WL Nutrient Agar, WL Differencial Agar, WL Caf Agar
WL Agar, recuento de microorganismos alterativos (bacterias y levaduras) en bebidas alcohólicas (vino, cerveza…)
Los medios de cultivo WL nacen para un mejor recuento y detección de bacterias y levaduras alterativas en cerveza, vino y otras bebidas alcohólicas
Existen 3 medios WL diferentes:
EL WL Nutrient Agar
es el medio base en el que crecen todas ellas
https://www.microkit.es/fichas/WL-NUTRIENT-AGAR.pdf
WL Differencial Agar
por su contenido en Cicloheximida, evita la aparición de hongos (levaduras y mohos) y permite sólo el crecimiento de bacterias
https://www.microkit.es/fichas/WL-DIFFERENTIAL-AGAR.pdf
El WL Caf Agar
dado su contenido en Cloranfenicol, es la solución de MICROKIT para buscar sólo levaduras y mohos alterativos, sin interferencia de bacterias
https://www.microkit.es/fichas/WL-NUTRIENT-CAF-AGAR.pdf
Y en distintas presentaciones:
Deshidratado 500 g y 100g, plaquis herméticas para MF cajas de 60u, viales 2 mL de caldo WL Nutrient para MF con cartón absorbente cajas de 40 u, Viales pinchables de caldo WL Nutrient (formato muy económico 100 mL para 50 test) para MF con cartón absorbente cajas de 1 frasco… También se pueden fabricar en plaquis, en viales 2 mL y en viales pinchables 100 mL cualquiera de los dos medios selectivos, con pedidos mínimos de 180 plaquis, 400 viales ó 10 frascos
Veamos su composición:
Extracto de levadura 4,0 g
Peptona pancreát.caseina 5,0 g
Glucosa 50,0 g
Fosfato monopotásico 550,0 mg
Cloruro potásico 425,0 mg
Cloruro cálcico 125,0 mg
Sulfato magnésico 125,0 mg
Cloruro férrico 2,5 mg
Sulfato de manganeso 2,5 mg
Verde de bromocresol 22,0 mg
Agar-agar 15,0 g
(Fórmula por litro)
pH final: 5,5 ± 0,2
En el WL Differencial Agar, además hay:
Cicloheximida 4,0 mg
En cambio en el WL Caf Agar, lo que además hay es:
Cloranfenicol 0,5 g
PREPARACIÓN
Disolver 75 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar agitando hasta ebullición para su completa disolución.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACION DE RESULTADOS
Sembrar en la superficie de las placas, por extensión o depositando la membrana filtrada. El medio puede ser utilizado a su pH original de 5,5 o bien alcalinizado con carbonato sódico al 1% hasta conseguir un pH de 6,5 para favorecer el desarrollo de levaduras de fermentación diversa.
A pH 5,5 crecen óptimamente las levaduras de la fermentación de la cerveza y
a pH 6,5 las levaduras de la cerveza, del pan y del destilado. Incubando en
condiciones anaerobias, se obtienen los cocos de la cerveza y los lactobacilos;
en condiciones aerobias, crecen las bacterias aceto-acéticas y las
termobacterias.
Incubar a 25 ºC aproximadamente para levaduras de la cerveza
y a 30 ºC aproximadamente para las del pan, durante 2-14 días.
Nota para el WL differencial: Incubando en condiciones anaerobias, crecen los cocos de la cerveza (ej. Pediococcus) y los Lactobacillus; en condiciones aerobias, crecen las bacterias
aceto-acéticas (ej. Acetobacter) y las termobacterias. Incubar a 25 ºC (cerveza)
o a 30 ºC (resto de matrices) aproximadamente, durante 2-14 días, según sea la flora
buscada. La incubación aerobia (levadura del pan) o anaerobia con refuerzo
de CO2 (levadura de fermentación alcohólica) dependerá del tipo de flora
buscado.
Notas:
1-En un estudio interno comparativo, los medios WL Nutrient y WL Nutrient Caf. han resultado los de máxima recuperación para levaduras, con mucho mejores resultados que el Sabouraud.
2-Este mismo juego de añadir cicloheximida (CEX) o cloranfenicol (CAF) a las concentraciones indicadas, se puede realizar con cualquier medio de recuento (PCA, PCA cromogénico, TSA, TSA Maxim, Nutrient Agar… adquiriendo ambos reactivos:
-SKM 200 (CEX no estéril), la cicloheximida no es autoclavable, esterilizar por filtración: viales 1 g
-SKM255 (CEX estéril por rayos gamma), añadir al medio cuando se ha enfriado a 45-47ºC: viales 0,5 g
-SMS195 (CAF no estéril), el cloranfenicol resiste el autoclavado: botes 25 g
-SMT990 (CAF estéril por rayos gamma): viales 0,5 g
Si desea emplear cualquiera de los 3 medios WL (o el caldo para uso con cartones absorbentes) o alguno de los dos suplementos selecivos, solicite precios actualizados en microkit@microkit.es