Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

DryPlates X-Staph

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DryPlates para la detección de Staphylococcus aureus tras enriquecimiento en aguas, alimentos y cosméticos.

DryPlates X-Staph

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.

CROMOKIT® X-STAPH Agar

es el medio cromogénico diseñado por MICROKIT®, donde Staphylococcus aureus crece con colonias violetas o azul oscuro, índigo, mientras otros Gram positivos (S.epidermidis, Bacillus spp.) lo hacen con colonias azul claro, turquesa. Medio válido para muestras de aguas, alimentos, cosméticos…
¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para detección de patógenos tras enriquecimiento y para ambientes interiores (superficies y aires)

Puede estriar con un asa con caldo enriquecido (o bien un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies), sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrado y no al revés). El viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio.
Las DryPlates son las únicas placas deshidratadas que permiten la siembra en ESTRÍA y por tanto, detectar patógenos de la forma más fiable: tras el enriquecimiento de la muestra. En cambio sembrar 1 ml de caldo enriquecido, como indican los otros fabricantes, casi siempre da falsos negativos (millones de ufcs generadas tras el enriquecimiento, compiten por el sustrato en placa y crean millones de microcolonias diminutas, invisibles, con un cambio de color de todo el medio, que a menudo resulta demasiado tenue, indetectable).
También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua centrada y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

NOTA DESDE 11-2017:

No resulta recomendable este medio en DryPlates para recuentos, dado que la molécula cromogénica es enorme y un alto porcentaje de la misma escapa de la red textil, pudiendo dar lugar a resultados falsamente negativos por empobrecimiento del color de los microorganismos allí crecidos. En cambio la DryPlates-XStaph es muy útil para detección tras enriquecimiento, porque tras enriquecer, los microorganismos están muy concentrados y las colonias originadas se evidencian muy bien en la estría, que queda muy nítida con su color azul sobre el disco blanco. Para recuentos es mejor utilizar este medio cromogénico, pero en cualquiera de sus demás versiones: polvo deshidratado para autoclavar, placas preparadas, plaquitas herméticas, tubos o frascos, ya que en ellos al hidratarse el cromógeno, se reparte homogéneamente en el 100% de la superficie del medio.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).

DryPlates para la detección de Staphylococcus aureus tras enriquecimiento en aguas, alimentos y cosméticos. Mantenga un stock de medios de cultivo de larguísima caducidad, para emergencias, o para uso rutinario.

https://www.microkit.es/fichas/Dry-Plates-X-STAPH-Prospecto.pdf

GAMA COMPLETA

Otros muchos medios en DryPlates®:

Aerobios totales (en alimentos y cosméticos, en aguas y en aguas oligotróficas),

Hongos (levaduras y mohos),

E.coli y demás coliformes,

Enterobacterias,

Bacillus cereus,

Pseudomonas aeruginosa,

Burkholderia cepacia,

Candida albicans,

Enterococos fecales,

Salmonella spp.,

Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae,

Otros medios en formato DryPlates®: consúltenos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.
Medio validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones muy superiores (hasta el 280%) a la de Baird Parker, rpf y Mannitol Salt Agar, evitando los falsos positivos y falsos negativos de los dos primeros, y los falsos positivos del tercero.
DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L.

https://www.microkit.es/monograficos/1-Estafilococo-dorado-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

BUFFERED PEPTONE NEUTRALIZING WATER

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Agua peptonada efecto matriz: Buffered Peptone Water Neutralizing para evitar el «efecto matriz» provocado por los conservantes alimentarios, que provocan falsos negativos y recuentos muy por debajo de la realidad. Sustituto del Agua Peptonada Tamponada Buffered Peptone Water clásica en alimentos que contienen conservantes, sean declarados, sean especias saborizantes (ajo, pimentón, pimienta, mostaza, aromáticas…), grasas u otros conservantes/inhibidores naturales o artificiales, que pueden enmascarar la presencia de patógenos. Es decir, en casi todos los alimentos. Incluso inactiva los metabolitos de la flora acompañante que podrían enmascarar el crecimiento del microorganismo diana en el Agua Peptonada Tamponada clásica. Primer caldo, patentado, que neutraliza estos aspectos tan olvidados por la Normativa, acerca del efecto matriz. Diseñado por MICROKIT a raíz de los resultados tan mediocres que obtenían muchos laboratorios usuarios de Agua de Peptona Tamponada, fuese cual fuese el parámetro microbiológico comparado, en muchos alimentos, en los servicios intercomparativos Seilalimentos.

COMPOSICIÓN

Polipeptona bacteriológica 15,0 g
Extracto de Levadura 5,0 g
Cloruro sódico 7,5 g
Fosfato disódico 4,5 g
Fosfato monopotásico 0,75 g
Polisorbato Tween 80 5,0 g
Mix de inactivadores 6,3 g

(Fórmula en g/l) Ajustar a pH: 7,3 ± 0,2

Este medio, según sea el agua destilada empleada, puede requerir hasta 7 ml de NaOH 1 N por cada litro de medio final (* Mezcla sinérgica de Lecitina, Tioglicolato sódico,Tiosulfato sódico, Bi‑sulfito sódico, Histidina…) PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

COD: DMT011

Agua peptonada efecto matriz: Buffered Peptone Water Neutralizing para evitar el «efecto matriz» provocado por los conservantes alimentarios

https://www.microkit.es/fichas/BUFFERED-PEPTONE-NEUTRALIZING-WATER.pdf

PREPARACIÓN

Disolver 44 g de medio en 1 l de agua bidestilada. Dispensar en tubos o en frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es paja-ámbar. El polvo es untuoso porque incluye 5 ml/l de polisorbato Tween 80, que permite obtener mejores efectos inactivadores de los inhibidores incluso en productos grasos. Imprescindible ajustar el pH para conseguir la efectividad necesaria.

Agua peptonada efecto matriz: Buffered Peptone Water Neutralizing para evitar el «efecto matriz» provocado por los conservantes alimentarios

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, crema PREPARADO: Estéril, paja-ámbar

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 (Aplicando el método ISO 6579:2003, o el del Manual MICROKIT actualizado), 18 h a 37 ºC: Salmonella abony MKTN 6017, Excelente, Tras 45 minutos a 25°C, resiembra en TSA estandarizado* y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 18 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada

E.coli MKTA 25922, Excelente, Tras 18 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente, Tras 18 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente. Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente. Candida albicans MKTA 10231, Excelente.

*El que cumple con recuperación superior al 70 % (92-125 %) con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres debidas a las cepas y a las diferentes proporciones de flora acompañante.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (DMT011), frascos preparados 50 ml (RPL112), frascos preparados 50 ml con perlas de vidrio para dispersar productos grasos o grumosos (RPL114), frascotes preparados 225 ml con perlas de vidrio para dispersar productos grasos o grumosos (RPL235).

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Añadir 1-25 gramos de muestra en 10-225 ml de medio (5 g en los frascos con 50 ml). Agitar (las perlas de vidrio de los frascos ahorran el uso de un homogeneizador en muestras blandas, salsas…) y dejar reposar para que actúe la inactivación de agentes inhibidores presentes en la muestra, durante 20-30 minutos a temperatura ambiente. Si es necesario, realizar las ulteriores diluciones decimales en este mismo medio.

PRECAUCIÓN: En matrices cuyo agente conservante sea la salazón, salmuera o almíbar, o en aquellas con alta proporción de sales o de azúcares, puede requerirse que la solución madre sea 1:100 en lugar del clásico 1:10 empleado en los demás alimentos. Otro aspecto muy interesante del «efecto matriz».

Para realizar recuentos, sembrar 1 ml de cada dilución en masa en los agares adecuados, sin previo enriquecimiento. Recomendamos el PCA cromogénico de MICROKIT (BCD510) ya que por el mismo precio que e PCA clásico, se distinguen las colonias (rojas) de las partículas de muestra.

Para enriquecimiento revitalizador, incubar 18 h a 35-37°C antes de pasar a enriquecimientos selectivos secundarios o antes de estriar en placas selectivas.

Para control de esterilidad comercial, incubar 18-72 h a 35-37°C y sembrar en estría en la superficie de una placa de un agar de recuento general, por ejemplo, PCA-cromogénico (BCD510), aunque la turbidez del caldo es una alerta rápida de la contaminación microbiana.

NOTA: Dados los resultados de los intercomparativos Seilalimentos de microbiología alimentaria de la ultima década, diseñamos este caldo peptonado neutralizante, que tan inmejorables resultados proporciona, como el sustituto habitual de la clásica agua peptonada tamponada, para inactivar los conservantes que la mayoría de alimentos resultan incluir. Además ha sido validado internamente por el método de pares y con cepas cuantitativas de referencia en los 5 parámetros microbiológicos de máxima importancia en microbiología alimentaria: Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, E.coli, Clostridium perfringens y Listeria monocytogenes.

Agua peptonada efecto matriz: Buffered Peptone Water Neutralizing para evitar el «efecto matriz» provocado por los conservantes alimentarios

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf

ANAEROTECA (Conservación de anaerobios)

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ANAEROTECA (KPX004)

Algunas cepas de microorganismos se resisten a mantenerse en los sistemas de congelación clásicos y comerciales de las tres marcas mundiales (En España, CRIOTECA® de MICROKIT); no es un problema del producto sino de la cepa. MICROKIT diseñó hace ya tiempo una CRIOTECA® especial para hongos como las levaduras (CRIOTECA®-YM), otra para halófilos como Vibrio (CRIOTECA®-MAR) y otra para microorganismos de crecimiento difícil como las micobacterias (CRIOTECA®-SKIM MILK). Sin embargo, seguía existiendo un grupo problemático: Los anaerobios.
Tras un año de intensos estudios presentamos la solución: ANAEROTECA, basada en el mantenimiento durante meses SIN CONGELACION, que era precisamente la que impedía su viabilidad en los sistemas criogénicos.
Los anaerobios se mantienen muy mal en medios normales refrigerados o congelados. Presentamos los tubos de ANAEROTECA, rellenos con 18 ml (máxima profundidad) de un medio especialmente diseñado por MICROKIT para la conservación de la mayoría de anaerobios (sobre todo Clostridios) y que ha resultado el mejor en un estudio interno entre 8 variantes.
El medio contiene agentes reductores para que la penetración del oxígeno del aire sea mínima.
Además, la resazurina avisa de cuándo la oxidación del medio alcanza niveles peligrosos para la viabilidad de los microorganismos almacenados: Si más de la tercera parte del tubo está de color rosa, se debe regenerar hirviéndolo 10 minutos. En el caso de que la cepa esté ya inoculada, hervir otro tubo vacío e inocularlo con una gota del fondo del tubo inoculado que se ha oxidado, no agitado.

Las partículas sólidas de Cooked Meat Granules resultan un hábitat ideal para el mantenimiento de la mayor parte de los anaerobios más usuales en microbiología de alimentos y de aguas.
La infusión de cerebro y corazón permite el mantenimiento de la mayor parte de anaerobios patógenos humanos.

MODO DE EMPLEO

Inocular la cepa pura (colonia, suspensión espesa o liófilo frescos) en el fondo. Si se trata de esporulados (Clostridium) realizar un duplicado sometido a un shock térmico adecuado (10 minutos a 75 ºC…) para permitir la germinación.
Cerrar y no agitar ni voltear, para mezclar, evitando la agitación brusca que oxigenaría el medio. Registrar los datos.
Mantener a temperatura ambiente (ideal 21-25 ºC).¡NO CONGELAR! ¡Ni siquiera refrigerar! El frío permitiría la rápida oxigenación del medio, comprometiendo la viabilidad de los anaerobios.¡NO AGITAR!.

Cuando necesite cepa pura, tome con una pipeta Pasteur una gota del fondo (mejor si lleva trozos particulados) e inocúlela en el medio adecuado. Incube de la forma más adecuada para la cepa en cuestión.
Algunas cepas pueden mantenerse en ANAEROTECA durante años, otras sólo algunos meses: Resiembre duplicados en ANAEROTECA hasta conocer el tiempo límite normal de viabilidad de sus cepas.
CRIOTECA®-MIX-ENANA-50 es una referencia que incluye 10 Crioviales clásicos (para todo), 10 Skim Milk (para todo y micobacterias), 10 YM (para hongos y levaduras), 10 Aquática (mejor para Legionella, Pseudomonas, Staphylococcus, E.coli…), 5 Halófilos (Vibrio parahaemolyticus…) y 5 Campy, Ref.: KPX200. Palillos estériles para tomar mejor las bolitas: VDP099.
CAJA VACIA CRIOBOX PARA 100 CRIOVIALES, y para poder tener una parte de la CRIOTECA® congelada y los viales no inoculados, sin congelar. Ref.: VPX453. Idem porexpán , Ref.VPX500.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Diseñado y fabricado por MICROKIT desde1995. CRIOTECA® es marca registrada de MICROKIT.
Revisado en Diciembre de 2019.

CRIOTECA®

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VIALES CRIOTECA® – CONSERVACIÓN AVANZADA DE CEPAS MICROBIANAS

PRESENTACIÓN

Los viales CRIOTECA® están diseñados para una conservación eficaz, segura y prolongada de cepas microbianas. Estos viales, pioneros en su fabricación en España desde 1991, incorporan criobolas de porcelana porosa especialmente tratadas y un líquido criogénico optimizado, lo que permite:

Minimizar resiembras, contaminaciones y mutaciones.
Garantizar la preservación de la primera generación inoculada.
Mantener las cepas vivas durante años.

Gracias a la colaboración con uno de los centros oficiales que gestiona las cepas causantes de brotes alimentarios, hospitalarios e hídricos, hemos conseguido optimizar nuestros caldos criogénicos, marcando una clara diferencia frente a otras marcas del mercado.

Ventajas destacadas

Mayor seguridad: tapón alto que evita el contacto directo con la muestra.
Alta eficiencia: mayor cantidad de criobolas (25 por vial) para asegurar la recuperación de la cepa.
Máxima optimización: menor volumen por vial y cajas CRIOBOX ultracompactas, ahorrando espacio en almacenamiento.
Fórmula mejorada: líquido criogénico especialmente desarrollado para una mayor viabilidad y recuperación de las cepas.
Precio más competitivo frente a kits importados similares.
Cierre totalmente hermético y caducidad de 5 años desde la fabricación. Si se conservan en nitrógeno líquido, este periodo puede extenderse incluso más allá.

Resultados validados con numerosos microorganismos:

Gram positivos: Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus plantarum, etc.
Gram negativos: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella abony, Campylobacter jejuni, Legionella pneumophila, entre otros.
Levaduras: Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, Rhodotorula glutinis…
Mohos: Aspergillus niger, Penicillium digitatum, Mucor racemosus, entre otros.

TIPOS DE CRIOTECA® DISPONIBLES

CRIOTECA® CLÁSICA (KPX006)
Para bacterias en general, levaduras y mohos. Bolitas amarillas.
CRIOTECA® YM (KPX007)
Formulada específicamente para hongos (levaduras y mohos). Bolitas blancas.
CRIOTECA® MARINA (KPX008)
Especial para microorganismos halófilos como Vibrio. Bolitas marrones.
CRIOTECA® SKIM MILK (KPX003)
Ideal para microorganismos exigentes, como micobacterias. También es excelente para bacterias comunes. Líquido blanco y bolitas verdes. (Es nuestra referencia más vendida, con 50 veces más demanda que la clásica).
CRIOTECA® CAMPY (KPX009)
Óptima para Campylobacter y Helicobacter. Bolitas azules.
CRIOTECA® ACUÁTICA (KPX010)
Especializada para bacterias presentes en el agua, incluyendo Legionella, Pseudomonas, Aeromonas, E. coli, Acinetobacter, Plesiomonas, entre otras. Bolitas rojas.

MODO DE EMPLEO – Conservación de cepas en criobolas

Introduzca una suspensión espesa del cultivo (idealmente fresco, 18-24h) o una colonia directamente en el vial.
- Para bacterias: Agar Sangre, TSA, BHI o TSB.
- Para hongos: SDA, SDB o YMB.
Si usa caldo en lugar de colonias, centrifugue y utilice el sedimento.
Cierre el vial y agítelo suavemente (invertir 10 veces) para impregnar bien las bolitas.
Espere un minuto, luego retire el exceso de líquido con una jeringa estéril.
Etiquete el vial con rotulador indeleble.
Golpee suavemente el vial contra la mesa para distribuir las bolitas a lo largo del tubo.
Congele entre –20 °C y –60 °C. Se recomienda duplicar las muestras como medida preventiva.
Para recuperar la cepa:
- Extraiga una bolita con un palillo estéril (ref. VDP099).
- Si la cepa es exigente: introducir en caldo tipo BHI antes de sembrar.
- Si es fácil: sembrar directamente en medio sólido o líquido.
- No espere a que la bolita se atempere.
- No reutilice ni reintroduzca el palillo ni la bolita.

PRECAUCIONES

Evite cambios de temperatura: devuelva el vial al congelador inmediatamente tras su uso.
Uso exclusivo en laboratorio.
Trabaje siempre con técnicas asépticas.
Confirme previamente la compatibilidad de su cepa con este sistema, antes de abandonar métodos tradicionales de resiembra.
Deseche el material contaminado siguiendo los protocolos de bioseguridad habituales.

¿NECESITA MÁS INFORMACIÓN?

Ficha técnica: https://www.microkit.es/pdf/crioteca-y-anaeroteca.pdf
✉️ Escríbanos a: microkit@microkit.es
Llámenos al: 91 897 46 16
Vea nuestro vídeo explicativo: https://youtu.be/Rau4mqTf3WE

MICROKIT® MUG PLUS CCA CROMOGENIC AGAR AGAR CROMOGÉNICO COLIFORMES Y E.COLI

3 respuestas

MICROKIT® MUG PLUS CCA CROMOGENIC AGAR (CROMOGÉNICO COLIFORMES Y E.COLI) S/BOE 31-MARZO-2009

MICROKIT® MUG PLUS CCA cromogénico E.coli-coliformes. Agar selectivo para la detección simultánea confirmativa de coliformes totales/fecales y E.coli en aguas y alimentos (cromógenos según ISO 16649-1:2001, AFNOR V08053-4)

INTRODUCCION

Inventado por MICROKIT en 1995, es el primer medio cromogénico que ha entrado en una Norma ISO (la ISO 9308-1) de aguas de consumo humano y envasadas. Los substratos cromógenicos Salmon-Gal y X-Glucurónido, permiten la detección simultánea de coliformes

MICROKIT® MUGPLUS: Agar cromogénico para E. coli (colonias azules -olas-) y demás coliformes (colonias rosas -surf-). Campylobacter y Shigella crecen con colonias verdes (hierba) y otros Gram negativos con colonias crema (Pseudomonas -montañas-).

E.coli (colonias azules -olas-) y demás coliformes (colonias rosas -surf-). Campylobacter y Shigella (colonias verdes-hierba) y otros Gram negativos con colonias crema (Pseudomonas -montañas-).

(colonias rojas) y E.coli (colonias azules) en el mismo medio de cultivo.
La acción simultánea de las peptonas seleccionadas en el medio, del piruvato y de los tampones fosfato, garantiza un rápido crecimiento colonial, incluso para los coliformes en estado subletal. El crecimiento de la flora acompañante Gram positiva, queda inhibido gracias al lauryl sulfato y a la mezcla de antibióticos Cefsulodina + Vancomicina.
El enzima Beta-D-galactosidasa, característica de los coliformes, actúa sobre el Salmon-GAL provocando la pigmentación roja o rosada en las colonias de coliformes.
E.coli, coliforme Beta-D-glucuronidasa positivo, actúa sobre el Salmon-GAL y sobre el X-Glucurónido (5-bromo-4-chloro-3-indoxyl Beta-D-glucurónido) de modo que sus colonias crecen de azul oscuro al añil.

COMPOSICION (g/l)

Inconfundibles colonias añil (no violetas ni esmeralda) de E.coli

Peptonas 3´0
Cloruro Sódico 5´0
Dihidrógeno Fosfato Sódico 2´2
Hidrógeno Fosfato Disódico 2´7
Piruvato Sódico 1´0
Triptófano 1´0
Tergitol 7 0´15
Sorbitol 1´0
Mezcla cromogénica
(Salmon Gal 0,2 y X-Glu 0,2) 0´4
Agar-Agar 10´0
pH Final: 6´8 ± 0´2

MODO DE EMPLEO CCA cromogénico E.coli coliformes

Agitar el bote. Disolver 26,5 g en 1 litro de agua destilada, calentando hasta ebullición. Mantener durante 1 minuto. Agitar hasta su completa disolución. Añadir asépticamente, cuando el medio se haya enfriado a 55 ºC, 5 mg de Cefsulodina + 5 mg de Vancomicina (total 5 ml de solución estéril MICROKIT SMS400) para aumentar la selectividad del medio y eliminar la flora acompañante Gram positiva. No autoclavar. El medio final es blanquecino. No refundir más de una vez.
En alimentos, la siembra en profundidad elimina los Gram negativos no fermentadores, que en la técnica de Filtración de Membrana para análisis de aguas pueden dar lugar a falsos positivos y además reducir en un 50% la recuperación de los microorganismos diana; para evitarlo, añadir sobre la membrana una segunda capa de medio agarizado, previamente enfriado a 50 ºC. Esto no es tan necesario en aguas potables o poco contaminadas por flora acompañante.

LECTURA DE RESULTADOS

Tras 18-24 horas de incubación a 35-37 ºC aproximadamente (ó 44,5 ºC aproximadamente para C. fecales), los resultados son: E.coli: Colonias de azul oscuro a añil (Salmon GAL y X-Glucurónido positivo) que resultan indol positivas (puede comprobarse directo en la colonia). Coliformes: Colonias rosas- rojas (Salmon GAL positivo) + las azules (E.coli). Otras enterobacterias: Colonias incoloras, excepto cepas como las Salmonella o Shigella Beta-D glucuronidasa positivas, que aparecen de color azul claro a turquesa. Muchas cepas de Shigella y de Campylobacter crecen con colonias verdes, pero también es del máximo interés que sean detectados, al ser microorganismos patógenos.

Unas pocas cepas de Enterococcus durans crecen con colonias rojas, pero también indican contaminación fecal del agua. Ciertas cepas de Staphylococcus aureus y de Bacillus crecen con colonias naranjas, pero nunca rosas-rojas. Otras cepas crecen con colonias crema que no se han de tener en cuenta. Las colonias con colores intermedios (violáceo-lila) proceden de ufc mixtas: diluir y repetir el análisis, o mirar una placa sembrada con una dilución mayor.
Confirme E.coli pinchando ó cubriendo sus colonias con reactivo de Kovacs. Si éste
vira a rojo-cereza antes de 1 minuto, la reacción es, definitivamente, confirmativa.

Color de la colonia Salmon-GAL X-Glucurónido Indol Rto. PCA estandarizado*

CRECIMIENTOS TÍPICOS

E.coli Azul oscuro-añil o turquesa + + + 58-125% **
Citrobacter freundii Rojo-rosa + – – 98-106%
Klebsiella oxytoca Lila-Granate + – – >99%
Enterobacter cloacae Rojo-rosa + – – 58-104%
Salmonella enteritidis Incoloro – – – 29-202%
Shigella flexneri Incoloro (azul en superficie) – – –
Salmonella MUG+ Azul claro – + –
E. coli O157 : H7 Rojo-rosa + – + 230%
* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo.
Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).
** En superficie, ya que en masa recupera el 200% más que en superficie
Un estudio comparativo independiente (*) de validación cuantitativa entre este medio, otros cromogénicos, Endo y MFC demuestra que MUG PLUS® es el mejor medio de recuento de E. coli en aguas. La validación interna realizada por MICROKIT con centenares de muestras y la revalidación trimestral en Seilagua ®, Seilalimentos y Seilaparfum, lo confirman para agua y para todo tipo de matrices alimentarias y cosméticas.

CCA cromogénico E.coli coliformes

VENTAJAS SOBRE OTRAS MARCAS

Ser los pioneros en el diseño de este medio nos da dos ventajas claras:

1-Gracias a ciertos secretos de fabricación, las colonias azules de presuntos E.coli se pueden confirmar directamente añadiendo reactivo de indol sobre la colonia, ya que en caso positivo, habrá un claro viraje del reactivo amarillo a rosa alrededor de las colonias del microorganismo diana.

2-Las colonias rosas de presuntos coliformes se pueden confirmar directamente añadiendo reactivo de la citocromo-oxidasa en goteros monodosis sobre las colonias, incluso bañando toda la placa, ya que en caso positivo (oxidasa positivo, no coliforme), habrá un claro viraje del reactivo incoloro a azul oscuro alrededor de las colonias del microorganismo diana.

PRESENTACIÓN

* Botes de 100 g de medio de cultivo deshidratado en polvo agarizado. Referencia DMT400-
* Suplemento en frasco de 100 ml, con 100 mg de solución estéril de Cefsulodina + Vancomicina, para 20 litros de medio (5 ml/l). Ref. SMS400.
* Frascos de 100 ml de agar MUG PLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia RPL444.
* Frascos de 200 ml de agar MUG PLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Ref. RPL244.
* Tubos de 20 ml de agar MUG PLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina. Referencia TPL400.
* Viales 2 ml de caldo MUG PLUS® de MF con Cefsulodina+Vancomicina. Ref. FPL400.
* Viales pinchables de 100 ml de caldo MUG PLUS® de MF con Cefsulodina+Vancomicina. Ref. RPL400.
* Plaquitas herméticas de Agar MUGLUS® preparado con Cefsulodina+Vancomicina . Referencia PPL902

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/pdf/mugplus-agar.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/11-E.coli-y-dem–s-coliformes-monograf–a.pdf

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

RINGER SOLUCIÓN ISOTÓNICA 1/4 (TABLETAS)

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RINGER SOLUCIÓN ISOTÓNICA 1/4 (TABLETAS)

Ringer, Solución isotónica 1/4 en tabletas para diluir en 500 mL de agua destilada

Diluyente isotónico [1/4] s/Normas UNE 34-818:1985, UNE 34 810:1984, UNE 34 814:1985, UNE 34 805-1983, UNE 34 821-1986, UNE 34 812:1985, UNE 34 815:1985

COMPOSICIÓN

Cloruro sódico 2,250 g
Cloruro potásico 0,105 g
Cloruro cálcico 6- H₂O 0,120 g
Bicarbonato sódico 0,050 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0.2

PREPARACIÓN

Disolver una tableta en 500 ml de agua bidestilada para obtener una solución isotónica según Ringer 1/4.
Autoclavar a 121 ºC, 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

Referencia: DMT300

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Tabletas, Blanco.

PREPARADO: Estéril, Incoloro.

CONTROL DE CRECIMIENTO tras sembrarlo en PCA 72 h a 37°C aproximadamente (o bien 5 días a temperatura ambiente 21-28°C aproximadamente):

Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Correcto
Bacillus subtillis MKTA 6633, Correcto
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Correcto
Micrococcus luteus MKTA 10240, Correcto
E.coli MKTA 25922, Correcto

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Añadir 1 ml de muestra a un tubo con 9ml de solución Ringer 1/4. Así se obtiene la primera dilución decimal. Agitar y añadir 1 ml de esta solución madre a otro tubo con 9 ml de Ringer. Así se obtiene la segunda dilución decimal. Repetir el proceso cuantas veces sea necesario.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Rapidtest

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Rapidtest detección rápida microbios: Tubos de caldo cromogénico para la detección rápida de contaminación bacteriana

El primer medio cromogénico del mundo fué inventado por MICROKIT en 1995, antes incluso que el famoso MugPlus Agar que ahora todo el mundo llama CCA por su aceptación en la ISO 9308-1 de E.coli-coliformes en aguas. Y ese primer medio cromogénico es precisamente Rapidtest.

A mayor concentración bacteriana del producto analizado, más rápido vira el tubo de Rapidtest. Por ejemplo, una materia prima, agua, alimento, orina… con una carga microbiana de 10.000.000 ufc/g ó mL, virará a rojo en aproximadamente 2-3 horas, una con 100.000 ufc/g ó mL, virará a rojo en aproximadamente 7 horas, y una con 1.000 ufc/g ó mL, virará aproximadamente en 13 horas.

Si por ejemplo, nuestro producto no debe tener más de 1.000 ufc/g ó mL, con mirar la estufa a las 13 horas y ver si ha virado a rojo, tendremos una estimación de que el producto anda mal, mucho antes de esperar el recuento de colonias en placa.

El kit funciona mejor y más rápido cuanto más carga microbiana es aceptable en el producto (ej: aguas residuales, petróleo, taladrinas…)

Rapidtest detección rápida microbios

Vídeo sobre el Modo de empleo de Rapidtest:

https://www.youtube.com/watch?v=ri7B9aauoPc

Si desea más información sobre nuestros rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto. O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LISTERIA CHROMOCYTOGENES AGAR

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LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR

LISTERIA CHROMOCYTOGENES MICROKIT AGAR es el medio diseñado por Ottaviani and Agosti que especifica la Norma ISO 11290

https://www.microkit.es/fichas/LISTERIA-CROMOCYTOGENES-OTTAVIANI-AGOSTI-AGAR.pdf

Cuando se hizo necesario el control de Listeria monocytogenes en alimentos, allá por los años 80 el siglo pasado, el medio de cultivo para detectarla se llamaba McBride Agar.

Este medio enseguida fué sustituido por los agares Oxford y Palcam.

Pero ninguno de los tres medios funcionaba lo suficientemente bien para buscar el microorganismo que años después se convirtió en el más buscado junto a E.coli y Salmonella.

En Microkit desarrollamos el Agar Microblue que era mucho más específico y tuvo un gran éxito en España, hasta el punto de que tuvimos que implantar turnos de producción para poder abastecer las necesidades de tantos usuarios.

Pero en 2004 dos italianos nos sorprendieron con un nuevo medio de cultivo que arrasó, al salir en una addenda de la Norma ISO 11290, y desde entonces sería el medio empleado por excelencia para detectar y enumerar este microorganismo.

Aunque actualmente todas las casas comerciales lo tienen (agar cromogénico para Listeria), con muy diferentes nombres según la casa comercial (el nuestro se llama Cromocytogenes), Microkit fué el primero en desarrollarlo en medio deshidratado + suplementos, para que los laboratorios dejaran de verse obligados a emplearlo en placas preparadas.

Si desea más información sobre nuestros productos, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

LISTERISWABS GREEN

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Listeria escobillones Listeriswabs green para la toma de muestras y detección de Listeria en superficies de las fábricas de alimentos

https://www.microkit.es/pdf/listeriswabbs-green.pdf

El reglamento UE 2073-2005

exige desde el año 2005 el control de Listeria no sólo en el producto final, sino además en las superficies de las fábricas e instalaciones de alimentos, para ver, en la filosofía HACCP, donde se «esconde» y acumula este peligroso patógeno:

El kit

Gracias a estos escobillones, que llevan en el mismo kit los viales con el medio ISO 11290 para Listeria, cualquier usuario puede analizar in situ sus superficies y convertirse en protagonista, no mero espectador, de la detección o descarte de este temible microorganismo. Sin tener que esperar los resultados de laboratorios externos.

Según ANSES, cualquier toma de superficie debe ir precedida de una humectación de la misma (pulverizador de Ringer estéril KMT035). Y debe rascarse con fuerza (no simplemente barrer) para arrancar biofilm.

Acto seguido se clava el escobillón en el medio del vial, se cierra y se incuba hasta el dia siguiente a 30-37ºC.

Se puede realizar esta labor de clavado del escobillón en el medio del vial, fuera de las instalaciones de producción, para no meter en ellas el vidrio del vial, simplemente guardando el escobillón muestreado en su tubo original de plástico y llevándolo al laboratorio de autocontrol.

Éste sólo necesita tener una la estufa de cultivos (SIL12AR muy económico o INCULINE-23 profesional).

Según nuestros clientes, este kit es el que mejor funciona de cuantos se han diseñado para control de Listeria en superficies.

La gran diferencia

La mayoría de ellos, contienen un derivado del Palcam, que proporciona innumerables resultados falsamente positivos por viraje de marrón a negro.

Listeriswabs green vira de crema a verde sólo en presencia de Listeria. Y si no hay Listeria, no hay Listeria monocytogenes: sólo hay que confirmar los tubos que hayan virado a verde tras la incubación de 24h, con el Kit M-Ident X/R (ref: KMT012).

Vídeo Listeriswabbs-Green, el modo de empleo es el mismo:

https://youtu.be/gfGHksTSXCs

Si desea más información sobre nuestros rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/pdf/listeriswabbs-green.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/6-Control-de-superficies-monograf–a.pdf

CEPAS CUANTITATIVAS EN LENTÍCULAS

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CEPAS EN LENTÍCULAS CUANTITATIVAS

CEPAS CUANTITATIVAS EN LENTÍCULAS: siga la Norma ISO 11133-2 de Control de calidad de medios de cultivo, realice sus validaciones y sus Challenge Test, gracias a las diferentes concentraciones de estas cepas cuantitativas.

Las lentículas cuantitativas de MICROKIT contienen cantidades precisas de cepas microbianas (de colección o salvajes-nativas-in house), cantidades que se indican (exactitud y precisión del lote) en su certificado de control de calidad. Y todo ello en 2 (y a veces hasta 3) medios de cultivo diferentes (TSA o SDA como medio general y el medio selectivo o cromogénico más usado para la cepa en cuestión). En el mismo certificado aparece la trazabilidad y el pase desde la cepa TIPO (1, 2 ó 3), el color de las lentículas del lote y otros muchos datos de interés sobre la cepa.

Empleamos la nomenclatura de la ISO 11133-2: WDCM (colección Universal).

La caducidad

de estas cepas desde fabricación es excepcionalmente larga (2 años en casi todas ellas), lo cual hemos conseguido gracias al proceso de fabricación, que no las estresa como sucede con las cepas liofilizadas. Excepto en 2 cepas que solo tienen 1 año de caducidad, si se acerca la caducidad del lote (< 6 meses) y aun no hemos elaborado otro más reciente, le regalamos el 50% del valor en la misma cepa.

Vendemos docenas a precio de decena, para que las dos sobrantes las invierta en controlar con qué concentración han llegado a sus instalaciones, para que si hubiera variado significativamente con respecto a la concentración que certificamos, pueda calcular y aplicar su propio factor de corrección.

El espacio que ocupan

en el congelador de la nevera es ínfimo: cada lentícula está dentro de un tubito Eppendorf con silicagel, los 12 tubitos dentro de un tubo hermético con tapón de silicagel, y éste en sobrecito Faraday de aluminio de sólo 12 x 18 cm. Así, con este minimalismo en su packaging, en un cajón de congelador normal de nevera caben perfectamente hasta 100 cepas diferentes.

Ofrecemos la gama completa

que necesitará para seguir la Norma ISO 11133-2 (si no encuentra la cepa que busca, la podemos fabricar).

Tambien fabricamos lotes especialmente para algunos clientes que necesitan lentículas especiales para sus intercomparativos; así como cuantificadas a partir de sus microorganismos aislados de monitorización ambiental para realizar el test de promoción de crecimiento tal y como se indica en el Anexo 1 de fabricación de medicamentos estériles de las NCF.

Podemos fabricar a tres rangos: BAJO (aprox 1.000 ufc/lentícula, diluyéndola en 10 mL obtendremos 10 inóculos de <100 ufc/mL), MEDIO (>1.000 Y < 100.000 ufc/lentícula) y ALTO (>100.000 y <100.000.000 ufc/lentícula, para Challenge test y validaciones donde se emplean muchos inóculos en un mismo día de trabajo)

CEPAS CUANTITATIVAS EN LENTÍCULAS

https://youtu.be/4WJ8FQl6GIE