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Mac CONKEY SORBITOL AGAR

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Mac CONKEY SORBITOL AGAR es el medio de cultivo clásico para la detección y recuento de la variante O157 de E.coli

Detección presuntiva de E.coli serovar. O157 (UNE-EN ISO 16654:2002) a partir de alimentos (carne de vacuno,…), aguas y otras muestras, previamente enriquecidas en E. coli O157 Broth.

COMPOSICIÓN

Peptona de caseina 17,00 g
Peptona de carne 3,00 g
D Sorbitol 10,00 g
Sales Biliares 1,50 g
Cloruro sódico 5,00 g
Rojo Neutro 0,030 g
Cristal violeta 0,001 g
Agar agar 12,00 g
E. coli izquierda, púrpura brillante; E. coli O157 derecha, rosa-crema.

(Fórmula por litro) pH final 7,1 ± 0,2

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO
CÓDIGO: BCD161

PREPARACIÓN

Disolver 48.5 gramos en 1 litro de agua bidestilada.

Calentar, agitando hasta ebullición, para su total disolución.

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

No sobrecalentar.

Añadir a 44-47 ºC, 20 ml de Telurito-Cefixime estéril (BCX161) (= 2’55 mg/l) y mezclar.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, púrpura
PREPARADO: Violáceo

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 18-24 h a 37 ºC, aplicando el método ISO 16654 o el indicado en el Manual MICROKIT actual:

E.coli (0157:H7) MKTA 35150, Excelente, colonias amarillentas o suavemente rosadas y 1 mm de diámetro. PR >50% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; la variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.
E. coli MKTA 25922, Excelente, pero con colonias rosa-púrpura
Staphylococcus aureus MKTA 6538, totalmente inhibido

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

MODO DE EMPLEO

Tras enriquecer en caldo O157 m-TSB (BCD165), no más de 18-24 h a 41,5°C aproximadamente: Inocular en superficie muestra y diluciones para obtener muchas colonias bien aisladas.

Incubar a 37 ºC aproximadamente durante no más de18-24 horas.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

E. coli enterohemorrágico, serovariedad O157 H7 crece con colonias casi incoloras, rosa pálido-amarillentas, al no fermentar el sorbitol, de 1 mm de diámetro.

Otras cepas de E. coli crecen con colonias púrpuras.

Resembrar colonias bien aisladas en Agar Nutritivo para E.coli O157 (DMT126).

Incubar 18 h a 37°C aproximadamente.

Si se prolonga la incubación, la distinción de colonias será más difícil.

Confirmar con los tests adecuados:

Indol en Agua de triptona con triptófano (BCD129), 24 h a 37°C aproximadamente y adición de Kovacs (SBH056),

látex O157 y H7 ,

controlando con cepa + y -.

Según un método bastante difundido, si se añaden 0’1 g/l de MUG (SKL061) en el medio antes de autoclavar, las colonias de E. coli O157 H7 son las NO fluorescentes bajo luz de 366 nm (VMT050).

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY SORBITOL AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/Mac-CONKEY-SORBITOL-O157-AGAR.pdf

LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR

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LISTERIA ISO 11290 CROMOCYTOGENES (Ottav&Agosti) AGAR para la detección mucho más eficiente que Oxford, Palcam, Microblue o MacBride

INTRODUCCIÓN

¿Reconoce Ud.este medio para aislamiento y/o recuento selectivo y diferencial
de Listeria monocytogenes?

Listeria spp: (verde-azulado sin halo)
Listeria monocytogenes: (verde-azulado con halo)
Flora acompañante: (incolora)

Si ya lo ha utilizado, seguro que estárá muy contento/a por su calidad, sensibilidad,.especificidad, eficacia, precisión, exactitud y rapidez… respecto al Oxford o al Palcam: es perfecto…no tiene pegas…bueno, sólo una: que sólo se encuentra en el mercado internacional en placas preparadas ¿verdad? Eso es caro, molesto en cuanto a servicio, y somete a causa de su escasa caducidad; además, para recuentos en 1 ml, requiere placas grandes o numerosas.

TAMBIEN EN DESHIDRATADO

¿Se lo imagina en PRESENTACIÓN polvo deshidratado con suplementos? A todas sus virtudes añadiríamos:

Independencia, al no depender de importaciones/programaciones
Disponibilidad, al evitar la necesidad de tener sobrestocks
Economía, al no tener que tirar placas caducadas y al ser medio deshidratado: Precio 2 €/test real.
Larga caducidad, al ser medio deshidratado
Posibilidad de siembras en masa de 1ml…

Pues no imagine más…..MICROKIT LO HA VUELTO A CONSEGUIR!!!!!
Tras 3 años de intensa investigación nace CHROMOCYTOGENES MICROKIT AGAR. Al igual que el CHROMOSALM MICROKIT AGAR para Salmonella, hemos conseguido el mejor medio cromogénico y diferencial para Listeria monocytogenes, en medio deshidratado!
Agosti Listeria and Ottaviani Agar, preparado con los suplementos selectivos y diferenciales adecuados, es el más moderno, rápido, selectivo y diferencial medio de cultivo para el aislamiento e identificación presuntiva de Listeria monocytogenes a partir de muestras alimentarias.

Fuimos los primeros en conseguir este medio en versión deshidratada

El sustrato cromogénico detecta la beta-glucosidasa, enzima común en todas las especies de Listeria y unas pocas cepas de Enterococos y Bacilos, provocando la aparición de colonias verde-azuladas. Un sustrato adecuado detecta la fosfolipasa propia de L.monocytogenes, provocando un halo de lisis/precipitación alrededor de sus colonias. La combinación de ambos sustratos permite diferenciar las colonias de Listeria spp, (verde-azuladas sin halo opaco) de las de Listeria monocytogenes (verde-azuladas rodeadas de un halo opaco). Dado que algunas cepas de L.ivanovii son capaces de provocar halo, se requiere confirmación de las colonias presuntivas, con la simple prueba: Rhamnosa+/Xylosa– : Kit completo KMT012, tambien disponible en tubos preparados, TPL014, TPL015, y en medio deshidratado DMT167 + suplementos DMT169 y DMT171. Ahorre el coste de las galerías de identificación!

PRESENTACIÓN

CÓDIGO del medio CHROMOCYTOGENES base DMT700+. Concentración: 70,5 g/l. Ajustar a pH 7,2. Autoclavar 15 minutos a 121°C. Enfriar a 48-50°C, añadir 1 pareja de viales del suplemento coktail-Chromocytogenes SMT700+, precalentado a 48-50°C, agitar bien y verter en placas. Plaquitas herméticas con larga caducidad PPL970. Placas preparadas PPLM70 con 3 meses de caducidad a la entrega. Tubos preparados BASE TPL700 + suplemento SMT700+.

MODO DE EMPLEO:

El medio final es crema opaco.

Sembrar, dada su alta selectividad, incluso un inóculo concentrado en Fraser o LEB (nunca en Aguas peptonadas).

Incubar 18-48 horas a 30-37°C aproximadamente.

Confirmar sólo las colonias regulares, redondeadas, de 1-2 mm, verde-azuladas, con halo opaco.

Según ISO 11290, algunas cepas estresadas (en particular por acidez) o fosfolipasa-débiles pueden generar halos estrechos, que se sólo ven bien tras 4 días de incubación.

Se han reportado cepas de L.monocytogenes, especialmente procedentes de productos cárnicos, que crecen con colonias atípicas, de color blanco.

COMPOSICIÓN:

La composición de este medio es la aprobada en la versión 2004 de la Norma ISO 11290. La referencia SMT700+ de suplemento cromocytogenes engloba una pareja de viales. Contiene las cantidades indicadas en la ISO 11290-1:1996/Amd.1:2004 (E) de Ácido Nalidíxico, Ceftazidina, Polimixina B, Cicloheximida y L-phosphatidylinositol, que suplementan el medio base Ottaviani & Agosti DMT700- (enzimatic digest of animal tissues 18g, enzimatic digest of casein 6 g, yeast extract 10 g, sodium piruvate 2 g, glucose 2 g, magnesium glycerophosphate 1 g, magnesium sulfate anhydrous 0,5 g, sodium chloride 5 g, lithium chloride 10 g, disodium hydrogen phosphate anhydrous 2,5 g, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-glucopyranoside 0,05 g, Agar-agar 13,5 g en 930 ml de agua bidestilada).

CONTROL DE CALIDAD:

Listeria monocytogenes MKTA 11994, Colonias verdes con halo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 277-424%, pero de forma más selectiva y diferencial. * El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio). Muchos clientes corroboran entusiasmados estos datos diferenciales sobre la enorme fertilidad de nuestro Cromocytogenes con respecto a los más famosas marcas de Ottaviani & Agosti Agar.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/LISTERIA-CROMOCYTOGENES-OTTAVIANI-AGOSTI-AGAR.pdf

Si desea más información sobre nuestros LISTERIA CHROMOCYTOGENES (Ottaviani and Agosti) MICROKIT AGAR, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/3-Listeria-monocytogenes-monograf–a.pdf

EUGON LT100 BROTH

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EUGON LT100 BROTH es el caldo ISO para neutralización y enriquecimiento en cosmética, tan solo mejorado por LPT Neutralizing broth

Caldo para suspensión inicial y enriquecimiento en muestras con propiedades antimicrobianas, según las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de aerobios), ISO 16212 (recuento de hongos), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans)

COMPOSICIÓN

Triptona 15,0 g
Peptona de soja 5,0 g
L-Cystina 0,7 g
Cloruro Sódico 4,0 g
Sulfito sódico 0,2 g
Glucosa 5,5 g
Lecitina de huevo 1,0 g

(Fórmula en g/l) pH: 7,0 ± 0,2

Fórmula actual (Reach) sin el Octoxynol 9

PREPARACIÓN

Disolver 31,4 g en 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 ml de Polisorbato-Tween 80 atemperado, calentando en agitación hasta ebullición al menos 30 minutos hasta obtener una dispersión homogénea. Autoclavar 15 minutos a 121 ºC. No sobrecalentar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. DESHIDRATADO CODIGO: DMT204

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema

PREPARADO: Estéril, Ámbar, con fondo precipitado.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 35 ºC, aplicando el método indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

Escherichia coli MKTA 25922, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
Candida albicans MKTA 10231, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en SDA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO Y PREPARADO: tubos 9 ml, frascos 90 ml y frascotes 225 ml.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Incubar la suspensión inicial preparada a razón de 1 g de muestra por 9 g de caldo, a 35°C ± 2,5 °C, durante al menos 20 horas y como máximo 72 horas.

Según las diferentes Normas ISO de microbiología cosmética, transferir 0,1-0,5 ml a la superficie de una placa que contenga 15-20 ml de:

TSA o Eugon LT100 Neutralizing Agar, para obtener aerobios cuando son esperables a una concentración muy baja y no es necesario contarlos. Esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 48-72 horas. Observar si hay aparición de cualquier colonia e identificarla.
MacConkey Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia e identificarla por resiembra en EMB Levine Agar
Cetrimide Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia e identificarla, mediante la prueba de la citocromooxidasa y por resiembra en King A Agar (P).
-Baird Parker Agar (atención, medio invalidado mediante Seilaparfum para microbiología cosmética, usar el que dan como alternativo en su apéndice, Mannitol Salt Agar), esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia sospechosa e identificarla.
Sabouraud Caf.Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia sospechosa e identificarla.

El recuento de hongos y de aerobios se hace, según estas Normas ISO, a partir de otro caldo, el Neutralizing Diluent SCDLP20 (ref. MICROKIT DMT203).

NOTA 1:

Como observarán los clientes habituales de MICROKIT, estas Normas ISO son un paso atrás en la eficiencia de la microbiología de cosméticos y cometen graves errores metodológicos de todo tipo (siembras en superficie que han de ser en masa, medios inválidos y obsoletos, tiempos de incubación inadecuados…) que quedan solventados siguiendo el protocolo MICROKIT y las instrucciones de sus medios (LPT Neutralizing Broth, LPT Neutralizing Agar, Sabouraud Caf.Agar, MugPlusCfs.Agar, Cetrimide Agar, Mannitol Salt Agar, Biggy Agar, o bien el conjunto de medios preparados COSMETIKIT®).

NOTA 2:

Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporciona, aunque nos veamos obligados a fabricar también este medio Eugon LT100 Neutralizing Broth con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán, aunque ya hemos podido comprobar que los primeros usuarios de Seilaparfum con este medio, obtienen también calificaciones excelentes al usarlo junto al resto del protocolo MICROKIT.

Si desea más información sobre nuestro MEDIO EUGON LT 100 BRTH, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

EUGON LT100 AGAR

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EUGON LT100 AGAR es el agar ISO alternativo al TSA en cosmética, tan solo mejorado por LPT Neutralizing Agar (ISO 100.012)

Agar de uso general para muestras con propiedades antimicrobianas, según las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de aerobios), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans).

COMPOSICIÓN

Triptona 15,0 g
Peptona de soja 5,0 g
L-Cystina 0,7 g
Cloruro Sódico 4,0 g
Sulfito sódico 0,2 g
Glucosa 5,5 g
Lecitina de huevo 1,0 g
Octoxynol 9 1,0 g
Agar-agar 15,0 g

(Fórmula por litro) pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 47,4 gramos en 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 ml de polisorbato Tween 80 (SDA071). Agitar calentando hasta ebullición. Autoclavar a 121° C durante 15 minutos. El color final del medio es crema. No sobrecalentar. Agitar hasta su completa solidificación para evitar grumos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT205

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema

PREPARADO: Estéril, Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48-72 h a 37°C aproximadamente, o bien 3-5 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 98-220 %. Si se añadió TTC, colonias blancas y medio naranja alrededor.
Bacillus subtillis MKTA 6633, Excelente Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >108-276 %. Si se añadió TTC, colonias anaranjadas o doradas, medio lila alrededor que más tarde vira a naranja.
E.coli MKTA 25922, Excelente, Colonia amarilla, Viraje amarillo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 63-127 %. Si se añadió TTC, colonias crema o rojas, medio naranja alrededor.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, Colonia amarilla, Viraje amarillo. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 35-122 %. Si se añadió TTC, colonias rojas o doradas, medio lila alrededor.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 23-103 %. Si se añadió TTC, colonias anaranjadas, medio naranja alrededor.
Candida albicans MKTA 10231, Excelente, colonias blancas. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento 108 %. Si se añadió TTC, colonias blancas o rosadas.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Para aislar microorganismos procedentes de productos cosméticos inhibitorios: Repartir 0,1-0,5 ml del caldo Eugon LT100 Neutralizing Broth (MICROKIT ref. DMT204) enriquecido en la superficie de una placa. Esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 48-72 horas. Observar si hay aparición de cualquier colonia e identificarla.
Para contar aerobios procedentes de productos cosméticos inhibitorios: Sembrar en masa 1 ml de cada dilución decimal realizada en el Neutralizing Diluent SCDLP20 (MICROKIT ref. DMT203). Incubar cada placa invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 72 ± 6 horas.

NOTA: Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Agar (DMT066, DMT227, RPL074, TPL0200) y nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporcionan, aunque nos veamos obligados a fabricar también estos medios Eugon con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán.

https://www.microkit.es/fichas/EUGON-LT100-AGAR.pdf

Solicite la fórmula actualizada (Reach) en microkit@microkit.es

Si desea más información sobre nuestro MEDIO EUGON LT100 AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Mac CONKEY BROTH PURPLE

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Mac CONKEY BROTH PURPLE es el caldo Farmacopea para enriquecimiento de E.coli y demás coliformes (medio G)
Presunción y enriquecimiento de COLIFORMES (ICMSF,
FDA, APHA, OMS) (ISO 9308-2:1990)

COMPOSICIÓN

De izquierda a derecha: Mac Conkey Broth Purple sin inocular, Salmonella (no amarillo) y E. coli (amarillo).

Digerido pancreático gelatina 20,00 g
Lactosa 10,00 g
Sales biliares 5,00 g
Púrpura de bromocresol 0,01 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,3 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 35 g. en 1 litro de agua destilada.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT076

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige
PREPARADO: Estéril, violeta

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Excelente, Acido positivo, amarillo, Con gas.
Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, Acido positivo, Con gas.
Salmonella abony MKTN 6017, Bueno, Acido negativo, Sin gas.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

PRESENTACIÓN: TUBOS 9 ml CON CAMPANA, FRASCOS, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para coliformes en agua y alimentos. Medio de enriquecimiento para medicamentos. La fermentación de la lactosa con acidificación (viraje del púrpura al amarillo) y la producción de gas (burbuja en la campana Durham) indican presencia de coliformes.

SIEMBRA

Para enumerar, inocular tubos con campana de acuerdo con la técnica del Número Más Probable o bien frascos para enriquecer. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 48 horas.

INTERPRETACION

Viraje y gas: Presencia de coliformes y presencia presuntiva de E. coli. Viraje sin gas: Coliformes con baja probabilidad de E. coli. Ni viraje ni gas: Ausencia de coliformes y de E. coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros Mac CONKEY BROTH PURPLE, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/Mac-CONKEY-BROTH-PURPLE.pdf

LÍQUIDO K PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES

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LÍQUIDO K PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES ACORDE A FARMACOPEA, SOLUCIÓN DE ENJUAGUE FARMACOPEA, RINSE BROTH

Líquido K para lavado de membranas filtrantes para MF acorde con USP y con Farmacopea Europea.

COMPOSICIÓN

Peptona de carne 5,0 g
Extracto de carne 3,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6.9 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 8 g de medio en 1 litro de agua bidestilada que contenga 1 g de polisorbato 80. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es amarillo claro.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT189

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO LÍQUIDO K

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo beige
PREPARADO: Crema-amarillo
CONTROL DE CRECIMIENTO (Tras su uso y colocación de la membrana en TSA, 24-48 h a 37°C aproximadamente):

E. coli MKTA 25922 (Crecimiento correcto)
Bacillu. subtilis MKTA 6633 (Crecimiento correcto)
Staphylococcus aureus MKTA 6538P (Crecimiento correcto)
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (Crecimiento correcto)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Después de filtrar la muestra, enjuagar el filtro tres veces con 100 ml de líquido de lavado de membranas filtrantes. Si la muestra contiene muchos azúcares o grasas, puede duplicarse la concentración de polisorbato (2 g/l).

Ver tambien líquidos de enjuague de membranas A, D y K según USP en frascos estériles 100 ml y frascotes estériles 225 ml

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros LÍQUIDO PARA LAVADO DE MEMBRANAS FILTRANTES, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/LIQUIDO-PARA-LAVADO-ENJUAGUE-DE-MEMBRANAS-FILTRANTES-Y-ENVASES.pdf

ETHYL VIOLET AZIDE BROTH (EVA LITSKY)

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ETHYL VIOLET AZIDE LITSKY BROTH (EVA) es el caldo clásico confirmativo para detección y recuento de enterococos fecales por la técnica NMP. Confirmación de Estreptococos fecales a partir de caldo Azide Dextrose Rothe.

COMPOSICIÓN

Polipeptona 20,0 g
Glucosa 5,0 g
Cloruro sódico 5,0 g
Fosfato monopotásico 2,7 g
Fosfato dipotásico 2,7 g
Azida sódica 0,4 g

(Fórmula por litro) pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 35,7 g de medio en 1 litro de agua destilada. Repartir en tubos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: La Azida Sódica es tóxica (y explosiva en contacto con plomo). Evitar el contacto con la piel y las mucosas (y no desechar por las cañerías).

DESHIDRATADO CODIGO: DMT053

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 37°C aproximadamente:

Escherichia coli MKTA 25922, Negativo.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Negativo.
Enterococcus faecalis MKTA 29212, Correcto, depósito violáceo-anaranjado.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Negativo.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio selectivo para la determinación de los enterococos en el agua, que son índice de contaminación fecal. La Azida Sódica hace el medio selectivo. El medio confirma la presencia de estreptococos fecales procedentes del Caldo ROTHE (Azide Dextrose Broth).

SIEMBRA

De cada tubo positivo de Caldo Rothe se transfiere 1 ml a un tubo de Caldo Litsky y se incuba 48 horas a 37 ºC aproximadamente. Para obtener recuentos, seguir la técnica NMP (9 tubos).

INTERPRETACIÓN

Se consideran positivos los tubos que presentan en el fondo un precipitado de color púrpura- lila o naranja. Los Enterococos (E. faecalis, E. faecium) y los Estreptococos Fecales no Enterococos (S.bovis, S.equinus) son indicadores de contaminación fecal. Si en la muestra no hay coliformes fecales, es que la contaminación fué realizada semanas antes

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https://www.microkit.es/fichas/ETHYL-VIOLET-AZIDE-BROTH.pdf

Mac CONKEY AGAR

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Mac CONKEY AGAR, medio clásico para detección de E.coli y demás coliformes en muestras clínicas y medicamentos (y en cosmética, error ISO)

PHARMACOPEA MEDIO H
Aislamiento y detección de Coliformes (USP, APHA, FDA, ISO 21150 cosméticos)

COMPOSICIÓN

Serratia marcescens (a las 10), E.coli (a las 12, a las 2 y a las 6). Grupo KES (a las 4 y a las 8).

Peptona pancreática de gelatina 17,0 g
Triptona 1,5 g
Peptona de carne 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Sales biliares 1,5 g
Cloruro sódico 5,0 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar agar 13,5 g

(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 50 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar lentamente hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos ó frascos.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT073

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo, púrpura
PREPARADO: Estéril, Púrpura
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Excelente , Colonias rojas.
Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Correcto, colonia roja con precipitado.
Salmonella abony MKTN 6017, Excelente, Colonias incoloras. Con respecto a TSA estandarizado, recuento 100%.
Shigella flexneri MKTA 12022, Bueno, colonias incoloras
Escherichia coli MKTA 25922, Excelente, Colonias rojas con precipitado. Con respecto a TSA estandarizado, recuento 95%.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 y 250 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
NOTA: Medio selectivo y diferencial para el aislamiento de las enterobacterias y para la diferenciación entre los coliformes y las enterobacterias patógenas que no fermentan la lactosa con producción de gas (APHA, FDA, USP XXI). Su selectividad se debe a la acción del Cristal Violeta y de las sales biliares.

SIEMBRA

En estría sobre la placa preparada o el tubo de agar inclinado. Con los tubos 20 ml y frascos 100 ml se preparan placas por fusión del medio. Las Placas de Contacto se aplican sobre la superficie problema, un instante y sin mover, o bien se introducen en un aparato para control del aire. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 16 24 horas.

INTERPRETACIÓN

Los coliformes crecen con colonias rojas rodeadas por un halo de precipitación de las sales biliares, por acidificación. Las otras enterobacterias crecen con colonias incoloras. Proteus no invade la placa. E. coli forma colonias rojo violáceas con halo. Enterobacter aerogenes crece menor que E.coli y sin halo. Salmonella crece incolora.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/Mac-CONKEY-AGAR.pdf

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Puntos críticos en la detección de Legionella pneumophila: GVPC y BCYE Broth

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Puntos críticos en la detección de Legionella pneumophila: GVPC y BCYE Broth . Temas que crean dudas en la Norma ISO 11731

Puntos Críticos en la Detección de Legionella pneumophila (ISO 11731)

La detección y enumeración de Legionella según la Norma ISO 11731 es un protocolo notoriamente problemático para los laboratorios cuando intentan implantarla, lo que a menudo resulta en una baja sensibilidad (media del 41,61% según SEILAGUA®) o en límites de cuantificación inaceptablemente altos (a menudo $> 200 - 800 UFC/litro$ ).

Hemos identificado cinco puntos críticos que comprometen la fiabilidad del análisis y ofrecemos soluciones probadas para superarlos.

1. Problema: La No-Revitalización de Células Subletales

Tras tratamientos de hipercloración, las células de Legionella (cuya prioridad es el biofilm, no el agua) se encuentran en estado subletal y no son detectadas.

Solución MICROKIT: Hemos diseñado dos caldos revitalizantes concentrados para añadir directamente a 1 litro de muestra de agua, permitiendo que las células se recuperen antes de la filtración:
- Caldo GVPC (Selectivo): Para aguas con alta carga microbiana (e.g., aguas de refrigeración). Disponible también en formato con torundas para rascado de biofilm (Ref: RPL330/TPL016).
- Caldo BCYE (No Selectivo): Para aguas de baja carga microbiana (e.g., potable), donde la flora acompañante es escasa (Ref: TPL017).
Protocolo de Revitalización:
1. Añadir el caldo agitado al litro de agua.
2. Agitar y dejar reposar 18-24 horas a temperatura ambiente ( $18-25^{\circ} C$ ).
3. Importante: No incubar a $35-37^{\circ} C$ , ya que la multiplicación de Legionella impediría el recuento de la flora original.
Resultado Comprobado: El uso de caldo revitalizante aumenta la sensibilidad en la detección hasta un $85%$ , según demuestran los resultados de los servicios intercomparativos SEILAGUA®.

2. Problema: Filtración de 1 Litro en una Sola Membrana

Filtrar 1 litro en una sola membrana genera estrés celular y el riesgo de que la membrana se fisure, resultando en falsos negativos o recuentos muy bajos.

Solución Recomendada: Filtrar el litro de muestra en 4 tandas de 250 ml utilizando membranas separadas.
- Aunque esto aumenta el material, asegura una recuperación significativamente superior de Legionella, tal como validan los participantes de SEILAGUA®.
Consejo para Ahorrar Material: Para reducir el gasto de placas, se pueden colocar dos membranas por placa de $90 mm$ (siempre que las zonas filtradas no se superpongan), reduciendo el requerimiento a solo dos placas por litro de agua.

3. Problema: El Shock Ácido

El tratamiento ácido para eliminar la flora competitiva puede, de forma simultánea, reducir significativamente la viabilidad de Legionella, especialmente si el tiempo de contacto se prolonga.

Solución: En aguas de baja carga microbiana (como las potables), donde el riesgo de flora acompañante es menor, es recomendable omitir el shock ácido para evitar esta pérdida de viabilidad.

4. Problema: La Selectividad Excesiva del Agar GVPC

El medio GVPC Agar es tan selectivo que a menudo inhibe incluso el crecimiento de Legionella. Las cepas certificadas muestran que los recuentos en GVPC son típicamente un logaritmo (factor 10) inferiores a los obtenidos en BCYE.

Solución (Doble Placa): En aguas de baja carga microbiana, se propone utilizar dos placas por litro:
- Una placa de GVPC Agar (selectivo).
- Una placa de BCYE Agar (no selectivo) para alertar sobre una selectividad excesiva en la placa GVPC.
Calidad de los Medios: Es crucial usar placas preparadas de máxima recuperación (como nuestras referencias PPLS30 y PPLS31) en lugar de medios deshidratados o placas económicas, ya que la composición de la ISO 11731 es difícil de optimizar.
Control de Crecimiento (No-Legionella): Para el control negativo de crecimiento (medio donde Legionella no debe crecer), sugerimos utilizar el Nutrient Agar o PCA-Water (YEA), que es más económico y accesible que el BCYE-Cys o el Agar Sangre.

5. Problema: Inmunodetección por Látex (Baja Robustez)

La confirmación serológica de colonias suele realizarse mediante pruebas de látex, que es la técnica inmunológica menos robusta y que ofrece más problemas de sensibilidad. La inmunofluorescencia ya está en desuso.

Solución Rápida y Robusta: Sugerimos el uso de inmunocromatogramas (Rapid Sticks), como los M-Ident Virapid Legionella (Ref: MKTVR2). Esta alternativa ofrece un máximo rendimiento, bajo coste y rapidez superior a las pruebas de látex, tanto en género como en especie, como en serogrupo.

https://www.microkit.es/pdf/legionella-virapid.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/9-Legionella-monograf–a.pdf

Mac CONKEY AGAR MUG

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Mac CONKEY AGAR MUG es un medio fluorogénico para detección diferencial de E.coli (fluorescente) de los demás coliformes (no fluorescentes)

Enumeración de coliformes y diferenciación de E.coli en la primera siembra.

COMPOSICIÓN

Peptona de caseina 17,000 g
Peptona de carne 3,000 g
Cloruro sódico 5,000 g
Lactosa 10,000 g
Sales biliares 1,500 g
Rojo neutro 0,030 g
Cristal violeta 0,001 g
MUG 0,100 g
Agar agar 13,500 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,1 ± 0,2

Mac Conkey Agar MUG con E. coli fluorescente (curiosamente rosa en vez de azul) bajo luz U.V. 366 nm.

PREPARACIÓN

Disolver 50 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar agitando hasta ebullición Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT074

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 h a 37°C aproximadamente:

Salmonella abony MKTN 6017, Colonia Incolora sin zona fluorescente.
Bacillus subtilis MKTA 6633, Negativo.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Correcto, colonia incolora sin zona fluorescente.
Escherichia coli MKTA 25922, Correcto, Colonia violeta oscuro con zona fluorescente.
Klebsiella oxytoca MKTA 13182, Correcto, colonia violeta oscura sin zona fluorescente.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS 20 ml, FRASCOS PREPARADOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO, DESINFECTEST-EC.

NOTA: El compuesto fluorogénico 4 Metil Umbeliferil Beta D Glucurónido (MUG), añadido al Mac Conkey Agar, permite la detección directa en placa de E. coli. La enzima Beta Glucuronidasa, presente en el 97% de las cepas de E.coli, hidroliza el MUG presente en el medio, liberando el compuesto 4 Umbeliferona, fuertemente fluorescente cuando se observa en la oscuridad bajo luz de 366 nm (Linterna MICROKIT). La mayoría de cepas enteropatogénicas de E.coli son Beta Glucuronidasa +. Miembros del género Citrobacter y del grupo KES (Klebsiella, Enterobacter, Serratia) pueden dar falsos positivos con MUG: Confirmar con la prueba del Indol, que sólo es positiva para E. coli.

SIEMBRA

Preparar placas fundiendo tubos o frascos y sembrar en estría o en masa. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 18 24 horas. Si se prolonga la incubación no se distinguirán las colonias fluorescentes de las no fluorescentes.

INTERPRETACIÓN

Enterobacterias: Colonias incoloras. Coliformes: Colonias rojas. E. coli: Fluorescencia azul bajo luz U.V. 366 nm (linterna MICROKIT), en la oscuridad. Confirmar con la prueba del indol.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros MEDIO Mac CONKEY AGAR MUG , rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/Mac-CONKEY-AGAR-MUG.pdf