KAA AGAR PARA DETECTAR Y ENUMERAR ENTEROCOCOS FECALES-ESTREPTOCOCOS GRUPO D EN ALIMENTOS, AGUAS Y OTRAS MUESTRAS
Los estreptococos fecales (y los enterococos fecales) son indicadores de contaminación con aguas residuales a más largo plazo que E.coli/Coliformes.
De modo que conservan mejor el chivato de contaminación, al perdurar más tiempo en el agua, los alimentos y demás matrices.
En aguas se buscan con Slanetz-Bartley Agar y KF Agar, aunque cada vez más laboratorios ahorran tiempo en su detección usando el agar Rapid BEA de MICROKIT (un Bilis Esculina Azida Agar con la Bilis muy bien equilibrada y estandarizada), que ha sido validado para uso directo en su detección en sólo 18 h, en vez de las 48 h típicas que necesitan los otros medios: https://www.microkit.es/fichas/BILE%20ESCULIN%20AZIDE%20AGAR%20(BEA)%20RAPID.pdf
El KAA es otro medio clásico rápido, de composición muy similar al Bilis Esculina Azida Agar (cambiando la Bilis por Kanamicina) y de uso más típico en alimentos.
KAA AGAR
Confirmación de estreptococos fecales grupo D Lancefield (CENAN) en
patatas, verduras, otros alimentos, aguas…
COMPOSICIÓN
Triptona 20,00 g
Extracto levadura 5,00 g
Cloruro sódico 5,00 g
Citrato disódico 1,00 g
Esculina 1,00 g
Citrato férrico-amónico 0,50 g
Azida sódica 0,15 g
Kanamicina 0,02 g
Agar-agar 15,00 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 48 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar agitando hasta ebullición.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR PARA HOMOGENEIZAR LOS EVENTUALES GRADIENTES DE COMPOSICIÓN A LO LARGO DE LA ALTURA DEL BOTE.
PRECAUCIÓN:
La Azida Sódica es tóxica (y explosiva en contacto con plomo). Evitar el contacto con la piel y las mucosas (y no desechar por las cañerías).
PRESENTACIÓN:
DESHIDRATADO CODIGO: DMT060; TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, PLAQUITAS HERMETICAS MF.
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Amarillo.
PREPARADO: Estéril, Ambar, iridiscente, fluorescente bajo luz UVA de 366 nm.
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24-48 h a 37°C aproximadamente:
Enterococcus faecalis WDCM00087, Correcto, colonias diminutas, blancoamarillentas, con halo negro, en sólo 24 h. Con respecto a TSA, recuento 77-
133 %, pero de forma selectiva. Incertidumbre debida a la cepa y a las
diferentes proporciones de flora acompañante.
Enterococcus faecium WDCM00178, Correcto, colonias diminutas, blancoamarillentas, con halo negro, en sólo 24 h. Con respecto a TSA, recuento 79-
260%, pero de forma selectiva. Incertidumbre debida a la cepa y a las
diferentes proporciones de flora acompañante.
E. coli WDCM00013 Inhibido.
Bacillus subtilis WDCM00003, Inhibido.
Staphylococcus aureus WDCM00033, Inhibido.
NOTA:
Kanamicina Aesculina Azida Agar es un medio para la detección y
aislamiento de estreptococos grupo D de Lancefield en muestras de alimentos y
aguas (CENAN). La inclusión de la Kanamicina en el medio deshidratado hace
de este medio el más cómodo del Mercado Internacional, ya que nos ahorramos
respirar la desagradable Bilis de otros medios de uso similar. Ver tambien el
nuevo cromogénico Enterococcus Cromokit Agar para aguas marinas.
SIEMBRA
Partiendo de tubos positivos de KAA Broth, inocular 0,1 ml en la superficie de
placas preparadas a partir de tubos o de frascos refundidos, o del medio
deshidratado. Extender con triángulo de vidrio (VRR154) o asas de Digralsky
desechables (VCL155). Aplicar la placa de contacto a la superficie problema
un instante y sin mover o bien colocarla en un aparato para control de aire.
Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 24 h.
INTERPRETACIÓN
Las colonias rodeadas de un halo negro son presuntos estreptococos del grupo
D de Lancefield. El ennegrecimiento global del medio indica presencia de gran
número de diminutas colonias.
Confirmar con Catalasa (KMT299), ya que sus colonias son catalasa negativas (no burbujean). Para efectuar recuentos, sembrar directamente 1 ml de la solución madre y sus diluciones decimales en profundidad en placas.
https://www.microkit.es/fichas/KAA-AGAR.pdf
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la
legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es
