CEREBRO CORAZÓN BRAIN HEART INFUSION AGAR. Detección de microorganismos difíciles y de la estafilocoagulasa.

COMPOSICIÓN

• Extracto corazón‑cerebro       17,5 g
• Peptona pancreát.gelatina      10,0 g
• Cloruro sódico                       5,0 g
• Fosfato disódico                    2,5 g
• Glucosa                                  2,0 g
• Agar-Agar                              10,0 g

(Fórmula por litro)

pH final : 7,1 ± 0,2

 MATERIAL PROCEDENTE EXCLUSIVAMENTE DE CERDO

PREPARACIÓN

Disolver 47 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando, para su total homogeneización. Repartir en tubos o frascos y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. No sobrecalentar, para evitar el oscurecimiento y caramelización del medio.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT021

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Tostado

PREPARADO: Estéril, Ambar precipitado

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

• Aspergillus niger MKTA 16404, Excelente, colonias algodonosas, amarillas, discretas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 81 %.
• Candida albicans MKTA 10231, Excelente, redondas, bien desarrolladas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 99 %.
• Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente, colonias expandidas, discretas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 118 %.
• Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente, colonias redondas, discretas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 102 %.
• Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, colonias grandes, lenticulares, pigmentadas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 177 %.
• Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, colonias grandes, lenticulares. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 90 %.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo.

PRESENTACIÓN: FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular en superficie 0,1 ml de muestra o de caldo BHI. Incubar el tiempo y a la temperatura óptimos para el microorganismo que se desea aislar (a falta de otro criterio, 24-72 horas a 35-37 ºC aproximadamente). Dada la riqueza de sus componentes, la recuperación (tanto de recuento total como de patógenos) es superior a la de otros medios generales

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Arriba: alfa, Beta y Gamma hemólisis en agar sangre

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BISMUTH SULFITE WILSON-BLAIR SALMONELLA AGAR. Aislamiento selectivo e identificación de Salmonella (USP, FIL, FDA, APHA, UNE 34-818, ISO 6579)

COMPOSICIÓN

• Polipeptona                           10,00 g
• Verde brillante                       25,00 mg
• Dextrosa                                5,00 g
• HidrogenoFosfato Disódico   4,00 g
• Sulfato ferroso                       0,30 g
• Citrato de amonio y bismuto 1,85 g
• BiSulfito sódico                     6,15 g
• Agar-agar                               20,00 g

(Fórmula por litro)       pH final: 7,7 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 47’3 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Para seguir la norma UNE 34-818-85, se deben añadir 5 g/l de bilis de buey (DMT120). Calentar hasta ebullición, agitando, para su total homogeneización. Mantener la ebullición durante 2 minutos. No autoclavar. El medio aumenta su caracter inhibitorio y paralelamente, su color verdoso, con el tiempo, por lo que se recomienda usar en la misma semana de su preparación, cuando su selectividad es óptima.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.  AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT019

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Verde

PREPARADO: Estéril, Verde, precipitado, más verde cuanto más viejo e inhibitorio se va haciendo el medio.

CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 37°C aproximadamente:

• Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Escaso.
• Escherichia coli MKTA 25922, Escaso, Colonia marrón‑verde.
• Salmonella abony MKTN 6017, Excelente, colonia negra.
• Shigella flexneri MKTA 12022, Escaso, Colonia marrón.
• Enterococcus faecalis MKTA 29212, Inhibido.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para el aislamiento de Salmonella, recomendable sobre todo para Salmonella typhi (APHA, USP), asi como para S.september en productos de la pesca. Las Salmonella reducen el sulfito sódico en presencia de glucosa, por lo que sus colonias son negras, rodeadas por una zona de brillo metálico. E.coli, Proteus y la flora secundaria Gram negativa quedan inhibidos por la presencia del verde brillante con citrato amónico, bismuto y sodio.

No confundir con Sulfite Iron Wilson Blair Agar para Clostridium.

 SIEMBRA 

Sembrar las placas recientes (las placas pierden su selectividad en 72 h) en superficie, por agotamiento. Incubar 24-48 horas a 37 ºC aproximadamente. Se recomienda sembrar en paralelo en otros medios selectivos (Brilliant Green Agar, SS Agar, XLD Agar, Hektoen Enteric Agar, MacConkey Agar…).

 INTERPRETACIÓN

 Salmonella typhi crece con colonias negras con brillo metálico, otras Salmonella son negras o verdes.

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https://www.microkit.es/monograficos/5-Salmonella-y-Shigella-monograf–a.pdf

CANDIDA ALBICANS BIGGY NICKERSON AGAR. Detección de Candida albicans por sus colonias color pardo (no crema, marrón o negro)

COMPOSICIÓN

• Extracto de levadura               1.0 g
• Glicina                                      10.0 g
• Glucosa                                    10.0 g
• Citrato-bismuto amoniacal     5.0 g
• Sulfito sódico                             3.0 g
• Agar‑agar                                 15.0 g

(Fórmula por litro)             pH final: 6,8 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 44 g de medio en 1 litro de agua estilada. Calentar hasta ebullición, agitando ara su disolución. Mantener la ebullición durante un máximo de 2 minutos.

NO autoclavar ni sobrecalentar o el medio virará a gris.

Medio que, una vez preparado, gana calidad con el tiempo, mientras se mantenga blanco (1-2 años).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT017

PRESENTACIÓN: TUBOS INCLINADOS CON PICO LARGO, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige         PREPARADO: Estéril, Blanco.

CONTROL DE CRECIMIENTO 48-72 h a 37°C aproximadamente, o bien a temperatura ambiente (aprox.21-28°C):

• Candida albicans MKTA 10231, Excelente, Colonia marrón sin difusión de pigmento al medio. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 114-119%, pero de forma selectiva.
• Candida tropicalis MKTA 1005, Excelente, Colonia con difusión del color negro-metálico al medio. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 115%, pero de forma selectiva.
• Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido.
• Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

NOTA:

Bismuto‑Sulfito‑Glucosa‑Glicina‑Yeast Agar (BIGGY) es un medio selectivo para Candida. El sulfito de Bismuto inhibe la flora bacteriana y es reducido a pardo oscuro por las Candida. El medio es tan bueno Para C.albicans que no ha sido mejorado por los medios cromogénicos.

SIEMBRA

Fundir frascos a 98 ºC para elaborar placas sin sobrecalentar. Sembrar en superficie, exclusivamente con asa de Platino (VCS147). A pesar de ser una levadura, si se siembra en masa, se obtendrán recuperaciones incluso 3 veces inferiores y colonias más tardías y diminutas.

Incubar durante 1‑3 días a 35 ºC aproximadamente.

 Izda: siembra en superficie; Dcha: siembra en masa, mucho menos eficiente para este microorganismo

INTERPRETACIÓN

Candida albicans forma colonias negras o pardo oscuras, sin brillo metálico ni difusión de pigmentos al medio. Candida tropicalis: colonias pardo‑oscuras con centro negro, con reflejo metálico y con pigmento negro que difunde alrededor de las colonias tras 72 horas. C. pseudotropicalis: colonias pardo‑rojizas oscuras, brillantes, sin difusión. Candida krusei: colonias rugosas, plateadas‑pardo‑negruzcas, con halo de difusión amarillo. C. parakrusei: colonias rugosas, pardo‑rojizas, con micelio amarillo alrededor. Candida stellatoidea: colonias pardo‑oscuras con leve reborde micelial.

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BAT ALICYCLOBACILLUS AGAR IFU. Medio selectivo para el aislamiento de microorganismos acidotermófilos y osmotolerantes, según IFU-12-2007

Medio selectivo para el aislamiento de microorganismos acidotermófilos y osmotolerantes (incluido Alicyclobacillus acidocaldarius) en jugos de frutas, concentrados, mermeladas y otros alimentos ácidos, según IFU-12-2007. Cada vez hay más problemas microbiológicos industriales, que pueden asociarse a estas bacterias acidófilas esporuladas termoresistentes (Eguchi y col., 1999),  que provocan en el alimento un olor desagradable por síntesis de fenoles. El extracto de levadura, la glucosa y las sales minerales aportan las vitaminas, carbohidratos y oligoelementos necesarios, la temperatura y pH de la incubación actúan como agentes selectivos.

 COMPOSICIÓN.

• Extracto de levadura                                2,00 g
• Glucosa                                                      5,00 g
• CaCl₂.2 H₂O                                               0,12 g
• MgSO₄.7 H₂O                                            0,25 g
• (NH₄)₂ SO₄                                                 0,10 g
• KH₂PO₄                                                      1,50 g
• ZnSO₄. 7 H₂O                                            0,09 mg
• CuSO₄. 5 H₂O                                            0,08 mg
• MnSO₄. H₂O                                              0,07 mg
• CoCl₂. 6 H₂O                                              0,09 mg
• H₃BO₃                                                         0,05 mg
• Na₂MoO₄. 2 H₂O                                      0,15 mg
• Agar-agar                                                  20,00 g

(Fórmula por litro)           pH final: 5,3 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 29 g del medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Autoclavar a 116 ºC durante 15 minutos, acortando al máximo los tiempo de autoclave y provocando un enfriamiento forzado a su salida.

NOTA IMPORTANTE: Sólo tras autoclavar y antes de que solidifique, ajustar el pH de cada frasco a 4,0 ± 0,2 mediante H₂SO₄, ya que el agar recalentado a un pH tan ácido pierde buena parte de sus propiedades gelificantes, por lo que quedará más friable y blando cuanto más lo recalentemos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

CODIGO DESHIDRATADO: DMT231, FRASCOS PREPARADOS: RPL145

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: polvo crema    PREPARADO: Estéril, Paja-Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO, 3 días a 45°C:

• Alicyclobacillus acidocaldarius MKT 001, Excelente
• Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido
• Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, FRASCOS PREPARADOS

 MODO DE EMPLEO E  INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Si el producto es filtrable, filtrar la cantidad deseada de muestra, en general 100-250 ml, por una membrana estéril de 0,45 µm, para obtener recuentos. Sembrar la membrana sobre una placa con BAT Agar. Si se desea, realizar un duplicado con una segunda capa (por si acaso la siembra en masa estimula mejor el crecimiento de los microorganismos presentes), a 45°C controlados para evitar que los microorganismos se estresen.

Si el producto no es filtrable, preincubarlo 3 días a 45 °C para su posterior investigación, en este caso sin posibilidad de recuento, ya que se ha enriquecido. Sembrar en la superficie del BAT Agar, en estría o repartiendo con asa de Digralsky, una alícuota de la muestra enriquecida; o en masa si el agar está muy blando como para estriarlo. En este caso, no voltear la placa durante su incubación.

Si el producto no es filtrable y se desea recuento, utilice tubos de Alicyclobacillus Broth (MICROKIT TPL011) para realizar un recuento NMP.

Incubar 3-7 días a 45°C (incluso puede ser a 60°C) en estricta AEROBIOSIS. Contar todas las colonias, ya que a esas temperaturas y con ese pH, sólo crecen microorganismos acidotermófilos. Si desea identificar las colonias, a nivel de especie, utilice los kits M-Ident®-Acidificantes, si se trata de bacterias acidoacéticas o acidolácticas, o bien M-Ident®-Bacillus si se trata de Bacilos.

Si desea más información sobre nuestros MEDIOS BAT ALICYCLOBACILLUS AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/BAT-ALICYCLOBACILLUS-AGAR.pdf

Tambien disponibles los caldos YSG Acidotermófilos Broth y GPY Acidotermófilos Osmotolerantes (como Zygosaccharomyces pombe) Broth:

https://www.microkit.es/fichas/ACIDOTERMOFILOS-ALICYCLOBACILLUS-YSG-BROTH.pdf

https://www.microkit.es/fichas/ACIDOTERMOFILOS-OSMOTOLERANTES-GPY-BROTH.pdf

Así como el kit de Guayacol:

https://www.microkit.es/fichas/GUAYACOL-ALICYCLOBACILLUS-KIT-UE-2-2019-ALIMENTOS.PDF?v=2023

https://www.microkit.es/monograficos/10-Bacillus-monograf–a.pdf

BAIRD PARKER FARMACOPEA AGAR (BASE). PHARMACOPEA MEDIO O, ISO 22718, medio de cultivo para detección de Staphylococcus aureus

Detección y enumeración de Staphylococcus aureus (USP, ISO 22718-cosméticos) 

Colonias típicas de Staphylococcus aureus

COMPOSICIÓN

• Triptona                      10.00 g
• Extracto de carne        5.00 g
• Extracto de levadura   1.00 g
• Piruvato sódico           10.00 g
• Glicina                           12.00 g
• Cloruro de litio             5.00 g
• Agar-agar                    20.00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6,8 ± 0.2

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 l de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición agitando para su completa disolución. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio base es crema y transparente.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT306

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, tostado

PREPARADO: Estéril, Crema, Opaco

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48 h a aprox.37°C:

• Bacillus subtilis MKTA 6633, Escaso, Colonia marrón.
• Proteus mirabilis MKTA 14153, Excelente, Colonia marrón.
• Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente, Colonia negra, Con reborde blanco y amplio halo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 73-95 %, pero de forma selectiva.
• Staphylococcus epidermidis MKTA 12228, Bueno, Colonia negra, sin halo.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO BASE + SUPLEMENTO.

NOTA: Medio selectivo y diferencial para la detección y enumeración de S. aureus en alimentos y productos farmacéuticos. El Cloruro de Litio, el Telurito Potásico y la Glicina inhiben la flora acompañante. La yema de huevo demuestra la actividad lecitinasa. Si la muestra es rica en mohos, se pueden eliminar añadiendo al medio enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de Cicloheximida (SKM200). 

SIEMBRA

Dejar enfriar el medio BASE a 48 ºC y mezclar bien con 50 ml/l de emulsión estéril de yema de huevo con telurito potásico (SBH011). El color final del medio completo es crema y algo opaco. Añadir 20 ml/placa. Sembrar la placa con 0,1 ml de la muestra y sus diluciones, en superficie, con un triángulo de vidrio estéril VRR154 o con asas de Digralsky desechables (VCL155). O bien por agotamiento si la muestra procede de enriquecimiento y por consiguiente, no es para realizar recuentos. Incubar 48 horas a 35-38 ºC. 

INTERPRETACIÓN

S.aureus forma colonias características (negras o grises, brillantes, convexas, de 1,5-2,5 mm, a menudo con reborde opalescente-blanco, rodeadas de un halo claro de 2‑5 mm de diámetro (lísis de la yema de huevo). Sospechar también de las colonias atípicas (negras brillantes y grises, sin halo). Confirmar la coagulasa con el látex inmediato KWD094 o bien con incubación en BHI (DMT022, RPL004, TPL003), 22-26 h a 35-37 °C si, tras 4-6 h de añadir 0,3 ml de plasma de conejo, a 35-37°C, el coágulo supera la mitad del volumen original. Otros estafilococos, Micrococcus y Bacillus forman colonias sin alguna de las características descritas. Para descartar los falsos positivos de Micrococos, realizar una citocromo-oxidasa (con las tiras estables KOT050), ya que los Staphylococcus spp. son oxidasa negativos pero los Micrococcus spp. son oxidasa positivos.

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colífagos bacteriófagos Real Decreto 3/2023, medio semisólido para recuento de virus en aguas de consumo humano, 10-1-2023

Detección y enumeración de bacteriófagos (Recuento de halos de lísis) ISO 10705:2001

COMPOSICIÓN

•  Peptona                                  10,00 g
• Extracto de Levadura             3,00 g
• Extracto de carne                   12,00 g
• Cloruro Sódico                      3,00 g
• Carbonato Sódico                  0,75 g
• Cloruro Magnésico                0,60 g
• Agar-agar                               6,00 g

(Fórmula por litro) pH final: 7,2 ± 0,2

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

 PREPARACIÓN

Disolver 35,1 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición, para la total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Preparar tubos con 2,5 ml.

PRESENTACION: DESHIDRATADO CODIGO: DMT803

 SIEMBRA

Seguir las directrices de la norma ISO 10705.

bacteriófagos colífagos Real Decreto 3/2023, medio semisólido para recuento de virus en aguas de consumo humano, 10-1-2023

Usar también este mismo medio semisólido (DMT803) en Agar (DMT802) y en caldo (DMT801)

https://www.microkit.es/fichas/BACTERIOFAGOS-COLIGRAFOS-SCHOLTEN-SEMISOLID.pdf

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