Análisis de Salmonella en alimentos: de los grandes equipos automatizados a una alternativa más robusta, rápida y económica
La detección de Salmonella spp. continúa siendo uno de los análisis microbiológicos más importantes en la industria alimentaria. Se trata además de uno de los pocos parámetros en los que, cuando el método está bien diseñado y correctamente aplicado, los distintos sistemas suelen ofrecer resultados muy concordantes.
Como coordinadores de programas de ensayos intercomparativos en microbiología de alimentos durante más de dos décadas, hemos podido observar la evolución de las estrategias analíticas empleadas por cientos de laboratorios. Esta experiencia nos ha permitido identificar claramente qué soluciones funcionan, cuáles presentan limitaciones y qué características debe reunir un método realmente fiable.
Dos grandes tendencias
Con el paso de los años se han consolidado dos enfoques muy diferentes.
Por una parte, los laboratorios de las grandes industrias alimentarias han incorporado equipos automatizados de elevado coste basados en tecnologías como la impedancia, la inmunofluorescencia o la PCR. Su objetivo es obtener resultados fiables reduciendo el tiempo de respuesta respecto al método ISO de referencia.
Por otra parte, la mayoría de laboratorios de menor tamaño, así como numerosos laboratorios de servicios externos, han optado por diferentes variantes de la ISO 6579, precisamente por la extraordinaria robustez que ha demostrado este método de referencia.
Cuando la rapidez compromete la microbiología
Afortunadamente son pocos los laboratorios que utilizan determinados sistemas cuya estrategia metodológica resulta difícil de justificar desde un punto de vista microbiológico.
En nuestros programas de intercomparación hemos comprobado repetidamente que algunos de estos métodos producen resultados erróneos con una frecuencia preocupante. Probablemente fueron incorporados confiando exclusivamente en validaciones externas, sin comprobar previamente su comportamiento con las propias matrices alimentarias del laboratorio.
El problema fundamental radica en intentar sembrar en masa un caldo de enriquecimiento directamente sobre el medio sólido. Desde el punto de vista microbiológico esto supone depositar millones de microorganismos que originan incontables microcolonias invisibles, dificultando seriamente la detección de Salmonella y favoreciendo la aparición de falsos negativos.
Por fortuna, este tipo de soluciones representan una excepción dentro del sector.
Rapidez, coste y fiabilidad: el equilibrio no siempre es sencillo
Los grandes sistemas automatizados ofrecen generalmente muy buenos resultados, pero requieren inversiones importantes tanto en equipamiento como en consumibles.
Además, aunque se consideran métodos rápidos, existe una realidad biológica imposible de evitar: Salmonella necesita un periodo previo de enriquecimiento, normalmente de unas 24-48 horas, antes de poder ser detectada con fiabilidad. Por ello, la diferencia real de tiempo respecto a otros métodos robustos es muy inferior de lo que en ocasiones se supone.
En el otro extremo, las variantes comerciales de la ISO 6579 mantienen una elevada fiabilidad, pero suelen comercializarse en forma de kits completos de medios preparados, lo que incrementa considerablemente el coste por análisis.
La propuesta de MICROKIT: Salmoquick®
Con el desarrollo de Salmoquick®, MICROKIT se planteó un objetivo muy concreto: reunir la robustez del método de referencia con la rapidez de los métodos modernos, eliminando al mismo tiempo el principal inconveniente de ambos, su elevado coste.
El resultado es un sistema que permite realizar el análisis completo desde sólo 2,90 € por muestra (sin incluir la confirmación de las colonias sospechosas), obteniendo resultados en aproximadamente 36 horas.
Durante su validación multicéntrica en veinte tipos diferentes de alimentos, Salmoquick alcanzó una sensibilidad del 100 % y una especificidad del 100 %, es decir:
- Ningún falso negativo en muestras contaminadas con distintas cepas de Salmonella.
- Ningún falso positivo en muestras inoculadas con microorganismos interferentes.
Cuatro avances respecto a la estrategia clásica de la ISO 6579
La robustez de Salmoquick se basa en una estrategia microbiológica cuidadosamente diseñada que incorpora cuatro mejoras fundamentales:
1. Pre-enriquecimiento revitalizador y enriquecimiento selectivo simultáneos
Al igual que otros métodos rápidos de alto rendimiento, ambas funciones se realizan en una única etapa, reduciendo el tiempo total del análisis sin comprometer la recuperación de células lesionadas.
2. APTN (BPNW): un caldo realmente adaptado a las muestras actuales
El caldo APTN/BPNW no solo es peptonado y tamponado, sino que además neutraliza conservantes, aditivos y metabolitos producidos por la microbiota acompañante. Esta característica exclusiva mejora notablemente la recuperación de Salmonella en alimentos complejos.
3. Un caldo selectivo alternativo al sistema Rappaport
Salmoquick sustituye el tradicional caldo Rappaport por SS Broth, evitando las limitaciones conocidas del primero, responsable de falsos negativos en determinadas cepas de Salmonella y en todas las especies de Shigella. Conviene recordar que esta última también debe investigarse legalmente en diversos tipos de alimentos.
4. Aislamiento sobre los mejores medios disponibles
La estrategia final combina el clásico agar XLD con uno de los medios cromogénicos de mayor rendimiento actualmente disponibles, aumentando la capacidad de diferenciación de las colonias sospechosas.
Más información
En este folleto se explican con mayor profundidad estas ventajas: https://www.microkit.es/pdf/Salmoquick-2016.pdf
Y en este otro se explica a fondo el modo de empleo y lectura de resultados:
https://www.microkit.es/fichas/SALMOQUICK%20UE%202-2019.pdf?v=2025
Si desea conocer los precios actualizados o recibir información técnica adicional, por ejemplo la validación de este kit, puede solicitarla en microkit@microkit.es.
En MICROKIT desarrollamos medios de cultivo desde hace 37 años, pero antes que fabricantes seguimos siendo microbiólogos. Por eso cada nuevo producto nace para resolver problemas reales observados diariamente en nuestro propio laboratorio y en cientos de laboratorios participantes en nuestros programas de intercomparación.