BISMUTH SULFITE WILSON-BLAIR SALMONELLA AGAR. Aislamiento selectivo e identificación de Salmonella (USP, FIL, FDA, APHA, UNE 34-818, ISO 6579)
COMPOSICIÓN
- Polipeptona 10,00 g
- Verde brillante 25,00 mg
- Dextrosa 5,00 g
- HidrogenoFosfato Disódico 4,00 g
- Sulfato ferroso 0,30 g
- Citrato de amonio y bismuto 1,85 g
- BiSulfito sódico 6,15 g
- Agar-agar 20,00 g
(Fórmula por litro) pH final: 7,7 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 47’3 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Para seguir la norma UNE 34-818-85, se deben añadir 5 g/l de bilis de buey (DMT120). Calentar hasta ebullición, agitando, para su total homogeneización. Mantener la ebullición durante 2 minutos. No autoclavar. El medio aumenta su caracter inhibitorio y paralelamente, su color verdoso, con el tiempo, por lo que se recomienda usar en la misma semana de su preparación, cuando su selectividad es óptima.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT019
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Verde
PREPARADO: Estéril, Verde, precipitado, más verde cuanto más viejo e inhibitorio se va haciendo el medio.
CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 37°C aproximadamente:
- Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Escaso.
- Escherichia coli MKTA 25922, Escaso, Colonia marrón‑verde.
- Salmonella abony MKTN 6017, Excelente, colonia negra.
- Shigella flexneri MKTA 12022, Escaso, Colonia marrón.
- Enterococcus faecalis MKTA 29212, Inhibido.
PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO
NOTA: Medio selectivo para el aislamiento de Salmonella, recomendable sobre todo para Salmonella typhi (APHA, USP), asi como para S.september en productos de la pesca. Las Salmonella reducen el sulfito sódico en presencia de glucosa, por lo que sus colonias son negras, rodeadas por una zona de brillo metálico. E.coli, Proteus y la flora secundaria Gram negativa quedan inhibidos por la presencia del verde brillante con citrato amónico, bismuto y sodio.
No confundir con Sulfite Iron Wilson Blair Agar para Clostridium.
SIEMBRA
Sembrar las placas recientes (las placas pierden su selectividad en 72 h) en superficie, por agotamiento. Incubar 24-48 horas a 37 ºC aproximadamente. Se recomienda sembrar en paralelo en otros medios selectivos (Brilliant Green Agar, SS Agar, XLD Agar, Hektoen Enteric Agar, MacConkey Agar…).
INTERPRETACIÓN
Salmonella typhi crece con colonias negras con brillo metálico, otras Salmonella son negras o verdes.
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