Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

DryPlates® Placas preparadas de medio deshidratado, que absorben en frío 1 ml de muestra en masa.

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DryPlates® Placas preparadas de medio deshidratado

Placas preparadas de medio deshidratado; DryPlates. Absorben 1 ml directo de muestra o se siembra en estría tras prehidratar.

Las DryPlates® son placas preparadas estériles y listas para su uso dry plates1inmediato, con un año de caducidad gracias al hecho de estar elaboradas con medio deshidratado, que se hidrata precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla. La gelificación en frío (a diferencia del Agar-agar, que precisa hervir para gelificar) se consigue con una mezcla sinérgica de gelificantes desarrollada por MICROKIT que denominamos “Hidragar” y que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC propios del medio clásico. El reparto de la muestra y la distribución homogénea del medio se consiguen gracias a un disco textil de malla muy fina, que retiene el medio de cultivo en polvo y la muestra, cuyo conjunto llamamos “Disco Nutriente”.

VENTAJAS SOBRE EL MEDIO CLÁSICO

    • La muestra líquida (agua, bebidas…) o la solución madre y sus diluciones decimales (sólidos) se añaden directamente: 1 ml es totalmente autodifundido y absorbido en escasos segundos por cada placa (siembra en masa sin necesidad de fundir agares): Multiplica por 3-10 el límite inferior de detección/recuento de la placa preparada clásica, yaque ésta está destinada sólo para siembras en superficie de 0,1-0,3 ml. No necesita aplicadores. Unos medios difunden más rápidos que otros, pero es cuestión de segundos.

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    • Fácil y rápido manejo: de la muestra a la estufa en sólo 10 segundos!!! Ya no hay que autoclavar o fundir medios.
  • Larguísima caducidad, de 12 meses desde fabricación.dryplates3
  • Recuentos muy evidentes, al emplearse medios cromogénicos y disco nutriente transparente, de fibra muy fina, que permite a las colonias desarrollarse sin las formas extrañas de otros kits. Incluso para los mohos invasivos, las colonias son muy nítidas.
  • 100% estériles, al estar irradiadas por rayos gamma.
  • Posibilidad de repicado de colonias, al ser más accesibles que en las placas clásicas, por ser el Hidragar mucho más blando que el Agar-agar.

  • MÁS VENTAJAS SOBRE EL MEDIO CLÁSICO

  • La muestra se reparte por el medio con total homogeneidad y sin necesidad de aplicadores.
  • Ahorro de espacio en almacenamiento, que es posible a dryplates4temperaturas muy variables (5-30°C), por lo que pueden guardarse en cualquier sitio; ahorro de espacio en las estufas de incubación: caben muchas más muestras en cada estufa que con la placa de 90; ahorro de volumen de material de desecho (compromiso medioambiental).
  • Diseño para placa Petri de 55 mm: Máxima aceptación por los más ortodoxos microbiólogos, que no confían en otros formatos extraños en cartón, ni en otras placas que resultan demasiado pequeñas para un adecuado recuento.
  • Gama completa de parámetros microbiológicos para alimentos, aguas y cosméticos.
  • Versatilidad de empleo: 1 ml de muestra en masa o bien, tras dryplates5prehidratarlas con 1 ml de agua estéril: uso con membranas de Filtración para mayores volúmenes, uso en superficies con swabs, uso para control de aire…
  • Validadas por MICROKIT con validaciones explicativas y disponibles al 100% (no sólo el diploma de la validación típico de otras entidades internacionales).

MODO DE EMPLEO

1. En las condiciones de asepsia propias de cualquier análisis microbiológico, voltear la placa de la DryPlates® y con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa.

2.Tomar la base de la placa (sin la tapa ni el disco nutriente), colocarla en su posición original y añadirle dentro 1 ml de muestra líquida (o su dilución) en el centro (no a los lados, ya que si la muestra toca la pared de la placa, tardará más en autodifundirse).

3.Voltear de nuevo la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante:

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Si se prefiere, tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en la placa):

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4.Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (basta con dejar un vaso de agua lleno en la estufa), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue nada de muestra durante la incubación. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar de cada medio y están indicadas en la etiqueta de su caja.

5.Leer los resultados (recuentos o aislamientos) buscando sólo las colonias diana, que crecen del color indicado para cada medio en el capítulo “GAMA” de este folleto (y en la etiqueta de su caja). Las demás colonias, si es que existen, no deben contarse, ya que son de flora acompañante o interferente.

6.Se puede aplicar el factor de corrección indicado en el CCC de cada medio, a fin de obtener el número de ufc/ml de muestra sembrada, como si fuera en placas clásicas de agar.

OTROS USOS

7.Para uso en aguas, añadir 1 ml de la muestra de agua en la placa TC-Water (con PCA Water-YEA-Nutrient Agar ISO 6222). En los demás parámetros del agua, y/o para mayores volúmenes, prehidratarlas poniendo 1 ml de agua estéril en la placa, añadir el disco nutriente y, una vez empapado, poner encima de éste la membrana filtrada.

8.Para uso con escobillones o para exponer al aire, añadir 1 ml de agua estéril a la placa para humectarla y colocar encima el disco nutriente, una vez empapado barrer sobre el mismo el escobillón con muestra o exponer al aire. Para exponer al aire añadir antes al agua 20 ml/litro de glicerol y una gota/litro de antiburbujas, para evitar el efecto desecación.

CONSERVACIÓN 

  • Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).
  • El polvo seco que vea que se ha desprendido durante el transporte y almacenamiento es irrelevante y no afecta al resultado, ya que por el modo de fabricación, si se ha desprendido del disco nutriente, es que sobraba: el tejido mantiene siempre más de la cantidad mínima necesaria, por fuerzas electrostáticas y por la relación entre la granulometría del polvo y los intersticios del tejido.

  • PRECAUCIONES DE USO

  • Algunas muestras, algunos medios y algunos diluyentes embeben peor que otros a causa de su diferente viscosidad y composición: si en unos segundos no se ha repartido homogéneamente toda la muestra en el disco nutriente, inclinar ligeramente la placa hasta que la muestra líquida sobrante vaya a un borde de la zona que aún no se haya hidratado y la empape (más trabajo da mezclar las siembras en masa de placas clásicas y esperar que se enfríen los agares).
  • Si quedan “islas” grandes sin empapar y no desaparecen en menos de 1 minuto, es que se ha añadido algo menos de 1 ml de muestra (o que se ha añadido directamente una muestra viscosa sin diluir) y debería repetirse la prueba correctamente en otra DryPlate®.
  • Este punto crítico de las micropipetas es más habitual de lo que se suele aceptar; y sólo gracias a las DryPlates®, se detecta antes de que sea demasiado tarde.
  • Las islas secas pequeñas son irrelevantes, se autohidratan al incubar y no afectan los resultados (simplemente habrá calvas, pero todas las ufc habrán formado sus respectivas colonias).
  • El añadir la muestra (o el agua de pre-humectación) sobre el disco nutriente, sea en el centro, sea repartiendo sobre su superficie, dificulta su autodifusión.
  • Es mucho mejor dejar caer el disco nutriente sobre el ml de muestra centrada en la placa (o de agua de prehidratación), ya que es su propio peso el que facilita una perfecta autodifusión.

  • MÁS CUESTIONES

  • Tener en cuenta que cada bolsa con 60 Discos Nutrientes es estéril en su interior, pero si se emplean algunos Discos Nutrientes sin terminar la bolsa, ésta debe almacenarse bien cerrada, con su saquito desecante y manipular en condiciones de asepsia, para evitar que entren contaminantes microbianos a la misma y provoquen resultados falsamente positivos en los siguientes análisis realizados con los Discos Nutrientes de dicha bolsa.
  • Si la muestra es sólida o espesa, emplear la dilución madre (-1) y su serie de diluciones decimales preferiblemente en Agua de Peptona Tamponada Neutralizante MICROKIT: en polvo (DMT011), en tubos preparados 9 ml (TPL053S), en frascos 90 ml sin (RPL054) o con (RPL054P) perlas de vidrio para homogeneizar muestras espesas o bien en frascos 225 ml con perlas de vidrio (RPL228Z).
  • Si no utiliza Agua de Peptona Tamponada Neutralizante como la indicada, y la muestra tiene conservantes (declarados/conocidos o no: cloro, formol, parabenes, ajo, pimentón, pimienta…), naturales o artificiales, los resultados pueden verse comprometidos y obtenerse grandes proporciones de resultados falsamente negativos, con este o con cualquier otro método de análisis microbiológico.
  • Si el recuento (o concentración tras enriquecimiento en caldo) de los dryplates8microorganismos es muy alto, en vez de colonias diminutas podrían aparecer virajes globales de color del disco nutriente al color del medio diana (microcolonias muy apretadas entre sí), pero a veces muy tenue, por lo que podría pasar desapercibido e informarse de un falso negativo.
  • Por ello en microbiología es importante realizar los recuentos en diversas diluciones decimales y contar las placas en la dilución que mejor se lean (las que tengan 10-200 colonias).

  • MÁS PRECAUCIONES DE USO

  • El método clásico en agar-agar es el más robusto de cuantos existen en microbiología, ya que sirve para todo tipo de muestras en todo tipo de laboratorios. Los métodos modernos, como las DryPlates® y todos los demás, pueden tener limitaciones de uso en algunos tipos de muestras (ej. viscosas, grasas, hiperosmóticas…) y el usuario debe comprobar si funcionan correctamente en sus muestras concretas (validar), antes de aplicarlo de rutina.
  • Algunos tipos de muestras pueden invitar a que se aplique un factor de corrección en los recuentos en DryPlates® para ser comparables con los resultados de las placas clásicas de agar-agar.
  • Este número corrector lo calculará el laboratorio interesado comparando ambos métodos con sus productos. Por ejemplo, si para un producto en recuento de hongos obtiene en placa clásica una media de 90 colonias y en DryPlates® obtiene una media de 100, cuando ya implante el uso único de DryPlates®, multiplique el recuento obtenido en ellas por el factor de corrección (en este caso sería 90/100 = 0,9), para expresar el número de ufc/ml que habría en placa de agar clásico.
  • Ej: Obtenemos 68 colonias en una DryPlates® YM-Food; 68 col x 0,9 = 61 ufc/ml de muestra sembrada, sería el recuento obtenido en placa clásica. Esta corrección sólo es necesaria si el factor de corrección es mayor a 1,5.

PRESENTACIÓN

Ofrecemos, para cada medio, dos tamaños de caja (60 u y 1200 u):

– cajas de 60 unidades (1 bolsa de 60 unidades junto a una caja pequeña de placas)

– cajas de 1200 (20 bolsas de 60 unidades junto a una caja grande de placas)

prentacion dry plates

GAMA COMPLETÍSIMA

DryPlates® TC: DPP001- (caja 60 u) y DPP001+ (caja 1200 u) Recuento total de bacterias aerobias, medio color crema PCA ISO 4833 cromogénico, colonias rojas, se ven más rápido.

DryPlates® YM: DPP002- (caja 60 u) y DPP002+ (caja 1200 u) Recuento de hongos (levaduras y mohos), medio color rosa DGRBC Agar ISO 21527, colonias de sus colores naturales.

 Y -DryPlates® TC-Water: DPP003 Recuento total en aguas, medio color crema YEA Nutrient Agar (PCA-Water) ISO 6222 cromogénico, colonias rojas.

También –DryPlates® SDA Caf: DPP021 Recuento de hongos (levaduras y mohos) en medicamentos y cosméticos, medio crema Sabouraud Dextrosa Agar Cloranfenicol Farmacopea, colonias de sus colores naturales.

Y TAMBIÉN PARA AISLAR PATÓGENOS

–DryPlates® EC: DPP006 Recuento de E.coli y demás coliformes.

–DryPlates® ETB: DPP008 Recuento de Enterobacterias, medio púrpura claro VRBG Agar ISO 21528, colonias púrpura oscuro.

Y también –DryPlates® STAPH: DPP009 Detección / Recuento de Staphylococcus aureus, medio crema CROMOKIT-STAPH Agar, colonias verde-azules.

–DryPlates® VIBRIO: DPP010 Detección / Recuento de Vibrio parahaemolyticus y de Vibrio cholerae, medio crema CROMOKIT-VIBRIO Agar, colonias verde-azuladas (V.parahaemolyticus) y púrpura (V.cholerae).

–DryPlates® BC: DPP011 Detección / Recuento de Bacillus cereus, medio salmón CROMOKIT-BC Mossel Agar, colonias con centro azul-verdoso.

Asimismo -DryPlates® SAL: DPP012 Detección de Salmonella, medio crema CROMOSALM Agar ISO 6579, colonias verde azuladas (el resto de enterobacterias crecen negras o incoloras).

-DryPlates® PS: DPP014 Detección de Pseudomonas aeruginosa, medio crema Cetrimida Agar ISO 22717/Farmacopea, colonias verdes, azules o amarillas, fluorescentes.

-DryPlates® BCPT: DPP015 Detección de Burkholderia cepacia, medio salmón BCPT Agar, colonias rosas o blancas (según cepa) con halo rosa.

Y –DryPlates® Candi: DPP016 Detección / Recuento de Candida albicans, medio crema CROMOKIT CANDIDA Agar, colonias verde-azuladas.

Placas preparadas de medio deshidratado; DryPlates. Absorben 1 ml directo de muestra o se siembra en estría tras prehidratar.

https://www.microkit.es/pdf/Dry-Plates-2021.pdf

ATENCIÓN: Si necesita mas información sobre las DryPlates® o necesita DryPlates® de otros medios rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto/ o bien póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16, y estudiaremos si podemos diseñarlas y fabricarlas para Ud.

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

DryPlates® ETB: DPP008- (caja 60 u) y DPP008+ (caja 1200 u). DryPlates® para Enterobacterias

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DryPlates® para Recuento de Enterobacterias

 

El sustituto del Siglo XXI para los medios de cultivo tradicionales.

Las placas DryPlates® para Enterobacterias (ETB) son placas de cultivo preparadas con polvo VRBG (Violet Red Bile Glucose) en un disco nutriente deshidratado, listas para su uso inmediato. Permiten la siembra en masa de 1 mL en solo 10 segundos, eliminando la necesidad de fundir, hervir o enfriar agares.

Características y Beneficios Clave

  • Ahorro de tiempo masivo: Evita el proceso de hervido, fusión y enfriado a 45 °C, ahorrando aproximadamente 2 horas de trabajo.
  • Fácil y rápida: La hidratación ocurre instantáneamente al entrar en contacto con la muestra líquida y a temperatura ambiente.
  • Alta Caducidad: 1 año desde su fabricación.
  • Medio Oficial: Utilizan VRBG, el Agar oficial para recuento de Enterobacterias (según normas UNE 34-557:1983, ISO 21528:2004).
  • Resultados Confiables: Ofrecen un 100% de recuperación de Enterobacterias respecto al medio agarizado clásico VRBG.

Crecimiento de Enterobacterias

En este medio, las bacterias de la familia Enterobacteriaceae crecen formando colonias de color púrpura con un diámetro de mm o superior, a menudo rodeadas por un halo de precipitación de sales biliares. Otros microorganismos pueden crecer excepcionalmente, pero lo harán con colonias de otros colores. Lo típico del medio VRBG.dry plates ETB

El medio es apto para muestras de alimentos, medicamentos y ambientes interiores (superficies y aires).

MODO DE EMPLEO

A. Para Muestras Líquidas (1 ml)

  1. Preparar la placa: Con unas pinzas, retire el disco nutriente de su bolsa y colóquelo en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Añadir la muestra: Vierta 1 ml de la muestra líquida en la base de la placa, procurando que esté bien centrada y no toque las paredes.
    • Nota: Si la muestra es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa.
  3. Cerrar e inocular: Voltee la tapa con el disco para cerrar la placa, asegurando que el disco caiga centrado sobre la muestra. El medio se repartirá y se hidratará homogéneamente al instante.
    • (Opcional: Puede colocar el disco nutriente con pinzas directamente sobre el ml de muestra ya dispensado).
    • Importante: No añada la muestra sobre el disco, ya que la difusión será lenta y heterogénea.

B. Para Ambientes Interiores (Superficies y Aires)

  1. Hidratación Previa: Hidrate la placa con 1 ml de agua estéril antes de la siembra (coloque el disco sobre el agua, no el agua sobre el disco).
  2. Muestras de Superficies: Estríe un escobillón de barrido sobre la DryPlates® ya hidratada.
  3. Muestras de Aire: Deje la DryPlates® abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala para una estimación «de campo» de la flora ambiental.
    • (Se recomienda mejor un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos precisos por de aire).

Incubación y Lectura

Incubación

  • Condiciones: durante (condiciones estándar).
  • Posición: Incubar sin voltear las placas (disco hacia abajo) para evitar fugas de la muestra.
  • Humedad: IMPORTANTE: Incubar en atmósfera húmeda (basta con dejar un vaso de agua lleno en la estufa).
  • Precaución: Nunca incube DryPlates® directamente sobre la bandeja metálica de la estufa. Intercale una placa vacía debajo para evitar que el exceso de calor seque el medio.

Lectura de Resultados

Busque únicamente las colonias diana (Enterobacterias): colonias de color púrpura oscuro sobre el medio púrpura claro.

Conservación y Precauciones

  • Almacenamiento: Almacene a temperatura ambiente (ideal ).
    • ¡No almacenar en nevera! La humedad de la nevera puede prehidratar y estropear los discos.
  • Condiciones: Es imprescindible guardar en un lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios deshidratados.
  • Zonas Húmedas: Si trabaja en zonas con alta humedad atmosférica, guarde las DryPlates® bien cerradas en su bolsa original dentro de un recipiente hermético tipo «tupper» con sacos antihumedad.

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DryPlates® recuento Enterobacterias, formuladas con polvo VRBG para siembra en masa en 10 segundos, sin tener que fundir agares

https://www.microkit.es/fichas/Dry-Plates-ETB-Prospecto.pdf

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 8 años de ensayos y mejoras en sinergia para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características. Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140:2003

DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L

Para más información no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

LINTERNA ULTRAVIOLETA 366 nm (luz negra de Wood)

3 respuestas

 

Linterna Ultravioleta de 366 nm: La Herramienta más Versátil para el Laboratorio

Esta linterna, económica y fácil de usar, es un instrumento esencial para un amplio abanico de aplicaciones en microbiología y más allá.

Linterna

Aplicaciones Clave en Microbiología (Detección por Fluorescencia)

La linterna permite la identificación rápida y visual de diversos microorganismos y compuestos mediante la fluorescencia que emiten:

Microorganismo / Compuesto Color de la Fluorescencia Condiciones / Observaciones
Clostridium perfringens Azul En presencia de MUP (ej. Placas PPL929).
Legionella Verdosa (L. pneumophila) o Azul-Blanquecina (L. bosemanii) En medio GVPC.
Pseudomonas (P. aeruginosa, P. putida, P. fluorescens) Amarillo-Verdosa marcada Incluso en cepas acromogénicas (sin pigmento).
Escherichia coli Azul celeste En presencia de MUG (tanto en colonias como en caldos).
Desulfovibrio Roja En medio Sulfate API Agar al añadir .
Salmonella Azul En presencia de MUCAP.
Bacteroides melaninogenicus Anaranjada —
Aflatoxinas Fluorescencia Detección cualitativa en cereales, piensos, frutos secos, etc., producida por Aspergillus flavus y A. parasiticus.

Aplicaciones en Micología y Dermatología

  • Dermatofitos (Tiñas): Detección de hongos causantes de tiñas (como Microsporum canis, M. audouinii y Trichophyton schoenleinii) por la fluorescencia verde-amarillenta que provocan en el pelo y heridas.
  • Cultivo de Hongos: Activa los métodos reproductores de los hongos, favoreciendo el cultivo.
  • Micología de Campo: Útil en identificaciones, por ejemplo, la fluorescencia de la seta de olivo (Omphalotus olearius).

Otras Aplicaciones Diversas

La versatilidad de la luz UV se extiende a otros campos:

  • Detección de billetes falsos.
  • Cromatografía y Fluoroquímica.
  • Análisis de pesticidas y detección de lípidos.
  • Control de calidad en dispositivos electrónicos.
  • Localización de soldaduras imperfectas en Aeronáutica.
  • Mineralogía, Arqueología y Filatelia.

Recordatorio Importante

¡Utilice la linterna siempre en la oscuridad! La luz ambiental enmascara la tenue fluorescencia emitida por los microorganismos.

Comprobación: Puede verificar el correcto funcionamiento de la linterna por la luz azul que emite la tónica.

[Enlace de referencia: https://www.microkit.es/fichas/LINTERNA-ULTRAVIOLETA-DE-366%20nm.pdf]

Para consultas o aclaraciones: No dude en ponerse en contacto con nosotros para solicitar precios actualizados y características técnicas en el teléfono 91-897 46 16 o a través del correo electrónico microkit@microkit.es.

ESPONJAS ABRASIVAS TOMAMUESTRAS

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Esponjas abrasivas tomamuestras superficies para detectar microorganismos (bacterias, levaduras y mohos) con la máxima eficiencia

https://www.microkit.es/fichas/ESPONJAS-ABRASIVAS-VMT037.pdf

ESTERILIZADAS por irradiación a 25 KGy

-CONTROLADAS con ausencia de inhibidores del crecimiento de los principales patógenos: Salmonella, Listeria monocytogenes, E.coli, Staphylococcus aureus…

Producto diseñado para cumplir con la Directiva 2073/2005 de 15/11/2005 y posteriores Normativas (ANSES, ISO 18593).

Cada esponja viene en una bolsa unitaria autosellable, que posteriormente ha sido esterilizada. Tamaño: 5×10 cm. CONSERVAR: 8-25°C  ¡EN OSCURIDAD! CÓDIGO: VMT037           

Material necesario NO incluido:

-Spray pulverizador (humectante) de Solución Ringer 1/4 sin nutrientes para ablandar el biofilm y que la esponja lo arrastre mejor (ref. MICROKIT: KMT035)

-Caja 20 Tubos 9 ml LPT Neutraling Broth para revitalizar los microorganismos una vez están arrastrados en la esponja. No usar para humectar la superficie a muestrear, ya que contienen nutrientes que la contaminarían y serían foco que alimentaría las próximas bacterias que cayeran allí (ref. MICROKIT: TPL053S)

-Caja 100 pares de Guantes estériles para tomar las muestras sin contaminarlas (ref. MICROKIT: VMT040 -talla pequeña-, VMT041 -talla grande-)

 MODO DE EMPLEO:

1-Añadir a la bolsa el contenido de un tubo LPT Neutraling Broth (TPL053S) para inactivar residuos de cualquier tipo de desinfectante que pueda tener la superficie de muestra, cerrar y apretar para embeber. Si utiliza otro caldo inactivador no respondemos de la efectividad del producto. Este paso previo no es necesario para muestrear canales.

2-Con guantes estériles (VMT040, VMT041), extraer la esponja de la bolsa, y escurrir en ella el exceso de líquido inactivador.

3-Raspar 100 cm2 (o la superficie que sea necesario) de la superficie.

4-Devolver a la bolsa y cerrar. Si se muestrean canales, añadir ahora el caldo TPL053S.

5-Tras un mínimo de 20 minutos para revitalización, y un máximo de 24 horas de transporte hasta el laboratorio, llevar la esponja con todo el líquido a un homogeneizador con 100-225 ml del caldo de pre-enriquecimiento adecuado para el microorganismo buscado (Salmonella spp., Listeria monocytogenes, E.coli, Staphylococcus aureus, Legionella pneumophila…). Si no se agita bien y no se utiliza un caldo de arrastre adecuado como el TPL053S propuesto, la retención (y consecuente no detección) de células en los poros de la esponja, puede llegar a ser del 50% de la población. Expresar los resultados como presente o ausente en 100 cm2.

 CONTENIDO:

100 ESPONJAS ESTÉRILES, DESHIDRATADAS  Y NO INHIBIDORAS  que, con TPL053S,  arrastran la población e inactivan residuos de amonios cuaternarios,  fenol, compuestos bencénicos (incluidos parabenes),  formol, iodo, cloro y demás halógenos, lejía, compuestos mercuriales, glutaraldehido…

USO EXCLUSIVO PARA LABORATORIO, para control microbiológico de superficies en industria alimentaria y otros sectores.

esponjasesponjas abrasivas tomamuestras superficies para detectar microorganismos (bacterias, levaduras y mohos) con la máxima eficiencia

¿Por qué usar estas esponjas y no bayetas? Numerosos laboratorios acreditados ISO 17025 que buscan Listeria monocytogenes en fábricas porque saben que hay focos que contaminan el alimento final, nos han comunicado que eligen nuestras esponjas abrasivas porque rascan el biofilm y detectan donde los demás métodos no son capaces de encontrar el foco de contaminación.

Aquí puedes ver cómo se usan:

https://youtu.be/TFT1VBA6IKY

Para consultas o aclaraciones sobre éste o cualquiera de nuestros productos no dude en ponerse en contacto con nosotros en el número de teléfono 91- 897 46 16 o a través del correo electrónico microkit@microkit.es.

ANAEROBIOSIS: KITS GENERADORES

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Kits Generadores y Controladores de Atmósfera de Anaerobiosis

ANAEROKIT y ANAEROTEST: Soluciones para la Anaerobiosis y el Control

Estos kits son esenciales para el cultivo de microorganismos que requieren ambientes con bajo o nulo contenido de oxígeno (anaerobios estrictos, facultativos o microaerófilos).

Principio de Funcionamiento de los Generadores (Anaerocult, AnaeroKIT)

Los generadores contienen componentes químicos (Tierra de diatomeas, Hierro, Ácido Cítrico y Carbonato Sódico) que:

  1. Fijan químicamente el oxígeno del aire dentro del recipiente o bolsa.
  2. Generan anhídrido carbónico ().
  3. Velocidad: El nivel máximo de atmósfera deseada se alcanza en aproximadamente 30 minutos y se mantiene durante varias horas.

A. Kits Generadores de Anaerobiosis Completa

Estos productos generan un ambiente totalmente anaerobio para el cultivo de anaerobios estrictos y facultativos.

1. ANAEROCULT A (Para Jarras)

Referencia Formato Uso Capacidad de la Jarra
KKM036 Caja de 10 unidades Generador de atmósfera en un recipiente de . Hasta 25 Plaquis, 20 Ecoplaquis o 7 placas de .

Modo de Empleo:

  1. Preparar Control: Humedezca una tira de Anaerotest (KKM039) con una gota de agua y fíjela en la gradilla de las placas.
  2. Cargar la Jarra: Introduzca las placas con el Anaerotest en la jarra de anaerobiosis.
  3. Activar el Generador: Añada de agua al papel de una bandeja de Anaerocult A, distribuyéndolos homogéneamente.
  4. Sellar: Antes de 20 segundos, coloque la bandeja verticalmente en la jarra (con la cara mojada mirando hacia las placas) y cierre la jarra inmediatamente.
  5. Incubar y Controlar:
    • Introduzca la jarra en la estufa.
    • Después de , compruebe que el Anaerotest haya virado de azul a blanco (indicando anaerobiosis correcta), sin abrir la jarra.
    • Conservación: Bien cerrado y al abrigo de la humedad, entre y .

2. ANAEROKIT (Para Bolsas Individuales)

Referencia Formato Uso
KKT001 Caja de 25 unidades Generador de atmósfera para bolsas individuales (placas de Petri).

Modo de Empleo:

  1. Preparar Control: Humedezca una tira de Anaerotest (KKM039) con una gota de agua y fíjela en el exterior de la placa, sobresaliendo la zona reactiva.
  2. Activar el Generador: Introduzca un bote de Anaerokit en una bolsa de incubación y humedézcalo con de agua.
  3. Sellar: Introduzca inmediatamente las placas con el Anaerotest y cierre la bolsa herméticamente con un Anaeroclip (KKM100).
  4. Incubar y Controlar:
    • Incube en la estufa.
    • Después de , controle que el Anaerotest haya virado de azul a blanco (anaerobiosis correcta).
    • Conservación: Al abrigo de la humedad, entre y .
    • Nota: Solicite un Anaeroclip sin cargo con su primer pedido de Anaerokit.

B. Kits Generadores de Microaerofilia

Estos productos crean una atmósfera pobre en oxígeno, ideal para microorganismos microaerófilos como Campylobacter.

Producto Referencia Modo de Empleo
ANAEROCULT C KKM101 (Caja 10 u) Usar siguiendo las instrucciones del Anaerocult A (Para Jarra).
ANAEROCULT C-MINI KKM037 (Caja 25 u) Usar siguiendo las instrucciones del Anaerokit (Para Bolsa).

C. Control de Anaerobiosis

ANAEROTEST (Indicador Químico)

Referencia Formato Uso
KKM039 Caja de 50 tiras Indicador de Azul de Metileno para verificar la correcta anaerobiosis.

Modo de Empleo:

  1. Humedezca la zona reactiva con $\mathbf{1\,\text{gota de agua destilada}$.
  2. Introduzca la tira en la jarra o bolsa junto al generador (, , etc.).
  3. Cierre e incube.
  4. Verificación: Confirme a las $\mathbf{4-6\,\text{horas}$ que el indicador ha virado de azul a blanco, señalando que se ha alcanzado la anaerobiosis.
  5. Conservación: Bien cerrado en su tubo, en zona seca.

Recordatorio Importante

Si utiliza el TSC o el SPS Agar en formato kit Quanti P/A-Clostricult, no necesita incubar en atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio en polvo ya incluye esta característica.

Contacto: Para consultas y conocer los precios actualizados, llame al 91-897 46 16 o escriba a microkit@microkit.es

https://www.microkit.es/fic

 

E COLI-COLIFORMES MCC® +/- EN TUBO:

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E COLI-COLIFORMES MCC® +/- EN TUBO: NUEVO KIT DE DETECCIÓN Kit para la detección positiva o negativa

tubos MCC

Detección rápida E.coli: tubos MCC P/A para control de su presencia o ausencia en 1 gramo ó mililitro de muestra

La detección de E.coli en microbiología alimentaria e industrial es un proceso

necesario y, a menudo, poco sencillo. El Mercado Internacional es rico en kits que identifican E.coli, pero a partir de colonias que han tardado 1 ó 2 días en crecer previamente en medios de cultivo sólidos. Con ello, la confirmación de la presencia/ausencia de E.coli necesita de varias manipulaciones y, además viene a tardar 48-72 horas, tiempo que, a menudo, resulta excesivo en productos perecederos y que obliga a la industria a una fuerte inversión en stock de producto acabado (lotes de 2-3 días esperando el visto bueno microbiológico).

Presentamos el KIT DE DETECCION POSITIVOS/NEGATIVOS elaborado en España por MICROKIT que permite la confirmación de E.coli en las primeras 4‑24 horas a partir de la muestra inicial. Además, permite la detección de coliformes en el mismo tiempo, dato que, a menudo, también exige la legislación de nuestro país. Si necesita hacer recuento de E.coli, nos remitimos a nuestro Kit de Recuento E coli – MUG PLUS (Ver más adelante). También disponemos de viales de 2 ml con caldo MUG PLUS, para la técnica de Filtración de Membrana (FPL400), así como de los medios deshidratados con MUG en caldo y en agar: MICROKIT COLICULT MCC (DMT900-) ( con el que se elabora el Kit E coli MCC +/- en tubo) y MUG PLUS AGAR (DMT400-) (con el que se elabora el KIT de recuento E. coli-MUG-PLUS).

PRINCIPIO, EFECTIVIDAD Y LIMITACIONES

Adicionado a los medios de cultivo selectivos para coliformes, el compuesto fluorogénico 4‑metil‑umbeliferil‑beta‑D‑glucurónido (MUG) posibilita la detección directa de E.coli. El MUG, hidrolizado por el enzima beta‑glucuronidasa, presente en la mayor parte de las cepas de E.coli (97%), libera el compuesto 4‑metil‑umbeliferona, fuertemente fluorescente cuando se observa bajo luz ultravioleta de 366 nm (suministrada en cómoda y económica linterna por MICROKIT).

Todas las cepas analizadas por FENG & HARTMAN (1982, Fluorogenic Assay For Inmediate Confirmation of E.coli, App.Env.Microbiol., 43, 1320) de E.coli enteropatógenos han sido beta-glucuronidasa positivas, incluido el patógeno E.coli O124 que con el método clásico no se detecta, al ser anaerogénico.

Se ha definido a los coliformes como las enterobacterias capaces de fermentar la lactosa produciendo gas. Un método más moderno es el sustrato cromogénico X-Gal, que vira el medio a azul turquesa en presencia de coliformes.

Con el primer componente del kit, los tubos de E.coli MCC +/- Broth MUG, se analiza la fluorescencia (excelente dada la falta de color del medio), y la reacción de coliformes por viraje a azul tras la incubación. El medio no necesita temperatura selectiva de 44,5º durante 24‑48 horas, aunque puede usarse si se desea. Una sóla célula de E.coli queda detectada en menos de 24 horas. Además, se pueden obtener resultados positivos desde las 4 horas de incubación, dependiendo de la concentración inicial de E.coli.

No hay falsos negativos: Se detectan el 100% de las cepas de E.coli enterotoxigénicas, aunque no produzcan gas ni fermenten la lactosa y aunque sean sensibles a altas temperaturas de incubación y a medios selectivos. Se detectan las cepas anaerógenas, que representan el 5% de las cepas de E.coli aislado en alimentos. No interfiere la presencia de Proteus vulgaris, que en las técnicas conveccionales puede suprimir la producción de gas por E.coli. Tampoco interfiere la presencia de otras enterobacterias. Por tanto, NO HAY falsos negativos. El 3% de E.coli es beta-glucuronidasa negativo, por lo que no da fluorescencia, pero virará el medio a azul por ser coliformes.

La debilidad de algunas cepas de E.coli en la emisión de fluorescencia con MUG hace recomendable la utilización del MUG REVELATION REAGENT, que se incorpora en el kit como segundo componente.

Añadiendo una gota a los tubos de E.coli MCC +/- Broth, se realza la fluorescencia de los tubos positivos de forma sorprendente e inmediata.

Según VAIANI et.col. (1985, Identificazione di E.coli su terreni contenenti MUG, Comunicazione Convegno AMCLI Lombarda, Varenna, 21/6/1985), existen cepas de Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Salmonella y Shigella, capaces de dar falsos positivos con MUG, es decir, fluorescencia. Por ello deben confirmarse los caldos fluorescentes con la prueba del indol, incorporada en el kit como tercer componente. Sólo E.coli es indol positivo.

MODO DE EMPLEO

  1. Sembrar en un tubo de E.coli MCC +/- Broth:
  • 1 ml de la muestra líquida.
  • 1 gramo desmenuzado de la muestra sólida.
  • 1 membrana de filtración enrollada por la que se hayan filtrado 100‑250 ml de muestra de agua (VAC073)
  • 1 escobillón (MICROKIT VSN251) humedecido con agua destilada estéril (MICROKIT TPL001) con el que se haya barrido una superficie de trabajo de 25 cm cuadrados.
  • 1 colonia que deseemos identificar.

2. Incubar a 37 ºC durante 18-24 horas (sólo 4-24 h. si partimos de colonia).La turbidez y el viraje a azul son indicadoras de presencia de coliformes.

3. Leer en completa oscuridad con la luz de 366 nm, preferiblemente añadiendo al tubo una gota de MUG REVELATION REAGENT. Este reactivo debe añadirse SIEMPRE que no haya fluorescencia, y cuando la fluorescencia es dudosa.

La presencia de fluorescencia azulada demuestra la presencia de E.coli de forma presuntiva. Un tubo no inoculado sirve como control negativo de fluorescencia. Se adjunta un tubo control positivo de fluorescencia que, aunque no tiene E.coli, sino productos químicos fluorogénicos, no debe abrirse para evitar su contaminación.

La ausencia de fluorescencia tras 24 horas de incubación descarta la presencia de E.coli.

4. Confirmar añadiendo 0,5 ml del reactivo INDOL Kovacs.

La aparición de un anillo rojo cereza en superficie en unos segundos es prueba confirmativa de presencia de E.coli. Es el conjunto de los tres test (viraje de X-Gal a azul, MUG e INDOL) y no cada uno por separado, lo que hace de este kit el método más cómodo, rápido y fiable del mercado para la detección de E.coli.

linterna

PRESENTACION

Kit completo de detección +/- de E.coli (KMT099+):

  1. 20 tubos de E. coliMCC+/-Broth (TPL637).
  2. 1 frasco de 5 ml de MUG REVELATION REAGENT (KBH064).
  3. 1 frasco de 5 ml de reactivo INDOL (SDA056).
  4. 1 tubo de control positivo de fluorescencia (VMT056).
  5. 1 linterna ultravioleta de 366 nm (VMT050).

MATERIAL NECESARIO NO INCLUÍDO:

  • Ø Estufa a 35-37 ºC (VRP001), Linterna UVA para E.coli (VMT050).
  • ØZona aséptica: Lámpara de alcohol (VLM068) y Envirostéril (VJM002) si no se dispone de cabina de flujo laminar.
  • ØCepas de referencia, de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados. Como control positivo puede usar una cepa de E.coli (CRIOSTRAIN MKTA 25922).
  • ØParticipación en servicios intercomparativos como SEILA para validar los procedimientos y los operarios.

Si se desea, los componentes se proporcionan por separado. Los tubos MCC +/- Broth en pedidos de 200 unidades ó más, resultan mucho más económicos. La caducidad es de un año. La duración del fluorescente de luz ultravioleta de 366 nm es de 100 horas; en la práctica, y por cuestión de ahorro de pilas, de varios años.

Para más información no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/MCC-COLICULT-CHROMOFLUOROGENIC-BROTH.pdf?v=2023

 

AUTOCLAVE: PRODUCTOS AUXILIARES IV: VIALES DE ESPORAS PARA CONTROL BIOLÓGICO Y VALIDACIÓN DEL CICLO DEL AUTOCLAVE:

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Control Biológico de Ciclo de Autoclave: Viales EZ Test

Los Viales EZ Test son indicadores biológicos diseñados para garantizar el correcto funcionamiento del ciclo de autoclavado en la esterilización de medios de cultivo, material de laboratorio y conservas. Son especialmente útiles para comprobar que los autoclaves operan sin oscilaciones de temperatura peligrosas, según las normativas USP. A diferencia de otras marcas, permiten validar el ciclo del autoclave  específico de los medios  de  cultivo (y no sólo el del material fungible)viales control autoclave

Características Clave

Componente Especificación
Microorganismo Indicador Bacillus stearothermophilus ( esporas/ml), el más resistente al calor húmedo.
Medio Caldo de cultivo con indicador de de color lila (original).
Resistencia Mínima Las esporas resisten durante $\mathbf{5\,\text{minutos}$.
Esterilización Objetivo La población de esporas es destruida tras a .
Ventajas sobre otros Indicadores

 

  • Seguridad y Riesgo Cero: A diferencia de las ampollas, no contienen vidrio frágil que pueda romperse al caer, eliminando el riesgo de contaminación por esporas. El filtro del tapón también impide cualquier fuga.
  • Viraje Biológico: A diferencia de las tiras indicadoras químicas, el resultado se basa en la viabilidad del microorganismo (crecimiento vs. muerte), lo que ofrece una prueba más robusta de esterilización.
  • Fácil Manejo: Solo se recomienda para ciclos estándar de a .

MODO DE EMPLEO

1. Preparación y Autoclavado

  1. Colocación: Coloque dos viales (se recomienda duplicado) en la zona menos caliente del autoclave. Si el autoclave es grande (), use varios viales espaciados.
  2. Procesar: Proceda con el ciclo de autoclavado deseado.
  3. Control Negativo: Prepare un vial de control no autoclavado pero sí activado.

2. Activación e Incubación

  1. Activación: Tras el ciclo de autoclavado, apriete cada vial (incluido el control) hasta que el vidrio interno se rompa, liberando el medio de cultivo.
  2. Incubación:
    • Incube todos los viales en posición vertical a .
    • Tiempo: $\mathbf{4-48\,\text{horas}$.

3. Interpretación de Resultados

Vial Resultado Correcto (Esterilización ) Resultado Incorrecto (Fallo ✖)
Vial Autoclavado Permanece lila (color original). Gira a amarillo y se enturbia (crecimiento de esporas supervivientes).
Vial Control Debe virar a amarillo (confirma la viabilidad inicial de las esporas). Permanece lila (Test no válido; esporas caducadas o muertas prematuramente).

Precauciones y Almacenamiento

  • Temperatura de Incubación: No incubar a , ya que el Bacillus stearothermophilus no crece a esa temperatura.
  • Posición de Incubación: No incubar más de 48 horas ni en posición horizontal para evitar la evaporación del caldo a través del filtro del tapón.
  • Almacenamiento: Mantener a . Desechar cualquier vial que esté amarillo o turbio de origen.
  • Desecho: Elimine los viales usados mediante un autoclavado final de, al menos, $\mathbf{15\,\text{minutos}$ a $\mathbf{121\,^\circ\text{C}$.
  • Control Físico: Se recomienda controlar en paralelo con un termómetro de máxima, ya que muchos fallos del autoclave se deben a no alcanzar los .

Opciones Adicionales

  • Viales para Ciclos Suaves: También están disponibles viales con esporas de Bacillus subtilis (caldo color naranja) para validar ciclos de autoclave menos agresivos (ej. durante ), ideales para proteger azúcares y vitaminas en medios de cultivo.
  • Otros Usos: Existen viales equivalentes para control de esterilización por óxido de etileno (Ref. VG24802).

Formatos: Cajas de 20 unidades (Ref. VMT292-). Incubador disponible (Ref. 573714).

https://www.microkit.es/fichas/AUTOCLAVE-PRODUCTOS-AUXILIARES.pdf

Para más información y precios actualizados no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

M-IDENT®-Bacillus cereus

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Kit de Confirmación de Bacillus cereus en Alimentos

Referencia: Kit de 6 Test.

Este kit está diseñado para la confirmación de colonias sospechosas de Bacillus cereus aisladas en Agar Mossel, siguiendo los criterios de la Norma ISO 7932:1998.BACILUS CEREUS

Ventaja Principal: Extremadamente larga caducidad, de 1 año asegurado.

Contenido del Kit (Para 6 Pruebas)

El kit proporciona todos los medios y reactivos necesarios para realizar 6 pruebas completas de confirmación:

Componente Tipo de Medio Formato Cantidad Observaciones
1. Agar DTA-Polimixina Sólido inclinado Tubo violeta 6 Para la prueba de /crecimiento.
2. Caldo MRVP Líquido Tubo incoloro-paja 6 Para la prueba Voges-Proskauer ().
3. Medio Nitratos-Movilidad Semisólido Tubo incoloro 6 Para las pruebas de Nitratos y Movilidad.
4. Reactivos Voges-Proskauer () Reactivos 1 + 2 Goteros ($\mathbf{5\,\text{ml}$ c/u) 1 kit Irritante.
5. Reactivos de Nitratos Reactivos Nitratos + Goteros ($\mathbf{5\,\text{ml}$ c/u) 1 kit Irritante.
Componentes NO Incluidos

El kit no incluye cepas de control ( o ) ni la participación en servicios intercomparativos () para la validación de procedimientos y operarios.

MODO DE EMPLEO e Interpretación

1. Inoculación e Incubación

  1. Muestra: Utilice una porción de una colonia pura y sospechosa de B. cereus procedente de Agar Mossel.
  2. Inoculación:
    • DTA-Polimixina: Inocular en estría.
    • MRVP: Inocular por dilución.
    • Nitratos-Movilidad: Inocular por picadura (punción central).
  3. Incubación: Incubar los tres tubos a durante en condiciones aerobias.

2. Lectura e Interpretación

Después de la incubación, se añaden los reactivos para obtener los resultados:

Prueba Medios / Reactivos Adición de Reactivo Resultado Positivo (B. cereus) Observación
Glucosa (DTA) DTA-Polimixina N/A Viraje de violeta a amarillo Crecimiento y acidificación del medio.
Voges-Proskauer () Caldo MRVP $\mathbf{0.5\,\text{ml}$ de VP 1 + 2 Viraje a rosa Observar $\mathbf{1\,\text{hora}$ después de la adición.
Nitratos Nitratos-Movilidad $\mathbf{0.5\,\text{ml}$ de Nitratos + Viraje a rojo Observar $\mathbf{15\,\text{minutos}$ después de la adición.
Movilidad Nitratos-Movilidad N/A Crecimiento difuso desde la línea de picadura. Observación visual directa.

Criterios de Confirmación (ISO 7932:1998 Adaptada)

Bacillus cereus se confirma si la colonia sospechosa cumple simultáneamente los siguientes cuatro criterios:

  1. Crecimiento en DTA-Polimixina con viraje del medio de violeta a amarillo.
  2. Test VP positivo (viraje a rosa).
  3. Test de Nitratos positivo (viraje a rojo).
  4. Movilidad positiva (crecimiento difuso a partir de la picadura).

Nota: Se utiliza la versión adaptada, ya que la versión más moderna clasifica los resultados como «presuntos B. cereus».

Control de Calidad del Kit

Es prudente repetir el Control de Calidad en su laboratorio, especialmente después de períodos sin uso (más de 3 meses), desinfección del laboratorio, almacenamiento a altas temperaturas o si el aspecto de los tubos cambia antes de la caducidad teórica.

Control de Crecimiento (24 h a en aerobiosis) con Bacillus cereus (MKTA 10876):

Medio / Prueba Resultado Esperado
DTA-Polimixina Viraje a amarillo-crema.
MRVP Broth () Crecimiento, y viraje a rosa tras añadir los reactivos .
Nitratos-Movilidad Crecimiento con movilidad/difusión y reducción del nitrato (viraje a rojo tras añadir reactivos de Nitratos).

Control de Calidad visual de los Componentes 

  • Tubos Preparados: Estériles, listos para su uso.
  • Kits de Reactivos ( y Nitratos): No estériles, IRRITANTES.
  • Conservación: Seguir las condiciones de almacenamiento para cada componente.
  • Movilidad/Nitratos: Semisólido, incoloro.
  • MRVP: Líquido, incoloro-paja.
  • DTA-Polimixina: Sólido inclinado, violeta-púrpura.

Para más información y precios actualizados no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/BACILLUS-CEREUS-M-IDENT-KIT-ISO-7932-UE-2-2019-ALIMENTOS.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/10-Bacillus-monograf–a.pdf

M-IDENT®-Clostridium perfringens

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Kit de confirmación de Clostridium perfringens en aguas por  Filtración de Membrana s/Norma ISO/CD 6461-2:2002 y en alimentos según FDA.

Confirmación C.perfringens mediante M-Ident ISO de MICROKIT: Lactosa-Gelatina- Nitratos-Movilidad, sin reactivos cancerígenos, Caducidad 1 año

 CONTROL DE CALIDAD DEL KIT

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

  • TUBOS PREPARADOS BUFFERED NITRATE-MOTILITY MEDIUM: m-ident clostridiumEstéril, crema, semisólido
  • TUBOS PREPARADOS LACTOSE-GELATIN MEDIUM: Estéril,  rojo, gelatinoso

 

 

 

 

 

CONTROL DE CRECIMIENTO a 37°C durante 24 horas, en anaerobiosis:

En el tubo crema de Buffered Nitrate-Motility Medium, Clostridium perfringens MKTA 13124 (=MKTN 8237), crece sin difusión/movilidad y reduce el nitrato a nitrito.

En el tubo rojo de Lactose-Gelatin Medium, Clostridium perfringens MKTA 13124 (=MKTN 8237),  crece con viraje del medio a amarillo y licúa la gelatina.

PRESENTACION:

KIT DE 9 TEST  para la confirmación de colonias sospechosas de Cl.perfringens:

  • 9 tubos 10 ml color crema de Buffered Nitrate-Motility Medium
  • 9 tubos 10 ml color rojo de Lactose-Gelatin Medium
  • 1 kit de Reactivos de Nitratos A + B de 5 ml cada uno, suficiente para las 9 pruebas

EL KIT NO INCLUYE:

  • Ø Zinc en polvo (solicítenos SRO001)
  • Ø Cepas de reserva (CRIOSTRAINS), de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados  inadecuados. 
  • Ø Participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, SEILALIMENTOS o SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inmediatamente antes de su uso, regenerar un tubo preparado de cada uno de los dos medios, hirviéndolos 15 minutos para eliminar su oxigenación. Enfriar rápidamente a 70-80°C o mejor hasta su solidificación.

  1. Inocular la colonia sospechosa, procedente de TSC o del medio elegido, en picadura, en el tubo crema de Buffered Nitrate-Motility Medium. Incubar a 36 ± 2 °C durante 21 ± 3 horas, en anaerobiosis. Observar la movilidad, positiva si hay crecimiento difuso desde la línea de picadura. Añadir 0,5 ml de Reactivo de Nitratos A y otro tanto de Reactivo de Nitratos B. Observar la reducción de Nitrato a Nitrito, que se considera positiva cuando hay viraje a rosa-rojo antes de 15 minutos tras añadir los reactivos de Nitratos A y B. Si no hay viraje, añadir un poco de Zinc en polvo (SRO001), esperar 10 minutos y considerar tambien positiva la prueba si TAMPOCO hay viraje a rosa-rojo.
  2. Al mismo tiempo que se inocula el tubo crema de Buffered Nitrate-Motility Medium, inocular otra colonia sospechosa,  procedente de TSC o del medio elegido, en picadura, en el tubo rojo de Lactose-Gelatin Medium.

Incubar a 36 ± 2 °C durante 21 ± 3 horas, en anaerobiosis. Observar la producción de ácido por viraje a amarillo. Enfriar los tubos en una nevera a 5 ± 3°C durante 1-2 horas y comprobar si hay liquefacción de la gelatina. Si han solidificado,  reincubar a 36 ± 2°C durante 21 ± 3 horas y volver a comprobar si hay liquefacción de la gelatina.

Se considera Clostridium perfringens, según Norma ISO/CD 6461-2:2002,  toda colonia negra, marrón o gris procedente de TSC Agar, no móvil en el medio crema Buffered Nitrate-Motility Medium, que reduce el nitrato a nitrito en el medio Buffered Nitrate-Motility Medium, que produce ácido a partir de la lactosa en el medio rojo Lactose-Gelatin Medium y que licúa la gelatina en el medio rojo Lactose-Gelatin Medium en menos de 44 ± 4 horas.

Para más información no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/CL-PERFRINGENS-M-IDENT-ISO-6461-UE-2-2019.pdf

 

ANTISUEROS PARA ANTÍGENOS COLONIALES

4 respuestas

ANTISUEROS CONFIRMACIÓN COLONIAS : IDENTIFIQUE Y SEROGRUPE/SEROTIPE LAS COLONIAS DE SALMONELLA, SHIGELLA, VIBRIO, E.COLI…

ANTISUEROS PARA ANTÍGENOS COLONIALES: Salmonella, E.Coli, Vibrio, Shigella.

INTRODUCCION

Para uso en identificaciones inmunológicas de los miembros del género Salmonella (o Escherichia coli, Vibrio cholerae, Shigella, para los que también sirve lo dicho a partir de aquí). Basados en el test de aglutinación bacteriana.

El género Salmonella contiene una amplia variedad de especies patógenas que afectan al hombre yantisuero a los animales en todo el mundo. Sin embargo, la identificación completa de Salmonella requiere aislamiento en cultivos, caracterización bioquímica y serotipado.

Los antisueros PROLAB y MUREX polivalentes se preparan mezclando el antisuero no absorbido de modo que den fuertes reacciones de aglutinación con las cepas correspondientes. Estos antisueros polivalentes sirven para guiar el diagnóstico, pero la identificación del grupo sólo puede realizarse con los antisueros monovalentes somáticos (O ó Vi) adicionales.

El serotipo de las Salmonella tambien se determina con el uso de antisueros polivalentes flagelares (H) en test de aglutinación, al contener éstos los anticuerpos contra antígenos flagelares asociados con el grupo somático del aislamiento. Los antisueros monovalentes flagelares (H) se utilizan para establecer la fórmula antigénica del aislamiento.

OTROS DATOS

Todos estos antisueros se fabrican en conejos, de acuerdo con la WHO (World Health Organization) utilizando cultivos específicos de referencia y absorbidos por otros cultivos heteroespecíficos, para eliminar anticuerpos que reaccionan con antígenos homólogos.

El principio utilizado es la mezcla del microorganismo sospechoso con el antisuero que contiene aglutininas específicas de Salmonella. Las bacterias aglutinarán («CLUMPING») en presencia del antisuero homólogo y no aglutinarán en presencia de otros antisueros heterólogos.

Los antisueros contienen 0,01% de thiomerosal como conservante y se comercializan en goteros de 2 ó 3 ml listos para su empleo.

La estabilidad es de hasta cerca de dos años desde fabricación, y viene marcada en cada gotero. Éste debe mantenerse bien cerrado, al abrigo de la luz y a 2-5°C. Si se enturbia es porque algunos microorganismos han sido capaces de crecer con los antígenos como fuente de alimentación y en presencia del conservante. En tal inusual caso, filtrar de forma aséptica por 0,2 µm para recuperar la esterilidad y controlar la eficacia con cepas de referencia.

Más de 100 referencias disponibles (ver catálogo actualizado de precios MICROKIT)

MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO

  • Portaobjetos de vidrio desengrasados
  • Pipetas
  • Solución Salina (0,85% ClNa en agua) (FPL112)
  • Tubos
  • Asas de siembra de plástico o palillos de madera
  • Cepas de referencia CRIOSTRAINS, de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
  • Participación en servicios intercomparativos como SEILA para validar los procedimientos y los operarios.

PREPARACION DE LAS MUESTRAS

Las colonias aisladas en medios selectivos o diferenciales para Enterobacterias, que tengan las antisuero2características típicas de Salmonella se clasifican clásicamente con screening de pruebas bioquímicas. Si los antisueros que se van a usar son flagelares (H) es mejor partir de medios no agarizados, donde las bacterias hayan desarrollado mejor sus flagelos.

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

 A-Identificación de antígenos somáticos O y Vi en porta

1- Añada dos gotas separadas de solución salina en un portaobjetos de vidrio bien limpio.

2- Mezcle con un palillo o asa, sendas colonias de no más de 24 horas, para obtener una suspensión homogénea en cada gota.

3- Añada una gota de antisuero cerca de una de las suspensiones, sin tocarla para no contaminar el gotero. En la otra suspensión añada una gota de solución salina, que servirá como control negativo.

4- Mezcle la primera suspensión con la gota de antisuero, mediante un palillo.

5- Agite en forma de vaivén el porta durante 1 minuto. Se consideran positivos los resultados cuando se forman, bajo condiciones normales de buena luz, gránulos en la gota con antisuero y no se forman en la gota control.

 B-Identificación de antígenos flagelares H en porta

El procedimiento es el mismo que en el caso anterior, con la única salvedad de que se utilizará como muestra la fase líquida de un medio semisólido o de un agar inclinado. Si se usa a partir de un medio líquido, no hay necesidad de utilizar solución salina.

 C-Identificación de antígenos somáticos (O), Vi y flagelares (H) en tubo

1- Prepare una suspensión densa de la bacteria en solución salina. Hervir 10 minutos para la identificación con antisueros O o Vi. Prepare caldos de cultivo para la identificación de antígenos H añadiendo 0,5% de formol en solución salina, y diluya hasta alcanzar una concentración ligera, alrededor de 10 E9 bacterias/ml.

2- Antes de usar, diluya los antisueros en solución salina a razón 1:5.

3- Añada una o dos gotas de solución salina en un tubo de vidrio y otro tanto del suero diluido en otro tubo. Los tubos serán de fondo redondo, de 9 x 85 mm aproximadamente.

4- Añada el mismo volumen de la suspensión bacteriana a cada uno de los dos tubos.

5- Incubar en  un baño de agua a 51°C durante 2 horas, en el caso de identificación flagelar, y durante 5-8 horas en el caso de identificación somática o del antígeno Vi.

6- Observar la aglutinación en los tubos, contra un fondo negro y bajo luz intensa. Los precipitados o aclaramientos del líquido no son positivos. Considerar positiva sólo la aparición de gránulos

7- Remitirse al esquema de Kauffman-White (1.966, The bacetriology of Enterobacteriaceae. The Williams & Wilkins Co., Baltimore) para identificar el serotipo.

LIMITACIONES Y PRECAUCIONES

1- La muestra puede contener microorganismos patógenos y debe manejarse como material potencialmente infeccioso.

2- Un control salino debe ser incluido en cada prueba para asegurar la especificidad de la reacción.

3- Ciertas cepas sufren autoaglutinación en el test de porta. Estos falsos positivos suelen aglutinar en el control de solución salina.

4- Se recomienda chequear la correcta actividad del antisuero con cepas control de referencia, de estructura antigénica conocida.

NOTAS SOBRE LOS ANTISUEROS DE VIBRIO

El antisuero polivalente se usará en test en porta, los monovalentes se pueden usar, además, en test en tubo, aunque en porta dan menos reacciones cruzadas entre ambos. No se pueden distinguir las variedades El Tor de otros Vibrio cholerae. El conservante utilizado es 0,5% de fenol.

https://www.microkit.es/fichas/ANTISUEROS-para-ANTIGENOS-COLONIALES.pdf

https://www.microkit.es/fichas/Antisueros-Salmonella-tablas.pdf

Para consultas o aclaraciones sobre éste o cualquiera de nuestros productos no dude en ponerse en contacto con nosotros en el número de teléfono 91- 897 46 16 o a través del correo electrónico microkit@microkit.es.