Análisis de Listeria en alimentos: de los grandes equipos automatizados a una alternativa más robusta, rápida y económica
La detección de Listeria monocytogenes continúa siendo uno de los análisis microbiológicos más importantes en la industria alimentaria. Se trata además de uno de los pocos parámetros en los que, cuando el método está bien diseñado y correctamente aplicado, los distintos sistemas suelen ofrecer resultados muy concordantes.
Como coordinadores de programas de ensayos intercomparativos en microbiología de alimentos durante más de dos décadas, hemos podido observar la evolución de las estrategias analíticas empleadas por cientos de laboratorios. Esta experiencia nos ha permitido identificar claramente qué soluciones funcionan, cuáles presentan limitaciones y qué características debe reunir un método realmente fiable.
Dos grandes tendencias
Con el paso de los años se han consolidado dos enfoques muy diferentes.
Por una parte, los laboratorios de las grandes industrias alimentarias han incorporado equipos automatizados de elevado coste basados en tecnologías como la impedancia, la inmunofluorescencia o la PCR. Su objetivo es obtener resultados fiables reduciendo el tiempo de respuesta respecto al método ISO de referencia.
Por otra parte, la mayoría de laboratorios de menor tamaño, así como numerosos laboratorios de servicios externos, han optado por diferentes variantes de la ISO 11290, precisamente por la extraordinaria robustez que ha demostrado este método de referencia desde que integra el Agar de los italianos Ottaviani & Agosti.
Rapidez, coste y fiabilidad: el equilibrio no siempre es sencillo
Los grandes sistemas automatizados ofrecen generalmente muy buenos resultados, pero requieren inversiones importantes tanto en equipamiento como en consumibles.
Además, aunque se consideran métodos rápidos, existe una realidad biológica imposible de evitar: Listeria necesita un periodo previo de enriquecimiento, normalmente de unas 24 a 48 horas, antes de poder ser detectada con fiabilidad. Por ello, la diferencia real de tiempo respecto a otros métodos robustos es muy inferior de lo que en ocasiones se supone.
En el otro extremo, las variantes comerciales de la ISO 11290 mantienen una elevada fiabilidad, pero suelen comercializarse en forma de kits completos de medios preparados, lo que incrementa considerablemente el coste por análisis.
La propuesta de MICROKIT: Listeriquick®
Con el desarrollo de Listeriquick®, MICROKIT se planteó un objetivo muy concreto: reunir la robustez del método de referencia con la rapidez de los métodos modernos, eliminando al mismo tiempo el principal inconveniente de ambos, su elevado coste.
El resultado es un sistema que permite realizar el análisis completo desde sólo 3,13 € por muestra (sin incluir la confirmación de las colonias sospechosas), obteniendo resultados en aproximadamente 36 horas.
Durante su validación multicéntrica en veinte tipos diferentes de alimentos, Salmoquick alcanzó una sensibilidad del 95% (exactamente igual que el método de referencia ISO 11290) y una especificidad del 100 %, es decir:
- 5% de falsos negativos exclusivamente en muestras de pollo contaminadas con distintas cepas de Salmonella. Es el estándar máximo de falsos positivos que permite la comunidad científica en un método de detección y es idéntico a los resultados obtenidos siguiendo al pie de la letra la ISO 11290.
- Ningún falso positivo en muestras inoculadas con microorganismos interferentes.
Cuatro avances respecto a la estrategia clásica de la ISO 11290
La robustez de Listeriquick se basa en una estrategia microbiológica cuidadosamente diseñada que incorpora cuatro mejoras fundamentales:
1. Pre-enriquecimiento revitalizador y enriquecimiento selectivo simultáneos
Al igual que otros métodos rápidos de alto rendimiento, ambas funciones se realizan en una única etapa, reduciendo el tiempo total del análisis sin comprometer la recuperación de células lesionadas.
2. APTN (BPNW): un caldo realmente adaptado a las muestras actuales
El caldo APTN/BPNW no solo es peptonado y tamponado, sino que además neutraliza conservantes, aditivos y metabolitos producidos por la microbiota acompañante. Esta característica exclusiva mejora notablemente la recuperación de Listeria monocytogenes en alimentos complejos.
3. Un caldo selectivo alternativo al sistema Fraser
Salmoquick sustituye el tradicional caldo Fraser por el también clásico LEB Broth de Lovett, evitando las limitaciones conocidas del primero, con sus complejos suplementos.
4. Aislamiento sobre los mejores medios disponibles
La estrategia final emplea el Agar cromogénico que lo cambió todo en la detección de Listeria monocytogenes, el O&A, aumentando la capacidad de diferenciación de las colonias sospechosas.
Más información
En este folleto se explican con mayor profundidad estas ventajas:
https://www.microkit.es/pdf/LISTERIQUICK.pdf
Y en este otro se explica a fondo el modo de empleo y lectura de resultados:
https://www.microkit.es/fichas/LISTERIQUICK-UE-2-2019.pdf?v=2023
Si desea conocer los precios actualizados o recibir información técnica adicional, por ejemplo su validación, puede solicitarla en microkit@microkit.es.
En MICROKIT desarrollamos medios de cultivo desde hace 37 años, pero antes que fabricantes seguimos siendo microbiólogos. Por eso cada nuevo producto nace para resolver problemas reales observados diariamente en nuestro propio laboratorio y en cientos de laboratorios participantes en nuestros programas de intercomparación.