Agar King B (Fluoresceína) para la confirmación de colonias crecidas en Cetrimide Agar y que son sospechosas de ser Pseudomonas aeruginosa
Medio de cultivo UNE-EN 12780:2003, BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas) e ISO 16266:2006 para la confirmación de Pseudomonas aeruginosa por su producción de fluoresceína
COMPOSICIÓN
Peptona 20,0 g
Sulfato Magnésico-7 hidrato 1,5 g
HidrogenoFosfato DiPotásico 1,5 g
Agar-agar 15,0 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7.2
PREPARACIÓN
Disolver 38 g de medio en 1 l de agua bidestilada.
Añadir 10 ml de glicerol.
Calentar, agitando, hasta ebullición, para su total homogeneización.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
Preparar tubos inclinados con pico largo.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO
DESHIDRATADO CODIGO: DMT182
PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS
NOTA: Este medio resalta la producción de pioverdina (color verde) y, por tanto, la fluorescencia, de las especies de Pseudomonas del grupo fluorescens (Ps. putida, Ps. fluorescens, Ps. aeruginosa).
Además dificulta la producción de piocianina, cuya búsqueda se hará en el Agar A de King (p).
SIEMBRA
Sembrar en estría la colonia sospechosa.
Incubar a 34-38 ºC aproximadamente, durante 2-5 días.
(Si no aparecen pigmentos, incubar a temperatura ambiente hasta otros 20 días, ya que a veces la producción de este pigmento es muy lenta).
INTERPRETACIÓN
Observar en la oscuridad bajo luz de 366 nm (LINTERNA MICROKIT VMT050).
La aparición de fluorescencia verdosa y/o amarillenta confirma la presencia de pioverdina en cepas de Pseudomonas aeruginosa sin capacidad de generar fluorescencia en Agar Cetrimida (o en Agar CN).
La Norma PrEN 12780 indica que debe considerarse como Pseudomonas aeruginosa toda colonia con cualquier tipo de fluorescencia en este medio, que además sea Acetamida positiva y Citocromo-Oxidasa positiva.
https://www.microkit.es/fichas/KING-B-PSEUDOMONAS-F-AGAR.pdf
https://www.microkit.es/fichas/ACETAMIDE-BROTH.pdf
https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf