Detección y recuento de estreptococos lácticos: M17 Agar

Los estreptococos lácticos son bacterias clave para la elaboración de derivados lácteos, como el queso y el yogur

Aunque tradicionalmente se clasificaban dentro del género Streptococcus (Ej: Streptococcus thermophilus), muchas especies lácticas se han reclasificado en el género Lactococcus (Ej: Lactococcus lactis)

Son Gram positivos, anaerobios facultativos, que producen ácido láctico mediante la fermentación de azúcares, principalmente lactosa. Son bacterias catalasa negativas.

Se reconocen al microscopio por formar cadenas de cocos.

M-17 AGAR

Detección y enumeración de estreptococos lácticos

COMPOSICIÓN

Triptona 2,50 g
Digerido pépsico de carne 2,50 g
Digerido papaínico de soja 5,00 g
Extracto de levadura 2,50 g
Extracto de carne 5,00 g
Lactosa 5,00 g
Glicerofosfato sódico 19,00 g
Sulfato de Magnesio 0,25 g
Acido ascórbico 0,50 g
Agar-agar 15,00 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,1

PREPARACIÓN

Disolver 57 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar agitando hasta ebullición para su completa disolución.
Repartir en tubos o frascos.
Autoclavar a 115 ºC durante 20 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y
OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT087

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, crema
PREPARADO: Estéril, Crema
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:
Enterococcus faecalis WDCM00087, Correcto, Puntiforme.
Streptococcus uberis MKTC 994 T, Correcto.
Streptococcus mutans MKTA25175**, Correcto.
Lactobacillus delbruckii MKTA9649**, Escaso.
Escherichia coli WDCM00013. Correcto.
**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos
la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Sembrar en profundidad 1 ml de muestra y de su serie de diluciones decimales.
Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 48 horas para Str. thermophilus y a
30 ºC aproximadamente, durante 48-72 horas para los estreptococos mesófilos.
Los Streptococcus termófilos y mesófilos forman colonias de 1-2 mm, en
función de su densidad en la placa.Confirmar al microscopio que se trata de
diplococos o estreptococos Gram (+).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos
según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la
basura.

https://www.microkit.es/fichas/M-17-STREPTOCOCCUS-AGAR.pdf

Consulte los precios actualizados del M17Agar de MICROKIT en pedidos@microkit.es

CLOSTRIDIUM PERFRINGENS LACTOSE AGAR BASE (LENA) para aislamiento selectivo de Clostridium perfringens en alimentos según ISO 15213-3:2024

Medio idéntico a lo indicado en esta Norma ISO:

COMPOSICION

Enzimatic digest of casein                  10,0 g

Meat extract                                        10,0 g

Sodium chloride NaCl                        5,0 g

Lactose C₁₂H₂₄O₁₂                              10,0 g

Phenol Red C₁₉H₁₄O₅S                       0,1 g

Agar-agar                                           15 g

(Fórmula en g/L)

Ajustar a pH final tras autoclavado: 7,3 ± 0,2

PREPARACION                    

1-Disolver 50,1 g  de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando para su total homogeneización. Dispensar en tubos o frascos herméticos y esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 min. No sobrecalentar. El color final del medio es  naranja. Se puede hacer stock de este LENA base esterilizado, manteniendo hasta 4 semanas a 5ºC.

2-Llevar hasta 44-47 ºC, 100 mL de LENA base DMT295 y añadir 1 mL de una solución de Neomycina sulfato (250 mg) SMT015 esterilizada por filtración (por 0,2 µ) en 10 mL de agua destilada estéril (para 1 L de LENA). Esta solución antibiótica se puede mantener a 5ºC hasta 4 semanas en tubos o frascos herméticos.

3-Añadir a los dos anteriores 5 mL de emulsión estéril de yema de huevo SBH010. Agitar hasta que los 3 ingredientes queden homogéneos

4-Dispensar en placas Petri estériles. Las placas así preparadas se pueden mantener en tuppers de cierre hermético (para que no pierdan humedad) hasta 4 semanas a 5ºC.

USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITAR ANTES DE USAR PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS eventuales gradientes de densidad de los COMPONENTES.

PRESENTACIÓN

-Medio deshidratado LENA BASE, botes 500 g, CÓDIGO: DMT295

-Emulsión de yema de huevo estéril CÓDIGO SBH010

-Neomycina NO estéril en viales de 250 mg, para añadir a 10 mL de agua destilada estéril/vial y elaborar 1 L de medio final/vial, Caja 40 viales CÓDIGO: SMT015. Si se usa SMT015 NO estéril:

-Agua destilada estéril en Tubos de 10 mL CÓDIGO: TPL001+

-Filtros estériles de carcasa para jeringa (lúer), 0,2 µm y 30 mm de diámetro, CÓDIGO: VHU237

-Jeringas estériles 20 mL para los filtros VHU237, CÓDIGO: VPL089

-Neomycina polvo estéril, para añadir a 10 mL de agua destilada estéril/vial y elaborar 1 L de medio final/vial ahorrando VHU237 y VPL090, CÓDIGO SMT015+I

CONTROL DE CALIDAD

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo de color rosado PREPARADO: Estéril, color rojo coral (foto página anterior).

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO  24 horas a 46ºC aprox:

Clostridium perfringens WDCM00007 Colonias amarillas con halo amarillo  (ver foto)

E.coli WDCM00012      Completamente inhibido

Bacillus subtilis WDCM00003 Colonias amarillas sin halo de precipitación

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Seguir las directrices de la Norma ISO 15213-3:2024

Emplear también el Rapid perfringens Medium BASE (RPM): Ver  DMT293

Tambien hay que emplear otros medios clásicos según ISO 15213-3:2024: TSC Agar DMT175 con su suplemento D-Cicloserina SMS252, Columbia Blood Agar DMT020 con suplemento de sangre, SIM Agar DMT112 y reactivos Indol Kovacs SBH056, fosfatasa ácida -cancerígena- la cual imaginamos permitirán sustituir por MUP SMT009 como en la búsqueda de C.perfringens en aguas, por demostrarse como método equivalente)

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-LACTOSE-AGAR-BASE-LENA.pdf

Ver tambien el caldo C.PERFRINGENS RAPID MEDIUM BASE (RPM):

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-RAPID-MEDIUM-BASE-RPM.pdf

Consulte precios actualizados en pedidos@microkit.es

CONTROL MICROBIOLÓGICO DE ALIMENTOS: OPTIMIZACIÓN DE TIEMPOS Y DE TÉCNICAS.

LA INNOVACIÓN TE LLEVA A UN NIVEL SUPERIOR

MAIL 1 ALIMENTOS:                                                   CERTEZA EN TUS RESULTADOS

La diferencia entre sólo analizar y vivir con certeza está en la forma en que trabajas

¿Alguna vez te has parado a pensar que muchas de las decisiones que tomas en tu laboratorio quizá no las estás tomando tú al 100%… sino ese “piloto automático” que todos tenemos?

Ese subconsciente no es otra cosa que la grabación que han ido escribiendo en tu mente —con su mejor intención, eso sí— padres, maestros, jefes, compañeros… e incluso la propia sociedad y normativa. Un auténtico “matrix comunitario” que, en realidad, no elegiste tú.

La gran pregunta es:

¿Quieres seguir conformándote con lo que hace la mayoría (ISO), aunque los resultados en tus análisis intercomparativos no siempre te convenzan?

¿O prefieres tener la máxima seguridad de que tus resultados son correctos?

A eso, en MICROKIT, lo llamamos “vivir con certeza”

Durante las próximas semanas vamos a publicar otras 5 entradas como ésta,

donde compartiremos los 5 problemas más habituales que hemos detectado en laboratorios de microbiología de alimentos…

y, lo más importante: las soluciones que mejor han funcionado en quienes ya los resolvieron.

Hablamos desde una posición privilegiada, porque en

MICROKIT llevamos años asumiendo esta triple faceta:

Dicho de otra manera: ¿los árboles no te dejan ver el bosque? En MICROKIT hemos trepado hasta más arriba de muchos árboles, y ahora tenemos la vista panorámica, como un águila, del bosque completo.

Queremos compartir contigo esta visión privilegiada para que, al final de este recorrido, seas tú quien decida:

¿Seguir como hasta ahora, o dar el paso hacia unos resultados analíticos optimizados?

Estos son los 5 problemas más comunes que abordaremos juntos:

1. Efecto matriz en microbiología de alimentos ¿de verdad es tan importante que hasta provoca la mayoría de falsos negativos en el mundo?

2. Staphylococcus aureus ¿Es el Baird Parker –o el rpf- la solución que necesito?

3. ¿Por qué en el recuento de Enterobacterias a veces obtengo menor resultado que en el recuento de Coliformes, cuando eso es una incongruencia?

4. ¿Por qué en el recuento de hongos se da la máxima dispersión de resultados entre los laboratorios participantes en los servicios intercomparativos?

5. Servicios intercomparativos: ¿Por qué sigo con el de siempre, si no tiene en cuenta el efecto matriz, ni compara claramente los resultados según metodologías, ni compara medios de cultivo, ni mejora las herramientas estadísticas convencionales y hasta a veces me saca de z-scores cuando estoy convencido que soy el que mejor he enumerado (¿eso sucede?)?

El poder de la innovación

Muchos de los métodos oficiales que nos quieren imponer han sido redactados como si, durante los últimos 100 años, todo el esfuerzo de investigación para facilitar la vida a los laboratorios de microbiología de alimentos… no hubiera existido.

Nos quieren devolver al siglo XX

Y no son sólo palabras:

Aquí tienes los datos, tras más de 200 rondas intercomparativas y 25 años de experiencia, que demuestran cómo quienes aplican nuestra metodología obtienen los mejores resultados:

https://www.medioscultivo.com/mejora-tus-resultados-analiticos-gracias-a-nuestra-innovacion/

¿De verdad ya estás usando las herramientas adecuadas para tu trabajo actual?

Solicita la información que necesites en microkit@microkit.es

¡Hasta la próxima entrega en Abril-2026!

Cepa de Lactobacillus paracasei

Este microorganismo se encuentra de forma natural en la vagina humana.

Es una bacteria inocua (Riesgo Biológico Gr.1), es más: muy beneficiosa para todo ser humano

Su ingesta como probiótico restablece el equilibrio de la microbiota y activa naturalmente el sistema inmunológico.

También es un fermento láctico que proporciona al queso un aroma exquisito, mucho mejor que el de los fermentos industriales habituales

En MICROKIT lo ofrecemos en lentículas cuantitativas para QC de medios como MRS o Cromokit LAC Agar, y también lo incluimos en Seilalimentos para intercomparación de laboratorios

En la actualidad, mientras se redacta este artículo, disponemos de un lote de  lentículas con (7,68 ± 2,68) x 10⁵  ufc/lentícula en MRS Agar y (7,78 ± 2,38) x 10⁵  en Cromokit  LAC Agar

Su variabilidad dentro del lote es, en CV%: 23,31 % en MRS y 21,59 %  en Cromokit LAC Agar

Y su consumo preferente es 12-2026, por lo que se elaborará un nuevo lote hacia el verano, para que tenga una caducidad cercana a 7-2028.

Solicite precios, concentraciones y caducidades actualizados en microkit@microkit.es

De todos modos, si su uso es como cepa cualitativa, la caducidad suele poderse extender durante décadas mientras se mantenga congelada entre -5 y -20ºC

En la foto destacada resaltamos como su cultivo en tubo hermético proporciona mucho mejor crecimiento que la placa, ya que es microaerófilo

Puede ver el manejo de nuestras cepas en lentículas, en el folleto:

https://microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

Y si lo prefiere, este es el video que lo explica todo mejor:

https://www.youtube.com/watch?v=4WJ8FQl6GIE&t=153s

Agradecemos sus likes y sus comentarios debajo del video, que ayudan de forma contundente a que más microbiólogos conozcan las ventajas de estas cepas y puedan ver todos los videos que les interesen y que hemos preparado para todos Uds.

Solicite el listado actualizado de cepas, donde podrá consultar la concentración y caducidad actualizadas de estas y otras cepas, así como los precios, en microkit@microkit.es

Método de detección de Yersinia enterocolitica en alimentos

Yersinia enterocolitica, método de detección en alimentos mediante CIN Agar y varias pruebas confirmativas, rápidas y definitivas

CIN YERSINIA AGAR (BASE)

Aislamiento de Yersinia enterocolitica s/ISO 10273:2003 tras enriquecer adecuadamente el alimento

COMPOSICIÓN

Extracto de carne                    20 g/L

Extracto de levadura                2 g/L

Mannitol                                  20 g/L

Piruvato sódico                        2 g/L

Cloruro sódico                         1 g/L

Sulfato magnésico                    0,010 g/L

Desoxicolato sódico                 0,5 g/L

Rojo neutro                              0,03 g/L

Cristal Violeta                          0,001 g/L

Agar‑agar                                 12 g/L

pH final: 7,4 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 28,75 g en 500 ml de agua destilada, calentando hasta hervir y agitando. NO AUTOCLAVAR.

Enfriar a 50 ºC y añadir 1 vial de Yersinia Supplement SBH021 (Cefsulodina 0,0015 g/l, Irgasan 0,004 g/l, Novobiocina 0,0025 g/l final de medio), reconstituido con 5 ml de agua destilada estéril.

Mezclar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT036

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Rosa   PREPARADO: Estéril, Rosado

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 Aplicando el método ISO 10273 o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado, 24 h a 30°C aprox:

Yersinia enterocolitica, MKTA27729**, Bueno, colonias translúcidas con centro  color rosa oscuro.

Escherichia coli WDCM00013, Inhibido total o parcialmente.

Staphylococcus aureus WDCM00034, Inhibido total o parcialmente.

Proteus mirabilis MKTA 43071**, Inhibido.

Pseudomonas aeruginosa WDCM00025, Inhibido.

Streptococcus faecalis WDCM00210, Inhibido.

**Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN

MEDIO DESHIDRATADO BASE Y SUPLEMENTOS.

NOTA

El Cefsulodin Irgasan Novobiocin Agar (CIN) es un medio selectivo para aislamiento de Yersinia enterocolítica en muestras clínicas y alimentos. Es el más idóneo para aislamiento selectivo de Y. enterocolítica. Por el sodio desoxicolato, cristal violeta e Irgasan, son inhibidas las bacterias Gram (+), algunas Gram (‑) y las enterobacterias. Sólo algúnas cepas de Citrobacter freundii, Serratia liquefaciens y Enterobacter aglomerans pueden crecer sobre CIN Agar, con un aspecto similar al de Yersinia enterocolítica.

SIEMBRA

Sembrar en estría para conseguir colonias aisladas Incubar a 22‑25 ºC aproximadamente durante 48 horas. Si se desea enriquecer la muestra, incubarla previamente durante 28 días a 4 ºC aproximadamente en tubos de agua peptonada tamponada.

INTERPRETACIÓN

Yersinia enterocolítica crece con colonias rosa‑púrpura, rodeadas de un borde transparente (colonias en «ojo de buey»). El diámetro de la colonia varía de unas cepas a otras, pero permanece constante para cepas del mismo serotipo.

CONFIRMACIÓN      

Para confirmar en menos de 4 horas Yersinia enterocolitica desde las colonias en ojo de buey en el agar CIN:

1. Oxidasa: Negativa (-). (Para diferenciar de Aeromonas, que también puede crecer en CIN y es Positiva).
2. Urea (Test de ureasa rápido): Positivo (+). Yersinia es una productora potente de ureasa; el viraje a fucsia ocurre en 1-2 horas si sembramos varias colonias en un microtubo con 0,5 mL de caldo Urea.
3. Ornitina (ODC): Positiva (+, violeta). Hacer caldo ODC con Extracto de levadura 5 g/L, L-Ornitina 10 g/L, Glucosa (como disparador del metabolismo) 0,5 g/L, y Púrpura de Bromocresol como indicador 0,01 g/L, ajustar a pH final 6,0. Inocular varias colonias en un microtubo (con 0.5 ml de caldo). Cubrir el caldo con 2 ó 3 gotas de Aceite de Vaselina o Parafina estéril (la descarboxilación de la ornitina requiere condiciones de anaerobiosis)
4. Kligler (KIA) o TSI: Lectura A/A (Pico amarillo / Fondo amarillo) debido a la fermentación de sacarosa y glucosa, sin gas y sin H₂S.

Solicite precios actualizados de todos estos productos en microkit@microkit.es