Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

Cepa de Bacillus cereus

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Cepa de Bacillus cereus, cuantitativa, para control de calidad de medios y kits, para detectar adecuadamente este ubicuo patógeno

Cepa de Bacillus cereus

Bacillus cereus es una bacteria Gram positiva, esporulada, patógena y ubicua.

Para conocer más de esta cepa recomendamos ver nuestro monográfico inmediatamente después de ver el presente:

https://www.medioscultivo.com/bacillus/

Si su laboratorio es de los que buscan este patógeno, necesitará comprobar que los medios que emplea son capaces de detectarlo adecuadamente. Por eso la cepa de Bacillus cereus se considera material de referencia, porque gracias a ella podrá conocer si la calidad de los medios y kits que utiliza es correcta.

 

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición la cepa cuantitativa de Bacillus cereus en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00001

Normalmente disponemos de ella a una concentración cercana a 10E4 ufc/lentícula que, al disolverse en un tubo de 10 mL de Ringer marino o solución salina, proporcionará un inóculo de 10E3/mL o de 10E2/0,1 mL

Con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización, sino que las mima.

Tambien disponible, entre otras muchas, la cepa de otro Bacillus:

Bacillus subtilis subsp. spizizenii WDCM 00003, que Farmacopea menciona con el número de la colección USA 6633

 

Medios de cultivo para detectar Bacillus cereus

El medio más usado para su aislamiento en placa, por su mención en la Norma ISO 7932 y demás bibliografía, es el Agar Mossel (tambien conocido como MYP y PREP (Polimixina, Rojo Fenol, Yema y Manitol Agar):

https://www.microkit.es/fichas/BACILLUS-CEREUS-MOSSEL-AGAR.pdf

En la foto se observa su aspecto típico en este medio: colonias con aspecto de gota de vela, que viran el medio de su original color salmón al rosa fucsia

 

 

 

 

 

 

En el siglo de los medios cromogénicos, no podía faltar el Cromokit-BC Agar, con base Mossel y un cromógeno que vira el centro de las colonias de B.cereus a azul; el medio como buen Mossel, vira de salmón a fucsia:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-B-CEREUS-AGAR.pdf

También se emplea este medio en el kit de detección de Bacillus cereus en las superficies de las fábricas de alimentos:

https://www.microkit.es/fichas/B-CEREUS-XSWABBS-UE-2-2019.pdf

 

Confirmación de colonias sospechosas

La galerías de identificación que existen para el género Bacillus están muy obsoletas e incompletas. Por ello es mejor emplear directamente un kit que diga si se trata o no de B.cereus, como nuestro M-Ident B.cereus:

https://www.microkit.es/fichas/BACILLUS-CEREUS-M-IDENT-KIT-ISO-7932-UE-2-2019-ALIMENTOS.pdf

 

Contacto

Todas estos medios y kits mencionados, así como la cepa (y otras muchas), los tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).

E.coli verotoxigénico, medios de cultivo para su detección

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Detección de E.coli verotoxigénico O157

E.coli verotoxigénico, medios de cultivo para su detección

La ingestión de alimentos contaminados con E.coli verotoxigénico O157 provoca serios episodios que a menudo acaban en la muerte de las personas afectadas.

Esta cepa letal de E.coli se detecta tras enriquecer el alimento o el agua en el medio:

 

1-E. coli O157 Broth mTSB (BASE)

Enriquecimiento selectivo de E. coli O157:H7 en alimentos (carne de vacuno y
otros animales), aguas y otras muestras. (ISO 16654:2002)

Tras enriquecer en caldo O157 m-TSB (BCD165), no más de 18-24 h a 41,5°C aproximadamente:

https://www.microkit.es/fichas/E-coli-O157-BROTH.pdf

Estriar este caldo enriquecido en agar Sorbitol MacConkey o en Cromokit O157 Agar.

Inocular en superficie del agar elegido la muestra y sus diluciones para obtener muchas colonias bien aisladas:

 

2-Mac CONKEY SORBITOL AGAR

Detección presuntiva de E.coli serovar. O157 (UNE-EN ISO 16654:2002) a partir de alimentos (carne de vacuno,…), aguas y otras muestras, previamente enriquecidas en E. coli O157 Broth.

Incubar a 37 ºC aproximadamente durante no más de18-24 horas.

E. coli enterohemorrágico, serovariedad O157 H7 crece con colonias casi incoloras, rosa pálido-amarillentas, al no fermentar el sorbitol, de 1 mm de diámetro (estría derecha de la foto).

Las otras cepas de E. coli crecen con colonias púrpuras (estría izquierda de la foto).

Resembrar colonias sospechosas, bien aisladas, en Agar Nutritivo para E.coli
O157 (DMT126):

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SALMONELLA-E-COLI-O157-YERSINIA-VIBRIO.pdf

Incubar 18 h a 37°C aproximadamente.

Si se prolonga la incubación, la distinción de colonias será más difícil.

Confirmar con los tests adecuados:

Indol en Agua de triptona con triptófano (BCD129), 24 h a 37°C aproximadamente y adición de Kovacs (SBH056).

Según un método bastante difundido, si se añaden 0’1 g/l de MUG (SKL061) en el medio antes
de autoclavar, las colonias de E. coli O157 H7 son las NO fluorescentes bajo luz de 366 nm (VMT050).

https://www.microkit.es/fichas/Mac-CONKEY-SORBITOL-O157-AGAR.pdf

 

Más recientemente, se emplea la estría en el medio cromogénico Cromokit-O157 Agar:

 

3-CROMOKIT O157:H7 AGAR

Detección diferencial de E.coli enterohemorrágico (VTEC) en alimentos y muestras ambientales. Medio cromogénico con base del medio de Rappaport y Henigh

Sembrar en superficie en estría por agotamiento para aislar colonias tras el
enriquecimiento en el medio E.coli O157 Broth BCD165. Incubar 18-24 h a
35-37°C, para mayor selectividad a 44,5ºC.

Se condidera E.coli O157:H7 toda colonia pequeña de color rosa, púrpura o
magenta, ya que este es el color que desarrolla enzimáticamente la mezcla
cromogénica en esta cepa. Las demás E.coli crecen con colonias verdes o
azules, a causa de su actividad X-Glu+, sorbitol + y Lysina-.

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-O157-AGAR.pdf

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Cronobacter sakazakii, cómo detectar este Enterobacter

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Cronobacter sakazakii, medios de cultivo para su detección

Cronobacter sakazakii, cómo detectar este Enterobacter: medios de cultivo cromogénicos para su detección en comidas para neonatos

Introducción

El patógeno emergente Enterobacter sakazakii (nueva nomenclatura tras encontrarse, por
identificación molecular, 5 especies diferentes dentro del mismo grupo: Cronobacter
sakazakii)…

…es responsable de gravísimas complicaciones en neonatos de menos de 4 semanas
que toman leche contaminada por él, causando hasta un 40-80% de muertes.

Pero también crea enfermedades en personas de todas las edades.

Todo ello exige la ausencia de este patógeno en preparados infantiles que estén destinados a este colectivo, así como en productos lácteos, aunque se trate de un microorganismo ubicuo en el medio ambiente y que por tanto, puede contaminar el biberón en el hospital aunque en la fábrica del alimento se haya constatado su ausencia.

De todas formas es en la industria donde hay mayor riesgo de contaminación,
sobre todo si no hay un riguroso control de la disminución del recuento de enterobacterias
(mejor que coliformes) ambientales.

El comité del Microbiological Risk Assessment (MRA) de la Food and Agriculture Organization (FAO) y la World Health Organization (WHO) proponen clasificar C.sakazakii…

…junto a Salmonella, como un riesgo de categoría “A” y recomiendan que los análisis de las plantas alimentarias incluyan su detección.

Lo primero que se necesita hacer, igual que en Salmonella, es enriquecer para poder detectarlo después en cualquiera de los dos agares cromogénicos disponibles:

1-E. sakazakii (C.sakazakii) CSEB Broth 

Caldo selectivo modificado para enriquecimiento selectivo de Enterobacter
sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según
Norma ISO/TS 22964.

Se trata de un caldo lauryl sulfato modificado con cloruro sódico y
vancomicina que eliminan la flora competitiva (incluido Staphylococcus
aureus y, parcialmente, E.coli).

Incubar 24 h a 44ºC aprox.

Enterobacter sakazakii WDCM00214, Excelente, turbio, crece con colonias verde-azules al
estriar en Cromokit Agar Sakazakii.

Escherichia coli WDCM00013, Excelente, turbio, crece con colonias amarillas (o incoloras
con centro azulado) al estriar en Cromokit Agar Sakazakii

Enterobacter aerogenes WDCM00175, Excelente, turbio, crece con colonias verdes (o
incoloras con centro azulado) al estriar en Cromokit Agar Sakazakii

Klebsiella pneumoniae WDCM00097 Excelente, turbio, crece con colonias amarillas,
grandes al estriar en Cromokit Agar Sakazakii.

Enterococcus faecalis WDCM00087, Inhibido, no turbio

Sembrar los tubos turbios en superficie, en estría, sobre placas de
Sakazakii Cromokit Improved Cristal Violet Agar (MICROKIT DMT315), según ISO/TS 22964:2006.

O bien sobre el Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos (MICROKIT DMT314), según Normas CSA y DFI.

https://www.microkit.es/fichas/SAKAZAKII-ENRICHMENT-CSEB-BROTH-DMT313.pdf

 

2-E. sakazakii CROMOKIT IMPROVED CRISTAL VIOLET AGAR
Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter
sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según
Norma ISO/TS 22964:2006, optimizada en 7/2013.

El desoxicolato, el cristal violeta y la temperatura de incubación inhiben el crecimiento de otros microorganismos.

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth
(DMT313) según ISO/TS 22964:2006

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias verde-azuladas, que son presuntivas para
E.sakazakii y deben confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este
microorganismo crece con colonias amarillas.

Enterobacter sakazakii WDCM00214, Excelente, colonias verde-azuladas. PR >50%

Escherichia coli WDCM00013, Excelente, colonias incoloras.

Enterobacter aerogenes WDCM00175, Excelente, colonias incoloras con el centro azulado.

Enterococcus faecalis WDCM00087, Inhibido.

Staphylococcus aureus WDCM 00034, Inhibido.

Identificar con test bioquímicos (ej. Enterotubos ref.MICROKIT 49578619).

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-SAKAZAKII-IMPROVED-CRISTAL-VIOLET-AGAR-DMT315.pdf

 

3-Agar selectivo y cromogénico para el aislamiento presuntivo de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii) en alimentos infantiles y lácteos, según Normas CSA y DFI.

La enzima Beta-D-glucosidasa de este microorganismo reacciona con el sustrato
cromogénico beta-X-glucopiranósido presente en el medio, provocando la aparición de
colonias verde-azuladas en tan sólo 24 horas.

Otras enterobacterias no expresan bien la Beta-D-glucosidasa en este medio, creciendo con colonias crema o púrpura (por el cristal violeta), traslúcidas.

La adición de más agar-agar del tipo cromogénico a la fórmula inicial termoestabiliza el cromógeno, aunque puede llegar a flocular.

El tiosulfato sódico inactiva desinfectantes residuales, como el cloro del agua.

Sembrar en superficie, en estría, a partir del caldo enriquecido CSEB Broth (DMT313)
según ISO/TS 22964:2006.

Incubar 18-24 h a 37-41°C aproximadamente.

Observar la aparición de colonias azules, que son presuntivas para E.sakazakii y deben
confirmarse resembrando en TSA (BCD011), donde este microorganismo crece con colonias
amarillas.

Enterobacter sakazakii WDCM00214, Excelente, colonias azules.

Escherichia coli MWDCM00013, Excelente, colonias amarillas.

Enterobacter aerogenes WDCM00175, Excelente, colonias verdes.

Klebsiella pneumoniae WDCM00097 Excelente, colonias amarillas, grandes.

Enterococcus faecalis WDCM00087, Inhibido.

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-SAKAZAKII-AGAR-DMT314.pdf

Identificar con test bioquímicos (ej. Enterotubos ref. MICROKIT 49578619):

https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf

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Cepas de enterococos fecales, cuantitativas

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Cepas de Enterococos fecales, cuantitativas, para control de los medios ISO 7899 de aguas: E.faecalis y E.faecium

Cepas de Enterococos fecales

Los enterococos fecales son un subgrupo que se apartó hace unos años de los estreptococos fecales, aunque ambos son indicadores de lo mismo: Infiltración de aguas fecales. Son cocos Gram positivos, que se agrupan en cadenas en forma de rosarios y cuya principal característica distintiva, es que son catalasa negativos (no burbujean al añadirles reactivo para catalasa), a diferencia de los demás microorganismos aerobios y facultativos más habituales que buscamos en los laboratorios de aguas, alimentos…

Son un excelente indicador de lo mismo que indica E.coli: infiltración de aguas residuales en la red de potables.

A menudo procedentes de granjas animales o de animales salvajes (raro es el pozo o fuente natural que no los contenga), su ventaja sobre E.coli como indicador es que perduran en el agua durante muchos días, incluso semanas, por lo que son capaces de advertirnos de la contaminación provocada hace más tiempo que lo que nos permite saber E.coli (que normalmente dura 1 día o poco más en el agua).

Para saber más, incluido el método rápido validado por MICROKIT para conocer la presencia/ausencia y recuento de enterococos fecales en sólo 18 horas, lea nuestra monografía:

https://www.medioscultivo.com/enterococos-fecales-mejoras-en-su-deteccion/

 

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición 2 cepas cuantitativas de Enterococos fecales en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00087 (E.faecalis),

WDCM 00178 (E.faecium)

Todas ellas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

 

Medios de cultivo para detectar/enumerar Enterococos fecales

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en las Normas ISO, son el SB (Slanetz-Bartley) y el BEA (Bilis Esculina Azida):

https://www.microkit.es/fichas/SLANETZ-BARTLEY-M-ENTEROCOCCUS-TTC-AGAR.pdf

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/fichas/BILE-ESCULIN-AZIDE-AGAR-BEA-RAPID.pdf

 

Tambien merece mención el KAA en alimentos:

https://www.microkit.es/fichas/KAA-AGAR.pdf

así como los cromogénicos validados por la EPA, con colonias azules (que en nuestra experiencia no son tan selectivos como el Rapid BEA de MICROKIT):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-ENTEROCOCCUS-EPA-AGAR.pdf

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Su confirmación directa en los agares selectivos es muy sencilla:

 

 

 

 

 

 

 

 

Catalasa positivo de la mayoría de microorganismos aerobios y facultativos. En cambio los enterococos fecales no provocan esta efervescencia cuando se añade sobre sus colonias el reactivo para la catalasa.

 

Para identificar la especie, dispone de las galerías enzimáticas rápidas (le dicen la especie en sólo 4 horas) RAPID-STR:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Así, además, podrá distinguir los enterococos fecales de los estreptococos fecales y de otras cepas

 

Contacto

Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas), así como todos los medios de cultivo, reactivos y galerías mencionados, los tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Solicite asesoría técnica sobre qué cepas de Enterococos fecales funcionarán mejor en sus muestras y cómo debe y no debe buscarlas, (según los resultados de 2 décadas de servicios intercomparativos) y en sus validaciones en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).

 

Mejora tus resultados analíticos gracias a nuestra innovación

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Aquí tienes los datos que, tras más de 200 rondas intercomparativas, demuestran los mejores resultados analíticos de quienes aplican nuestra metodología 

Mejora tus resultados analíticos gracias a nuestra innovación

 

¿Sabías que 3 de cada 10 análisis microbiológicos son falsos positivos, falsos negativos o recuentos inexactos, por seguir protocolos oficiales obsoletos, o con puntos críticos que nadie ha salvado por tí?

Donde se ve más claro es en los resultados de los servicios intercomparativos. Eso sí, saliendo del bosque y a vista de águila.

¿Quieres salir de ese matrix, que da por normal la incertidumbre en tus resultados?

¿Necesitas aumentar la fiabilidad de tus resultados?

¿Quieres estar en ese nivel élite del 7% de laboratorios que alcanzan la excelencia en sus resultados?

Gracias a nuestra situación privilegiada y única como diseñadores y fabricantes de medios y kits, por un lado;

y por otro lado como coordinadores de los ensayos intercomparativos más veteranos (26 años, con 100 rondas en alimentos; 69 rondas de aguas; 51 rondas de cosméticos), donde vemos a vista de águila los fallos de cada método/medio/kit, evitando que el árbol nos impida ver el bosque;

y por último, como analistas en nuestro propio laboratorio de análisis y nuestra visión más global en los análisis contradictorios.

Gracias a todo ello, nosotros ya hace tiempo que encontramos las diversas soluciones a los puntos críticos que llevan a cometer esos errores comunes.

En MICROKIT entendemos tus problemas, porque lo que te sucede, ya lo hemos vivido y solucionado. Te aconsejamos cómo resolver tus dudas con la mayor fiabilidad, dándote una amplia gama de soluciones exclusivas de excelente calidad, comodidad y rapidez. Nuestra consultoría es personalizada: nos ponemos a tu nivel técnico para que nos entiendas al 100%, es más una tutoría o mentoría.

Veamos exactamente cuáles son esos errores detectados en intercomparación, dentro del control microbiológíco de alimentos, aguas y cosméticos; y cuál es la evolución de los laboratorios que aplican las soluciones MICROKIT:

 

1-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE ALIMENTOS: Enseñanzas de 100 rondas

 Problema 1:

El fallo más monumental que hemos encontrado en Seilalimentos es que no se tiene en cuenta en microbiología de alimentos (y sí que se tiene en cuenta en microbiología de aguas y de cosméticos) el efecto matriz, lo que provoca falsos negativos en numerosos tipos de alimentos, donde sus conservantes, especias y microbiota acompañante, inhiben en numerosos laboratorios la manifestación de algunos de los microorganismos que buscamos:

El porcentaje de laboratorios que obtiene excelencia de resultados (ni un solo falso negativo) y usa nuestra solución BPNW (Buffered Peptone Neutralizing Water, APTN: Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante, patente MICROKIT) es del 81,34%, mientras que el porcentaje de laboratorios que obtiene excelencia de resultados (ni un solo falso negativo) y usa Agua de Peptona o Agua de Peptona Tamponada, sin neutralizantes, es del 52,21%.

No es que no haya laboratorios que alcanzan la excelencia de resultados sin usar BPNW, lo que detectamos es que muchos más de los que la usan, la consiguen.

Una diferencia del 29,13% de más laboratorios que obtienen la excelencia cuando se usa BPNW en vez de las aguas de peptona tradicionales. Casi 1/3 más de laboratorios con excelencia, a favor del BPNW.

Por otra parte, entre todos los participantes en las mismas rondas, que usan BPNW, el número medio de falsos negativos por usuario es de 0,62, mientras que entre todos los usuarios en las mismas rondas de los caldos peptonados sin neutralizantes, el número medio de falsos negativos por usuario sube a 1,39.

El número de falsos negativos entre los usuarios de caldos peptonados no neutralizantes, es más del doble que entre los usuarios de BPNW.

 Podemos concluir que el uso de BPNW reduce a menos del 50% el número de falsos negativos, algo que ninguna otra variable había conseguido jamás a semejante nivel.

Problema 2:

El microorganismo que más % de falsos resultados genera en Seilalimentos es Staphylococcus aureus. En algunas rondas (algunos tipos de alimentos) no sucede, pero en la mayoría de casos, muchos laboratorios no la encuentran cuando está presente (falsos negativos) y en otras rondas muchos laboratorios la encuentran cuando no está presente (falsos positivos). El empleo de medios de cultivo clásicos (Baird Parker, rpf, y no hablemos del Mannitol Salt Agar) e incluso de medios cromogénicos con un solo cromógeno y de métodos rápidos indirectos, es el candidato número uno a estos errores analíticos.

La solución que MICROKIT propone es el uso del Baird Parker Mannitol Yema Agar (BPMY). La dición de mannitol (sin sal) al Baird Parker, lo cambia todo, eliminando esos graves proporciones de falsos negativos). Es una solución que solo lleva desde 12-2022 en el mercado, pero ya despunta en resultados. Ver la entrada:

https://www.medioscultivo.com/mejor-medio-para-staphylococcus-aureus/

 

Otros problemas generales:

Otros microorganismos que suelen dar la mayor % de problemas en Seilalimentos, dependiendo del tipo de alimento y de la microbiota acompañante concreta, en los últimos 5 años de intercomparación son:

Parámetro Resultados erróneos
Clostridium perfringens hasta el 67%
E.coli hasta el 67%
Bacillus cereus hasta el 50%
Listeria monocytogenes hasta el 33%
Salmonella spp hasta el 33%
Levaduras y Mohos hasta un 15%

Hace unos años, los resultados detectados en Seilalimentos eran también dramáticos, lo que demuestra que la mejora continua es más que una filosofía que debe aparecer escrita en nuestra documentación técnica, y hemos de verdad de buscar acercarnos cada vez más a la eficiencia >95%:

Parámetro Eficiencia
Staphylococcus aureus 65 %
Listeria monocytogenes 66 %
Levaduras y Mohos 70%
Clostridium perfringens y sus esporas 72 %
Bacillus cereus 75%
E.coli 77%
Salmonella spp, y Shigella spp 77 %

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

 

2-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AGUAS: Enseñanzas de 69 rondas

En este caso a nadie se le ocurre analizar aguas cloradas sin antes inactivar el cloro, por lo que no podemos hablar del efecto matriz. Sin embargo la proporción de falsos negativos en algunos parámetros es tan dramática como vimos que ocurría en alimentos, en este caso a causa de una técnica destructiva de células como es la filtración de membrana:

Parámetro Resultados erróneos

Método oficial

 Resultados erróneos soluciones MICROKIT
Clostridium perfringens 49% 3%
E.coli y demás Coliformes 21% 2%
Enterococos fecales 6% 0%
Pseudomonas aeruginosa 33% 0%

Hace unos años, los resultados detectados en Seilagua eran también dramáticos, por lo que todos debemos acercarnos cada vez más a la eficiencia >95%:

Parámetro Eficiencia
Clostridium perfringens y sus esporas 29%
Staphylococcus aureus 62%
Vibrio cholerae 60%
Pseudomonas aeruginosa 78%
E. coli 79%
Coliformes 80%

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

 

3-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE COSMÉTICOS: Enseñanzas de 51 rondas propias y 7 ajenas

En este caso, a pocos se les ocurre analizar cosméticos (repletos de conservantes) sin antes inactivar éstos adecuadamente, por lo que no podemos hablar del efecto matriz. Sin embargo la proporción de falsos negativos en algunos parámetros es tan dramática como vimos que ocurría en alimentos y en aguas:

Parámetro Agar clásico Resultados falsos Solución MICROKIT Resultados falsos
Staphylococcus aureus Baird Parker 55% Cromokit X-Staph Agar 5%
Peudomonas aeruginosa Agar

Cetrimida de marcas clínicas

 90% Cromokit Cetrimida Agar 5%
E.coli MacConkey Agar 60% MugPlus Agar 5%
Candida albicans Sabouraud 25% Biggy Candida Agar 5%

En estos años de comparación profesional, la calificación del rendimiento de los participantes sube de una media de 6/10 en noveles a una media de 9/10 en veteranos ¡un 30%!

Gran parte del mérito de esta hazaña lo merece el caldo inactivador validado LPTN Broth de MICROKIT, frente a caldos obsoletos como el Letheen Modif o el Eugon Modif

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

¡La innovación te lleva a un nivel superior!

https://www.microkit.es/publicaciones.htm

Contacta con consultastecnicas@microkit.es y déjate guiar por nuestros expertos

XLD AGAR ISO 6579 PARA AISLAR SALMONELLA

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MEDIO DE CULTIVO ISO PARA AISLAMIENTO DIFERENCIAL DE SALMONELLA EN ALIMENTOS, AGUAS Y MEDICAMENTOS

XLD AGAR ISO 6579 PARA AISLAR SALMONELLA

XLD AGAR (XYLOSE LYSINE DESOXYCOLATE)

PHARMACOPEA MEDIO  K

Detección de enterobacterias patógenas

(USP, UNE-EN ISO 6579:2003, ISO 6340)

 

COMPOSICIÓN

Extracto de levadura   3,0 g

Lactosa                       7,5 g

Sacarosa                     7,5 g

Xilosa                         3,5 g

L‑lisina                       5,0 g

Cloruro sódico            5,0 g

Desoxicolato sódico     2,5 g

Tiosulfato sódico        6,8 g

Citrato Fe-amoniacal  0,8 g

Rojo fenol                   80,0 mg

Agar‑agar                   12,5 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,4 ± 0,2

 

PREPARACIÓN

Disolver 55,1 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar con agitación hasta llegar a 98 ºC. Cesar de calentar cuando el medio esté completamente disuelto, o bien  autoclavar a 116 ºC durante sólo 1 minuto, para evitar la formación de cristales precipitados en la superficie. NO SOBRECALENTAR NI RECALENTAR, aunque en este medio MICROKIT es más difícil que aparezcan precipitados o que el agar se ablande y el asa se hunda.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN

LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT142

 

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Calabaza     PREPARADO: Estéril, Calabaza

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

Salmonella abony WDCM00029, Excelente, tras inocular <100 ufc, crecen >50%.  Colonias transparentes con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento en estría de colonias transparentes con centro negro, medio amoratado.

Shigella flexneri WDCM00126, Colonias incoloras-rosadas, buen crecimiento.

  1. coli WDCM00013, Inhibición parcial (colonias amarillas) o total.

Enterococcus faecalis WDCM00009, Inhibición completa: Ni una sola colonia.

 

PRESENTACIÓN:  MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS.

NOTA

Se utiliza para aislar enterobacterias patógenas especialmente Salmonella y Shigella. El desoxicolato sódico reduce el crecimiento de coliformes. La degradación de azúcares (Xylosa, lactosa y sacarosa) en ácidos se detecta por el viraje a amarillo del rojo fenol. La formación de sulfuro de hidrógeno se detecta por la aparición de óxido de hierro negro en el centro de las colonias. Las bacterias que descarboxilan la lysina en cadaverina se reconocen por la formación de un color púrpura en la periferia de las colonias, resultado de la alcalinización.

 

MEJORAS DE MICROKIT

Hemos observado que en la mayoría de marcas aparecen precipitados/cristalizaciones en la placa varios días tras su preparación. Y en otras muchas marcas el agar es friable (el asa se hunde al sembrar en estría).

Todo esto no sucede en el XLD de MICROKIT:

https://www.microkit.es/fichas/XLD-AGAR.pdf

Si como segundo medio de aislamiento que la ISO 6579 te exige emplear, eliges el Cromosalm (en la ISO lo llaman ABC Agar),

te garantizamos la máxima fiabilidad en tus resultados,

ya que este medio reduce al máximo los falsos positivos típicos de otros medios cromogénicos, al tener 2 cromógenos: uno específico para Salmonella y otros para las demás Enterobacterias que dan falsos positivos en los medios Magenta-Gal:

https://www.microkit.es/fichas/ABC-CROMOSALM-MICROKIT-AGAR.pdf

SIEMBRA

En superficie, por estría, a partir del enriquecimiento. Paralelamente sembrar en placas de otros medios de cultivo selectivos. Incubar 48 horas a 37 ºC aproximadamente.

 

INTERPRETACIÓN

Colonias amarillas, con o sin centro negro: Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Proteus, Serratia, Klebsiella. Las colonias rojas, sin centro negro, son de Shigella, Providencia, Salmonella, Proteus, Pseudomonas. Colonias rojas con centro negro: Salmonella, Arizona, Edwardsiella. Las colonias incoloras con o sin centro negro son de Salmonella,  Pseudomonas.

 

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

 

Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Febrero-2021

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

Si tiene dudas técnicas contacte con consultastecnicas@microkit.es

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Vibrio vulnificus: Detección e identificación más certeras

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Vibrio vulnificus: Métodos para detectarlos con mayor fiabilidad

Vibrio vulnificus: Detección e identificación más certeras mediante mejores medios de enriquecimiento, aislamiento e identificación

Ver tambien la entrada más completa: https://www.medioscultivo.com/wp-admin/post.php?post=7369&action=edit&classic-editor

INTRODUCCIÓN (para poner los pelos de punta)

Vibrio vulnificus  es un grave patógeno propio del mar y de las aguas salobres que se acumulan tras las playas con aportación de agua dulce y en las desembocaduras de los ríos.

Infecta por ingestión de productos del mar contaminados por él. Nada menos que el 50% de estas infecciones, en el caso de la mala costumbre de ingerir bivalvos crudos recolectados en la playa (aunque les echemos limón), acaban en la muerte del afectado.

Y también es un grave patógeno por infección de heridas al bañarse en agua salobres estancadas.

Se encuentra en playas, rocas y maderas en contacto con agua semisalina semi estancada, y resulta patógeno al introducirse en una herida. El agua de mar contien 37-42 g/L y el óptimo de esta especie son 20-25 g/L.

Muchos de estos casos terminan con septicemias y muertes; basta una apertura en la piel para que causen cuadros de gravedad en uno de cada cuatro infectados.

Nada menos que 1 de cada 5 personas que sufren estas infecciones a través de heridas acaban muriendo por ello.

 

Detección tras enriquecimiento

Como buen Vibrio, es Oxidasa + y Lactosa +. Pero además, esta especie es halófila (crece hasta con 60 g/l de ClNa o aún mejor: sales marinas DMT149, y no crece sin al menos 20-37 g/L).

Por ello los medios de enriquecimiento más efectivos (a menudo el paso previo necesario para detectarlo cuando está a bajas concentraciones), son hipersalinos:

El clásico:

https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-SALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf

No confundir con este otro, más indicado para V.cholerae:

https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf

La aportación de MICROKIT que mejora al Alkaline-Saline:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-HIPERSALINE-MICROKIT-BROTH.pdf

Un truco importante en Vibrio es preenriquecer-revitalizar en TSB para eliminar el stress.

Este preenriquecimiento-revitalización de unos minutos en TSB permite la detección un 50% más veces que si no se hace.

https://www.microkit.es/fichas/TSB-TRYPTIC-SOY-BROTH-polvo.pdf

 

Tras enriquecer, hay que aislar estriando en placa

También los medios clásicos de aislamiento mejoran su selectividad para este vibrio añadiéndoles 20-50 g/L de ClNa…

…o mejor aun, de sales marinas (agua de mar desecada) DMT149, ya que aumentan no sólo la presión osmótica necesaria como hace el ClNa, sino que además aportan todos los oligoelementos necesarios:

https://www.microkit.es/fichas/AGUA-DE-MAR.pdf

En el clásico TCBS V.vulnificus se distingue porque no fermenta la sacarosa, por lo que crece con colonias verde-azuladas, no amarillas:

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio vulnificus y V.parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/fichas/TCBS-VIBRIO-AGAR.pdf

Otro medio de aislamiento en placa, muy recomendable para distinguirlo de V.parahaemolyticus y de V.alginolyticus es el TSAT, basado en TTC:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-TSAT-SALINE-AGAR.pdf

ya que en el mismo, V.vulnificus crece con colonias crema o incoloras, mientras V.parahaemolyticus y Vibrio alginolyticus crecen con colonias rojas o blancas.

 

 

 

.

Otro medio que aporta MICROKIT es la versión agarizada del caldo antes indicado para halófilos:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-HIPERSALINE-MICROKIT-AGAR.pdf

Y el medio cromogénico (al que puede ser conveniente añadir 25 g/L de ClNa o de sales marinas (agua de mar desecada) DMT149:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-VIBRIO-AGAR.pdf

 

 

Confirmación de colonias sospechosas

Como siempre, los medios de aislamiento nos acercan pero no son 100% específicos, de modo que hay que confirmar las colonias sospechosas.

Aparte de la oxidasa:

https://www.microkit.es/fichas/CITOCROMO-OXIDASA-M-IDENT-ISO-16266–ISO-16649.pdf

 

o bien:

https://www.microkit.es/fichas/Citocromo-oxidasa–reactivo-en-goteros-para-banar-placas.pdf

 

 

También ofrecemos las galerías de identificación enzimática a nivel de especie en sólo 4 horas Rapid NF:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

 

 

 

 

.

También tenemos una completa gama de medios y kits de confirmación para V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus…

No se pierda nuestro video sobre V.vulnificus: https://www.youtube.com/watch?v=nkpZSuHPXqA&

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Confirmación de Clostridium perfringens desde colonias en TSC, TSN, SPS…

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El problema de la confirmación de Clostridium perfringens

Confirmación de Clostridium perfringens desde colonias en TSC, TSN, SPS… fosfatasa ácida, MUP, lactosa-gelatina, nitratos-movilidad, X-CP

Aunque pocos microorganismos que no sean Clostridium perfringens crecen con colonias negras en TSC Agar cuando se ha incubado a 43-46ºC…*

…es necesario confirmar las colonias para asegurarse que se trata del patógeno e indicador, y no de un falso positivo que nos haga perder tiempo y recursos.

https://www.microkit.es/fichas/TSC-AGAR-MUP.pdf

*la temperatura selectiva depende de si seguimos la Norma ISO de alimentos (ISO 13401) o de aguas (ISO 6461, ISO 14189)

Aunque siempre será mejor informar de un falso positivo, que de un falso negativo, que pueda afectar la salud pública al no haberse detectado.

 

Quanti P/A Clostricult

Lo mismo en el recomendable formato QPA, donde las colonias pueden pescarse con asa desde el tapón para identificar, o incluso pinchando a través de su bolsa. Este novedoso formato de inclusión en masa para el TSC, permite unos resultados mucho más veraces que la Filtración de Membrana sin tener que filtrar-oxigenar-comprometer la muestra, ni tener que emplear costosas atmósferas de anaerobiosis:

https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-2022.pdf

Linealidad en QPA-CP

Alimentos

En alimentos, Clostridium perfringens se confirma con las pruebas Lactosa, Gelatina, Nitratos y Movilidad, sin mayor problema:

https://www.microkit.es/fichas/LACTOSE-GELATIN-CLOSTRIDIUM-MEDIUM.pdf

Ya que Clostridium perfringens es Lactosa + (vira el medio rojo a naranja), licúa la gelatina que estaba sólida, reduce el nitrato a nitrito (viraje a rosa tras añadir los reactivos de nitrato A y B) y crece sin movilidad desde la línea de picadura (ver el medio Nitratos-Movilidad abajo del todo del artículo).

Lactose-Gelatin Medium sin inocular (rojo y sólido), Clostridium perfringens (naranja y licuado).

 

 

 

 

 

 

 

 

Además la nueva ISO 15213-3:2024 habla de otro medio muy selectivo:

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-LACTOSE-AGAR-BASE-LENA.pdf

 

 

Aguas

Pero en aguas, a causa de la ultima versión de la ISO, se han desmarcado de estas pruebas (desconocemos el motivo) y se han empeñado en emplear reactivos cancerígenos (fosfatasa ácida) o que caducan pocos días después de hidratarse (MUP):

https://www.microkit.es/fichas/MUP.pdf

Lo que dificulta enormemente su confirmación.

Máxime habiendo otras pruebas definitivas, como las mencionadas para alimentos.

 

Con los avances de la ciencia, debería haber ya algo que fuese definitivo y no tuviese los problemas que hemos mencionado sobre potencial cancerígeno, cortísima caducidad una vez hidratado…

Y lo hay:

Innovaciones que aún no han contemplado las Normas ISO pero ya pueden aprovecharse

Las galerías enzimáticas RAPID-ANA:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Que por un lado, son costosas, pero por otro, nos permiten conocer si la colonia se trata o no de Clostridium perfringens ¡en sólo 4 horas!

O el medio cromogénico Cromokit-CP, donde Clostridium perfringens crece con hermosas colonias de color naranja que no revierten en contacto con el aire (como sucede con las negras en TSC, que se vuelven grises o incluso blancas en cuanto sacamos la placa de la anaerobiosis, creando un serio riesgo de reportar falsos negativos):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-C-perfringens-Agar.pdf

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Debería ser el medio que sustituya al TSC en la próxima versión ISO. Mientras tanto, todos los laboratorios que no estén acreditados por la ISO 17025 ya pueden emplearlo sin problemas.

La innovación te lleva a un nivel superior. Aprovéchala de la mano de MICROKIT.

Haga sus consultas sobre la confirmación de colonias de Clostridium perfringens en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de medios y kits para la confirmación de colonias de Clostridium perfringens en: pedidos@microkit.es 

 

Ficha técnica del medio que junto al medio Lactosa-Gelatina, permite la confirmación ISO de colonias de Clostridium perfringens (al menos, en alimentos):

BUFFERED NITRATE-MOTILITY MEDIUM (BASE sin glicerol)

Confirmación de Clostridium perfringens en aguas por  Filtración de Membrana s/Norma ISO/CD 6461-2:2002 y en alimentos según FDA.

COMPOSICIÓN

Beef Extract                              3,0 g

Enzimatic Digest of Casein       5,0 g

Potassium Nitrate (KNO3)        1,0 g

D-Galactose                              5,0 g

Disodium hydrogen phosphate

(Na2 HPO4 )                              2,5 g

Agar-Agar                                5,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,1

PREPARACIÓN

Añadir 21,5 g a 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 g de glicerol. Llevar a ebullición lentamente, agitando hasta su disolución completa. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es crema y el aspecto, semisólido.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT054

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, crema

PREPARADO: Estéril, crema, semisólido

CONTROL DE CRECIMIENTO a 37°C aproximadamente, durante 24 horas, en anaerobiosis:

Clostridium perfringens  WDCM00007 (=MKTN 8237), crece sin difusión/movilidad y reduce el nitrato a nitrito.

Bacillus subtilis WDCM00003, crece con movilidad y no reduce el nitrato a nitrito.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, KIT M-IDENT-Cl.perfringens.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inmediatamente antes de su uso, regenerar el tubo preparado, hirviéndolo 15 minutos para eliminar su oxigenación. Enfriar rápidamente a 70-80°C. Inocular la colonia sospechosa, procedente de TSC o del medio elegido, en picadura. Incubar a 36 ± 2 °C durante 21 ± 3 horas, en anaerobiosis. Observar la movilidad, positiva si hay crecimiento difuso desde la línea de picadura. Añadir unas gotas (0,5 ml) de Reactivos de Nitratos A y B (MICROKIT SMN001). Observar la reducción de Nitrato a Nitrito, que se considera positiva cuando hay viraje a rosa-rojo antes de 15 minutos tras añadir los reactivos de Nitratos A y B. Si no hay viraje, añadir un poco de Zinc en polvo (SRO001), esperar 10 minutos y considerar tambien positiva la prueba si TAMPOCO hay viraje a rosa-rojo.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

Si tiene dudas técnicas contacte con consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos en pedidos@microkit.es

 

 

Aspergillus niger brasiliensis, cepa cuantitativa

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Aspergillus niger brasiliensis, cepa cuantitativa para control de calidad de los medios de cultivo para hongos, validaciones y Challenge test

Aspergillus niger brasiliensis, cepa cuantitativa

 

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición la cepa cuantitativa de Aspergillus niger brasiliensis en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00053

Con esta excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

Y que dispersa las esporas (originalmente concentradas en esporangios) para conseguir la máxima precisión intra-lote (CV desde 15%).

Aspergillus flavus, otro moho, en este caso tóxico, por ser el máximo productor de las cancerígenas aflatoxinas

ATCC™ 16404; DSM 1387; DSM 1988; NCPF 2275 WDCM 00053 Aspergillus niger brasiliensis  Pharmacopea (Test de promoción de medios para recuentos en medicamentos no estériles. Test de esterilidad. CHALLENGE TEST, moho inocuo amarillo y negro) LOTE COLOR PARDO SDA/RB/RYM PASE 3

 Otros hongos disponibles (levaduras y mohos):

ATCC™ 10231; B 49904; BCRC 21538; CBS 6431; CCM 8215; DSM 1386; IFO 1594; IHEM 3731; MUCL 30114; NCPF 3179; NCYC 1363; NIH 3147; UMIP 48.72; VTT C-85161 WDCM 00054 Candida albicans Pharmacopea (Test de promoción de medios para microorganismos específicos y recuentos en medicamentos no estériles. Test de esterilidad. Challenge Test ISO 11930) Riesgo Gr.2 PASE 3, LOTE COLOR AMARILLO SDA/Biggy. Excelente para usar en el recuento de aerobios y de hongos
ATCC™ 10651, CBS 187, CCRC 22090, CCY 39-4-2, DEM 57, IFO 1124, NRRL Y-1619, VTT C-74031 MKTC187 Pichia fermentans, levadura alterativa, PASE 3, Lote color NARANJA, SDA, RB Caf
MKTM-R001 Rhodotorula mucilaginosa (levadura salvaje pigmentada de rojo, procede de ducha de agua de MadridI) LOTE COLOR NARANJA SDA/RB PASE 3. Excelente para usar en el recuento de aerobios
ATCC™ 9763; B 42428; BCRC 20822; CBS 2978; CCM 8191; CCRC 20822; DSM 1333; IHEM 3961; MUCL 30115; NCTC 10716; NCYC 87; NRRL Y-567; UMIP 1432.83 WDCM00058 Saccharomyces cerevisiae (Pharmacopea ensayos de antibióticos, ISO 11133-2). LOTE COLOR MARRÓN Cepa lenta (6 días a 25ºC en Sabouraud SDA sin Caf, crece mejor en PDA), PASE 2,  SDA/PDA
ATCC™  8383 MKTA8383 Zygosaccharomyces rouxii, levadura alterativa, colonias cónicas o cerebriformes. Challenge test. Lote color VERDE OLIVA. Pase 2 DESDE COLECCIÓN TIPO ES. SDA/RB Caf

Medios de cultivo para detectar/enumerar hongos (levaduras y mohos) como Aspergillus niger brasiliensis

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en la bibliografía más clásica, son el SDA y SDA Caf (Sabouraud), junto con el YGC (Caf Glucose Agar) el OGYE y los medios con malta:

https://www.microkit.es/fichas/SABOURAUD-DEXTROSE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SABOURAUD-DEXTROSE-CAF-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/CHLORAMPHENICOL-GLUCOSE-AGAR-YGC.pdf

https://www.microkit.es/fichas/OGYE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/MALT-EXTRACT-AGAR.pdf

Sin embargo se trata de medios del Siglo 19 y sus variantes, que han sido muy mejorados en los Siglos XX y XXI por otros muchos.

 

Destacamos como mejores, entre la enorme cantidad de medios que existen formulados para hongos:

el Potato Dextrose Agar, que permite mayor biomasa y una mejor esporulación de los mohos:

https://www.microkit.es/fichas/POTATO-DEXTROSE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/POTATO-DEXTROSE-CAF-AGAR.pdf

el Rosa Bengala CAF Agar, que permite realizar mejor los recuentos de flora mixta ambiental (aires, superficies, aguas…) y hasta es el recomendado por la Norma ISO 100.012 de ambientes interiores…

porque los mohos invasores quedan restringidos a colonias pequeñas, lo que permite visualizar también todos los demás mohos y levaduras (el gran problema de la mayoría de medios para hongos)

https://www.microkit.es/fichas/ROSA-BENGALA-CLORANFENICOL-AGAR.pdf

los medios ISO 21527 actuales para alimentos (DRBC y DG18):

https://www.microkit.es/fichas/DICLORAN-ROSA-BENGALA-CLORANFENICOL-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/DICLORAN-GLICEROL-DG18-AGAR.pdf

el medio especial para levaduras de bebidas alcohólicas, cerveza, vino… el WL Nutrient Agar y su versión en caldo para añadir a placas con cartón absorbente:

https://www.microkit.es/fichas/WL-NUTRIENT-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/WL-NUTRIENT-BROTH.pdf

así como el también famoso en este sector, el M-Green:

https://www.microkit.es/fichas/M-GREEN-YEAST-MOULDS-BROTH.pdf

o los medios más usados en zumos, el OSA y el OSA con Caf:

https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR-CAF.pdf

y los diseñados para concentrados de zumos y mermeladas:

https://www.microkit.es/fichas/OSMOPHILIC-YEAST-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/OSMOTOLERANT-YEAST-AGAR.pdf

 

Y la gran aportación de MICROKIT para acelerar los resultados de 3-5 días de incubación a sólo 18-36h:

en cualquier producto con pH superior a 4,0: el RYM Agar (con base Sabouraud), que permite liberar los lotes sin que el recuento/detección de hongos siga siendo el eslabón más lento de la cadena del laboratorio de microbiología:

https://www.microkit.es/fichas/rapid-ym-agar.pdf

 

A diferencia de la que se emplea en los medios para bacterias, la peptona más usada en medios para hongos es la vegetal:

https://www.microkit.es/fichas/PEPTONA-POLIMICOLOGICA-VEGETAL.pdf

 

Para identificar la especie de levadura, recomendamos las galerías rápidas de identificación enzimática (4 horas) Rapid Yeast:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Y para identificar el género de moho, se necesita microscopio y claves como las que ofrece sin coste MICROKIT a los usuarios de sus medios de cultivo.

Y para la identificación más precisa, emplee nuestro servicio de identificación molecular por secuenciación genética y comparación con la base de datos más completa (Genbank), tambien disponible para levaduras y mohos.

 

Contacto

Todas estas cepas y medios mencionados (y otros/as muchos/as), así como las galerías y claves, las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Haga sus consultas sobre  las cepas más adecuadas en su caso en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

 

Cepas de Salmonella, cuantitativas

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Cepas de Salmonella, cuantitativas, para control de los medios ISO 6579 (alimentos) e ISO 6340 (aguas): S.enteritidis, S.typhimurium y S.abony

Cepas de Salmonella

Salmonella es un bacilo Gram negativo, anaerobio facultativo, móvil, urea negativo, citrato positivo, que genera gas sulfhídrico y pertenece a la familia de las Enterobacterias.

Algunas cepas se pueden considerar coliformes (Galactosidasa +) y otras no.

Antes buscada en tándem junto a Shigella, la gran olvidada por un gran número de laboratorios…

…cuando es precisamente una Shigella, la Sh.dysenteriae, la que se considera de riesgo biológico mayor: 3 en vez del 2 que se otorga a las Salmonella de transmisión alimentaria e hídrica.

Para Shigella existe la Norma 21567, ya que el Rappaport de las Normas de Salmonella, no la dejan crecer.

 

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición 3 cepas cuantitativas de Salmonella en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00029 (S.abony), WDCM 00030 (S.enteritidis) y WDCM 00031 (S.typhimurium).

Todas ellas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

 Así como Shigella:

MKTS-SH01 Shigella flexneri SALVAJE identificada genéticamente comparando su secuenciación con Genbank

Medios de cultivo para detectar/enumerar Salmonella

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en las Normas ISO, son el XLD:

https://www.microkit.es/fichas/XLD-AGAR.pdf

así como los cromogénicos basados en magenta-Gal (colonias fucsia) y el CromoSalm ABC de MICROKIT, basado en X-alfa-Gal (colonias verdes):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOSALM-ABC-MICROKIT-AGAR-MODIF-1-2022.pdf

En sectores concretos se prefiere el Sulfito de Bismuto (Wilson Blair), el Brilliant Green Agar, el DCA, el Hektoen, el SS Agar…:

https://www.microkit.es/fichas/BISMUTH-SULFITE-WILSON-BLAIR-SALMONELLA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/BRILLIANT-GREEN-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/DESOXICOLATO-CITRATO-AGAR-DCA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/HEKTOEN-ENTERIC-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-AGAR.pdf

Para su confirmación ISO se emplean medios como los Agares Nutritivos y semisólidos especiales, el Urea Agar (o Urea Broth), Citrato Agar, KIA, LIA, TSI…:

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SALMONELLA-E-COLI-O157-YERSINIA-VIBRIO.pdf

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SEMISOLID-MEDIUM-SALMONELLA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/UREA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/UREA-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SIMMONS-CITRATE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/KLIGLER-IRON-AGAR-KIA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/LYSINE-IRON-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/TRIPLE-SUGAR-IRON-AGAR-TSI.pdf

y más cómodo: las galerías de identificación bioquímica, como los Enterotubos:

https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf

o las galerías rápidas de identificación enzimática (4 horas) Rapid ONE:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Y para Shigella, cambie el Rappaport por Shigella Broth ISO 21567 (o mejor por SS Broth de MICROKIT); y cambie los medios cromogénicos para Salmonella, por SS Agar (junto al XLD):

https://www.microkit.es/fichas/SHIGELLA-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-MICROKIT-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-AGAR.pdf

 

Contacto

Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas), así como la mayor parte de los medios de cultivo y galerías, las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

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Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).