Archivo de la categoría: Microbiologia de Cosmeticos

Optimización en los análisis microbiológicos de
COSMÉTICOS. Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

MICROKIT® P/A COLICULT-MCC

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MICROKIT® P/A COLICULT-MCC

MICROKIT® P/A COLICULT-MCC para la detección Presencia/Ausencia de E.coli y demás coliformes en 100 mL de muestra de agua

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

   INTRODUCCIÓN:

Medio estéril COLICULT Cromofluorogénico (MCC Broth DMT900) para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020) de E.coli (fluorescente azul bajo luz de 366 nm VMT050 e indol + con reactivo de Kovacs SBH056) y demás

coliformes (viraje a azul), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL303 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u
  2. FPA900 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u
  3. DMTI900- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 100 test

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

 

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

 

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL303, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir una cucharadita rasa sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. Incubar 8-48 horas a 35-37° C (Coliformes totales y E.coli) ó a 44° C (Coliformes Fecales y E.coli). La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL303 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar 2,5 viales ó 2,5 cucharaditas)

 

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color azul (XGal) demuestra la Presencia de Coliformes (totales o fecales según la Tª  de incubación) en la muestra de agua. La Fluorescencia azul (luz azul por MUG) que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) demuestra la presencia de E.coli en la muestra de agua (confirmar con 0,5 ml de KOVACS-SBH056): anillo rojo de Indol en superficie es prueba positiva. E.coli   O157 H7 se detecta por ser XGal + (vira a azul), de acuerdo con la definición moderna de coliforme;  MUG – (no fluorescente a pesar de ser E.coli) e indol + (anillo rojo).

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 250 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable.

 

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL303, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, este kit se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

 

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO 8-24 h a 37°C aproximadamente:

  • E.coli WDCM 000013, vira a azul, da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y genera anillo rosa de indol, en 8h si el inóculo es alto y no procede de muestras estresadas, en 18-24h en caso contrario.
  • Enterobacter aerogenes  WDCM 00175: Vira a azul-turquesa en 18 h. No da fluorescencia con 366 nm. Indol – (no rojo en superficie)
  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026, no vira a azul, no da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y no genera anillo rosa de indol.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A COLICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/P-A-COLICULT-UE-2-2019.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/11-E.coli-y-dem–s-coliformes-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

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https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® P/A CLOSTRICULT

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CLOSTRICULT P/A DETECCIÓN VALIDADA POR MICROKIT Y POR IELAB PARA DETECCIÓN CERTERA DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS EN AGUA

CLOSTRICULT P/A DETECCIÓN VALIDADA

Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 ml de agua

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.pdf

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril CLOSTRICULT Cromogénico diseñado por MICROKIT con base TSC y atmósfera de anaerobiosis para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-CP) de C.perfringens y sus esporas (el agua vira a negro opaco), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL308 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u
  1. FPA902 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u
  2. DMTI902- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora paraañadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 33 test

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

Recuerde que este parámetro es el único indicador de probable presencia de Enterovirus-Norovirus y protozoos (Cryptosporidium, Giardia, Entamoeba…) en el agua.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Voltear sin agitar para homogeneizar sin oxigenar. Incubar 18-48 horas a 35-37° C (según nuestras recomendaciones) ó a 42° C (según Normas ISO).

Si desea detectar sólo esporas, provocar un shock térmico: calentar la muestra de 100 ml de agua  15 minutos a 70-80 ºC antes de añadir el medio. No es necesario incubar con atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio ya la incorpora. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 50 mL, por lo que debe añadir 50 mL de agua estéril a los 50mL de agua de muestra, o bien emplear el medio a la mitad de la concentración indicada.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color negro-opaco (aunque sólo sea en el fondo, que es por donde suele empezar a virar) demuestra la Presencia de Clostridium perfringens y sus esporas en la muestra de agua.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar(muestras positivas con Clostricult P/A), utilice Quanti-P/A-TSC (Ref: QPA-CP), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío y atmósfera de anaerobiosis en una bolsa hermética.

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Clostridium perfringens WDCM 00007, vira a negro opaco desde las primeras 18h si el inóculo es elevado y no procede de muestras estresantes, en 48h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013: Inhibido
  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: Inhibido.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

Para  recuento NMP

este kit no se puede emplear con cubetas miniaturizadas, ya que la anaerobiosis quedaría comprometida. Por eso inventamos Quanti-P/A Clostricult: https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-FOTOS2018.pdf

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A CLOSTRICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

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MICROKIT® P/A ENTEROCULT

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ENTEROCOCOS MICROKIT® P/A ENTEROCULT para la detección Presencia/Ausencia de Enterococos fecales en 100 mL de muestra de agua 

Enterococos fecales: Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

            INTRODUCCIÓN:

Medio estéril ENTEROCULT diseñado por MICROKIT con base BEA para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-ETC) de Enterococos fecales (el agua vira de ámbar a negro opaco y pierde su iridiscencia), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  • RPL301 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

 

  • FPA901 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u

 

 

  • DMTI901- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 100 test

 

 

Screening negativo

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 6% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

Festivos y fines de semana

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

 

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL301, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para mezclar. Incubar 18-24 horas a 35-37° C.

La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL301 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar 2,5 viales ó 2,5 cucharaditas)

 

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje del color ámbar inicial, transparente e iridiscente, a color negro-opaco (y pérdida de la iridiscencia que adquiere el agua en este medio) demuestra la Presencia de Enterococos fecales en la muestra de agua. Puede confirmar observando al microscopio que son cadenas de cocos Gram positivos y/o que son microorganismos catalasa negativos.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar (muestras positivas con Enterocult P/A), utilice Quanti-P/A-ETC (Ref: QPA-ETC), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío en una bolsa hermética.

     Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL301, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

 

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Ámbar, transparente

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 h a 37°C aproximadamente:

Enterococcus faecalis MKTA 29212, Correcto, medio opaco y negro, sin iridiscencia en el menisco
Escherichia coli MKTA 25922, inhibido completamente.

Bacillus subtillis MKTA 6633, Inhibido completamente.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido completamente.

 

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/P-A-ENTEROCULT-UE2-2019.pdf

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A ENTEROCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

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https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR

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BURKHOLDERIA AGAR CROMOGÉNICO

Burkholderia Agar Cromogénico, medio CROMOKIT para la detección de Burkholderia cepacia complex, más eficiente que el BCSA, BCPT y CBCSA

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Burkholderia cepacia en aguas, cosméticos y otras muestras, con base BCPT Agar.

COMPOSICIÓN

  • Polipeptona bacteriológica      6.00 g
  • Piruvato sódico                          6.00 g
  • Dihidrógeno fosfato potasio    4.35 g
  • Hidrógeno fosfato sodio          1.42 g
  • Sales biliares                               1.50 g
  • Amonio sulfato                          1.00 g
  • Magnesio sulfato                      0.20 g
  • Sulfato férrico amónico          0.01 g
  • Rojo fenol                                  0.02 g
  • Cristal violeta                            0,01 g
  • Agar-agar                                   12.0 g
  • Mezcla cromogénica               c.s
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: ajustar a  6.2 ± 0.2

Detección en las primeras 24 horas. Izda: Pseudomonas aeruginosa, colonias rojas grandes. Dcha: Burkholderia cepacia, colonias rojas pequeñas. Medio salmón-crema.

Crecimiento a las 48 h: medio fucsia. Izda: Pseudomonas aeruginosa, colonias rojas grandes y con márgenes lobulados. Dcha: Burkholderia cepacia, colonias rojas menores y con márgenes redondos

PREPARACIÓN

Disolver 32,5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando hasta la total homogeneización. No sobrecalentar. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Si se desea hacer el medio más selectivo para análisis en aguas, enfriar a 45-50 °C y añadir 14 ml de solución BCPT Suplemento estéril selectivo (SMT301, que contiene Polimixina B (150.000 UI/L) y Ticarcilina (500,0 mg/L). Para máxima selectividad y evitar falsos positivos de Sphingomonas spp. y Moraxella spp., se puede añadir Gentamicina, aunque forman colonias diminutas y diferentes a las típicas de Burkholderia cepacia. En cambio Ochrobactrum anthropi y Delftia acidovorans sólo resultan distinguibles mediante identificación molecular, ya que las galerías comerciales dan, igual que este medio, falso positivo de B.cepacia.

Los antibióticos polimixina y ticarcilina del suplemento SMT301 restringen la productividad de algunas cepas de B.cepacia, por lo que no conviene usarlos para recuentos. Además todas las colonias crecidas en estos medios (base BCPT) sin suplemento, que han sido enviadas a nuestro servicio de identificación molecular, han sido siempre de patógenos emergentes como lo es Burkholderia. Para detección por estría tras enriquecimiento (para analizar muestras cosméticas de escasa carga microbiana), si se deben usar con los antibióticos, porque no hay que contar colonias y así se evitan muchos falsos positivos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT555

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

NOTA: 

Antes Pseudomonas cepacia, Burkholderia cepacia es una especie muy resistente que agrupa numerosas cepas de bacilos Gram negativos, Oxidasa positivos (a menudo oxidasa-lentos), No Fermentadores de Glucosa, Móviles. Algunas cepas pueden crecer en Agar Cetrimida sin fluorescencia y en Agar CN. Muchas cepas no crecen a más de 35°C. En TSA algunas cepas crecen con colonias regulares, redondeadas, blanquecinas, crema o amarillas. Deben identificarse molecularmente (MICROKIT SFI004), ya que las galerías bioquímicas no son nada fiables en este tándem de cepas denominado B.cepacia. Debe el nombre genérico a su descubridor y el específico, a haber sido descubierta infectando cebollas (Allium cepa), aunque se encuentra también en aguas y biofilms. Es una de las bacterias más versátiles que se conocen, capaz de usar más de 200 compuestos como nutrientes, entre los cuales se encuentran antibióticos, desinfectantes, pesticidas, hidrocarburos aromáticos policíclicos (HPA), tricloroetileno, policlorobifenilos, ftalatos… además de producir sus propios antibióticos para suprimir el crecimiento de otros competidores, así como matrices especiales para generar biofilms, lo que la hace extremadamente difícil de erradicar. Es frecuente como saprófito en aguas, ambientes húmedos y suelos. Se emplea en biorremediación de contaminaciones y en control de plagas fúngicas agrícolas,  pero tambien algunas cepas son serios patógenos oportunistas en infecciones nosocomiales. Parece que junto a otros Pseudomonadinos esta bacteria fué, desde el Arcaico, corresponsable del paso de la vida a Tierra, al sintetizar ciertas macromoléculas que actúan como inductores de la lluvia.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).                    DESHIDRATADO:Polvo, rosado

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros del hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 35°C aproximadamente:

  • Burkholderia cepacia MKTA 25416, Crece con colonias rojas, pequeñas (<2 mm en 24 h), algunas cepas viran el medio bajo las colonias a rosa-fucsia, sobre todo a las 48h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 75-294 %.
  • Burkholderia cepacia MKTN 10743, Crece con colonias rojas, vira el medio de debajo de las colonias a rosa-fucsia, desde las primeras 24h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 75-294 %.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Crece con colonias rojas, pero son muy grandes (>5 mm a no ser que haya tantas que compitan por el sustrato) e irregulares, además son fluorescentes bajo luz UVA de 366 nm.
  • Pseudomonas fluorescens MKTA 13525, Inhibido o lento y sin viraje, fluorescentes bajo 366 nm.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo.

Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 24 h una de ellas es más salmón que roja.

 

 

 

 

 

 

Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 48 h todas son fucsia-rojas, pero de diferentes tonalidades. Y el viraje del medio salmón a fucsia es muy diferente de unas a otras cepas tipo.

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

Sembrar en estría sobre la placa preparada una alícuota del cosmético (previamente diluido y enriquecido en LPT Neutralizing Broth u otro caldo similar que sea neutralizante de todos los conservantes empleados actualmente y a la vez enriquecedor). En agua, sembrar una membrana por la que se hayan filtrado 100 ml). Incubar a 30-35°C durante 24-72 horas, ideal 48 h. Verificar el crecimiento de una estría roja intensa o de colonias rojas de 1,5-2 mm de diámetro, con o sin halo fucsia en el medio. Identificar por ID molecular (MICROKIT SFI004). El recuento/ml será la suma de los recuentos de las tres placas (por filtración, el recuento será el número de colonias/los 100 ml filtrados). De todas formas, no debe aparecer ni una sola colonia confirmativa en 1 g de cosmético enriquecido ni en 100 ml de agua farmacéutica o cosmética.

El recuento a 24h y a 48 h es similar, solo unas pocas colonias más a las 48h (11% en la cepa de NCTC, 7% en la cepa de DSMZ) y significativo: 70% en la cepa de ATCC.

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT555) y suplemento opcional en frasco pinchable estéril 100 ml (SMT301) c.s.p.7 litros de medio final. DryPlates-BCPT (DPP015), que en realidad son el origen de este medio cromogénico que ahora también ofrecemos deshidratado. Placas preparadas 90 mm con (PPLM56, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPLM56NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de antibióticos. Plaquis herméticas 55 mm con (PPL942, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPL942NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de Abb.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar en la basura.     

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

MICROKIT® P/A PSEUDOCULT

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Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Pseudomonas aeruginosa en 100 (250) ml de agua

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/fichas/P-A-PSEUDOCULT-UE2-2019.pdf

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril PSEUDOCULT Cromofluorogénico diseñado por MICROKIT muchos años antes que otros (sólo fluorogénicos) más conocidos,  para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP-Racks Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Pseudomonas aeruginosa (viraje del agua a rosa-rojo y además fluorescente azul bajo luz de 366 nm VMT050 e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL302 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA908 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u. Para 250 mL d agua, ref: FPA903

DMTI908- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test

SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir dos cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. Incubar 24-72 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 1 vial FPA903 ó 4 cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL302 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar a 5 cucharaditas

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color rosa-rojo demuestra la Presencia de P.aeruginosa en la muestra de agua. La Fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que se trata de P.aeruginosa (además con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, NO hay anillo rojo de Indol en superficie). Ya que hay otros microorganismos  capaces de virar a rosa, pero no son fluorescentes ni indol -.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 250 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable.

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de esta fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-72 h a 37°C aproximadamente:

  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026, vira a rosa, da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y no genera anillo rosa de indol, en las primeras 24h si el inóculo es alto y no procede de muestras estresadas, en 48-72h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013, vira a rojo, no da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y genera anillo rosa de indol.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A PSEUDOCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® P/A CLOSTRICULT

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Clostridium  aguas MICROKIT® P/A CLOSTRICULT para la detección Presencia/Ausencia de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 mL de agua

 Clostridium perfringens y sus esporas

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

 INTRODUCCIÓN:

Medio estéril CLOSTRICULT Cromogénico diseñado por MICROKIT con base TSC y atmósfera de anaerobiosis para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-CP) de C.perfringens y sus esporas (el agua vira a negro opaco), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL308 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

 

 

 

 

  1. FPA902 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u

 

 

 

  1. DMTI902- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 33 test

 

 

 

 

 

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

Recuerde que este parámetro es el único indicador de probable presencia de Enterovirus-Norovirus y protozoos (Cryptosporidium, Giardia, Entamoeba…) en el agua.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Voltear sin agitar para homogeneizar sin oxigenar. Incubar 18-48 horas a 35-37° C (según nuestras recomendaciones) ó a 42° C (según Normas ISO).

Si desea detectar sólo esporas, provocar un shock térmico: calentar la muestra de 100 ml de agua  15 minutos a 70-80 ºC antes de añadir el medio. No es necesario incubar con atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio ya la incorpora. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 50 mL, por lo que debe añadir 50 mL de agua estéril a los 50mL de agua de muestra, o bien emplear el medio a la mitad de la concentración indicada.

 

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color negro-opaco (aunque sólo sea en el fondo, que es por donde suele empezar a virar) demuestra la Presencia de Clostridium perfringens y sus esporas en la muestra de agua.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar(muestras positivas con Clostricult P/A), utilice Quanti-P/A-TSC (Ref: QPA-CP), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío y atmósfera de anaerobiosis en una bolsa hermética.

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

 

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Clostridium perfringens WDCM 00007, vira a negro opaco desde las primeras 18h si el inóculo es elevado y no procede de muestras estresantes, en 48h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013: Inhibido
  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: Inhibido.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.pdf

Si desea recuento fiable de Clostridium perfringens y sus esporas, olvídese radicalmente de la filtración de membrana, que tan nefastos resultados provoca en tantísimos laboratorios, y céntrese en los kits Quanti-P/A Clostricult de MICROKIT

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A CLOSTRICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

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MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia

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Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Burkholderia cepacia complex en 100 ml de agua

Microkit P/A Burkholderia cepacia complex, detección de este peligroso grupo en 100 mL de agua sin los falsos negativos de la filtración de membrana

 

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril Cromogénico diseñado por MICROKIT en base al BCA (BCPT), para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Burkholderia cepacia (viraje del agua a rojo burdeos en sólo 18-24h e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL323 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

  1. FPA904 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u.DMTI904- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test.

  2. SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

  3. De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

            Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya incluyen el tiosulfato.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, ponerse guantes estériles para no contaminar el medio y usarlo en cabina de flujo laminar; añadir 3 cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. El color resultante es naranja, transparente. Incubar 18-48 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa, aun que casi siempre vira en 18h) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir hasta horas entre toma e incubación.

Monitorice todos los puntos necesarios para el análisis preventivo de tendencias.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje del agua a color rojo burdeos (vino tinto) y opaco demuestra la Presencia de B.cepacia en la muestra de agua. La ausencia de fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que no se trata de P.aeruginosa. Además, con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, no hay anillo rojo de Indol en superficie, lo que descarta falsos positivos de coliformes. Ya que hay otros microorganismos  capaces de virar a rojo, pero son más lentos, fluorescentes o indol +. Puede conseguir que el kit sea muy selectivo añadiendo a cada frasco 0,14 ml del suplemento MICROKIT SMT301 (Ticarcilina + Polimixina). Preferimos ofrecer el kit sin suplemento porque algunas cepas de B.cepacia subletales podrían no crecer (por ejemplo la DSMZ 50181 no crece bien con los antibióticos).

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a       0 ufc/100 mL. Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es aceptable para fabricación de medicamentos y cosméticos.

Como siempre en microbiología, resiembre los positivos en estría en agar selectivo BCA (BCPT) e identifique las colonias con galerías bioquímicas (MICROKIT 245000) o con nuestro servicio de identificación molecular (SFI004).

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL323, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O INCLUSO PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

Los viales FPA904 y botes DMTI904- son extremadamente higroscópicos: manténgalos bien cerrados en lugar seco, fresco y oscuro (no en nevera). Agite el bote antes de usar. En zonas de elevada humedad ambiental, guardar bien cerrados en un tupper hermético con silicagel. Los frascos RPL323 tampoco precisan nevera, sólo oscuridad.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, rosado, sólo existe versión agarizada y versión irradiada.

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros de hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 18 h a 35°C aproximadamente:

  • Burkholderia cepacia MKTA 25416, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Burkholderia cepacia MKTN 10743, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Burkholderia cepacia MKTD 50181, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (WDCM00026), Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

DryPlates®-TSA-Crom y SDA-Caf

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DryPlates TSA-Crom y DryPlates SDA-Caf son placas preparadas de medio deshidratado estéril para recuento en 1 ml sin tener que fundir medios

¡Placas preparadas de medio deshidratado estéril!

Absorben en frío 1 ml de muestra en masa.

Las DryPlates® son placas preparadas, estériles y listas para su uso inmediato, con 2 años de caducidad desde fabricación,

al estar elaboradas con medio deshidratado, que se hidrata precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla.

La gelificación en frío (a diferencia del clásico medio con Agar-agar, que precisa hervir para gelificar) se consigue con un desarrollo de MICROKIT denominado “Hidragar”,

que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico.

El reparto inmediato de la muestra y la distribución homogénea del medio se consiguen gracias al Disco Nutriente,

un disco fibroso de malla muy fina que retiene juntos el medio de cultivo en polvo y la muestra.

Enhorabuena por haber adquirido el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Añadir a la base de placa 1 ml de muestra líquida (o su dilución) bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea y no se formes islas secas marginales).
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante:

Si se prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa):

 

 

 

 

 

No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente. La formación de “islas secas” sin muestra sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar las pequeñas desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas.

INCUBACIÓN

  1. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar 4 vasos llenos de agua en la estufa, uno en cada esquina), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación.
  2. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (como “podio base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal;
  3. igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar de cada medio: bacterias 22-37ºC, 1-3 días, hongos 21-25ºC, 3-5 días.
  4. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda.
  5. Leer los resultados (recuentos o aislamientos) buscando sólo las colonias diana, que crecen del color indicado para cada medio en la etiqueta de su caja:
  6. bacterias rojas en DryPlates®-TSA cromogénico, mohos filamentosos-algodonosos en DryPlates®-SDA Caf y levaduras no filamentosas ni algodonosas en DryPlates®-SDA Caf.
  7. Para uso en 1 mL de agua, añadir 1 ml de la muestra de agua centrada en la DryPlates®-TSA (o mejor en DryPlates®-R2A). En los demás parámetros del agua, y/o para mayores volúmenes, prehidratarlas poniendo 1 ml de agua estéril en la placa, añadir el disco nutriente y, una vez empapado, poner encima de éste la membrana filtrada por los 100-250 ml de muestra.
  8. Para superficies, estriar un hisopo con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre la DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril.
  9. Para aires dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril, abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental
  10. (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes.

Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados.

Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con silicagel o sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).

 NUEVA GAMA

-DryPlates®-TSA cromogénico: DPP020- (caja 60 u) y DPP020+ (caja 1200 u): Recuento total en cosméticos, TSA (ISO 21149) cromogénico, colonias rojas que para mejor visión, contrastan con el medio color crema y con las partículas de la muestra. Dcha: Mix de aerobios totales.

-DryPlates®-SDA Caf: DPP021- (caja 60 u) y DPP021+ (caja 1200 u): Recuento de hongos (levaduras y mohos) en cosméticos, medio color crema Sabouraud Dextrosa Cloranfenicol Agar (ISO 16212), colonias de sus colores naturales (Izda: Levadura Candida albicans; Dcha: Moho Aspergillus niger).  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

NOTAS

Otros muchos medios en DryPlates®: Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos, en bebidas alcohólicas),

Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos),

Enterobacterias (VRBG o cromogénico),

Coliformes, Coliformes y E.coli, E.coli,

Staphylococcus aureus,

Bacillus cereus,

Pseudomonas aeruginosa,

Burkholderia cepacia,

Candida albicans,

Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir),

Salmonella spp. (Cromosalm y XLD),

Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae,

Antiobiograma cromogénico,

UTIs…

Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L.  tras más de 23 años de ensayos y mejoras  para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características. Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones equivalentes (>90%) a los mismos medios clásicos agarizados.

https://www.microkit.es/fichas/Dry-Plates-TSA-crom-y-SDA-Caf-Prospecto.pdf

Si desea más información sobre nuestros DryPlates®-TSA-Crom y SDA-Caf rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

CHALLENGE TEST

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CHALLENGE TEST KIT es el conjunto de cepas cuantitativas necesario para realizar el test de potencia conservante en cosméticos

Nuevo kit de cepas cuantitativas y estables, a concentración muy elevada, que estaba necesitando la industria cosmética para elaborar sus Challenge Test, sin necesidad de preparar cada uno las suyas.  Al emplear estas cepas de referencia, ya cuantificadas, se ahorra los primeros días del Challenge Test tradicional:

KIT DE CEPAS CUANTITATIVAS MICROKIT PARA CHALLENGE TEST SEGÚN ISO 11930 y FDA (Ref: WDCM-CH, para 10 test, caducidad CERCANA A 1 año):

Cepas de colección universal WDCM, cuyo máximo pase certificado es el tercero desde la colección tipo empleada:

*    Aspergillus niger-brasiliensis 105 – 106 ufc/lentícula, 10 unidades por caja, como hongo alterativo del grupo de los mohos. Los Challenge Test para hongos, dado su gran tamaño celular, pueden realizarse a partir de cepas 10E5 en vez de hacerse con cepas a partir de 10E7

  • Candida albicans 105 – 106 ufc/lentícula, 10 unidades por caja, como hongo patógeno del grupo de las levaduras. Los Challenge Test para hongos, dado su gran tamaño celular, pueden realizarse a partir de cepas 10E5 en vez de hacerse con cepas a partir de 10E7

*    Pseudomonas aeruginosa 107 – 109 ufc/lentícula, 10 unidades por caja, como bacteria patógena Gram negativa y oxidasa positiva

  • Burkholderia cepacia 107 – 109 ufc/lentícula, 10 unidades por caja, como bacteria patógena emergente Gram negativa y oxidasa positiva (por ser patógeno emergente típico del biofilm de aguas de uso cosmético)

*    Citrobacter freundii 107 – 109  ufc/lentícula, 10 unidades por caja, como bacteria alterativa e indicadora, Gram negativa y oxidasa negativa, del grupo de los coliformes (no recomendamos el uso de E.coli en este test, ya que su supervivencia en cualquier cosmético es muy fugaz, en cambio la indicada es frecuente alterativo en productos cosméticos, ideal para este ensayo), pero si lo desea, lo incluimos en vez de Citrobater

  • Staphylococcus aureus 107 – 109  ufc/lentícula, 10 unidades por caja, como bacteria patógena Gram positiva

ADEMÁS

Además, si lo desea, podemos añadir a esta lista, los microorganismos salvajes, nativos, autóctonos, endémicos o in house que hayan encontrado con cierta frecuencia en sus muestras y/o instalaciones (aguas, superficies, aire, materias primas…), a nivel 107 – 109  para bacterias de tamaño celular normal (106 si son células muy grandes) y a nivel 105 para hongos.

Para ello puede enviarnos una placa con cultivo puro de cada una las que desee utilizar para que se las caractericemos genéticamente (Seilasesoría-Identificación molecular SFI004+) y le elaboremos las lentículas cuantitativas al nivel indicado.

Este servicio suele demorarse de 4 a 8 semanas.

Para dichas cepas salvajes, el pedido mínimo es de 100 unidades (10 cajas de 10 unidades, 2 años de caducidad estándar) si las libera para nuestro uso comercial (con confidencialidad sobre su origen) y de 250 unidades (25 cajas de 10 unidades) si son de uso exclusivo y confidencial para Ud. Precio muy reducido en cualquiera de los dos supuestos, incluida la identificación molecular.

REGALO

Por pedir este kit de cepas para Challenge Test, junto con los medios MICROKIT necesarios (sean deshidratados, sean preparados):

Ringer, TSB, LPT Neutralizing Broth, TSA y SDA (ó SDA+Caf),

solicite en su pedido que le regalemos nuestro protocolo MICROKIT para elaboración del Challenge Test (29 páginas, sólo disponible en español), que mejora el protocolo de la ISO 11930 (Microbiología cosmética: Ensayo de la protección antimicrobiana  de un producto cosmético), de Diciembre 2012, mediante diversas justificaciones de la afamada FDA (Microbiological Challenge Testing),

lo cual permite así realizar estos ensayos en mucho menos tiempo, al ahorrarle el paso previo de elaborar Ud. mismo las cepas a estas elevadas concentraciones; con mayor precisión, al tener la concentración exacta certificada en origen; y con directrices más acordes a un producto tan netamente inhibitorio como es un cosmético.

Si desea pedir este protocolo (en vez de conseguirlo gratis por comprarnos los medios de cultivo necesarios junto al kit de cepas), pídanoslo con la referencia: PRT-COSM-010.

Con esta nueva iniciativa, confiamos convertirnos en (o seguir siendo) su proveedor favorito en microbiología industrial y ambiental.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/Challenge-Test-Kit-UE-2-2019.pdf

Si desea más información sobre nuestros CHALLENGE TEST rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

KIT P/A PSEUDOCULT BOTE 100 g ESTÉRIL

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PSEUDOCULT P/A BOTE 100 g ESTÉRIL

detección económica Pseudomonas aguas:

Con los botes de 100 g de Pseudocult podrá buscar Ps.aeruginosa en aguas por sólo 1 €

El método P/A

(Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir

¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!

En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de agua el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los microorganismos como sucede con la MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.

La legislación europea 2015 exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium perfringens y sus esporas y Pseudomonas aeruginosa en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que Ud. analiza, están exentas de estos microorganismos,

está gastando enormes cantidades de tiempo y de dinero en “contar ceros”.

Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis, ya que

el método P/A detecta numerosas presencias que el método MF encuentra como “cero”,

que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía internacional que cerca del 33 % de las aguas que contienen Pseudomonas aeruginosa, no son detectadas como positivas mediante el método MF!

Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar dentro 100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios, extendemos desde finales de 2016 su uso en una

nueva presentación extraordinariamente económica: Botes de 100 g de polvo estéril con cucharilla esterilizable

(referencias DMTI9..-).

En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un Bunsen, extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de medio, y cerrar el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que ninguno de los microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar el resto del polvo interior de eventuales células todavía viables de Pseudomonas aeruginosa que pudiera portar en sus manos.

MODO DE EMPLEO 

1-Añada dos cucharaditas (2 gramos) de P/A PSEUDOCULT para buscar Pseudomonas aeruginosa  en 100 ml de agua (cuatro cucharaditas para buscarla  en 250 ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de medio añadido, ya que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de esta concentración. Si el agua es clorada, añadir el Tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.

2-Agitar, incubar a 37ºC

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

3-Ver al día siguiente si hay viraje del agua de color paja a rosa y si da fluorescencia verde-amarillenta en la oscuridad bajo luz UVA de 366 nm (linterna MICROKIT VMT050). Si no hay cambios, dejar incubando otro día y volver a verificar si hay viraje a rosa del agua. Por si las Ps.aeruginosa estuviesen muy estresadas, es prudente dejar los negativos incubando hasta 3 días y verificar después si sigue sin haber viraje a rosa y fluorescencia.

4-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (resiembra en Cetrimide Agar y uso de M-Ident-PS). En caso negativo declarar la muestra como ausente de este patógeno en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.

PRESENTACIÓN

Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Pseudomonas aeruginosa, Ref: DMTI908-  para 25-50 muestras, con ¡3 años de caducidad!

detección económica Pseudomonas aguas: Con los botes de 100 g de Pseudocult podrá buscar Ps.aeruginosa en aguas por sólo 1 €

https://www.microkit.es/fichas/P-A-PSEUDOCULT-BOTE-100g-esteril.pdf

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros KIT P/A PSEUDOCULT BOTE 100 g ESTÉRIL rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U