Quanti-P/A Clostricult

Quanti-P/A Clostricult

Recuento de Clostridium perfringens y/o de Clostridios sulfito-reductores en 1 g, 50 ml, 100 ml ó 250 ml de muestra

Quanti-P/A-Clostricult-TSC para detección y recuento fiables de Clostridium perfringens en 100 ml de muestra de aguas potables o en 1 gramo/ml de muestra de alimentos. Ref: QPA-CP (caja  20 u)

Quanti-P/A-Clostricult-SPS para detección y recuento fiables de Clostridium sulfito-reductores en 1 gramo/ml de muestra de alimentos/cosméticos o en 50 ml de muestra de aguas envasadas. Ref: QPA-CSR (caja  40 u)

Clostridium perfringens es un anaerobio estricto que por el método destructivo de filtración de membrana, aunque sea el método oficial, ve reducida su concentración a niveles inaceptables (baja al 10% e incluso al 1% respecto al valor inóculo, cuando debería recuperarse al menos un 50-95 % del valor inóculo) y además es incapaz de ofrecer una sensibilidad adecuada (el 49% de las aguas con este microorganismo, casi la mitad,  dan falso negativo con dicho sistema, cuando deberían dar como máximo un 5% de falsos negativos; y no sólo con el medio de la Directiva 2003 de aguas de consumo, el Agar m-CP, también con el medio de la Nueva Directiva 2015 de aguas de consumo, el Agar TSC).

Por otra parte el sistema DryPlates para recuento de microorganismos, por inclusión en masa de 1 ml de muestra, sin necesidad de calentar/enfriar agares, no puede emplearse en anaerobios estrictos, porque la fina capa de medio los oxigena demasiado. Desde la invención de las DryPlates en 2014, MICROKIT ha estado intentando encontrar el método idóneo para hacer recuentos de  Clostridium perfringens y de Clostridium sulfito-Reductores en 1 ml de muestra de alimento o cosmético, en 50 ml de aguas envasadas y en 100 ml de aguas de consumo humano. Y tras 3 años, en Junio de 2017 por fin lo ha conseguido! Damos la bienvenida al futuro a los pioneros, con criterio propio, que no se dejan cegar por la ortodoxia normativa! Sin duda pasarán años hasta que este nuevo método sea el oficial, pero de ninguna manera eso significa que no deba emplearlo desde ya y adelantarse al futuro normativo, que siempre es tan lento. La fiabilidad de resultados es lo más importante. Y actualmente, esta fiabilidad está gravemente comprometida en los recuentos de anaerobios.

 

Empleando el mismo hidragar de las DryPlates diseñado y patentado por MICROKIT, mezclado con el medio de cultivo TSC  (QPA-CP para Clostridium perfringens) o SPS (QPA-CSR para Clostridios sulfito-reductores) en bolsas transparentes, rígidas y herméticas, con tapón a rosca, se consigue una recuperación muy cercana al 100% del valor inóculo y una sensibilidad también muy cercana al 100% de las muestras realmente positivas. Hemos bautizado este nuevo método patentado por MICROKIT con el nombre Quanti P/A, porque utilizamos los mismos caldos P/A que diseñamos hace décadas, pero con el hidragar de las DryPlates para poder hacer recuentos.

 

Se añaden como ventajas a la fiabilidad mediante estos excelentes resultados, la comodidad del método (ahorro de filtraciones de membrana, que además son destructivas para las células subletales; siembra en masa sin necesidad de calentar y enfriar agares) y su extraordinaria caducidad (3 años desde fabricación). Además, se ahorra el empleo de jarras y de costosas atmósferas de anaerobiosis, ya que se incuba hermético en ausencia de aire (semivacío).

El Agar TSC es el medio Normativo para análisis de Clostridium perfringens, tanto en muestras de alimentos (ISO 13401), como de aguas de consumo humano (ISO 14189).

El Agar SPS es el medio Normativo (AOAC) para análisis de Clostridium sulfito-Reductores, tanto en muestras de alimentos, como de aguas envasadas.

18 ufc Quanti-P/A-CSR incubando en exceso (48 h):colonias ya englobándose unas a otras. Su aspecto no es el más ortodoxo, pero lo importante es que es el método que mejores resultados obtiene en recuento de anaerobios.

¡Enhorabuena por utilizar el mejor método para recuento de anaerobios en aguas (o en alimentos y cosméticos) sin necesidad de calentar/enfriar agares, sin oxigenar por filtración y sin necesidad de atmósferas de anaerobiosis, sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados, de los medios preparados hidratados en tubo, frasco o botella y del método destructivo de Filtración de Membrana!

MODO DE EMPLEO:

(ver tutorial en  https://www.youtube.com/watch?v=A8WifR8mZ1k ):

1) Para detección y recuento de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 ml de muestra de aguas de consumo humano:

1.     Tome un Quanti-P/A-CP, dele la vuelta para que el medio salga del fondo, doble el fondo de la bolsa para que no vuelva a depositarse allí, ponga la bolsa vertical con el fondo doblado, abra el tapón  y añada por el orificio, con pulso para evitar derrames, 100 ml de la muestra de agua (tratada con Na TioSulfato si es clorada). Si lo que busca son esporas, caliente el agua de muestra a 75 ºC antes de añadirla a kit. Lo ideal es analizar una muestra de 100 ml a temperatura ambiente para formas vegetativas y un duplicado de 100 ml de la misma muestra a 75ºC para esporas. Los artefactos negros de Citrato Fe-Amónico no afectan los resultados: son de contorno irregular, no como las colonias.

2.     Cierre con fuerza el tapón. Coloque la bolsa horizontal sobre la superficie de trabajo.

3.     Amase el conjunto con las manos unas 30  veces (o bien vertical con stomacher-masticator) para mezclar el medio con los 100 ml de muestra de agua. Dele la vuelta y repita la operación. Si queda polvo o algún grumo de más de 1 cm, pellízquelo hasta que se disuelva o parta. No se preocupe por los pequeños grumos que queden, desaparecerán durante la incubación.

4.     Ponga la bolsa de pie –tapón arriba-, abra el tapón, golpee el fondo de la bolsa contra la poyata para que el medio interno que se haya colocado cerca del tapón, caiga dentro; deje escapar el aire con cuidado, apretando desde abajo del todo con las manos el medio con muestra, hasta que el medio hidratado suba hasta el borde del tapón.

5.     Cierre entonces de nuevo el tapón con fuerza, sin dejar cámara de aire y vuelva a amasar para repartir, esta vez sin bolsitas de aire (con las manos o con stomacher-masticator). Cuanto mejor amase mejores resultados obtendrá, por separar mejor las ufcs. No se preocupe por los grumos que todavía quedarán, ya que se reabsorberán durante la incubación.

6.     Deposite la bolsa horizontal en la estufa de cultivos, verificando que el tapón sigue herméticamente cerrado. Si lo desea, hágalo en una cubeta para prevenir eventuales vertidos. Extienda el medio con muestra en toda la superficie interna de la bolsa para que la capa de medio sea lo más homogénea posible, y así luego pueda contar mejor las colonias al trasluz.

7.     Incube 18-24 horas a 35-45ºC (dada la selectividad del medio TSC, se puede incubar a 35ºC aprox, aunque los protocolos oficiales digan que es mejor a 45ºC aprox). Si se prolonga la incubación, las colonias se agrandan, se solapan y en caso extremo (48 h) todo el medio ennegrece, impidiendo así el recuento que, por este motivo, debe hacerse entre 18 y 24 h desde iniciada la incubación. Durante la incubación, en caso positivo la bolsa se hinchará del gas generado por Clostridium.

8.     Extraiga la bolsa, déjela horizontal y cuente todas las colonias o burbujas negras, que serán el número de ufc de Clostridium perfringens en 100 ml de muestra de agua. Cuente primero por una cara y repita el recuento por la otra, ya que el medio es traslúcido: Sume los recuentos de ambas caras. En este sistema se cuentan perfectamente entre 1 y 100 colonias. Si lo desea, puede aplicar el siguiente factor de corrección, calculado a causa de la opacidad del medio: Recuento < 50 colonias, no corregir. Recuento >50 colonias, multiplicar por 2. Recuento > a 100 colonias, multiplicar por 3. A fin de cuentas su recuento, aplique el factor de corrección o no, será mucho más cercano a la realidad que el obtenido con los demás métodos de recuento de anaerobios. Puede confirmar colonias pinchando a través de la bolsa.

 

2) Para detección y recuento de Clostridium perfringens y sus esporas en 1 g ó ml de muestra de alimentos o cosméticos (u otras matrices):
Siga exactamente los mismos pasos descritos en el apartado anterior, con las siguientes salvedades:

1.        Mezcle su ml ó gramo de muestra con 100 ml de medio estéril FTM (puede emplear agua peptonada tamponada, Ringer, Solución marina al 0,9 %, agua…, aunque FTM es lo ideal para conseguir  los más óptimos resultados en anaerobios).

2.        Cuente todas las colonias o burbujas negras, que serán el número de ufc de Clostridium perfringens en 1 ml ó gramo de muestra de alimento, cosmético o la matriz que sea (aumenta x10 el límite inferior). En este sistema se cuentan perfectamente entre 1 y 100 colonias.

3)  Para detección y recuento de Clostridium sulfito-reductores en 50-100 ml de muestra de aguas envasadas:
Siga exactamente los mismos pasos descritos en el apartado 1), con las siguientes salvedades:

1.        En este caso use la bolsa Quanti-P/A-CSR.

2.        Añada 100 ml del agua de muestra (o 50 ml de su agua de muestra más 50 ml de agua estéril) y amase en la pila para prevenir posibles derrames. Siga los demás pasos indicados en el apartado 1)

3.        Incube 18-48 horas a 35ºC aprox

4.        Cuente todas las colonias o burbujas negras, que serán el número de ufc de Clostridium sulfito-reductores en 50-100 ml de agua envasada. En este sistema se cuentan perfectamente entre 1 y 100 colonias.

 

4)  Para detección y recuento de Clostridium sulfito-reductores en 1 g ó ml de muestra de alimentos o cosméticos (u otras matrices):
Siga exactamente los mismos pasos descritos en los apartados 1) y 3), con las siguientes salvedades:

1.        Mezcle su ml o gramo de muestra con 100 ml  de medio estéril FTM (puede emplear agua peptonada tamponada, Ringer, Solución marina al 0,9 %, agua,…, aunque FTM es la mejor opción en anaerobios). Aumenta x10 el límite inferior de cuantificación, al emplear directamente 1 g de alimento diluido en 100 ml de caldo: leerá ufc/g, no las hasta ahora habituales ufc/0,1 g.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los medios. Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las Quanti-P/A, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: VRB747).

Con este sistema, con la destreza que da la experiencia, un analista puede controlar (de la muestra a la estufa incubadora) hasta 50 muestras por hora. Tambien en este mismo método, el Quanti-P/A-Enterocult (QPA-ETC) para recuento de Enterococos fecales (colonias pardas-negras) en 100-250 ml de muestra de agua, conseguido mezclando nuestro clásico P/A Enterocult con Hidragar en este tipo de envase. Para cuantificar Coliformes-E.coli y Pseudomonas aeruginosa emplee nuestros caldos P/A (MCC Colicult y Pseudocult, respectivamente) en las cubetas NMP. Esto ahorrará los elevados porcentajes de falsos negativos que también implica el método de filtración de membrana en estos tres parámetros (21% en E.coli-Coliformes, 6% en Enterococos fecales y 33% en P.aeruginosa).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura. Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140. Exactitud del 87,5 % al 100 % de ufcs, en función de lo correctos que sean el amasado- extensión de la muestra al mezclarla con el medio. Exclusividad: 100%. Límite inferior de cuantificación: 1-5 ufc/100 ml.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros QUANTI-P/A CLOSTRICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Diseñado, Patentado y Fabricado desde Junio de 2017 por Laboratorios MICROKIT, S.L.

SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

Selección de Salmonella y Shigella (APHA) UNE-EN ISO 6579:2003

COMPOSICIÓN

  • Peptona pancreática de carne 5,00 g
  • Extracto de carne                  5,00 g
  • Sales biliares                         8,50 g
  • Citrato sódico                       10,00 g
  • Tiosulfato sódico                  8,50 g
  • Citrato férrico amoniacal      1,00 g
  • Lactosa                                 10,00 g
  • Rojo neutro                           25,00 mg
  • Verde brillante                      0,33 mg
  • Agar‑agar                              15,00 g
SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Calentar agitando hasta ebullición para su disolución.

Mantener la ebullición durante 2 minutos.

Autoclavar 116 ºC durante 5 minutos. El color final del medio es rojo-naranja.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES

DESHIDRATADO CODIGO: DMT107

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CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Rosáceo

PREPARADO: Estéril, Rojo‑naranja

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

  • Salmonella abony MKTN 6017, Colonias incoloras con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Colonias incoloras, buen crecimiento.
  • E.coli MKTA 25922, Inhibición parcial o total, puede crecer en 48 h.
  • Enterococcus faecalis MKTN 775, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
  • Proteus mirabilis MKTA 14153, Bueno, Colonias incoloras.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio selectivo utilizado para aislamiento de Salmonella y Shigella. Distingue a los fermentadores de lactosa de aquellos que no lo son. Las sales biliares y el verde brillante inhiben el crecimiento de las bacterias Gram (+). El citrato y thiosulfato sódico limitan el desarrollo de los coliformes y previenen la invasión por Proteus.

SIEMBRA

Fundir un tubo o frasco para elaborar placas sin sobrecalentar. Dejar enfriar. Sembrar en superficie 1 ml del medio de enriquecimiento incubado. Incubar a 37-42 ºC aproximadamente, durante 24-72 horas.

INTERPRETACIÓN

Salmonella, no fermenta la lactosa, sus colonias aparecen incoloras, transparentes, con o sin centro negro debido a la producción de sulfuro de hidrógeno. Shigella, aparece con colonias incoloras. Los coliformes que hayan conseguido crecer, formarán colonias rojas o rosadas.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

E. SAKAZAKII CROMOKIT  IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Norma ISO/TS 22964:2006, optimizada en 7/2013.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                         7,0 g
  • Cloruro Sódico               5,0 g
  • Extracto de levadura      3,0 g
  • Desoxicolato Sódico       0,60 g
  • Thiosulfato sódico            1,0 g
  • Mix cromogénico          0,15 g
  • Cristal Violeta                0,002 g
  • Agar-Agar cromogénico         15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 31,75 gramos en 1 litro de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El color del medio es púrpura, a veces floculado por el tipo de agar-agar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT315.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado

PREPARADO: Estéril, Púrpura, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 41°C aproximadamente:

  • Enterobacter (=Cronobacter)  sakazakii  MKTA 12868, Excelente, colonias verde-azuladas. Crece más del 50% del valor inóculo.
  • Escherichia coli  MKTA 25922, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterobacter aerogenes  MKTA 13048, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterococcus faecalis  MKTA 29212, Inhibido.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias verde-azuladas, que son presuntivas para E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.  Ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación, sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias (mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

E. SAKAZAKII CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

E. SAKAZAKII CROMOKIT  IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR

 Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Norma ISO/TS 22964:2006, optimizada en 7/2013.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                         7,0 g
  • Cloruro Sódico               5,0 g
  • Extracto de levadura      3,0 g
  • Desoxicolato Sódico       0,60 g
  • Thiosulfato sódico            1,0 g
  • Mix cromogénico          0,15 g
  • Cristal Violeta                0,002 g
  • Agar-Agar cromogénico         15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 31,75 gramos en 1 litro de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El color del medio es púrpura, a veces floculado por el tipo de agar-agar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT315.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado

PREPARADO: Estéril, Púrpura, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 41°C aproximadamente:

  • Enterobacter (=Cronobacter)  sakazakii  MKTA 12868, Excelente, colonias verde-azuladas. Crece más del 50% del valor inóculo.
  • Escherichia coli  MKTA 25922, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterobacter aerogenes  MKTA 13048, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.
  • Enterococcus faecalis  MKTA 29212, Inhibido.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias verde-azuladas, que son presuntivas para E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.  Ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación, sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias (mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros  E. SAKAZAKII CROMOKIT  IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

RAPPAPORT VASSILIADIS SOJA BROTH PHARMACOPEA

RAPPAPORT VASSILIADIS SOJA BROTH PHARMACOPEA

Pharmacopea armonizada 2008

Enriquecimiento selectivo de Salmonella.

COMPOSICIÓN

  • Peptona de soja                      4.5 g
  • Cloruro sódico                       8.0 g
  • DihidrógenoFosfato potásico          0.6 g
  • Cloruro de magnesio              29.0 g
  • Oxalato de verde malaquita             0.036 g
  • Fosfato dipotásico                  0.4 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,2 ± 0,2

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PREPARACIÓN

Disolver 42,5 gramos en 1 l de agua bidestilada. Una posible ebullición espontánea es normal y característica en este medio. Autoclavar a 115 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es azul turquesa.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

De izquierda a derecha: Rappaport sin inocular, E. coli, Shigella, y Salmonella.

De izquierda a derecha: Rappaport sin inocular, E. coli, Shigella, y Salmonella.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo fino, Azul

PREPARADO: Estéril, Azul turquesa

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Correcto, a las 48 h. El medio se vuelve lechoso.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Crece bien, a las 48 h. El medio se vuelve lechoso.
  • Escherichia coli MKTA 25922, parcialmente inhibido.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, parcialmente inhibido.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 0.1 ml del pre-enriquecimiento en 10 ml de este medio. Incubar 21-27 horas a 37 ºC aproximadamente o, para mayor selectividad para Salmonella, a 40,5-42,5 ºC aproximadamente, incluso 24 horas más. Para tener un mínimo de certeza en la detección de Salmonella, NO SE PUEDE enriquecer sólo en caldo Rappaport, ya que, en ese caso, y en función de las distintas matrices y las distintas cepas,  podrían obtenerse hasta un 47,4 % de falsos negativos!!! Realizar un paralelo en caldo Mueller Kauffmann Tetrationato (DMT086),  o en Selenito (DMT111) o en SS Broth (DMT067). Sembrar en placas selectivas.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros RAPPAPORT VASSILIADIS SOJA BROTH PHARMACOPEA rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SALMONELLA-SHIGELLA BROTH (SS BROTH)

SALMONELLA-SHIGELLA BROTH (SS BROTH)

Versión caldo del medio SS Agar UNE-EN ISO 6579:2003

 Enriquecimiento selectivo de Salmonella y Shigella con máxima recuperación

COMPOSICIÓN

  • Peptona de carne    5,00 g
  • Extracto de carne   5,00 g
  • Sales biliares          8,50 g
  • Citrato Sódico      10,00 g
  • Tiosulfato Sódico   8,50 g
  • Citrato Fe-Amoniacal 1,00 g
  • Lactosa                 10,00 g
  • Rojo Neutro      25,00 mg
  • Verde Brillante    0,33 mg

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,1

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De izquierda a derecha: SS Broth sin nocular, E. coli, Shigella (turbio), y Salmonella (negro)

De izquierda a derecha: SS Broth sin nocular, E. coli, Shigella (turbio), y Salmonella (negro)

PREPARACIÓN

Disolver 48 g en 1 l de agua bidestilada.

Hervir 1 minuto a 100  ºC. No autoclavar o, mejor aún, esterilizar por filtración. El aspecto grumoso-filamentoso del medio preparado es normal.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

Nueva imagenMANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES

 

DESHIDRATADO CODIGO: DMT067

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, rosado.   PREPARADO: Estéril, rojo intenso con precipitado filamentoso que NO ES contaminación.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 42°C aproximadamente:

  • Salmonella abony MKTN 6017: Correcto, Amarillento y ennegrece el medio.
  • Escherichia coli MKTA 25922: Inhibido, Puede llegar a crecer en 48 h.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Inhibido.
  • Proteus mirabilis MKTA 14153, Bueno.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Bueno.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Escaso.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS, FRASCOS PREPARADOS, KITS P/A.

NOTA: Medio ideal para el enriquecimiento selectivo de Salmonella y Shigella; presenta la ventaja, sobre el Caldo Selenito-Cystina, de no ser tóxico; y sobre el Caldo Rappaport Vassiliadis, de permitir el crecimiento de las Shigella. Casi toda la flora Gram positiva queda inhibida (excepto algunas cepas de Bacillus cereus, Enterococcus durans y Staphylococcus epidermidis); y gram parte de la flora Gram negativa también es inhibida (excepto algunas cepas de E. coli, Pseudomonas aeruginosa, y el grupo KES -Klebsiella, Enterobacter y Serratia-). Estas cepas quedarán luego descartadas en los agares selectivos XLD y SS (sustituya este último por Chromosalm si sólo busca Salmonella) y con las pruebas inmunológicas (KMB501) y bioquímicas. En los servicios intercompartivos SEILALIMENTOS de los ultimos 7 años, este medio demuestra ser el que mejor recupera las diferentes cepas de Salmonella y de Shigella en todo tipo de matrices (lácteos, cárnicos, pescados, vegetales…)

 SIEMBRA

Agitar para resuspender las nubes, precipitados y flóculos. Inocular 0,1 ml de caldo de pre-enriquecimiento (Buffered peptone Water) en un tubo de 9 ml, o bien 1 ml en un frasco de 100 ml. Incubar 48 horas a 42 ºC aproximadamente.

 INTERPRETACIÓN

Llevar a los medios sólidos selectivos XLD Agar y SS-Agar (sustituya éste por Chromosalm si sólo busca Salmonella) y, sembrando en superficie por agotamiento, cualquier caldo turbio o con viraje de color. Los medios con precipitado cristalino o flóculos son normales y no indican crecimiento.

ATENCIÓN, MÉTODO RÁPIDO PARA SALMONELLA: Uniendo este avance a un enriquecimiento mixto acelerado (mezclando los medios del preenriquecimiento revitalizador y neutralizante: 225 ml Buffered Peptone Neutralizing Water de MICROKIT  DMT011+ enriquecimiento selectivo 18 ml SS Broth concentrado [x5] de MICROKIT DMT067) e incubándolos juntos en las 18 h previas; permite la detección fiable de Salmonella en sólo 36 h desde la muestra inicial. Por todo ello, este método acortado es la herramienta que estaban esperando todas las fábricas de productos alimenticios para poder liberar lotes gracias a la detección precoz de este patógeno, que les retrasaba hasta ahora el resultado global del laboratorio microbiológico a 3-5 días.

 BIBLIOGRAFÍA

FSanchis, J. 09-2014: XIX Congreso Nacional de Microbiología  de los Alimentos. Doble enriquecimiento simultáneo para detección de Salmonella. J. Sanchís. MICROKIT.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

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SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS AGAR)

Selección de Salmonella y Shigella (APHA) UNE-EN ISO 6579:2003

COMPOSICIÓN

  • Peptona pancreática de carne 5,00 g
  • Extracto de carne                  5,00 g
  • Sales biliares                         8,50 g
  • Citrato sódico                       10,00 g
  • Tiosulfato sódico                  8,50 g
  • Citrato férrico amoniacal      1,00 g
  • Lactosa                                 10,00 g
  • Rojo neutro                           25,00 mg
  • Verde brillante                      0,33 mg
  • Agar‑agar                              15,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,1

SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

SS Agar con E. coli, Salmonella y Shigella.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Mantener la ebullición durante 2 minutos. Autoclavar 116 ºC durante 5 minutos. El color final del medio es rojo-naranja.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES

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DESHIDRATADO CODIGO: DMT107

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Rosáceo

PREPARADO: Estéril, Rojo‑naranja

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

  • Salmonella abony MKTN 6017, Colonias incoloras con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Colonias incoloras, buen crecimiento.
  • E.coli MKTA 25922, Inhibición parcial o total, puede crecer en 48 h.
  • Enterococcus faecalis MKTN 775, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
  • Proteus mirabilis MKTA 14153, Bueno, Colonias incoloras.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio selectivo utilizado para aislamiento de Salmonella y Shigella. Distingue a los fermentadores de lactosa de aquellos que no lo son. Las sales biliares y el verde brillante inhiben el crecimiento de las bacterias Gram (+). El citrato y thiosulfato sódico limitan el desarrollo de los coliformes y previenen la invasión por Proteus.

SIEMBRA

Fundir un tubo o frasco para elaborar placas sin sobrecalentar. Dejar enfriar. Sembrar en superficie 1 ml del medio de enriquecimiento incubado. Incubar a 37-42 ºC aproximadamente, durante 24-72 horas.

INTERPRETACIÓN

Salmonella, no fermenta la lactosa, sus colonias aparecen incoloras, transparentes, con o sin centro negro debido a la producción de sulfuro de hidrógeno. Shigella, aparece con colonias incoloras. Los coliformes que hayan conseguido crecer, formarán colonias rojas o rosadas.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

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E. SAKAZAKII CROMOKIT CSA-DFI AGAR

E. SAKAZAKII CROMOKIT  CSA-DFI AGAR

 Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Norma CSA y DFI.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                                   15,0 g
  • Peptona de soja                       5,0 g
  • Cloruro Sódico                         5,0 g
  • Desoxicolato Sódico             0,60 g
  • Thiosulfato sódico                  1,0 g
  • Mix cromogénico                 0,11 g
  • Agar-Agar cromogénico      15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,2

3 colonias azuladas: E.sakazakii. Colonias de otros colores: Flora acompañante

3 colonias azuladas: E.sakazakii.
Colonias de otros colores: Flora acompañante

PREPARACIÓN

Disolver 42 gramos en 1 litro de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. No sobrecalentar! El color del medio es crema-rosado, a veces floculado por el tipo de agar-agar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT314.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema-rosado

PREPARADO: Estéril, Crema-rosado, puede contener flóculos de agar-agar cromogénico: dejarlos precipitar y dispensar en placas el medio sin ellos.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24 h a 41°C aproximadamente:

  • Enterobacter sakazakii  MKTA 12868, Excelente, colonias azules. Crece más del 50% del valor inóculo.
  • Escherichia coli  MKTA 25922, Excelente, colonias amarillas.
  • Enterobacter aerogenes  MKTA 13048, Excelente, colonias verdes.
  • Klebsiella pneumoniae MKTA 13883 Excelente, colonias amarillas o verdes, grandes, mucosas.
  • Enterococcus faecalis  MKTA 29212, Inhibido.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313) según ISO/TS 22964:2006: un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y vancomicina que elimina la flora competitiva (incluido Staphylococcus aureus y parcialmente E.coli).

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias azules, que son presuntivas para E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias amarillas. Identificar con test bioquímicos (ej. Crystal Gram negativos, ref.MICROKIT 245000, Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter sakazakii) es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes. Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.  Ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia. De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación, sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias (mejor que coliformes) ambientales. El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii, junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas. Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas. El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos. La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular. El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

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SABOURAUD POLIMICOLOGICAL BROTH

SABOURAUD POLIMICOLOGICAL BROTH

Enriquecimiento selectivo de levaduras y mohos, aislamiento más sensible por MF.

COMPOSICIÓN

  • Polipeptona micológica     10 g
  • Dextrosa                           20 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,7 ± 0,2

Aspergillus niger en placa con cartón absorbente

Aspergillus niger en placa con cartón absorbente

PREPARACIÓN

Disolver 30 g en 1 litro de agua destilada. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO  EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT105

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Parcialmente inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Parcialmente inhibido.
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas floculando o flotando en 5 días.
  • Candida albicans MKTA 10231, Correcto.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS 9 ml, FRASCOS 100 ml, VIALES PARA FILTRACIÓN DE MEMBRANA, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Preparado como modificación de la USP para enriquecer muestras pobres en hongos y ricas en flora acompañante (ideal para detección en cosméticos) y para detectar levaduras y mohos por la técnica de Filtración de Membrana.

 SIEMBRA

Añadir 1 ml o 1 gramo de muestra al tubo o al frasco. Incubar a 21 ºC aproximadamente, durante 3 días (levaduras) o 5 días (mohos). Los viales se añaden sobre cartones absorbentes previamente colocados en placas de Petri de 55 mm de diámetro, y se deposita encima la membrana de filtración.

INTERPRETACIÓN

La turbidez en tubos o frascos indica presencia de hongos. Averiguar por crecimientos coloniales en medios agarizados de qué especies se trata. En el caso de la MF, las colonias aparecidas son de levaduras (colonias no filamentosas) y mohos (colonias filamentosas) aunque a menudo aparecerán colonias de bacterias acompañantes al no ser el medio altamente selectivo.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

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SABOURAUD MALTOSE AGAR

SABOURAUD MALTOSE AGAR

Aislamiento de hongos. Obtención de cultivos masivos.

COMPOSICIÓN

  • Polipeptona  micológica         10 g
  • Maltosa                         40 g
  • Agar‑agar                      15 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,6 ± 0,2

Colonias lobulado-asteroides,  entre otras, procedentes de arena de playa

Colonias lobulado-asteroides, entre otras, procedentes de arena de playa

PREPARACIÓN

Disolver 65 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. No sobrecalentar.

Nueva imagen (1)

Penicillium candidum. Polvo blanco (falsa harina) procedente de embutidos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT106

Escaso poder selectivo del medio: Invasión bacteriana de muestra con abundante flora  mixta, anterior al crecimiento de los hongos

Escaso poder selectivo del medio: Invasión bacteriana de muestra con abundante flora
mixta, anterior al crecimiento de los hongos

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Parcialmente inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Parcialmente inhibido.
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas en 5 días.
  • Candida albicans MKTA 10231, Correcto.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio para cultivo de hongos con máxima obtención de biomasa.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Sembrar en superficie e incubar 2-5 días a 21-25 ºC aproximadamente. Se obtienen cultivos masivos.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Crecimiento mixto procedente de arena fangosa de una playa.

Crecimiento mixto procedente de arena fangosa de una playa.

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