SEGURIDAD ALIMENTARIA ANALISIS MICROBIOLOGICOS: DE LOS MEDIOS ISO A LAS SOLUCIONES MAS MODERNAS (MEDIOS Y KITS)
Las Normas ISO de microbiología alimentaria han sido redactadas por expertos y cada vez están más actualizadas
Sin embargo, 3 décadas de intercomparación de muestras alimentarias, nos han demostrado que muchas de ellas son muy poco robustas, es decir, dependiendo del laboratorio y del analista que las aplique, no detectan o no recuentan adecuadamente.
Este es un grave problema, sobre todo si no se es consciente del mismo, al no participar en este tipo de servicios intercomparativos que profundizan de verdad en los problemas encontrados, como es el caso de Seilalimentos
En Microkit cubrimos una triple faceta, tres puntos de vista radicalmente diferentes de la microbiología aplicada:
-Somos diseñadores y fabricantes de medios y de kits desde hace 37 años
-Somos también un laboratorio de análisis microbiológico desde hace 7 años
-Y además somos coordinadores muy veteranos de ensayos intercomparativos (27 años)
Esta triple visión retroalimenta soluciones a partir de los problemas reales encontrados en el día a día, como ningún otro proveedor tiene el privilegio de detectar
Y de aqui es de donde surgen tantas ideas sin necesidad de brainstormings y tantas soluciones que no es que contradigan las Normas ISO, sino que las complementan:
Problema 1 en microbiología de alimentos y su solución: EL EFECTO MATRIZ
Una de las primeras evidencias de que algo no funcionaba bien en microbiología alimentaria eran los pobres resultados obtenidos en los primeros servicios Seilalimentos por parte de los participantes (rendimiento medio de 6 puntos sobre 10, eran 4 errores (falsos positivos o falsos negativos) de cada 10 parámetros microbiológicos, un 40% de microorganismos mal detectados.
Tras varios años de pruebas, ensayos y errores, surgió nuestra solución actual (patentada), que sin ser la panacea en el 100% de alimentos, mejora drásticamente los resultados hasta la actual nota media de los participantes de >9/10:
Cambiar el Agua Peptonada tamponada clásica por un caldo que además neutralice los conservantes (naturales y artificiales) y además los metabolitos generados en el enriquecimiento por parte de la microbiota acompañante. Hemos bautizado esta solución «Buffered Peptone Neutralizing Water (BPNW)» o «Agua de Peptona Tamponada Neutralizante (APTN)» y es una satisfacción ver como ya los numerosos laboratorios que la han implantado, obtienen una tremenda mejora en sus resultados globales. Aumentando drásticamente la certeza en sus resultados.
Problema 2 en microbiología de alimentos y su solución: Staphylococcus aureus nos está engañando
Probablemente el parámetro menos robusto de todos los de alimentos, según llevamos 27 años observando en seilalimentos, donde resulta más fácil acertar si este microorganismo está o no presente en un alimento, tirando una moneda al aire, que con el método clásico. Y todo por el efecto interferente de la matriz sobre las diferentes cepas.
Tras numerosos intentos de solucionarlo con medios cromogénicos, tanto por la imperfección del medio de aislamiento (Baird Parker, BP) como por la subjetividad en la interpretación de los kits confirmativos (látex coagulasa y rpf), llegamos a la meta gracias al Agar Baird Parker Mannitol con Yema de huevo y Telurito Potásico (BPMY Agar).
No imaginábamos que la simple adición de este azúcar al medio Baird Parker a la concentración adecuada (y sin la sal del MSA) pudiera subir nada menos que un 50% la eficiencia de este parámetro, hasta el techo del 100%.
Las colonias típicas son negras, tengan o no reborde hialino y halo de lecitinasa, y produzcan o no viraje de rojo a amarillo alrededor (viraje: fermentación del mannitol, sin viraje: asimilación del mismo, que elimina los falsos negativos del medio BP sin mannitol).
En cuanto a la confirmación, el descubrimiento del reactivo FF (Fosfatasa alcalina Fluorescente) y su fabricación en goteros para añadir a las colonias sospechosas, remata la certeza del BPMY Agar cuando crecen colonias típicas, sin el derroche que supondría en todas las muestras negativas, añadirlo a todas las placas.
Problema 3 en microbiología de alimentos y su solución: La dispersión en el recuento de hongos
Otro de los parámetros problemáticos en alimentos es sin duda el recuento de hongos (levaduras y mohos).
La dispersión de resultados entre los diferentes laboratorios, y entre los diferentes analistas del mismo laboratorio, es la mayor de todos los parámetros microbiológicos.
Al preguntarnos por el motivo, la solución surgió a gritos desde una simple fotografía del caldo de dilución: las esporas de hongos son hidrófugas: flotan en pocos segundos tras agitar (negras de Aspergillus niger en la fotografía)
De este modo, aquí la solución es tan simple como agitar inmediatamente antes de cada dilución y de cada siembra, para evitar que ese gradiente que se forma a las diferentes profundidades del pipeteo, en menos de medio minuto, afecte a los resultados de recuento
Hay muchos otros problemas descubiertos en nuestro día a día (al menos uno por cada microorganismo) y las respectivas soluciones que hemos ido desarrollando para todos ellos a lo largo de estas décadas.
Algunas soluciones, como hemos visto, no requieren cambio de medios, de kits ni de técnicas: sólo usar el sentido común una vez se conocen.
Consúltenos dichas soluciones para los parámetros donde vea que su rendimiento es mejorable, en microkit@microkit.es