Agar King B (Fluoresceína): medio selectivo para la confirmación de Pseudomonas aeruginosa
El Agar King B (Fluoresceína) es un medio de cultivo diseñado para la confirmación e identificación de colonias sospechosas de Pseudomonas aeruginosa, especialmente aquellas previamente aisladas en Agar Cetrimide.
Cumple con las normas UNE-EN 12780:2003 (BOE nº 259 de 29 de octubre de 2003, relativa al análisis microbiológico de aguas de bebida envasadas) y ISO 16266:2006, ambas destinadas a la detección y confirmación de Pseudomonas aeruginosa mediante su capacidad de producir fluoresceína (pioverdina).
Ficha técnica oficial del Agar King B (Fluoresceína)
Principio del medio
El Agar King B permite evidenciar la producción del pigmento pioverdina, responsable de la fluorescencia verdosa o amarillenta bajo luz ultravioleta (366 nm).
Este pigmento es característico de las especies de Pseudomonas del grupo fluorescens (P. putida, P. fluorescens, P. aeruginosa), y su detección constituye una prueba clave para confirmar la identidad de Pseudomonas aeruginosa en muestras ambientales, clínicas o alimentarias.
Este medio resalta la producción de pioverdina (fluoresceína) y reduce la síntesis de piocianina, pigmento azul verdoso que se confirma mediante el Agar King A (P) complementario.
Composición (por litro de medio)
- Peptona …………………………….. 20,0 g
- Sulfato de magnesio (heptahidratado) …. 1,5 g
- Fosfato dipotásico (hidrogenado) …….. 1,5 g
- Agar-Agar ……………………………. 15,0 g
- pH final: 7,2
Antes de la esterilización, se añade 10 ml de glicerol por litro.
Preparación del medio
- Disolver 38 g de medio deshidratado en 1 litro de agua bidestilada.
- Añadir 10 ml de glicerol.
- Calentar con agitación hasta ebullición para asegurar la completa disolución.
- Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
- Preparar tubos inclinados con pico largo para facilitar la observación del pigmento fluorescente.
⚠️ Uso exclusivo en laboratorio.
Mantener el envase bien cerrado, en lugar seco, fresco y oscuro.
Agitar antes de usar para homogeneizar los componentes.
Presentaciones y código
- Medio deshidratado
- Tubos preparados listos para uso
- Código: DMT182
Procedimiento de siembra
- Seleccionar una colonia sospechosa obtenida en Agar Cetrimide u otro medio selectivo.
- Sembrar en estría sobre la superficie del Agar King B (Fluoresceína).
- Incubar a 34–38 °C durante 2–5 días.
- Si no se observa pigmentación, prolongar la incubación a temperatura ambiente hasta 20 días, ya que la producción de pioverdina puede ser lenta en algunas cepas.
Interpretación de resultados
Observar las placas o tubos en la oscuridad bajo luz ultravioleta de 366 nm
(por ejemplo, con la linterna UV MICROKIT VMT050).
- Resultado positivo: aparición de fluorescencia verdosa o amarillenta → confirma la presencia de pioverdina, característica de Pseudomonas aeruginosa y especies del grupo fluorescente.
- Resultado negativo: ausencia de fluorescencia → puede indicar cepas no fluorescentes o especies no pertenecientes al grupo fluorescens.
Según la Norma PrEN 12780, debe considerarse positiva para Pseudomonas aeruginosa toda colonia que:
- Presente cualquier tipo de fluorescencia en este medio, y además sea:
- Acetamida positiva
- Citocromo oxidasa positiva
Ficha técnica Acetamide Broth (MICROKIT)
Monográfico sobre Pseudomonas aeruginosa (MICROKIT)
Ventajas del Agar King B (Fluoresceína)
- Cumple con normas UNE e ISO internacionales.
- Excelente diferenciación visual de Pseudomonas aeruginosa mediante fluorescencia.
- Complementario del Agar King A (Piocianina) para una identificación más completa.
- Ideal para laboratorios de microbiología de aguas, alimentos, medicamentos y cosméticos.
- Fabricado por MICROKIT con altos estándares de calidad y control.
Seguridad y almacenamiento
- Producto exclusivo para uso en laboratorio.
- No ingerir ni inhalar.
- Mantener el envase cerrado, en lugar fresco, seco y protegido de la luz.
- Esterilizar y desechar los residuos conforme a la legislación medioambiental vigente.
Información y contacto
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