Archivo de la categoría: microbiologia de aguas

Optimización en los análisis microbiológicos de
AGUAS Y BEBIDAS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR

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BURKHOLDERIA AGAR CROMOGÉNICO

Burkholderia Agar Cromogénico, medio CROMOKIT para la detección de Burkholderia cepacia complex, más eficiente que el BCSA, BCPT y CBCSA

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Burkholderia cepacia en aguas, cosméticos y otras muestras, con base BCPT Agar.

COMPOSICIÓN

Polipeptona bacteriológica 6.00 g
Piruvato sódico 6.00 g
Dihidrógeno fosfato potasio 4.35 g
Hidrógeno fosfato sodio 1.42 g
Sales biliares 1.50 g
Amonio sulfato 1.00 g
Magnesio sulfato 0.20 g
Sulfato férrico amónico 0.01 g
Rojo fenol 0.02 g
Cristal violeta 0,01 g
Agar-agar 12.0 g
Mezcla cromogénica c.s
(Fórmula por litro)
pH final: ajustar a 6.2 ± 0.2

Detección en las primeras 24 horas. Izda: Pseudomonas aeruginosa, colonias rojas grandes. Dcha: Burkholderia cepacia, colonias rojas pequeñas. Medio salmón-crema.

Crecimiento a las 48 h: medio fucsia. Izda: Pseudomonas aeruginosa, colonias rojas grandes y con márgenes lobulados. Dcha: Burkholderia cepacia, colonias rojas menores y con márgenes redondos

PREPARACIÓN

Disolver 32,5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando hasta la total homogeneización. No sobrecalentar. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Si se desea hacer el medio más selectivo para análisis en aguas, enfriar a 45-50 °C y añadir 14 ml de solución BCPT Suplemento estéril selectivo (SMT301, que contiene Polimixina B (150.000 UI/L) y Ticarcilina (500,0 mg/L). Para máxima selectividad y evitar falsos positivos de Sphingomonas spp. y Moraxella spp., se puede añadir Gentamicina, aunque forman colonias diminutas y diferentes a las típicas de Burkholderia cepacia. En cambio Ochrobactrum anthropi y Delftia acidovorans sólo resultan distinguibles mediante identificación molecular, ya que las galerías comerciales dan, igual que este medio, falso positivo de B.cepacia.

Los antibióticos polimixina y ticarcilina del suplemento SMT301 restringen la productividad de algunas cepas de B.cepacia, por lo que no conviene usarlos para recuentos. Además todas las colonias crecidas en estos medios (base BCPT) sin suplemento, que han sido enviadas a nuestro servicio de identificación molecular, han sido siempre de patógenos emergentes como lo es Burkholderia. Para detección por estría tras enriquecimiento (para analizar muestras cosméticas de escasa carga microbiana), si se deben usar con los antibióticos, porque no hay que contar colonias y así se evitan muchos falsos positivos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT555

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

NOTA:

Antes Pseudomonas cepacia, Burkholderia cepacia es una especie muy resistente que agrupa numerosas cepas de bacilos Gram negativos, Oxidasa positivos (a menudo oxidasa-lentos), No Fermentadores de Glucosa, Móviles. Algunas cepas pueden crecer en Agar Cetrimida sin fluorescencia y en Agar CN. Muchas cepas no crecen a más de 35°C. En TSA algunas cepas crecen con colonias regulares, redondeadas, blanquecinas, crema o amarillas. Deben identificarse molecularmente (MICROKIT SFI004), ya que las galerías bioquímicas no son nada fiables en este tándem de cepas denominado B.cepacia. Debe el nombre genérico a su descubridor y el específico, a haber sido descubierta infectando cebollas (Allium cepa), aunque se encuentra también en aguas y biofilms. Es una de las bacterias más versátiles que se conocen, capaz de usar más de 200 compuestos como nutrientes, entre los cuales se encuentran antibióticos, desinfectantes, pesticidas, hidrocarburos aromáticos policíclicos (HPA), tricloroetileno, policlorobifenilos, ftalatos… además de producir sus propios antibióticos para suprimir el crecimiento de otros competidores, así como matrices especiales para generar biofilms, lo que la hace extremadamente difícil de erradicar. Es frecuente como saprófito en aguas, ambientes húmedos y suelos. Se emplea en biorremediación de contaminaciones y en control de plagas fúngicas agrícolas, pero tambien algunas cepas son serios patógenos oportunistas en infecciones nosocomiales. Parece que junto a otros Pseudomonadinos esta bacteria fué, desde el Arcaico, corresponsable del paso de la vida a Tierra, al sintetizar ciertas macromoléculas que actúan como inductores de la lluvia.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…). DESHIDRATADO:Polvo, rosado

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros del hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 35°C aproximadamente:

Burkholderia cepacia MKTA 25416, Crece con colonias rojas, pequeñas (<2 mm en 24 h), algunas cepas viran el medio bajo las colonias a rosa-fucsia, sobre todo a las 48h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 75-294 %.
Burkholderia cepacia MKTN 10743, Crece con colonias rojas, vira el medio de debajo de las colonias a rosa-fucsia, desde las primeras 24h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 75-294 %.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Crece con colonias rojas, pero son muy grandes (>5 mm a no ser que haya tantas que compitan por el sustrato) e irregulares, además son fluorescentes bajo luz UVA de 366 nm.
Pseudomonas fluorescens MKTA 13525, Inhibido o lento y sin viraje, fluorescentes bajo 366 nm.
Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo.

Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 24 h una de ellas es más salmón que roja.

Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 48 h todas son fucsia-rojas, pero de diferentes tonalidades. Y el viraje del medio salmón a fucsia es muy diferente de unas a otras cepas tipo.

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

Sembrar en estría sobre la placa preparada una alícuota del cosmético (previamente diluido y enriquecido en LPT Neutralizing Broth u otro caldo similar que sea neutralizante de todos los conservantes empleados actualmente y a la vez enriquecedor). En agua, sembrar una membrana por la que se hayan filtrado 100 ml). Incubar a 30-35°C durante 24-72 horas, ideal 48 h. Verificar el crecimiento de una estría roja intensa o de colonias rojas de 1,5-2 mm de diámetro, con o sin halo fucsia en el medio. Identificar por ID molecular (MICROKIT SFI004). El recuento/ml será la suma de los recuentos de las tres placas (por filtración, el recuento será el número de colonias/los 100 ml filtrados). De todas formas, no debe aparecer ni una sola colonia confirmativa en 1 g de cosmético enriquecido ni en 100 ml de agua farmacéutica o cosmética.

El recuento a 24h y a 48 h es similar, solo unas pocas colonias más a las 48h (11% en la cepa de NCTC, 7% en la cepa de DSMZ) y significativo: 70% en la cepa de ATCC.

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT555) y suplemento opcional en frasco pinchable estéril 100 ml (SMT301) c.s.p.7 litros de medio final. DryPlates-BCPT (DPP015), que en realidad son el origen de este medio cromogénico que ahora también ofrecemos deshidratado. Placas preparadas 90 mm con (PPLM56, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPLM56NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de antibióticos. Plaquis herméticas 55 mm con (PPL942, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPL942NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de Abb.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar en la basura.

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

MICROKIT® P/A PSEUDOCULT

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Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Pseudomonas aeruginosa en 100 (250) ml de agua

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/fichas/P-A-PSEUDOCULT-UE2-2019.pdf

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril PSEUDOCULT Cromofluorogénico diseñado por MICROKIT muchos años antes que otros (sólo fluorogénicos) más conocidos, para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP-Racks Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Pseudomonas aeruginosa (viraje del agua a rosa-rojo y además fluorescente azul bajo luz de 366 nm VMT050 e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL302 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA908 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u. Para 250 mL d agua, ref: FPA903

DMTI908- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test

SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir dos cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. Incubar 24-72 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 1 vial FPA903 ó 4 cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL302 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar a 5 cucharaditas

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color rosa-rojo demuestra la Presencia de P.aeruginosa en la muestra de agua. La Fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que se trata de P.aeruginosa (además con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, NO hay anillo rojo de Indol en superficie). Ya que hay otros microorganismos capaces de virar a rosa, pero no son fluorescentes ni indol -.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 250 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable.

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de esta fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema PREPARADO: Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-72 h a 37°C aproximadamente:

Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026, vira a rosa, da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y no genera anillo rosa de indol, en las primeras 24h si el inóculo es alto y no procede de muestras estresadas, en 48-72h en caso contrario.
E.coli WDCM 000013, vira a rojo, no da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y genera anillo rosa de indol.
Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A PSEUDOCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

TOTAL OCEANOGRAPHIC MICROKIT®AGAR (MARINE AGAR)

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TOTAL OCEANOGRAPHIC MICROKIT®AGAR (MARINE AGAR ZOBELL)

AGAR MARINO ZOBELL (TOTAL OCEANOGRAPHIC MICROKIT® AGAR) fué diseñado para recuento total de microorganismos en productos del mar y aguas marinas.

Por ello, en su composición se emula el contenido en sales del agua de mar, al que se añaden peptonas, factores dopping de oligoelementos y agar-agar

En la imagen: Photobacterium phosphoreum, bioluminiscente, en Marine Agar. Foto en oscuridad con 1 minuto de exposición

COMPOSICIÓN

Mezcla de peptonas 6,000 g

Citrato Fe 0,100 g

Cloruro Sódico 19,450 g

Cloruro de Magnesio 8,800 g

Sulfato Sódico 3,200 g

Fosfato Disódico 0,008 g

Glucosa 2,000 g

Cloruro de Calcio 1,800 g

Cloruro de Potasio 0,550 g

Bicarbonato Sódico 0,160 g

Bromuro potásico 0,080 g

Cloruro de Estroncio 0,034 g

Silicato de Sodio 0,004 g

Fluoruro de Sodio 0,002 g

Acido Bórico 0,022 g

Nitrato amónico 0,020 g

Factores dopping c.s.

Agar-Agar 15,000 g

(Fórmula por litro)

pH: 7,6 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 56 gramos en 1 litro de agua bidestilada, calentando hasta ebullición y agitando hasta la completa homogeneización.

Es preferible añadir 5 g/L de glicerol (SDA073) para retrasar la precipitación de las sales.

Autoclavar a 121 ºC, durante 15 minutos. No sobrecalentar.

Para que el medio sea selectivo para bacterias y no crezcan hongos, añadir 0,2 g/L de Cicloheximida (SKM200 no estéril, o mejor SKM255 estéril).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT334

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Tostado

PREPARADO: Estéril, Ambar, Precipitado

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente), ya que los microorganismos marinos son termolábiles:

Staphylococcus aureus WDCM00033, Correcto.

Listeria monocytogenes WDCM 00021, Correcto.

Aeromonas hydrophila MKTA49141**, Excelente.

Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Correcto, Colonias verde-amarillentas.

Escherichia coli WDCM00013, Correcto.

**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO, MEDIOS PREPARADOS A CONVENIENCIA DEL USUARIO

NOTA:

Medio optimizado para recuento total de bacterias, (y levaduras y mohos si no se añade cicloheximida) procedentes de ambiente marino. Es por ello, ideal como sustituto del PCA en agua de mar y productos de la pesca. Para anaerobios y microbiota marina especial, solicite nuevos diseños a MICROKIT.

La placa preparada de este medio debe consumirse cuanto antes, para evitar la precipitación de su alto contenido en sal marina.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar la membrana de filtración en la superficie de una placa preparada, o bien 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en placas en masa, o bien en estría en superficie. Incubar en condiciones adecuadas para saprófitos (72 h a 25°C aproximadamente) o para psicotrofos (10 días a 6°C aproximadamente). Contar todas las colonias (no filamentosas: bacterias no autótrofas y levaduras; filamentosas: hongos).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1994 bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Nov-2025

Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es

MICROKIT® P/A CLOSTRICULT

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Clostridium aguas MICROKIT® P/A CLOSTRICULT para la detección Presencia/Ausencia de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 mL de agua

Clostridium perfringens y sus esporas

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril CLOSTRICULT Cromogénico diseñado por MICROKIT con base TSC y atmósfera de anaerobiosis para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-CP) de C.perfringens y sus esporas (el agua vira a negro opaco), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL308 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA902 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u

DMTI902- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 33 test

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

Recuerde que este parámetro es el único indicador de probable presencia de Enterovirus-Norovirus y protozoos (Cryptosporidium, Giardia, Entamoeba…) en el agua.

MODO DE EMPLEO:

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Voltear sin agitar para homogeneizar sin oxigenar. Incubar 18-48 horas a 35-37° C (según nuestras recomendaciones) ó a 42° C (según Normas ISO).

Si desea detectar sólo esporas, provocar un shock térmico: calentar la muestra de 100 ml de agua 15 minutos a 70-80 ºC antes de añadir el medio. No es necesario incubar con atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio ya la incorpora. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 50 mL, por lo que debe añadir 50 mL de agua estéril a los 50mL de agua de muestra, o bien emplear el medio a la mitad de la concentración indicada.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color negro-opaco (aunque sólo sea en el fondo, que es por donde suele empezar a virar) demuestra la Presencia de Clostridium perfringens y sus esporas en la muestra de agua.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar(muestras positivas con Clostricult P/A), utilice Quanti-P/A-TSC (Ref: QPA-CP), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío y atmósfera de anaerobiosis en una bolsa hermética.

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

CONTROL DE CALIDAD:

DESHIDRATADO: Polvo crema PREPARADO: Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

Clostridium perfringens WDCM 00007, vira a negro opaco desde las primeras 18h si el inóculo es elevado y no procede de muestras estresantes, en 48h en caso contrario.
E.coli WDCM 000013: Inhibido
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: Inhibido.
Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.pdf

Si desea recuento fiable de Clostridium perfringens y sus esporas, olvídese radicalmente de la filtración de membrana, que tan nefastos resultados provoca en tantísimos laboratorios, y céntrese en los kits Quanti-P/A Clostricult de MICROKIT

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A CLOSTRICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® KITS P/A EN FRASCOS TOMAMUESTRAS

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Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 ml de muestra de agua

KITS P/A FRASCOS TOMAMUESTRAS; LA FORMA MÁS FÁCIL Y FIABLE DE ANALIZAR AGUAS EN TODOS LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS

INTRODUCCIÓN:

El método P/A ha sido validado para una óptima detección de patógenos en 100 mL de agua y de bebidas incoloras, cuando no se requiere recuento.

La legislación exige la ausencia absoluta de patógenos en aguas de consumo humano (extensible a todas las aguas de fabricación, no sólo de industrias alimentarias, sino también farmacéuticas y cosméticas, aguas de baño, etc), por lo que buscar patógenos por los métodos de Filtración de Membrana (MF) o de Número Más Probable (MPN) para poder enumerar colonias, carece de sentido: sería como necesitar siempre contar “cero”. Algunos laboratorios emplean los kits P/A como screening negativo y sólo en caso positivo repiten la muestra por método cuantitativo para saber cuantas ufc del patógeno hay en la muestra, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es apta.

SORPRESA

La sorpresa es que la Filtración de Membrana no es fiable en la búsqueda de patógenos, porque demuestra en los servicios intercomparativos ser un método destructivo que provoca un número inaceptable de resultados falsamente negativos: en el 21% de las muestras analizadas para Coliformes-E.coli, 33% para Pseudomonas aeruginosa, 49% para Clostridium perfringens… no son detectados dichos microorganismos cuando están presentes, cuando se comparan con el método P/A y con los inóculos diana de las muestras ciegas. El método MPN es demasiado disperso, impreciso, porque obtiene resultados a menudo bastante alejados del valor inóculo (hacia arriba o hacia abajo).

Además el método P/A en frascos tomamuestras es el más fácil de emplear y de interpretar, incluso por personal no especializado en análisis (la única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el medio con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales), por lo que muchos laboratorios empiezan empleándolos, POR COMODIDAD, para fines de semana y festivos; y acaban aplicándolo a todas las muestras, POR FIABILIDAD.

Dada la sensibilidad cercana al 100% (ausencia de falsos negativos), el método P/A sirve de screening negativo de muestras: si la muestra sale negativa, se considera negativa y sólo en los pocos casos en que salga positiva, habrá que confirmarla estriando en placa de medio selectivo adecuado, para descartar falsos positivos.

MODO DE EMPLEO:

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco. Agitar para homogeneizar. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación. Si el microorganismo diana es muy aerófilo, no cerrar el tapón. Incubar en las condiciones indicadas para cada parámetro/microorganismo.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

Tras la incubación, el viraje del agua al color indicado para cada parámetro, demuestra la presencia del microorganismo buscado. La ausencia de viraje demuestra su ausencia.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES. GUARDAR A TEMPERATURA AMBIENTE (8-25ºC), AL ABRIGO DE LA LUZ.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

GAMA COMPLETA:

En MICROKIT disponemos de kits P/A en frascos tomamuestras para TODOS los microorganismos indeseables del agua, en cajas de 10 y de 90 test. Ya llevan incorporado el Sodio Tiosulfato para neutralizar la posible presencia de Cloro. Si analiza muchas aguas al día, consulte los formatos más económicos de MICROKIT de los mismos caldos cromogénicos, en formato vial y formato de bote de 100 g con cucharilla dosificadora. Aún así, si necesita kits P/A para otros microorganismos no contemplados en este folleto, podemos diseñarlos y fabricarlos especialmente para Ud: CONSÚLTENOS

Los kits P/A pueden convertirse en recuento MPN simplemente añadiéndolos a cubetas miniaturizadas antes de incubar.

https://www.microkit.es/pdf/KITS-PA-AGUAS-EN-FRASCOS-TOMAMUESTRAS.pdf

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® KITS P/A EN FRASCOS TOMAMUESTRAS rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LISTA DE FRASCOS P/A

RPL303	MCC P/A COLICULT® BROTH Coliformes (vira de paja a azul) y E. coli (fluorescente con luz de 366 nm -linterna MICROKIT- e indol + en el mismo frasco). Incubar 18-48 horas a 35-37° C
RPL301	ENTEROCULT: Enterococos fecales (vira de ámbar a negro opaco y pierde la iridiscencia de la superficie) Incubar 18-48 horas a 35-37° C
RPL308	CLOSTRICULT: Clostridium perfringens y sus esporas (vira de paja a negro opaco sin necesidad de anaerobiosis, a veces solo vira el fondo) Incubar 18-48 horas a 44-46°C (a 35ºC para buscar Clostridios sulfito-reductores)
RPL302	PSEUDOCULT Ps. aeruginosa (vira de incoloro a rosa-rojo y da fluorescencia azul bajo luz de 366 nm -linterna MICROKIT-). Incubar 24-48 horas a 35-37° C, si se prevé muy estresada, incubar otros 2-3 días
RPL323	Burkholderia cepacia (vira de naranja a rojo tinto) Incubar 24-48 horas a 35-37ºC
RPL309	Aeromonas/Pseudomonas/Plesiomonas (vira de rojo a naranja o púrpura) Incubar 24-72 horas a 21-37ºC
RPL320	ESTAFILOCOCOS (vira de rojo a naranja) Incubar 24-48 horas a 35-37ºC
RPL312	Vibrio cholerae (vira de verde a amarillo) Incubar 8-48 horas a 21-35ºC
RPL312C	Vibrio cholerae Cromokit (vira a rojizo: naranja, púrpura, ámbar) Incubar 36 horas a 21-35ºC, si se prevé muy estresado, incubar otros 2-3 días.
RPL310P	Vibrio parahaemolyticus (vira de azul oscuro a verdoso) Incubar 24 horas a 21-35ºC
RPL307	FICOKIT: ALGAS MICROSCOPICAS (vira de incoloro a verde, pardo, dorado, rojo o verde-azulado) Incubar durante 2-14 días a 21-25ºC en fotoperiodo 16h luz/ 8h oscuridad
RPL306	CIANOKIT: CIANOBACTERIAS Y BACTERIAS FOTOTROFAS (vira de incoloro a verde-azulado o rojo) Incubar durante 2-14 días a 21-25ºC en fotoperiodo 16h luz/ 8h oscuridad
RPL315	MYCOKIT -LEVADURAS Y MOHOS- (enturbia o flocula) Incubar 2-14 días a 21-25ºC
RPL314	FERROKIT para bacterias del hierro Incubar 2-14 días a 21-35ºC

KITS P/A FRASCOS TOMAMUESTRAS; LA FORMA MÁS FÁCIL Y FIABLE DE ANALIZAR AGUAS EN TODOS LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de la otra forma de usar este método: los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia

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Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Burkholderia cepacia complex en 100 ml de agua

Microkit P/A Burkholderia cepacia complex, detección de este peligroso grupo en 100 mL de agua sin los falsos negativos de la filtración de membrana

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril Cromogénico diseñado por MICROKIT en base al BCA (BCPT), para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Burkholderia cepacia (viraje del agua a rojo burdeos en sólo 18-24h e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL323 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA904 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u.DMTI904- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test.
SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS
De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

MODO DE EMPLEO:

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, ponerse guantes estériles para no contaminar el medio y usarlo en cabina de flujo laminar; añadir 3 cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. El color resultante es naranja, transparente. Incubar 18-48 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa, aun que casi siempre vira en 18h) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir hasta horas entre toma e incubación.

Monitorice todos los puntos necesarios para el análisis preventivo de tendencias.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje del agua a color rojo burdeos (vino tinto) y opaco demuestra la Presencia de B.cepacia en la muestra de agua. La ausencia de fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que no se trata de P.aeruginosa. Además, con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, no hay anillo rojo de Indol en superficie, lo que descarta falsos positivos de coliformes. Ya que hay otros microorganismos capaces de virar a rojo, pero son más lentos, fluorescentes o indol +. Puede conseguir que el kit sea muy selectivo añadiendo a cada frasco 0,14 ml del suplemento MICROKIT SMT301 (Ticarcilina + Polimixina). Preferimos ofrecer el kit sin suplemento porque algunas cepas de B.cepacia subletales podrían no crecer (por ejemplo la DSMZ 50181 no crece bien con los antibióticos).

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL. Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es aceptable para fabricación de medicamentos y cosméticos.

Como siempre en microbiología, resiembre los positivos en estría en agar selectivo BCA (BCPT) e identifique las colonias con galerías bioquímicas (MICROKIT 245000) o con nuestro servicio de identificación molecular (SFI004).

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL323, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O INCLUSO PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

Los viales FPA904 y botes DMTI904- son extremadamente higroscópicos: manténgalos bien cerrados en lugar seco, fresco y oscuro (no en nevera). Agite el bote antes de usar. En zonas de elevada humedad ambiental, guardar bien cerrados en un tupper hermético con silicagel. Los frascos RPL323 tampoco precisan nevera, sólo oscuridad.

CONTROL DE CALIDAD:

DESHIDRATADO: Polvo, rosado, sólo existe versión agarizada y versión irradiada.

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros de hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 18 h a 35°C aproximadamente:

Burkholderia cepacia MKTA 25416, Viraje a rojo burdeos, opaco
Burkholderia cepacia MKTN 10743, Viraje a rojo burdeos, opaco
Burkholderia cepacia MKTD 50181, Viraje a rojo burdeos, opaco
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (WDCM00026), Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

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TCBS VIBRIO AGAR

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AGAR TCBS PARA VIBRIO

VIBRIO TCBS AGAR es el medio de cultivo más clásico para detección de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae y demás especies de Vibrio

Selección de Vibrio cholerae (ICMSF, APHA, FDA) y V.parahaemolyticus (ISO 8914:1990 modificada). ISO/TS 21872-1:2007.

COMPOSICIÓN

Triptona 10,00 g
Extracto de levadura 5,00 g
Tiosulfato sódico 10,00 g
Citrato sódico 10,00 g
Cloruro sódico 10,00 g
Bilis 8,00 g
Sacarosa 20,00 g
Citrato férrico 1,00 g
Azul de timol 0,04 g
Azul de bromotimol 0,04 g
Agar‑agar 14,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 8,6 ± 0,2

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

PREPARACIÓN

Disolver 88 g de medio en 1 litro de agua destilada. Para vibrios hiperhalófitos ( V. parahaemolyticus, …) puede requerir la adición de otros 20-50 g/l de Agua de Mar (DMT149) o de Cl Na (BCB101).

Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Hervir 1 minuto y enfriar o bien autoclavar a 116 ºC durante 5 minutos, aunque resulta más recomendable el primer método. Añadiendo después TTC (SDA018) cuando el medio se ha enfriado a 45°C, el TCBS es más diferencial.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT119

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema-verdoso PREPARADO: Estéril, Verde

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

Escherichia coli MKTA 25922, Escaso, colonia translúcida.
Enterococcus faecalis MKTA 29212, Escaso, Colonias muy pequeñas y amarillas.
Vibrio cholerae MKTA 14035, Bueno, Colonias amarillas.
Vibrio parahaemolyticus MKTC 613, Bueno con 30-60 g/l de ClNa, Colonias azules.

PRESENTACIÓN:

FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS INCLINADOS CON Y SIN 30 g/l ClNa.

Medio selectivo indicado para el aislamiento y el recuento de Vibrio. (ICMSF, FDA, APHA). Por su pH alcalino y su contenido en sales, inhibe el crecimiento de la mayor parte de microorganismos, excepto los halófilos.

NOTA 1:

-Numerosas especies de Vibrio provocan enfermedades gastrointestinales y sistémicas en el hombre por ingesta de pescados y mariscos crudos o mal cocinados, ya que en el agua raramente alcanzan la dosis infectiva necesaria: V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.mimicus, V.fluvialis, V. hollisae, V.furnisii, Otros como V. alginolyticus, V.damsela, V.vulnificus, V.metscnikovii… podrían también estar implicados. Todos ellos son marinos costeros, excepto V.cholerae y V.mimicus que viven en aguas continentales. La mayor frecuencia de sus toxiinfecciones se produce en verano.

NOTA 2:

-La mayoría de capturas de pescado (hasta el 96%) y marisco (100% de cocinas) costeros en verano contienen V.parahaemolyticus, lo cual no ocurre el resto del año.

El agua del grifo y el vinagre destruyen gran parte de las células presentes en el pescado, por ello es conveniente lavarlos bien bajo el grifo y acidificarlo por debajo de pH 4,5.

El cocinado destruye sus células, desde 15 minutos a 60°C. La refrigeración frena su crecimiento y la congelación incluso lo hace decrecer.

Se deben prevenir las contaminaciones cruzadas de pescado cocinado con pescado crudo, ya que en sólo 10 minutos duplica su población y en unas horas pueden desarrollarse millones. Se concentra en la piel, agallas e intestino de los pescados.

También provoca otitis e infecciones de heridas. Si no se detecta en las matrices indicadas y en verano, a menudo no es por su ausencia sino porque no se pre-enriquece adecuadamente en TSB, de modo que los microorganismos estresados no se manifiestan ni en el caldo de enriquecimiento Alkaline Saline ni en el agar de aislamiento selectivo TCBS.

NOTA 3:

-Vibrio cholerae incluye el virulento biotipo clásico (que no hemoliza los hematíes de carnero y cabra pero si los de hombre y conejo), y el menos virulento pero pandémico biotipo El Tor (que sí hemoliza los hematíes de carnero y cabra). Aunque en la actualidad la mayoría de casos de esta enfermedad son leves, puede ser mortal por deshidratación de hasta 20 litros de agua al día en la persona contagiada. También provoca otitis e infecciones de heridas. Se difunde por el agua y alimentos contaminados con ella, sobre todo con las heces de los individuos enfermos. Pero el agua continental es su reservorio natural.

NOTA 4:

-El TCBS Agar está diseñado para detectar la mayoría de especies de Vibrio, pero no para los otros géneros de la familia Vibrionáceas: Aeromonas spp., Plesiomonas spp. y Photobacterium spp.

SIEMBRA

Sembrar en superficie las placas, en estria, a partir del enriquecimiento en Alkaline Vibrio Broth (para V.cholerae) o en Vibrio Hipersaline Broth-Alkaline Saline Broth (para V.parahaemolyticus y otras especies halófilas), previamente preenriquecidos en TSB para eliminar el stress (este preenriquecimiento permite la detección un 50% más veces que sin él). Incubar de 18 a 24 horas a 28-35 ºC.

INTERPRETACIÓN

Vibrio cholerae

tipo El Tor forma colonias amarillas por fermentación de la sacarosa (naranjas si se añadió TTC) con viraje del medio a amarillo.

Toda prueba posterior debe realizarse desde colonias repicadas en Nutrient Agar-Vibrio DMT126 o de lo contrario se obtendrán falsos negativos.

Para evitar falsos positivos, recordar que a diferencia de las Enterobacterias, Vibrio cholerae es oxidasa positivo, a diferencia de los Coliformes, es lactosa negativo (aunque indol +) y a diferencia de otros Vibrio, no crece con >6% (60 g/l) de ClNa, pudiendo crecer en absoluta ausencia de ClNa.

Ciertas cepas de Vibrio cholerae se detectan mejor incubando a aproximadamente 28°C, temperatura más acorde con su reservorio natural (peces).

Vibrio parahaemolyticus

no fermenta la sacarosa (excepto cepas especiales, que crecen en TCBS amarillas con centro verde) y crece con colonias verde‑azuladas sin virar el medio, incluso añadiendo TTC.

Es oxidasa +, Lactosa-, Indol + y crece hasta con 80 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 30 g/l.

Vibrio alginolyticus

fermenta la sacarosa y crece en TCBS con grandes colonias amarillas (naranjas con TTC), virando el medio a amarillo.

Es oxidasa +, Lactosa- y crece hasta con 100 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 40 g/l.

Se distingue de V.parahaemolyticus porque en TSAT crece con colonias blancas y pequeñas, ocasionalmente con centro rojo, mientras éste crece con grandes colonias totalmente rojas.

Vibrio vulnificus

no fermenta la sacarosa y crece con colonias verde-azuladas en TCBS. Es oxidasa +, Lactosa + y crece hasta con 60 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia.

También se distingue de V.cholerae por ser a menudo Lactosa +.

Vibrio cholerae

V.alginolyticus

V.cholerae (sin y con TTC)

V.parahaemolyticus

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TCBS-VIBRIO-AGAR.pdf

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https://www.microkit.es/monograficos/14-Vibrio-monograf–a.pdf

T.B.A. Tryptone Bile Agar

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TBA Tryptone Bile Agar, medio de cultivo sólido para la detección y recuento confirmativos de Escherichia coli en aguas según ISO 9308-1

Medio para la detección y recuento confirmativo de Escherichia coli en aguas, por el método de Filtración de Membrana, mediante ensayo rápido según Norma ISO 9308-1:2001, BOE 45 de 21/2/2003 de aguas de consumo humano y BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas.

COMPOSICIÓN

Triptona 20,0 g
Sales Biliares 1,5 g
Agar-Agar 15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,2 ± 0,1

E.coli crecida en T.B.A.

PREPARACIÓN

Disolver 36,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición. Repartir en envases de menos de 250 ml. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

Enfriar a 55°C aproximadamente y verter en placas formando una capa de espesor no inferior a 5 mm.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRESENTACIÓN: DESHIDRATADO CODIGO: DMT135. MEDIO COMPLETO PREPARADO EN PLAQUIS ® HERMÉTICAS MF: PPL914. FRASCOS PREPARADOS.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL MEDIO PREPARADO A 15-21°C, EN TOTAL OSCURIDAD.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar el laboratorio, tras conservar a alta Tª por fallos de refrigeración, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de su etiqueta…)

DESHIDRATADO: Polvo crema. PREPARADO: Agar crema, homogéneo, traslúcido.

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 44°C aproximadamente:

E.coli MKTA 25922, Crecimiento correcto, colonias rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 95-150 %, pero de forma selectiva.
Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Crecimiento correcto, nunca colonias rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 141 %, pero de forma selectiva.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Sembrar la membrana filtrada (procedente de incubación de 4-5h a 34-38 °C, en TSA) evitando la formación de burbujas entre el filtro y el medio. Incubar 19-20 horas a 44 ± 0,5 °C.

Colocar la membrana sobre un cartón saturado en reactivo de Indol Kovacs (SBH056) e irradiar con luz ultravioleta entre 10 y 30 minutos. Se cuentan todas las colonias rojas, considerándolas como E.coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar o inundar en lejía antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro T.B.A. Tryptone Bile Agar rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR NUEVA FÓRMULA (ISA)

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SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR para la detección y recuento de Clostridios sulfito-reductores en alimentos (fórmula anterior a la del SPS Agar)

Detección de Clostridios sulfito-reductores (ISO 15213:2003 en alimentos, UNE 26461-2:1995 para recuento en aguas por Filtración de Membrana)

COMPOSICIÓN

Extracto de levadura 5,0 g
Triptona 15,0 g
Peptona de soja 5,0 g
BiSulfito disódico 1,0 g
Citrato Fe-amónico 1,0 g
Agar-Agar 15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,6 ± 0,2

Colonias negras diminutas y artefactos de Hierro, grandes e irregulares

PREPARACIÓN

Disolver 42 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición, para su completa homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Utilizar de inmediato a su preparación para evitar su oxigenación letal.

NOTA: Para mejorar el desarrollo de colonias negras de Clostridios, añada 1 vial del suplemento estéril VMT136 a cada 100-1000 ml de medio estéril, hervido para desoxigenarlo y una vez enfriado a unos 45-50 ºC.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

LAS PARTÍCULAS PARDAS-NEGRAS, IRREGULARES QUE PUEDEN VERSE, PRECIPITAN AL ENFRIARSE EL MEDIO Y SON BUENAS PARA EL AUMENTO DE SU SENSIBILIDAD, DE ACUERDO CON LAS NORMAS UNE 13401 y UNE-EN-26461. NO CONFUNDIR CON COLONIAS!!!

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT551. TUBOS Y FRASCOS PREPARADOS.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso,Amarillo

PREPARADO: Estéril, Beige

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24 h a 37°C aproximadamente, en anaerobiosis:

Clostridium sporogenes MKTA 11437, colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >114%, pero de forma más selectiva y diferencial.
Clostridium perfringens MKTA 13124, colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >270%, pero de forma más selectiva y diferencial.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Crece con colonias blancas.
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

NOTA: Es más rápido pero menos selectivo que el SPS Agar.

Medio de Wilson Blair (no confundir con el Bismuth Sulfite Wilson Blair Agar para Salmonella) para la detección y recuento de clostridios sulfito reductores, mejorado para disminuir los falsos negativos.

SIEMBRA

Calentar la muestra 15 minutos a unos 70-80 ºC. Filtrar 100 ml de agua a través de 0,22 µm (VAC022). Añadir en la placa Petri y verter 18 ml del medio enfriado a unos 50 ºC (y si se desea, preparado a doble concentración), sin que se formen burbujas. Para siembra directa sin filtración de aguas cloradas, añadir 0,6 g de Tiosulfato sódico para inactivar el cloro. Incubar 16-24 h y 40-48 horas a 36-38 ºC aproximadamente (es más rápido que el SPS)., en anaerobiosis si no se ha quedado la membrana en profundidad.

INTERPRETACIÓN

Contar las colonias (no nubes) negras. Las colonias blancas o grises son presuntivas si la anaerobiosis no es correcta.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/SULFITE-IRON-WILSON-BLAIR-CLOSTRIDIUM-ISA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SULFITE-IRON-SOLUCION-MADRE-Y-DILUCIONES-CLOSTRIDIUM-AGAR.pdf

Medio similar al SPS Agar

https://www.microkit.es/fichas/SPS-AGAR-polvo.pdf

Si desea más información sobre nuestro SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

SULFATE API AGAR (MODIFICADO para acelerar el crecimiento)

5 respuestas

detección reductoras sulfato petroleras: Kit según API (American Petroleum Institute) para detectar biocorrosión en cañerías

Detección de bacterias anaerobias reductoras del sulfato (Desulfovibrio…) y flora asociada.

COMPOSICIÓN

Lactato sódico 4,000 g
Extracto de levadura 1,000 g
Acido ascórbico 0,100 g
Sulfato magnésico 0,200 g
Di‑Potasio hidrogenofosfato 0,010 g
Sulfato amonio‑hierro (II) 0,200 g
Cloruro sódico 10,000 g
Resazurina sódica 0,001 g
Agar‑agar 12,000 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,1

De izquierda a derecha: Sulfate API sin inocular,
Cl. perfringens y Desulfovibrio desulfuricans.

PREPARACIÓN

Disolver 27,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar, agitando hasta hervir para su disolución. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar en agitación para minimizar el precipitado que sin remedio se formará.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT118

TUBOS PREPARADOS CÓDIGO: TPL048

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Rosado nebuloso

CONTROL DE CRECIMIENTO 2-7 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente) en anaerobiosis:

Desulfovibrio desulfuricans MKTN 8301, Excelente, colonias o nubes negras.
Clostridium perfringens MKTA 13124, Correcto, colonias negras.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS 15 ml (VER SULFATOKIT API EN KITS)

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 2 ml de muestra en el fondo de un tubo con 15 ml de medio fundido y enfriado a unos 50 ºC. O bien clavar un capilar o un escobillón con el que se haya rascado el recipiente de la muestra, hasta el fondo de un tubo. Extraer y cerrar. En estas condiciones no es necesario incubar en anaerobiosis, pero debe cerrarse el tapón a fondo. Incubar a 21-35 ºC aproximadamente, durante 2-21 días. Se consideran positivos los tubos con puntos o nubes negras, demostrando mayor contaminación cuanto menos tiempo tarden en virar a negro.

Esquema elaborado en 1989.

Ver también FERROKIT para detección de las bacterias del hierro.

detección reductoras sulfato petroleras

https://www.microkit.es/fichas/SULFATE-API-AGAR.pdf

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro SULFATE API AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16