Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

Cepas de enterococos fecales, cuantitativas

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Cepas de Enterococos fecales, cuantitativas, para control de los medios ISO 7899 de aguas: E.faecalis y E.faecium

Cepas de Enterococos fecales

Los enterococos fecales son un subgrupo que se apartó hace unos años de los estreptococos fecales, aunque ambos son indicadores de lo mismo: Infiltración de aguas fecales. Son cocos Gram positivos, que se agrupan en cadenas en forma de rosarios y cuya principal característica distintiva, es que son catalasa negativos (no burbujean al añadirles reactivo para catalasa), a diferencia de los demás microorganismos aerobios y facultativos más habituales que buscamos en los laboratorios de aguas, alimentos…

Son un excelente indicador de lo mismo que indica E.coli: infiltración de aguas residuales en la red de potables.

A menudo procedentes de granjas animales o de animales salvajes (raro es el pozo o fuente natural que no los contenga), su ventaja sobre E.coli como indicador es que perduran en el agua durante muchos días, incluso semanas, por lo que son capaces de advertirnos de la contaminación provocada hace más tiempo que lo que nos permite saber E.coli (que normalmente dura 1 día o poco más en el agua).

Para saber más, incluido el método rápido validado por MICROKIT para conocer la presencia/ausencia y recuento de enterococos fecales en sólo 18 horas, lea nuestra monografía:

https://www.medioscultivo.com/enterococos-fecales-mejoras-en-su-deteccion/

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición 2 cepas cuantitativas de Enterococos fecales en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00087 (E.faecalis),

WDCM 00178 (E.faecium)

Todas ellas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

Medios de cultivo para detectar/enumerar Enterococos fecales

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en las Normas ISO, son el SB (Slanetz-Bartley) y el BEA (Bilis Esculina Azida):

https://www.microkit.es/fichas/SLANETZ-BARTLEY-M-ENTEROCOCCUS-TTC-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/BILE-ESCULIN-AZIDE-AGAR-BEA-RAPID.pdf

Tambien merece mención el KAA en alimentos:

https://www.microkit.es/fichas/KAA-AGAR.pdf

así como los cromogénicos validados por la EPA, con colonias azules (que en nuestra experiencia no son tan selectivos como el Rapid BEA de MICROKIT):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-ENTEROCOCCUS-EPA-AGAR.pdf

Su confirmación directa en los agares selectivos es muy sencilla:

Catalasa positivo de la mayoría de microorganismos aerobios y facultativos. En cambio los enterococos fecales no provocan esta efervescencia cuando se añade sobre sus colonias el reactivo para la catalasa.

Para identificar la especie, dispone de las galerías enzimáticas rápidas (le dicen la especie en sólo 4 horas) RAPID-STR:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Así, además, podrá distinguir los enterococos fecales de los estreptococos fecales y de otras cepas

Contacto

Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas), así como todos los medios de cultivo, reactivos y galerías mencionados, los tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Solicite asesoría técnica sobre qué cepas de Enterococos fecales funcionarán mejor en sus muestras y cómo debe y no debe buscarlas, (según los resultados de 2 décadas de servicios intercomparativos) y en sus validaciones en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Cepas cuantitativas de MICROKIT, la únicas lentículas cuantitativas fabricadas en España, desde hace más de 15 años, bajo Norma ISO 9001 y siguiendo las directrices sobre la competencia de los fabricantes de material de referencia (ISO 17034).

Mejora tus resultados analíticos gracias a nuestra innovación

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Aquí tienes los datos que, tras más de 200 rondas intercomparativas, demuestran los mejores resultados analíticos de quienes aplican nuestra metodología

Mejora tus resultados analíticos gracias a nuestra innovación

¿Sabías que 3 de cada 10 análisis microbiológicos son falsos positivos, falsos negativos o recuentos inexactos, por seguir protocolos oficiales obsoletos, o con puntos críticos que nadie ha salvado por tí?

Donde se ve más claro es en los resultados de los servicios intercomparativos. Eso sí, saliendo del bosque y a vista de águila.

¿Quieres salir de ese matrix, que da por normal la incertidumbre en tus resultados?

¿Necesitas aumentar la fiabilidad de tus resultados?

¿Quieres estar en ese nivel élite del 7% de laboratorios que alcanzan la excelencia en sus resultados?

Gracias a nuestra situación privilegiada y única como diseñadores y fabricantes de medios y kits, por un lado;

y por otro lado como coordinadores de los ensayos intercomparativos más veteranos (26 años, con 100 rondas en alimentos; 69 rondas de aguas; 51 rondas de cosméticos), donde vemos a vista de águila los fallos de cada método/medio/kit, evitando que el árbol nos impida ver el bosque;

y por último, como analistas en nuestro propio laboratorio de análisis y nuestra visión más global en los análisis contradictorios.

Gracias a todo ello, nosotros ya hace tiempo que encontramos las diversas soluciones a los puntos críticos que llevan a cometer esos errores comunes.

En MICROKIT entendemos tus problemas, porque lo que te sucede, ya lo hemos vivido y solucionado. Te aconsejamos cómo resolver tus dudas con la mayor fiabilidad, dándote una amplia gama de soluciones exclusivas de excelente calidad, comodidad y rapidez. Nuestra consultoría es personalizada: nos ponemos a tu nivel técnico para que nos entiendas al 100%, es más una tutoría o mentoría.

Veamos exactamente cuáles son esos errores detectados en intercomparación, dentro del control microbiológíco de alimentos, aguas y cosméticos; y cuál es la evolución de los laboratorios que aplican las soluciones MICROKIT:

1-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE ALIMENTOS: Enseñanzas de 100 rondas

Problema 1:

El fallo más monumental que hemos encontrado en Seilalimentos es que no se tiene en cuenta en microbiología de alimentos (y sí que se tiene en cuenta en microbiología de aguas y de cosméticos) el efecto matriz, lo que provoca falsos negativos en numerosos tipos de alimentos, donde sus conservantes, especias y microbiota acompañante, inhiben en numerosos laboratorios la manifestación de algunos de los microorganismos que buscamos:

El porcentaje de laboratorios que obtiene excelencia de resultados (ni un solo falso negativo) y usa nuestra solución BPNW (Buffered Peptone Neutralizing Water, APTN: Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante, patente MICROKIT) es del 81,34%, mientras que el porcentaje de laboratorios que obtiene excelencia de resultados (ni un solo falso negativo) y usa Agua de Peptona o Agua de Peptona Tamponada, sin neutralizantes, es del 52,21%.

No es que no haya laboratorios que alcanzan la excelencia de resultados sin usar BPNW, lo que detectamos es que muchos más de los que la usan, la consiguen.

Una diferencia del 29,13% de más laboratorios que obtienen la excelencia cuando se usa BPNW en vez de las aguas de peptona tradicionales. Casi 1/3 más de laboratorios con excelencia, a favor del BPNW.

Por otra parte, entre todos los participantes en las mismas rondas, que usan BPNW, el número medio de falsos negativos por usuario es de 0,62, mientras que entre todos los usuarios en las mismas rondas de los caldos peptonados sin neutralizantes, el número medio de falsos negativos por usuario sube a 1,39.

El número de falsos negativos entre los usuarios de caldos peptonados no neutralizantes, es más del doble que entre los usuarios de BPNW.

Podemos concluir que el uso de BPNW reduce a menos del 50% el número de falsos negativos, algo que ninguna otra variable había conseguido jamás a semejante nivel.

Problema 2:

El microorganismo que más % de falsos resultados genera en Seilalimentos es Staphylococcus aureus. En algunas rondas (algunos tipos de alimentos) no sucede, pero en la mayoría de casos, muchos laboratorios no la encuentran cuando está presente (falsos negativos) y en otras rondas muchos laboratorios la encuentran cuando no está presente (falsos positivos). El empleo de medios de cultivo clásicos (Baird Parker, rpf, y no hablemos del Mannitol Salt Agar) e incluso de medios cromogénicos con un solo cromógeno y de métodos rápidos indirectos, es el candidato número uno a estos errores analíticos.

La solución que MICROKIT propone es el uso del Baird Parker Mannitol Yema Agar (BPMY). La dición de mannitol (sin sal) al Baird Parker, lo cambia todo, eliminando esos graves proporciones de falsos negativos). Es una solución que solo lleva desde 12-2022 en el mercado, pero ya despunta en resultados. Ver la entrada:

https://www.medioscultivo.com/mejor-medio-para-staphylococcus-aureus/

Otros problemas generales:

Otros microorganismos que suelen dar la mayor % de problemas en Seilalimentos, dependiendo del tipo de alimento y de la microbiota acompañante concreta, en los últimos 5 años de intercomparación son:

Parámetro	Resultados erróneos
Clostridium perfringens	hasta el 67%
E.coli	hasta el 67%
Bacillus cereus	hasta el 50%
Listeria monocytogenes	hasta el 33%
Salmonella spp	hasta el 33%
Levaduras y Mohos	hasta un 15%

Hace unos años, los resultados detectados en Seilalimentos eran también dramáticos, lo que demuestra que la mejora continua es más que una filosofía que debe aparecer escrita en nuestra documentación técnica, y hemos de verdad de buscar acercarnos cada vez más a la eficiencia >95%:

Parámetro	Eficiencia
Staphylococcus aureus	65 %
Listeria monocytogenes	66 %
Levaduras y Mohos	70%
Clostridium perfringens y sus esporas	72 %
Bacillus cereus	75%
E.coli	77%
Salmonella spp, y Shigella spp	77 %

Para no extender demasiado este documento, consulte cuáles son las soluciones MICROKIT en todos ellos y cómo aumentan tambien la eficacia de los resultados. Nuestra consultoría en consultastecnicas@microkit.es es gratuita. Queremos compartir lo que hemos aprendido en estas décadas de la historia con quien honre estos conocimientos, aplicándolos:

2-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AGUAS: Enseñanzas de 69 rondas

En este caso a nadie se le ocurre analizar aguas cloradas sin antes inactivar el cloro, por lo que no podemos hablar del efecto matriz. Sin embargo la proporción de falsos negativos en algunos parámetros es tan dramática como vimos que ocurría en alimentos, en este caso a causa de una técnica destructiva de células como es la filtración de membrana:

Parámetro	Resultados erróneos Método oficial	Resultados erróneos soluciones MICROKIT
Clostridium perfringens	49%	3%
E.coli y demás Coliformes	21%	2%
Enterococos fecales	6%	0%
Pseudomonas aeruginosa	33%	0%

Hace unos años, los resultados detectados en Seilagua eran también dramáticos, por lo que todos debemos acercarnos cada vez más a la eficiencia >95%:

Parámetro	Eficiencia
Clostridium perfringens y sus esporas	29%
Staphylococcus aureus	62%
Vibrio cholerae	60%
Pseudomonas aeruginosa	78%
E. coli	79%
Coliformes	80%

3-CONTROL MICROBIOLÓGICO DE COSMÉTICOS: Enseñanzas de 51 rondas propias y 7 ajenas

En este caso, a pocos se les ocurre analizar cosméticos (repletos de conservantes) sin antes inactivar éstos adecuadamente, por lo que no podemos hablar del efecto matriz. Sin embargo la proporción de falsos negativos en algunos parámetros es tan dramática como vimos que ocurría en alimentos y en aguas:

Parámetro	Agar clásico	Resultados falsos	Solución MICROKIT	Resultados falsos
Staphylococcus aureus	Baird Parker	55%	Cromokit X-Staph Agar	5%
Peudomonas aeruginosa	Agar Cetrimida de marcas clínicas	90%	Cromokit Cetrimida Agar	5%
E.coli	MacConkey Agar	60%	MugPlus Agar	5%
Candida albicans	Sabouraud	25%	Biggy Candida Agar	5%

En estos años de comparación profesional, la calificación del rendimiento de los participantes sube de una media de 6/10 en noveles a una media de 9/10 en veteranos ¡un 30%!

Gran parte del mérito de esta hazaña lo merece el caldo inactivador validado LPTN Broth de MICROKIT, frente a caldos obsoletos como el Letheen Modif o el Eugon Modif

¡La innovación te lleva a un nivel superior!

https://www.microkit.es/publicaciones.htm

Contacta con consultastecnicas@microkit.es y déjate guiar por nuestros expertos

XLD AGAR ISO 6579 PARA AISLAR SALMONELLA

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MEDIO DE CULTIVO ISO PARA AISLAMIENTO DIFERENCIAL DE SALMONELLA EN ALIMENTOS, AGUAS Y MEDICAMENTOS

XLD AGAR ISO 6579 PARA AISLAR SALMONELLA

XLD AGAR (XYLOSE LYSINE DESOXYCOLATE)

PHARMACOPEA MEDIO K

Detección de enterobacterias patógenas

(USP, UNE-EN ISO 6579:2003, ISO 6340)

COMPOSICIÓN

Extracto de levadura 3,0 g

Lactosa 7,5 g

Sacarosa 7,5 g

Xilosa 3,5 g

L‑lisina 5,0 g

Cloruro sódico 5,0 g

Desoxicolato sódico 2,5 g

Tiosulfato sódico 6,8 g

Citrato Fe-amoniacal 0,8 g

Rojo fenol 80,0 mg

Agar‑agar 12,5 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,4 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 55,1 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar con agitación hasta llegar a 98 ºC. Cesar de calentar cuando el medio esté completamente disuelto, o bien autoclavar a 116 ºC durante sólo 1 minuto, para evitar la formación de cristales precipitados en la superficie. NO SOBRECALENTAR NI RECALENTAR, aunque en este medio MICROKIT es más difícil que aparezcan precipitados o que el agar se ablande y el asa se hunda.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN

LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT142

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Calabaza PREPARADO: Estéril, Calabaza

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 (Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:

Salmonella abony WDCM00029, Excelente, tras inocular <100 ufc, crecen >50%. Colonias transparentes con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento en estría de colonias transparentes con centro negro, medio amoratado.

Shigella flexneri WDCM00126, Colonias incoloras-rosadas, buen crecimiento.

coli WDCM00013, Inhibición parcial (colonias amarillas) o total.

Enterococcus faecalis WDCM00009, Inhibición completa: Ni una sola colonia.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS.

NOTA

Se utiliza para aislar enterobacterias patógenas especialmente Salmonella y Shigella. El desoxicolato sódico reduce el crecimiento de coliformes. La degradación de azúcares (Xylosa, lactosa y sacarosa) en ácidos se detecta por el viraje a amarillo del rojo fenol. La formación de sulfuro de hidrógeno se detecta por la aparición de óxido de hierro negro en el centro de las colonias. Las bacterias que descarboxilan la lysina en cadaverina se reconocen por la formación de un color púrpura en la periferia de las colonias, resultado de la alcalinización.

MEJORAS DE MICROKIT

Hemos observado que en la mayoría de marcas aparecen precipitados/cristalizaciones en la placa varios días tras su preparación. Y en otras muchas marcas el agar es friable (el asa se hunde al sembrar en estría).

Todo esto no sucede en el XLD de MICROKIT:

https://www.microkit.es/fichas/XLD-AGAR.pdf

Si como segundo medio de aislamiento que la ISO 6579 te exige emplear, eliges el Cromosalm (en la ISO lo llaman ABC Agar),

te garantizamos la máxima fiabilidad en tus resultados,

ya que este medio reduce al máximo los falsos positivos típicos de otros medios cromogénicos, al tener 2 cromógenos: uno específico para Salmonella y otros para las demás Enterobacterias que dan falsos positivos en los medios Magenta-Gal:

https://www.microkit.es/fichas/ABC-CROMOSALM-MICROKIT-AGAR.pdf

SIEMBRA

En superficie, por estría, a partir del enriquecimiento. Paralelamente sembrar en placas de otros medios de cultivo selectivos. Incubar 48 horas a 37 ºC aproximadamente.

INTERPRETACIÓN

Colonias amarillas, con o sin centro negro: Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Proteus, Serratia, Klebsiella. Las colonias rojas, sin centro negro, son de Shigella, Providencia, Salmonella, Proteus, Pseudomonas. Colonias rojas con centro negro: Salmonella, Arizona, Edwardsiella. Las colonias incoloras con o sin centro negro son de Salmonella, Pseudomonas.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Febrero-2021

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

Si tiene dudas técnicas contacte con consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos en pedidos@microkit.es

Vibrio vulnificus: Detección e identificación más certeras

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Vibrio vulnificus: Métodos para detectarlos con mayor fiabilidad

Vibrio vulnificus: Detección e identificación más certeras mediante mejores medios de enriquecimiento, aislamiento e identificación

Ver tambien la entrada más completa: https://www.medioscultivo.com/wp-admin/post.php?post=7369&action=edit&classic-editor

INTRODUCCIÓN (para poner los pelos de punta)

Vibrio vulnificus es un grave patógeno propio del mar y de las aguas salobres que se acumulan tras las playas con aportación de agua dulce y en las desembocaduras de los ríos.

Infecta por ingestión de productos del mar contaminados por él. Nada menos que el 50% de estas infecciones, en el caso de la mala costumbre de ingerir bivalvos crudos recolectados en la playa (aunque les echemos limón), acaban en la muerte del afectado.

Y también es un grave patógeno por infección de heridas al bañarse en agua salobres estancadas.

Se encuentra en playas, rocas y maderas en contacto con agua semisalina semi estancada, y resulta patógeno al introducirse en una herida. El agua de mar contien 37-42 g/L y el óptimo de esta especie son 20-25 g/L.

Muchos de estos casos terminan con septicemias y muertes; basta una apertura en la piel para que causen cuadros de gravedad en uno de cada cuatro infectados.

Nada menos que 1 de cada 5 personas que sufren estas infecciones a través de heridas acaban muriendo por ello.

Detección tras enriquecimiento

Como buen Vibrio, es Oxidasa + y Lactosa +. Pero además, esta especie es halófila (crece hasta con 60 g/l de ClNa o aún mejor: sales marinas DMT149, y no crece sin al menos 20-37 g/L).

Por ello los medios de enriquecimiento más efectivos (a menudo el paso previo necesario para detectarlo cuando está a bajas concentraciones), son hipersalinos:

El clásico:

https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-SALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf

No confundir con este otro, más indicado para V.cholerae:

https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf

La aportación de MICROKIT que mejora al Alkaline-Saline:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-HIPERSALINE-MICROKIT-BROTH.pdf

Un truco importante en Vibrio es preenriquecer-revitalizar en TSB para eliminar el stress.

Este preenriquecimiento-revitalización de unos minutos en TSB permite la detección un 50% más veces que si no se hace.

https://www.microkit.es/fichas/TSB-TRYPTIC-SOY-BROTH-polvo.pdf

Tras enriquecer, hay que aislar estriando en placa

También los medios clásicos de aislamiento mejoran su selectividad para este vibrio añadiéndoles 20-50 g/L de ClNa…

…o mejor aun, de sales marinas (agua de mar desecada) DMT149, ya que aumentan no sólo la presión osmótica necesaria como hace el ClNa, sino que además aportan todos los oligoelementos necesarios:

https://www.microkit.es/fichas/AGUA-DE-MAR.pdf

En el clásico TCBS V.vulnificus se distingue porque no fermenta la sacarosa, por lo que crece con colonias verde-azuladas, no amarillas:

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio vulnificus y V.parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

https://www.microkit.es/fichas/TCBS-VIBRIO-AGAR.pdf

Otro medio de aislamiento en placa, muy recomendable para distinguirlo de V.parahaemolyticus y de V.alginolyticus es el TSAT, basado en TTC:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-TSAT-SALINE-AGAR.pdf

ya que en el mismo, V.vulnificus crece con colonias crema o incoloras, mientras V.parahaemolyticus y Vibrio alginolyticus crecen con colonias rojas o blancas.

Otro medio que aporta MICROKIT es la versión agarizada del caldo antes indicado para halófilos:

https://www.microkit.es/fichas/VIBRIO-HIPERSALINE-MICROKIT-AGAR.pdf

Y el medio cromogénico (al que puede ser conveniente añadir 25 g/L de ClNa o de sales marinas (agua de mar desecada) DMT149:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-VIBRIO-AGAR.pdf

Confirmación de colonias sospechosas

Como siempre, los medios de aislamiento nos acercan pero no son 100% específicos, de modo que hay que confirmar las colonias sospechosas.

Aparte de la oxidasa:

https://www.microkit.es/fichas/CITOCROMO-OXIDASA-M-IDENT-ISO-16266–ISO-16649.pdf

o bien:

https://www.microkit.es/fichas/Citocromo-oxidasa–reactivo-en-goteros-para-banar-placas.pdf

También ofrecemos las galerías de identificación enzimática a nivel de especie en sólo 4 horas Rapid NF:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

También tenemos una completa gama de medios y kits de confirmación para V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus…

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

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Confirmación de Clostridium perfringens desde colonias en TSC, TSN, SPS…

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El problema de la confirmación de Clostridium perfringens

Confirmación de Clostridium perfringens desde colonias en TSC, TSN, SPS… fosfatasa ácida, MUP, lactosa-gelatina, nitratos-movilidad, X-CP

Aunque pocos microorganismos que no sean Clostridium perfringens crecen con colonias negras en TSC Agar cuando se ha incubado a 43-46ºC…*

…es necesario confirmar las colonias para asegurarse que se trata del patógeno e indicador, y no de un falso positivo que nos haga perder tiempo y recursos.

https://www.microkit.es/fichas/TSC-AGAR-MUP.pdf

*la temperatura selectiva depende de si seguimos la Norma ISO de alimentos (ISO 13401) o de aguas (ISO 6461, ISO 14189)

Aunque siempre será mejor informar de un falso positivo, que de un falso negativo, que pueda afectar la salud pública al no haberse detectado.

Quanti P/A Clostricult

Lo mismo en el recomendable formato QPA, donde las colonias pueden pescarse con asa desde el tapón para identificar, o incluso pinchando a través de su bolsa. Este novedoso formato de inclusión en masa para el TSC, permite unos resultados mucho más veraces que la Filtración de Membrana sin tener que filtrar-oxigenar-comprometer la muestra, ni tener que emplear costosas atmósferas de anaerobiosis:

https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-2022.pdf

Linealidad en QPA-CP

Alimentos

En alimentos, Clostridium perfringens se confirma con las pruebas Lactosa, Gelatina, Nitratos y Movilidad, sin mayor problema:

https://www.microkit.es/fichas/LACTOSE-GELATIN-CLOSTRIDIUM-MEDIUM.pdf

Ya que Clostridium perfringens es Lactosa + (vira el medio rojo a naranja), licúa la gelatina que estaba sólida, reduce el nitrato a nitrito (viraje a rosa tras añadir los reactivos de nitrato A y B) y crece sin movilidad desde la línea de picadura (ver el medio Nitratos-Movilidad abajo del todo del artículo).

Lactose-Gelatin Medium sin inocular (rojo y sólido), Clostridium perfringens (naranja y licuado).

Además la nueva ISO 15213-3:2024 habla de otro medio muy selectivo:

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-LACTOSE-AGAR-BASE-LENA.pdf

Aguas

Pero en aguas, a causa de la ultima versión de la ISO, se han desmarcado de estas pruebas (desconocemos el motivo) y se han empeñado en emplear reactivos cancerígenos (fosfatasa ácida) o que caducan pocos días después de hidratarse (MUP):

https://www.microkit.es/fichas/MUP.pdf

Lo que dificulta enormemente su confirmación.

Máxime habiendo otras pruebas definitivas, como las mencionadas para alimentos.

Con los avances de la ciencia, debería haber ya algo que fuese definitivo y no tuviese los problemas que hemos mencionado sobre potencial cancerígeno, cortísima caducidad una vez hidratado…

Y lo hay:

Innovaciones que aún no han contemplado las Normas ISO pero ya pueden aprovecharse

Las galerías enzimáticas RAPID-ANA:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Que por un lado, son costosas, pero por otro, nos permiten conocer si la colonia se trata o no de Clostridium perfringens ¡en sólo 4 horas!

O el medio cromogénico Cromokit-CP, donde Clostridium perfringens crece con hermosas colonias de color naranja que no revierten en contacto con el aire (como sucede con las negras en TSC, que se vuelven grises o incluso blancas en cuanto sacamos la placa de la anaerobiosis, creando un serio riesgo de reportar falsos negativos):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-C-perfringens-Agar.pdf

Debería ser el medio que sustituya al TSC en la próxima versión ISO. Mientras tanto, todos los laboratorios que no estén acreditados por la ISO 17025 ya pueden emplearlo sin problemas.

La innovación te lleva a un nivel superior. Aprovéchala de la mano de MICROKIT.

Haga sus consultas sobre la confirmación de colonias de Clostridium perfringens en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de medios y kits para la confirmación de colonias de Clostridium perfringens en: pedidos@microkit.es

Ficha técnica del medio que junto al medio Lactosa-Gelatina, permite la confirmación ISO de colonias de Clostridium perfringens (al menos, en alimentos):

BUFFERED NITRATE-MOTILITY MEDIUM (BASE sin glicerol)

Confirmación de Clostridium perfringens en aguas por Filtración de Membrana s/Norma ISO/CD 6461-2:2002 y en alimentos según FDA.

COMPOSICIÓN

Beef Extract 3,0 g

Enzimatic Digest of Casein 5,0 g

Potassium Nitrate (KNO₃) 1,0 g

D-Galactose 5,0 g

Disodium hydrogen phosphate

(Na₂ HPO₄ ) 2,5 g

Agar-Agar 5,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,1

PREPARACIÓN

Añadir 21,5 g a 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 g de glicerol. Llevar a ebullición lentamente, agitando hasta su disolución completa. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es crema y el aspecto, semisólido.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT054

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, crema

PREPARADO: Estéril, crema, semisólido

CONTROL DE CRECIMIENTO a 37°C aproximadamente, durante 24 horas, en anaerobiosis:

Clostridium perfringens WDCM00007 (=MKTN 8237), crece sin difusión/movilidad y reduce el nitrato a nitrito.

Bacillus subtilis WDCM00003, crece con movilidad y no reduce el nitrato a nitrito.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, KIT M-IDENT-Cl.perfringens.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inmediatamente antes de su uso, regenerar el tubo preparado, hirviéndolo 15 minutos para eliminar su oxigenación. Enfriar rápidamente a 70-80°C. Inocular la colonia sospechosa, procedente de TSC o del medio elegido, en picadura. Incubar a 36 ± 2 °C durante 21 ± 3 horas, en anaerobiosis. Observar la movilidad, positiva si hay crecimiento difuso desde la línea de picadura. Añadir unas gotas (0,5 ml) de Reactivos de Nitratos A y B (MICROKIT SMN001). Observar la reducción de Nitrato a Nitrito, que se considera positiva cuando hay viraje a rosa-rojo antes de 15 minutos tras añadir los reactivos de Nitratos A y B. Si no hay viraje, añadir un poco de Zinc en polvo (SRO001), esperar 10 minutos y considerar tambien positiva la prueba si TAMPOCO hay viraje a rosa-rojo.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

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Aspergillus niger brasiliensis, cepa cuantitativa

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Aspergillus niger brasiliensis, cepa cuantitativa para control de calidad de los medios de cultivo para hongos, validaciones y Challenge test

Aspergillus niger brasiliensis, cepa cuantitativa

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición la cepa cuantitativa de Aspergillus niger brasiliensis en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00053

Con esta excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

Y que dispersa las esporas (originalmente concentradas en esporangios) para conseguir la máxima precisión intra-lote (CV desde 15%).

Aspergillus flavus, otro moho, en este caso tóxico, por ser el máximo productor de las cancerígenas aflatoxinas

ATCC™ 16404; DSM 1387; DSM 1988; NCPF 2275

WDCM 00053

Aspergillus niger brasiliensis Pharmacopea (Test de promoción de medios para recuentos en medicamentos no estériles. Test de esterilidad. CHALLENGE TEST, moho inocuo amarillo y negro) LOTE COLOR PARDO SDA/RB/RYM PASE 3

Otros hongos disponibles (levaduras y mohos):

ATCC™ 10231; B 49904; BCRC 21538; CBS 6431; CCM 8215; DSM 1386; IFO 1594; IHEM 3731; MUCL 30114; NCPF 3179; NCYC 1363; NIH 3147; UMIP 48.72; VTT C-85161

WDCM 00054

Candida albicans Pharmacopea (Test de promoción de medios para microorganismos específicos y recuentos en medicamentos no estériles. Test de esterilidad. Challenge Test ISO 11930) Riesgo Gr.2 PASE 3, LOTE COLOR AMARILLO SDA/Biggy. Excelente para usar en el recuento de aerobios y de hongos

ATCC™ 10651, CBS 187, CCRC 22090, CCY 39-4-2, DEM 57, IFO 1124, NRRL Y-1619, VTT C-74031

MKTC187

Pichia fermentans, levadura alterativa, PASE 3, Lote color NARANJA, SDA, RB Caf

MKTM-R001

Rhodotorula mucilaginosa (levadura salvaje pigmentada de rojo, procede de ducha de agua de MadridI) LOTE COLOR NARANJA SDA/RB PASE 3. Excelente para usar en el recuento de aerobios

ATCC™ 9763; B 42428; BCRC 20822; CBS 2978; CCM 8191; CCRC 20822; DSM 1333; IHEM 3961; MUCL 30115; NCTC 10716; NCYC 87; NRRL Y-567; UMIP 1432.83

WDCM00058

Saccharomyces cerevisiae (Pharmacopea ensayos de antibióticos, ISO 11133-2). LOTE COLOR MARRÓN Cepa lenta (6 días a 25ºC en Sabouraud SDA sin Caf, crece mejor en PDA), PASE 2, SDA/PDA

ATCC™ 8383

MKTA8383

Zygosaccharomyces rouxii, levadura alterativa, colonias cónicas o cerebriformes. Challenge test. Lote color VERDE OLIVA. Pase 2 DESDE COLECCIÓN TIPO ES. SDA/RB Caf

Medios de cultivo para detectar/enumerar hongos (levaduras y mohos) como Aspergillus niger brasiliensis

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en la bibliografía más clásica, son el SDA y SDA Caf (Sabouraud), junto con el YGC (Caf Glucose Agar) el OGYE y los medios con malta:

https://www.microkit.es/fichas/SABOURAUD-DEXTROSE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SABOURAUD-DEXTROSE-CAF-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/CHLORAMPHENICOL-GLUCOSE-AGAR-YGC.pdf

https://www.microkit.es/fichas/OGYE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/MALT-EXTRACT-AGAR.pdf

Sin embargo se trata de medios del Siglo 19 y sus variantes, que han sido muy mejorados en los Siglos XX y XXI por otros muchos.

Destacamos como mejores, entre la enorme cantidad de medios que existen formulados para hongos:

el Potato Dextrose Agar, que permite mayor biomasa y una mejor esporulación de los mohos:

https://www.microkit.es/fichas/POTATO-DEXTROSE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/POTATO-DEXTROSE-CAF-AGAR.pdf

el Rosa Bengala CAF Agar, que permite realizar mejor los recuentos de flora mixta ambiental (aires, superficies, aguas…) y hasta es el recomendado por la Norma ISO 100.012 de ambientes interiores…

porque los mohos invasores quedan restringidos a colonias pequeñas, lo que permite visualizar también todos los demás mohos y levaduras (el gran problema de la mayoría de medios para hongos)

https://www.microkit.es/fichas/ROSA-BENGALA-CLORANFENICOL-AGAR.pdf

los medios ISO 21527 actuales para alimentos (DRBC y DG18):

https://www.microkit.es/fichas/DICLORAN-ROSA-BENGALA-CLORANFENICOL-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/DICLORAN-GLICEROL-DG18-AGAR.pdf

el medio especial para levaduras de bebidas alcohólicas, cerveza, vino… el WL Nutrient Agar y su versión en caldo para añadir a placas con cartón absorbente:

https://www.microkit.es/fichas/WL-NUTRIENT-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/WL-NUTRIENT-BROTH.pdf

así como el también famoso en este sector, el M-Green:

https://www.microkit.es/fichas/M-GREEN-YEAST-MOULDS-BROTH.pdf

o los medios más usados en zumos, el OSA y el OSA con Caf:

https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR-CAF.pdf

y los diseñados para concentrados de zumos y mermeladas:

https://www.microkit.es/fichas/OSMOPHILIC-YEAST-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/OSMOTOLERANT-YEAST-AGAR.pdf

Y la gran aportación de MICROKIT para acelerar los resultados de 3-5 días de incubación a sólo 18-36h:

en cualquier producto con pH superior a 4,0: el RYM Agar (con base Sabouraud), que permite liberar los lotes sin que el recuento/detección de hongos siga siendo el eslabón más lento de la cadena del laboratorio de microbiología:

https://www.microkit.es/fichas/rapid-ym-agar.pdf

A diferencia de la que se emplea en los medios para bacterias, la peptona más usada en medios para hongos es la vegetal:

https://www.microkit.es/fichas/PEPTONA-POLIMICOLOGICA-VEGETAL.pdf

Para identificar la especie de levadura, recomendamos las galerías rápidas de identificación enzimática (4 horas) Rapid Yeast:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Y para identificar el género de moho, se necesita microscopio y claves como las que ofrece sin coste MICROKIT a los usuarios de sus medios de cultivo.

Y para la identificación más precisa, emplee nuestro servicio de identificación molecular por secuenciación genética y comparación con la base de datos más completa (Genbank), tambien disponible para levaduras y mohos.

Contacto

Todas estas cepas y medios mencionados (y otros/as muchos/as), así como las galerías y claves, las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Haga sus consultas sobre las cepas más adecuadas en su caso en: consultastecnicas@microkit.es

Haga sus pedidos de cepas en: pedidos@microkit.es

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Cepas de Salmonella, cuantitativas

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Cepas de Salmonella, cuantitativas, para control de los medios ISO 6579 (alimentos) e ISO 6340 (aguas): S.enteritidis, S.typhimurium y S.abony

Cepas de Salmonella

Salmonella es un bacilo Gram negativo, anaerobio facultativo, móvil, urea negativo, citrato positivo, que genera gas sulfhídrico y pertenece a la familia de las Enterobacterias.

Algunas cepas se pueden considerar coliformes (Galactosidasa +) y otras no.

Antes buscada en tándem junto a Shigella, la gran olvidada por un gran número de laboratorios…

…cuando es precisamente una Shigella, la Sh.dysenteriae, la que se considera de riesgo biológico mayor: 3 en vez del 2 que se otorga a las Salmonella de transmisión alimentaria e hídrica.

Para Shigella existe la Norma 21567, ya que el Rappaport de las Normas de Salmonella, no la dejan crecer.

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición 3 cepas cuantitativas de Salmonella en formato lentícula estabilizada, con el doble de vida útil que la mayoría de cepas cuantitativas (en nuestro caso, 2 años de caducidad desde fabricación):

WDCM 00029 (S.abony), WDCM 00030 (S.enteritidis) y WDCM 00031 (S.typhimurium).

Todas ellas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que no las maltrata, como lo hace la liofilización.

Así como Shigella:

MKTS-SH01

Shigella flexneri SALVAJE identificada genéticamente comparando su secuenciación con Genbank

Medios de cultivo para detectar/enumerar Salmonella

Los medios más usados para su aislamiento en placa, por su mención en las Normas ISO, son el XLD:

https://www.microkit.es/fichas/XLD-AGAR.pdf

así como los cromogénicos basados en magenta-Gal (colonias fucsia) y el CromoSalm ABC de MICROKIT, basado en X-alfa-Gal (colonias verdes):

https://www.microkit.es/fichas/CROMOSALM-ABC-MICROKIT-AGAR-MODIF-1-2022.pdf

En sectores concretos se prefiere el Sulfito de Bismuto (Wilson Blair), el Brilliant Green Agar, el DCA, el Hektoen, el SS Agar…:

https://www.microkit.es/fichas/BISMUTH-SULFITE-WILSON-BLAIR-SALMONELLA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/BRILLIANT-GREEN-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/DESOXICOLATO-CITRATO-AGAR-DCA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/HEKTOEN-ENTERIC-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-AGAR.pdf

Para su confirmación ISO se emplean medios como los Agares Nutritivos y semisólidos especiales, el Urea Agar (o Urea Broth), Citrato Agar, KIA, LIA, TSI…:

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SALMONELLA-E-COLI-O157-YERSINIA-VIBRIO.pdf

https://www.microkit.es/fichas/NUTRIENT-AGAR-SEMISOLID-MEDIUM-SALMONELLA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/UREA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/UREA-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SIMMONS-CITRATE-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/KLIGLER-IRON-AGAR-KIA.pdf

https://www.microkit.es/fichas/LYSINE-IRON-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/TRIPLE-SUGAR-IRON-AGAR-TSI.pdf

y más cómodo: las galerías de identificación bioquímica, como los Enterotubos:

https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf

o las galerías rápidas de identificación enzimática (4 horas) Rapid ONE:

https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf

Y para Shigella, cambie el Rappaport por Shigella Broth ISO 21567 (o mejor por SS Broth de MICROKIT); y cambie los medios cromogénicos para Salmonella, por SS Agar (junto al XLD):

https://www.microkit.es/fichas/SHIGELLA-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-MICROKIT-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-AGAR.pdf

Contacto

Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas), así como la mayor parte de los medios de cultivo y galerías, las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock de cepas cuantitativas para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

Solicite asesoría técnica sobre qué cepas de Salmonella funcionarán mejor en sus muestras y cómo debe y no debe buscarlas, (según los resultados de 2 décadas de servicios intercomparativos) y en sus validaciones en: consultastecnicas@microkit.es

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Cepas de Clostridium perfringens, cuantitativas

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Cepas de Clostridium perfringens, cuantitativas, para control de los medios ISOs 14189 y 26461 (aguas) e ISOs 13401 y 15213 (alimentos)

Cepas de Clostridium perfringens

Clostridium perfringens es un bacilo anaerobio estricto, Gram positivo, esporulado e inmóvil. El anaerobio más buscado, no sólo por su capacidad patógena (gangrena gaseosa, toxiinfecciones alimentarias y de transmisión por vía acuática…) sino porque es un excelente indicador de infiltración de aguas naturales en la red de aguas de consumo humano.

Cepas disponibles en stock para entrega inmediata

MICROKIT pone a su disposición dos cepas cuantitativas de Clostridium perfringens en formato lentícula estabilizada (2 años de caducidad desde fabricación): WDCM 00007 (hemolítica) y WDCM 00174.

Ambas con excelente capacidad de conservación, dado que las fabricamos con un sistema que nos permite mantenerlas siempre en estricta anaerobiosis.

Y ambas con células vegetativas y esporas a la vez, por lo que le sirven para el control de medios con y sin shock térmico.

Así como otros anaerobios acompañantes o interferentes:

WDCM00079

Clostridium bifermentans (Paraclostridium) ISO 11133-2 (Desde FTM enriquecido, desecado en anaerobiosis doble para mejor mantenimiento) LOTE COLOR CARAMELO, TSC/Schaedler Agar, PASE 2

Medios de cultivo para detectar/enumerar Clostridium perfringens

En aguas, el medio de referencia sobre el que se debe demostrar el correcto crecimiento típico de Clostridium perfringens (colonias negras o grises), es el Agar TSC (MICROKIT DMT175), según ISOs 14189 y 26461;

https://www.microkit.es/fichas/TSC-AGAR-MUP.pdf

y en alimentos, según ISO 13401 el mismo TSC y según ISO 15213 de 2024, el LENA Agar (DMT295), con colonias amarillas que viran el medio rojo a amarillo.

https://www.microkit.es/fichas/C-PERFRINGENS-LACTOSE-AGAR-BASE-LENA.pdf

Aunque para los laboratorios no sometidos a Normas ISO, y que van más allá de lo que hace la mayoría, funciona mucho mejor el Cromokit CP Agar (colonias naranjas y exhuberantes que no revierten de color al airearse, como sucede con el TSC).

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-C-perfringens-Agar.pdf

En las cepas de MICROKIT de Clostridium perfringens, certificamos la concentración de cada lote en TSC y además en Agar Schaedler (medio general como un TSA, pero para anaerobios).

https://www.microkit.es/fichas/SCHAEDLER-AGAR.pdf

NOTA:

El mayor enemigo de los anaerobios estrictos, como es Clostridium perfringens, es el oxígeno del aire:

es suficiente el rato en que se tarda en hacer un análisis en el que se le oxigene (ej; durante la filtración de membrana MF) para que los recuentos caigan en picado entre 1 y 2 órdenes de magnitud (por ejemplo de 500 a 50 ó incluso a 5 ufc/100 mL)…

…e incluso se obtengan falsos negativos: el 50% de las aguas con Clostridium perfringens, analizadas por MF, resultan falsamente positivas: el microorganismo está presente pero no se detecta (<1 ufc/100 mL).

Por eso MICROKIT inventó el caldo Clostricult P/A (basado en TSC), validado externamente (ielab) con resultados de excelencia diferencial con respecto a las mismas muestras analizadas por filtración de membrana en varios laboratorios acreditados por la ISO 17025. Esta validación está disponible solicitándola a consultastecnicas@microkit.es

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.PDF?v=2023

https://www.microkit.es/pdf/kits-pa-polvos.pdf

Ya que las células de Clostridium perfringens mediante este método P/A en ningún momento del análisis están en contacto con el oxígeno del aire.

Y más adelante MICROKIT tuvo que inventar el Quanti P/A Clostricult, también basado en TSC, para dar resultados cuantitativos exactos, precisos y robustos…

…tanto de formas vegetativas (sin aplicar shock térmico)…

…como de esporas (aplicando shock térmico a la muestra de agua)

Ya que está diseñado con TSC Agar en una bolsa donde no entra oxígeno (lo que además ahorra el gasto en atmósferas de anaerobiosis)

https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-2022.pdf

Ver 3 videos de este novedoso método, el único capaz de enumerar correctamente las células y esporas de Clostridium perfringens que realmente hay en una muestra de agua, por cualquier usuario (robustez):

https://youtu.be/A8WifR8mZ1k

https://youtu.be/9ACxFVKJhrM

https://youtu.be/keVSi9E2uDg

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Todas estas cepas mencionadas (y otras muchas) las tenemos en nuestras instalaciones en stock para entrega inmediata. Solicite la lista actualizada de stock para consultar las concentraciones y caducidades, antes de realizar sus pedidos, en microkit@microkit.es.

Consulte el folleto:

https://www.microkit.es/pdf/CEPAS-CUANTITATIVAS-2022.pdf

y el video:

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE

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DIPSLIDES-HACCP, laminocultivos DESINFECTEST para recuento de Aerobios y Enterobacterias en un mismo análisis

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DIPSLIDES-HACCP

DIPSLIDES-HACCP, laminocultivos DESINFECTEST para recuento de Aerobios y Enterobacterias en un mismo análisis

Función

En este kit de DIPSLIDES-HACCP, podrá detectar y enumerar tanto bacterias aerobias (cara incolora-crema) como Enterobacterias (cara púrpura)

Temperatura de incubación

Dado que lo que busca son microbios alterativos de su producto, la temperatura de incubación debe ser aquélla a la que su producto más se altera, o la temperatura a la que se suele transportar y/o almacenar

Los 35ºC aprox son ideales en ambos casos, la temperatura más típica y en general con crecimientos más rápidos, tanto para bacterias aerobias como para enterobacterias).

Ventajas de DIPSLIDES-HACCP

Los laminocultivos DESINFECTEST son los que crearon la palabra laminocultivo en español, ya que antes de existir en 1989, todo el mundo nombraba este tipo de kits en inglés «dipslides»

A diferencia de la mayoría de otras marcas, en los DIPSLIDES DESINFECTEST-HACCP, cada lámina tiene 10 cm2, lo que permite emplearlos sin necesidad de aplicar cálculos en el recuento de superficies:

colonias/cara es exactamente igual a ufc/10 cm2

Y tambien son muy útiles para inmersión en líquidos brutos, como aguas de lavado, aguas residuales… y así poder distinguir el orden de magnitud de la contaminación microbiana

Por otra parte, no se deslaminan durante los golpes que reciben en su transporte, lo que los hace mucho más robustos y fiables.

Utilidad

Son doblemente útiles:

a) Para superficies. Aplicar 10 segundos apretando con fuerza (sin que se llegue a romper el agar). Repetir al lado de la superficie ya muestreada, con la otra cara.

b) Para control de líquidos de alta carga microbiana. Sumergir en ellos vertical, extraer suavemente sin agitar y devolver a su tubo para incubar en posición vertical, con el tapón arriba para que el exceso de los líquidos viscosos siga goteando a la cubeta del fondo del tubo

En superficies, la ventaja de DESINFECTEST-HACCP sobre las clásicas placas Rodac es que se puede acceder mejor a esquinas y superficies curvas. Además el transporte desde la zona de muestreo hasta el laboratorio es más higiénico, ya que se cierran a rosca.

Los resultados son tan sencillos como hemos anunciado antes: x colonias/cara = x ufc/10 cm2

En inmersión en líquidos brutos, los resultados se comparan con la tabla del folleto que se incluye, para conocer el orden de magnitud de la contaminación (sea de aerobios, sea de Enterobacterias) a escala exponencial: 10E3 ufc/mL, 10E4 ufc/mL, 10E5 ufc/mL, 10E6 ufc/mL…

https://www.microkit.es/pdf/desinfectest.pdf

También le resultarán muy útiles los escobillones Listeriswabbs-Green, entre otros que ofrecemos para buscar otros microorganismos en sus superficies:

https://www.microkit.es/pdf/Listeriswabs-green-2021.pdf

Y si desea obtener resultados inmediatos (en tal caso, será materia orgánica, que generará multiplicaciones microbianas si no se limpia la superficie), use KitProPlus, sticks que viran de amarillo a verde en presencia de suciedad orgánica, sin necesidad de aparato lector como sucede con la bioluminiscencia:

https://www.microkit.es/pdf/kitpro-plus.pdf

Solicite los precios actualizados en microkit@microkit.es

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No se pierda el vídeo:

https://youtu.be/qJB0elPYvVU

Enterotube

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Enterotube, las galerías originales para la Identificación de colonias de Enterobacterias, con una ingeniosa forma de inocularlas

Enterotube. Galerías diseñadas hace mas de 60 años por Roche, han pasado por varios fabricantes, pero estas galerías son las únicas del mercado que contienen medios de cultivo preparados, hidratados, no liofilizados…

…y eso las convierte en referente porque fueron con las que los autores describieron las especies de la mayoría de bacterias.

Son galerías de pruebas bioquímicas. Sólo ha sobrevivido la galería de identificación de Enterobacterias, que sigue siendo un referente,

Y desaparecieron los míticos Oxiferm para No fermentadores y Mycotube para levaduras.

Para ellos, y para estafilococos, enterococos y anaerobios… utilice nuestras galerías RAPID, que al ser enzimáticas, sólo tardan 4 horas en darle el resultado.

Modo de empleo

Las Enterotube son las más fáciles de usar, mediante una ingeniosa patente de picadura, y por eso, las más queridas por los microbiólogos más veteranos, que las conocen como las únicas galerías de referencia desde que estudiaron hace medio siglo:

1-se abren los tapones

2-se toca la colonia con el asa incluida en la galería

3-se estira hasta ver que el inóculo ha llegado al ultimo pocillo de glucosa, que sirve de control, ya que, si tras la incubación, sale glucosa negativo, hay que repetir, porque todas las enterobacterias son glucosa positivas, señal de que el inóculo colonial no se ha repartido hasta el final.

4-se parte el asa por la muesca y se cierran los tapones

5-con el trozo de asa que ha quedado en nuestras manos, se perforan las ventanas de aireación de las pruebas oxidativas y se guarda ese trozo de asa limpia para el día de la lectura de resultados

6-se incuba a 35ºC aprox durante 24 h, aunque a veces si la cepa estaba muy estresada los virajes no se ven definitivamente hasta las 36-48 h

7-se añaden los reactivos de indol y de voges proskauer en los pocillos donde lo indica, abriéndolos por el film de arriba con el trozo de asa que ya abrió las ventanas

Puedes ver mejor cómo se usa en nuestro canal de Youtube:

https://www.youtube.com/watch?v=9j4tbyghvZA&t=704s

Interpretación de resultados

8-se apuntan los resultados positivos o negativos comparando los colores finales con los de la tabla adjunta. Se asigna a los positivos el número indicado en las tablillas y a los negativos un cero

9-se suman los números de cada grupo y se obtiene un código de 5 cifras (en el ejemplo 20063):

10-se busca este número en el pdf del libro de resultados, libro que puede pedir sin coste con la primera compra de enterotubos:

11-y le saldrá el nombre de la enterobacteria identificada:

12-a veces le salen varios nombres de diferentes cepas y le indica con qué prueba adicional puede distinguir cuál de ellos es el definitivo

13-y algunas veces le saldrá un código que le indicará que no se puede asignar el resultado a ninguna cepa. Eso suele ser:

porque no es una enterobacteria y no se cercioró antes de utilizar la galería, de que la colonia lo era (Neogram negativa formando filamento; y oxidasa negativa sin viraje a azul),
o porque la colonia era de un cultivo demasiado viejo,
o porque tomó inóculo de una colonia multiespecífica, procedente de ufcs de diferentes cepas,
o porque arrastró medio de cultivo junto con la colonia, que ha interferido en los medios de cultivo de la galería.

En tal caso repita con otra galería y con más cuidado

La base de datos Bacdive es la misma para todas las galerías bioquímicas, por lo que los resultados deberían ser los mismos que los de otras marcas.

Sin embargo la gran diferencia de Enterotube con las demás galerías es que tiene los medios preparados hidratados, no liofilizados, por lo que los virajes de color que diferencian cada prueba positiva de la negativa, son mucho más evidentes.

https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf

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