Archivo de la categoría: microbiologia de aguas

Optimización en los análisis microbiológicos de
AGUAS Y BEBIDAS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

Mejora tus resultados analíticos gracias a nuestra innovación

Aquí tienes los datos que, tras más de 200 rondas intercomparativas, demuestran los mejores resultados analíticos de quienes aplican nuestra metodología 

Mejora tus resultados analíticos gracias a nuestra innovación

 

¿Sabías que 3 de cada 10 análisis microbiológicos son falsos positivos, falsos negativos o recuentos inexactos, por seguir protocolos oficiales obsoletos, o con puntos críticos que nadie ha salvado por tí?

Donde se ve más claro es en los resultados de los servicios intercomparativos. Eso sí, saliendo del bosque y a vista de águila.

¿Quieres salir de ese matrix, que da por normal la incertidumbre en tus resultados?

¿Necesitas aumentar la fiabilidad de tus resultados?

¿Quieres estar en ese nivel élite del 7% de laboratorios que alcanzan la excelencia en sus resultados?

Gracias a nuestra situación privilegiada y única como diseñadores y fabricantes de medios y kits, por un lado;

y por otro lado como coordinadores de los ensayos intercomparativos más veteranos (26 años, con 100 rondas en alimentos; 69 rondas de aguas; 51 rondas de cosméticos), donde vemos a vista de águila los fallos de cada método/medio/kit, evitando que el árbol nos impida ver el bosque;

y por último, como analistas en nuestro propio laboratorio de análisis y nuestra visión más global en los análisis contradictorios.

Gracias a todo ello, nosotros ya hace tiempo que encontramos las diversas soluciones a los puntos críticos que llevan a cometer esos errores comunes.

En MICROKIT entendemos tus problemas, porque lo que te sucede, ya lo hemos vivido y solucionado. Te aconsejamos cómo resolver tus dudas con la mayor fiabilidad, dándote una amplia gama de soluciones exclusivas de excelente calidad, comodidad y rapidez. Nuestra consultoría es personalizada: nos ponemos a tu nivel técnico para que nos entiendas al 100%, es más una tutoría o mentoría.

Veamos exactamente cuáles son esos errores detectados en intercomparación, dentro del control microbiológíco de alimentos, aguas y cosméticos; y cuál es la evolución de los laboratorios que aplican las soluciones MICROKIT:

 

1-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE ALIMENTOS: Enseñanzas de 100 rondas

 Problema 1:

El fallo más monumental que hemos encontrado en Seilalimentos es que no se tiene en cuenta en microbiología de alimentos (y sí que se tiene en cuenta en microbiología de aguas y de cosméticos) el efecto matriz, lo que provoca falsos negativos en numerosos tipos de alimentos, donde sus conservantes, especias y microbiota acompañante, inhiben en numerosos laboratorios la manifestación de algunos de los microorganismos que buscamos:

El porcentaje de laboratorios que obtiene excelencia de resultados (ni un solo falso negativo) y usa nuestra solución BPNW (Buffered Peptone Neutralizing Water, APTN: Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante, patente MICROKIT) es del 81,34%, mientras que el porcentaje de laboratorios que obtiene excelencia de resultados (ni un solo falso negativo) y usa Agua de Peptona o Agua de Peptona Tamponada, sin neutralizantes, es del 52,21%.

No es que no haya laboratorios que alcanzan la excelencia de resultados sin usar BPNW, lo que detectamos es que muchos más de los que la usan, la consiguen.

Una diferencia del 29,13% de más laboratorios que obtienen la excelencia cuando se usa BPNW en vez de las aguas de peptona tradicionales. Casi 1/3 más de laboratorios con excelencia, a favor del BPNW.

Por otra parte, entre todos los participantes en las mismas rondas, que usan BPNW, el número medio de falsos negativos por usuario es de 0,62, mientras que entre todos los usuarios en las mismas rondas de los caldos peptonados sin neutralizantes, el número medio de falsos negativos por usuario sube a 1,39.

El número de falsos negativos entre los usuarios de caldos peptonados no neutralizantes, es más del doble que entre los usuarios de BPNW.

 Podemos concluir que el uso de BPNW reduce a menos del 50% el número de falsos negativos, algo que ninguna otra variable había conseguido jamás a semejante nivel.

Problema 2:

El microorganismo que más % de falsos resultados genera en Seilalimentos es Staphylococcus aureus. En algunas rondas (algunos tipos de alimentos) no sucede, pero en la mayoría de casos, muchos laboratorios no la encuentran cuando está presente (falsos negativos) y en otras rondas muchos laboratorios la encuentran cuando no está presente (falsos positivos). El empleo de medios de cultivo clásicos (Baird Parker, rpf, y no hablemos del Mannitol Salt Agar) e incluso de medios cromogénicos con un solo cromógeno y de métodos rápidos indirectos, es el candidato número uno a estos errores analíticos.

La solución que MICROKIT propone es el uso del Baird Parker Mannitol Yema Agar (BPMY). La dición de mannitol (sin sal) al Baird Parker, lo cambia todo, eliminando esos graves proporciones de falsos negativos). Es una solución que solo lleva desde 12-2022 en el mercado, pero ya despunta en resultados. Ver la entrada:

https://www.medioscultivo.com/mejor-medio-para-staphylococcus-aureus/

 

Otros problemas generales:

Otros microorganismos que suelen dar la mayor % de problemas en Seilalimentos, dependiendo del tipo de alimento y de la microbiota acompañante concreta, en los últimos 5 años de intercomparación son:

Parámetro Resultados erróneos
Clostridium perfringens hasta el 67%
E.coli hasta el 67%
Bacillus cereus hasta el 50%
Listeria monocytogenes hasta el 33%
Salmonella spp hasta el 33%
Levaduras y Mohos hasta un 15%

Hace unos años, los resultados detectados en Seilalimentos eran también dramáticos, lo que demuestra que la mejora continua es más que una filosofía que debe aparecer escrita en nuestra documentación técnica, y hemos de verdad de buscar acercarnos cada vez más a la eficiencia >95%:

Parámetro Eficiencia
Staphylococcus aureus 65 %
Listeria monocytogenes 66 %
Levaduras y Mohos 70%
Clostridium perfringens y sus esporas 72 %
Bacillus cereus 75%
E.coli 77%
Salmonella spp, y Shigella spp 77 %

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

 

2-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AGUAS: Enseñanzas de 69 rondas

En este caso a nadie se le ocurre analizar aguas cloradas sin antes inactivar el cloro, por lo que no podemos hablar del efecto matriz. Sin embargo la proporción de falsos negativos en algunos parámetros es tan dramática como vimos que ocurría en alimentos, en este caso a causa de una técnica destructiva de células como es la filtración de membrana:

Parámetro Resultados erróneos

Método oficial

Resultados erróneos soluciones MICROKIT
Clostridium perfringens 49% 3%
E.coli y demás Coliformes 21% 2%
Enterococos fecales 6% 0%
Pseudomonas aeruginosa 33% 0%

Hace unos años, los resultados detectados en Seilagua eran también dramáticos, por lo que todos debemos acercarnos cada vez más a la eficiencia >95%:

Parámetro Eficiencia
Clostridium perfringens y sus esporas 29%
Staphylococcus aureus 62%
Vibrio cholerae 60%
Pseudomonas aeruginosa 78%
E. coli 79%
Coliformes 80%

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

 

3-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE COSMÉTICOS: Enseñanzas de 51 rondas propias y 7 ajenas

En este caso, a pocos se les ocurre analizar cosméticos (repletos de conservantes) sin antes inactivar éstos adecuadamente, por lo que no podemos hablar del efecto matriz. Sin embargo la proporción de falsos negativos en algunos parámetros es tan dramática como vimos que ocurría en alimentos y en aguas:

Parámetro Agar clásico Resultados falsos Solución MICROKIT Resultados falsos
Staphylococcus aureus Baird Parker 55% Cromokit X-Staph Agar 5%
Peudomonas aeruginosa Agar

Cetrimida de marcas clínicas

90% Cromokit Cetrimida Agar 5%
E.coli MacConkey Agar 60% MugPlus Agar 5%
Candida albicans Sabouraud 25% Biggy Candida Agar 5%

En estos años de comparación profesional, la calificación del rendimiento de los participantes sube de una media de 6/10 en noveles a una media de 9/10 en veteranos ¡un 30%!

Gran parte del mérito de esta hazaña lo merece el caldo inactivador validado LPTN Broth de MICROKIT, frente a caldos obsoletos como el Letheen Modif o el Eugon Modif

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

¡La innovación te lleva a un nivel superior!

https://www.microkit.es/publicaciones.htm

Contacta con consultastecnicas@microkit.es y déjate guiar por nuestros expertos

XLD AGAR ISO 6579 PARA AISLAR SALMONELLA

MEDIO DE CULTIVO ISO PARA AISLAMIENTO DIFERENCIAL DE SALMONELLA EN ALIMENTOS, AGUAS Y MEDICAMENTOS

XLD AGAR ISO 6579 PARA AISLAR SALMONELLA

XLD AGAR (XYLOSE LYSINE DESOXYCOLATE)

PHARMACOPEA MEDIO  K

Detección de enterobacterias patógenas

(USP, UNE-EN ISO 6579:2003, ISO 6340)

 

COMPOSICIÓN

Extracto de levadura   3,0 g

Lactosa                       7,5 g

Sacarosa                     7,5 g

Xilosa                         3,5 g

L‑lisina                       5,0 g

Cloruro sódico            5,0 g

Desoxicolato sódico     2,5 g

Tiosulfato sódico        6,8 g

Citrato Fe-amoniacal  0,8 g

Rojo fenol                   80,0 mg

Agar‑agar                   12,5 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,4 ± 0,2

 

PREPARACIÓN

Disolver 55,1 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar con agitación hasta llegar a 98 ºC. Cesar de calentar cuando el medio esté completamente disuelto, o bien  autoclavar a 116 ºC durante sólo 1 minuto, para evitar la formación de cristales precipitados en la superficie. NO SOBRECALENTAR NI RECALENTAR, aunque en este medio MICROKIT es más difícil que aparezcan precipitados o que el agar se ablande y el asa se hunda.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN

LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT142

 

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Calabaza     PREPARADO: Estéril, Calabaza

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

Salmonella abony WDCM00029, Excelente, tras inocular <100 ufc, crecen >50%.  Colonias transparentes con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento en estría de colonias transparentes con centro negro, medio amoratado.

Shigella flexneri WDCM00126, Colonias incoloras-rosadas, buen crecimiento.

  1. coli WDCM00013, Inhibición parcial (colonias amarillas) o total.

Enterococcus faecalis WDCM00009, Inhibición completa: Ni una sola colonia.

 

PRESENTACIÓN:  MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS.

NOTA

Se utiliza para aislar enterobacterias patógenas especialmente Salmonella y Shigella. El desoxicolato sódico reduce el crecimiento de coliformes. La degradación de azúcares (Xylosa, lactosa y sacarosa) en ácidos se detecta por el viraje a amarillo del rojo fenol. La formación de sulfuro de hidrógeno se detecta por la aparición de óxido de hierro negro en el centro de las colonias. Las bacterias que descarboxilan la lysina en cadaverina se reconocen por la formación de un color púrpura en la periferia de las colonias, resultado de la alcalinización.

 

MEJORAS DE MICROKIT

Hemos observado que en la mayoría de marcas aparecen precipitados/cristalizaciones en la placa varios días tras su preparación. Y en otras muchas marcas el agar es friable (el asa se hunde al sembrar en estría).

Todo esto no sucede en el XLD de MICROKIT:

https://www.microkit.es/fichas/XLD-AGAR.pdf

Si como segundo medio de aislamiento que la ISO 6579 te exige emplear, eliges el Cromosalm (en la ISO lo llaman ABC Agar),

te garantizamos la máxima fiabilidad en tus resultados,

ya que este medio reduce al máximo los falsos positivos típicos de otros medios cromogénicos, al tener 2 cromógenos: uno específico para Salmonella y otros para las demás Enterobacterias que dan falsos positivos en los medios Magenta-Gal:

https://www.microkit.es/fichas/ABC-CROMOSALM-MICROKIT-AGAR.pdf

SIEMBRA

En superficie, por estría, a partir del enriquecimiento. Paralelamente sembrar en placas de otros medios de cultivo selectivos. Incubar 48 horas a 37 ºC aproximadamente.

 

INTERPRETACIÓN

Colonias amarillas, con o sin centro negro: Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Proteus, Serratia, Klebsiella. Las colonias rojas, sin centro negro, son de Shigella, Providencia, Salmonella, Proteus, Pseudomonas. Colonias rojas con centro negro: Salmonella, Arizona, Edwardsiella. Las colonias incoloras con o sin centro negro son de Salmonella,  Pseudomonas.

 

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

 

Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Febrero-2021

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

Si tiene dudas técnicas contacte con consultastecnicas@microkit.es

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CROMOKIT PSEUDOMONAS: CETRIMIDA Y CN AGAR CROMOGÉNICOS

CROMOKIT PSEUDOMONAS CETRIMIDA Y CN AGAR CROMOGÉNICOS

CROMOKIT PSEUDOMONAS: DOS MEDIOS RÁPIDOS PARA PSEUDOMONAS AERUGINOSA CON LAS VENTAJAS DEL CETRIMIDA Y CN CLÁSICOS, EN SÓLO 18 HORAS

CROMOKIT PSEUDOMONAS CETRIMIDA y CN AGAR CROMOGÉNICOS son dos medios de cultivo rápidos para la detección y recuento de Pseudomonas aeruginosa en cosméticos y aguas  respectivamente,  con las ventajas de los dos medios clásicos, sumadas a la rapidez en el descarte de muestras negativas en sólo 18h en vez de las 48 h de los mismos medios clásicos.

Los clásicos en 48h:

 

 

 

 

 

 

Los rápidos en 18h:

 

Tiempos clásicos, tiempos modernos

Tanto en cosméticos como en aguas envasadas y de baño, la búsqueda de Pseudomonas aeruginosa suele tardar:

-4 días en el primer caso (2 son enriqueciendo en caldo neutralizante y 2 de estría en placa del caldo enriquecido) y

-2 días en aguas por filtración de membrana.

Gracias a la simple adición de un cromógeno en ambos medios, las colonias de Pseudomonas aeruginosa crecen rojas en sólo 18 h, contrastando de forma excelente con la membrana, mientras en los medios clásicos todavía no se alcanzan a  ver.

La ventaja es que en las primeras 18 h desde la siembra en placa, ya sabemos qué muestras no contienen este patógeno: no hay colonias rojas.

 

¿Y en caso de presuntos positivos?

Si aparecen colonias rojas, podrían ser falsos positivos, y sólo en este caso hay que esperar otras 18 h para poder observar si alrededor de las colonias hay un halo fluorescente verde, amarillo o azul, propios de Pseudomonas aeruginosa.

Hacer la prueba de la oxidasa no es redundante, porque si bien el Cetrimida y el CN son dos medios bastante selectivos, hemos visto a veces crecimiento de coliformes e incluso de Gram positivos como Bacillus spp:

 

 

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Si aparecen en las primeras 18h colonias rojas, oxidasa positivas, la simple prueba de Acetamida con reactivo Nessler nos sacará definitivamente de dudas:

Si precipita a marrón-naranja nada más añadir el reactivo al tubo de Acetamida (previamente incubado con la colonia sospechosa), se trata sin duda de Pseudomonas aeruginosa.

 

Además, mientras incubamos el tubo de Acetamida, seguiremos incubando la placa de Cromokit Rapid Cetrimida o de Cromokit Rapid CN con colonias rojas…

,,,y al mismo tiempo de ver la prueba de la Acetamida, podremos observar si aparece halo fluorescente alrededor de las colonias rojas, señal de que se trata de Pseudomonas aeruginosa.

Izda: Agar Cetrimida clásico

Dcha: Agar Rapid Cetrimida cromogénico

 

¿En caso de presuntos positivos no habremos ganado tiempo?

En estos 4 medios (tanto los 2 clásicos como los 2 cromogénicos) pueden haber falsos positivos de Ps.fluorescens y de Ps.putida, que también generan colonias características, si bien su fluorescencia es bastante más tenue que en el caso de Ps.aeruginosa.

Y tambien falsos positivos de otros Gram negativos no fermentadores.

Para acelerar también en el caso de que aparezcan presuntos positivos, contamos con las galerías enzimáticas Rapid NF, que en sólo 4 horas nos van a decir de qué especie de No fermentador se trata, sea o no sea una Pseudomonas.

De modo que en el peor de los casos, vamos a saber si tenemos o no Pseudomonas aeruginosa en nuestras muestras de cosméticos o de aguas en sólo 18+4 horas tras la siembra en placa, es decir, en menos de 24 horas.

 

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Estas son las fichas técnicas de los avances comentados:

Para cosméticos:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-RAPID-PSEUDOMONAS-AGAR.pdf

Para aguas:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-RAPID-CN-PSEUDOMONAS-AGAR.pdf

Para confirmar presuntos positivos de 18h:

https://www.microkit.es/fichas/CITOCROMO-OXIDASA-M-IDENT-ISO-16266–ISO-16649.pdf

o bien:

https://www.microkit.es/fichas/Citocromo-oxidasa–reactivo-en-goteros-para-banar-placas.pdf

Y además, para potenciar la visión de la fluorescencia:

https://www.microkit.es/fichas/LINTERNA-ULTRAVIOLETA-DE-366%20nm.pdf

Y después:

https://www.microkit.es/fichas/ACETAMIDE-BROTH.pdf

O más rápido, desde las colonias rojas de 18 horas, usar directamente Rapid-NF 4 horas:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

total: 18 horas si no aparecen colonias rojas y 22 horas si aparecen colonias rojas

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Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

Vibrio vulnificus: Detección e identificación más certeras

Vibrio vulnificus: Métodos para detectarlos con mayor fiabilidad

Vibrio vulnificus: Detección e identificación más certeras mediante mejores medios de enriquecimiento, aislamiento e identificación

 

INTRODUCCIÓN (para poner los pelos de punta)

Vibrio vulnificus  es un grave patógeno propio del mar y de las aguas hipersalinas que se acumulan tras las playas.

Infecta por ingestión de productos del mar contaminados por él. Nada menos que el 50% de estas infecciones, en el caso de la mala costumbre de ingerir bivalvos crudos recolectados en la playa (aunque les echemos limón), acaban en la muerte del afectado.

Y también es un grave patógeno por infección de heridas al bañarse en agua hipersalinas estancadas.

Se encuentra en playas, rocas y maderas en contacto con agua salina semi estancada, y resulta patógeno al introducirse en una herida.

Muchos de estos casos terminan con septicemias y muertes; basta una apertura en la piel para que causen cuadros de gravedad en uno de cada cuatro infectados.

Nada menos que 1 de cada 5 personas que sufren estas infecciones a través de heridas acaban muriendo por ello.

 

Detección tras enriquecimiento

Como buen Vibrio, es Oxidasa + y Lactosa +. Pero además, esta especie es halófila (crece hasta con 60 g/l de ClNa o aún mejor: sales marinas DMT149, y no crece sin al menos 20-37 g/L).

Por ello los medios de enriquecimiento más efectivos (a menudo el paso previo necesario para detectarlo cuando está a bajas concentraciones), son hipersalinos:

El clásico:

https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-SALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf

No confundir con este otro, más indicado para V.cholerae:

https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf

La aportación de MICROKIT que mejora al Alkaline-Saline:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-HIPERSALINE-MICROKIT-BROTH.pdf

 

 

 

 

 

 

 

 

Un truco importante en Vibrio es preenriquecer-revitalizar en TSB para eliminar el stress.

Este preenriquecimiento-revitalización de unos minutos en TSB permite la detección un 50% más veces que si no se hace.

https://www.microkit.es/fichas/TSB-TRYPTIC-SOY-BROTH-polvo.pdf

 

Tras enriquecer, hay que aislar estriando en placa

También los medios clásicos de aislamiento mejoran su selectividad para este vibrio añadiéndoles 20-50 g/L de ClNa…

…o mejor aun, de sales marinas (agua de mar desecada) DMT149, ya que aumentan no sólo la presión osmótica necesaria como hace el ClNa, sino que además aportan todos los oligoelementos necesarios:

https://www.microkit.es/fichas/AGUA-DE-MAR.pdf

En el clásico TCBS V.vulnificus se distingue porque no fermenta la sacarosa, por lo que crece con colonias verde-azuladas, no amarillas:

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio vulnificus y V.parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/fichas/TCBS-VIBRIO-AGAR.pdf

Otro medio de aislamiento en placa, muy recomendable para distinguirlo de V.parahaemolyticus y de V.alginolyticus es el TSAT, basado en TTC:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-TSAT-SALINE-AGAR.pdf

ya que en el mismo, V.vulnificus crece con colonias crema o incoloras, mientras V.parahaemolyticus y Vibrio alginolyticus crecen con colonias rojas o blancas.

 

 

 

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Otro medio que aporta MICROKIT es la versión agarizada del caldo antes indicado para halófilos:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-HIPERSALINE-MICROKIT-AGAR.pdf

Y el medio cromogénico (al que puede ser conveniente añadir 25 g/L de ClNa o de sales marinas (agua de mar desecada) DMT149:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-VIBRIO-AGAR.pdf

 

 

Confirmación de colonias sospechosas

Como siempre, los medios de aislamiento nos acercan pero no son 100% específicos, de modo que hay que confirmar las colonias sospechosas.

Aparte de la oxidasa:

https://www.microkit.es/fichas/CITOCROMO-OXIDASA-M-IDENT-ISO-16266–ISO-16649.pdf

 

o bien:

https://www.microkit.es/fichas/Citocromo-oxidasa–reactivo-en-goteros-para-banar-placas.pdf

 

 

También ofrecemos las galerías de identificación enzimática a nivel de especie en sólo 4 horas Rapid NF:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

 

 

 

 

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También tenemos una completa gama de medios y kits de confirmación para V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus…

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Confirmación de Clostridium perfringens desde colonias en TSC, TSN, SPS…

El problema de la confirmación de Clostridium perfringens

Confirmación de Clostridium perfringens desde colonias en TSC, TSN, SPS… fosfatasa ácida, MUP, lactosa-gelatina, nitratos-movilidad, X-CP

Aunque pocos microorganismos que no sean Clostridium perfringens crecen con colonias negras en TSC Agar cuando se ha incubado a 43-46ºC…*

…es necesario confirmar las colonias para asegurarse que se trata del patógeno e indicador, y no de un falso positivo que nos haga perder tiempo y recursos.

https://www.microkit.es/fichas/TSC-AGAR-MUP.pdf

*la temperatura selectiva depende de si seguimos la Norma ISO de alimentos (ISO 13401) o de aguas (ISO 6461, ISO 14189)

Aunque siempre será mejor informar de un falso positivo, que de un falso negativo, que pueda afectar la salud pública al no haberse detectado.

 

Quanti P/A Clostricult

Lo mismo en el recomendable formato QPA, donde las colonias pueden pescarse con asa desde el tapón para identificar, o incluso pinchando a través de su bolsa. Este novedoso formato de inclusión en masa para el TSC, permite unos resultados mucho más veraces que la Filtración de Membrana sin tener que filtrar-oxigenar-comprometer la muestra, ni tener que emplear costosas atmósferas de anaerobiosis:

https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-2022.pdf

Linealidad en QPA-CP

Alimentos

En alimentos, Clostridium perfringens se confirma con las pruebas Lactosa, Gelatina, Nitratos y Movilidad, sin mayor problema:

https://www.microkit.es/fichas/LACTOSE-GELATIN-CLOSTRIDIUM-MEDIUM.pdf

Ya que Clostridium perfringens es Lactosa + (vira el medio rojo a naranja), licúa la gelatina que estaba sólida, reduce el nitrato a nitrito (viraje a rosa tras añadir los reactivos de nitrato A y B) y crece sin movilidad desde la línea de picadura (ver el medio Nitratos-Movilidad abajo del todo del artículo).

Lactose-Gelatin Medium sin inocular (rojo y sólido), Clostridium perfringens (naranja y licuado).

 

 

 

 

 

 

 

 

Además la nueva ISO 15213-3:2024 habla de otro medio muy selectivo:

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-LACTOSE-AGAR-BASE-LENA.pdf

 

 

Aguas

Pero en aguas, a causa de la ultima versión de la ISO, se han desmarcado de estas pruebas (desconocemos el motivo) y se han empeñado en emplear reactivos cancerígenos (fosfatasa ácida) o que caducan pocos días después de hidratarse (MUP):

https://www.microkit.es/fichas/MUP.pdf

Lo que dificulta enormemente su confirmación.

Máxime habiendo otras pruebas definitivas, como las mencionadas para alimentos.

 

Con los avances de la ciencia, debería haber ya algo que fuese definitivo y no tuviese los problemas que hemos mencionado sobre potencial cancerígeno, cortísima caducidad una vez hidratado…

Y lo hay:

Innovaciones que aún no han contemplado las Normas ISO pero ya pueden aprovecharse

Las galerías enzimáticas RAPID-ANA:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Que por un lado, son costosas, pero por otro, nos permiten conocer si la colonia se trata o no de Clostridium perfringens ¡en sólo 4 horas!

O el medio cromogénico Cromokit-CP, donde Clostridium perfringens crece con hermosas colonias de color naranja que no revierten en contacto con el aire (como sucede con las negras en TSC, que se vuelven grises o incluso blancas en cuanto sacamos la placa de la anaerobiosis, creando un serio riesgo de reportar falsos negativos):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-C-perfringens-Agar.pdf

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Debería ser el medio que sustituya al TSC en la próxima versión ISO. Mientras tanto, todos los laboratorios que no estén acreditados por la ISO 17025 ya pueden emplearlo sin problemas.

La innovación te lleva a un nivel superior. Aprovéchala de la mano de MICROKIT.

Haga sus consultas sobre la confirmación de colonias de Clostridium perfringens en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de medios y kits para la confirmación de colonias de Clostridium perfringens en: pedidos@microkit.es 

 

Ficha técnica del medio que junto al medio Lactosa-Gelatina, permite la confirmación ISO de colonias de Clostridium perfringens (al menos, en alimentos):

BUFFERED NITRATE-MOTILITY MEDIUM (BASE sin glicerol)

Confirmación de Clostridium perfringens en aguas por  Filtración de Membrana s/Norma ISO/CD 6461-2:2002 y en alimentos según FDA.

COMPOSICIÓN

Beef Extract                              3,0 g

Enzimatic Digest of Casein       5,0 g

Potassium Nitrate (KNO3)        1,0 g

D-Galactose                              5,0 g

Disodium hydrogen phosphate

(Na2 HPO4 )                              2,5 g

Agar-Agar                                5,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,1

PREPARACIÓN

Añadir 21,5 g a 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 g de glicerol. Llevar a ebullición lentamente, agitando hasta su disolución completa. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es crema y el aspecto, semisólido.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT054

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, crema

PREPARADO: Estéril, crema, semisólido

CONTROL DE CRECIMIENTO a 37°C aproximadamente, durante 24 horas, en anaerobiosis:

Clostridium perfringens  WDCM00007 (=MKTN 8237), crece sin difusión/movilidad y reduce el nitrato a nitrito.

Bacillus subtilis WDCM00003, crece con movilidad y no reduce el nitrato a nitrito.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, KIT M-IDENT-Cl.perfringens.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inmediatamente antes de su uso, regenerar el tubo preparado, hirviéndolo 15 minutos para eliminar su oxigenación. Enfriar rápidamente a 70-80°C. Inocular la colonia sospechosa, procedente de TSC o del medio elegido, en picadura. Incubar a 36 ± 2 °C durante 21 ± 3 horas, en anaerobiosis. Observar la movilidad, positiva si hay crecimiento difuso desde la línea de picadura. Añadir unas gotas (0,5 ml) de Reactivos de Nitratos A y B (MICROKIT SMN001). Observar la reducción de Nitrato a Nitrito, que se considera positiva cuando hay viraje a rosa-rojo antes de 15 minutos tras añadir los reactivos de Nitratos A y B. Si no hay viraje, añadir un poco de Zinc en polvo (SRO001), esperar 10 minutos y considerar tambien positiva la prueba si TAMPOCO hay viraje a rosa-rojo.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

Si tiene dudas técnicas contacte con consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos en pedidos@microkit.es

 

 

Cepas de Salmonella, cuantitativas

Cepas de Salmonella, cuantitativas, para control de los medios ISO 6579 (alimentos) e ISO 6340 (aguas): S.enteritidis, S.typhimurium y S.abony

Cepas de Salmonella

Salmonella es un bacilo Gram negativo, anaerobio facultativo, móvil, urea negativo, citrato positivo, que genera gas sulfhídrico y pertenece a la familia de las Enterobacterias.

Algunas cepas se pueden considerar coliformes (Galactosidasa +) y otras no.

Antes buscada en tándem junto a Shigella, la gran olvidada por un gran número de laboratorios…

…cuando es precisamente una Shigella, la Sh.dysenteriae, la que se considera de riesgo biológico mayor: 3 en vez del 2 que se otorga a las Salmonella de transmisión alimentaria e hídrica.

Para Shigella existe la Norma 21567, ya que el Rappaport de las Normas de Salmonella, no la dejan crecer.

 

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición 3 cepas cuantitativas de Salmonella en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00029 (S.abony), WDCM 00030 (S.enteritidis) y WDCM 00031 (S.typhimurium).

Todas ellas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

 Así como Shigella:

MKTS-SH01 Shigella flexneri SALVAJE identificada genéticamente comparando su secuenciación con Genbank

Medios de cultivo para detectar/enumerar Salmonella

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en las Normas ISO, son el XLD:

https://www.microkit.es/fichas/XLD-AGAR.pdf

así como los cromogénicos basados en magenta-Gal (colonias fucsia) y el CromoSalm ABC de MICROKIT, basado en X-alfa-Gal (colonias verdes):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOSALM-ABC-MICROKIT-AGAR-MODIF-1-2022.pdf

En sectores concretos se prefiere el Sulfito de Bismuto (Wilson Blair), el Brilliant Green Agar, el DCA, el Hektoen, el SS Agar…:

https://www.microkit.es/fichas/BISMUTH-SULFITE-WILSON-BLAIR-SALMONELLA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/BRILLIANT-GREEN-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/DESOXICOLATO-CITRATO-AGAR-DCA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/HEKTOEN-ENTERIC-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-AGAR.pdf

Para su confirmación ISO se emplean medios como los Agares Nutritivos y semisólidos especiales, el Urea Agar (o Urea Broth), Citrato Agar, KIA, LIA, TSI…:

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SALMONELLA-E-COLI-O157-YERSINIA-VIBRIO.pdf

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SEMISOLID-MEDIUM-SALMONELLA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/UREA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/UREA-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SIMMONS-CITRATE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/KLIGLER-IRON-AGAR-KIA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/LYSINE-IRON-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/TRIPLE-SUGAR-IRON-AGAR-TSI.pdf

y más cómodo: las galerías de identificación bioquímica, como los Enterotubos:

https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf

o las galerías rápidas de identificación enzimática (4 horas) Rapid ONE:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Y para Shigella, cambie el Rappaport por Shigella Broth ISO 21567 (o mejor por SS Broth de MICROKIT); y cambie los medios cromogénicos para Salmonella, por SS Agar (junto al XLD):

https://www.microkit.es/fichas/SHIGELLA-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-MICROKIT-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-AGAR.pdf

 

Contacto

Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas), así como la mayor parte de los medios de cultivo y galerías, las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Solicite asesoría técnica sobre qué cepas de Salmonella funcionarán mejor en sus muestras y cómo debe y no debe buscarlas, (según los resultados de 2 décadas de servicios intercomparativos) y en sus validaciones en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).

 

Cepas de Clostridium perfringens, cuantitativas

Cepas de Clostridium perfringens, cuantitativas, para control de los medios ISOs 14189 y 26461 (aguas) e ISOs 13401 y 15213 (alimentos)

Cepas de Clostridium perfringens

Clostridium perfringens es un bacilo anaerobio estricto, Gram positivo, esporulado e inmóvil. El anaerobio más buscado, no sólo por su capacidad patógena (gangrena gaseosa, toxiinfecciones alimentarias y de transmisión por vía acuática…) sino porque es un excelente indicador de infiltración de aguas naturales en la red de aguas de consumo humano.

 

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición dos cepas cuantitativas de Clostridium perfringens en formato lentícula estabilizada (2 años de caducidad desde fabricación): WDCM 00007 (hemolítica) y WDCM 00174.

Ambas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que nos permite mantenerlas siempre en estricta anaerobiosis.

Y ambas con células vegetativas y esporas a la vez, por lo que le sirven para el control de medios con y sin shock térmico.

 

 Así como otros anaerobios acompañantes o interferentes:

WDCM00079 Clostridium bifermentans (Paraclostridium) ISO 11133-2  (Desde FTM enriquecido, desecado en anaerobiosis doble para mejor mantenimiento) LOTE COLOR CARAMELO, TSC/Schaedler Agar, PASE 2

Medios de cultivo para detectar/enumerar Clostridium  perfringens

En aguas, el medio de referencia sobre el que se debe demostrar el correcto crecimiento típico de Clostridium perfringens (colonias negras o grises), es el Agar TSC (MICROKIT DMT175), según ISOs 14189 y 26461;

https://www.microkit.es/fichas/TSC-AGAR-MUP.pdf

y en alimentos, según ISO 13401 el mismo TSC y según ISO 15213 de 2024, el LENA Agar (DMT295), con colonias amarillas que viran el medio rojo a amarillo.

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-LACTOSE-AGAR-BASE-LENA.pdf

Aunque para los laboratorios no sometidos a Normas ISO, y que van más allá de lo que hace la mayoría, funciona mucho mejor el Cromokit CP Agar (colonias naranjas y exhuberantes que no revierten de color al airearse, como sucede con el TSC).

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-C-perfringens-Agar.pdf

En las cepas de MICROKIT de Clostridium perfringens, certificamos la concentración de cada lote en TSC y además en Agar Schaedler (medio general como un TSA, pero para anaerobios).

https://www.microkit.es/fichas/SCHAEDLER-AGAR.pdf

NOTA:

El mayor enemigo de los anaerobios estrictos, como es Clostridium perfringens, es el oxígeno del aire:

es suficiente el rato en que se tarda en hacer un análisis en el que se le oxigene (ej; durante la filtración de membrana MF) para que los recuentos caigan en picado entre 1 y 2 órdenes de magnitud (por ejemplo de 500 a 50 ó incluso a 5 ufc/100 mL)…

…e incluso se obtengan falsos negativos: el 50% de las aguas con Clostridium perfringens, analizadas por MF, resultan falsamente positivas: el microorganismo está presente pero no se detecta (<1 ufc/100 mL).

Por eso MICROKIT inventó el caldo Clostricult P/A (basado en TSC), validado externamente (ielab) con resultados de excelencia diferencial con respecto a las mismas muestras analizadas por filtración de membrana en varios laboratorios acreditados por la ISO 17025. Esta validación está disponible solicitándola a consultastecnicas@microkit.es

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.PDF?v=2023

https://www.microkit.es/pdf/kits-pa-polvos.pdf

Ya que las células de Clostridium perfringens mediante este método P/A en ningún momento del análisis están en contacto con el oxígeno del aire.

 

Y más adelante MICROKIT tuvo que inventar  el Quanti P/A Clostricult, también basado en TSC, para dar resultados cuantitativos exactos, precisos y robustos…

…tanto de formas vegetativas (sin aplicar shock térmico)…

…como  de esporas (aplicando shock térmico a la muestra de agua)

Ya que está diseñado con TSC Agar en una bolsa donde no entra oxígeno (lo que además ahorra el gasto en atmósferas de anaerobiosis)

https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-2022.pdf

Ver 3 videos de este novedoso método, el único capaz de enumerar correctamente las células y esporas de Clostridium perfringens que realmente hay en una muestra de agua, por cualquier usuario (robustez):

https://youtu.be/A8WifR8mZ1k

https://youtu.be/9ACxFVKJhrM

https://youtu.be/keVSi9E2uDg

 

Contacto

Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas) las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Solicite asesoría técnica sobre qué cepas de Clostridium perfringens funcionarán mejor en sus muestras y cómo debe y no debe buscarlas, (según los resultados de 2 décadas de servicios intercomparativos) y en sus validaciones en: consultastecnicas@microkit.es

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Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).

 

Detección rápida de bacterias : M-Ident BAC

Detecte bacterias en sólo 15 minutos con los sticks M-Ident BAC

Detectar bacterias, sean Gram positivas o Gram negativas, sean aerobias o anaerobias ¡en sólo 15 minutos! M-Ident BAC.

Stick de Inmunocromatograma con anticuerpo monoclonal contra proteínas comunes a la inmensa mayoría de bacterias.

Sin necesidad de aparato alguno, ni de electricidad, in situ esté donde esté.

Detecta en sólo 15 minutos todo tipo de bacterias, Gram positivas y Gram negativas, aerobias y anaerobias, Coliformes y No fermentadores, estafilococos, enterococos, clostridios, vibrios, legionella…

El límite de detección es de 10E3-10E4 ufc/mL (1-10 ufc/microlitro), por lo que distingue claramente aguas sucias de aguas aptas para usos industriales.

APLICACIONES:

Sirve para screening negativo de muestras in situ, de forma prácticamente inmediata, detectar bacterias minutos, por lo que sus aplicaciones son innumerables:

piscinas, spas, jacuzzis, saunas…

…lagos, ríos, aguas recreativas, estanques…

…aguas de refrigeración, aguas de limpieza en industria, empresas de servicios y mantenimiento…

…centrales eléctricas, empresas de electrónica…

…hoteles, barcos,

…peceras, acuicultura, cultivos hidropónicos…

…aguas residuales,

…túneles de lavado,

…verificación de la eficacia de la desinfección UV…

dejamos a su imaginación todas las aplicaciones que puede resolver en su trabajo y en su casa gracias a este nuevo kit

 

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS STICK para detectar bacterias en minutos:

Para obtener resultados fiables debe respetar estrictamente los pasos, con los tiempos y volúmenes indicados:

1-Tome 5 gotas del agua de muestra con la pipeta incluida y añádalos al fondo del vial que contiene el disruptor liofilizado de color lila

2-Deje disolver el disruptor lila, colocando el vial en una superficie horizontal durante 5 minutos

3-Agite suavemente el vial hasta que vea que la muestra de agua, coloreada de lila, tiene un color homogéneo

4-Coloque el stick dentro del vial con las flechas hacia abajo, de modo que el agua lila moje el final del stick.

5-Espere 10 minutos sin tocar para que el agua coloreada de lila recorra todo del stick

6-Saque el stick del vial y lea los resultados:

-Sólo se ve la banda de arriba (2, control):  <103 ufc de bacterias/mL (NEGATIVO)

-Además de la banda de arriba (2, control), se desarrolla otra banda por debajo de ella (1, test), sea más clara o más oscura que la banda 2 de control:  > 103 ufc de bacterias/mL (POSITIVO)

-La banda test es débil: DUDOSO, menos de 103 ufc/mL

-Si no aparece la banda 2 (control): test inválido, repetir

MANTENER:

a temperatura ambiente, entre 10ºC y 30ºC. No necesita nevera.

PRESENTACIÓN:

Cajas con 20 test, cad: 6-18 meses. Sticks M-Ident BAC Ref: KMTBAC

ORIGEN detectar bacterias minutos:

Diseñado y fabricado en USA

Distribuido en exclusiva en España e Iberoamérica por MICROKIT desde Marzo-2025

https://www.microkit.es/

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Enterotube

Enterotube, las galerías originales para la Identificación de colonias de Enterobacterias, con una ingeniosa forma de inocularlas

Enterotube. Galerías diseñadas hace mas de 60 años por Roche, han pasado por varios fabricantes, pero estas galerías son las únicas del mercado que contienen medios de cultivo preparados, hidratados, no liofilizados…

…y eso las convierte en referente porque fueron con las que los autores describieron las especies de la mayoría de bacterias.

Son galerías de pruebas bioquímicas. Sólo ha sobrevivido la galería de identificación de Enterobacterias, que sigue siendo un referente,

Y desaparecieron los míticos Oxiferm para No fermentadores y Mycotube para levaduras.

Para ellos, y para estafilococos, enterococos y anaerobios… utilice nuestras galerías RAPID, que al ser enzimáticas, sólo tardan 4 horas en darle el resultado.

 

Modo de empleo

Las Enterotube son las más fáciles de usar, mediante una ingeniosa patente de picadura, y por eso, las más queridas por los microbiólogos más veteranos, que las conocen como las únicas galerías de referencia desde que estudiaron hace medio siglo:

1-se abren los tapones

2-se toca la colonia con el asa incluida en la galería

3-se estira hasta ver que el inóculo ha llegado al ultimo pocillo de glucosa, que sirve de control, ya que, si tras la incubación, sale glucosa negativo, hay que repetir, porque todas las enterobacterias son glucosa positivas, señal de que el inóculo colonial no se ha repartido hasta el final.

4-se parte el asa por la muesca y se cierran los tapones

5-con el trozo de asa que ha quedado en nuestras manos, se perforan las ventanas de aireación de las pruebas oxidativas y se guarda ese trozo de asa limpia para el día de la lectura de resultados

6-se incuba a 35ºC aprox durante 24 h, aunque a veces si la cepa estaba muy estresada los virajes no se ven definitivamente hasta las 36-48 h

7-se añaden los reactivos de indol y de voges proskauer en los pocillos donde lo indica, abriéndolos por el film de arriba con el trozo de asa que ya abrió las ventanas

Puedes ver mejor cómo se usa en nuestro canal de Youtube:

https://www.youtube.com/watch?v=9j4tbyghvZA&t=704s

 

Interpretación de resultados

.

8-se apuntan los resultados positivos o negativos comparando los colores finales con los de la tabla adjunta. Se asigna a los positivos el número indicado en las tablillas y a los negativos un cero

 

 

 

.

9-se suman los números de cada grupo y se obtiene un código de 5 cifras (en el ejemplo 20063):

10-se busca este número en el pdf del libro de resultados, libro que puede pedir sin coste con la primera compra de enterotubos:

.

11-y le saldrá el nombre de la enterobacteria identificada:

.

12-a veces le salen varios nombres de diferentes cepas y le indica con qué prueba adicional puede distinguir cuál de ellos es el definitivo

13-y algunas veces le saldrá un código que le indicará que no se puede asignar el resultado a ninguna cepa. Eso suele ser:

  1. porque no es una enterobacteria y no se cercioró antes de utilizar la galería, de que la colonia lo era (Neogram negativa formando filamento; y oxidasa negativa sin viraje a azul),
  2. o porque la colonia era de un cultivo demasiado viejo,
  3. o porque tomó inóculo de una colonia multiespecífica, procedente de ufcs de diferentes cepas,
  4. o porque arrastró medio de cultivo junto con la colonia, que ha interferido en los medios de cultivo de la galería.

En tal caso repita con otra galería y con más cuidado

La base de datos Bacdive es la misma para todas las galerías bioquímicas, por lo que los resultados deberían ser los mismos que los de otras marcas.

Sin embargo la gran diferencia de Enterotube con las demás galerías es que tiene los medios preparados hidratados, no liofilizados, por lo que los virajes de color que diferencian cada prueba positiva de la negativa, son mucho más evidentes.

https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf

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Cepas de Pseudomonas aeruginosa

Cepas Cuantitativas de Pseudomonas aeruginosa para Control de Calidad Microbiano

Ofrecemos cepas de Pseudomonas aeruginosa validadas y trazables, esenciales para el riguroso control de calidad de medios de cultivo en sectores clave como aguas, cosméticos y farmacia, cumpliendo con las normativas ISO 16266, ISO 22717, ISO 11133-2 y las directrices de la Farmacopea.

El Valor de Pseudomonas aeruginosa en el Control de Calidad

Pseudomonas aeruginosa es un bacilo Gram negativo, oxidasa positivo, de gran interés sanitario y regulatorio. Su carácter ubicuo lo convierte en un patógeno relevante en aguas envasadas y de baño, así como en entornos críticos de hospitales (UVIs y quirófanos). Su correcta detección es vital para la seguridad.

Beneficio Exclusivo: Nuestras cepas cuantitativas duplican la vida útil de otras cepas del mercado, lo que puede significar una reducción de hasta el 50% en su gasto en reactivos de control.

Opciones de Cepas de Pseudomonas aeruginosa

Ponemos a su disposición la cepa cuantitativa de P. aeruginosa en formato de lentícula estabilizada, asegurando su longevidad y fiabilidad.

Cepa de Referencia Código y Trazabilidad Características Clave Caducidad
Opción 1 P. aeruginosa WDCM 00026 (Farmacopea 9027) Alta producción de pioverdina. 1 año (desde la fabricación)
Opción 2 P. aeruginosa WDCM 00025 (ISO 11133-2 / USA 27853) Cepa más robusta y longeva, de uso general. 2 años (desde la fabricación)

Certificación de Calidad: Certificamos rigurosamente la concentración de cada lote en Agar Tripticasa de Soja (TSA), Agar Cetrimida y, más recientemente, en nuestro medio cromogénico Agar Rapid Cetrimida.

Cepas Interferentes y Filogenéticamente Cercanas

También disponemos de cepas interferentes clave para validar la selectividad de sus medios, como P. putida WDCM 00117 y P. fluorescens WDCM 00115 (ambas fluorescentes). Además, ofrecemos cepas de Burkholderia cepacia y Chryseobacterium indologenes (de hermoso color amarillo vivo). En constante actualización, tambien hemos añadido recientemente Aeromonas hydrophila WDCM 00063, Burkholderia cenocepacia MKTA 245, Pseudomonas stutzeri MKTA 17588 y Ralstonia pickettii MKTA 27511

Medios y Kits Óptimos para Pseudomonas aeruginosa

Nuestras cepas son el estándar para el control de los medios diseñados para el aislamiento y confirmación de P. aeruginosa.

Aplicación y Norma Medio de Referencia Descripción del Crecimiento Típico
Industria Farma/Cosmética Cetrimide Agar Colonias grandes, lobuladas, color crema, a menudo con pigmentos fosforescentes (azul, verde o amarillo).
Control de Aguas Cetrimida CN Agar Presentan fuerte fluorescencia bajo luz UVA de 366 nm y un característico olor a «trapo sucio, jabonoso».

Innovación en Detección Rápida:

Hemos desarrollado el Rapid Cetrimida Agar y el Rapid CN Agar (medios cromogénicos). Estos medios permiten descartar su presencia en las primeras 18 horas si no hay crecimiento y, si hay colonias sospechosas, la confirmación se logra con otras 18 horas adicionales al observar la fluorescencia emitida  alrededor de la colonia roja:

Usos Adicionales de las Cepas:

  • Medios Clásicos: Control de calidad de medios como King A, King B, Asparagina o Acetamida.
  • Kits de Identificación: Control de calidad de galerías de No Fermentadores y kits de Citocromo-Oxidasa (debe observarse un viraje instantáneo a azul oscuro).
  • Detección en Agua: Control de nuestro kit Pseudocult P/A, donde provocan el típico viraje a color rosa.

 

Cepas de Burkholderia cepacia y su Control

La detección de Burkholderia cepacia es de creciente interés. Ponemos a su disposición las cepas MKTN 10743 y MKTA 25416 (siendo la primera la más robusta).

Estas cepas son esenciales para el control de medios especializados:

  • BCPT Agar
  • BCPT Cromogénico
  • BCSA
  • OFPBL

Control de Kits: Permiten el Control de Calidad de galerías de No Fermentadores y de nuestro kit Burkhocult P/A, donde provocan un viraje intenso a color rojo vino tinto opaco.

 

Información para su Pedido

Dado que fabricamos nuevos lotes continuamente para asegurar la máxima validez y evitar el agotamiento de stock, la concentración y caducidad de estas cepas varían.

Le recomendamos encarecidamente consultarnos las concentraciones y las fechas de caducidad justo antes de realizar sus pedidos para asegurar que el lote que recibe se ajuste a sus necesidades de validación.

Haga sus consultas de stocks, concentraciones, caducidades, precios actualizados… de nuestras cepas cuantitativas de Pseudomonas spp. y Burkholderia spp., así como otras muchas en: microkit@microkit.es.

Para más información técnica, consulte su folleto:

microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Solicite asesoría técnica sobre qué cepas funcionarán mejor en el QC de sus medios para sus muestras concretas, en sus validaciones y en sus  Challenge Test (según los resultados de 2 décadas de servicios intercomparativos)  en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).