Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

TOMATO JUICE AGAR (BASE) (MODIFICADO)

2 respuestas

agar zumo de tomate TOMATO JUICE AGAR, medio de cultivo sólido para el recuento de bacterias acidolácticas en productos ácidos

Medio especialmente mejorado por nuestros laboratorios para la detección y recuento rápidos de flora acidoláctica en alimentos, cerveza, vinagres, …

COMPOSICIÓN

Tween 80 1,00 g
Extracto de carne 20,00 g
Extracto de levadura 5,00 g
Glucosa 20,00 g
Fosfato dipotásico 2,00 g
Acetato de sodio 5,00 g
Citrato triamonio 2,00 g
Sulfato de Magnesio 0,20 g
Sulfato de Manganeso 0,05 g
Agar‑agar 15,00 g
(Fórmula por litro)
pH final: 5’5 ± 0,5

Lactobacillus plantarum

PREPARACIÓN

Disolver 70 g en 1 litro de agua destilada que contenga 50 ml del suplemento SDA500 (suero de tomate).

Calentar agitando hasta ebullición. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Evitar el sobrecalentamiento.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT079

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar opalescente

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a 37°C aproximadamente, en microaerofilia:

Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >99%.
Lactobacillus casei MKTA 7830, Excelente.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (BASE), FRASCOS PREPARADOS 100 y 250 ml,

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Fundir al baño María e inocular en superficie o mejor en profundidad. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 2-3 días o bien a 30 ºC aproximadamente, durante 3-5 días. Todas las colonias blancas son de Lactobacilos. Este medio da unos resultados mucho más rápidos y exuberantes que otros medios desarrollados para flora acidoláctica.

NOTA: La adición de 0,5 g/l de L- Cisteína (tubos inclinados en pico largo, ref: TPL814) hace el medio más nutritivo y selectivo para Leuconostoc.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TOMATO JUICE AGAR (BASE) (MODIFICADO) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

MICROKIT® P/A CLOSTRICULT

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Clostridium aguas MICROKIT® P/A CLOSTRICULT para la detección Presencia/Ausencia de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 mL de agua

Clostridium perfringens y sus esporas

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril CLOSTRICULT Cromogénico diseñado por MICROKIT con base TSC y atmósfera de anaerobiosis para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-CP) de C.perfringens y sus esporas (el agua vira a negro opaco), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL308 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA902 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u

DMTI902- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 33 test

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

Recuerde que este parámetro es el único indicador de probable presencia de Enterovirus-Norovirus y protozoos (Cryptosporidium, Giardia, Entamoeba…) en el agua.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Voltear sin agitar para homogeneizar sin oxigenar. Incubar 18-48 horas a 35-37° C (según nuestras recomendaciones) ó a 42° C (según Normas ISO).

Si desea detectar sólo esporas, provocar un shock térmico: calentar la muestra de 100 ml de agua 15 minutos a 70-80 ºC antes de añadir el medio. No es necesario incubar con atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio ya la incorpora. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 50 mL, por lo que debe añadir 50 mL de agua estéril a los 50mL de agua de muestra, o bien emplear el medio a la mitad de la concentración indicada.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color negro-opaco (aunque sólo sea en el fondo, que es por donde suele empezar a virar) demuestra la Presencia de Clostridium perfringens y sus esporas en la muestra de agua.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar(muestras positivas con Clostricult P/A), utilice Quanti-P/A-TSC (Ref: QPA-CP), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío y atmósfera de anaerobiosis en una bolsa hermética.

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema PREPARADO: Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

Clostridium perfringens WDCM 00007, vira a negro opaco desde las primeras 18h si el inóculo es elevado y no procede de muestras estresantes, en 48h en caso contrario.
E.coli WDCM 000013: Inhibido
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: Inhibido.
Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.pdf

Si desea recuento fiable de Clostridium perfringens y sus esporas, olvídese radicalmente de la filtración de membrana, que tan nefastos resultados provoca en tantísimos laboratorios, y céntrese en los kits Quanti-P/A Clostricult de MICROKIT

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A CLOSTRICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

CROMOKIT CAMPY AGAR

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Agar cromogénico Campylobacter MICROKIT:

Campylobacter Agar cromogénico MICROKIT

resultados mucho más fiables que los obtenidos en los clásicos medios bioquímicos

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Campylobacter en alimentos, aguas y muestras clínicas, en base a la Norma ISO 10272-1:2006.

COMPOSICIÓN

Polipeptona bacteriológica 15.00 g
Extracto de levadura 9.00 g
Sales mix 9.00 g
Agar-agar 15.0 g
Mezcla cromogénica 1.10 g
Mezcla selectiva 1.10 g
(Fórmula por litro)
pH final: ajustar a 7.4 ± 0.2

Atención: Bote de 100 g (para elaborar 2 litros de medio) y suplemento adjunto (añadir 0,21 g/L)

Colonias típicas de Campylobacter spp. en este medio

PREPARACIÓN

Disolver 50,0 g de medio en 1 L de agua bidestilada. Remover para homogeneizar, calentando hasta ebullición sin parar de remover. NO AUTOCLAVAR. Enfriar rápidamente en un baño a 45-50ºC, agitando suavemente.

Añadir 210 mg del suplemento en 10 mL de agua bidestilada que no esté fría. Agitar hasta su total disolución. Esterilizar por filtración con filtro de 0,45 µm (por ejemplo con jeringa y filtro de carcasa VHU237).

Añadir los 10 mL de esta solución estéril de suplemento al 1L de medio enfriado a 45-50ºC. Remover para homogeneizar.

Dispensar en placas Petri estériles y dejar solidificar. Las placas pueden almacenarse hasta un mes en nevera ¡no congelar! si están bien cerradas en bolsas autosellables, para evitar su deshidratación y contaminación.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT560- (bote de 100 g), incluye anexo suplemento selectivo + cromogénico

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. Y EL SUPLEMENTO REFRIGERADO A 4-8ºC. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

NOTAS

Las diferentes cepas de Campylobacter spp. son la causa principal de las toxiinfecciones alimentarias con gastroenteritis humanas en el mundo, donde se suele culpar falsamente al agente causal como Salmonella spp. De modo que la incidencia actual de Campylobacter spp. está subestimada, dado que por su dificultad de análisis (al ser un microorganismo microaerófilo), no se suele buscar en la mayoría de laboratorios agroalimentarios del mundo. Vive en el tracto intestinal de pollos, cerdos, ganado y mascotas y también se puede transmitir por contaminación cruzada de alimentos crudos/cocinados y por el agua. En niños menores de 2 años estas gastroenteritis debidas a Campylobacter spp. son especialmente frecuentes y pueden causar su muerte (OMS, nota 255).

En un estudio comparativo entre este nuevo medio cromogénico, el medio Karmali con carbón (Oxoid) y Campylosel con sangre (Biomerieux), realizado en el hospital Central de la armada de Argelia en 2016, se demuestra que el medio cromogénico es, en cepas termotolerantes de Campylobacter (C.jejuni y C.coli), exactamente igual de sensible (100%) que los otros dos medios clásicos, pero resulta mucho más específico (18% de falsos positivos, generalmente Klebsiella oxytoca y Pseudomonas aeruginosa, frente al 48% del Karmali y al 57% del Campylosel). Además el medio cromogénico se lee mejor (colonias rojas y bien aisladas, frente a las colonias de aspecto variable gris o blanco de los otros medios en función de la edad del cultivo, que pueden ser confundidas con la flora acompañante).

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

PREPARADO: Estéril, crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 36-48 h a 42°C aproximadamente:

Campylobacter jejuni WDCM 00073 Crece con colonias rojas. Respecto a Campy charcoal Agar, recuento >70 %.
Campylobacter coli WDCM 00072, Crece con colonias rojas. Respecto a Campy charcoal Agar, recuento >70 %.
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

El medio no ha sido diseñado para C.fetus, que podría no crecer. C.lari sí crece adecuadamente, con colonias rojas.

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

Sembrar en estría sobre la placa preparada, una alícuota de la muestra de alimento enriquecida en Campy Broth. Si la muestra es clínica o de heces, no suele precisar enriquecimiento.

Si la placa ha sido mantenida en la nevera, debe dejarse atemperar antes de la siembra.

Incubar a 42ºC durante 36-48h en atmósfera de microaerofilia (KKM037 o con el sistema de la jarra con vela). No es necesario esperar a la incubación de 72h típica de otros medios.

Confirmar las colonias sospechosas (rojas) con el látex M-Ident Campy (KMB001) y pruebas bioquímicas.

PRESENTACIÓN

MEDIO DESHIDRATADO 100g (DMT560-) y suplemento anexo c.s.p.2 L de medio final.

Agar cromogénico Campylobacter MICROKIT: resultados mucho más fiables que los obtenidos en los clásicos medios bioquímicos

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-CAMPY-Agar.pdf

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar en la basura.

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT CAMPY AGAR póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

BACILLUS SPOROTHERMODURANS CROMOKIT AGAR (HRS CROMOGENIC AGAR)

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BACILLUS SPOROTHERMODURANS AGAR HRS PERMITE LA DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESPORAS RESISTENTES A ALTAS TEMPERATURAS HRS (EJ:TETRABRICKS)

HRS BACILLUS SPOROTHERMODURANS AGAR

INTRODUCCIÓN

La presencia de esporas altamente resistentes al calor de Bacillus sporothermodurans en leche pasterizada por el método Ultra Hight Temperature (UHT) se ha convertido en un problema importante en la industria láctea.

Su presencia se considera indeseable, ya que obstaculizan los requisitos de esterilidad comercial.

En un estudio (APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Mar. 2005, p. 1480–1494), se han evaluado, mediante el uso de un selectivo tratamiento térmico de 30 minutos a 100°C, la presencia, fuentes, y naturaleza de las esporas potencialmente muy resistentes al calor en la leche cruda.

Se detectaron altos números de estas esporas en la tela del filtro del equipo de ordeño y en muestras de cultivos y forrajes verdes.

Se aislaron aproximadamente 700 cepas después del calentamiento selectivo. La colección de cepas mostró una notable diversidad, con representantes de siete géneros que forman esporas aerobias.

Las más frecuentes esporas aisladas de leche UHT han sido Bacillus sporothermodurans (aerobio facultativamente anaerobio), Brevibacillus borstelensis, Paenibacillus lactis, Bacillus sphaericus, Bacillus licheniformis, y Brevibacillus brevis.

El 23% de las 603 cepas formadoras de esporas pertenecen a 18 nuevas especies.

REDUCCIÓN DE CARGA

La reducción de esta carga de esporas por buenas medidas higiénicas durante el ordeño probablemente podría reducir aún más el nivel de contaminación de la leche cruda…

…y de esta manera reducir al mínimo el recuento aeróbico de formadores de esporas de bacterias que podrían conducir al deterioro de la leche y los productos lácteos.

Las HRS (Heat Resistant Spores) o más coloquialmente “termorresistentes”, aparecen en muestras de leche UHT, sobre todo si el método de tratamiento térmico es “indirecto” (intercambiador de calor).

Los métodos “directos” con inyección de vapor sobrecalentado son más eficaces, pero estas esporas también aparecen de vez en cuando.

No son un problema para la salud (son microorganismos de riesgo biológico 1: sin riesgo para la salud) y aparentemente no alteran la leche, de modo que nos hemos acostumbrado a beber leche contaminada por estos microorganismos.

El problema no es para el consumidor sino para la imagen de la industria.

SOLUCIONES

MICROKIT ha desarrollado un medio de cultivo cromogénico, derivado del Plate Count Agar ISO 4833, con factores “doping” que permiten la visión de estas esporas germinadas en forma de colonias, que suelen ser diminutas y rojas, gracias a un cromógeno termoestable.

El medio no es selectivo para B. sporothermodurans, de modo que también crecen en el mismo Bacillus licheniformis, Bacillus sphaericus y los demás esporulados alterativos de la leche UHT:

Las esporas termorresistentes (HRS).

Pero se denomina así por el mayor conocimiento que tiene la industria láctea de la denominación “B. sporothermodurans” que de las siglas HRS.

COMPOSICIÓN

Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g
Glucosa 1,0 g
Factores doping MICROKIT 8,0 g
Agar‑agar 10,5 g
Cromógeno termoestable c.s.
(Fórmula por litro)
pH final: 6,8 ± 0,2

Obsérvese la forma de volcán de las colonias, rojas, de Bacillus sporother-modurans

PREPARACIÓN

Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución.

Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a 116°C durante 15 minutos. No sobrecalentar ni mantener fundido mucho tiempo. Refundir sólo una vez. El color final del medio es blanco-crema.

A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna al crema cuando se vuelve a enfriar el medio, lo cual no afecta los resultados.

Si lo desea, puede añadir trazas de vitamina B12 cuando el medio se está enfriando a 47-50ºC, aunque ya están incorporadas en el medio deshidratado.

Si prefiere obtener colonias grandes, añada 37 g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022). Si desea una cierta selectividad en leche cruda, añada a 1 L de medio, cuando se está enfriando a 47-50ºC, 10 ml de un frasco pinchable de polimixina B (MICROKIT SMS009).

O mejor aún: someta a la leche cruda a un calentamiento UHT para eliminar toda la flora acompañante.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT532

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-72 h a 37-55 ºC o bien 3-5 días a 30 ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT:

Bacillus sporothermodurans MKTD 10599, Excelente, pequeñas colonias rojas o fucsia, redondas, con forma de volcán (boina), PR >90% de colonias respecto al TSA.
Bacillus subtilis WDCM 00003, Excelente, colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas, PR >90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Bacillus cereus WDCM 00001, Excelente, colonias céreas, fucsia, enormes, lobuladas, PR >90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Enterococcus faecalis WDCM 00009, Excelente, colonias pequeñas, rojas, redondas, con márgenes incoloros, PR >90% de colonias respecto al TSA.
Staphylococcus aureus WDCM 00032, Excelente, colonias rojo burdeos, grandes, redondas, mucosas, PR >90% de colonias respecto al TSA.

Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia, por lo que indicamos la Universal WDCM según ISO 11133-2:2014 y la Colección de Cepas Nativas Tropicales.

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO (100 g, 500 g, 5 Kg).

Recuento total de bacterias esporuladas en leche UHT y otros alimentos UHT (lácteos, gelatina, forraje…).

Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja, púrpura…. sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los aerobios).

El color de las colonias no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.

MODO DE EMPLEO

Inocular 1 ml de muestra de leche y su serie de diluciones decimales, en masa, para detectar precozmente la posible contaminación del lote, con esporas de este microorganismo (o bien estriar en superficie muestras ya alteradas).

Si se desea analizar la leche antes de la UHT, añada a cada L de medio 10 ml de Polimixina B (frascos pinchables MICROKIT SMS009), cuando está enfriándose a 47-50ºC, para eliminar buena parte de la flora acompañante.

La polimixina es un antibiótico polipeptídico producido por una cepa de Bacillus polymyxa, activo frente a Gram negativos, ya que rompe violentamente su membrana plasmática. Atención: los iones Ca++ inhiben su acción.

Aunque el mejor agente selectivo es el calor UHT, para buscar sólo sus supervivientes, con este medio (sin suplementos de antibióticos).

De modo que para analizar leche cruda, es mejor someterla a un calentamiento similar a UHT antes de sembrarla en el medio de cultivo, a fin de eliminar la flora acompañante.

Incubar una placa a 30 ºC aproximadamente durante 3-5 días, e incubar otra placa a 37 y/o 55 ºC aproximadamente, durante 48-72 horas.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Buscar las colonias rojas y pequeñas típicas de B.sporothermodurans, aunque cualquier otro tipo de colonia que aparezca, también demuestra una UHT deficiente.

La recuperación supera el 20% por encima de la obtenida en PCA y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a ciertos factores doping descubiertos y agregados por MICROKIT.

Esta fórmula, con menos agar, aumenta la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación del fondo de la placa.

Este medio está diseñado para siembra en masa de productos que han sufrido esterilización UHT, de modo que los resultados no son concluyentes en productos no-UHT, con numerosos falsos positivos (sobre todo si no se añade polimixina B).

Si desea sembrar en superficie, utilice 32 g/l de este mismo medio, en lugar de 27 g/l.

Para minimizar la desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas (MICROKIT SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de autoclavar.

https://www.microkit.es/fichas/HRS-RAPID-Cromogenic-sporothermodurans-Agar.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/10-Bacillus-monograf–a.pdf

ANEXO FOTOGRÁFICO

B.sporothermodurans en Maxim Agar Cromogénico (MICROKIT BCD515) en 3 días a 35ºC

B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532). Obsérvese el mayor tamaño de las colonias en 3 días a 35ºC, que con lupa ya muestran su forma de volcán

B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532) al que hemos añadido 37 g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022). Obsérvese el espectacular tamaño de las colonias en 3 días a 35ºC, que muestran a simple vista su forma de volcán

Mix de Acidolácticas en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias blancas o muy ligeramente rosadas

Bacillus cereus en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias céreas, enormes, fucsia, lobuladas

Bacillus subtilis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas

Bacillus subtilis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009) al que hemos añadido 37 g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022): Colonias enormes, fucsia, lobuladas

Enterococcus faecalis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con centro rojo y borde incoloro, aspecto similar a Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con centro rojo y borde incoloro, aspecto similar a Enterococcus faecalis

Staphylococcus aureus en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, mucosas, redondas

Shigella flexneri en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): único Gram negativo testado que crece, con colonias enormes, fucsia, lobuladas

CONCLUSIÓN

BACILLUS SPOROTHERMODURANS AGAR HRS PERMITE LA DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESPORAS RESISTENTES A ALTAS TEMPERATURAS HRS (EJ:TETRABRICKS)

https://www.microkit.es/fichas/HRS-RAPID-Cromogenic-sporothermodurans-Agar.pdf

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro BACILLUS SPOROTHERMODURANS CROMOKIT AGAR (HRS CROMOGENIC AGAR) póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.)

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TETRATIONATO TBG BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.) es un caldo para enriquecimiento de Salmonella (Pharmacopea medio I)

COMPOSICIÓN

Carbonato cálcico 20.0 g
Tetrationato potásico 20.0 g
Peptona 8.6 g
Cloruro sódico 6.4 g
Sales biliares 8.0 g
Verde Brillante 70 mg
(Fórmula por litro)
pH final: 7.0 ± 0,2.

Izquierda: Tetrationate TBG Broth estéril
Derecha: con Salmonella, aclaramiento del color.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Enfriar a unos 45 ºC. Distribuir en tubos o frascos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023). Para inhibir los Proteus añadir Novobiocina al 0,4% o bien bajar el pH a 6,5.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES, IRRITANTE.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT304

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Verdoso

PREPARADO: Estéril, Precipitado, verde.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C

aproximadamente:

Bacillus subtillis MKTA 6633, Inhibido.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.
E.coli MKTA 25922, Bueno, medio azul-verdoso.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Bueno, medio azul-verdoso.
Salmonella abony MKTN 6017, Bueno, medio claro.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias (sin turbidez)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. Tubos preparados con Verde Brillante y solución Yodo-Iodurada. Frascos preparados con Verde Brillante, pero sin solución Yodo-Iodurada, que debe añadirla el usuario instantes antes del uso definitivo del medio (s/Pharmacopea).

NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en medicamentos, aguas y alimentos. Se utiliza en paralelo a otros caldos de enriquecimiento, para evitar falsos negativos de ciertas cepas de Salmonella. El Carbonato cálcico actúa como neutralizante que absorbe los metabolitos tóxicos. Las sales biliares, el verde brillante y la temperatura de incubación lo hacen muy selectivo ante los Gram positivos (incluso los Clostridios) y muchos Gram negativos. Los microorganismos que tienen la enzima tetrationato-reductasa se multiplican de forma preferente en este medio.

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 35-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TETRATHIONATE-TBG-BROTH.pdf

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN (BASE)

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TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN (BASE) es un caldo para enriquecimiento de Salmonella que se puede convertir en TBG

Enriquecimiento de Salmonella (UNE 34-818:1985, UNE 34-554:1983)

COMPOSICIÓN

Triptona 7.0 g
Tiosulfato sódico 40.7 g
Peptona de soja 2.3 g
Cloruro sódico 2.3 g
Carbonato cálcico 25.0 g
Sales biliares 4.75 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7.0 ± 0,2.

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK Base, suplementado con Verde Brillante, y con Salmonella.

PREPARACIÓN

Disolver 82 g de medio en 1 litro de agua destilada. (41 gramos para menor selectividad, como Tetrationato clásico). Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Enfriar a unos 45 ºC, añadir 9.5 ml de solución de verde brillante al 0.1% (VCC4634). Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR

SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT086

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.
Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías
Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.
Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en versiones antiguas de la Norma ISO 6579, junto al Selenito Cistina Broth.

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que el caldo tetratrionato a mitad de concentración para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado: SS Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas.Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TETRATHIONATE-BROTH-MUELLER-KAUFFMAN.pdf

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

MUELLER KAUFFMAN TETRATHIONATE BROTH VERDE BRILLANTE (BASE)

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MUELLER KAUFFMAN TETRATHIONATE VERDE BRILLANTE (BASE) es un caldo como el TBG pero con suplemento, para enriquecimiento de Salmonella

Enriquecimiento de Salmonella (ISO 6579)

COMPOSICIÓN

Extracto de carne 4,3
Dig.enzimático caseína 8,6
Cloruro sódico 2,6
Carbonato cálcico 38,7
Tiosulfato sódico-5-h 47,8
Bilis de buey 4,78
Verde Brillante 0,0096

(Fórmula en gramos por litro)

pH final: 8.0 ± 0,2.

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK con Verde Brillante, y con Salmonella.

PREPARACIÓN

Disolver 106,8 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR

SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT177

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.
Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías
Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.
Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en la Norma ISO 6579 (en versiones antiguas junto al Selenito Cistina Broth).

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que los otros caldos Tetratrionato (DMT086 y DMT304) para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado por MICROKIT por sus mayores sensuibilidad y especificidad: SS Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TCBS VIBRIO AGAR

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AGAR TCBS PARA VIBRIO

VIBRIO TCBS AGAR es el medio de cultivo más clásico para detección de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae y demás especies de Vibrio

Selección de Vibrio cholerae (ICMSF, APHA, FDA) y V.parahaemolyticus (ISO 8914:1990 modificada). ISO/TS 21872-1:2007.

COMPOSICIÓN

Triptona 10,00 g
Extracto de levadura 5,00 g
Tiosulfato sódico 10,00 g
Citrato sódico 10,00 g
Cloruro sódico 10,00 g
Bilis 8,00 g
Sacarosa 20,00 g
Citrato férrico 1,00 g
Azul de timol 0,04 g
Azul de bromotimol 0,04 g
Agar‑agar 14,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 8,6 ± 0,2

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

PREPARACIÓN

Disolver 88 g de medio en 1 litro de agua destilada. Para vibrios hiperhalófitos ( V. parahaemolyticus, …) puede requerir la adición de otros 20-50 g/l de Agua de Mar (DMT149) o de Cl Na (BCB101).

Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Hervir 1 minuto y enfriar o bien autoclavar a 116 ºC durante 5 minutos, aunque resulta más recomendable el primer método. Añadiendo después TTC (SDA018) cuando el medio se ha enfriado a 45°C, el TCBS es más diferencial.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT119

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema-verdoso PREPARADO: Estéril, Verde

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

Escherichia coli MKTA 25922, Escaso, colonia translúcida.
Enterococcus faecalis MKTA 29212, Escaso, Colonias muy pequeñas y amarillas.
Vibrio cholerae MKTA 14035, Bueno, Colonias amarillas.
Vibrio parahaemolyticus MKTC 613, Bueno con 30-60 g/l de ClNa, Colonias azules.

PRESENTACIÓN:

FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS INCLINADOS CON Y SIN 30 g/l ClNa.

Medio selectivo indicado para el aislamiento y el recuento de Vibrio. (ICMSF, FDA, APHA). Por su pH alcalino y su contenido en sales, inhibe el crecimiento de la mayor parte de microorganismos, excepto los halófilos.

NOTA 1:

-Numerosas especies de Vibrio provocan enfermedades gastrointestinales y sistémicas en el hombre por ingesta de pescados y mariscos crudos o mal cocinados, ya que en el agua raramente alcanzan la dosis infectiva necesaria: V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.mimicus, V.fluvialis, V. hollisae, V.furnisii, Otros como V. alginolyticus, V.damsela, V.vulnificus, V.metscnikovii… podrían también estar implicados. Todos ellos son marinos costeros, excepto V.cholerae y V.mimicus que viven en aguas continentales. La mayor frecuencia de sus toxiinfecciones se produce en verano.

NOTA 2:

-La mayoría de capturas de pescado (hasta el 96%) y marisco (100% de cocinas) costeros en verano contienen V.parahaemolyticus, lo cual no ocurre el resto del año.

El agua del grifo y el vinagre destruyen gran parte de las células presentes en el pescado, por ello es conveniente lavarlos bien bajo el grifo y acidificarlo por debajo de pH 4,5.

El cocinado destruye sus células, desde 15 minutos a 60°C. La refrigeración frena su crecimiento y la congelación incluso lo hace decrecer.

Se deben prevenir las contaminaciones cruzadas de pescado cocinado con pescado crudo, ya que en sólo 10 minutos duplica su población y en unas horas pueden desarrollarse millones. Se concentra en la piel, agallas e intestino de los pescados.

También provoca otitis e infecciones de heridas. Si no se detecta en las matrices indicadas y en verano, a menudo no es por su ausencia sino porque no se pre-enriquece adecuadamente en TSB, de modo que los microorganismos estresados no se manifiestan ni en el caldo de enriquecimiento Alkaline Saline ni en el agar de aislamiento selectivo TCBS.

NOTA 3:

-Vibrio cholerae incluye el virulento biotipo clásico (que no hemoliza los hematíes de carnero y cabra pero si los de hombre y conejo), y el menos virulento pero pandémico biotipo El Tor (que sí hemoliza los hematíes de carnero y cabra). Aunque en la actualidad la mayoría de casos de esta enfermedad son leves, puede ser mortal por deshidratación de hasta 20 litros de agua al día en la persona contagiada. También provoca otitis e infecciones de heridas. Se difunde por el agua y alimentos contaminados con ella, sobre todo con las heces de los individuos enfermos. Pero el agua continental es su reservorio natural.

NOTA 4:

-El TCBS Agar está diseñado para detectar la mayoría de especies de Vibrio, pero no para los otros géneros de la familia Vibrionáceas: Aeromonas spp., Plesiomonas spp. y Photobacterium spp.

SIEMBRA

Sembrar en superficie las placas, en estria, a partir del enriquecimiento en Alkaline Vibrio Broth (para V.cholerae) o en Vibrio Hipersaline Broth-Alkaline Saline Broth (para V.parahaemolyticus y otras especies halófilas), previamente preenriquecidos en TSB para eliminar el stress (este preenriquecimiento permite la detección un 50% más veces que sin él). Incubar de 18 a 24 horas a 28-35 ºC.

INTERPRETACIÓN

Vibrio cholerae

tipo El Tor forma colonias amarillas por fermentación de la sacarosa (naranjas si se añadió TTC) con viraje del medio a amarillo.

Toda prueba posterior debe realizarse desde colonias repicadas en Nutrient Agar-Vibrio DMT126 o de lo contrario se obtendrán falsos negativos.

Para evitar falsos positivos, recordar que a diferencia de las Enterobacterias, Vibrio cholerae es oxidasa positivo, a diferencia de los Coliformes, es lactosa negativo (aunque indol +) y a diferencia de otros Vibrio, no crece con >6% (60 g/l) de ClNa, pudiendo crecer en absoluta ausencia de ClNa.

Ciertas cepas de Vibrio cholerae se detectan mejor incubando a aproximadamente 28°C, temperatura más acorde con su reservorio natural (peces).

Vibrio parahaemolyticus

no fermenta la sacarosa (excepto cepas especiales, que crecen en TCBS amarillas con centro verde) y crece con colonias verde‑azuladas sin virar el medio, incluso añadiendo TTC.

Es oxidasa +, Lactosa-, Indol + y crece hasta con 80 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 30 g/l.

Vibrio alginolyticus

fermenta la sacarosa y crece en TCBS con grandes colonias amarillas (naranjas con TTC), virando el medio a amarillo.

Es oxidasa +, Lactosa- y crece hasta con 100 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 40 g/l.

Se distingue de V.parahaemolyticus porque en TSAT crece con colonias blancas y pequeñas, ocasionalmente con centro rojo, mientras éste crece con grandes colonias totalmente rojas.

Vibrio vulnificus

no fermenta la sacarosa y crece con colonias verde-azuladas en TCBS. Es oxidasa +, Lactosa + y crece hasta con 60 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia.

También se distingue de V.cholerae por ser a menudo Lactosa +.

Vibrio cholerae

V.alginolyticus

V.cholerae (sin y con TTC)

V.parahaemolyticus

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TCBS-VIBRIO-AGAR.pdf

Si desea más información y precios actualizados sobre nuestro TCBS VIBRIO AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/14-Vibrio-monograf–a.pdf

T.B.X. Tryptone Bile X-Glucurónido Agar

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TBX Tryptone Bile X-Glucurónido Agar, medio cromogénico para detección y recuento de E.coli según ISO 16649

https://www.microkit.es/fichas/TBX-E-COLI.pdf

Medio para la detección y recuento confirmativo de Escherichia coli en aguas, por el método de Filtración de Membrana, mediante ensayo rápido según Norma ISO 9308-1:2001, BOE 45 de 21/2/2003 de aguas de consumo humano y BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas. Para alimentos según Norma ISO 16649-2. Y para piensos según Norma ISO/TC 34/SC9.

COMPOSICIÓN

Triptona 20,0 g
Sales Biliares 1,5 g
X-Glu 0,075 g
Agar-Agar 14,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,2 ± 0,2

E.coli en Agar T.B.X.

PREPARACIÓN

Disolver 35,6 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición. Repartir en envases de menos de 250 ml. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

Enfriar a unos 55°C aproximadamente y verter en placas formando una capa de espesor no inferior a 5 mm.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL MEDIO PREPARADO A 15-21°C, EN TOTAL OSCURIDAD. PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO CODIGO: DMT147. Frascos preparados para fundir en placas. Tubos preparados de agar inclinado.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar el laboratorio, tras conservar a alta Tª por fallos de refrigeración, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de su etiqueta…)

DESHIDRATADO: Polvo crema.

PREPARADO: Agar crema, homogéneo, traslúcido.

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 44°C aproximadamente:

E.coli MKTA 25922, Crecimiento correcto, colonias azul-verdosas, rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 95-131 %, pero de forma selectiva.
Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Crecimiento correcto, colonias a menudo azul claro, pero nunca rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 121 %, pero de forma selectiva.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Las placas no deben estar recién hechas, ya que en este medio hay que dejarlas enfriar más de una hora para que la superficie quede bien dura.

Sembrar la membrana filtrada (procedente de incubación de 4-5h a 34-38 °C, en TSA) evitando la formación de burbujas entre el filtro y el medio. O bien sembrar 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, para siembra en masa, añadiendo después 15-20 ml de medio fundido a 100°C y atemperado a 47-50°C y mezclando. Dejar solidificar del todo más de 1 hora. Incubar 19-20 horas a 44 ± 0,5 °C. Para muestras con probables células subletales, preincubar 4 horas a 37°C aproximadamente. Todas las colonias verde-azuladas son presuntos E.coli.

Colocar la membrana sobre un cartón saturado en reactivo de Indol Kovacs (SBH056) e irradiar con luz ultravioleta entre 10 y 30 minutos. Se cuentan todas las colonias que viran el reactivo a rojo, considerándolas como E.coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar o inundar en lejía antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro T.B.X. Tryptone Bile X-Glucurónido Agar rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR NUEVA FÓRMULA (ISA)

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SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR para la detección y recuento de Clostridios sulfito-reductores en alimentos (fórmula anterior a la del SPS Agar)

Detección de Clostridios sulfito-reductores (ISO 15213:2003 en alimentos, UNE 26461-2:1995 para recuento en aguas por Filtración de Membrana)

COMPOSICIÓN

Extracto de levadura 5,0 g
Triptona 15,0 g
Peptona de soja 5,0 g
BiSulfito disódico 1,0 g
Citrato Fe-amónico 1,0 g
Agar-Agar 15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,6 ± 0,2

Colonias negras diminutas y artefactos de Hierro, grandes e irregulares

PREPARACIÓN

Disolver 42 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición, para su completa homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Utilizar de inmediato a su preparación para evitar su oxigenación letal.

NOTA: Para mejorar el desarrollo de colonias negras de Clostridios, añada 1 vial del suplemento estéril VMT136 a cada 100-1000 ml de medio estéril, hervido para desoxigenarlo y una vez enfriado a unos 45-50 ºC.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

LAS PARTÍCULAS PARDAS-NEGRAS, IRREGULARES QUE PUEDEN VERSE, PRECIPITAN AL ENFRIARSE EL MEDIO Y SON BUENAS PARA EL AUMENTO DE SU SENSIBILIDAD, DE ACUERDO CON LAS NORMAS UNE 13401 y UNE-EN-26461. NO CONFUNDIR CON COLONIAS!!!

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT551. TUBOS Y FRASCOS PREPARADOS.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso,Amarillo

PREPARADO: Estéril, Beige

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24 h a 37°C aproximadamente, en anaerobiosis:

Clostridium sporogenes MKTA 11437, colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >114%, pero de forma más selectiva y diferencial.
Clostridium perfringens MKTA 13124, colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >270%, pero de forma más selectiva y diferencial.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Crece con colonias blancas.
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

NOTA: Es más rápido pero menos selectivo que el SPS Agar.

Medio de Wilson Blair (no confundir con el Bismuth Sulfite Wilson Blair Agar para Salmonella) para la detección y recuento de clostridios sulfito reductores, mejorado para disminuir los falsos negativos.

SIEMBRA

Calentar la muestra 15 minutos a unos 70-80 ºC. Filtrar 100 ml de agua a través de 0,22 µm (VAC022). Añadir en la placa Petri y verter 18 ml del medio enfriado a unos 50 ºC (y si se desea, preparado a doble concentración), sin que se formen burbujas. Para siembra directa sin filtración de aguas cloradas, añadir 0,6 g de Tiosulfato sódico para inactivar el cloro. Incubar 16-24 h y 40-48 horas a 36-38 ºC aproximadamente (es más rápido que el SPS)., en anaerobiosis si no se ha quedado la membrana en profundidad.

INTERPRETACIÓN

Contar las colonias (no nubes) negras. Las colonias blancas o grises son presuntivas si la anaerobiosis no es correcta.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/SULFITE-IRON-WILSON-BLAIR-CLOSTRIDIUM-ISA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SULFITE-IRON-SOLUCION-MADRE-Y-DILUCIONES-CLOSTRIDIUM-AGAR.pdf

Medio similar al SPS Agar

https://www.microkit.es/fichas/SPS-AGAR-polvo.pdf

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https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf