Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

LACTOBACILLUS AGAR CROMOKIT

2 respuestas

El nuevo medio CROMOKIT Lactobacillus Agar permite obtener resultados mucho más fiables con respecto a los innumerables falsos positivos propios del MRS Agar, como se desprende de los magníficos resultados obtenidos por los participantes en el inter Seilalimentos plus desde su lanzamiento en 2022.

Lactobacillus Agar CROMOKIT elimina los falsos positivos propios del MRS Agar, ya que las diana crecen con colonias verdes

Ya todos habíamos tirado la toalla en cuanto a los aerobios que son capaces de crecer en MRS y dan lugar a falsos positivos, aumentando a menudo 2 y 3 log el recuento real de los lactobacilos.

Desde que algunos participantes han cambiado al nuevo medio cromogénico CROMOKIT Lactobacillus Agar, se ha podido poner de manifiesto que el valor obtenido por ellos es clavado al valor inóculo de Lactobacilos, no como sucede con el de los usuarios de MRS Agar, que siguen teniendo que descontar del recuento obtenido en el mismo, el recuento de aerobios mesófilos en PCA (aunque esta regla funciona sólo algunas veces).

CROMOKIT Lactobacillus Agar permite la detección diferencial de Lactobacilos, porque crecen cion colonias verdes, mientras otros Lactobacillos crecen blancos y la inmensa mayoría de los aerobios mesófilos crecen con colonias incoloras o crema, o no crecen en este medio.

COMPOSICIÓN

 Triptona                                    10,0

Extracto de levadura                 5,0

Dihidrogenofosfato de Potasio           6,0

Citrato  diamónico                    2,0

Acetato de Sodio                      15,0

Sulfato de Magnesio anhidro    0,281

Hierro Sulfato                      0,034

Sulfato de Manganeso anhidro           0,011

Glucosa                                    20,0

Polisorbato Tween 80               1,0

Agar-Agar                                 12,0

Mezcla cromogénica                 c.s.

(Fórmula en g/L)

Puede añadir suplementos para ajustar la fórmula a sus requerimientos específicos

pH final: ajustar a  5,8 ± 0.2

PREPARACIÓN

Disolver 71,3 g de medio en 1 L de agua bidestilada. Remover para homogeneizar, calentando hasta ebullición sin parar de remover. AUTOCLAVAR a 121ºC durante 15 minutos. Enfriar rápidamente en un baño a 45-50ºC, agitando suavemente.  No volver a fundir, dispensar en placas Petri estériles que contengan 1 mL de muestra y su serie de diluciones decimales y dejar solidificar. El color del medio es crema.

PRESENTACIÓN:  MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT506)

¡SIN LOS FALSOS POSITIVOS TAN FRECUENTES EN MRS AGAR, QUE A MENUDO SUPONEN MÁS DEL 90% DEL RECUENTO FALSEADO!

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo crema

PREPARADO: Estéril, crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a 35°C aproximadamente, en anaerobiosis:

Lactobacillus acidophilus MKTA 314, Correcto, colonias verdes o verde-azuladas

L. casei  MKTA 3932, Correcto, colonias blancas

Lactobacillus bulgaricus MKTD 20081, Correcto, colonias blancas

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

Preparar la muestra y su serie de diluciones decimales en Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing Water, MRS Broth u otro medio adecuado.

Sembrar en superficie sobre la placa preparada 0,1 mL de cada dilución, repartiendo con asa Digralsky. Tambien puede sembrar 1 mL de cada dilución en masa, cuidando que el medio esté a 45-47ºC para no destruir las células diana; pero las colonias se verán mejor en siembra en superficie.

Tras dejar que el medio absorba la muestra, invertir las placas e incubarlas a 35ºC en jarra o en bolsa de anaerobiosis (KKT001) durante 72h. Realizar el recuento de las colonias verdes (L.acidophilus) y blancas (otros lactobacilos). También pueden crecer enterococos, pediococos y especies de Leuconostoc.

NOTA

Aunque el medio es ideal para recuento de Lactobacillus acidophilus en yogurt, otros productos lácteos fermentados y en probióticos, también resulta de mayor ayuda que el MRS Agar u otros agares clásicos para recuento selectivo de Lactobacilos y acidolácticas en general, en cualquier tipo de muestra ácida.

https://www.microkit.es/fichas-tecnicas-medios-de-cultivo.htm

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

Retiradas de mercado por problemas microbiológicos

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Seguridad alimentaria. Seguridad cosmética. Potabilidad del agua.

Seguridad alimentaria, seguridad cosmética, agua potable… eso es lo que realmente pide la legislación! ¡Porque es lo que de verdad importa!

Y no protocolos cojos ni medios de cultivo y kits que se han quedado obsoletos al necesitar tantos años para entrar en Norma ISO, aunque hayan sido finalmente bendecidos por esta parafernalia ISO

¿Sabe cuántas retiradas de mercado de productos fabricados en nuestro país existen por problemas microbiológicos? Problemas que no han sido detectados por los fabricantes?

Y a  menudo no es culpa de una supuesta negligencia del fabricante, sino de los métodos de análisis que les imponen en esa búsqueda de seguridad alimentaria y cosmética

Son muchas más retiradas de las que nos enteramos por los medios de comunicación habituales (prensa, radio, televisión, internet…)

Existen dos páginas oficiales especializadas en informar al consumidor de este tipo de problemas de seguridad alimentaria y cosmética:

Para alimentos:

https://www.aesan.gob.es/AECOSAN/web/seguridad_alimentaria/subseccion/otras_alertas_alimentarias.htm

Para cosméticos, medicamentos y otros productos sanitarios:

https://www.aemps.gob.es/comunicacion/notas-informativas-cosmeticos-y-cuidado-personal/

(aparte de la específica de medicamentos)

¿Por qué hay retiradas de mercado?

Muchos son los fabricantes que creen que a ellos no les tocará, porque con seguir las Normas ISO de microbiología, creen que están salvados.

Y creen que con salir airosos de las inspecciones de Sanidad, ya está todo resuelto.

Sin sospechar que las autoridades sanitarias, además, toman muestras del mercado para analizarlas en aras a esa seguridad alimentaria y cosmética.

Y lamentablemente, en estas webs puede ver claramente que no es todo de color de rosa: y año tras año, se retiran productos e incluso se cierran empresas que pensaban que «aquí no pasa nada».

Incluso grandes marcas.

Porque las autoridades sanitarias han detectado problemas en productos del mercado, que el fabricante y sus laboratorios no supieron detectar.

En MICROKIT tenemos un serio compromiso con nuestros clientes:

Tenerlos bien informados sobre lo que les exige la legislación, para que puedan conseguir en sus productos esa seguridad alimentaria y cosmética

Por eso, aparte de diseñar y fabricar medios de cultivo y kits de análisis,  impartimos cursos, realizamos consultorías, enviamos emails masivos aunque luego los servidores nos califiquen como spam…

— gastamos una fortuna en mailings impresos e incluso tenemos a su disposición una dirección email de consultas técnicas «consultastecnicas@microkit.es» que contesta nuestro experto en diseño de medios, diseño de métodos alternativos y coordinación de ensayos intercomparativos.

No sólo para estos dos sectores (alimentario y cosmético), también para aguas de consumo humano.

Nuestras tres especialidades (aparte de la microbiología ambiental)

Ser cliente de MICROKIT aporta una seria ventaja sobre el resto de fabricantes de medios de cultivo y kits:

nosotros no queremos que sigan procedimientos anticuados, ni que usen productos obsoletos, sólo porque lleven sellos «ISO».

Queremos que lo haga mucho mejor que eso. Con métodos actuales, no de hace 10 ó 20 años.

Mantenemos un continuo envío de comunicaciones y  monografías que alertan a nuestros clientes sobre parámetros microbiológicos que no están analizando y deben analizar.

Los más frecuentes:

-Shigella spp. y Bacillus cereus en alimentos; ¡es falso que Shigella ya no se deba analizar!

-Burkholderia cepacia, Pluralibacter gergoviae y otros 8 patógenos que provocan retiradas de mercado de cosméticos y no son «los 4 de siempre»;

-El tema de los colífagos en aguas de consumo humano, que llevamos promoviendo desde 2010 aunque la legislación no lo haya empezado a exigir hasta enero de 2023.

También sobre métodos que detectan más adecuadamente que los métodos oficiales.

Y sobre medios de cultivo y kits que eliminan la incertidumbre en los resultados de sus análisis.

Más allá

No nos conformamos con ser su más cordial proveedor de buenos productos y servicios, e interactuamos hasta la saciedad para que a nuestros estimados clientes no les suceda nada malo en la materia que trabajamos: la microbiología.

Por eso nos sentimos tan orgullosos de nuestro trabajo, que casi siempre supone «nadar contra corriente»

y ser considerados «los rebeldes de la microbiología» que no aceptan la cadena ISO como método oficial.

Nuestro trabajo es de la máxima importancia, sobre todo porque nadie más lo hace, ni nadie lo va a querer hacer.

Haber sido durante casi 30 años diseñadores de medios, kits y cepas,

y a la vez, coordinadores de servicios intercomparativos,

nos ha colocado en un lugar privilegiado que los demás fabricantes de estos productos no pueden ni imaginar.

Porque sabemos qué métodos y qué medios y kits funcionan mejor y cuáles no,

sean métodos, medios y kits oficiales, o no.

Conocemos perfectamente cuáles son los puntos críticos en el análisis de cada microorganismo.

Y los hemos resuelto.

De ahí diseñamos productos tan espectaculares como el CUP12A, el Quanti-P/A Clostricult,  el Rapid Y&M 36h Agar, el Maxim 18h TPC cromogenic Agar,

el Vibrio cholerae MPT Magic Broth, los kits P/A, el Salmoquick y Listeriquick,  nuestras cepas cuantitativas, las DryPlates, el Seilalimentos-efecto matriz…

Y otro sinfín de productos que no encontrará en ningún otro proveedor,

porque son las soluciones específicas de los problemas que sólo nosotros hemos detectado gracias a los errores que hemos visto en la intercomparación de laboratorios.

Productos excelentes que los lobbies quieren desprestigiar exigiendo validaciones millonarias que no son asumibles más que por las propias multinacionales que las promueven.

Contra corriente

Y ahora, ¡nos quieren imponer certificaciones que se han copiado descaradamente de nuestros primeros informes intercomparativos de hace 20 años (ya obsoletos)!

No vamos a pasar por ese aro, no nos da la gana, nuestros clientes merecen lo mejor, la salud pública también y nosotros también.

Afortunadamente muchos clientes nos apoyan, incluso muchos se ven entre la espada y la pared de la ortodoxia legislativa…

y aún conservan tal profesionalidad, que deciden seguir los protocolos oficiales que les imponen…

…pero ADEMAS los de MICROKIT, porque ven que son los que de verdad son fiables,

y no quieren obtener falsos negativos ni seguir «la moda de la ceguera ISO».

Esa es la importancia de nuestra labor en la prevención de las toxiinfecciones,

nos  consideramos una parte muy importante de la cadena de la medicina preventiva, sin la cual ésta quedaría seriamente coja.

Y desde luego lo ultimo que somos es una financiera sin alma que lo único que busca es aumentar los beneficios de sus socios a costa de lo que sea,

de malasesorar e incluso de mentir a sus clientes.

Si todavía no es cliente nuestro, considérenos en buena parte como una ONG sin ánimo de lucro

(porque prestamos tantas soluciones que nadie más contempla, ni se plantea contemplar, y nadie nos ha ayudado nunca a financiar este I+D que a todos beneficia).

Así es la realidad

Si nos ve con estos nuevos ojos, quizá querrá pedirnos algo de lo que nos caracteriza, para probarlo, como su propia aportación desinteresada a ese I+D gratuito que no tiene igual.

Y así podrá sorprenderse al confirmar que hay métodos y productos mucho mejores que los que  actualmente llevan la etiqueta de «oficiales».

Y si no es así, entonces ¿por qué sigue habiendo tantas retiradas de mercado por problemas microbiológicos?

¿De verdad cree que es porque todos esos fabricantes, cuyas fábricas les cerraron, o cuyos productos y marcas les destruyeron, eran unos inútiles o unos vagos?

¿O será que muchos de ellos acabaron cayendo en la trampa de analizar o «enviar a analizar a mengano» tal y como marcaba la moda ISO, y conformarse con esa moda absurda?

https://www.microkit.es/monograficos/15-Aguas-de-uso-cosm–tico-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/23-Monograf–a-CURSO-DE-MICROBIOLOG–A-COSM–TICA-EN-LA-TERCERA-D–CADA-DEL-SIGLO-XXI.pdf

 

 

INTER ALIMENTOS SEILALIMENTOS-PLUS, MUCHO MAS QUE UN INTER

INTER ALIMENTOS Y MUCHO MÁS

Presentamos el primer servicio  intercomparativo  microbiológico  de alimentos diseñado, elaborado y coordinado en España, desde Julio de 1998, bajo Norma UNE 66543-1:1999 IN sobre Ensayos de Aptitud por Intercomparación de Laboratorios, y según las directrices de las guías ENAC sobre participación en programas de intercomparación.

Y ¿cómo no ha de seguir la ISO 17043 sobre ensayos de aptitud, cuando ésta no deja de ser un calco de nuestros informes de hace dos décadas?

Todo ello coordinado por  una empresa líder en diseño y fabricación de medios y kits, cuyo alcance de certificación internacional ISO 9001 los incluye y avala, garantizando su buen hacer en cada auditoría anual de AENOR-TÜV Rheinland-SGS.

Y lo mismo por parte de auditores externos para la ISO 17043.

Laboratorios MICROKIT acepta el reto de mantener este servicio desde 2023, cuando la tendencia del mercado involuciona a seguir con servicios e informes de estadística obsoleta (ISO 17043: z-scores, test de Grubs…) nacidos hace casi 3 décadas, que solo sirven para dar una falsa sensación de que todo está bien analizado, cuando no es así.

 

Más allá de un inter más, por muy veterano que sea

El nivel de calidad de los laboratorios de autocontrol del siglo XXI requería una evolución en el planteamiento de los inter, y eso es lo que ofrece en la actualidad, SEILA: no es solo otro inter, es además el único inter que:

  1. Compara métodos y medios, concluyendo tendencias de los que se demuestran más efectivos, lo que permite al laboratorio de autocontrol mantener su razón de ser: usar los métodos más fiables y que a su vez liberan más rápidamente los lotes fabricados, sin dejarse llevar por las mafias de certificación/validación creadas por los mayores proveedores de laboratorio.
  2.  Compara detecciones y recuentos con herramientas mucho más serias que las z-scores y no excluye laboratorios que lo hacen mejor que la media solo porque el test de Grubs lo indique. Aplicamos el mismo criterio que emplea la norma ISO 11133-2 en cuanto a fertilidad de medios, pero aquí en la exactitud y precisión de los resultados de cada laboratorio respecto al valor consensuado medio y además teniendo en cuenta el valor inóculo. Lo cual nos evita caer en la misma trampa de mediocridad de las z-scores y de exclusión de laboratorios que trabajan mejor que la media.
  3. Somos los primeros en ayudarle a conocer el efecto matriz de sus fabricados y así poder corregirlo, ya que en cada ronda, añadimos a la muestra (y su réplica), otros tres inóculos ciegos para que pueda añadirlos a tres de sus propios fabricados y comprobar si su método es capaz de detectar/enumerar tan adecuadamente como lo hace con la matriz común de cada ronda,

Logros de este INTER ALIMENTOS

SEILA ha permitido ya a más de 100 laboratorios re-VALIDAR  en continuo sus procedimientos de análisis microbiológicos y demostrar de rutina que la calidad de sus análisis está correctamente controlada de forma externa e independiente.

Este servicio busca la presencia (con o sin recuento, a gusto del usuario) o la ausencia de los siguientes microorganismos, de los que cada laboratorio analizará sólo los que le interesen (sin rebaja de coste, al ser el inóculo e informe comunes para todos los participantes):

1) Salmonella spp.

2) Bacillus cereus

3) Escherichia coli (cualquier cepa  no-VTEC)

4) Listeria monocytogenes

5) Clostridium perfringens

6) Staphylococcus aureus (coagulasa +)

7) Recuento de Hongos (levaduras y mohos)

8) Recuento de Acidolácticas (lactobacilos y demás)

9) Recuento de Aerobios mesófilos

10) Recuento de Enterobacterias

11) Recuento de Coliformes

SE INCLUYEN TAMBIEN CEPAS INTERFERENTES Y NATIVAS (SALVAJES) PARA OPTIMIZAR LA REALIDAD

 

Más logros de este INTER ALIMENTOS

Gracias a una estabilidad y a una homogeneidad sin precedentes del inóculo (cepas en lentículas cuantitativas deshidratadas), el día de inicio del análisis no es una fecha crítica para la obtención de resultados equivalentes, como sucede en la mayoría de inters.

Ni siquiera la temperatura y tiempo de transporte son críticos, siempre que el envío llegue antes de la fecha de caducidad de la ronda.

 

Este servicio desde 2023 es de 3 rondas al año (Marzo, Junio y Octubre)

Devuelva sus resultados en dicha tabla actualizada, adjunta a cada envío, antes del 1 de Mayo, del 1 de Septiembre y del 1 de Diciembre, de modo que tiene nada menos que casi 2 meses para realizar el análisis (por si está de vacaciones, baja, acúmulo de trabajo…).

Poco después (aprox. en otro mes y medio)  recibirá confidencialmente EN SU EMAIL el completo informe con la valoración de sus resultados con respecto a los propios de control de calidad interno del laboratorio piloto (valor inóculo) y a los de los demás participantes (valor consensuado), con los comentarios pertinentes que se deriven desde nuestro punto de vista técnico.

Como mejora respecto a otros servicios, además recibirá las No Conformidades detectadas en su método (si nos lo envió), con lista de comprobación para cada parámetro y con tablas comparativas de métodos y medios, que facilitan una visión global de la sensibilidad de cada uno de ellos, así como la calificación global del rendimiento de su laboratorio.

Los resultados de los inóculos ciegos en sus propias matrices sólo son útiles para Ud, pero si nos los adjunta, los añadiremos en un anexo del informe, para que le sirvan de prueba ante auditores e inspectores y pueda demostrar que su laboratorio está muy por encima de la media, al tener en cuenta el estudio del efecto matriz de sus propias muestras.

REFERENCIA SMT003

El precio por muestra de este INTER ALIMENTOS incluye hasta 11 parámetros, la muestra con su réplica (y sus dos inóculos ciegos) y 3 inóculos ciegos adicionales para sus propios fabricados!

Contenido: Con las tablas actualizadas de presentación de resultados, en el folleto de instrucciones, recibirá 3 artículos:

100 g de Matriz cruda pero estéril (esterilizada por rayos gamma para evitar interferencias imprevisibles por parte de una flora inicial desconocida). Y su réplica. Esto le permite, desde 2016, estudiar su repetitividad intralaboratorial En cada laboratorio participante, una muestra debería analizarla un  analista y la otra otro analista; en caso de solo tener un analista para microbiología, el mismo debería analizar una muestra un día y la otra muestra otro día. Y enviar ambas tablas de resultados.

Tubo de inóculo con los microorganismos inoculados en forma de lentículas cuantitativas desecadas, con estabilidad y homogeneidad contrastadas, recuentos y precisión conocidas y certificadas  (almacenar  a -20/+10ºC hasta comenzar el análisis). 5 tubos idénticos con el mismo inóculo mixto: 2 para el inter y 3 para 3 de sus propias matrices

Y tubo con 10 ml de caldo revitalizador del inóculo, válido para revitalizar TODOS los microorganismos de SEilalimentos. 5 tubos revitalizantes, uno para cada inóculo ciego.

Esto le permite, desde 2021, conocer el efecto matriz de sus propios fabricados (3 por ronda), e implantar las mejoras necesarias para neutralizar los problemas que detecte.

Inscripción:

solicite en microkit@microkit.es la ficha de inscripción actualizada, que es similar a la siguiente:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/pdf/SEILA-INTERCOMPARATIVOS.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf

 

Ante la publicación de la Norma ISO 15213-1:2023 sobre recuento de Clostridium sulfito-reductores en alimentos, ya están disponibles los medios allí indicados, con las fórmulas exactas

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ISO 15213-1:2023 para recuento de Clostridium sulfito-reductores en alimentos, con el medio ISA (Sulfite Iron Agar) y 2 soluciones especiales (una para la solución madre y otra para las diluciones)

En MICROKIT disponemos ya de los 4 medios que necesita para el recuento de Clostridios Sulfito-Reductores siguiendo esta nueva Norma ISO 15213-1 de 2023:

1-El Sulfite Iron Agar (ISA) sufre una modificación en su fórmula, que ya hemos corregido para adaptarnos a esta nueva Norma ISO

2-La solución madre se hace en un caldo especial, que ya tenemos disponible en botes de 500 g para autoclavar

3-Las diluciones se realizan en otro caldo diferente, que también ofrecemos en botes de 500 g para autoclavar

4-Las confirmaciones se hacen en agar sangre Columbia, con el cual contamos (medio base) desde hace 33 años

Solicite precios y plazos de entrega (en principio inmediatos) de todos estos medios, en microkit@microkit.es

Adjuntamos fotografias de los folletos de los 3 primeros medios, con fórmulas idénticas a las indicadas en esta Norma ISO 15213. Del Agar sangre Columbia no adjuntamos, porque no ha sufrido modificación alguna.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

En este medio modificado de su original Wilson-Blair, si sólo se buscan esporas, calentar la muestra y su serie de diluciones decimales en baño María 10-15 minutos a unos 70-80 ºC.

Para aguas, filtrar 100 ml de muestra a través de 0,22 µm (VAC022) y depositar la membrana invertida en la placa Petri vacía.

En alimentos, sembrar 1 ml de muestra y de sus diluciones en sendas placas Petri vacías.

Añadir de inmediato en cada placa Petri 12-15 ml del medio enfriado a unos 50 ºC, sin que se formen burbujas.

Una vez solidificado, añadir otros 5 mL para evitar el desarrollo de colonias invasivas.

Para siembra directa sin filtración de aguas cloradas, añadir 0,6 g de Tiosulfato sódico para inactivar el cloro.

Incubar 48±2 horas a 37±1 ºC, en atmósfera de anaerobiosis (ej: KKT001 en bolsa para < 7 placas de 90 mm, < 20-25 plaquitas MF, KKM036 para jarras) controlada (KKM039).

Contar las colonias (no nubes de productores de hidrógeno) negras, grises o marrones, típicas de productores de SH2.

Realizar los recuentos nada más sacar de la atmósfera de anaerobiosis, ya que la reacción de color revierte en presencia de aire.

Confirmar 5 colonias típicas, estriando en 2 placas de agar sangre con base Columbia (DMT020), incubar una de ellas en aerobiosis y la otra en anaerobiosis, a 37ºC durante 20h.

Las colonias confirmativas de Clostridios sulfito reductores habrán crecido en estría en la placa en anaerobiosis, pero no en la incubada en aerobiosis.

La Norma exige el empleo de estos diluyentes de la muestra: Usar los medios DMT277 y DMT278 para realizar la solución madre y las diluciones decimales, respectivamente, eliminando así inhibidores que pueda haber en la muestra.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/microbiologia-de-alimentos.htm

https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

 

EFECTO MATRIZ EN ALIMENTOS

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¿HA OÍDO HABLAR DEL EFECTO MATRIZ?

efecto matriz en alimentos,

averigüe cuales de sus alimentos inhiben y dejan patógenos en letargia: no se detectan ¡pero siguen viables!

 

El efecto matriz en alimentos, al contrario que en cosméticos o en aguas cloradas, es algo de lo que se habla poco, y no se resuelve.

 

¿Qué es el efecto matriz en alimentos?

Casi todos los alimentos incorporan conservantes (bien a propósito o bien como saborizantes cuyo efecto secundario es la inhibición de ciertos microorganismos) que dificultan la detección de algunos microorganismos. Y esto convierte la microbiología de alimentos en una auténtica caja negra. Y dispara la incertidumbre de los resultados a niveles cientos de veces superiores a la incertidumbre calculada según Normas ISO.

Algunos autores defienden ¿Y si un alimento es inhibitorio, por ejemplo para Listeria, para qué necesito detectar si el alimento la contiene? No es un argumento válido. Es una pregunta que ya nunca se hace nadie que trabaje en microbiología  cosmética o en aguas de consumo humano o de piscinas, con cloro. Porque si el microorganismo está presente en un alimento, subletal-letárgico, pero viable, las BPFs y el sentido común exigen que sepamos que está, ya que en tal caso, cuando el consumidor lo ingiera, el efecto conservante se va a diluir y el microorganismos se va a revitalizar, provocando una toxiinfección alimentaria.

¿Podemos saber si existe efecto matriz en nuestro alimento?

MICROKIT ha desarrollado desde 2021 el primer servicio que permite a los fabricantes de alimentos averiguar para qué microorganismos son inhibitorias sus matrices. Y mostrar sus logros para conseguir detectarlos desde entonces. Bien empleando Buffered Peptone Neutralizing Water (BPNW, APTN) o bien, además, partiendo de la dilución -2 del alimento.

Acompañado de servicio intercomparativo, en el que MICROKIT es pionero desde hace ya más de 2 décadas, el servicio Seilalimentos-Plus permite a cada fábrica de alimentos no sólo detectar qué microorganismos son inhibidos en sus matrices, sino además resolver el problema de falsos negativos que ello supone, analizando de nuevo, una vez aplicadas las soluciones para detectarlos (los mismos inóculos ciegos) y resolver definitivamente este poblema «oculto» de la microbiología alimentaria.

De paso, es un intercompartivo de élite, porque no está sometido a obsoletas Normas ISO sobre coordinación de ensayos intercomparativos, ni a sus más que permisivos valores «Z», ni a su eliminación de laboratorios con resultados supuestamente aberrantes (que en realidad no lo son, y lo parecen por aplicar estadística barata, en vez de microbio-estadística). Nosotros aplicamos criterios más acordes a la ISO 11133-2 de «control de calidad de medios de cultivo», extendida a «control de calidad  de procedimientos analíticos en microbiología de alimentos».

¡A por el efecto matriz!

No lo dude, si fabrica o analiza alimentos, esta es la herramienta que necesita. Y si los auditores desconocen el efecto matriz y sus gravísimas consecuencias sobre los falsos negativos, el problema es de ellos, no de Ud. Defienda su postura y no se vea sometido a tener que añadir, además, uno de esos obsoletos servicios intercomparativos acreditados con z-scores y test de Grubbs o de Cochram, que ni siquiera se plantean acabar con el problema del efecto matriz. Puede que el mercado sí, pero la microbiología no funciona así.

https://www.microkit.es/

Solicítenos folleto técnico y calendario de rondas (3 al año)  de Seilalimentos-Plus.

En cada ronda podrá analizar, aparte del alimento común intercomparado (por duplicado, por dos de sus analistas), 3 de sus alimentos (ó mas si así lo contrata)

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf

 

CURSOS MICROBIOLOGÍA

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CURSOS DE MICROBIOLOGÍA: auditoría/consultoría de optimización en control microbiológico, la excusa perfecta para aplicar la mejora continua

CURSOS DE MICROBIOLOGÍA IN SITU:

Nos es muy grato presentarle nuestro curso in situ para profundización en microbiología de alimentos, aguas, cosméticos y/o ambientes (superficies y aires interiores)

Todos los clientes que nos lo han contratado, lo han calificado con sobresaliente.

Le sirve como curso de formación específica para los sistemas de calidad que su empresa haya implantado,

y además le sirve como auditoría y consultoría para optimizar parámetros que quizá no estén todo lo optimizados/actualizados en su laboratorio como Ud. desearía .

Además somos la primera entidad proveedora de productos y servicios para microbiología cuyo alcance ISO 9001 reconoce y certifica todos estos cursos, desde hace ya 2 décadas.

 

Programa

Lo que veremos cuando lo contrate, en su propio laboratorio, en una jornada completa de trabajo de 8 horas (fecha a consensuar por ambas partes), es:

1-Repaso de la legislación y parámetros que les afectan

2-Revisión de resultados de inters en los que hayan participado en los ultimos años

3-Revisión de sus Protocolos de análisis microbiológico de productos, agua, instalaciones (superficies y aire) y manipuladores

4-Análisis de la frecuencia de muestreo y del tamaño de muestra representativa

5-Hábitos y malos hábitos detectados desde afuera en su trabajo

6-Sugerencias de implantación de lo que les falte

7-Informe de desviaciones y acciones de mejora propuestas

8-Diploma de participación de las personas que asistan

 

Otros cursos

  • Tambien ofrecemos cursos similares de iniciación a la microbiología,

  • para fábricas que desean montar su propio laboratorio de autocontrol, o que lo tienen infra-aprovechado, o con personal nuevo con escasa formación práctica en microbiología de alimentos, aguas, ambientes, cosméticos…

  • Y también impartimos cursos similares de validación de métodos/medios/kits alternativos para laboratorios de autocontrol

  • y le dejamos cerrada la validación del parámetro microbiológico que elija, con informe completo (validación tipo Sanidad y para clientes export, no la del tipo ISO 16140 especial para laboratorios acreditados ISO 17025).

Aproveche esta profunda herramienta de calidad que nadie más le ofrece:

CURSOS DE MICROBIOLOGÍA IN SITU.

Solicite presupuesto del curso que más le conviene actualmente, escribiendo a consultastecnicas@microkit.es, inversión que le servirá como gasto para descontar de beneficios de su empresa: ¡no desperdicie dinero en un exceso de beneficios!

SABOURAUD RAPID-YM AGAR (RYM)

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Sabouraud RAPID-YM AGAR (RYM) HONGOS 18-48h PARA DETECCIÓN Y RECUENTO RÁPIDO DE LEVADURAS Y MOHOS EN ALIMENTOS, COSMÉTICOS, AGUAS Y AMBIENTES

Si Monsieur Sabouraud levantara la cabeza… usaría sin dudarlo Rapid YM Agar.

Primero por sus cualidades inauditas en cuanto a velocidad de liberación de lotes de producto terminado.

Y segundo, porque tiene base Sabouraud Dextrose Agar (entre otras muchas mejoras).

No está diseñado, como el Rosa Bengala Caf Agar (ISO 100.012) o el DRBC Agar (ISO 21527) para obtener un máximo recuento y diversidad.

Pero sí para solucionar otro hándicap de los laboratorios de microbiología, que ven retrasados todos sus resultados por causa de la lentitud de los hongos ¿Por qué su laboratorio no lo usa todavía?

Lo diseñamos y lo dimos a conocer en plena pandemia, cuando todo el mundo teletrabajaba ¿quizá por eso aun no lo conoce? ¿O no le prestó atención porque creyó que era un bulo? Lo entendería: Cuando estuve en Iberoamérica todo el año 2015, encontrando un montón de nuevas especies de microbios ambientales para la ciencia con mi muestreador de aire MBS (y con un muestreador de aguas que me tocó inventar para acceder a aguas naturales tropicales sin correr peligro), vi que existía un medio USA que se suponía que detectaba y enumeraba hongos (levaduras y mohos) en sólo 24 horas.

Pero no me pareció fiable, por muy diseño USA que tuviera, porque su control de calidad, lo hacía y recomendaba el fabricante, exclusivamente con Candida albicans, una levadura que ya crece en sólo 24 h en cualquier otro medio de cultivo para hongos.

Pero con esa raspa, me dieron la idea.

Y con los conocimientos adquiridos en 33 años de microbiólogo en MICROKIT, tanto en diseño de medios mejorados, como en coordinación de intercomparación de laboratorios, encontré la solución, que estaba ahí y sólo estaba esperando una época de tranquilidad (la pandemia) para poder ser plasmada: Rapid-YM Agar.

Un agar de color violeta para muestras de pH >4,0, selectivo para hongos, que vira a amarillo (en las zonas donde después aparecerán las colonias) tras incubar entre 18 y 48 horas (según la especie de hongo) a 35ºC ¡Oh pecado! ¿35ºC, hongos?

¿Por qué nos creemos que los hongos no patógenos sólo crecen bien a 25ºC? ¿Acaso mueren con una de esas olas de calor del Sáhara, que nos ponen todo a 45ºC, o en los trópicos? ¿Acaso son patógenos obligadamente, sólo por el hecho de que sean capaces de crecer a 35ºC? Si no crecen a 35ºC, está claro que no pueden ser patógenos humanos, pero si crecen a 35ºC no tienen por qué ser patógenos.

El caso es que este medio sólo funciona bien con muestras de pH > 4,0, para hongos (levaduras y mohos, no para bacterias) y cuando se incuba a 35ºC. Está diseñado así y para ello. Y así funciona. Eso sí, para todo tipo de muestras: alimentos, aguas, cosméticos, ambientes (superficies y aire…)…

Creado durante la pandemia por MICROKIT.

RAPID-YM AGAR HONGOS 18-48h

https://www.microkit.es/productos-microbiologia.htm

https://www.microkit.es/monograficos/4-Levaduras-y-mohos-monograf–a.pdf

No te pierdas nuestro vídeo: https://youtu.be/qE2gNZH9KWQ?si=sAKHe8KqtGkBua9V

 

Quanti-P/A Clostricult para recuento fiable de Clostridium perfringens en aguas

2 respuestas

Recuento fiable de Clostridium perfringens en aguas de consumo humano sin necesidad de filtración ni de atmósfera de anaerobiosis. Tambien disponible kit para Clostridios sulfito-reductores. Recuento fiable Clostridium aguas.

El recuento fiable de Clostridium perfringens es la asignatura pendiente en microbiología de aguas. La legislación ha cambiado del medio mCP Agar (tan querido por unos pocos y tan aborrecido por la mayoría), a TSC Agar, el medio que funciona muy bien en alimentos. Y todos esperaban un cambio para bien con este cambio de medio. Pero los resultados intercomparativos siguen demostrando que el problema no es el medio, es algo más general. Que provoca innumerables resultados falsamente negativos. Y en los positivos, provoca reducciones en los recuentos de 1-3 log desde el valor real.

En MICROKIT sabemos donde está el problema, y por eso hemos buscado la solución adecuada. Porque diseñamos el medio cromogénico para Clostridium perfringens (colonias naranjas) y va genial en alimentos y cosméticos, pero en aguas sigue dando falsos negativos.

El problema es que estamos oxigenando, mediante la técnica de filtración de membrana, el agua que contiene microorganismos anaerobios estrictos. Pruebe a filtrar medio FTM tioglicolato, que tiene un indicador de oxigenación (resazurina, que vira a rosado en presencia de oxígeno). Verá como la membrana de filtración se vuelve rosa al filtrar a través de ella.

Es justo lo contrario, pero análogo, a que nosotros, aerobios estrictos, cayéramos en un armario cerrado al fondo del mar. ¿Cuántos minutos aguantaríamos sin perecer por falta de oxigeno?

Estamos olvidando desde los primeros instantes del análisis, que trabajamos con anaerobios estrictos: seres que mueren en presencia del oxígeno del aire. Y por eso su hábitat natural son los fangos, las aguas profundas y el tracto digestivo de los animales. Y los estamos colocando en la atmósfera adecuada de anaerobiosis, durante la incubación. Demasiado tarde, cuando muchas (o todas) las células se han hecho ya inviables durante el proceso de la filtración.

Por eso vimos que no era un problema de medios, era un problema de métodos. E inventamos el método que acaba con todos los problemas del recuento, hasta ahora incierto, de Clostridium perfringens en aguas.

En primer lugar, hacía falta un método de inclusión en masa para recuento en 100 mL, no en 1 mL como las DryPlates y otras placas deshidratadas pensadas para muestras de alimentos o cosméticos.

En segundo lugar, hacía falta un método que no expusiera a las células de anaerobios al oxígeno del aire, como hace gravemente la filtración de membrana.

Tras emular nuestras DryPlates (que recuentan en masa sin tener que fundir medios), combinadas con 100 mL de la muestra de agua, y la atmósfera de anaerobiosis, surgió la patente Quanti-P/A Clostricult. Útil tanto para C.perfringens con TSC Agar, como para Clostridios sulfito-reductores con SPS Agar.

Ambos medios necesitaban la adición de nuestro famoso hidragar para mezclar el medio con los anaerobios presentes, y solidificar el agua de muestra sin tener que estar fundiendo medios.

Y tambien ambos medios necesitaban el generador de la atmósfera de anaerobiosis, lo cual fué posible agregar directamente al medio.

Sólo nos faltaba encontrar el recipiente adecuado para la mezcla de la muestra de agua con el medio, que fuese 100% hermético. Que permitiera luego amasarlo, para homogeneizar. Y plancharlo, para que la capa de medio fuese fina y permitiese un buen recuento.

Lo encontramos gracias a las bolsas con tapón a rosca donde hemos introducido el TSC Agar en polvo con hidragar y generador de anaerobiosis, conjunto que llamamos Quanti-P/A Clostricult.

Tambien ofrecemos el mismo kit con SPS Agar en polvo con hidragar y generador de anaerobiosis, para recuento fiable de clostridios sulfito-reductores en 50-100 mL de agua.

El tamaño de la bolsa elegida es muy superior al de la placa de filtración para membranas de 47 mm de diámetro, lo cual permite aumentar drásticamente el límite superior de cuantificación. Porque pasamos de los 1.590 mm2 de la membrana a 18.600 mm2 de la bolsa Quanti-P/A.

Lo cual permite leer 11 veces más colonias por muestra de 100 mL en la bolsa, que en la membrana estándar.

Por fin, el tapón a rosca permite recuperar colonias para su confirmación posterior, ya que el medio es más blando que un agar estándar. Y se pueden «pescar» colonias con asa de siembras, desde el tapón abierto.

Recuento fiable Clostridium aguas. Método diseñado por MICROKIT y protegido por patente. https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult.pdf

Linealidad del método QPA-CP
Recuento en el rango medio en QPA-CP
Colonias típicas (negras con burbuja) de Clostridium perfringens en QPA-CP
https://youtu.be/9ACxFVKJhrM
 
Por fin un recuento fiable de clostridium perfringens en aguas

https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf 

 Cómo usarlas en video:

https://www.youtube.com/watch?v=keVSi9E2uDg

Baird Parker cromogénico: detecte con certeza St.aureus en cosméticos y alimentos con el nuevo medio BPX19 Agar

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Baird Parker cromogénico BPX19A

Baird Parker cromogénico BPX19A: certeza St.aureus cosméticos y alimentos (colonias lilas-violetas, los otros estafilococos crecen verdes)

 

El microorganismo menos robusto

Los servicios intercomparativos demuestran que St.aureus es el microorganismo con mayores problemas de detección en microbiología de cosméticos y de alimentos:

numerosos falsos positivos cuando no está presente y numerosos falsos negativos cuando está presente.

 

¿Por qué?

Esto se debe al uso de medios de cultivo creados hace demasiado tiempo para microbiología de alimentos (Baird Parker),

de medicamentos (Mannitol Salt Agar),

o clínica (XStaph Agar cromogénico hipersalino),

cuya idiosincrasia es 100% diferente a la microbiología de cosméticos.

En cosméticos, a causa de los conservantes, todos los microorganismos están en letargia y a pesar de la inactivación de los conservantes con un buen caldo neutralizante, siguen en estado latente, subletal.

Si no se enriquece 48h (sino sólo 24h) y si no se estría incubando otras 48 h (en vez de 24 h), la probabilidad de encontrar los St.aureus presentes en el cosmético cae en picado.

Y si encima se emplean los medios inadecuados (Baird Parker, Mannitol Salt Agar, Agar cromogénico hipersalino)…

…la probabilidad de encontrarlos cuando están presentes pasa a ser prácticamente nula.

 

Soluciones a medias

Conscientes del problema, numerosas marcas han añadido el test de la coagulasa al Baird Parker clásico (BP+rpf),

sin que ello haya solucionado el problema en absoluto, como se demuestra en los más variados servicios intercomparativos.

Otras marcas han intentado encontrar la solución con cromógenos,

pero los medios cromogénicos para St.aureus no lo distinguen bien de otros estafiloccos, como se vuelve a observar claramente en los inters.

 

La solución más avanzada

Por eso MICROKIT ha creado el nuevo Baird Parker cromogénico, con dos cromógenos, que hemos llamado BPX19 Agar.

Baird Parker cromogénico: detecte con certeza St.aureus en cosméticos y alimentos.

Sin los problemas de falsos positivos del Baird Parker clásico…

…donde aparecen numerosas colonias negras con halo que a menudo ni siquiera son otras cepas de estafilococo…

…a veces ni siquiera son Gram positivos

e incluso a veces ni siquiera son bacterias, sino levaduras.

Y sin los problemas de los numerosos falsos negativos del Mannitol hipersalino y de los medios cromogénicos hipersalinos, que tienen un solo cromógeno para Staphylococcus spp

En este nuevo BPX19 Agar, los St.aureus crecen con pequeñas colonias de color violeta/púrpura/azul oscuro,

otras cepas de estafilococos crecen con colonias verdes o azul turquesa

y otras cepas no crecen, o lo hacen con colonias de color crema que nunca se podrían interpretar como falsos positivos.

Las colonias grandes y verdes suelen ser  Bacillus spp. que, no siendo lilas/violetas, no pueden considerarse falsos positivos, porque no pueden confundirse con St.aureus

¡Hacía falta este nuevo medio de cultivo, y MICROKIT lo ha logrado!

Baird Parker cromogénico: detecte con certeza St.aureus en cosméticos y alimentos.

BPX19A: certeza St.aureus cosméticos. https://www.microkit.es/


Staphylococcus aureus, único microorganismo que crece con colonias pequeñas y moradas/lila en BPX19 Agar. Las colonias azul celeste o verdes son de otros estafilococos y nunca se confundirán con un falso positivo. Las colonias crema son de otros microorganismos, que tampoco pueden confundirse con la diana de Staphylococcus aureus. BPX19A: certeza St.aureus cosméticos.

https://www.microkit.es/monograficos/1-Estafilococo-dorado-monograf–a.pdf

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

CURSOS Y ASESORÍA EN MICROBIOLOGÍA

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CURSOS Y ASESORÍA EN MICROBIOLOGÍA

CURSOS Y ASESORÍA EN MICROBIOLOGÍA: con sus 33 años de experiencia, MICROKIT (y su filial KOSMLAB) es el primer proveedor de productos para control microbiológico que, además, imparte CURSOS PRÁCTICOS certificados por la Norma ISO 9001 (Seilasesoría) en materia de MICROBIOLOGÍA.

 

Son cursos de asesoría en microbiología 

Aparte de los cursos que convoca para todos los asistentes que lo deseen, en diferentes hoteles de la geografía española, los cursos con más éxito son los impartidos in situ en las instalaciones de cada cliente. Dirigidos a todos los analistas, Director Técnico, etc. de la empresa que quieran participar.

Tras la revisión de lo que necesitan o hacen, y tras la introducción teórica de lo que se va a hacer, se realizan las prácticas previamente acordadas de entre estas materias:

microbiología de cosméticos, microbiología de alimentos, microbiología de aguas, microbiología de ambientes interiores (superficies y aire).

 

Tipos de cursos

Y todo ello a tres niveles:

1) iniciación (con montaje del laboratorio de autocontrol, técnicas y protocolos analíticos),

2) optimización (auditoría de puntos críticos detectados en su laboratorio y consultoría sobre sus soluciones) y

3) validación de técnicas microbiológicas (según criterio de inspección de Sanidad, no de ISO 17025).

 

Reconocimiento oficial

MICROKIT es la primera empresa donde el alcance de su certificación ISO 9001 incluye este tipo de asesorías, desde hace ya más de dos décadas.

 

Motivos por los que debe fiarse del criterio profesional del profesorado

Hemos sido, durante 25 años, los coordinadores y evaluadores de los primeros servicios intercomparativos de España en materia de control microbiológico de alimentos, aguas, cosméticos y ambientes interiores.

Esto nos colocó en una situación privilegiada única con respecto a cualquier otro diseñador o fabricante de medios y kits para control microbiológico:

Sabemos en qué fallan la mayoría de protocolos oficiales y hemos aprendido a solucionar todos esos puntos críticos.

Nuestra experiencia de más de 25 años en validación de técnicas microbiológicas nos hace ser los elegidos por el 99% de industrias.

Porque todos necesitan validar sus técnicas más rápidas y eficientes frente a las inspecciones oficiales.

Y saben que los problemas microbiológicos que se encuentran en el día a día…

…MICROKIT hace ya décadas que los detectó, los desmanteló y los resolvió con métodos / productos novedosos que funcionan mucho mejor que los clásicos

 

¿Cómo me informo mejor de estos cursos?

Solicite información en consultastecnicas@microkit.es sobre los CURSOS Y ASESORÍA EN MICROBIOLOGÍA. Será el curso adaptado a su empresa, que más le conviene.

De paso, cumpla de la manera más eficiente con los objetivos de calidad en materia de formación especializada, que requiere su certificación ISO.

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