nuevo medio especial para Cl.perfringens y sus esporas, en vez de ser para todos los Clostridios Sulfito-Reductores) y con precipitado.

Incubar a (37-)44-46°C durante 16-48 horas. El ennegrecimiento del agua desde abajo hacia arriba es prueba de la presencia de Cl.perfringens; si se realizó shock

térmico, es prueba de la presencia de sus esporas. Como todo método, los positivos requieren confirmación (sembrar en estría en m-CP o mejor en TSC e identificar las colonias aisladas). Frascos con el fondo negro en 48h indican presencia de estresados

NOTA: Para acelerar el viraje a negro, añada 1 vial del suplemento estéril VMT136 a cada 100-1000 ml de medio estéril, una vez enfriado a 45-50 ºC.

Presentación: Viales pre-pesados para 100 ml de muestra (FPA902). Frascos preparados con Tiosulfato Sódico y parafina incluidos, para añadir directamente 100 ml de muestra de agua (RPL308).

Material necesario no incluído en los viales de polvo: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976), Parafina líquida (SDA081), Bote estéril 100ml (sólo se incluye si se solicita en el pedido) (VML155) o bolsa estéril STAND-UP (B2787B), Estufa o incubador 35-37 ºC (VRP001 ó VMT051). Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN Clostridium perfringens MKTA 13124. Límite de detección según  nuestra validación interna: 15 ufc (hasta 10 veces más sensible que el método MF). Recomendamos asimismo la participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, para validar los procedimientos y los operarios.

Validación: Realizada durante 7 años de intercomparación de 70 laboratorios de toda España en más de 700 muestras duplicadas. Se demuestra comparado con filtración de membrana en el medio oficial para Clostridium perfringens y sus esporas (mCP Agar y también frente a TSC Agar), una sensibilidad del 77,3 % frente al 14,33%  del método oficial y al 56,0% del TSC. Una especificidad del 100%  frente al 100% del método oficial y del 95,8% del TSC. Y un límite de detección de 3 a 10 veces más cercano a 1 ufc/100 ml que el método oficial: 2±1 ufc/100 ml con un 85% de detecciones frente a 8±7 ufc/100 ml en TSC Agar con sólo un 40% de detecciones.

NOTA: Los medios de cultivo, bien utilizados con el método P/A o bien con cualquier otro método, son presuntivos, jamás confirmativos (todos y en todas las marcas comerciales). Todo resultado positivo debería confirmarse con pruebas bioquímicas e inmunológicas para obtener resultados precisos. El método P/A es mucho más sensible (tienen muchos menos falsos negativos) que el método MF, pero algunas veces es menos específico (tienen más falsos positivos). Por ello es tan útil como screening negativo, para poder procesar un gran número de muestras. Si el kit da negativo, el resultado es negativo. Pero si el kit sale positivo, hay que confirmar esa muestra aislando en placa e identificando colonias aisladas.

Todos nuestros kits P/A permiten ahorrar 4-8 horas de incubación si, antes de inocularlos, se precalienta a 37°C la muestra de agua en un baño María.

Nuestros kits están validados para uso en aguas continentales, no marinas ni salinas.

Para más información sobre nuestras MICROKIT® P/A CLOSTRICOULT no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

Puntos críticos de las DryPlates®

Puntos críticos de las DryPlates® a tener en cuenta para obtener resultados adecuados:

Como en todo método nuevo, hay diferentes variables a tener en cuenta, y en el caso de las DryPlates ® hay 6 puntos críticos que debe salvar a la hora de emplearlas y que significan la diferencia entre obtener valores más reales y rápidos, o no encontrar nada, (si por error  sigue las pautas de la microbiología tradicional, que nada tiene que ver con las DryPlates ®):

  1. Las DryPlates® son placas preparadas pero de medio deshidratado. Por eso pueden almacenarse sin problemas de temperatura, la única precaución es no dejar la bolsa mal cerrada para que no les entre la humedad atmosférica. Y si ésta es exagerada, además almacenar las bolsas autosellables de aluminio en tuppers herméticos con silicagel.
  2. Añadir el disco nutritivo sobre el ml de muestra ya añadido a la placa Petri, nunca al revés, o si añadimos la muestra sobre el disco, no se repartirá en el medio
  3. Intentar que la muestra quede hecha una sola gota en el  centro de la placa (nivelar la cabina o poyata para que no se desplace a un lado) o de lo contrario el reparto será heterogéneo y mucho más lento. No es grave, ya que igualmente saldrán tantas colonias como ufc, pero la placa no quedará homogénea y posiblemente haya zonas de islas secas.
  4. No voltear la placa al meterla en la estufa, ya que a simple vista parece que el 100% de la muestra se embebe en unos segundos, pero en realidad un 15-30% de la misma tarda un buen rato en absorberse y se perdería si le damos la vuelta.
  5. Impedir que las placas toquen el suelo, las paredes y el techo de la estufa, que están a temperaturas mucho más elevadas que el aire interior controlado a 25 ó 35ºC. Eso secaría las DryPlates ® antes de que crecieran las colonias, dando la falsa sensación de que la muestra estaba perfecta. Pero este problema se delataría porque la superficie de la DryPlate ® se vería seca, sin el brillo característico del agar (en este caso del hidragar). Para ello adjuntamos en cada caja un tapón naranja que sirve de podio para poner encima la pila de DryPlates ®. Este es el mayor problema que podemos encontrar si no seguimos las instrucciones.
  6. Por el mismo motivo del punto anterior, añadir un vaso lleno de agua dentro de la estufa y si está muy vacía, varios vasos llenos de agua. Y no sobrepasar el tiempo de lectura (que además en las DryPlates ® suele ser muy anterior al del medio clásico).

dry plate EC3

Resumen de ventajas de las DryPlates® cuando son correctamente empleadas:

Inoculan 1 ml de muestra en masa sin perder el tiempo en calentar-fundir-enfriar frascos, y no inoculan sólo los 0,1-0,33 ml que absorbe la superficie de una placa preparada (de modo que multiplican por 3-10 el límite inferior de detección), se ahorra el asa de siembra, la caducidad es de un año, no hay contaminaciones en el transporte, obtienen recuentos significativamente  superiores a los de los medios preparados en formatos clásicos, las colonias crecen con aspecto idéntico al de los formatos clásicos, muchos medios obtienen resultados mucho más rápidos, ahorran espacio en el almacén, en la estufa y en el contenedor de residuos, no necesitan nevera, están disponibles todos los medios necesarios en esta versión (recuentos y patógenos)… todo son ventajas! El slogan es “de la muestra a la estufa en 10 segundos”, siempre que se sepan emplear siguiendo la pie de la letra las instrucciones.

dry plates uso

Si desea más información sobre nuestras DryPlates®  rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

COSMETIKIT® WATER

MICROKIT LES OFRECE EL COSMETIKIT® WATER, KIT COMPLETO PARA MICROBIOLOGÍA DE AGUAS DE USO COSMÉTICO

COSMETIKIT® WATER es un KIT COMPLETO  para análisis directo de recuento de aerobios y de Presencia/Ausencia de patógenos en frascos toma-muestras, sin necesidad de aparato de filtración. Contiene inactivadores del cloro. Para control completo de las aguas empleadas en la fabricación de productos cosméticos

COSMETIKIT WATER

INTRODUCCIÓN

El control microbiológico del agua  es de la máxima importancia en la elaboración de productos cosméticos porque se trata de una de las materias primas usadas en mayor cantidad y también por usarse para tareas de limpieza, enjuague de envases, equipos, etc.

Una calidad deficiente en el agua de uso cosmético puede causar contaminaciones en el producto final con serias repercusiones en la salud del usuario final y en la estabilidad del producto.

La actual legislación garantiza la calidad del agua a la salida de la potabilizadora y a la salida de los grifos públicos, pero NO a la salida de los grifos privados que utilizan el consumidor y las industrias. Las continuas obras públicas, así como las internas de los edificios, ponen en grave peligro la seguridad final del agua, a menudo por infiltración de aguas fecales en la red potable; por ello es imprescindible su re-control privado.

Los kits P/A de MICROKIT han sido validados en España, comparando durante años los datos de decenas de laboratorios mediante análisis clásico por Filtración de membrana y los resultados obtenidos mediante esta cómoda técnica. En nuestra página Web (www.laboratoriosmicrokit.com) encontrará las 4 publicaciones que respaldan esta validación y demuestran que el método no sólo es tan bueno como el de Filtración de membrana, sino incluso mejor. Además, es mucho más sencillo y rápido de manejar, ahorrando el uso de aparatos de filtración y dejando el análisis microbiológico del agua al alcance de todo usuario, sin necesidad de un laboratorio especial.

Realice un análisis semanal (para mayor seguridad, uno diario) para verificar que el agua que sale de la potabilizadora municipal llega pura a sus instalaciones y se mantiene limpia en ellas, sin infiltración de aguas residuales ni otros serios problemas microbiológicos.

Según la reglamentación actual (R.D.140 de 2003) un agua sólo es apta para consumo humano o para uso en fábricas de alimentos, si no contiene patógenos o sus indicadores (Coliformes- E. coli, Enterococos fecales, Clostridium perfringens y sus esporas) en 100 ml y si el recuento total de aerobios asociados al hombre es inferior a 20 ufc/1 mililitro (incubando 24 h a 37 ºC) y el recuento total de aerobios saprófitos es inferior a 100 ufc/1 mililitro (incubado 72 h a 22 ºC), en ambos casos en medio nutritivo YEA. Sin embargo, no existen criterios específicos para aguas de uso cosmético.

Dada la especial idiosincrasia de la industria cosmética, la prudencia exige el control de los microorganismos que más frecuentemente dan problemas en el sector. Hemos elegido para este kit como único indicador fecal la detección de Enterococos fecales, ya que es el parámetro que demuestra ser mejor detectado en los laboratorios que participan en los intercomparativos SEILAGUA®. La detección de Coliformes y E.coli puede considerarse redundante, ya que si están presentes, también lo van a estar los Enterococos fecales, que además nos indican una contaminación más amplia en el tiempo (E.coli en aguas sólo es viable 24 h mientras los Enterococos fecales resisten 1 semana). No obstante si desea añadir este parámetro a su control, utilice además el kit P/A RPL303. Los clostridios son indicadores de posible presencia de enterovirus y protozoos en aguas naturales tratadas, lo cual no resulta muy probable de encontrar en el sector cosmético. No obstante si emplea aguas de pozo, utilice además el kit P/A RPL308. Hemos elegido como parámetros adicionales en el kit, la detección de Pseudomonas aeruginosa y la detección de Burkholderia cepacia, los dos patógenos que dan problemas habituales tanto en aguas tratadas como en aguas purificadas. Por fin, añadimos los dos recuentos de aerobios totales en las cómodas CompactDryPlates®, medios preparados pero deshidratados, validados por AOAC y por Microval, que absorben directamente 1 ml del agua de muestra sin necesidad de fundir medios sólidos. 

 CONTENIDO DEL KIT, CODIGO: KMT450                              

 PARA 10 TEST COMPLETOS de los 5 parámetros:

  • 10 Jeringas 50 ml estériles (sin aguja).

  • 10 Pipetas Pasteur estériles.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Pseudomonas aeruginosa, patógeno procedente de aguas mal purificadas.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Burkholderia cepacia, patógeno procedente del biofilm de aguas estancadas.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Enterococos, los mejores indicadores a largo plazo (1-7 días) de infiltración de aguas fecales.

  • 20 Compact Dry Plates ® TC para recuento total de aerobios a 22°C  y a 35 °C.

MANTENER LOS KITS A TEMPERATURA AMBIENTE (4-25ºC). ES MUY IMPORTANTE MANTENERLOS AL RESGUARDO DE LA LUZ.

MATERIAL CONVENIENTE NO INCLUÍDO:

  • Estufas a 22 y a 35ºC (VRP001) (imprescindibles).
  • Zona aséptica: Lámpara de alcohol (VLM068) o Portabunsen (ME2195) y Envirostéril (VJM002), si no se  dispone de cabina de flujo laminar.
  • Test confirmativos de frascos sospechosos (todos disponibles consultando en MICROKIT).
  • Cepas certificadas (ver lentículas cuantitativas MICROKIT).
  • Servicios  intercomparativos (SEILAGUA®).
  • Frascos  P/A STAPH para Staphylococcus aureus si se utilizan aguas de muy dudosa calidad (RPL320).
  • Frascos P/A MCC para Coliformes y E.coli si se desea saber si la contaminación por infiltración de aguas fecales es muy reciente (de hace sólo unas horas): RPL303
  • Frascos P/A Clostricult si el agua procede de pozos profundos y desea controlar la contaminación por clostridios, indicadores de enterovirus y patógenos (RPL308).
  • Si utiliza este kit a diario (o una o dos veces por semana), no es necesario realizar más análisis microbiológicos de las aguas, pero si lo utiliza sólo una vez al mes, añada al menos un control semanal (o mejor diario) de recuento de aerobios a ambas temperaturas mediante las Compact Dry Plates ® TC  (Ref: 1000166).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro COSMETIKIT® WATER no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.

MICROKIT® P/A Vibrio cholerae EN POLVO

Nuevo MICROKIT® P/A Vibrio cholerae  EN POLVO. Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 ml de agua.(VIAL estéril 4 g).

MICROKIT® P/A Vibrio cholerae EN POLVO es un medio estéril TCBS Broth Modificado pre-pesado en tubos de 4 g estériles, para añadir directamente el contenido  a 100 ml de agua de pozo, red o fabricación (o bien dos tubos a 250 ml de agua envasada o de baño), para la detección de la Presencia o la Apa vibriousencia de Vibrio cholerae. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales. Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen. Agitar para homogeneizar. El agua quedará verde-azulada y opaca. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación. Incubar a 28-35ºC durante 18-24 horas. El viraje a crema turbio demuestra probable presencia de Vibrio cholerae, aunque hay frecuentes falsos positivos y se debe confirmar resembrando en Agar TCBS (PPL922) y luego identificando las colonias amarillas con los antisueros ZM05 polivalente y BAA001 (Bengala O:139). Como control positivo puede utilizarse la cepa Vibrio cholerae (CRIOSTRAIN MKTC 514). Para evitar falsos positivos, recordar que a diferencia de las Enterobacterias, Vibrio cholerae es oxidasa positivo, a diferencia de los Coliformes, es lactosa negativo (aunque indol +) y a diferencia de otros Vibrio, no crece con >6% (60 g/l) de ClNa, pudiendo crecer en absoluta ausencia de ClNa. Ciertas cepas de Vibrio cholerae se detectan mejor incubando a aprox. 28°C, temperatura más acorde con su reservorio natural (peces).

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976), Bote estéril 100ml (sólo se incluye si se solicita en el pedido) (VML155). Estufa o incubador 28-35ºC (VRP001 ó VMT051).

CONTENIDO: 40 ó 400 test c.s.p.100 ml  (Tubo Estéril 5 g)

CÓDIGO: FPA906

Para más información sobre MICROKIT® P/A Vibrio cholerae EN POLVO no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

DryPlates® LAC

DryPlates® LAC: DPP019- (caja 60 u) y DPP019+ (caja 1200 u)   DryPlates® para Lactobacilos/Flora acidoláctica

 

MRS es el Agar oficial para recuento de Lactobacilos y demás flora acidoláctica (ISO 9232), donde estos microorganismos crecen con colonias generalmente blancas y redondas.

DPPLAC1LAC3

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO DryPlates® LAC para muestras de 1 ml

A causa de la microaerofilia de estos microorganismos, este tipo de Dryplates® funciona mucho mejor con 2 ml de muestra y dos discos en una misma placa; por eso incluimos 2 bolsas de 60 discos nutritivos cada 60 placas. No olvide después dividir por 2 el recuento obtenido para informar de ufc/ml.

  1. Con unas pinzas, sacar dos discos nutrientes de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Añadir a la base de la placa 2 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con ambos discos nutrientes para volver a cerrar la placa, con cuidado para que los discos nutrientes caigan centrados sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto. Si lo prefiere, puede tomar 2 discos nutrientes con unas pinzas y colocarlos directamente sobre los 2 ml de muestra, previamente dispensados en el centro de la placa). No añada la muestra sobre los discos nutrientes, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en los 2 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias).
  4. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua lleno en la estufa), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (o el tapón naranja incluido como “base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 2-3 días o 30ºC durante 5 días. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda.Leer los resultados buscando sólo las colonias diana: Acidolácticas, colonias blancas opacas sobre el medio+disco claro y traslúcido. No olvide dividir por 2 los resultados obtenidos, para informar del recuento por mililitro. Las DryPlates®-LAC obtienen una recuperación extraordinaria de Flora acidoláctica respecto al medio agarizado en placa clásica MRS (900%) y respecto a los medios de recuento total como el TSA o las CompactDryPlates-TC (300%). No emplee sólo 1 disco, la recuperación de las DryPlates®-LAC baja drásticamente. Además son mucho más rápidas que el medio clásico, ya se entreven a las 24 h y se cuentan perfectamente a las 48h.

 

MODO DE EMPLEO DryPlates® LAC para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre 2 DryPlates® LAC, previamente hidratadas con 2 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y no al revés).
  2. También puede dejar las 2 DryPlates®-LAC, previamente hidratadas con 2 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos/m3 de aire). En estos casos ambientales no hay que dividir por 2 el recuento obtenido, ya que los 2 ml son de agua estéril, no de muestraLAC2

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO DE LAS DryPlates® LAC.

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad

Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (en alimentos y cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas), Levaduras y Mohos, E.coli y demás coliformes, Enterobacterias, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Candida albicans, Enterococos fecales, Clostridium perfringens, Salmonella spp., Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae. Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos para Ud.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos a dos empresas: Laboratorios MICROKIT, S.L. (Madrid) y BC Aplicaciones Analiticas, S.A (Barcelona) tras más de 8 años de ensayos y mejoras en sinergia para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características. Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones superiores al 90% respecto al mismo medio clásico agarizado.

Si desea más información sobre nuestras DryPlates® LAC rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

MEDIO COLICULT-MCC EN POLVO PARA PRESENCIA/AUSENCIA

MICROKIT® P/A COLICULT-MCC CROMOFLUOROGENIC BROTH SELECTIVO-ESPECÍFICO-CÓMODO-ECONÓMICO

El que se ha convertido ya en clásico MICROKIT-COLICULT P/A (DMT999) en pocos meses, a causa de su máxima recuperación de Coliformes y E.coli en 100 ml de agua, de su comodidad de uso y de su bajísimo coste, aún podía ser mejorado, y MICROKIT lo ha conseguido:

P-A3

Efectivamente, la prueba de la fermentación de lactosa con campana Durham proporciona un cierto número de falsos positivos para Coliformes debidos a cepas gasógenas de Pseudomonas y Aeromonas, principalmente, capaces de crecer en este tipo de medios. Sin embargo, las tiras de citocromooxidasa de alta resolución de MICROKIT (KOT050), directamente sumergidas en el clásico COLICULT P/A incubado, viran en unos segundos a azul si se trata de un falso positivo, mientras que no viran si se trata realmente de coliformes, con lo que son una prueba adicional en todo resultado presuntamente positivo. Además, aunque sea la única manipulación adicional que requiere este polvo, la adición de campanas Durham estériles a los 100 ml de agua de muestra no deja de ser un engorro. Por fin, como en cualquier método clásico, los E. coli no fermentadores de lactosa y no fluorescentes con MUG (precisamente el E. coli patógeno O157:H7) no se detectan, siendo de los más controvertidos falsos negativos que existen hoy día.

Mediante MICROKIT-COLICULT CROMOFLUOROGENIC P/A BROTH (MCC)  se elimina este triple problema de falsos positivos (Pseudomonas, Aeromonas…), manipulación (c/Durham) y falsos negativos (E.coli O157):Al incorporar al medio COLICULT clásico sustratos cromogénicos específicos (X-Gal), no es necesario añadir campanas Durham esterilizadas, ya que la detección de coliformes no se lee por formación de gas sino por un clarísimo viraje del medio a azul-turquesa. Ello implica una ventaja adicional: Pseudomonas y Aeromonas no dan lugar a falsos positivos, ya que no viran el medio. Así, los laboratorios cuyas muestras obtengan frecuentes falsos positivos  con COLICULT, se ahorrarían la prueba adicional de la citocromooxidasa de alta resolución.

La detección de E.coli mediante la fluorescencia con MUG es idéntica en el nuevo medio.

Los E.coli no fermentadores de Lactosa y no fluorescentes con MUG (O157:H7) se detectan como coliformes, gracias al sorbitol y el X-Gal, con viraje del medio a azul. Aunque en la naturaleza no sea probable encontrar aguas con E.coli O157 que no vayan acompañados de cepas más normales de E.coli, nadie está a salvo de sabotajes, como ya se han dado en diversas industrias con casos más o menos conocidos (Pseudomonas aeruginosa, Aspergillus fumigatus, Desulfovibrio desulfuricans…), por lo que resulta necesario utilizar un método que también detecte dicha cepa, como es éste.

La incorporación de Tiosulfato Sódico, ya incluido en el medio preparado, ahorra el tratamiento previo de la muestra con el mismo. Los viales de polvo irradiado no lo contienen, por ser altamente higroscópico. Si usa éstos en vez del medio preparado, trate la muestra previamente con Tiosulfato Sódico.

El precio del nuevo medio sigue siendo más competitivo que el de cualquier otro método, y nada requiere menor manipulación que este producto para análisis mínimo de potabilidad microbiológica de aguas. Con 1 g/l el medio funciona siempre mejor; con 0,5 (máxima economía) sólo en aguas poco polutas; con 2 viales, el viraje es mucho más rápido.

La nueva Directiva Comunitaria Europea, por fin, da la mayor relevancia a la ausencia de E.coli en aguas de consumo humano y, secundariamente, a la ausencia de coliformes. Con MCC se detectan ambos parámetros a la vez.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

  1. Añadir 1 vial de 1gramo de MCC COLICULT® a 100 ml de agua de muestra. Dejar embeber unos instantes y agitar para la inmediata disolución (en muestras de agua muy fría, calentar el conjunto a 25-37°C). No calentar por encima de 37°C, ya que no se requiere ni se debe esterilizar. Si se usa el medio deshidratado no estéril, ideal para muchas otras matrices aparte del agua, autoclavar a 121°C durante 15 minutos antes de añadir la muestra.
  2. Incubar a 35-37 (44)°C durante 16-48 horas.
  3. Las muestras cuya agua o cuya superficie haya virado a azul-turquesa contienen coliformes. Las que no viran a azul-turquesa, NO contienen coliformes. Para casos de extrema urgencia, debe saberse que los positivos viran a azul claro en menos horas (más deprisa a mayor concentración de coliformes en la muestra), sobre todo si se añadieron 2 viales de medio (o medio a [2]).
  4. Las muestras que emiten fluorescencia azul celeste cuando se observan en la oscuridad bajo luz U.V.A.de 366 nm (linterna MICROKIT, VMT050) contienen E. coli de forma presuntiva; confirmar añadiendo 1 ml de Indol Kovacs y observando la aparición de un anillo rojo en superficie, que confirma la presencia de E. coli. Las muestras sin tal  fluorescencia no contienen ninguna de las cepas clásicas de E. coli. La fluorescencia es muy evidente y no interfiere si el medio ha virado a azul-turquesa, pero cuidado, se pierde o atenúa tras añadir el Kovacs-Indol.
  5. Las muestras que contienen E. coli de forma confirmativa, pero no contienen coliformes, no son aberrantes, ya que ciertas cepas de E. coli no se pueden considerar coliformes, por definición.
  6. En las muestras azules sin fluorescencia puede haber E.coli O157 (MUG-, Lactosa -, X-Gal+), que se confirma por ser Indol +. MCC es el único método para análisis mínimo de potabilidad donde E.coli O157 no da lugar a sus peligrosos falsos negativos.

PA MCC

PRESENTACIÓN Y REFERENCIA:

Viales pre-pesados para 100 ml (FPA900). Frascos preparados con Tiosulfato Sódico incluido, para añadir directamente 100 ml de muestra de agua (RPL303).  Medio deshidratado NO estéril (DMT900). Linterna U.V.A. 366 nm MICROKIT (VMT050).

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976), Bote estéril 100ml (sólo se incluye si se solicita en el pedido) (VML155), Estufa o incubador 35-37 ºC (VRP001 ó VMT051). Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN E.coli MKTA 25922. Recomendamos asimismo la participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, para validar los procedimientos y los operarios.

Validación: Realizada durante 7 años de intercomparación de 70 laboratorios de toda España en más de 700 muestras duplicadas. Se demuestra comparado con filtración de membrana en el medio oficial (Tergitol Chapman TTC Agar), una sensibilidad del 100% frente al 97,7% del método oficial para coliformes, así como una sensibilidad del 100% para E.coli frente al 95,65% del método oficial. Una especificidad del 100% para coliformes frente al 94,25% del método oficial y del 100% para E.coli frente al 94,57% del método oficial. Y un límite de detección de hasta 3±2 ufc/100 ml frente a 5±2 ufc/100 ml del método oficial.

Para más información sobre nuestras MICROKIT® P/A COLICULT-MCC CROMOFLUOROGENIC BROTH no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

R2 CROMOGENIC AGAR

R2 CROMOGENIC AGAR (A.P.H.A. IMPROVED)

(Pharmacopea medio S, mejorado)

r2 cromog

Recuento total en aguas potables, con máxima recuperación , al continuar las células en un medio tan oligotrófico como la muestra de agua. Recomendado para recuento en aguas cloradas y farmacéuticas. La adición de un cromógeno termoestable permite el contraste de las colonias, rojas, con el color del medio con el de la membrana.

COMPOSICIÓN DEL R2 CROMOGENIC AGAR:

  • Extracto de levadura       0,50 g
  • Extracto de carne            0,50 g
  • Hidrolizado de caseina    0,50 g
  • Dextrosa-Glucosa           0,50 g
  • Almidón soluble              0,50 g
  • Di-K Hidrógeno Fosfato0,30 g
  • Sulfato de Magnesio       0,024 g
  • Piruvato de Sodio           0,30 g
  • Mezcla cromogénica        c.s.
  • Agar-Agar                       15,00 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,2 ± 0,2

 

PREPARACIÓN DEL R2 CROMOGENIC AGAR:

Disolver 19 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada .

Agitar, calentando hasta ebullición, hasta la total homogeneización.

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. No sobrecalentar y enfriar rápidamente para evitar que el medio vire a rosa, lo que haría contrastar peor a las colonias rojas.

 

MANTENER EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.   AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PARA USO EN LABORATORIO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT545

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO R2 CROMOGENIC AGAR:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige.

PREPARADO: Estéril, Blanquecino.

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 72 h a 37°C aproximadamente (o bien 5 días a Tª ambiente 21-28°C aproximadamente):

Escherichia coliMKTA 25922, Correcto, colonias rojas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 132-161%

Enterococcus faecalisMKTA 29212, Correcto, colonias rojas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 166-177 %

Pseudomonas aeruginosaMKTA 9027, Correcto, colonias rojas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 85-143%

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Correcto, colonias rojas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 111-133%

Aeromonas hydrophilaMKTA 49141, Correcto, colonias rojas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >100%.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

 

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, FRASCOS PREPARADOS, PLAQUITAS HERMETICAS MF.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1 ml en profundidad o mejor 0,1 ml en superficie, o aún mejor una membrana en superficie por la que se hayan filtrado 1-250 ml de muestra. Duplicar la muestra. Incubar una placa 5-7 días a 22 ºC aprox. para mesófilos y la otra 3 días a 30-37 ºC aprox. para termófilos. Contar todas las colonias, que serán rojas y muchas más que en medios normales como PCA, TSA, Nutrient Agar, LPT Neutralizing Agar… (Sanchís, 9/99, Interlaboratorio sobre la recuperación de medios nutritivos para recuento total en aguas, XVII Congreso S.E.M.). La flora termófila se asocia a procedencia humana. La mesófila al proceso de depuración. Este medio no es adecuado para recuento en alimentos, superficies o aire, sólo es mucho más sensible en aguas puras.

 

Si desea más información sobre nuestros MEDIO R2 CROMOGENIC AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

MICROKIT® P/A-ENTEROCULT

KIT  MICROKIT® P/A-ENTEROCULT SELECTIVO-SPECÍFICO-CÓMODO-ECONÓMICO.

Un agua potable, desde un punto de vista más completo que el del análisis mínimo, no sólo está libre de coliformes en 100 ml demuestra; también están ausentes en ella los estreptococos fecales, indicadores de contaminación  fecal, más resistentes que los coliformes y a menudo más indicadores de contaminación por ganado que de contaminación humana. La nueva Directiva Comunitaria Europea da la máxima importancia a la ausencia de Enterococos en aguas de consumo humano.

Gracias al polvo Enterocult de MICROKIT, diseñado a partir de medio base KAA Broth, el análisis de ausencia de estreptococos fecales en aguas potables es ahora posible de la forma más cómoda y fiable conocida. La incorporación de Tiosulfato Sódico, ya incluido en el medio preparado de MICROKIT® P/A-ENTEROCULT , ahorra el tratamiento previo de la muestra con el mismo. Los viales de polvo irradiado no lo contienen, por ser altamente higroscópico. Si usa éstos en vez del medio preparado, trate la muestra previamente con Tiosulfato Sódico.

Enterocult

Añada a 100 ml de agua de muestra, 1 vial de 1g del polvo estéril ENTEROCULT. Cierre el bote y trabaje en condiciones asépticas para no contaminarlo con estreptococos fecales.

Agitar a temperatura ambiente hasta la completa disolución. Si fuese necesario, en muestras de agua muy fría, calentar el conjunto a 25-37°C. No calentar por encima de 37°C, ya que no se requiere ni se debe esterilizar. El color del agua debe ser ahora ámbar y debe emitir una fluorescencia natural, que queda más patente bajo luz de 366 nm y en la superficie.

Incubar a 35-37°C (41°C) durante 16-24-(48) horas.

El ennegrecimiento del agua y la pérdida de fluorescencia son prueba de presencia de estreptococos fecales, mientras que la falta de ennegrecimiento y el mantenimiento de su fluorescencia en 24 horas demuestran su ausencia.

Presentación:. Linterna U.V.A. 366 nm MICROKIT (VMT050). Viales pre-pesados para 100 ml de agua (FPA901). Frascos preparados con Tiosulfato Sódico incluido, para añadir directamente 100 ml de muestra de agua (RPL301).

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976), Bote estéril 100ml (sólo se incluye si se solicita en el pedido) (VML155), Estufa o incubador 35-37 ºC (VRP001 ó VMT051). Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN Enterococcus faecalis MKTA 29212. Recomendamos asimismo la participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, para validar los procedimientos y los operarios.

Validación:

Realizada durante 7 años de intercomparación de 70 laboratorios de toda España en más de 700 muestras duplicadas. Se demuestra comparado con filtración de membrana en el medio oficial para enterococos fecales (Slanetz-Bartley Agar + Bilis Esculina Azida Agar), una sensibilidad del 100% frente al 95,6%  del método oficial. Una especificidad del 100%  frente al 61,0% del método oficial. Y un límite de detección coincidente en ambos métodos

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A-ENTEROCULT no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16

 

DryPlates® EC

 

DryPlates® EC DryPlates® para E.coli y demás coliformes

DryPlates® para E.coli son placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.

dpp-ec

MUGPLUS es el Agar cromogénico oficial (BOE 31/03/2009), donde E.coli crece con colonias azul oscuro y los demás coliformes con colonias rosas. Otros microorganismos pueden crecer, pero en tal caso lo hacen con colonias de otros colores (crema, verde, turquesa…). El medio es válido para muestras de aguas, alimentos, cosméticos, ambientes…

 ¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

 MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de DryPlates® EC  de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Añadir a la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para  que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.

Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias).

  1. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (basta con dejar un vaso de agua lleno en la estufa), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue nada de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale una placa vacía para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 18h.
  2. Leer los resultados buscando sólo las colonias diana: E.coli azules y resto de coliformes rosas. Recuerde contar ambos tipos de colonias para el recuento de coliformes (ya que E.coli es otro coliforme). Las DryPlates® EC obtienen un 129-157% de recuperación de coliformes respecto al medio cromogénico agarizado en placa clásica y ¡hasta un 400%! de E.coli.

 

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Prehidrate el disco nutriente en la placa con 1 ml de agua estéril (o de la misma agua de muestra). Recuerde, siempre el disco sobre el agua y no al revés.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 µm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® EC.
  4. Si pre-hidrató el disco con 1 ml  agua de muestra y filtró por ejemplo 100 ml, recuerde que su recuento será en 101 ml.

  MODO DE EMPLEO para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre la DryPlates® EC, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y no al revés).
  2. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

 

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).

 

El aspecto de las colonias de E.coli y demás coliformes  en DryPlates®-EC es idéntico al de las colonias en medios agarizados

dry plate EC3

 

Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (en aguas, en alimentos y cosméticos, en aguas oligotróficas), Levaduras y Mohos, Bacillus cereus, Candida albicans, Enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa y, en fase de diseño: Burkholderia cepacia, Staphylococcus aureus, Flora acidófila, Salmonella spp, Listeria monocytogenes, Enterococos fecales, Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos a dos empresas: Laboratorios MICROKIT, S.L. (Madrid) y BC Aplicaciones Analiticas, S.A (Barcelona) tras más de 8 años de ensayos y mejoras en sinergia para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características. Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140:2003

Para más información sobre nuestras DryPlates®EC no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16