EUGON LT100 AGAR

EUGON LT100 AGAR

Agar de uso general para muestras con propiedades antimicrobianas, según las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de aerobios), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans).lptagar

 COMPOSICIÓN

  • Triptona                        15,0 g
  • Peptona de soja             5,0 g
  • L-Cystina                          0,7 g
  • Cloruro Sódico                4,0 g
  • Sulfito sódico                   0,2 g
  • Glucosa                             5,5 g
  • Lecitina de huevo            1,0 g
  • Octoxynol 9                      1,0 g
  • Agar-agar                        15,0 g

(Fórmula por litro)    pH final: 7,0 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 47,4 gramos en 1 litro de agua  bidestilada que contenga 5 ml de polisorbato Tween 80 (SDA071). Agitar  calentando hasta ebullición.  Autoclavar a 121° C durante 15 minutos. El color final del medio es crema. No sobrecalentar. Agitar hasta su completa solidificación para evitar grumos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT205

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema

PREPARADO: Estéril, Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48-72 h a 37°C aproximadamente, o bien 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 98-220 %. Si se añadió TTC, colonias blancas y medio naranja alrededor.
  • Bacillus subtillis MKTA 6633, Excelente Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >108-276 %. Si se añadió TTC, colonias anaranjadas o doradas, medio lila alrededor que más tarde vira a naranja.
  • E.coli MKTA 25922, Excelente, Colonia amarilla, Viraje amarillo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 63-127 %. Si se añadió TTC, colonias crema o rojas, medio naranja alrededor.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, Colonia amarilla, Viraje amarillo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 35-122 %. Si se añadió TTC, colonias rojas o doradas, medio lila alrededor.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 23-103 %. Si se añadió TTC, colonias anaranjadas, medio naranja alrededor.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente, colonias blancas. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento 108 %. Si se añadió TTC, colonias blancas o rosadas.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 SIEMBRA E INTERPRETACIÓN 

  1. Para aislar microorganismos procedentes de productos cosméticos inhibitorios: Repartir 0,1-0,5 ml del caldo Eugon LT100 Neutralizing Broth (MICROKIT ref. DMT204) enriquecido en la superficie de una placa. Esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 48-72 horas. Observar si hay aparición de cualquier colonia e identificarla.
  2. Para contar aerobios procedentes de productos cosméticos inhibitorios: Sembrar en masa 1 ml de cada dilución decimal realizada en el Neutralizing Diluent SCDLP20 (MICROKIT ref. DMT203). Incubar cada placa invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 72 ± 6 horas.

NOTA: Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Agar (DMT066, DMT227, RPL074, TPL0200) y nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporcionan, aunque nos veamos obligados a fabricar también estos medios Eugon con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán.

Si desea más información sobre nuestro MEDIO EUGON LT100 AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Mac CONKEY BROTH PURPLE

Mac CONKEY BROTH PURPLE

PHARMACOPEA MEDIO G
Presunción y enriquecimiento de COLIFORMES (ICMSF,
FDA, APHA, OMS) (ISO 9308-2:1990)

COMPOSICIÓN

De izquierda a derecha: Mac Conkey Broth  Purple sin inocular, Salmonella (no amarillo) y E. coli (amarillo).

De izquierda a derecha: Mac Conkey Broth Purple sin inocular, Salmonella (no amarillo) y E. coli (amarillo).

Digerido pancreático gelatina 20,00 g
Lactosa 10,00 g
Sales biliares 5,00 g
Púrpura de bromocresol 0,01 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,3 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 35 g. en 1 litro de agua destilada.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT076

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige
PREPARADO: Estéril, violeta

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Excelente, Acido positivo, amarillo, Con gas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, Acido positivo, Con gas.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Bueno, Acido negativo, Sin gas.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

PRESENTACIÓN: TUBOS 9 ml CON CAMPANA, FRASCOS, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para coliformes en agua y alimentos. Medio de enriquecimiento para medicamentos. La fermentación de la lactosa con acidificación (viraje del púrpura al amarillo) y la producción de gas (burbuja en la campana Durham) indican presencia de coliformes.

SIEMBRA

Para enumerar, inocular tubos con campana de acuerdo con la técnica del Número Más Probable o bien frascos para enriquecer. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 48 horas.

INTERPRETACION

Viraje y gas: Presencia de coliformes y presencia presuntiva de E. coli. Viraje sin gas: Coliformes con baja probabilidad de E. coli. Ni viraje ni gas: Ausencia de coliformes y de E. coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY BROTH PURPLE, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES

LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES

Líquido de lavado para MF acorde con USP y con Farmacopea Europea.

COMPOSICIÓN

Peptona de carne 5,0 g
Extracto de carne 3,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6.9 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 8 g de medio en 1 litro de agua bidestilada que contenga 1 g de polisorbato 80. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es amarillo claro.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT189

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo beige
PREPARADO: Crema-amarillo
CONTROL DE CRECIMIENTO (Tras su uso y colocación de la membrana en TSA, 24-48 h a 37°C aproximadamente):

  • E. coli MKTA 25922 (Crecimiento correcto)
  • Bacillu. subtilis MKTA 6633 (Crecimiento correcto)
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P (Crecimiento correcto)
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (Crecimiento correcto)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Después de filtrar la muestra, enjuagar el filtro tres veces con 100 ml de líquido de lavado de membranas filtrantes. Si la muestra contiene muchos azúcares o grasas, puede duplicarse la concentración de polisorbato (2 g/l).

Ver tambien líquidos de enjuague de membranas A, D y K según USP en frascos estériles 100 ml y frascotes estériles 225 ml

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA LITSKY)

ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA‑LITSKY). Confirmación de Estreptococos fecales a partir de caldo Azide Dextrose Rothe.

ethyl broth

COMPOSICIÓN 

  • Polipeptona                              20,0 g
  • Glucosa                                      5,0 g
  • Cloruro sódico                          5,0 g
  • Fosfato monopotásico            2,7 g
  • Fosfato dipotásico                    2,7 g
  • Azida sódica                               0,4 g

(Fórmula por litro)          pH final: 7,0 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 35,7 g de medio en 1 litro de agua destilada. Repartir en tubos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.  AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: La Azida Sódica es tóxica (y explosiva en contacto con plomo). Evitar el contacto con la piel y las mucosas (y no desechar por las cañerías).

DESHIDRATADO CODIGO: DMT053

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige  PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 37°C aproximadamente:

  • Escherichia coli MKTA 25922, Negativo.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Negativo.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Correcto, depósito violáceo-anaranjado.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Negativo.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para la determinación de los enterococos en el agua, que son índice de contaminación fecal. La Azida Sódica hace el medio selectivo. El medio confirma la presencia de estreptococos fecales procedentes del Caldo ROTHE (Azide Dextrose Broth).

 SIEMBRA

 De cada tubo positivo de Caldo Rothe se transfiere 1 ml a un tubo de Caldo Litsky y se incuba 48 horas a 37 ºC aproximadamente. Para obtener recuentos, seguir la técnica NMP (9 tubos).

 INTERPRETACIÓN

Se consideran positivos los tubos que presentan en el fondo un precipitado de color púrpura- lila o naranja. Los Enterococos (E. faecalis, E. faecium) y los Estreptococos Fecales no Enterococos (S.bovis, S.equinus) son indicadores de contaminación fecal. Si en la muestra no hay coliformes fecales, es que la contaminación fué realizada semanas antes

 

Si desea más información sobre nuestros MEDIO  ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA LITSKY)  rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

Mac CONKEY AGAR

Mac CONKEY AGAR

PHARMACOPEA MEDIO H
Aislamiento y detección de Coliformes (USP, APHA, FDA, ISO 21150 cosméticos)

COMPOSICIÓN

Serratia marcescens (a las 10), E.coli (a las 12, a las 2 y a las  6).  Grupo KES (a las 4 y a las 8).

Serratia marcescens (a las 10), E.coli (a las 12, a las 2 y a las 6). Grupo KES (a las 4 y a las 8).

Peptona pancreática de gelatina 17,0 g
Triptona 1,5 g
Peptona de carne 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Sales biliares 1,5 g
Cloruro sódico 5,0 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar agar 13,5 g

(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 50 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar lentamente hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos ó frascos.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT073

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo, púrpura
PREPARADO: Estéril, Púrpura
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Excelente , Colonias rojas.
  • Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Correcto, colonia roja con precipitado.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Excelente, Colonias incoloras. Con respecto a TSA estandarizado, recuento 100%.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Bueno, colonias incoloras
  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, Colonias rojas con precipitado. Con respecto a TSA estandarizado, recuento 95%.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 y 250 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
NOTA: Medio selectivo y diferencial para el aislamiento de las enterobacterias y para la diferenciación entre los coliformes y las enterobacterias patógenas que no fermentan la lactosa con producción de gas (APHA, FDA, USP XXI). Su selectividad se debe a la acción del Cristal Violeta y de las sales biliares.

SIEMBRA

En estría sobre la placa preparada o el tubo de agar inclinado. Con los tubos 20 ml y frascos 100 ml se preparan placas por fusión del medio. Las Placas de Contacto se aplican sobre la superficie problema, un instante y sin mover, o bien se introducen en un aparato para control del aire. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 16 24 horas.

INTERPRETACIÓN

Los coliformes crecen con colonias rojas rodeadas por un halo de precipitación de las sales biliares, por acidificación. Las otras enterobacterias crecen con colonias incoloras. Proteus no invade la placa. E. coli forma colonias rojo violáceas con halo. Enterobacter aerogenes crece menor que E.coli y sin halo. Salmonella crece incolora.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Puntos críticos en la detección de Legionella pneumophila: GVPC y BCYE Broth

Puntos críticos en la detección de Legionella pneumophila: GVPC y BCYE Broth

La detección y enumeración de Legionella spp. y de Legionella pneumophila según Norma ISO 11731, tiene varios puntos críticos que la convierten en un protocolo problemático, que acaba en su no-detección por parte de numerosos laboratorios (sensibilidad media del 41,61% según los servicios intercomparativos SEILAGUA®), o al menos en la obtención de recuentos cuyo límite inferior de cuantificación es a menudo superior a nada menos que 200-800 ufc/litro, y en algunos laboratorios no acreditados, de hasta 105 ufc/litro. Aunque hemos plasmado estos puntos críticos en nuestro protocolo de detección y recuento de L.pneumophila en aguas (ref: PNT-AG-007), hemos decidido compartir con todos los laboratorios que lo deseen dichos problemas de detección:

El primero de dichos puntos críticos es la no-revitalización de las células de Legionella que, sobre todo tras los shocks de hipercloración y tratamientos preventivos actuales (motivados por los numerosos brotes de años anteriores), suelen encontrarse en estado subletal. Se busca Legionella en agua para evitar su proliferación en el aire (donde se convierte en patógena por respiración), cuando su hábitat real no es el aire ni siquiera es el agua: es el biofilm, de modo que las formas planctónicas son sólo formas de dispersión de la especie.

Por ello hace ya tiempo que MICROKIT diseñó una modificación del Agar GVPC en forma de caldo revitalizante selectivo y concentrado para añadir a 1 litro de agua de refrigeración, en kit de tubos para añadir a 1 l de agua con torundas de rascado de biofilm (ref: RPL330) o bien en tubos sin las torundas para añadir a 1 l de agua (ref: TPL016). Este medio resulta costoso por su elevada concentración de antibióticos, dado que se añade a 1 l de agua. Por ello MICROKIT ha rediseñado el Agar BCYE en forma de caldo revitalizante no selectivo y concentrado (ref: TPL017) para añadir a 1 litro de agua presuntamente potable o de baja carga microbiana, ya que la escasa flora acompañante en ellas permite revitalizar las Legionella sin necesidad de agentes selectivos.

Tanto el tubo de caldo GVPC como el tubo de caldo BCYE se emplean de la misma manera:

1-Añadir el contenido del tubo (heterogéneo por el carbón granulado que absorbe los residuos de desinfectantes, así como los metabolitos generados) recién agitado a 1 litro de muestra de agua, volver a agitar y dejar actuar durante 18-24 horas a temperatura ambiente (18-25°C). No incubar a 35-37 °C, o la posible población de Legionella se multiplicaría, impidiendo realizar posteriores recuentos de la flora original. El retraso de 1 día en el análisis se compensa holgadamente con la rapidez de crecimiento posterior en placa de las Legionella bien revitalizadas.

2-Verter el agua con cuidado de que no caiga el carbón, sobre los embudos de filtración y realizar el análisis siguiendo el protocolo habitual.

El uso del caldo revitalizante aumenta la sensibilidad en la detección de Legionella ¡hasta un 85%!, como se demuestra en los resultados de los servicios intercomparativos SEILAGUA®.
El segundo de los puntos críticos del protocolo habitual de Legionella es que se filtra 1 litro completo en una sola membrana, lo cual genera desconfianza sobre si la membrana habrá resistido o se habrá fisurado sin percibirse, pasando las células al líquido eluyente que no se analiza, y proporcionando por tanto resultados falsamente negativos o bajos. Y aunque no fuera así, el efecto estrés producido en las células que hayan quedado retenidas desde el principio en el filtro, tras un litro filtrado, degenera también en una importante merma de la sensibilidad. La solución es filtrar 4 tandas de 250 ml en sendas membranas. Aunque esto aumenta el trabajo y la cantidad de membranas y placas necesarias, asegura una muy superior recuperación, como demuestran los participantes de los servicios intercomparativos SEILAGUA® que aplican este consejo.

Para paliar un poco este aumento del gasto y ahorrar placas, podemos añadir dos membranas por placa de 90 mm si nuestro sistema de filtración no ocupa toda la superficie de la membrana y podemos así colocar las dos membranas solapadas sin que las dos zonas filtradas queden superpuestas. De este modo sólo necesitamos dos placas por litro de agua.

El tercer punto crítico que debemos controlar (y nos debemos ahorrar en aguas con poca flora acompañante, como son las aguas potables) es el shock ácido que elimina la flora competitiva pero también puede eliminar buena parte la viabilidad de la Legionella, sobre todo si se prolonga algunos segundos más de lo necesario.

El cuarto punto crítico es el medio de cultivo GVPC Agar, que resulta tan selectivo para especies distintas a la Legionella como incluso para la Legionella. De hecho, utilizando cepas cuantitativas certificadas (ref: MKTN12821), podemos verificar que los recuentos de Legionella en BCYE, se dividen por 10 (bajan un logaritmo) con las mismas cepas si empleamos GVPC. Por ello proponemos en aguas de baja carga microbiana, que de las dos placas empleadas por litro, siguiendo el consejo del punto 2, una sea de GVPC pero la otra sea de BCYE, que nos alertará si la selectividad del primero ha sido excesiva. Por otra parte no todas las placas preparadas de medios para Legionella funcionan correctamente, de hecho es muy difícil encontrar el truco por el cual un medio de la composición de la ISO 11731 se pueda convertir en un buen medio. Por ello recomendamos el uso de nuestras nuevas placas de GVPC Agar (ref: PPLS30) y de BCYE Agar (ref: PPLS31), de máxima recuperación, prescindiendo de medios deshidratados y de placas baratas. En cuanto al tercer medio donde no crece Legionella, nos parece un despilfarro utilizar BCYE-Cys o incluso Agar sangre, cuando para su no-crecimiento se puede usar el mismo Nutrient Agar que en recuento de aerobios, el YEA también llamado PCA-Water (ref: PPL901 en plaquita hermética de larga caducidad, TPL060Z en tubos para fundir y hacerse la placa por siembra en masa, RPL106 en frascos para fundir y hacerse 5-7 placas, DMT152 en polvo deshidratado).

El quinto punto crítico es la confirmación de las colonias por métodos serológicos, ya que la inmunofluorescencia ya nadie la usa y se ha puesto de moda utilizar látex, aunque todos sabemos que es la técnica inmunológica menos robusta y que más problemas de sensibilidad y de detección proporciona. Gracias a los avances desarrollados por empresas como la nuestra, en este caso de nuestros compatriotas Vircell, podemos ofrecer al fin una alternativa rápida, de muy bajo coste y máximo rendimiento: los inmunocromatogramas o rapidsticks Virapid Legionella (ref: VR002).

Si desea más información sobre nuestros MEDIOS, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

ESTY BROTH

ESTY  BROTH

Agar selectivo para la enumeración de Streptococcus thermophilus en yogurt (IDF).

COMPOSICIÓN

  • Triptona                                            5,0 g
  • Peptona de soja                              5,0 g
  • Extracto de carne de vacuno        5,0 g
  • Extracto de levadura                      2,5 g
  • Glicerofosfato disódico                19,0 g
  • Acido ascórbico                               0,5 g
  • Sulfato Magnésico                        0,25 g

(Fórmula por litro)     pH final: 6,9 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 37 gramos en 900 ml de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición, para la completa disolución. Ajustar el volumen final a 1 litro y volver a agitar. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 40-45 °C, añadir 50 ml de una solución estéril de lactosa al 10%, mezclar bien y verter en placas o tubos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT347

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, crema          PREPARADO: Estéril, crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 horas a 35 °C aproximadamente:

  • Streptococcus thermophilus MKTA 14486, Excelente.
  • Lactobacillus bulgaricus MKTA 11842, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 NOTA:

Medio recomendado para el crecimiento de cocos lácticos, que no crecen bien en otros medios por acidificarlos en exceso; este medio tiene una gran capacidad para tamponar el ácido producido por la fermentación de la lactosa, gracias al glicerofosfato disódico. El ácido ascórbico promueve el crecimiento de los estreptococos lácticos. Por eso se recomienda para el mantenimiento de los starters que producen ácidos. El glicerofosfato inhibe además el desarrollo de los Lactobacillus bulgaricus.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

 Inocular e incubar a 35°C aproximadamente, durante 24-48 horas.

 

Si desea más información sobre nuestros MEDIOS ESTY BROTH, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Mac CONKEY AGAR MUG

Mac CONKEY AGAR MUG

Enumeración de coliformes y E.coli en la primera siembra.

COMPOSICIÓN

Escherichia coli (fluorescente) entre otros coliformes (no fluorescentes).

Escherichia coli (fluorescente) entre otros coliformes (no fluorescentes).

Peptona de caseina 17,000 g
Peptona de carne 3,000 g
Cloruro sódico 5,000 g
Lactosa 10,000 g
Sales biliares 1,500 g
Rojo neutro 0,030 g
Cristal violeta 0,001 g
MUG 0,100 g
Agar agar 13,500 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,2

Mac Conkey Agar MUG con E. coli fluorescente (curiosamente rosa en vez de azul)  bajo luz U.V. 366 nm.

Mac Conkey Agar MUG con E. coli fluorescente (curiosamente rosa en vez de azul) bajo luz U.V. 366 nm.

PREPARACIÓN

Disolver 50 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar agitando hasta ebullición Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

Nueva imagen (4)

DESHIDRATADO CODIGO: DMT074

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, púrpura. PREPARADO: Estéril, púrpura

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 h a 37°C aproximadamente:

  • Salmonella abony MKTN 6017, Colonia Incolora sin zona fluorescente.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Negativo.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Correcto, colonia incolora sin zona fluorescente.
  • Escherichia coli MKTA 25922, Correcto, Colonia violeta oscuro con zona fluorescente.
  • Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Correcto, colonia violeta oscura sin zona fluorescente.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS 20 ml, FRASCOS PREPARADOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO, DESINFECTEST-EC.

NOTA: El compuesto fluorogénico 4 Metil Umbeliferil Beta D Glucurónido (MUG), añadido al Mac Conkey Agar, permite la detección directa en placa de E. coli. La enzima Beta Glucuronidasa, presente en el 97% de las cepas de E.coli, hidroliza el MUG presente en el medio, liberando el compuesto 4 Umbeliferona, fuertemente fluorescente cuando se observa en la oscuridad bajo luz de 366 nm (Linterna MICROKIT). La mayoría de cepas enteropatogénicas de E.coli son Beta Glucuronidasa +. Miembros del género Citrobacter y del grupo KES (Klebsiella, Enterobacter, Serratia) pueden dar falsos positivos con MUG: Confirmar con la prueba del Indol, que sólo es positiva para E. coli.

SIEMBRA

Preparar placas fundiendo tubos o frascos y sembrar en estría o en masa. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 18 24 horas. Si se prolonga la incubación no se distinguirán las colonias fluorescentes de las no fluorescentes.

INTERPRETACIÓN

Enterobacterias: Colonias incoloras. Coliformes: Colonias rojas. E. coli: Fluorescencia azul bajo luz U.V. 366 nm (linterna MICROKIT), en la oscuridad. Confirmar con la prueba del indol.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros MEDIO Mac CONKEY AGAR  MUG , rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LEGIONELLA BCYE AGAR

LEGIONELLA BCYE AGAR
BCYE-Cys, (GVPC-BASE)

Aislamiento selectivo de Legionella por  el método MF o por siembra directa  (ISO 11731:1998, ISO 11731-2:2004)

COMPOSICIÓN

Nueva imagen (9)

 

Medio BASE (BCYE-Cys):

  • Carbón activado 2,0 g
  • Extracto de levadura 10,0 g
  • Agar Agar 22,0 g
  • Alfa-ketoglutarato (sal mono-K) * 1,0 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 6,9 ± 0,1

GVPC Suplemento Selectivo+Nutritivo estéril en solución 200 ml SBL604
Agite contundentemente y añada en asepsia 40 ml a 500 ml de medio enfriado a 50 ºC (o bien 8 ml a 100 ml de medio). Puede contener precipitados por su elevada concentración pero desaparecen al diluir en el medio BCYE base. c.s.p. 2’5 l de medio. Contiene las proporciones precisas, según ISO 11731, de: Tampón ACES, -Cetoglutarato, KOH, Clorhidrato de L-Cisteina, Pirofosfato férrico, Vancomicina, Cicloheximida, Polimixina y Glicina. Contiene elementos tóxicos, evitar el contacto con la piel.

NOTA 1: La ref. SBL605 es idéntica al suplemento GVPC pero sin la Cisteína.

NOTA 2: EL caldo GVPC para preenriquecimiento revitalizador, es idéntico al Agar GVPC pero sin Agar-Agar y con el carbón granulado (ver kit P/A Legionella en tubos preparados, ref.RPL330). Ideal para usar antes de la ISO 11731 y encontrar de forma mucho más sensible y exacta la Legionella.

PREPARACIÓN (conversión del medio deshidratado en medio preparado)

Disolver 17 gramos de medio en 500 ml de agua bidestilada. Calentar hasta hervir para la total disolución. Autoclavar a 121 ºC, 15 minutos. El color final del medio es negro. Enfriar a 45-50 ºC y, para el medio selectivo GVPC, añadir asépticamente 40 ml de Legionella Supplement-200 ml (SBL604, tampón ACES/KOH; nutritivo con -ketoglutarato, clorhidrato de L-cisteina y pirofosfato férrico; y selectivo, con Vancomicina, Polimixina, Cicloheximida y Glicina) ; para el medio BCYE-Cys, añadir 40 ml de Legionella-Cys Supplement-200 ml (SBL605, tampón ACES/KOH, -ketoglutarato y pirofosfato férrico); y para el medio BCYE, no son imprescindibles los antibióticos. Mezclar muy bien y verter 20 ml/placa cuando el medio esté a punto de solidificar, para que la distribución del carbón activo sea lo más homogénea posible. No sobrecalentar o el agar se volverá demasiado blando: Es posible que sea necesario añadir aún más Agar-agar (BCB006) para minimizar la friabilidad del agar, si se va a sembrar con asa (aceptado en ISO 11731).

PARA USO EXCLUSIVO
EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO
EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT007

Nueva imagen
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio,
tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, Negro
PREPARADO: Estéril, Negro.

CONTROL DE CRECIMIENTO 2 semanas a 37°C aproximadamente:

  • Legionella pneumophila MKTN 12821 serogrupo1, Correcto, colonias gris-azuladas, cristalinas, mucosas, en 2-15 días, en medio suplementado BCYE+GVPC. No crece en medio BCYE base, sin suplemento nutritivo de hierro y cisteína. En el medio BCYE con suplemento nutritivo pero sin antibióticos, crece aproximadamente el doble de población que en el GVPC. Con respecto a PCA estandarizado y suplementado,* recuento 126 %, pero de forma selectiva.
  • Legionella pneumophila serogrupo 2-15, MKTLeg-2, Idem.
  • Escherichia coli, MKTA 25922 parcialmente inhibido. Con respecto a PCA estandarizado y suplementado,* recuento 27 %.
  • Micrococcus luteus MKTA 9341, inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO (BCYE-BASE) Y SUPL. GVPC, KITS P/A caldo revitalizante, PLAQUIS HERMÉTICAS MF GVPC, FRASCOS PREPARADOS 100 ml (BCYE-BASE) + SUPL. GVPC.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACION DE RESULTADOS

Medio selectivo GVPC: Inocular una membrana de filtración de 0’22 µm (VAC022, no usar de 0,45 µm), o mejor 0´1 ml de un extracto del fondo del tubo tras la centrifugación a 2500 r.p.m., 20′ de una muestra rascada, o bien 0’1 ml del fondo del caldo de enriquecimiento concentrado (RPL330) sobre una placa. O aplicar una placa de contacto sobre la superficie, o bien introducirla en un aparato de control de aire. Preincubar estrictamente 30 minutos a 50 ºC para eliminar la flora competitiva acompañante. Incubar a 35 ºC aproximadamente, en atmósfera húmeda de 2 a 14 días. Las colonias de Legionella pneumophila son blanco-azuladas, brillantes, mucosas, de 1-2 mm Ø, circulares, lisas, algo elevadas y con los bordes enteros, fluorescentes en la oscuridad bajo luz UVA (linterna MICROKIT). Subcultivar 3 colonias en BCYE (sin antibióticos) y en BCYE-Cys, al menos 2 días a 36 ± 1°C. Legionella crece en BCYE sin antibióticos (y en GVPC), pero no crece en BCYE-Cys (ni en medios generales tipo agar sangre, PCA, TSA, YEA, Nutrient Agar…). Las colonias deben confirmarse con oxidasa positivo, a menudo lento (KOT050), catalasa positiva (KMT299) y serotipado (MICROKIT-LEGIONELLA-VIRAPID VR002, QUE PUEDE USARSE DIRECTAMENTE EN EL PRIMER AISLAMEINTO DE GVPC Y AHORRARSE ASÍ EL TIEMPO Y COSTE DE LAS OTRAS PLACAS DE BCYE y BCYE-Cys). Contar sólo la placa de GVPC con más colonias de Legionella pneumophila. Si no se encuentra, expresar los resultados como “no detectada”, ya que a veces está presente y no crece. Peligro, microorganismos de alto riesgo para inmunodeprimidos, por inhalación de aerosoles (pero no llega a ser de Clase III).

Nueva imagen

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan multiplicado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura. 

Si desea más información sobre nuestros MEDIO LEGIONELLA BCYE AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

ESTY AGAR

ESTY  AGAR

Agar selectivo para la enumeración de Streptococcus thermophilus en yogurt (IDF).

COMPOSICIÓN

  • Triptona                                            5,0 g
  • Peptona de soja                              5,0 g
  • Extracto de carne de vacuno        5,0 g
  • Extracto de levadura                      2,5 g
  • Glicerofosfato disódico                19,0 g
  • Acido ascórbico                               0,5 g
  • Sulfato Magnésico                        0,25 g
  • Agar-Agar                                      11,0 g

 

(Fórmula por litro)     pH final: 6,9 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 48 gramos en 900 ml de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición, para la completa disolución. Ajustar el volumen final a 1 litro y volver a agitar. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 40-45 °C, añadir 50 ml de una solución estéril de lactosa al 10%, mezclar bien y verter en placas o tubos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT348

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque

no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, crema          PREPARADO: Estéril, crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 horas a 35 °C aproximadamente:

  • Streptococcus thermophilus MKTA 14486, Excelente.
  • Lactobacillus bulgaricus MKTA 11842, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA:

 

Medio recomendado para el crecimiento de cocos lácticos, que no crecen bien en otros medios por acidificarlos en exceso; este medio tampona el ácido producido por la fermentación de la lactosa y el ácido ascórbico promueve el crecimiento de los estreptococos lácticos. El glicerofosfato regula el pH e inhibe el desarrollo de los Lactobacillus bulgaricus.

 

 

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

 Sembrar en masa para obtener recuentos y en estría para simples aislamientos. Incubar a 35°C aproximadamente, durante 24-48 horas.

Si desea más información sobre nuestros MEDIOS ESTY AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16