FERROKIT para detectar las bacterias del hierro

bacterias oxidantes del hierro, detección de su presencia o de su ausencia mediante el kit FERROKIT de MICROKIT

Detección y enriquecimiento de bacterias oxidantes del hierro.

Las bacterias del hierro son de una gran importancia ecológica por su capacidad para biolixiviar metales en forma soluble y para bioxidar metales. Las más conocidas en nuestro país son las del RioTinto, que les debe su nombre por su color de vino tinto. La contaminación ambiental causada al extraer metales a partir de minerales puede reducirse mediante estos microorganismos, que controlan el drenaje ácido, a la vez que oxidan el azufre generando ácido sulfúrico, lo cual solubiliza los metales.

Thiobacillus ferrooxidans

es una arqueobacteria extremófila. Sus células son bacilos Gram negativos, no esporulados, con flagelos polares que las hacen planctónicas, están en la masa de agua que colorean de rojo. Se trata de aerobios estrictos, que crecen a pH comprendidos entre 2 y 3,5 y a temperaturas entre 30 y 50°C. Son autotrofos quimiolitotrofos, que oxidan el hierro ferroso (por eso enrojecen el agua en la que viven) y el azufre inorgánico (sulfuro) mediante oxígeno, por lo que son muy aerófilos, formando sulfato y ácido sulfúrico. Como fuente de carbono asimilan CO₂ . Su hábitat natural son los efluentes de las minas de metales (por ejemplo oxida la pirita) y aunque su impacto ambiental es importante al generar aguas extremadamente ácidas (ácido sulfúrico), se emplea en bioremediación en la extracción de metales porque recupera el Cobre y el Uranio.

 La reacción química simplificada es:

Fe₂S + O₂ + H₂O ———-H₂SO₄

Los tiobacilos producen ácido sulfúrico, que corroe los metales y provoca la lluvia ácida.

Otras arqueobacterias de hábitats similares

Leptospirillum ferrooxidans, crece a pHs aún más extremos, por debajo de 1,3. Sus células son espirilos, Gram negativos y forman un biofilm flotante de color rosa. Desplaza a T. ferrooxidans en lugares con alto ratio de hierro férrico/ferroso. También quimiolitotrofo, fija Carbono usando el ión ferroso como dador de electrones y el oxígeno como receptor. Asociados a ellas se pueden encontrar Gallionella ferruginea (acumula Fe y oxida el azufre a temperaturas muy altas y pH ácido, formando tubérculos internos en las cañerías de metal, que favorecen la aparición de anaerobios corrosivos como Desulfovibrio), Siderocapsa, Siderocystis, Naumaniella, Metallogenium, Leptothrix, Sphaerotilus… Para detectar las bacterias reductoras del azufre véanse los kits de Sulfito-reductores (RPL062) y de Sulfato-reductores (TPL048).

El problema de encontrar este tipo de microorganismos en aguas y circuitos de las industrias es que pueden generar problemas técnicos irreversibles, por lo que prevenir y controlar sistemáticamente su aparición resulta más que necesario. Por ello resulta de gran interés el control de circuitos de refrigeración y lavado, depósitos, redes de distribución de aguas, refinerías de petróleos y aceites, minas de pirita, conducciones de agua y cualquier otro substrato donde se sospeche la corrosión microbiológica de metales y la aparición de lluvia ácida.

FERROKIT es el método Presencia/Ausencia

que combina la máxima comodidad con la máxima eficiencia, al rodear las células de los microorganismos buscados de medio de cultivo. Ferrokit es un kit P/A estéril cuya composición permite el crecimiento de las bacterias oxidadoras del hierro en las mismas condiciones en que proliferan en Riotinto. Su alta concentración, que le confiere aspectos cristalizados y precipitados, permite la detección directa de bacterias oxidantes del hierro en 50 ml de muestra de agua. Precaución: no tocar el líquido, su bajo pH de 2,3 lo hace tan irritante y corrosivo para la piel y las mucosas como un baño en  Riotinto. Si busca L. ferrooxidans, acidifique FERROKIT a pH 1,3 con Ac.Sulfúrico 1N.

https://www.microkit.es/fichas/FERROKIT.pdf

kits P/A en tubos preparados para detectar Salmonella/Shigella, Campylobacter, E.coli O157 o Legionella en 100-500 mL de agua

Presentamos 4 nuevos kits P/A de MICROKIT para el screening de microorganismos emergentes o de detección, hasta ahora compleja, en 100-500ml de agua.

• SALMONELLA Y SHIGELLA
• CAMPYLOBACTER
• E. COLI O157:H7
• LEGIONELLA

Presentamos 4 nuevos kits P/A en tubos preparados para el screening de microorganismos emergentes o de detección, hasta ahora compleja, en 100-500ml de agua. Como los clásicos kits P/A de MICROKIT, se trata de medios selectivos altamente concentrados y con inactivadores del cloro; y a diferencia de los mismos, se presentan en formato de tubos con 18ml de caldo para añadir directamente a los 100-500ml de muestra de agua. Toda turbidez tras la incubación se considera presuntiva, por lo que se habrá de sembrar en agares selectivos para aislar colonias que identificar, pero habremos ahorrado la filtración, esterilización y siembra en todas las muestras negativas.

El modo de empleo es común: Agitar  un tubo y añadir su contenido al recipiente de toma de muestra de agua o a un frasco Pyrex de 500ml con 500ml de agua. Agitar para homogeneizar. La muestra de 500ml es más representativa que la de 100ml (para ésta añadir sólo ½-1/3 del contenido agitado del tubo y desechar el resto); incluso pueden ampliarse los muestreos añadiendo una membrana (mejor de 0,22µm que de 0,45µm) por la que hallamos filtrado 5 litros del agua de muestra, por ejemplo. Se incuba el conjunto en las condiciones indicadas para cada microorganismo y se observa la aparición de turbidez, que demuestra presencia presuntiva: Sembrar 0,1ml sobre el agar selectivo indicado, incubar y confirmar las colonias con los kits confirmativos inmediatos en látex recomendados en cada caso. Se presentan en cajas de 20 ó 40 test con caducidad de 1 año.

Kit de Screening MICROKIT® P/A-SALMONELLA Y SHIGELLA en 100-500 ml de agua: 

Contiene SS Broth selectivo altamente concentrado para poder añadir hasta 500 ml de agua. Referencia: RPL331. Los precipitados o filamentos en ciertos lotes son normales y no afectan la calidad final. Este medio, diseñado por MICROKIT, lleva años demostrando mediante intercomparación SEILAGUA®, ser el caldo de enriquecimiento selectivo más eficiente de cuantos existen para Salmonella y para Shigella.

Si se busca sólo Salmonella, incubar a 42 ºC durante 24-48 horas, al ser  esta temperatura más selectiva. Si se busca también Shigella, incubar a 37 ºC durante el mismo tiempo. Toda muestra turbia o con viraje de color se pasa directamente al látex KMB501 para Salmonella o al KWD000 para Shigella; o si no se tiene prisa, haciendo un paso intermedio en Agar CROMOSALM (DMT500),  Agar SS (DMT107), Agar XLD (DMT142) y, si se desea, usando después los látex para confirmar las colonias.

Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN Salmonella abony MKTN 6017 y Shigella flexneri MKTA 12022. Recomendamos asimismo la participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, para validar los procedimientos y los operarios.

Validación: Realizada durante 7 años de intercomparación de 70 laboratorios de toda España en más de 700 muestras duplicadas. Se demuestra, comparado con el método oficial de filtración de membrana para Salmonella, una sensibilidad del 89,47% frente al 47,22-62,96% del método oficial según se use BGA o XLD; y para Shigella una sensibilidad del 100% frente al 33,0%  del método oficial. Una especificidad para Salmonella del 98,45% frente al 42,55-73,91% del método oficial según se use Hektoen, Magenta-Gal, XLD, BGA o SS Agar, en orden decreciente; y para Shigella una especificidad del 100% frente al 79% en el método oficial.

Kit de Screening MICROKIT® P/A-CAMPYLOBACTER en 100-500 ml de agua:

Contiene Campy Broth Preston selectivo muy concentrado para poder añadir hasta 500 ml de agua o bien 50 g de alimento en 450 ml de Ringer. Referencia RPL332. Se incuba a 43 ºC sin agitar, para que en el fondo se desarrolle un ambiente microaerófilo, durante 24-48 horas o incluso 1 semana si no enturbia antes.Toda muestra con turbidez se pasa (0,1ml a distintas profundidades) a Agar Campy Blood Free Skirrow (DMT184 + SBH020). Tras incubar en las mismas condiciones con atmósfera microaerófila (KKM037, KKM101) se confirman las colonias con el látex KMB001.

Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN Campylobacter jejuni MKTA 33291. Recomendamos asimismo la participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, para validar los procedimientos y los operarios.

Kit de Screening MICROKIT® P/A-E. COLI O157:H7 en 100-500 ml de agua:

Contiene Tellurite-Cefixime O157 Broth selectivo altamente concentrado para poder añadir hasta 500 ml de agua. Ref: RPL333.

Se incuba a 42 ºC durante 24 horas. Las muestras turbias se pasan a Sorbitol MacConkey Agar (BCD161) con Telurito-Cefixime ( X161). Tras incubar a 37 ºC durante 24 horas se confirman las colonias sospechosas (incoloras) con el látex KMB102.

Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN E.coli O157:H7 MKTA 35150. Recomendamos asimismo la participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA, para validar los procedimientos y los operarios.

El método P/A es mucho más sensible (tienen muchos menos falsos negativos) que el método MF, pero es menos específico (tienen más falsos positivos). Por ello es tan útil como screening negativo, para poder procesar un gran número de muestras. Si el kit da negativo, el resultado es negativo. Pero si el kit sale positivo, hay que confirmar esa muestra aislando en placa e identificando colonias aisladas.

Nuestros kits están validados para uso en aguas continentales, no marinas ni salinas.

Para más información de los kits P/A en tubos preparados no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/LEGIONELLA-PA-KIT-CALDO-REVITALIZACI–N-Y-DETECCI–N.PDF

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U