Mac CONKEY SORBITOL AGAR

Mac CONKEY SORBITOL AGAR

Detección presuntiva de E.coli serovar. O157 (UNE-EN ISO 16654:2002) a partir de alimentos (carne de vacuno,…), aguas y otras muestras, previamente enriquecidas en E. coli O157 Broth.

COMPOSICIÓN

  • Peptona de caseina 17,00 g
  • Peptona de carne 3,00 g
  • D Sorbitol 10,00 g
  • Sales Biliares 1,50 g
  • Cloruro sódico 5,00 g
  • Rojo Neutro 0,030 g
  • Cristal violeta 0,001 g
  • Agar agar 12,00 g
    E. coli izquierda, púrpura brillante; E. coli O157 derecha, rosa-crema.

    E. coli izquierda, púrpura brillante; E. coli O157 derecha, rosa-crema.

    (Fórmula por litro) pH final 7,1 ± 0,2

    PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
    AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
    MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

    Nueva imagen (4)PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

 

 

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO
CÓDIGO: BCD161

PREPARACIÓN

Disolver 48.5 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando hasta ebullición, para su total disolución. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. No sobrecalentar. Añadir a 44-47 ºC, 20 ml de Telurito-Cefixime estéril (BCX161) (= 2’55 mg/l) y mezclar.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, púrpura
PREPARADO: Violáceo

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 18-24 h a 37 ºC, aplicando el método ISO 16654 o el indicado en el Manual MICROKIT actual:

  • E.coli (0157:H7) MKTA 35150, Excelente, colonias amarillentas o suavemente rosadas y 1 mm de diámetro. PR >50% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; la variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
  • E. coli MKTA 25922, Excelente, pero con colonias rosa-púrpura
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, totalmente inhibido

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Tras enriquecer en caldo O157 m-TSB (BCD165), no más de 18-24 h a 41,5°C aproximadamente: Inocular en superficie muestra y diluciones para obtener muchas colonias bien aisladas. Incubar a 37 ºC aproximadamente durante no más de18-24 horas. E. coli enterohemorrágico, serovariedad O157 H7 crece con colonias casi incoloras, rosa pálido-amarillentas, al no fermentar el sorbitol, de 1 mm de diámetro. Otras cepas de E. coli crecen con colonias púrpuras. Resembrar colonias bien aisladas en Agar Nutritivo para E.coli O157 (DMT126). Incubar 18 h a 37°C aproximadamente. Si se prolonga la incubación, la distinción de colonias será más difícil. Confirmar con los tests adecuados: Indol en Agua de triptona con triptófano (BCD129), 24 h a 37°C aproximadamente y adición de Kovacs (SBH056), látex O157 (KMB102) y H7 (KPL079), controlando con cepa + y -. Según un método bastante difundido, si se añaden 0’1 g/l de MUG (SKL061) en el medio antes de autoclavar, las colonias de E. coli O157 H7 son las NO fluorescentes bajo luz de 366 nm (VMT050).

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY SORBITOL AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR

LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR
ISO 11290-1 Amendment 1 (15-10-2004), ISO 11290-2:2000/A1:2004

¿Reconoce Ud.este medio para aislamiento y/o recuento selectivo y diferencial
de Listeria monocytogenes?

Listeria spp: (verde-azulado sin halo) Listeria monocytogenes: (verde-azulado con halo) Flora acompañante:(incolora)

Listeria spp: (verde-azulado sin halo)
Listeria monocytogenes: (verde-azulado con halo)
Flora acompañante: (incolora)

Si ya lo ha utilizado, seguro que estárá muy contento/a por su calidad, sensibilidad,.especificidad, eficacia, precisión, exactitud y rapidez… respecto al Oxford o al Palcam: es perfecto…no tiene pegas…bueno, sólo una: que sólo se encuentra en el mercado internacional en placas preparadas ¿verdad? Eso es caro, molesto en cuanto a servicio, y somete a causa de su escasa caducidad; además, para recuentos en 1 ml, requiere placas grandes o numerosas.
¿Se lo imagina en PRESENTACIÓN polvo deshidratado con suplementos? A todas sus virtudes añadiríamos:

  • Independencia, al no depender de importaciones/programaciones
  • Disponibilidad, al evitar la necesidad de tener sobrestocks
  • Economía, al no tener que tirar placas caducadas y al ser medio deshidratado: Precio 2 €/test real.
  • Larga caducidad, al ser medio deshidratado
  • Posibilidad de siembras en masa de 1ml…

Pues no imagine más…..MICROKIT LO HA VUELTO A CONSEGUIR!!!!!
Tras 3 años de intensa investigación nace CHROMOCYTOGENES MICROKIT AGAR. Al igual que el CHROMOSALM MICROKIT AGAR para Salmonella, hemos conseguido el mejor medio cromogénico y diferencial para Listeria monocytogenes, en medio deshidratado!
Agosti Listeria and Ottaviani Agar, preparado con los suplementos selectivos y diferenciales adecuados, es el más moderno, rápido, selectivo y diferencial medio de cultivo para el aislamiento e identificación presuntiva de Listeria monocytogenes a partir de muestras alimentarias.

El sustrato cromogénico detecta la beta-glucosidasa, enzima común en todas las especies de Listeria y unas pocas cepas de Enterococos y Bacilos, provocando la aparición de colonias verde-azuladas. Un sustrato adecuado detecta la fosfolipasa propia de L.monocytogenes, provocando un halo de lisis/precipitación alrededor de sus colonias. La combinación de ambos sustratos permite diferenciar las colonias de Listeria spp, (verde-azuladas sin halo opaco) de las de Listeria monocytogenes (verde-azuladas rodeadas de un halo opaco). Dado que algunas cepas de L.ivanovii son capaces de provocar halo, se requiere confirmación de las colonias presuntivas, con la simple prueba: Rhamnosa+/Xylosa– : Kit completo KMT012, tambien disponible en tubos preparados, TPL014, TPL015, y en medio deshidratado DMT167 + suplementos DMT169 y DMT171. Ahorre el coste de las galerías de identificación!

CÓDIGO del medio CHROMOCYTOGENES base DMT700+. Concentración: 70,5 g/l. Ajustar a pH 7,2. Autoclavar 15 minutos a 121°C. Enfriar a 48-50°C, añadir 1 pareja de viales del suplemento coktail-Chromocytogenes SMT700+, precalentado a 48-50°C, agitar bien y verter en placas. Plaquitas herméticas con larga caducidad PPL970. Placas preparadas PPLM70 con 3 meses de caducidad a la entrega. Tubos preparados BASE TPL700 + suplemento SMT700+.

MODO DE EMPLEO: El medio final es crema opaco. Sembrar, dada su alta selectividad, incluso un inóculo concentrado en Fraser o LEB (nunca en Aguas peptonadas). Incubar 18-48 horas a 30-37°C aproximadamente. Confirmar sólo las colonias regulares, redondeadas, de 1-2 mm, verde-azuladas, con halo opaco. Según ISO 11290, algunas cepas estresadas (en particular por acidez) o fosfolipasa-débiles pueden generar halos estrechos, que se sólo ven bien tras 4 días de incubación. Se han reportado cepas de L.monocytogenes, especialmente procedentes de productos cárnicos, que crecen con colonias atípicas, de color blanco.
En nuestra validación de Microstick-Listeria, pudimos testificar que tras solo 18 h de enriquecimiento en LEB de MICROKIT de 8 ufc de L.monocytogenes con 102-103 ufc de flora acompañante e interferente, la siembra directa en Agar Cromocytogenes no produjo ni un solo falso negativo en 20 tipos diferentes de alimentos, lo que nos permite proponer un protocolo de detección en solo 36h con 18 h LEB + 18 h Cromocytogenes.

COMPOSICIÓN: La composición de este medio es la aprobada en la versión 2004 de la Norma ISO 11290. La referencia SMT700+ de suplemento cromocytogenes engloba una pareja de viales. Contiene las cantidades indicadas en la ISO 11290-1:1996/Amd.1:2004 (E) de Ácido Nalidíxico, Ceftazidina, Polimixina B, Cicloheximida y L-phosphatidylinositol, que suplementan el medio base Ottaviani & Agosti DMT700- (enzimatic digest of animal tissues 18g, enzimatic digest of casein 6 g, yeast extract 10 g, sodium piruvate 2 g, glucose 2 g, magnesium glycerophosphate 1 g, magnesium sulfate anhydrous 0,5 g, sodium chloride 5 g, lithium chloride 10 g, disodium hydrogen phosphate anhydrous 2,5 g, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-glucopyranoside 0,05 g, Agar-agar 13,5 g en 930 ml de agua bidestilada).

CONTROL DE CALIDAD: Listeria monocytogenes MKTA 11994, Colonias verdes con halo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 277-424%, pero de forma más selectiva y diferencial. * El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio). Muchos clientes corroboran entusiasmados estos datos diferenciales sobre la enorme fertilidad de nuestro Cromocytogenes con respecto a los más famosas marcas de Ottaviani & Agosti Agar.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

EUGON LT100 BROTH

EUGON LT100 BROTH.

Caldo para suspensión inicial y enriquecimiento en muestras con propiedades antimicrobianas, según las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de aerobios), ISO 16212 (recuento de hongos), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans)

EUGON BROTH

COMPOSICIÓN

  • Triptona                        15,0 g
  • Peptona de soja             5,0 g
  • L-Cystina                       0,7 g
  • Cloruro Sódico             4,0 g
  • Sulfito sódico                0,2 g
  • Glucosa                          5,5 g
  • Lecitina de huevo          1,0 g
  • Octoxynol 9                  1,0 g

(Fórmula en g/l)         pH: 7,0 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 31,4 g en 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 ml de Polisorbato-Tween 80 atemperado, calentando en agitación hasta ebullición al menos 30 minutos hasta obtener una dispersión homogénea. Autoclavar 15 minutos a 121 ºC. No sobrecalentar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.       AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. DESHIDRATADO CODIGO: DMT204

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema

PREPARADO: Estéril, Ámbar, con fondo precipitado.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 35 ºC, aplicando el método indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en SDA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO Y PREPARADO: tubos 9 ml, frascos 90 ml y frascotes 225 ml.

 SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

 

Incubar la suspensión inicial preparada a razón de 1 g de muestra por 9 g de caldo, a 35°C ± 2,5 °C, durante al menos 20 horas y como máximo 72 horas.

 

Según las diferentes Normas ISO de microbiología cosmética, transferir 0,1-0,5 ml a la superficie de una placa que contenga 15-20 ml de:

 

  1. TSA o Eugon LT100 Neutralizing Agar, para obtener aerobios cuando son esperables a una concentración muy baja y no es necesario contarlos. Esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 48-72 horas. Observar si hay aparición de cualquier colonia e identificarla.
  2. MacConkey Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia e identificarla por resiembra en EMB Levine Agar
  3. Cetrimide Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia e identificarla, mediante la prueba de la citocromooxidasa y por resiembra en King A Agar (P).
  4. -Baird Parker Agar (atención, medio invalidado mediante Seilaparfum para microbiología cosmética, usar el que dan como alternativo en su apéndice, Mannitol Salt Agar), esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia sospechosa e identificarla.
  5. Sabouraud Caf.Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia sospechosa e identificarla.

 

El recuento de hongos y de aerobios se hace, según estas Normas ISO, a partir de otro caldo, el Neutralizing Diluent SCDLP20 (ref. MICROKIT DMT203).

 

NOTA 1: Como observarán los clientes habituales de MICROKIT, estas Normas ISO son un paso atrás en la eficiencia de la microbiología de cosméticos y cometen graves errores metodológicos de todo tipo (siembras en superficie que han de ser en masa, medios inválidos y obsoletos, tiempos de incubación inadecuados…) que quedan solventados siguiendo el protocolo MICROKIT y las instrucciones de sus medios (LPT Neutralizing Broth, LPT Neutralizing Agar, Sabouraud Caf.Agar, MugPlusCfs.Agar, Cetrimide Agar, Mannitol Salt Agar, Biggy Agar, o bien el conjunto de medios preparados COSMETIKIT®).

 

NOTA 2: Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporciona, aunque nos veamos obligados a fabricar también este medio Eugon LT100 Neutralizing Broth con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán, aunque ya hemos podido comprobar que los primeros usuarios de Seilaparfum con este medio, obtienen también calificaciones excelentes al usarlo junto al resto del protocolo MICROKIT.

Si desea más información sobre nuestro MEDIO EUGON LT 100 BRTH, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

EUGON LT100 AGAR

EUGON LT100 AGAR

Agar de uso general para muestras con propiedades antimicrobianas, según las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de aerobios), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans).lptagar

 COMPOSICIÓN

  • Triptona                        15,0 g
  • Peptona de soja             5,0 g
  • L-Cystina                          0,7 g
  • Cloruro Sódico                4,0 g
  • Sulfito sódico                   0,2 g
  • Glucosa                             5,5 g
  • Lecitina de huevo            1,0 g
  • Octoxynol 9                      1,0 g
  • Agar-agar                        15,0 g

(Fórmula por litro)    pH final: 7,0 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 47,4 gramos en 1 litro de agua  bidestilada que contenga 5 ml de polisorbato Tween 80 (SDA071). Agitar  calentando hasta ebullición.  Autoclavar a 121° C durante 15 minutos. El color final del medio es crema. No sobrecalentar. Agitar hasta su completa solidificación para evitar grumos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT205

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema

PREPARADO: Estéril, Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48-72 h a 37°C aproximadamente, o bien 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 98-220 %. Si se añadió TTC, colonias blancas y medio naranja alrededor.
  • Bacillus subtillis MKTA 6633, Excelente Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >108-276 %. Si se añadió TTC, colonias anaranjadas o doradas, medio lila alrededor que más tarde vira a naranja.
  • E.coli MKTA 25922, Excelente, Colonia amarilla, Viraje amarillo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 63-127 %. Si se añadió TTC, colonias crema o rojas, medio naranja alrededor.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, Colonia amarilla, Viraje amarillo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 35-122 %. Si se añadió TTC, colonias rojas o doradas, medio lila alrededor.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 23-103 %. Si se añadió TTC, colonias anaranjadas, medio naranja alrededor.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente, colonias blancas. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento 108 %. Si se añadió TTC, colonias blancas o rosadas.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 SIEMBRA E INTERPRETACIÓN 

  1. Para aislar microorganismos procedentes de productos cosméticos inhibitorios: Repartir 0,1-0,5 ml del caldo Eugon LT100 Neutralizing Broth (MICROKIT ref. DMT204) enriquecido en la superficie de una placa. Esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 48-72 horas. Observar si hay aparición de cualquier colonia e identificarla.
  2. Para contar aerobios procedentes de productos cosméticos inhibitorios: Sembrar en masa 1 ml de cada dilución decimal realizada en el Neutralizing Diluent SCDLP20 (MICROKIT ref. DMT203). Incubar cada placa invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 72 ± 6 horas.

NOTA: Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Agar (DMT066, DMT227, RPL074, TPL0200) y nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporcionan, aunque nos veamos obligados a fabricar también estos medios Eugon con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán.

Si desea más información sobre nuestro MEDIO EUGON LT100 AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Mac CONKEY BROTH PURPLE

Mac CONKEY BROTH PURPLE

PHARMACOPEA MEDIO G
Presunción y enriquecimiento de COLIFORMES (ICMSF,
FDA, APHA, OMS) (ISO 9308-2:1990)

COMPOSICIÓN

De izquierda a derecha: Mac Conkey Broth  Purple sin inocular, Salmonella (no amarillo) y E. coli (amarillo).

De izquierda a derecha: Mac Conkey Broth Purple sin inocular, Salmonella (no amarillo) y E. coli (amarillo).

Digerido pancreático gelatina 20,00 g
Lactosa 10,00 g
Sales biliares 5,00 g
Púrpura de bromocresol 0,01 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,3 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 35 g. en 1 litro de agua destilada.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT076

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige
PREPARADO: Estéril, violeta

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Excelente, Acido positivo, amarillo, Con gas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, Acido positivo, Con gas.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Bueno, Acido negativo, Sin gas.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

PRESENTACIÓN: TUBOS 9 ml CON CAMPANA, FRASCOS, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para coliformes en agua y alimentos. Medio de enriquecimiento para medicamentos. La fermentación de la lactosa con acidificación (viraje del púrpura al amarillo) y la producción de gas (burbuja en la campana Durham) indican presencia de coliformes.

SIEMBRA

Para enumerar, inocular tubos con campana de acuerdo con la técnica del Número Más Probable o bien frascos para enriquecer. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 48 horas.

INTERPRETACION

Viraje y gas: Presencia de coliformes y presencia presuntiva de E. coli. Viraje sin gas: Coliformes con baja probabilidad de E. coli. Ni viraje ni gas: Ausencia de coliformes y de E. coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

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LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES

LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES

Líquido de lavado para MF acorde con USP y con Farmacopea Europea.

COMPOSICIÓN

Peptona de carne 5,0 g
Extracto de carne 3,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6.9 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 8 g de medio en 1 litro de agua bidestilada que contenga 1 g de polisorbato 80. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es amarillo claro.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT189

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo beige
PREPARADO: Crema-amarillo
CONTROL DE CRECIMIENTO (Tras su uso y colocación de la membrana en TSA, 24-48 h a 37°C aproximadamente):

  • E. coli MKTA 25922 (Crecimiento correcto)
  • Bacillu. subtilis MKTA 6633 (Crecimiento correcto)
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P (Crecimiento correcto)
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (Crecimiento correcto)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Después de filtrar la muestra, enjuagar el filtro tres veces con 100 ml de líquido de lavado de membranas filtrantes. Si la muestra contiene muchos azúcares o grasas, puede duplicarse la concentración de polisorbato (2 g/l).

Ver tambien líquidos de enjuague de membranas A, D y K según USP en frascos estériles 100 ml y frascotes estériles 225 ml

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA LITSKY)

ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA‑LITSKY). Confirmación de Estreptococos fecales a partir de caldo Azide Dextrose Rothe.

ethyl broth

COMPOSICIÓN 

  • Polipeptona                              20,0 g
  • Glucosa                                      5,0 g
  • Cloruro sódico                          5,0 g
  • Fosfato monopotásico            2,7 g
  • Fosfato dipotásico                    2,7 g
  • Azida sódica                               0,4 g

(Fórmula por litro)          pH final: 7,0 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 35,7 g de medio en 1 litro de agua destilada. Repartir en tubos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.  AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: La Azida Sódica es tóxica (y explosiva en contacto con plomo). Evitar el contacto con la piel y las mucosas (y no desechar por las cañerías).

DESHIDRATADO CODIGO: DMT053

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige  PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 37°C aproximadamente:

  • Escherichia coli MKTA 25922, Negativo.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Negativo.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Correcto, depósito violáceo-anaranjado.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Negativo.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para la determinación de los enterococos en el agua, que son índice de contaminación fecal. La Azida Sódica hace el medio selectivo. El medio confirma la presencia de estreptococos fecales procedentes del Caldo ROTHE (Azide Dextrose Broth).

 SIEMBRA

 De cada tubo positivo de Caldo Rothe se transfiere 1 ml a un tubo de Caldo Litsky y se incuba 48 horas a 37 ºC aproximadamente. Para obtener recuentos, seguir la técnica NMP (9 tubos).

 INTERPRETACIÓN

Se consideran positivos los tubos que presentan en el fondo un precipitado de color púrpura- lila o naranja. Los Enterococos (E. faecalis, E. faecium) y los Estreptococos Fecales no Enterococos (S.bovis, S.equinus) son indicadores de contaminación fecal. Si en la muestra no hay coliformes fecales, es que la contaminación fué realizada semanas antes

 

Si desea más información sobre nuestros MEDIO  ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA LITSKY)  rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

Mac CONKEY AGAR

Mac CONKEY AGAR

PHARMACOPEA MEDIO H
Aislamiento y detección de Coliformes (USP, APHA, FDA, ISO 21150 cosméticos)

COMPOSICIÓN

Serratia marcescens (a las 10), E.coli (a las 12, a las 2 y a las  6).  Grupo KES (a las 4 y a las 8).

Serratia marcescens (a las 10), E.coli (a las 12, a las 2 y a las 6). Grupo KES (a las 4 y a las 8).

Peptona pancreática de gelatina 17,0 g
Triptona 1,5 g
Peptona de carne 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Sales biliares 1,5 g
Cloruro sódico 5,0 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar agar 13,5 g

(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 50 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar lentamente hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos ó frascos.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT073

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo, púrpura
PREPARADO: Estéril, Púrpura
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Excelente , Colonias rojas.
  • Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Correcto, colonia roja con precipitado.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Excelente, Colonias incoloras. Con respecto a TSA estandarizado, recuento 100%.
  • Shigella flexneri MKTA 12022, Bueno, colonias incoloras
  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, Colonias rojas con precipitado. Con respecto a TSA estandarizado, recuento 95%.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 y 250 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
NOTA: Medio selectivo y diferencial para el aislamiento de las enterobacterias y para la diferenciación entre los coliformes y las enterobacterias patógenas que no fermentan la lactosa con producción de gas (APHA, FDA, USP XXI). Su selectividad se debe a la acción del Cristal Violeta y de las sales biliares.

SIEMBRA

En estría sobre la placa preparada o el tubo de agar inclinado. Con los tubos 20 ml y frascos 100 ml se preparan placas por fusión del medio. Las Placas de Contacto se aplican sobre la superficie problema, un instante y sin mover, o bien se introducen en un aparato para control del aire. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 16 24 horas.

INTERPRETACIÓN

Los coliformes crecen con colonias rojas rodeadas por un halo de precipitación de las sales biliares, por acidificación. Las otras enterobacterias crecen con colonias incoloras. Proteus no invade la placa. E. coli forma colonias rojo violáceas con halo. Enterobacter aerogenes crece menor que E.coli y sin halo. Salmonella crece incolora.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Puntos críticos en la detección de Legionella pneumophila: GVPC y BCYE Broth

Puntos críticos en la detección de Legionella pneumophila: GVPC y BCYE Broth

La detección y enumeración de Legionella spp. y de Legionella pneumophila según Norma ISO 11731, tiene varios puntos críticos que la convierten en un protocolo problemático, que acaba en su no-detección por parte de numerosos laboratorios (sensibilidad media del 41,61% según los servicios intercomparativos SEILAGUA®), o al menos en la obtención de recuentos cuyo límite inferior de cuantificación es a menudo superior a nada menos que 200-800 ufc/litro, y en algunos laboratorios no acreditados, de hasta 105 ufc/litro. Aunque hemos plasmado estos puntos críticos en nuestro protocolo de detección y recuento de L.pneumophila en aguas (ref: PNT-AG-007), hemos decidido compartir con todos los laboratorios que lo deseen dichos problemas de detección:

El primero de dichos puntos críticos es la no-revitalización de las células de Legionella que, sobre todo tras los shocks de hipercloración y tratamientos preventivos actuales (motivados por los numerosos brotes de años anteriores), suelen encontrarse en estado subletal. Se busca Legionella en agua para evitar su proliferación en el aire (donde se convierte en patógena por respiración), cuando su hábitat real no es el aire ni siquiera es el agua: es el biofilm, de modo que las formas planctónicas son sólo formas de dispersión de la especie.

Por ello hace ya tiempo que MICROKIT diseñó una modificación del Agar GVPC en forma de caldo revitalizante selectivo y concentrado para añadir a 1 litro de agua de refrigeración, en kit de tubos para añadir a 1 l de agua con torundas de rascado de biofilm (ref: RPL330) o bien en tubos sin las torundas para añadir a 1 l de agua (ref: TPL016). Este medio resulta costoso por su elevada concentración de antibióticos, dado que se añade a 1 l de agua. Por ello MICROKIT ha rediseñado el Agar BCYE en forma de caldo revitalizante no selectivo y concentrado (ref: TPL017) para añadir a 1 litro de agua presuntamente potable o de baja carga microbiana, ya que la escasa flora acompañante en ellas permite revitalizar las Legionella sin necesidad de agentes selectivos.

Tanto el tubo de caldo GVPC como el tubo de caldo BCYE se emplean de la misma manera:

1-Añadir el contenido del tubo (heterogéneo por el carbón granulado que absorbe los residuos de desinfectantes, así como los metabolitos generados) recién agitado a 1 litro de muestra de agua, volver a agitar y dejar actuar durante 18-24 horas a temperatura ambiente (18-25°C). No incubar a 35-37 °C, o la posible población de Legionella se multiplicaría, impidiendo realizar posteriores recuentos de la flora original. El retraso de 1 día en el análisis se compensa holgadamente con la rapidez de crecimiento posterior en placa de las Legionella bien revitalizadas.

2-Verter el agua con cuidado de que no caiga el carbón, sobre los embudos de filtración y realizar el análisis siguiendo el protocolo habitual.

El uso del caldo revitalizante aumenta la sensibilidad en la detección de Legionella ¡hasta un 85%!, como se demuestra en los resultados de los servicios intercomparativos SEILAGUA®.
El segundo de los puntos críticos del protocolo habitual de Legionella es que se filtra 1 litro completo en una sola membrana, lo cual genera desconfianza sobre si la membrana habrá resistido o se habrá fisurado sin percibirse, pasando las células al líquido eluyente que no se analiza, y proporcionando por tanto resultados falsamente negativos o bajos. Y aunque no fuera así, el efecto estrés producido en las células que hayan quedado retenidas desde el principio en el filtro, tras un litro filtrado, degenera también en una importante merma de la sensibilidad. La solución es filtrar 4 tandas de 250 ml en sendas membranas. Aunque esto aumenta el trabajo y la cantidad de membranas y placas necesarias, asegura una muy superior recuperación, como demuestran los participantes de los servicios intercomparativos SEILAGUA® que aplican este consejo.

Para paliar un poco este aumento del gasto y ahorrar placas, podemos añadir dos membranas por placa de 90 mm si nuestro sistema de filtración no ocupa toda la superficie de la membrana y podemos así colocar las dos membranas solapadas sin que las dos zonas filtradas queden superpuestas. De este modo sólo necesitamos dos placas por litro de agua.

El tercer punto crítico que debemos controlar (y nos debemos ahorrar en aguas con poca flora acompañante, como son las aguas potables) es el shock ácido que elimina la flora competitiva pero también puede eliminar buena parte la viabilidad de la Legionella, sobre todo si se prolonga algunos segundos más de lo necesario.

El cuarto punto crítico es el medio de cultivo GVPC Agar, que resulta tan selectivo para especies distintas a la Legionella como incluso para la Legionella. De hecho, utilizando cepas cuantitativas certificadas (ref: MKTN12821), podemos verificar que los recuentos de Legionella en BCYE, se dividen por 10 (bajan un logaritmo) con las mismas cepas si empleamos GVPC. Por ello proponemos en aguas de baja carga microbiana, que de las dos placas empleadas por litro, siguiendo el consejo del punto 2, una sea de GVPC pero la otra sea de BCYE, que nos alertará si la selectividad del primero ha sido excesiva. Por otra parte no todas las placas preparadas de medios para Legionella funcionan correctamente, de hecho es muy difícil encontrar el truco por el cual un medio de la composición de la ISO 11731 se pueda convertir en un buen medio. Por ello recomendamos el uso de nuestras nuevas placas de GVPC Agar (ref: PPLS30) y de BCYE Agar (ref: PPLS31), de máxima recuperación, prescindiendo de medios deshidratados y de placas baratas. En cuanto al tercer medio donde no crece Legionella, nos parece un despilfarro utilizar BCYE-Cys o incluso Agar sangre, cuando para su no-crecimiento se puede usar el mismo Nutrient Agar que en recuento de aerobios, el YEA también llamado PCA-Water (ref: PPL901 en plaquita hermética de larga caducidad, TPL060Z en tubos para fundir y hacerse la placa por siembra en masa, RPL106 en frascos para fundir y hacerse 5-7 placas, DMT152 en polvo deshidratado).

El quinto punto crítico es la confirmación de las colonias por métodos serológicos, ya que la inmunofluorescencia ya nadie la usa y se ha puesto de moda utilizar látex, aunque todos sabemos que es la técnica inmunológica menos robusta y que más problemas de sensibilidad y de detección proporciona. Gracias a los avances desarrollados por empresas como la nuestra, en este caso de nuestros compatriotas Vircell, podemos ofrecer al fin una alternativa rápida, de muy bajo coste y máximo rendimiento: los inmunocromatogramas o rapidsticks Virapid Legionella (ref: VR002).

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ESTY BROTH

ESTY  BROTH

Agar selectivo para la enumeración de Streptococcus thermophilus en yogurt (IDF).

COMPOSICIÓN

  • Triptona                                            5,0 g
  • Peptona de soja                              5,0 g
  • Extracto de carne de vacuno        5,0 g
  • Extracto de levadura                      2,5 g
  • Glicerofosfato disódico                19,0 g
  • Acido ascórbico                               0,5 g
  • Sulfato Magnésico                        0,25 g

(Fórmula por litro)     pH final: 6,9 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 37 gramos en 900 ml de agua  bidestilada. Agitar  calentando hasta ebullición, para la completa disolución. Ajustar el volumen final a 1 litro y volver a agitar. Autoclavar a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 40-45 °C, añadir 50 ml de una solución estéril de lactosa al 10%, mezclar bien y verter en placas o tubos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT347

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, crema          PREPARADO: Estéril, crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 horas a 35 °C aproximadamente:

  • Streptococcus thermophilus MKTA 14486, Excelente.
  • Lactobacillus bulgaricus MKTA 11842, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 NOTA:

Medio recomendado para el crecimiento de cocos lácticos, que no crecen bien en otros medios por acidificarlos en exceso; este medio tiene una gran capacidad para tamponar el ácido producido por la fermentación de la lactosa, gracias al glicerofosfato disódico. El ácido ascórbico promueve el crecimiento de los estreptococos lácticos. Por eso se recomienda para el mantenimiento de los starters que producen ácidos. El glicerofosfato inhibe además el desarrollo de los Lactobacillus bulgaricus.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

 Inocular e incubar a 35°C aproximadamente, durante 24-48 horas.

 

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