Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

OSMOPHILIC ZYGOSACCHAROMYCES YEASTS AGAR OZYA

OSMOFILOS ZYGOSACCHAROMYCES YEASTS AGAR OZYA Medio de cultivo para detección y recuento de levaduras osmófilas

Fórmula CENAN mejorada. Medio de cultivo para detección y recuento de levaduras osmófilas, que soportan altas presiones osmóticas, como Zygosaccharomyces rouxi.

 COMPOSICIÓN

  • Polipeptona micológica          5,0 g
  • Extracto de levadura              5,0 g
  • Fructosa                                 250,0 g
  • Polisorbato Tween 80            0,75 g
  • Agar‑agar                               15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6,4 ± 0,2

PREPARACIÓN OSMOFILOS ZYGOSACCHAROMYCES AGAR

Disolver 276 g de medio en 1 litro de agua destilada caliente. Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Autoclavar a 116 ºC durante 5 minutos. No sobrecalentar!

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

DESHIDRATADO: SÓLO SE PREPARA BAJO PEDIDO EN BIDÓN DE 5 Kg (ó 10 botes de 500 g): DMT225

PREPARADO EN FRASCOS 100ml CÓDIGO: RPL147

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Paja-Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, inhibido.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Crece con mucha dificultad
  • Zygosaccharomyces rouxi MKTN 381, Correcto

PRESENTACIÓN: DESHIDRATADO, FRASCOS PREPARADOS

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS OSMOFILOS ZYGOSACCHAROMYCES AGAR

Fundir al baño María los frascos , sin sobrecalentar. Si se desea, se puede bajar el pH hasta 5,5 con Acido Tartárico estéril para mejorar la selectividad. Si se desea una selectividad total añadir 0,5 g/l de Cloranfenicol.

No recalentar.

Sembrar en masa 1 ml de muestra e incubar 3-7 días a 21-25 ºC aproximadamente, o mejor incubar el tiempo y a la temperatura para los que se puedan esperar problemas (las del almacenamiento y transporte).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/OSMOPHILIC-YEAST-AGAR.pdf

Tambien disponible la cepa cuantitativa de Zygosaccharomyces rouxii, a alta concentración para que sirva para Challenge test y también, mediante diluciones, para QC

Si desea más información sobre nuestros OSMOPHILIC ZYGOSACCHAROMYCES YEASTS AGAR OZYA rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

ORANGE SERUM AGAR

ORANGE SERUM AGAR, MEDIO DE CULTIVO SOLIDO PARA DETECCIÓN Y RECUENTO DE MICROORGANISMOS ACIDÓFILOS EN ZUMOS Y CONSERVAS ACIDAS

Detección de microorganismos alterativos en zumos, mermeladas y similares.

COMPOSICIÓN

  • Triptosa                    10,0 g
  • Extracto de levadura 3,0 g
  • Extracto de naranja   3,5 g
  • Glucosa                     4,0 g
  • Fosfato dipotásico     2,5 g
  • Agar‑agar                  14,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,5 ± 0,2

Orange Serum Agar: Recuento de bacterias + levaduras acidófilas

Orange Serum Agar: Recuento de bacterias + levaduras acidófilas

PREPARACIÓN

Disolver 37 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición,agitando para su disolución. La turbidez es normal y se minimiza al plaquear. Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 116 ºC durante 15-30 minutos.  No sobrecalentar o podría destruirse la macromolécula del Agar, perdiéndose su capacidad solidificante. Usarlo preferentemente el día de su preparación.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO COD: DMT092

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Tostado  PREPARADO: Estéril, Ambar.

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Correcto, Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 62%.
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas en 5 días. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 1100%.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 233%.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, PLAQUIS® herméticas, MEDIO DESHIDRATADO. EN VERSIÓN CALDO, VIALES MF Y VIALES PINCHABLES.

NOTA: Medio de cultivo especial para aislamiento y recuento de microorganismos (bacterias como Bacillus, Lactobacillus, Leuconostoc, Streptococcus, Clostridium…, así como levaduras y mohos) responsables de la alteración de zumos, bebidas ácidas, concentrados de frutas y conservas vegetales de pH ácido. También resulta de interés para controlar los equipos industriales usados en la preparación de bebidas a base de frutas.

MICROKIT también fabrica, desde Mayo de 2007, Orange Serum Agar con cloranfenicol, para distinguir las levaduras, que crecen en él, de las bacterias, que no crecen en él y sí lo hacen en el mismo medio sin Cloranfenicol. Tambien fabrica otros medios de gran interés para control de zumos, como Osmotolerant Yeast Agar, Alicyclobacillus Broth, Acetobacter Agar, Osmophillic Zygosaccharomyces Agar, M.Green Caf.Agar… e identifica molecularmente los alterativos que los clientes le envían, para ponerles nombre y apellidos y ayudarles así a buscar su procedencia y erradicarlos de sus instalaciones.

SIEMBRA

Fundir el medio a 98 ºC, sin sobrecalentarlo, pues a causa de su acidez perdería propiedades gelificantes, y ennegrecería. No recalentar (usar frascos de 100 ml sólo si se elaboran 5 placas a la vez). Dejar enfriar a 48 ºC. Sembrar 1 ml de muestra y de sus diluciones decimales en placas Petri estériles y añadir 20 ml de medio. Mezclar bien. Para detectar la flora anaerobia que realmente altera los productos ácidos, utilizar este medio incubado en anaerobiosis (KKM036, KKM038, KKM039) ya que en otros medios aparecen los anaerobios no alterativos a pH ácido. Para contar por separado las bacterias, de las levaduras y mohos, añadir a un duplicado, enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de  Cicloheximida (SKM200): En la placa con CEX  sólo crecerán las bacterias y en la placa sin CEX , la suma de bacterias + levaduras y mohos. Si la muestra se puede filtrar, depositar la membrana filtrada sobre la placa preparada.

 INTERPRETACIÓN

Tras incubar a 30 ºC aproximadamente, durante 3‑5 días, contar por separado las levaduras, los mohos y las bacterias, identificando con galerías de identificación adecuadas (Yeast Ident KUS003, M-Ident Acidificantes KUS801, M-Ident Bacillus KUS700) cada tipo de colonia encontrada.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR.pdf

Si desea detetar por separado bacterias de hongos: https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR-CAF.pdf

Si desea más información sobre nuestros ORANGE SERUM AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

ORANGE SERUM CLORANFENICOL AGAR

suero de naranja ORANGE SERUM CLORANFENICOL AGAR para detectar hongos (levaduras y mohos) alterativos en zumos, mermeladas…

Detección de hongos (levaduras y mohos) alterativos en zumos, mermeladas…

COMPOSICIÓN

  • Triptosa                    10,0 g
  • Extracto de levadura 3,0 g
  • Extracto de naranja   3,5 g
  • Glucosa                     4,0 g
  • Fosfato dipotásico     2,5 g
  • Agar‑agar                  14,0 g
  • Cloranfenicol       0,5 g

(Fórmula por litro)

pH final: 5,5 ± 0,2

Orange Serum Caf.Agar: Recuento de levaduras y mohos acidófilos.

Orange Serum Caf.Agar: Recuento de levaduras y mohos acidófilos.

PREPARACIÓN

Disolver 37,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición,agitando para su disolución. La turbidez es normal y se minimiza al plaquear. Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 116 ºC durante 15-30 minutos.  No sobrecalentar o podría destruirse la macromolécula del Agar (al ser un medio muy ácido), perdiéndose su capacidad solidificante o solidificando a grumos. Usarlo preferentemente el día de su preparación.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO COD: DMT292

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Tostado

PREPARADO: Estéril, Ambar.

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Inhibido
  • Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas en 5 días. Con respecto a SDA estandarizado*, recuento 1100%.
  • Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto. Con respecto a SDA estandarizado*, recuento 233%.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. Ver tambien el mismo sin cloranfenicol (OSA) para detectar tambien las bacterias alterativas. MICROKIT también fabrica otros medios de gran interés para control de zumos, como Osmotolerant Yeast Agar, Alicyclobacillus Broth, Acetobacter Agar, Osmophillic Zygosaccharomyces Agar, M.Green Caf.Agar… e identifica molecularmente los alterativos que los clientes le envían, para ponerles nombre y apellidos y ayudarles así a buscar su procedencia y erradicarlos de sus instalaciones.

NOTA: Medio de cultivo especial para aislamiento y recuento de levaduras y mohos responsables de la alteración de zumos, concentrados de frutas y conservas vegetales de pH ácido. También resulta de interés para controlar los equipos industriales usados en la preparación de bebidas a base de frutas.

SIEMBRA

Fundir el medio a 98 ºC, sin sobrecalentarlo, pues a causa de su acidez perdería propiedades gelificantes, y ennegrecería. No recalentar (usar frascos de 100 ml sólo si se elaboran 5 placas a la vez). Dejar enfriar a 48 ºC. Sembrar 1 ml de muestra y de sus diluciones decimales en placas Petri estériles y añadir 20 ml de medio. Mezclar bien.

 INTERPRETACIÓN

Tras incubar a 30 ºC aproximadamente, durante 3‑5 días, contar por separado las levaduras y los mohos filamentosos, identificando con test adecuados cada tipo de colonia encontrada de levadura y al microscopio cada colonia encontrada de moho. También puede enviarnos sus colonias crecidas para que se las identifiquemos molecularmente por PCR (servicio sólo disponible para la UE por tema de retención de cepas en fronteras).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.  

https://www.microkit.es/fichas/ORANGE-SERUM-AGAR-CAF.pdf

Si desea más información sobre nuestros ORANGE SERUM CLORANFENICOL AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LISTERIA TSB-YE BROTH

LISTERIA TSB-YE BROTH, CALDO EN EL QUE SE EVIDENCIA LA MOVILIDAD DE LAS CÉLULAS DE LISTERIA MONOCYTOGENES: SE VOLTEAN AL MOVERSE

Caldo para pruebas de movilidad en Listeria (ISO 11290-1:1997, 11290-2:2000)

COMPOSICIÓN

  • Triptona de caseína 17.00 g
  • Peptona de soja 3.00 g
  • Cloruro sódico 5.00 g
  • Fosfato dipotásico 2.50 g
  • Glucosa 2.50 g
  • Extracto de Levadura 6.00 g

(Fórmula por litro)
pH final: 7.3 ± 0.2

PREPARACIÓN

Disolver 36 g de medio en 1 l de agua bidestilada, volteando varias veces hasta su total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es paja-ámbar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT154

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: polvo crema
PREPARADO: ámbar

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2, 24 h a 25°C, (Aplicando el método UNE EN ISO 11290-1: 1997 y 11290-2: 2000, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado):

  • Listeria monocytogenes.MKTA 7644, Crecimiento correcto, turbidez de ligera a elevada; al microscopio, las células se voltean.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular el tubo con una colonia aislada. Incubar 8-24 h a <25 ºC hasta observar turbidez en el medio. Depositar una gota del medio en un portaobjetos y observar al microscopio que las células se voltean. O bien realizar las pruebas de uso de Rhamnosa y Xylosa (DMT167, DMT169, DMT171).

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros LISTERIA TSB-YE BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/LISTERIA-TSB-YE-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

LISTERIA TSB-YE AGAR

LISTERIA TSB-YE AGAR es el Agar ISO para aislar colonias de Listeria previo a su confirmación bioquímica (ej: con Xilosa/Rhamnosa MICROKIT) .

Agar para selección de colonias de Listeria y su confirmación (ISO 11290-1:1997, 11290-2:2000)

COMPOSICIÓN

  • Triptona de caseína 17.00 g
  • Peptona de soja 3.00 g
  • Cloruro sódico 5.00 g
  • Fosfato dipotásico 2.50 g
  • Glucosa 2.50 g
  • Extracto de Levadura 6.00 g
  • Agar-Agar 15.00 g

(Fórmula por litro)
pH final: 7.3 ± 0.2

PREPARACIÓN

Disolver 51 g de medio en 1 l de agua bidestilada, volteando varias veces hasta su total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es crema.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT156

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: polvo crema
PREPARADO: crema

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24 h a 37 ºC Aplicando el método ISO 11290 o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

  • Listeria monocytogenes.MKTA 7644, Buen crecimiento

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular con una colonia aislada. Incubar a 35 ºC ó 37 ºC aproximadamente, 18-24 h o hasta que el crecimiento sea satisfactorio. Partir de este cultivo para realizar pruebas bioquímicas e inmunológicas.

https://www.microkit.es/fichas/LISTERIA-TSB-YE-AGAR.pdf

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros LISTERIA TSB-YE AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

RHAMNOSE / XYLOSE LISTERIA BROTH (BASE)

 

Medio de Confirmación para Listeria monocytogenes – Rhamnose / Xylose Listeria Broth (ISO 11290)

El Rhamnose / Xylose Listeria Broth es un medio diferencial de confirmación diseñado para identificar y distinguir Listeria monocytogenes de otras especies, especialmente de Listeria ivanovii y otros falsos positivos.

Este medio permite verificar la utilización de carbohidratos por parte de las especies de Listeria, conforme a las normas UNE-EN ISO 11290-1:1997 y 11290-2:2000, y reduce la necesidad de galerías bioquímicas adicionales cuando se trabaja a partir del Agar Chromogenic Ottaviani & Agosti (Agar Chromocytogenes).

Izquierda: Rhamnosa Broth sin inocular. Centro: Rhamnosa positivo, L.monocytogenes. Derecha: Rhamnosa negativo, L.ivanovii u otra

Izquierda: Rhamnosa Broth sin inocular.
Centro: Rhamnosa positivo, L.monocytogenes.
Derecha: Rhamnosa negativo, L.ivanovii u otra

⚗️ Composición (por litro)

  • Peptona de carne: 10,00 g
  • Extracto de carne: 1,00 g
  • Cloruro sódico: 5,00 g
  • Púrpura de Bromocresol: 0,02 g
  • pH final: 6,8 ± 0,2

Preparación del Medio

  1. Disolver 16 g del medio en 1 litro de agua bidestilada.
  2. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
  3. Añadir 1 ml de L-Rhamnosa (Ref. DMT169) o D-Xilosa (Ref. DMT171) (5 g/100 ml de agua) por cada 9 ml de medio, esterilizados por filtración.

Agitar antes de usar para asegurar una correcta homogeneización.
Mantener el envase bien cerrado, en un lugar seco, fresco y protegido de la luz.

Uso exclusivo en laboratorio.
Código del producto: DMT167


Control de Calidad del Medio

El control de calidad se realiza en nuestro laboratorio conforme a los protocolos de ISO/TS 11133.
Se recomienda repetirlo en su laboratorio si el medio ha permanecido más de 3 meses sin uso, tras limpieza o desinfección general, exposición a altas temperaturas o si presenta cambios de aspecto.

Características visuales:

  • Deshidratado: Polvo ocre.
  • Preparado: Color lila.

Control de crecimiento (2–5 días, 37 ºC):

Microorganismo Reacción con L-Rhamnosa Reacción con D-Xilosa Resultado esperado
Listeria monocytogenes MKTA 7644 Positiva (viraje a amarillo) Negativa Confirmación de L. monocytogenes
Listeria ivanovii MKTA 19119 Negativa Positiva (viraje a amarillo) Falso positivo descartado

Presentaciones Disponibles

  • Medio deshidratado (Ref. DMT167)
  • Tubo preparado con Rhamnosa (Ref. TPL014)
  • Tubo preparado con Xilosa (Ref. TPL015)

Aplicaciones y Ventajas

  • Confirmación precisa de Listeria monocytogenes frente a otras especies.
  • Basado en el uso diferencial de carbohidratos (Rhamnosa y Xilosa).
  • Ahorra tiempo y costes, evitando el uso de galerías confirmativas adicionales.
  • Ideal como complemento del Agar Chromogenic Ottaviani & Agosti (O&A).
  • Cumple las especificaciones de ISO 11290 para el control microbiológico de alimentos.

Siembra e Interpretación de Resultados

  1. Inocular el medio con un cultivo procedente de TSB-YE Broth (Ref. DMT154).
  2. Incubar a 35–37 ºC durante hasta 5 días.
  3. Interpretación visual:
    • Viraje a amarillo: Reacción positiva (producción de ácido por utilización del carbohidrato).
    • Color lila: Reacción negativa.

Listeria monocytogenes → Rhamnosa positiva / Xilosa negativa
Listeria ivanovii → Rhamnosa negativa / Xilosa positiva

Otras especies de Listeria pueden mostrar comportamientos variables. En los casos en que ambas pruebas sean positivas o negativas, se recomienda confirmación con galerías bioquímicas complementarias.


⚠️ Precauciones y Conservación

  • Producto para uso exclusivo en laboratorio.
  • No ingerir ni inhalar.
  • Mantener en ambiente seco, fresco y protegido de la luz directa.
  • En caso de contaminación o crecimiento anómalo, desechar conforme a la normativa medioambiental vigente.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/LISTERIA-RHAMNOSE-XYLOSE-BROTH.pdf

Si desea más información y precios actualizados sobre nuestros RHAMNOSE / XYLOSE LISTERIA BROTH (BASE),  póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

No se pierda el vídeo de R/X en nuestro canal de youtube: https://www.youtube.com/watch?v=ZHpWuUUWQFg&t=82s

Mac CONKEY SORBITOL AGAR

Mac CONKEY SORBITOL AGAR es el medio de cultivo clásico para la detección y recuento de la variante O157 de E.coli

Detección presuntiva de E.coli serovar. O157 (UNE-EN ISO 16654:2002) a partir de alimentos (carne de vacuno,…), aguas y otras muestras, previamente enriquecidas en E. coli O157 Broth.

COMPOSICIÓN

  • Peptona de caseina 17,00 g
  • Peptona de carne 3,00 g
  • D Sorbitol 10,00 g
  • Sales Biliares 1,50 g
  • Cloruro sódico 5,00 g
  • Rojo Neutro 0,030 g
  • Cristal violeta 0,001 g
  • Agar agar 12,00 g
    E. coli izquierda, púrpura brillante; E. coli O157 derecha, rosa-crema.

    E. coli izquierda, púrpura brillante; E. coli O157 derecha, rosa-crema.

    (Fórmula por litro) pH final 7,1 ± 0,2

    PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
    AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
    MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

    Nueva imagen (4)PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

 

 

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO
CÓDIGO: BCD161

PREPARACIÓN

Disolver 48.5 gramos en 1 litro de agua bidestilada.

Calentar, agitando hasta ebullición, para su total disolución.

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

No sobrecalentar.

Añadir a 44-47 ºC, 20 ml de Telurito-Cefixime estéril (BCX161) (= 2’55 mg/l) y mezclar.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, púrpura
PREPARADO: Violáceo

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 18-24 h a 37 ºC, aplicando el método ISO 16654 o el indicado en el Manual MICROKIT actual:

  • E.coli (0157:H7) MKTA 35150, Excelente, colonias amarillentas o suavemente rosadas y 1 mm de diámetro. PR >50% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; la variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
  • E. coli MKTA 25922, Excelente, pero con colonias rosa-púrpura
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, totalmente inhibido

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

MODO DE EMPLEO 

Tras enriquecer en caldo O157 m-TSB (BCD165), no más de 18-24 h a 41,5°C aproximadamente: Inocular en superficie muestra y diluciones para obtener muchas colonias bien aisladas.

Incubar a 37 ºC aproximadamente durante no más de18-24 horas.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

E. coli enterohemorrágico, serovariedad O157 H7 crece con colonias casi incoloras, rosa pálido-amarillentas, al no fermentar el sorbitol, de 1 mm de diámetro.

Otras cepas de E. coli crecen con colonias púrpuras.

Resembrar colonias bien aisladas en Agar Nutritivo para E.coli O157 (DMT126).

Incubar 18 h a 37°C aproximadamente.

Si se prolonga la incubación, la distinción de colonias será más difícil.

Confirmar con los tests adecuados:

Indol en Agua de triptona con triptófano (BCD129), 24 h a 37°C aproximadamente y adición de Kovacs (SBH056),

látex O157  y H7 ,

controlando con cepa + y -.

Según un método bastante difundido, si se añaden 0’1 g/l de MUG (SKL061) en el medio antes de autoclavar, las colonias de E. coli O157 H7 son las NO fluorescentes bajo luz de 366 nm (VMT050).

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY SORBITOL AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/Mac-CONKEY-SORBITOL-O157-AGAR.pdf

LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR

LISTERIA ISO 11290 CROMOCYTOGENES (Ottav&Agosti) AGAR para la detección mucho más eficiente que Oxford, Palcam, Microblue o MacBride

INTRODUCCIÓN

¿Reconoce Ud.este medio para aislamiento y/o recuento selectivo y diferencial
de Listeria monocytogenes?

Listeria spp: (verde-azulado sin halo) Listeria monocytogenes: (verde-azulado con halo) Flora acompañante:(incolora)

Listeria spp: (verde-azulado sin halo)
Listeria monocytogenes: (verde-azulado con halo)
Flora acompañante: (incolora)

Si ya lo ha utilizado, seguro que estárá muy contento/a por su calidad, sensibilidad,.especificidad, eficacia, precisión, exactitud y rapidez… respecto al Oxford o al Palcam: es perfecto…no tiene pegas…bueno, sólo una: que sólo se encuentra en el mercado internacional en placas preparadas ¿verdad? Eso es caro, molesto en cuanto a servicio, y somete a causa de su escasa caducidad; además, para recuentos en 1 ml, requiere placas grandes o numerosas.

TAMBIEN EN DESHIDRATADO

¿Se lo imagina en PRESENTACIÓN polvo deshidratado con suplementos? A todas sus virtudes añadiríamos:

  • Independencia, al no depender de importaciones/programaciones
  • Disponibilidad, al evitar la necesidad de tener sobrestocks
  • Economía, al no tener que tirar placas caducadas y al ser medio deshidratado: Precio 2 €/test real.
  • Larga caducidad, al ser medio deshidratado
  • Posibilidad de siembras en masa de 1ml…

Pues no imagine más…..MICROKIT LO HA VUELTO A CONSEGUIR!!!!!
Tras 3 años de intensa investigación nace CHROMOCYTOGENES MICROKIT AGAR. Al igual que el CHROMOSALM MICROKIT AGAR para Salmonella, hemos conseguido el mejor medio cromogénico y diferencial para Listeria monocytogenes, en medio deshidratado!
Agosti Listeria and Ottaviani Agar, preparado con los suplementos selectivos y diferenciales adecuados, es el más moderno, rápido, selectivo y diferencial medio de cultivo para el aislamiento e identificación presuntiva de Listeria monocytogenes a partir de muestras alimentarias.

Fuimos los primeros en conseguir este medio en versión deshidratada

El sustrato cromogénico detecta la beta-glucosidasa, enzima común en todas las especies de Listeria y unas pocas cepas de Enterococos y Bacilos, provocando la aparición de colonias verde-azuladas. Un sustrato adecuado detecta la fosfolipasa propia de L.monocytogenes, provocando un halo de lisis/precipitación alrededor de sus colonias. La combinación de ambos sustratos permite diferenciar las colonias de Listeria spp, (verde-azuladas sin halo opaco) de las de Listeria monocytogenes (verde-azuladas rodeadas de un halo opaco). Dado que algunas cepas de L.ivanovii son capaces de provocar halo, se requiere confirmación de las colonias presuntivas, con la simple prueba: Rhamnosa+/Xylosa– : Kit completo KMT012, tambien disponible en tubos preparados, TPL014, TPL015, y en medio deshidratado DMT167 + suplementos DMT169 y DMT171. Ahorre el coste de las galerías de identificación!

PRESENTACIÓN

CÓDIGO del medio CHROMOCYTOGENES base DMT700+. Concentración: 70,5 g/l. Ajustar a pH 7,2. Autoclavar 15 minutos a 121°C. Enfriar a 48-50°C, añadir 1 pareja de viales del suplemento coktail-Chromocytogenes SMT700+, precalentado a 48-50°C, agitar bien y verter en placas. Plaquitas herméticas con larga caducidad PPL970. Placas preparadas PPLM70 con 3 meses de caducidad a la entrega. Tubos preparados BASE TPL700 + suplemento SMT700+.

MODO DE EMPLEO:

El medio final es crema opaco.

Sembrar, dada su alta selectividad, incluso un inóculo concentrado en Fraser o LEB (nunca en Aguas peptonadas).

Incubar 18-48 horas a 30-37°C aproximadamente.

Confirmar sólo las colonias regulares, redondeadas, de 1-2 mm, verde-azuladas, con halo opaco.

Según ISO 11290, algunas cepas estresadas (en particular por acidez) o fosfolipasa-débiles pueden generar halos estrechos, que se sólo ven bien tras 4 días de incubación.

Se han reportado cepas de L.monocytogenes, especialmente procedentes de productos cárnicos, que crecen con colonias atípicas, de color blanco.

COMPOSICIÓN:

La composición de este medio es la aprobada en la versión 2004 de la Norma ISO 11290. La referencia SMT700+ de suplemento cromocytogenes engloba una pareja de viales. Contiene las cantidades indicadas en la ISO 11290-1:1996/Amd.1:2004 (E) de Ácido Nalidíxico, Ceftazidina, Polimixina B, Cicloheximida y L-phosphatidylinositol, que suplementan el medio base Ottaviani & Agosti DMT700- (enzimatic digest of animal tissues 18g, enzimatic digest of casein 6 g, yeast extract 10 g, sodium piruvate 2 g, glucose 2 g, magnesium glycerophosphate 1 g, magnesium sulfate anhydrous 0,5 g, sodium chloride 5 g, lithium chloride 10 g, disodium hydrogen phosphate anhydrous 2,5 g, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-glucopyranoside 0,05 g, Agar-agar 13,5 g en 930 ml de agua bidestilada).

CONTROL DE CALIDAD:

Listeria monocytogenes MKTA 11994, Colonias verdes con halo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 277-424%, pero de forma más selectiva y diferencial. * El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio). Muchos clientes corroboran entusiasmados estos datos diferenciales sobre la enorme fertilidad de nuestro Cromocytogenes con respecto a los más famosas marcas de Ottaviani & Agosti Agar.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/LISTERIA-CROMOCYTOGENES-OTTAVIANI-AGOSTI-AGAR.pdf

Si desea más información sobre nuestros LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

 

CLOSTRIDIUM BOTULINUM AGAR BASE

Clostridium botulinum Agar MICROKIT permite la detección de este gravísimo patógeno en alimentos enlatados o envasados al vacío

Detección y enumeración selectiva de Clostridium botulinum en conservas, productos cárnicos y todo tipo de alimentos

COMPOSICIÓN

Nueva imagen (18)

Hidrolizado pancreático de caseína 40,0 g
Extracto de levadura 5,0 g
Glucosa 2,0 g
Sodio Fosfato Dibásico 5,0 g
Sodio Cloruro 2,0 g
Magnesio sulfato 0,01 g
Agar- Agar 20,0 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,4  0,2

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
CONTENIDO: 500 g
CÓDIGO: DMT038

PREPARACIÓN

Disolver 74,0 g de medio en 1 l de agua bidestilada. Llevar a ebullición, agitando hasta su total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 °C y añadir 50 ml de emulsión de yema de huevo (SBH010), así como el contenido de un vial de Cl.botulinum Supplement (125 mg de D-Cicloserina, 2 mg de Trimetroprim y 38 mg de Sulfametoxazol, SBH008) reconstituido con 2,5 ml de agua destilada estéril y 2,5 ml de acetona. Mezclar bien y distribuir en placas de Petri estériles.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: polvo beige
PREPARADO: crema
CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 35-37°C aproximadamente, en ANAErobiosis:

  • Clostridium botulinum, crece con colonias rodeadas de un borde iridiscente cuando se observan con luz oblicua. Al microscopio se observan bacilos gram positivos, esporulados.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO BASE + SUPLEMENTOS

SIEMBRA E INTEPRETACIÓN DE RESULTADOS

Sembrar 0’1 ml de las diluciones decimales en superficie y extender con un asa de Digralsky. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 48h (y hasta 7 días) en condiciones anaerobias estrictas. Considerar como Clostridium botulinum, las colonias rodeadas de un precipitado iridiscente de lipasa cuando se observan con luz oblicua. Al microscopio se observan bacilos gram positivos, esporulados.

Clostridium botulinum Agar MICROKIT permite la detección de este gravísimo patógeno en alimentos enlatados o envasados al vacío, ahorrando los estabularios y la muerte de ratones de laboratorio

https://www.microkit.es/fichas/CLOSTRIDIUM-BOTULINUM-AGAR-BASE.pdf

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros MEDIO  CLOSTRIDIUM BOTULINUM AGAR BASE rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

DNA ase TEST AGAR

 

Agar DNA-asa / Termonucleasa (UNE 34-820:1985)

Detección indirecta de la enterotoxina termoestable de Staphylococcus aureus

El Agar DNA-asa / Termonucleasa es un medio de cultivo diseñado para la detección indirecta de la enterotoxina termoestable (termonucleasa) producida por Staphylococcus aureus, siguiendo el método UNE 34-820:1985 (CENAN).

Este medio permite identificar estafilococos patógenos en función de su actividad DNA-ásica, un indicador clave de virulencia y capacidad enterotoxigénica.


⚗️ Composición del Agar DNA-asa / Termonucleasa

Por litro de medio:

  • Triptosa: 20,0 g
  • Ácido desoxirribonucleico: 2,0 g
  • Cloruro sódico: 5,0 g
  • Agar agar: 15,0 g
  • pH final: 7,3 ± 0,2

En el caso de Staphylococcus aureus DNA-asa positivo, se observa un halo transparente tras unos minutos de añadir HCl, especialmente visible en el cuadrante superior izquierdo de la placa.


Preparación del medio

  1. Disolver 42 g de medio deshidratado en 1 litro de agua destilada.
  2. Calentar con agitación hasta ebullición.
  3. Autoclavar a 121 °C durante 15 minutos.
  4. Conservar el medio preparado entre 4 y 8 °C, en lugar fresco, seco y protegido de la luz.
  5. Agitar el frasco antes de usar.

Uso exclusivo en laboratorio. Mantener el envase bien cerrado para preservar sus propiedades.

Código deshidratado: DMT046


Control de calidad del medio

El control de calidad se realiza en los laboratorios MICROKIT, aunque se recomienda repetirlo en su propio laboratorio si:

  • El medio lleva más de 3 meses sin usarse.
  • Ha habido una desinfección general del laboratorio.
  • Se ha almacenado a temperatura elevada.
  • Presenta un aspecto anómalo aunque no haya caducado.
  • Staphylococcus aureus DNA-asa positivo (halo transparente tras unos minutos de añadir HCl en el cuadrante superior izquierdo)

Staphylococcus aureus DNA-asa positivo (halo transparente

tras unos minutos de añadir HCl en el cuadrante superior izquierdo)

Características:

  • Deshidratado: polvo fino de color beige.
  • Preparado: estéril, color ámbar (azul si se añade azul de toluidina).

Prueba de fertilidad (18–48 h a 37 °C):

Cepa de control Resultado Observación
Serratia marcescens MKTA 8412 Excelente Halo transparente tras añadir HCl
Staphylococcus aureus MKTA 6538P Excelente Halo transparente tras añadir HCl
Staphylococcus epidermidis MKTA 12228 Excelente Sin halo transparente

Presentación disponible

  • Tubos preparados con azul de toluidina.
  • Frascos preparados (100 ml) con azul de toluidina.
  • Medio deshidratado.

Principio del método y aplicación

El Agar Desoxirribonucleasa (DNA-asa) permite identificar estafilococos patógenos mediante la detección de la enzima DNA-asa, que degrada el ADN presente en el medio.
Se recomienda especialmente para confirmar la patogenicidad de colonias sospechosas de S. aureus aisladas en otros medios selectivos como Baird Parker, Mannitol Chapman o Vogel Johnson.

Aunque el calentamiento destruye las células de S. aureus, su enterotoxina puede resistir altas temperaturas, lo que puede originar toxiinfecciones alimentarias incluso tras procesos térmicos correctos.
Por ello, este método permite identificar indirectamente la presencia de enterotoxina estafilocócica termorresistente, correlacionada con la actividad termonucleasa.


Procedimiento para la detección de termonucleasa (método CENAN)

Nueva imagen (7)

  1. Mezclar 1 g de muestra con 1 ml de agua destilada (30–40 °C).
  2. Triturar y homogeneizar.
  3. Ajustar el pH a 5,5.
  4. Calentar a 100 °C durante 20 minutos.
  5. Enfriar rápidamente en baño de hielo (4 °C).
  6. Centrifugar a 7.500 rpm durante 45 minutos.
  7. Empapar discos de celulosa (VAC158) con el sobrenadante.
  8. Colocarlos sobre una placa de Agar DNA-asa con azul de toluidina.
  9. Cubrir con otro tubo del mismo medio fundido (45 °C).
  10. Incubar 2–8 h a 50 °C.

➡️ La presencia de halos rosados alrededor de los discos indica actividad termonucleasa y, por tanto, la probable presencia de enterotoxina estafilocócica termorresistente.


Siembra e interpretación

  • Fundir el medio preparado (frasco o tubo con azul de toluidina).
  • Agitar para homogeneizar posibles fases oxidada/reducida.
  • Sembrar por estría en superficie (placa o tubo inclinado) con la colonia sospechosa.
  • Incubar 4–18 h a 37 °C.
  • Añadir HCl 1 N (solo en el medio sin azul de toluidina).

Resultados:

  • Colonias positivas: rodeadas de halo claro (lisis del ADN) o halo rosado (en el medio con azul de toluidina).
  • Colonias negativas: sin halo de lisis.

♻️ El usuario es responsable de la eliminación segura de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente.
Autoclavar antes de desechar.


Más información

Si desea más información sobre nuestro medio DNA-asa Test Agar, puede:
Rellenar el formulario de contacto en www.medioscultivo.com/contacto
Escribirnos a microkit@microkit.es
O llamarnos al 91 897 46 16

Más detalles técnicos disponibles en:
https://www.microkit.es/fichas/DNA-asa-TEST-AGAR.pdf