CICLOHEXIMIDA, también bien dicho: CICLOEXIMIDA (CEX)
CICLOHEXIMIDA: el aditivo inverso al CLORANFENICOL (que elimina bacterias), para evitar que crezcan eucariotas (hongos, algas…)
Existe un reactivo que permite hacer más selectivos los medios de cultivo
En este caso es el inverso al CLORANFENICOL, que sirve para que en los medios para hongos (levaduras y mohos) no crezcan procariotas (bacterias):
se trata de la CICLOHEXIMIDA, que impide el crecimiento de las células eucariotas (Hongos frente a bacterias, Algas frente a Cianobacterias…)
Aún así existen eucariotas resistentes a ciertas dosis de Cicloheximida, por ejemplo la levadura Candida albicans
DOSIS Y PRESENTACIÓN
La dosis de uso habitual para añadir a un medio y evitar el crecimiento de eucariotas está entre 0,05 y 0,5 g/l de medio final.
Dado que no es estéril, debe esterilizarse por filtración con jeringas y filtro de carcasa de 0,22-0,45 µm (Ref: VHU237)
Es termolábil, debe añadirse al medio una vez autoclavado y enfriado a 47ºC aprox, justo antes de solidificar en la placa.
En MICROKIT lo ofrecemos en viales de 1 g, cantidad suficiente para elaborar 2 L de medio (Ref: SKM200)
También lo ofrecemos ya esterilizado por rayos Gamma, en vial de 500 mg para 1 L de medio (Ref: SKM255)
La escasez de este suplemento ha provocado serias carencias en el mercado; nosotros tenemos el suministro asegurado porque nos lo fabrica un cliente de toda la vida de la industria farmacéutica , en sus fermentaciones a escala piloto.
Se acaba el agar-agar microbiológico, a menos que pongamos freno al actual despilfarro en placas de 90 mm, para usos donde hay otras opciones
¿Te has preguntado cuántas placas de 90 mm llenas de medios con agar-agar microbiológico, se gastan en un solo día en todo el mundo?
¿Y sabías que el único agar-agar microbiológico puro, procede exclusivamente de las costas del Cantábrico español? En concreto Cantabria y Asturias, un poco en el N de Galicia, y nada en País Vasco,
donde está prohibido recolectar el alga marina de la que procede, lo cual sirve de reservorio. Nada en costas vecinas como Portugal o Francia.
Porque todo se lo debemos a una sola especie de alga marina: Gelidium sesquipedale.
Y si has oído hablar de otro agar de Marruecos, procede de mezcla de algas, por lo que es nefasto en medios de cultivo.
Y el agar de otra alga marina Gelidium en México, es diferente, de máxima transparencia, pero se produce en muy pequeñas cantidades.
De Asia procede otro agar de otras algas, no debería llamarse así porque no gelifica a 47ºC sino a 55ºC, como el agar alimentario procedente de otra alga (Gracilaria sp.pl.), por lo que no es válido en siembras en masa («quema» los microorganismos que buscamos) y aun así es el más consumido en países donde todavía no usan cepas cuantitativas de control:
no son conscientes de este problemón de la siembra en masa , aunque pueden sospechar que algo no anda bien, por los abultamientos y grumos que aparecen en sus placas.
Sí, nuestro Cantábrico abastece prácticamente todo el único agar microbiológico de alta calidad del mundo.
Y ya hace casi una década que hemos sobrepasado el punto máximo de capacidad de producción, no hay suficiente Gelidium sesquipedale para todos los fabricantes de medios de cultivo del mundo.
¿Recuerdas un año muy sonado porque no había suficiente para fabricar medios de cultivo y subió de precio considerablemente? Ese fue el primer año de su carencia, pero los siguientes han sido igual, aunque no ha seguido sonando porque las marcas baratas de medios lo solucionaron mezclando con el alimentario.
Y el problema cada año va a más, con más consumidores cada vez, dada la escalada sin freno de la población mundial.
Soluciones a este problema de escasez de agar
Algunos fabricantes de medios de cultivo (de Asia) lo han «solucionado» usando su agar alimentario, pero no advierten del problema de reducción de los recuentos en las siembras en masa.
Se está intentando extraer un nuevo agar microbiológico de otras especies de Gelidium cultivadas en Asia, pero los resultados hasta ahora no son buenos: demasiada turbidez en el gel.
La mayoría de fabricantes de medios lo han solucionado usando agar marroquí de mezcla,
o deliberadamente mezclando ellos mismos agar Cantábrico con agar alimentario:
cuanto mayor sea la % de éste, más baratos serán sus medios, pero más alta será su temperatura de gelificación y menor % de recuperación de microorganismos obtendrán en los recuentos.
Ojo que hablamos de 0 colonias en VRBG con 80 colonias en medio bueno, por ejemplo.
Aunque suponemos que en MICROKIT no somos los únicos que seguimos usando 100% agar procedente de Gelidium sesquipedale español,
sí que somo los únicos que lo certificamos (al menos hasta la fecha de edición de este artículo)
La otra solución: el cambio de chip
Tenemos todos la solución en nuestras manos. Y no es una solución difícil.
Es más, es una solución que ADEMÁS, soluciona otros problemas diversos del laboratorio de microbiología que quizá el día a día no te ha dejado percibir:
1-Problema de espacio: cada vez necesitamos más neveras, almacenes, estufas y bidones de residuos biológicos.
2-Problema de caducidad: las placas una vez preparadas duran unos pocos días, semanas a lo sumo, porque el medio se concentra al evaporarse su agua; lo tenemos tan asumido que nos parece algo normal. Fíjate en las pilas de placas, aún precintadas, como la de arriba y la de abajo tiene menos medio (están más secas) que las del centro de la pila.
3-Problema de accidentes de la pilas de placas: si se cae, se contaminan, y las tapas van por un lado, las bases por otro… pérdida de trazabilidad tras la siembra.
4-Problema de marcado de cada placa: por ese mismo problema 3, tienes que marcar cada placa en el reborde convexo de la base, porque si marcas en su base, luego tu letra interfiere con la visión de las colonias (pero la mayoría de placas ya vienen marcadas de fábrica en la base)
5-Aparte del problema medioambiental de abuso del alga Gelidium sesquipedale, sumado al abuso de plástico.
La solución para el agar: usar Plaquis® en siembras por estría
en siembras para recuentos esta solución no sirve, has de seguir usando placas de 90 mm, ya que has de extender 0,1-0,33 mL de caldo en su amplia superficie
o mezclar 1 mL en masa, pero…
√para Filtración de membrana ya todo el mundo lo asume, ya nadie usa placas de 90 mm,
√ y sin embargo ¿cuántas siembras por estría se siguen haciendo con semejante despilfarro de espacio y de este componente de los medios de cultivo?
Aislamiento de colonias de patógenos por estría tras enriquecimiento en Plaquis®
Las Plaquis® solucionan los 5 problemas antes mencionados de las placas clásicas:
1-Problema de espacio: donde caben 20 placas de 90 mm caben 60 Plaquis® ¡el triple! No exageramos: usamos la misma caja de venta para 20 placas que para 60 Plaquis®. Ahorra espacio de almacén, de estufas, de bidones de residuos…
2-Problema de caducidad: las Plaquis® al ser herméticas, no pierden agua: duran 6 meses
3-Problema de accidentes de la pilas de placas: si se cae una pila, las tapas de las Plaquis® no se abren: ni se contaminan, ni pierdes la trazabilidad de cada muestra
4-Problema de marcado de cada placa: las Plaquis® tienen un reborde en su base para que escribas los datos de la muestra, el medio que es…
5-Usando Plaquis® minimizarás el problema medioambiental de abuso del alga Gelidium sesquipedale, ¡ahorras 2/3 de lo que generas actualmente! Sumado al ahorro de plástico.
Olvida la comodidad de tener sólo un tipo de placas, cuando estamos ahogando la única fuente de agar-agar adecuado del mundo,
aquél con el que los grandes microbiólogos diseñaron tantos y tantos medios de cultivo clásicos.
Usa placas de 90 mm en siembras para recuento, pero usa Plaquis® en siembras por MF y por estría tras enriquecimiento, en la búsqueda de patógenos
Tenemos disponibles todos los medios que necesitas en formato Plaquis®
Aquí tienes el video en el que te explicamos las ventajas de las Plaquis®:
Servicio Intercomparativo completo sobre Challenge Test en cosméticos,
con las 5 cepas «ISO» y además, si lo desea, con otras 5 de los patógenos emergentes
A raíz de las solicitudes recibidas por parte de algunos clientes de España, México y Colombia…
nos estamos planteando coordinar una ronda intercomparativa de Challenge Test (CHT) en cosméticos.
Si la experiencia resulta satisfactoria para todos los participantes, nuestra intención sería repetirla de forma anual.
Nos ilusiona especialmente esta posibilidad porque creemos que podemos ofrecer un servicio de gran calidad, apoyándonos en tres pilares muy sólidos:
Experiencia consolidada: contamos con 20 años organizando intercomparativos en microbiología de cosméticos, alimentos, aguas y ambientes interiores. Sabemos perfectamente cómo planificar, coordinar y ejecutar este tipo de ensayos con rigor y fiabilidad.
Estabilidad excepcional de nuestros inóculos microbianos: nuestras lentículas de cepas desecadas y estabilizadas (10⁵–10⁸ CFU, con una precisión intra-lote muy alta: CV% generalmente <25%) permiten flexibilidad total en la fecha de inicio del análisis. No es necesario comenzar el mismo día ni siquiera la misma semana en que les llegue la muestra; cada laboratorio puede esperar a un momento más conveniente, incluso tras periodos de alta carga de trabajo. Además, las muestras se envían sin congelación y han demostrado mantener su orden de magnitud incluso en exportaciones transatlánticas con trámites aduaneros.
Sólido conocimiento en CHT: gracias a nuestra filial KosmLab y a la autoría de 3 PRTs en los últimos 15 años, cada uno más optimizado que el anterior, hemos identificado y minimizado los puntos críticos del proceso.
Nuestro objetivo es garantizar que el análisis siga siendo meticuloso y útil también en T14 y T28.
Para asegurar que la ronda sea útil tanto para laboratorios ISO 17025, como para laboratorios de autocontrol en fábricas y externos no acreditados,
utilizaremos las 5 cepas específicas de la ISO 11930 y Farmacopea.
Aspergillus niger brasiliensis WDCM 00053
Candida albicans WDCM 00054
Staphylococcus aureus WDCM 00032
E.coli WDCM 00196
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026
Además, para uso de forma voluntaria, incluiremos también otras 5 cepas de interés por su relevancia en retiradas de mercado o por su especial pertinencia técnica:
Burkholderia cepacia equivalente a la colección USA 25416
Pluralibacter gergoviae salvaje (nativa, in house) aislada de un champú contaminado en España y confirmada por secuenciación
Enterococcus faecalis WDCM 00087
Pseudomonas putida WDCM 00117
Zygosaccharomyces rouxii equivalente a la colección USA 8383
Todas ellas se suministrarán a concentraciones superiores a 10⁵ por inóculo, y algunas incluso superiores a 10⁸ (la concentración y precisión exactas se comunicará en el envío).
Planeamos lanzar la primera ronda con estas 10 cepas y la matriz cosmética estéril en Mayo de 2026
y dar tiempo a los participantes para que puedan realizar sus análisis desde Mayo hasta primeros de Septiembre de 2026,
que es la fecha límite para enviarnos los resultados.
Solicite información y precios actualizados, o apúntese desde ya, en microkit@microkit.es
Vogel Johnson Agar, el gran olvidado para Staphylococcus aureus… ¡y puede ser la solución!
Medios más comúnmente usados para S.aureus
Si preguntamos en cualquier laboratorio qué medio usan para detectar Staphylococcus aureus, la mayoría dirán Baird Parker (industria alimentaria, cosmética y aguas) o Mannitol Salt Agar (industria farmacéutica).
Pocos emplean Vogel Johnson Agar, a pesar de ser un medio diferente a los otros dos, podría decirse que combina algo de ambos y puede ser un gran aliado.
El gran problema de S.aureus
El problema principal de los Staphylococcus aureus es su polimorfismo: que sus colonias son de aspecto muy diferente según la cepa y según crezcan desde diferentes muestras (matrices). Ya la ISO 6888 de alimentos lo reconoce y viene a decir algo así como: «las colonias típicas en Baird Parker son negras con reborde traslúcido y halo en el medio, pero… algunos S.aureus y en algunas muestras crecen sin halo, otros sin el reborde y otros de diferentes tonos de color gris en vez de negro»
De modo que el Baird Parker no sólo genera ingentes cantidades de falsos positivos a partir de cepas puras (no sólo de otros Gram positivos, también de Gram negativos e incluso de levaduras) sino que el efecto matriz tiene una influencia muy superior a la de cualquier otro medio de cultivo de los habituales para cualquier otro microorganismo: colonias diferentes según sea el producto en el que hemos aislado la cepa.
Hasta el punto que en los intercomparativos de alimentos, aguas y cosméticos, según sea la cepa y la matriz elegidas, será más fácil acertar si está o no presente, jugando a pares y nones, que usando este medio de cultivo.
El rpf es una modificación del Baird Parker que todavía crea mayor confusión.
Selectividad de los diferentes medios de cultivo para S.aureus
El Baird Parker basa su supuesta selectividad en la glicina y el cloruro de Litio, por lo que es muy fácil encontrar falsos positivos:
El Mannitol Salt Agar basa su tremenda (excesiva) selectividad en una gran proporción de cloruro sódico (75 g/L), por lo que en él, lo que es fácil encontrar son falsos negativos, aunque no faltan falsos positivos como Staphylococcus saprophyticus, que forma también colonias amarillas:
Y el Vogel Johnson Agar basa su supuesta selectividad en los dos mismos ingredientes que el Baird Parker (la glicina a menor proporción y el cloruro de Litio a la misma proporción), por lo que también crecen en él muchos falsos positivos. Pero su gran ventaja es que combina la prueba del telurito potásico (colonias negras) del Baird Parker con la prueba de la fermentación del Mannitol (halo amarillo en medio rojo) del Mannitol Salt Agar, eliminando el exceso de selectividad de éste:
De modo que en este microorganismo, aparte del medio que usemos, hay que confirmar siempre cualquier colonia más o menos típica.
-Test de la Coagulasa
La prueba distintiva más habitual es la coagulasa (ej. látex MICROKIT KWD094), propia de S.aureus pero no de otros estafilococos.
Aunque no todas las colonias forman lo que deberían formar: grumos y fondo acuoso en S.aureus y aspecto lechoso sin grumos en los otros estafilococos.
Efectivamente, muchas veces encontramos grumos con fondo lechoso y la prueba no nos ha servido para nada.
Además hay otros microorganismos no estafilococos, que crecen falsamente positivos en Baird Parker, y que son coagulasa positivos, liando aun más el asunto.
Al menos la ventaja de la coagulasa es que es la única prueba de respuesta inmediata (30 segundos)
-Test de la DNA-asa y de la termonucleasa
Otra prueba supuestamente concluyente es la DNA-asa y la DNA-asa termoestable o termonucleasa, también propias de S.aureus pero no de otros estafilococos:
Pero lo mismo que sucede con la coagulasa, hay falsos positivos de microorganismos que no son estafilococos y son DNA-asa y/o termonucleasa positivas. Y en este caso, la prueba no es inmediata como el látex de la coagulasa, por lo que encima nos hace perder más tiempo.
-Otra prueba que supuestamente no debería fallar: la fosfatasa
Los medios cromogénicos para S.aureus se basan en esta prueba, y en función del sustrato cromogénico elegido, las colonias de S.aureus serán lilas, magenta, azul… mientras las de otros estafilococos y otros microorganismos serán de otros colores (sobre todo verdes y blancas)
Pero lo mismo que sucede en los medios clásicos, decepciona ver los resultados al emplear diferentes cepas de S.aureus… y sobre todo sin van combinadas con diferentes matrices (distintas muestras de alimentos, cosméticos…): el polimorfismo de S.aureus vuelve a despistarnos por completo, con placas multicolor: colonias lilas rodeadas de un potente verde que enmascara el lila, lilas sobre fondo verde, blanco-liláceas con halo verde y hasta hermosas «placas arco-iris» con toda la transición entre el lila y el verde…
-La solución: las galerías enzimáticas
La única solución que hemos encontrado hasta ahora es disponer de las galerías enzimáticas RAPID-STAPH (MICROKIT Ref: R8311009) y usarlas ante cualquier colonia crecida en BPX19Y Agar (lo malo es si nos despistamos y se nos acaban, ya que al traerlas desde USA bajo pedido para dar su máxima caducidad, tardan varios días en llegar):
Lo bueno de estas galerías ante cualquier otra, es que sólo tardan 4 horas en darnos los resultados desde la colonia (esa misma tarde), y encima la mayoría de veces sale un código que sí que corresponde con una especie de estafilococo (no llega a resultados aberrantes o indeterminados). Lo cual no se puede decir de otras galerías.
Veamos este tercer medio tan olvidado y prometedor, más a fondo:
VOGEL-JOHNSON-AGAR
Agar para el aislamiento rápido de Staphylococcus aureus en medicamentos,
alimentos, muestras ambientales, manipuladores y muestras clínicas.
Pharmacopea USP XXI
COMPOSICIÓN
Glicina 10,0 g
Mannitol 10,0 g
Triptona 10,0 g
Fosfato dipotásico 5,0 g
Cloruro de Litio 5,0 g
Extracto de levadura 5,0 g
Rojo fenol 0,025 g
Agar-Agar 15,0 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,2 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 60 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta
ebullición, para la completa disolución. Autoclavar a 121°C durante 15
minutos. Enfriar a 45-50°C y añadir 6 ml de Telurito Potásico al 3,5%
(SPL016). Mezclar bien y verter en placas.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR,
PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES
GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE
BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Rosado PREPARADO: Estéril, Rojizo
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 horas a 35°C aproximadamente: Staphylococcus aureus WDCM00034, Excelente, colonias negras con halo amarillo (su gran ventaja: combina las propiedades del Mannitol Salt Agar con las del Baird Parker). PR > 0,5, en concreto >50-150% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Staphylococcus epidermidis WDCM00036, Correcto, colonias traslúcidas o
negras, sin halo amarillo. Salmonella typhimurium WDCM00031, Inhibido. Escherichia coli WDCM00013, Inhibido.
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO CODIGO: DMT343.
NOTA:
Este medio permite el rápido crecimiento de Staphylococcus aureus, de forma
diferencial, por lo que es ideal para control de manipuladores y para estudios
de microbiología farmacéutica, alimentaria y clínica donde se necesitan
resultados rápidos. Staphylococcus aureus reduce el telurito potásico a negro.
La fermentación del manitol queda indicada por un halo amarillo alrededor de
sus colonias negras. El telurito potásico, el cloruro de litio y la glicina inhiben
buena parte de la flora acompañante.
SIEMBRA E INTERPRETACIÓN
Sembrar en estría e incubar a 35°C aproximadamente, durante 24 y 48 horas.
En las primeras 24 horas, sólo los estafilococos coagulasa positivos son
capaces de crecer, con diminutas colonias negras rodeadas de un halo amarillo
que contrasta con el color rojo del medio. A las 48 aparecen los demás
estafilococos coagulasa negativos, sean manitol positivos o manitol negativos: S.epidermidis, S.saprophiticus y S.intermedius crecen con colonias diminutas,
grises o negras, sin halo amarillo; otros estafilococos coagulasa positivos
forman colonias negras, con o sin halo amarillo según fermenten o no el
manitol. Existe una correlación entre fermentadores de manitol y patógenos.
Los S.aureus coagulasa positivos tienen a las 48 h grandes colonias negras
rodeadas de halo amarillo, que a menudo han virado todo el medio a amarillo.
Confirmar las colonias con el test de la coagulasa (KWD094) y con las galerías RAPID-STAPH (MICROKIT Ref: R8311009)
De modo que este medio puede ser la solución definitiva, dado que S.aureus crece con colonias negras (telurito potásico) con halo amarillo (fermentación del Mannitol) y sin las desventajas de la alta concentración de cloruro sódico (demasiado selectivo) propias del Mannitol Salt Agar; ni de la escasa selectividad + especificidad del Baird Parker.
Una vez estudiado su comportamiento, como siempre con los medios para Staphylococcus aureus, la teoría y la práctica distan demasiado. Ver la entrada de este newsletter:
Yeast Extract en polvo estéril: potencia tus medios con el aporte real de vitaminas
El extracto de levadura es uno de los ingredientes más valiosos en los medios de cultivo gracias a su amplio perfil nutricional y a su capacidad para estimular un crecimiento celular robusto.
Su eficacia no es teoría: numerosos estudios demuestran un incremento claro en la formación de colonias cuando se combina extracto de levadura con peptonas, frente a medios formulados únicamente con mezclas de peptonas.
¿Por qué es tan importante el extracto de levadura?
A diferencia de otras fuentes nutricionales como las peptonas, el extracto de levadura destaca por ser la materia prima más completa en vitaminas utilizada en microbiología.
De modo que hablar de extracto de levadura es sinónimo de hablar de vitaminas.
Este aporte es clave para el desarrollo de múltiples microorganismos, especialmente para aquellos más exigentes o sensibles a carencias vitamínicas.
Sin embargo, existe un desafío bien conocido:
la mayoría de vitaminas son termolábiles, y durante el autoclavado suelen desnaturalizarse, reduciendo su capacidad de favorecer el crecimiento celular.
Aun así, los medios suplementados con extracto de levadura autoclavada, muestran mejores tasas de crecimiento que aquellos que no lo contienen.
Imagínese entonces lo que será un medio de cultivo con extracto de levadura fresca, estéril pero no autoclavada, con todas sus vitaminas intactas.
La solución de MICROKIT: Extracto de Levadura en Polvo Estéril
Pensando en este problema común en los laboratorios, MICROKIT presenta su innovador Extracto de Levadura en Polvo Estéril, esterilizado mediante rayos gamma, un método que no altera las vitaminas ni el resto de nutrientes.
Esto permite incorporarlo después del autoclavado y enfriamiento del medio, justo antes del plaqueado si se trata de agar.
El resultado: un auténtico “factor doping” que aumenta la fertilidad del medio y mejora notablemente la recuperación de cepas exigentes, reduciendo falsos negativos y acelerando el crecimiento en microorganismos tanto aerobios como anaerobios.
Ventajas para investigación y microbiología aplicada
Recuperación más realista y fiable de microorganismos.
Menos falsos negativos debidos a la ausencia de alguna vitamina que es imprescindible para el microorganismo en cuestión.
Crecimiento más rápido y eficiente.
Amplía las posibilidades para laboratorios de investigación y para fermentaciones industriales que requieren condiciones nutricionales ajustadas.
Formato seguro y práctico: Tubotes de 5 g
Para evitar contaminaciones al abrir envases de 500 g o de 5 Kg, el extracto de levadura estéril se presenta en Tubotes para 1 L de medio, con 5 g cada uno (Ref. DPAYE5), cajas de 20 o de 200 tubotes.
En MICROKIT llamamos «Tubote» a los tubos con tapón con silicagel antihumedad, los típicos de las vitaminas efervescentes. Es una presentación sumamente práctica para los medios de cultivo deshidratados en formato c.s.p. 1L.
Este formato minimiza riesgos de falsos positivos (que podrían aparecer al abrir múltiples veces un formato mayor para usos secuenciales a lo largo del tiempo).
Además facilita la dosificación:
Muchos medios requieren 2,5 g/L: puede usar aprox. medio Tubote para cada litro.
Otros medios emplean 2, 3, 4 ó 5 g/L: puede añadir el Tubote completo sin afectar negativamente el resultado—al contrario, una mayor disponibilidad de nutrientes beneficia al crecimiento microbiano (siempre que el exceso no suponga un choque osmótico: no es el caso).
Si necesita otra cantidad de gramos por Tubote, podemos fabricarle lotes de 200 u a medida.
Si necesita presentaciones mayores (fermentaciones industriales y piloto) podemos fabricarle lotes en botes de 100 g, 500 g…
Si necesita otro nutriente esterilizado sin autoclavar, consúltenos tambien: tenemos posibilidad de fabricarle lotes de al menos 200 Tubotes, o bien botes de 100, 500 g, bolsas de 5 Kg, etc.
Aumente el rendimiento de sus medios deshidratados
El nuevo Extracto de Levadura en Polvo Estéril de MICROKIT es una herramienta clave para cualquier laboratorio que busque mejorar la fertilidad de sus medios y obtener resultados más fiables.
UREA AGAR Y UREA BROTH: 2 medios de cultivo (uno sólido y otro líquido) para detectar la actividad ureásica de los microorganismos
CHRISTENSEN UREA AGAR (BASE)
Actividad ureásica en Proteus y otros microorganismos (UNE-EN ISO
6579:2003, UNE 12824, UNE 34-818:1985, UNE 34-554:1983, UNE
6785:2001, ISO 6340:1995
COMPOSICIÓN
Peptona de carne 1,000 g
Glucosa 1,000 g
Cloruro sódico 5,000 g
Fosfato disódico 1,200 g
Fosfato monopotásico 0,800 g
Rojo fenol 0,012 g
Agar-agar 15,000 g
(Fórmula por litro)
pH final: 6,8 ± 0,1
PREPARACIÓN
Disolver 24 g de medio en 950 ml de agua bidestilada. Calentar, agitando,
hasta ebullición, para la total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante
20 minutos. Enfriar hasta 50 ºC y añadir 50 ml de urea en solución estéril 40%
(SBH019). Repartir en tubos y dejar enfriar en posición inclinada. No
recalentar.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y
OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO COD: DMT132
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Naranja
PREPARADO: Estéril, Naranja
Medio para la detección de la producción de Ureasa por Proteus, Klebsiella, y
ciertas levaduras como Cryptococcus.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACION DE RESULTADOS
Inocular la colonia en la mitad anterior de la superficie (la mitad posterior sirve
de control negativo). Incubar durante 2-24 h a 35 ºC ó 37 ºC aproximadamente.
Los microorganismos que hidrolizan la urea producen iones amonio que viran
el medio a rojo, por alcalinización: Proteus en vez de Salmonella-Shigella.
El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Abril-2020
Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es
Extracto de levadura 1,10 g
Fosfato monopotásico 0,80 g
Fosfato disódico 1,20 g
Rojo fenol 0,04 g
Dextrosa 1,00 g
Cloruro Sódico 5,00 g
(Fórmula por litro)
pH final: 6,8 ± 0,1
PREPARACIÓN
Disolver 9 g de medio en 950 ml de agua destilada.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
Enfriar y añadir 50 ml de solución estéril de urea al 40% (SBH019).
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y
OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR
DESHIDRATADO CODIGO: DMT133
Rosa: Ureasa + Naranja: Ureasa –
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Rosáceo
PREPARADO: Estéril, Naranja
PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACION DE RESULTADOS
Medio utilizado para diferenciar Proteus de otras enterobacterias (APHA). El
medio vira a rojo-púrpura en presencia de Proteus que, dada su actividad
ureásica, alcaliniza el sustrato. Otros microorganismos ureasa positivos son
mucho más lentos en virar el medio. Inocular tres colonias en 2 ml de medio e
incubar a 37 ºC aproximadamente en baño termostático durante 10 minutos, 1
hora y 2 horas. Si el medio vira a rosa, no es Salmonella-Shigella sino Proteus.
El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Abril-2020
Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es
NEUTRALIZING AGENTS FARMACOPEA PARA AÑADIR A BUFFERED ClNa PEPTONE SOLUTION pH7 (Farmacopea) EN MEDICAMENTOS CON CONSERVANTES
NEUTRALIZING AGENTS FARMACOPEA
COMPOSICIÓN
Lecitina de huevo 3,0 g
Peptona 1,0 g
Cloruro sódico 4,3 g
Histidina 1,0 g
DihidrogenoFosfato potásico 3,6 g
HidrogenoFosfato disódico 7,2 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7.0 ± 0.1
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR,
PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES
GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO:
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
PRESENTACIÓN:
MEDIO DESHIDRATADO COD: DMT302
FRASCOS CON BUFFERED ClNa PEPTONE SOLUTION Y NEUTRALIZING AGENTS FARMACOPEA
PREPARACIÓN
Disolver 20,1 gramos de medio en 1 l de agua bidestilada que contenga entre 1 y 30 gramos de polisorbato 80 (SDA071) y 16,1 g de Buffered ClNa Peptone Solution pH 7,0 Pharmacopea (DMT301). Dispensar en tubos o en frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15-20 minutos. El color final del medio es paja.
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…) DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema PREPARADO: Paja
CONTROL DE CRECIMIENTO 16-48 h a 37°C aproximadamente:
Salmonella abony WDCM00029, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente. Tras 45 minutos a 25°C, resiembra en TSA estandarizado* y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas.
E. coli WDCM00013, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Pseudomonas aeruginosa MKTA** 9027, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Bacillus subtilis WDCM00003, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Candida albicans WDCM00054, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
SIEMBRA E INTERPRETACIÓN
Para realizar la suspensión inicial ó 1ª dilución, en general hay que añadir 25 g
de muestra en 225 ml de medio (o bien 10 g de muestra en 90 ml de medio),
pero tener en cuenta que hay matrices muy inactivadoras, que requieren
diluciones mayores (1:100) o muestras mayores (50 g, 500 g…). Las demás
diluciones decimales se hacen añadiendo 1 ml de la dilución anterior en 9 ml
de medio, y así sucesivamente.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
NEUTRALIZING DILUENT SCDLP20-FCDLP20 PARA DILUCIONES EN COSMÉTICOS
NEUTRALIZING DILUENT SCDLP20-FCDLP20: Diluyente para realizar diluciones (y posteriores recuentos) en muestras con propiedades antimicrobianas, según las Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de
aerobios), ISO 16212 (recuento de hongos), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans).
La Normas ISO de microbiología cosmética mencionan este caldo como diluyente para cosméticos.
Triptona 20,00 g
Lecitina 5,00 g
Polisorbato 20 40,00 ml
(Fórmula en g/l)
pH: 7,6 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver los 40 ml de polisorbato-20 en 960 ml de agua bidestilada precalentada a 49 ± 2 °C. Añadir la triptona con lecitina, calentando unos 30 minutos hasta obtener una solución
homogénea. Agitar y distribuir en tubos o en frascos. Autoclavar 15 minutos a
121°C. Ajustar el pH a 7,3 ± 0,2
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. DESHIDRATADO CODIGO: DMT203
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar el laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema
PREPARADO: Estéril, Ámbar, con fondo precipitado.
CONTROL DE CRECIMIENTO 48-72 h a 37°C aproximadamente, o bien a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):
Salmonella abony WDCM00029, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente. Tras 45 minutos a 25°C, resiembra en TSA estandarizado* y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas.
E. coli WDCM00013, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente. Staphylococcus aureus WDCM00033, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Bacillus subtilis WDCM00003, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
Candida albicans WDCM00054, Excelente, tras inocular <100 ufc e incubar 18 h a 37°C, turbidez muy evidente.
*El que cumple con recuperación superior al 70 % (92-125 %) con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres debidas a las cepas y a las diferentes proporciones de flora acompañante.
PRESENTACION:
MEDIO DESHIDRATADO
SIEMBRA E INTERPRETACIÓN
Añadir 1-25 gramos de muestra en 10-225 ml de medio. Agitar y dejar reposaractuar 20-30 minutos a temperatura ambiente. Realizar las ulteriores diluciones
decimales en este mismo medio, volviendo a dejar actuar 20-30 minutos a
temperatura ambiente. Para realizar recuentos, sembrar 1 ml de cada dilución
en masa en los agares adecuados, sin previo enriquecimiento.
NOTA:
Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporciona, aunque nos veamos obligados a fabricar también este medio con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología
cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán, sin el menor convencimiento de que este medio sea el más adecuado para el fin que se propone.
El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es
KAA AGAR PARA DETECTAR Y ENUMERAR ENTEROCOCOS FECALES-ESTREPTOCOCOS GRUPO D EN ALIMENTOS, AGUAS Y OTRAS MUESTRAS
Los estreptococos fecales (y los enterococos fecales) son indicadores de contaminación con aguas residuales a más largo plazo que E.coli/Coliformes.
De modo que conservan mejor el chivato de contaminación, al perdurar más tiempo en el agua, los alimentos y demás matrices.
En aguas se buscan con Slanetz-Bartley Agar y KF Agar, aunque cada vez más laboratorios ahorran tiempo en su detección usando el agar Rapid BEA de MICROKIT (un Bilis Esculina Azida Agar con la Bilis muy bien equilibrada y estandarizada), que ha sido validado para uso directo en su detección en sólo 18 h, en vez de las 48 h típicas que necesitan los otros medios: https://www.microkit.es/fichas/BILE%20ESCULIN%20AZIDE%20AGAR%20(BEA)%20RAPID.pdf
El KAA es otro medio clásico rápido, de composición muy similar al Bilis Esculina Azida Agar (cambiando la Bilis por Kanamicina) y de uso más típico en alimentos.
KAA AGAR
Confirmación de estreptococos fecales grupo D Lancefield (CENAN) en
patatas, verduras, otros alimentos, aguas…
COMPOSICIÓN
Triptona 20,00 g
Extracto levadura 5,00 g
Cloruro sódico 5,00 g
Citrato disódico 1,00 g
Esculina 1,00 g
Citrato férrico-amónico 0,50 g
Azida sódica 0,15 g
Kanamicina 0,02 g
Agar-agar 15,00 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 48 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar agitando hasta ebullición.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR PARA HOMOGENEIZAR LOS EVENTUALES GRADIENTES DE COMPOSICIÓN A LO LARGO DE LA ALTURA DEL BOTE.
PRECAUCIÓN:
La Azida Sódica es tóxica (y explosiva en contacto con plomo). Evitar el contacto con la piel y las mucosas (y no desechar por las cañerías).
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Amarillo.
PREPARADO: Estéril, Ambar, iridiscente, fluorescente bajo luz UVA de 366 nm.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24-48 h a 37°C aproximadamente: Enterococcus faecalis WDCM00087, Correcto, colonias diminutas, blancoamarillentas, con halo negro, en sólo 24 h. Con respecto a TSA, recuento 77-
133 %, pero de forma selectiva. Incertidumbre debida a la cepa y a las
diferentes proporciones de flora acompañante. Enterococcus faecium WDCM00178, Correcto, colonias diminutas, blancoamarillentas, con halo negro, en sólo 24 h. Con respecto a TSA, recuento 79-
260%, pero de forma selectiva. Incertidumbre debida a la cepa y a las
diferentes proporciones de flora acompañante. E. coli WDCM00013 Inhibido. Bacillus subtilis WDCM00003, Inhibido. Staphylococcus aureus WDCM00033, Inhibido.
NOTA:
Kanamicina Aesculina Azida Agar es un medio para la detección y
aislamiento de estreptococos grupo D de Lancefield en muestras de alimentos y
aguas (CENAN). La inclusión de la Kanamicina en el medio deshidratado hace
de este medio el más cómodo del Mercado Internacional, ya que nos ahorramos
respirar la desagradable Bilis de otros medios de uso similar. Ver tambien el
nuevo cromogénico Enterococcus Cromokit Agar para aguas marinas.
SIEMBRA
Partiendo de tubos positivos de KAA Broth, inocular 0,1 ml en la superficie de
placas preparadas a partir de tubos o de frascos refundidos, o del medio
deshidratado. Extender con triángulo de vidrio (VRR154) o asas de Digralsky
desechables (VCL155). Aplicar la placa de contacto a la superficie problema
un instante y sin mover o bien colocarla en un aparato para control de aire.
Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 24 h.
INTERPRETACIÓN
Las colonias rodeadas de un halo negro son presuntos estreptococos del grupo
D de Lancefield. El ennegrecimiento global del medio indica presencia de gran
número de diminutas colonias.
Confirmar con Catalasa (KMT299), ya que sus colonias son catalasa negativas (no burbujean). Para efectuar recuentos, sembrar directamente 1 ml de la solución madre y sus diluciones decimales en profundidad en placas.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es
HPC-Heterotrophic Plate Count Agar, medio para recuento total de heterotrofos
HPC Agar para recuento total de heterotrofos en aguas potables, de baño y farmacéuticas, mediante siembra en masa o por la técnica de filtración de membrana, con máxima recuperación.
Gelatina 25,0 g
Pancreatic Digest of casein 20,0 g
Agar-Agar 15,00 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 60 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada .
Agitar, calentando hasta ebullición, hasta la total homogeneización.
Añadir 10 ml de glicerol y mezclar bien.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
MANTENER EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
PRESENTACIÓN
DESHIDRATADO CODIGO: DMT198
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige.
PREPARADO: Estéril, Blanquecino.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 72 h a 37°C
aproximadamente (o bien 5 días a Tª ambiente 21-28°C aproximadamente):
Escherichia coli WDCM00013, Correcto. Con respecto a TSA, recuento 121-
135%
Enterococcus faecalis WDCM00087, Correcto. Con respecto a TSA, recuento
151-166 %.
Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Correcto. Con respecto a TSA,
recuento 98-136%.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Correcto. Con respecto a TSA, recuento
109-131 %.
Aeromonas hydrophila MKTA49141**, Correcto. Con respecto a TSA,
recuento >100 %.
**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos
la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1 ml en profundidad o incluso 0,1 ml en superficie, o aún mejor una
membrana en superficie por la que se hayan filtrado 1-100 ml de muestra.
Duplicar la muestra. Incubar una placa 5-7 días a 22 ºC aproximadamente y la
otra 3 días a 30-37 ºC aproximadamente. Contar todas las colonias. La flora
termófila se asocia a procedencia humana. La mesófila al proceso de
depuración.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 2010, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es
