Archivo de la categoría: KITS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

Kits para análisis microbiológicos (ISO 17381)

DryPlates® SAL (Detección de Salmonella spp.)

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Cromosalm ABC formato placa deshidratada: Las DryPlates-SAL junto a las DryPlates-XLD permiten sembrar enriquecimientos en estría

DryPlates-SAL y DryPlates-XLD

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinaria caducidad (1 año desde fabricación).


El Agar DCA (Pharmacopea medio J) es un medio excelente (selectivo y diferencial) para detección selectiva de Salmonella spp. en muestras farmacéuticas, cosméticas, alimentarias, acuáticas y clínicas. La adición de dos sustratos cromogénicos muy específicos (X-alfa-Gal y CHE-Gal) lo convierten en el ya clásico Agar CromoSalm de MICROKIT (en la ultima versión de la ISO 6579 lo han llamado medio ABC), que supera en sensibilidad y especificidad incluso a los más modernos medios cromogénicos diseñados para Salmonella spp. en las últimas décadas.

En formato DryPlate®, este medio permite la rápida detección de Salmonella spp. en sólo 16h tras el enriquecimiento. Uniendo este avance a un enriquecimiento mixto acelerado (mezclando los medios del preenriquecimiento revitalizador y neutralizante: 225 ml Buffered Peptone Neutralizing Water de MICROKIT DMT011+ enriquecimiento selectivo 18 ml SS Broth concentrado [x5] de MICROKIT DMT067) e incubándolos juntos en las 18 h previas; permite la detección fiable de Salmonella en sólo 34 h desde la muestra inicial.

Las colonias crecen verde-azuladas, y al proceder necesariamente de enriquecimiento, suelen ser tantas que sólo se suelen apreciar mediante el viraje del medio a color verde-azulado. De modo que es mejor prehidratar la DryPlates con 1 ml de agua estéril y sembrar acto seguido el enriquecimiento en estría.

Por todo ello, DryPlates® SAL es la herramienta que estaban esperando todas las fábricas de productos alimenticios para poder liberar lotes gracias a la detección precoz de este patógeno, que les retrasaba hasta ahora el resultado global del laboratorio microbiológico de 3 a 5 días.

Para abarcar todas las cepas de Salmonella, duplicar la estría en DryPlates® SAL, con estría en DryPlates® XLD.

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para detección de patógenos tras enriquecimiento y para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar con un asa con caldo enriquecido (ideal SS Broth Microkit, ya que es un caldo que funciona mucho mejor que Rappaport o MKT, sea cual sea el medio posterior de aislamiento), sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrado y no al revés). O también un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies.
  2. El viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio. Ver modo de empleo completo en el siguiente apartado (muestras de 1 ml)
  3. Las DryPlates son las únicas placas deshidratadas que permiten la siembra en ESTRÍA y por tanto, detectar patógenos de la forma más fiable: tras el enriquecimiento de la muestra.
  4. En cambio sembrar 1 ml de caldo enriquecido, como indican los otros fabricantes, casi siempre da falsos negativos (millones de ufcs generadas tras el
    enriquecimiento, compiten por el sustrato en placa y crean millones de microcolonias diminutas, invisibles, con un cambio de color de todo el medio, que a menudo resulta demasiado tenue, indetectable).
  5. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua y nunca el agua sobre el disco nutritivo), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire). Ver modo de empleo completo en el siguiente apartado (muestras de 1 ml).

CÓMO USARLAS para muestras de 1 ml

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa de una placa DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la placa en una superficie horizontal, sin inclinaciones. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida (si es espesa, realice diluciones decimales hasta que sea acuosa), bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  3. Voltear la tapa con disco nutriente para volver a cerrar la placa, con cuidado para que el disco nutriente caiga centrado sobre la muestra; de este modo se repartirá homogéneamente en un instante. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
    Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa). No añada la muestra sobre el disco nutriente, ya que no difundirá homogéneamente y tardará mucho en hacerlo. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto sea heterogéneo).

  4. Incubar en estufa,

  5. IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas vacías (como“base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa.
  6. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) son las estándar: 35-37ºC durante 16-24 (48)h. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda.
  7. Las cepas de Salmonella spp. que no estén en estado subletal o estresado, crecerán desde las primeras 16h como colonias, virajes o estrías verde-azulados (detección precoz). Si no aparecieran estos cambios en 16h, siga incubando para revitalizar las células dañadas sub-letalmente durante la fabricación del producto, hasta las 48 h.
  8. Los resultados de las DryPlates®-SAL son mucho más rápidos (16h respecto a 24-48h) que los de los medios agarizados clásicos.
  9. Leer los resultados buscando sólo el color diana: Salmonella spp. crece de color verde-azulado (sean colonias aisladas, sean estrías, sean zonas del medio o sea el medio completo), mientras otras enterobacterias pueden crecer, pero con colores negros (ej: Citrobacter spp.) o crema (ej: Proteus spp.).

MODO DE EMPLEO para muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades:
  2. Prehidrate el disco nutriente incluido en la placa con 1 ml de agua estéril (o solución salina, Ringer, Buffered Peptone Water, Buffered Peptone Neutralizing, LPT Broth…). Recuerde, añada el disco sobre el ml de agua y no al revés.
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 ó de 0,22 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® SAL , evitando la formación de burbujas entre ambos. Evite estresar las posibles células de Salmonella spp. retenidas en la membrana: es conveniente enjuagar/revitalizar la membrana una vez recién filtrada la muestra, filtrando acto seguido por ella 100 ml de, por ejemplo, Buff.Peptone ClNa Solution pH 7,0 Pharmacopea (MICROKIT RPL115, DMT301); apague la bomba en cuanto se haya terminado el líquido del embudo de filtración y deposite la membrana sin demora sobre la DryPlates® SAL prehidratada.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: VRB747).

ATENCIÓN

¿Cual es la diferencia entre DryPlates-SAL y las demás placas deshidratadas del mercado? Con DryPlates puede estriar el caldo enriquecido, tal y como dictan los más lógicos protocolos de buenas prácticas de laboratorio en microbiología. Así, al no inocular masivamente 1 mL de muestra enriquecida, como le sugieren otras placas deshidratadas del mercado, distinguirá la estría y las colonias verdes de Salmonella, del medio blanco, y no le pasarán desapercibidas como microcolonias imperceptibles al ojo humano.

https://www.microkit.es/fichas/Dry-Plates-SAL-Prospecto.pdf

GAMA COMPLETA

Otros muchos medios en DryPlates®:

Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en medicamentos, en bebidas alcohólicas),

Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos),

Enterobacterias (VRBG o cromogénico),

Coliformes y E.coli,

E.coli,

Staphylococcus aureus,

Bacillus cereus,

Pseudomonas aeruginosa,

Burkholderia cepacia,

Candida albicans,

Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir),

Salmonella spp. (Cromosalm y XLD),

Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae,

Antiobiograma cromogénico,

UTIs…

Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.

https://www.microkit.es/monograficos/5-Salmonella-y-Shigella-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

DryPlates X-Staph

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DryPlates para la detección de Staphylococcus aureus tras enriquecimiento en aguas, alimentos y cosméticos.

DryPlates X-Staph

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa. Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.

CROMOKIT® X-STAPH Agar

es el medio cromogénico diseñado por MICROKIT®, donde Staphylococcus aureus crece con colonias violetas o azul oscuro, índigo, mientras otros Gram positivos (S.epidermidis, Bacillus spp.) lo hacen con colonias azul claro, turquesa. Medio válido para muestras de aguas, alimentos, cosméticos…
¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para detección de patógenos tras enriquecimiento y para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar con un asa con caldo enriquecido (o bien un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies), sobre cualquier DryPlates®, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el ml de agua centrado y no al revés). El viraje de la estría y las colonias aisladas al final de la misma contrastarán mejor con el color de base del medio.
    Las DryPlates son las únicas placas deshidratadas que permiten la siembra en ESTRÍA y por tanto, detectar patógenos de la forma más fiable: tras el enriquecimiento de la muestra. En cambio sembrar 1 ml de caldo enriquecido, como indican los otros fabricantes, casi siempre da falsos negativos (millones de ufcs generadas tras el enriquecimiento, compiten por el sustrato en placa y crean millones de microcolonias diminutas, invisibles, con un cambio de color de todo el medio, que a menudo resulta demasiado tenue, indetectable).
  2. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua centrada y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental (aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire)

NOTA DESDE 11-2017:

No resulta recomendable este medio en DryPlates para recuentos, dado que la molécula cromogénica es enorme y un alto porcentaje de la misma escapa de la red textil, pudiendo dar lugar a resultados falsamente negativos por empobrecimiento del color de los microorganismos allí crecidos. En cambio la DryPlates-XStaph es muy útil para detección tras enriquecimiento, porque tras enriquecer, los microorganismos están muy concentrados y las colonias originadas se evidencian muy bien en la estría, que queda muy nítida con su color azul sobre el disco blanco. Para recuentos es mejor utilizar este medio cromogénico, pero en cualquiera de sus demás versiones: polvo deshidratado para autoclavar, placas preparadas, plaquitas herméticas, tubos o frascos, ya que en ellos al hidratarse el cromógeno, se reparte homogéneamente en el 100% de la superficie del medio.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes. Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747).

DryPlates para la detección de Staphylococcus aureus tras enriquecimiento en aguas, alimentos y cosméticos. Mantenga un stock de medios de cultivo de larguísima caducidad, para emergencias, o para uso rutinario.

https://www.microkit.es/fichas/Dry-Plates-X-STAPH-Prospecto.pdf

GAMA COMPLETA

Otros muchos medios en DryPlates®:

Aerobios totales (en alimentos y cosméticos, en aguas y en aguas oligotróficas),

Hongos (levaduras y mohos),

E.coli y demás coliformes,

Enterobacterias,

Bacillus cereus,

Pseudomonas aeruginosa,

Burkholderia cepacia,

Candida albicans,

Enterococos fecales,

Salmonella spp.,

Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae,

Otros medios en formato DryPlates®: consúltenos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles. Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.
Medio validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones muy superiores (hasta el 280%) a la de Baird Parker, rpf y Mannitol Salt Agar, evitando los falsos positivos y falsos negativos de los dos primeros, y los falsos positivos del tercero.
DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L.

https://www.microkit.es/monograficos/1-Estafilococo-dorado-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

DryPlates TC-WATER

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DRYPLATES TC-WATER (18h a 35ºC, 36h a 22ºC)

DryPlates TC-WATER (Recuento de aerobios en aguas)

https://www.microkit.es/pdf/Dry-Plates-2021.pdf

DryPlates® TC-Water: DPP003- (caja 60 u) y DPP003+ (caja 1200 u)
DryPlates TC-WATER (Recuento de aerobios en aguas) medio ISO 6222.

Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente, estériles y listas para su uso inmediato, que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en frío, lo que ahorra el hervido-fusión-enfriado-a-45ºC y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio clásico para siembra por inclusión en masa.

Extraordinariamente alta caducidad: 1 año desde fabricación.

Yeast Extract Agar-YEA, Agar Nutriente para aguas o PCA-water son tres formas de denominar al Agar oficial de recuento de aerobios en aguas de consumo humano (ISO 6222).

La adición de un cromógeno termoestabilizado permite obtener las colonias de aerobios de color rojo, que de este modo contrastan mucho mejor con el medio o con la membrana.

El medio es válido para muestras de aguas, aunque también es útil para alimentos, cosméticos, ambientes…

¡Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados!

MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml DryPlates TC-WATER (Recuento de aerobios en aguas)

  1. Con unas pinzas, sacar un disco nutriente de su bolsa y colocarlo en una placa cassette DryPlates® recién abierta.
  2. Colocar la placa cassette en una superficie horizontal, sin inclinaciones.
  3. Añadir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra líquida , bien centrada (mejor que la muestra no toque las paredes internas de la placa, para que la autodifusión sea mucho más rápida y homogénea)
  4. Volver a cerrar la placa cassette. Con un poco de práctica le saldrá perfecto.
  5. Si lo prefiere, puede tomar el disco nutriente con unas pinzas y colocarlo directamente sobre el ml de muestra, previamente dispensado en el centro de la placa cassette.
  6. La formación de “islas secas” sin muestra, sólo debe preocupar si éstas son muy grandes, ya que al incubar desaparecerán y además el número de colonias por placa cassette en 1 ml de muestra será el mismo con o sin ellas (aunque haya calvas sin colonias y el reparto de colonias sea heterogéneo).
  7. Incubar en estufa, IMPORTANTE: en atmósfera húmeda (dejar un vaso de agua siempre lleno en cada esquina de la estufa, total 4 vasos), sin voltear las placas cassette (el disco abajo) para que no se fugue parte de muestra durante la incubación.
  8. Nunca incube las DryPlates® directamente sobre la bandeja de la estufa, intercale dos placas cassettes vacías (como“base porta-placas” para poner entre la torre de placas y la base metálica de la estufa) para que la DryPlate® no se seque durante la incubación por el exceso de calor del metal; igualmente no deje que la torre de placas cassette toque la paredes de la estufa.
  9. Las condiciones de incubación (tiempo y temperatura) estándar son: 22ºC, 3 días (aunque con este formato, la mayoría de colonias rojas ya han crecido en sólo 36-48h) ó 35ºC, 2 días (aunque en este kit, aparecen ya la inmensa mayoría de colonias rojas, desde las primeras 18-24h de incubación).
  10. ¡Detección precoz en las primeras 18h!
  11. Antes de leer, es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue húmeda, porque si se secó durante la incubación, los recuentos podrían no ser válidos a causa de las cepas más lentas.
  12. Leer los resultados contando las colonias rojas.
  13. Si no se ven colonias pero aparecen virajes del medio a color rosa, se debe sospechar que hay una inmensa concentración de microorganismos en la muestra (miles o millones de microcolonias):
  14. repetir en otras DryPlates®-TC Water a mayor dilución (1:10 y 1:100, al menos).

USO en muestras líquidas filtradas (100, 250… ml)

  1. Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades
  2. Prehidrate el disco nutriente en la placa con 1 ml de agua estéril (o de la misma agua de muestra).
  3. Filtrar la muestra líquida (100, 250… ml) por una membrana estéril de 0,45 μm y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates® TC Water.
  4. Si pre-hidrató el disco con 1 ml agua de muestra y filtró por ejemplo 100 ml, recuerde que su recuento será en 101 ml, aunque este 1% es irrelevante en microbiología.

MODO DE EMPLEO para ambientes interiores (superficies y aires)

  1. Puede estriar un escobillón con el que haya barrido una muestra de superficies, sobre la DryPlates® TC-Water, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril.
  2. O para recuentos, agitar el escobillón en 1 mL de agua estéril y añadir éste a la DryPlates no prehidratada.
  3. También puede dejar la DryPlates® de cualquier medio, previamente hidratada con 1 ml de agua estéril (recuerde, el disco sobre el agua y no al revés), abierta durante 10-15 minutos en los puntos críticos de la sala, para realizar una estimación “de campo” de la flora ambiental
  4. aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m3 de aire

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

DryPlates TC-WATER (Recuento de aerobios en aguas).

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los discos nutrientes.

Eso sí, es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados.

Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las DryPlates®, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: MICROKIT VRB747), bien cerrada.
Otros muchos medios en DryPlates®:

Aerobios totales (medios diferentes en alimentos, en cosméticos, en aguas, en aguas oligotróficas, en

medicamentos y en bebidas alcohólicas, según la Normativa vigente en cada producto),

Levaduras y Mohos (en alimentos, en cosméticos, en aguas, en medicamentos),

Enterobacterias (VRBG o cromogénico),

Coliformes y E.coli,

E.coli,

Staphylococcus aureus,

Bacillus cereus,

Pseudomonas aeruginosa,

Burkholderia cepacia,

Candida albicans,

Enterococos fecales (SB ó KAA a elegir),

Salmonella spp. (Cromosalm y XLD),

Vibrio parahaemolyticus-Vibrio cholerae,

Antiobiograma cromogénico, UTIs…

Si necesita otros medios en formato DryPlates® podemos diseñarlos especialmente para Ud.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseño y fabricación 100% españoles.

Derechos de explotación de la PATENTE concedidos en exclusiva a Laboratorios MICROKIT, S.L. tras más de 23 años de ensayos y mejoras para poder ofrecerle el mejor y más versátil producto de estas características.

Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140, con recuperaciones similares al mismo medio clásico agarizado.

DryPlates® es marca registrada por Laboratorios MICROKIT, S.L.

Texto elaborado el 04/Junio/2014, actualizado el 7/02/2020

DryPlates TC-WATER (Recuento de aerobios en aguas).

https://www.microkit.es/monograficos/19-Monograf–a-Recuento-en-masa-sin-tener-que-perder-el-tiempo-fundiendo-agares.pdf

Haga sus consultas de este medio en: microkit@microkit.es

Haga sus pedidos de este medio en: pedidos@microkit.es

En este vídeo puedes entender mejor la hazaña de las DryPlates® y cómo usarlas:

https://www.youtube.com/watch?v=vkdRD5ulpSY&t=29s

MICROKIT P/A CROMOKIT 2019

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Presencia / Ausencia con caldos cromogénicos

Caldos microbiológicos cromogénicos (P/A). En Julio de 2019 lanzamos dos nuevos medios cromogénicos P/A CROMOKIT que no generan gas, para que puedan usarse en cubetas miniaturizadas cerradas de NMP. Ambos medios están adaptados para poder usarse también en agua de mar. Nuestro PSEUDOCULT P/A clásico ya podía usarse desde su creación en cubetas miniaturizadas cerradas NMP y en agua de mar, con la ventaja de proporcionar viraje de color muy evidente a rosa, no sólo fluorescencia.

https://www.microkit.es/pdf/kits-pa-polvos.pdf

COLICULT-PLUS ( ONPG+MUGChrom)
COLIFORMES / Escherichia coli
Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua continental o marina

El medio COLICULT-PLUS (ONPG-MUGChrom) en viales P/A alerta de la presencia y/o recuento de E.coli (viraje a verde) y demás coliformes (viraje a amarillo-naranja). La ventaja sobre el medio ISO ISO 9308-2:2012 es el derivado cromogénico del MUG del Siglo XXI, que hemos denominado “MUGChrom” y que en vez de fluorescencia en presencia de E.coli, genera viraje del agua a verde. Los demás coliformes, gracias al ONPG cromogénico, generan viraje del agua a amarillo anaranjado. De modo que el medio detecta simultáneamente la enzima β-galactosidasa de los coliformes y la enzima β-glucuronidasa de E. coli.

MODO DE EMPLEO Caldos microbiológicos cromogénicos (P/A):

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen.

  1. Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar
  2. Añadir todo el contenido de un vial sobre el agua; en el caso de los botes de 100g de polvo estéril
  3. Añadir una cucharadita rasa sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar
  4. Incubar 18-28 horas a 35-37° C (Coliformes totales y E.coli) ó a 44° C (Coliformes Fecales y
    E.coli). La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubarinmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para agua de mar (AM), al tratarse de un sustrato que inhibe el crecimiento de estas bacterias, diluir 10 ml de AM en 90 ml de agua destilada estéril antes de utilizar el medio. Multiplicar por 10 los resultados.
Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos
cucharaditas por muestra.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color amarillo-naranja (β-galactosidasa-ONPG)
demuestra la Presencia de Coliformes en la muestra de agua. El viraje a verde (β-glucuronidasa-MUGChrom) demuestra la presencia de E.coli en la muestra de agua (confirmar con 0,5 ml de KOVACS-SBH056): anillo rojo de Indol en superficie es prueba positiva. E.coli O157 H7 se detecta por ser β-galactosidasa + (vira a amarillo-anaranjado), de acuerdo con la definición moderna de coliforme; aunque es una cepa β-glucuronidasa – (no vira a verde a pesar de ser E.coli); y es indol + (anillo rojo).

 

ENTEROCULT X-Enterococcus Broth
Enterococos fecales
Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua continental o marina

El medio CROMOKIT® X-Enterococcus Broth en viales P/A alerta de la presencia y/o recuento de Enterococos fecales (viraje a azul marino). La ventaja sobre el clásico Enterocult es el sustrato cromogénico del Siglo XXI, que hemos denominado “ETCChrom” y que en vez de ennegrecer en presencia de los Enterococos fecales, genera viraje del agua a azul. Medio acorde a la EPA.

MODO DE EMPLEO Caldos microbiológicos cromogénicos (P/A):

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen.

  1. Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar
  2. Añadir todo el contenido de un vial sobre el agua; en el caso de los botes de 100g de polvo estéril, añadir una cucharadita rasa sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar.
  3. Incubar 18-28 horas a 35-37° C ó a 44° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para agua de mar (AM), al tratarse de un sustrato que inhibe el crecimiento de estas bacterias, diluir 10 ml de AM en 90 ml de agua destilada estéril antes de utilizar el medio. Multiplicar por 10 los resultados.
Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos cucharaditas por muestra.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color azul demuestra la Presencia de Enterococos fecales en la muestra de agua.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.
EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA LOS VIALES O EL BOTE BIEN CERRADOS EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR LOS VIALES O EL BOTE BIEN CERRADOS EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

PRESENTACIÓN Caldos microbiológicos cromogénicos (P/A):
COLICULT-PLUS ONPG-MUGChrom: DMT575 (500 g de polvo no estéril), DMTI575- (100 g de polvo esterilizado), FPA575 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 100 ml de muestra de agua)
ENTEROCULT X-Enterococcus Broth: DMT580 (500 g de polvo no estéril), DMTI580- (100 g de polvo esterilizado), FPA580 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 100 ml de muestra de agua)
PSEUDOCULT: DMT908 (500 g de polvo no estéril), DMTI908- (100 g de polvo esterilizado), FPA908 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 100 ml de muestra de agua), FPA903 (40 ó 400 viales monodosis de polvo estéril para 250 ml de muestra de agua)

CUBETAS NMP MINIATURIZADAS PARA RECUENTO: CONSULTAR

Si desea seguir el Reglamento UE 2-2019 que entrará en vigor en 2021 mediante el cual los lobbies del laboratorio han conseguido barrer la innovación que aporta el milagro mediterráneo (la PIME), al exigirnos a los inventores de productos/métodos para industria alimentaria, el inviable pago de cientos de miles de € a AOAC, AFNOR o similar por cada referencia innovadora; nos puede pedir CCA Agar ISO 9308-1:2014 (Ref: DMT400 en deshidratado, TPL400 en tubo, ECOP23J en Ecoplacas, ECOPQ08J en Ecoplaquis MF…), ya que de este modo no es un método alternativo y por tanto ningún inspector ni auditor puede impedirle emplearlo. Aunque perderá el valor añadido del kit: su extraordinario poder de detección sin falsos negativos, el ahorro de filtración de membrana…. La mejor solución sería realizar una proporción residual pero razonable de muestras con el medio ISO en formato clásico, para presentar sus informes a inspección de Sanidad, y asi poder seguir usando internamente en paralelo este kit en esas y en las demás muestras, para la mejora, fiabilidad y rapidez de sus resultados de autocontrol. A fin de cuentas, este reglamento que corta de cuajo el I+D que no provenga de multinacionales, no es nada nuevo: los kits de autocontrol nunca han servido para obtener resultados oficiales, pero ayudan a la industria a tomar las mejores decisiones.El usuario es el ún ico responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

KOSMLAB

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KOSMLAB
KosmLab nace de MICROKIT, con la idea de ofrecer otros servicios al laboratorio tras la experiencia acumulada de 33 años:

Análisis microbiológicos de cosméticos: seguridad lote tras lote. Y en aguas y ambientes interiores. Cursos, validaciones y auditorías.

 

  • Auditorías/Consultorías para la optimización de métodos y protocolos microbiológicos 
  • Cursos de iniciación al autocontrol microbiológico en fábricas de cosméticos
  • Cursos que incluyen las Validaciones de sus métodos de análisis microbiológico
  • Análisis microbiológicos de cosméticos, aguas y ambientes. Los análisis más completos: encontramos patógenos que nadie más busca pero le crearían retiradas de mercado si estuvieran en sus productos
  • Test de eficiencia antimicrobiana
  • Creación de medios de cultivo MICROKIT más adecuados para microbiología de cosméticos, donde los microorganismos se encuentran subletales a causa de los conservantes y a pesar de la neutralización de los mismos: LPT Neutralizing Broth, PCA+TSA cromogénico, Rapid YM Agar, MugPlus Agar, Rapid Cetrimide Agar, Baird Parker cromogénico (BPX19 Agar), CUP12A para el resto de patógenos cosméticos que han provocado retiradas de mercado.
  • Primer laboratorio de España con 100% de aciertos en las 3 rondas intercomparativas en las que ha participado en 2022 (GSC e ielab).

¿Necesita externalizar sus análisis microbiológicos de cosméticos y sus materias primas? 

https://cosmlab.wixsite.com/cosmlab

Recuerde: Las Normas ISO de microbiología cosmética NO SON de obligado cumplimiento. Lo único obligado es la legislación: el Reglamento  CE 1223/2009  y el RD 85/2018 de 23/Febrero, que exigen la seguridad e inocuidad del cosmético.

Esas palabras tan laxas, traducidas a la microbiología, significan sólo una cosa: ausencia de patógenos.

Por eso hay tantas retiradas de mercado en este sector cosmético por problemas microbiológicos, porque la mayoría de fábricas con autocontrol y la mayoría de labs externos, siguen convencidísimos en su «matrix ISO» (incluidos algunos inspectores), y casi nadie busca otros patógenos, que son los que provocan dichas retiradas.

Porque los responsables de Salud Pública que realizan campañas de análisis de cosméticos tomados al azar en el mercado, sí que los buscan, y por eso los encuentran, ya que nadie los ha buscado antes y los cosméticos han sido liberados al mercado no siendo seguros / inocuos.

SERVICIOS DE KOSMLAB

 

LA GRAN DIFERENCIA

Haga una prueba: envíenos unas cuantas muestras de sus cosméticos al servicio de análisis microbiológico completo (lo que realmente le está pidiendo la legislación) y podrá comprobar en los informes, de qué estamos hablando. Es la diferencia entre:

a) cumplir con la legislación, o

b) dejarse llevar por la moda impuesta por las Normas ISO de control microbiológico de cosméticos, que se quedan muy cortas (sólo 4 patógenos frente a los 14 que están provocando reiteradas retiradas de mercado de cosméticos por imposición de las autoridades sanitarias), que de este modo, le están diciendo claramente si la opción correcta es la a) o la b).

COSMETIKIT® WATER

4 respuestas

KIT COMPLETO PARA MICROBIOLOGÍA DE AGUAS DE USO COSMÉTICO

Kit Microbiología Aguas Cosméticas para control completo de las aguas empleadas en la fabricación de productos cosméticos

COSMETIKIT® WATER es un KIT COMPLETO  para análisis directo de recuento de aerobios y de Presencia/Ausencia de patógenos en frascos toma-muestras, sin necesidad de aparato de filtración. Contiene inactivadores del cloro. Para control completo de las aguas empleadas en la fabricación de productos cosméticos

COSMETIKIT WATER

INTRODUCCIÓN

El control microbiológico del agua  es de la máxima importancia en la elaboración de productos cosméticos porque se trata de una de las materias primas usadas en mayor cantidad y también por usarse para tareas de limpieza, enjuague de envases, equipos, etc.

Una calidad deficiente en el agua de uso cosmético puede causar contaminaciones en el producto final con serias repercusiones en la salud del usuario final y en la estabilidad del producto.

La actual legislación garantiza la calidad del agua a la salida de la potabilizadora y a la salida de los grifos públicos, pero NO a la salida de los grifos privados que utilizan el consumidor y las industrias. Las continuas obras públicas, así como las internas de los edificios, ponen en grave peligro la seguridad final del agua, a menudo por infiltración de aguas fecales en la red potable; por ello es imprescindible su re-control privado.

SON KITS VALIDADOS

Los kits P/A de MICROKIT han sido validados en España, comparando durante años los datos de decenas de laboratorios mediante análisis clásico por Filtración de membrana y los resultados obtenidos mediante esta cómoda técnica. En nuestra página Web (www.laboratoriosmicrokit.com) encontrará las 4 publicaciones que respaldan esta validación y demuestran que el método no sólo es tan bueno como el de Filtración de membrana, sino incluso mejor.

Además, es mucho más sencillo y rápido de manejar, ahorrando el uso de aparatos de filtración y dejando el análisis microbiológico del agua al alcance de todo usuario, sin necesidad de un laboratorio especial.

Realice un análisis semanal (para mayor seguridad, uno diario) para verificar que el agua que sale de la potabilizadora municipal llega pura a sus instalaciones y se mantiene limpia en ellas, sin infiltración de aguas residuales ni otros serios problemas microbiológicos.

Según la reglamentación actual (R.D.140 de 2003) un agua sólo es apta para consumo humano o para uso en fábricas de alimentos, si no contiene patógenos o sus indicadores (Coliformes- E. coli, Enterococos fecales, Clostridium perfringens y sus esporas) en 100 ml y si el recuento total de aerobios asociados al hombre es inferior a 20 ufc/1 mililitro (incubando 24 h a 37 ºC) y el recuento total de aerobios saprófitos es inferior a 100 ufc/1 mililitro (incubado 72 h a 22 ºC), en ambos casos en medio nutritivo YEA. Sin embargo, no existen criterios específicos para aguas de uso cosmético.

AGUAS DE USO COSMÉTICO

Dada la especial idiosincrasia de la industria cosmética, la prudencia exige el control de los microorganismos que más frecuentemente dan problemas en el sector. Hemos elegido para este kit como único indicador fecal la detección de Enterococos fecales, ya que es el parámetro que demuestra ser mejor detectado en los laboratorios que participan en los intercomparativos SEILAGUA®.

La detección de Coliformes y E.coli puede considerarse redundante, ya que si están presentes, también lo van a estar los Enterococos fecales, que además nos indican una contaminación más amplia en el tiempo (E.coli en aguas sólo es viable 24 h mientras los Enterococos fecales resisten 1 semana). No obstante si desea añadir este parámetro a su control, utilice además el kit P/A RPL303.

Los clostridios son indicadores de posible presencia de enterovirus y protozoos en aguas naturales tratadas, lo cual no resulta muy probable de encontrar en el sector cosmético. No obstante si emplea aguas de pozo, utilice además el kit P/A RPL308.

Hemos elegido como parámetros adicionales en el kit, la detección de Pseudomonas aeruginosa y la detección de Burkholderia cepacia, los dos patógenos que dan problemas habituales tanto en aguas tratadas como en aguas purificadas.

Por fin, añadimos los dos recuentos de aerobios totales en las cómoda DryPlates®, medios preparados pero deshidratados, que absorben directamente 1 ml del agua de muestra sin necesidad de fundir medios sólidos. 

MODO DE EMPLEO DEL COSMETIKIT® WATER

1. Presencia o Ausencia de Enterococos fecales, de Pseudomonas aeruginosa y/o
de Burkholderia cepacia:

Añadir 100 ± 1 ml del agua de muestra a cada uno de los
tres frascos (RPL301, RPL302 y RPL323), sin llenar para dejar una cámara de aire,
agitando suavemente para diluir su contenido concentrado. Cerrar el tapón e incubar
18-72 horas a 35-37ºC.

Si el frasco de Enterococos (ámbar con menisco azul) se
vuelve negro y pierde su iridiscencia (Fig.1, izquierda), hay contaminación fecal por
infiltración de aguas residuales.

Si el frasco de Pseudomonas aeruginosa (incoloro)
se vuelve rosa o rojizo (Fig.2, izquierda), y/o el de Burkholderia cepacia
(anaranjado) se vuelve rojo vino tinto (Fig.3, izquierda), estos patógenos se han
infiltrado en nuestras aguas.

La presencia de cualquiera de estos microorganismos
impide el uso del agua para fabricación de productos cosméticos.

Añada cloro o lejía

hasta el borde de los botes usados, o bien autoclávelos, antes de desecharlos.

+ Fig.1 –                                                                   +Fig.2-                                                + Fig.3 –

2.Recuento de aerobios a dos temperaturas:

Añadir con una pipeta estéril 1 ml del
agua de muestra en el centro de una placa vacía y depositar encima el disco Dry-
Plate®-TC-R2. Dejar embeber el medio deshidratado y cerrar.

Repetir la operación
con otra Dry-Plate®-TC-R2. Incubar una placa 24 h a 35 ºC aprox. y otra 48-72 h a
22 ºC aprox.

Si se emplean incubadores, no voltear las placas, no dejar que toquen el
metal de la estufa (suelo, paredes y techo) y poner a incubar junto a un vaso lleno de
agua.

Contar todas las colonias, que gracias al cromógeno, crecen con colores de la
gama del rojo (rosa, naranja, rojo, Fig.4).

Para que el agua pueda considerarse apta
para consumo, debe haber menos de 20 colonias en la placa incubada 1 día a 35°C y
menos de 100 colonias en la placa incubada 2-3 días a 22°C.

Fig.4 (>100 colonias)

 CONTENIDO DEL KIT

CODIGO: KMT450                              

 PARA 10 TEST COMPLETOS de los 5 parámetros:

  • 10 Jeringas 50 ml estériles (sin aguja).

  • 10 Pipetas Pasteur estériles.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Pseudomonas aeruginosa, patógeno procedente de aguas mal purificadas.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Burkholderia cepacia, patógeno procedente del biofilm de aguas estancadas.

  • 10 Frascos P/A para deteccción de Enterococos, los mejores indicadores a largo plazo (1-7 días) de infiltración de aguas fecales.

  • 20 Compact Dry Plates ® TC para recuento total de aerobios a 22°C  y a 35 °C.

MANTENER LOS KITS A TEMPERATURA AMBIENTE (4-25ºC). ES MUY IMPORTANTE MANTENERLOS AL RESGUARDO DE LA LUZ.

MATERIAL CONVENIENTE NO INCLUÍDO:

  • Estufas a 22 y a 35ºC (VRP001) (imprescindibles).
  • Zona aséptica: Lámpara de alcohol (VLM068) o Portabunsen (ME2195) y Envirostéril (VJM002), si no se  dispone de cabina de flujo laminar.
  • Test confirmativos de frascos sospechosos (todos disponibles consultando en MICROKIT).
  • Cepas certificadas (ver lentículas cuantitativas MICROKIT).
  • Servicios  intercomparativos (SEILAGUA®).
  • Frascos  P/A STAPH para Staphylococcus aureus si se utilizan aguas de muy dudosa calidad (RPL320).
  • Frascos P/A MCC para Coliformes y E.coli si se desea saber si la contaminación por infiltración de aguas fecales es muy reciente (de hace sólo unas horas): RPL303
  • Frascos P/A Clostricult si el agua procede de pozos profundos y desea controlar la contaminación por clostridios, indicadores de enterovirus y patógenos (RPL308).
  • Si utiliza este kit a diario (o una o dos veces por semana), no es necesario realizar más análisis microbiológicos de las aguas, pero si lo utiliza sólo una vez al mes, añada al menos un control semanal (o mejor diario) de recuento de aerobios a ambas temperaturas mediante las Compact Dry Plates ® TC  (Ref: 1000166).

Kit Microbiología Aguas Cosméticas para control completo de las aguas empleadas en la fabricación de productos cosméticos

https://www.microkit.es/pdf/COSMETIKIT-Water.pdf

NOTA: Si realiza muchos análisis de aguas cosméticas puede crear su propio kit para que el coste sea de sólo 4 €/muestra. Pidiendo las DryPlates-R2A y los 3 kits P/A en su formato económico (botes de 100 g de polvo estéril con cucharilla para dosificar): Enterocult (o Colicult), Pseudocult y Burkholderia Cromogenic Broth.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro COSMETIKIT® WATER no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.

COSMETIKIT ® CLASSIC

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MICROKIT COSMETIKIT ® CLASSIC

cosmetikit-classic, kit completo para el análisis microbiológico estándar de productos cosméticos y sus materias primas

INTRODUCCION          

Con este kit y la simple ayuda de un Baño María y una estufa de cultivos, toda industria cosmética puede realizar el análisis microbiológico completo en 20 muestras diferentes, de la forma más eficiente que un laboratorio pueda realizar.

Si desea controlar también el agua, utilice nuestro COSMETIKIT-WATER (ref: KMT450). Si desea controlar también las superficies de trabajo, recipientes, etc, utilice nuestros laminocultivos DESINFECTEST® (Ej.ref: MBN407) y para las manos de operarios nuestros KITS PARA MANIPULADORES (ref: kmt020).

CONTENIDO (CADUCIDAD APROX. 1 AÑO DESDE FABRICACION)

  • 20 Jeringas 20ml estériles (sin aguja)COSMETIKIT CLASSIC
  • 20 Pipetas Pasteur estériles.
  • 2 x 10 Frascos 90ml c/perlas para tratamiento de la muestra (LPT100 Broth Incoloro  RPL054P).
  • 20 Tubos para recuento total (LPT100.Neutralizing Agar Purple TPL200).
  • 20 Tubos para levaduras y mohos (Rosa Bengala CAF agar TPL072).
  • 20 Tubos para Pseudomonas aeruginosa (Cetrimide Agar TPL100).
  • 20 Tubos para E.coli y demás Coliformes (MUGPLUS Cfs.Agar TPL400).
  • 20 Tubos para Staphylococcus aureus (Mannitol Salt Agar TPL066).
  • 20 Tubos inclinados para Candida albicans (Biggy Agar TPL062).
  • 20 Tubos para Burkholderia cepacia (BCPT Agar TPL005)
  • 120 Placas Petri  estériles de 90 mm.

MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO

1. Estufa a 35-37ºC (VRP001), Baño María, hervidor o microondas.

2. Zona aséptica: lámpara de alcohol (VLM068), portabunsen o envirostéril (VJM002).

3. Test confirmativos de colonias sospechosas

4. Cepas de referencia, de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamiento prolongado o inadecuado

5. Participar en servicios intercomparativos como SEILAPARFUM para validar procedimientos y analistas.

 

MODO DE EMPLEO

(Seguir al pie de la letra para obtener resultados correctos y validados)

  1.  Añadir con una jeringa estéril, asépticamente, 10 gramos o 10 ml de muestra a un Frasco 90ml LPT Neutralizing  Broth con perlas. Cerrar el tapón. Mezclar agitando y dejar actuar no menos de 20 ni más de 30 minutos a 21-25°C aproximados. Así se obtiene la solución madre (muestra tratada).
  2. Con la ayuda de una Pipeta Pasteur estéril añadir de inmediato 1 ml de la muestra tratada recién agitada a una placa Petri estéril, en condiciones asépticas. Repetir la operación en otra placa, con la misma pipeta y para la misma muestra. Es conveniente realizar duplicados (Pida TPL200 y TPL072).
  3. Fundir al Baño María un tubo de LPT Neutralizing Agar y otro de Rosa Bengala CAF, hasta que estén  totalmente licuados (si duplica las placas, funda dos tubos de cada medio por muestra).
  4. Cuando se hayan enfriado lo suficiente para no quemar la mano, pero sigan líquidos, añadir cada uno a una placa con el mililitro de muestra tratada. Los mohos tambien se pueden sembrar en superficie, 0,1-0,33 ml mediante asa de Digralsky. Mejor sembrar en masa 1ml y en superficie 0,1ml.
  5. Hacer girar las placas sobre la mesa 10 veces en cada sentido para asegurar la mezcla del medio con la muestra, con cuidado para que no rebose el líquido ni llegue a la tapa de la placa. Dejar solidificar sin tocar (si la temperatura ambiente no es elevada, 10-15 minutos serán suficientes).

  6. Si prefiere usar un método más moderno y ahorrarse todas estas fusiones-enfriamientos de medios: UTILICE COSMETIKIT EASY-PLUS

  1. Incubar las placas en posición invertida y en total oscuridad, 3-5 días a 30-35 ºC (LPT Neutralizing Agar) y (3)-5 días a 20-25 ºC (Rosa Bengala Caf.Agar).
  2. A la vez que esas placas, incubar el resto de muestra tratada en LPT Broth durante 48 h a 30-35°C para obtener la muestra tratada y enriquecida,  necesaria para la búsqueda de patógenos.
  3. Añadir unas gotas (tras enriquecer no hace falta más precisión) de la muestra enriquecida, recién agitada, a un tubo inclinado Biggy Agar Candida, con una misma pipeta estéril y repartir, volteando.
  4. Añadir unas gotas de muestra tratada enriquecida, recien agitada, a una placa Petri estéril, en condiciones asépticas. Repetir en otra placa, con la misma pipeta y para la misma muestra.
  5. Fundir al Baño María un tubo de MUGPLUS Cfs.Agar, otro de Mannitol Salt Agar, otro de Cetrimide Agar y otro de BCPT Agar hasta que estén totalmente licuados.
  6. Cuando se hayan enfriado lo suficiente para no quemar la mano, pero sigan líquidos, añadir el contenido del MUGPLUS y del Mannitol a sendas placas con las gotas de muestra enriquecida.

  1. Puede usar un método más moderno y ahorrarse todas estas fusiones-enfriamientos de medios: UTILICE COSMETIKIT EASY-PLUS

  1. Hacer girar las placas sobre la mesa 10 veces en cada sentido para asegurar la mezcla del medio con la muestra, con cuidado para que no rebose el líquido ni llegue a la tapa de la placa. Dejar solidificar sin tocar. Esta siembra en masa es imprescindible en Coliformes-E.coli y en estafilococos.
  2. Verter el contenido del Cetrimida y del BCPT en sendas placas Petri estériles y dejar solidificar. Sembrar en zigzag sobre su superficie una gota de la muestra enriquecida recién agitada.
  3. Es una buena práctica sembrar además en otra placa de LPT Agar, en zigzag, una gota del enriquecimiento recién agitado para aislar colonias e identificarlas (¡no para contarlas!), a fin de aumentar la sensibilidad para cepas  estresadas, que podrían no crecer en los medios selectivos.
  4. Incubar las placas en posición invertida, y los tubos de Candida albicans en posición vertical, durante 24-72 horas a 30-35 ºC. No apilar más de 5 placas y dejar espacio entre las pilas, y entre éstas y las paredes de la estufa.

INTERPRETACION DE RESULTADOS

El recuento total (placas de Neutralizing Agar) no conviene que sea superior a 100-1000 ufc/ml ó gramo de muestra inicial, según las exigencias (cosmética infantil-general). De modo que no deben aparecer más de 10-100 colonias por placa, dada la dilución efectuada en la solución madre. Lo mismo para recuento de levaduras (colonias convexas) y mohos (colonias filamentosas) (Placas Rosa Bengala CAF Agar).  De lo contrario, y siempre que no haya patógenos, se puede reprocesar el lote.

No debe aparecer ninguna colonia de Escherichia coli (colonias azules en placas de MUGPLUS Cfs.Agar; las colonias rosas en este medio son indicadoras de coliformes, que sin ser patógenos, ni indicadores exclusivos de contaminación fecal, suelen provocar alteraciones en la muestra), de Pseudomonas aeruginosa (colonias amarillas-verdosas o pardo-rojizas en placas de Agar Cetrimida), de Burkholderia cepacia (colonias blancas o salmón, con medio virado a fucsia, en BCPT), ni de Staphylococcus aureus (colonias amarillas en placa de Agar Mannitol), patógenos procedentes de contaminación fecal, del agua, del biofilm del agua y de operarios-aire, respectivamente.

Si aparece alguna colonia parda (que no provoque viraje de color del medio a pardo-negro) en el tubo de Biggy Agar, será de Candida albicans, lo que demuestra contaminación por mucosas de operarios portadores. Si aparece cualquiera de los 5 patógenos, hay que destruir el lote.

Para confirmar definitivamente, consúltenos sobre nuestros kits de identificación de colonias sospechosas.

Para más información no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Ver también el kit más moderno «COSMETIKIT EASY-PLUS» cuya ventaja es que no hay que fundir medios, manteniendo la larga caducidad del COSMETIKIT clásico.

https://www.microkit.es/pdf/cosmetikit.pdf

COSMETIKIT ® EASY-PLUS

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COSMETIKIT ® EASY-PLUS

COSMETIKIT ® EASY-PLUS es el Kit análisis microbiológico cosméticos, todos los parámetros para un correcto análisis

 TOTALMENTE ACORDE  AL MANUAL DE MICROBIOLOGÍA COSMÉTICA DEL MINISTERIO DE SANIDAD Y A LAS DE  NORMAS  ISO SOBRE  MICROBIOLOGÍA COSMÉTICA, MEJORADAS

Kit análisis microbiológico de cosméticos. Con este kit y la simple ayuda de una estufa de cultivos, toda industria cosmética puede realizar el análisis microbiológico completo en 60 muestras diferentes, de la forma más eficiente que un laboratorio pueda realizar. CADUCIDAD: APROX. 1 AÑO DESDE FABRICACION 

Si desea controlar el agua, utilice nuestros kits Cosmetikit®-Water, especialmente diseñados para microbiología de aguas de uso cosmético. Si desea controlar también las superficies de trabajo, recipientes, etc., utilice nuestros laminocultivos DESINFECTEST®. Y para el control de operarios le ofrecemos nuestro MANIPULADORES-KIT. 

CONTENIDO (caja de 60 TEST completos) Kit análisis microbiológico cosméticos

–  60 Jeringas 20 ml estériles (sin aguja)

–  60 Pipetas Pasteur estériles

–  6 x 10 Frascos LPT 100 Broth Incoloro 90 ml CON PERLAS para tratamiento de 10 gramos de muestra

–  60 Dry Plates ® TC para recuento total de aerobios.

–  Otras 60 Dry Plates ® YM para recuento total de hongos (levaduras y mohos).

–  60 Dry Plates ® X-SA para detección de Staphylococcus aureus.

–  Otras 60 Dry Plates ®  EC para detección de coliformes y E. coli.

–  60 Dry Plates ®  CANDI para detección de Candida albicans

–  Otras 60 Dry Plates ®  PS para detección de Pseudomonas aeruginosa

–  60 Dry Plates ®  BCPT para detección de Burkholderia cepacia, el emergente de los cosméticos.

– Y 60 Dry Plates ®  CUP12A para detección de los demás patógenos «no especificados», que generan la mayoría de retiradas de mercado de los cosméticos, porque la mayoría de laboratorios aún cree que no necesitan contemplarlos.

MATERIAL NECESARIO NO INCLUÍDO

  • Estufa a 35-37 ºC (PT2499),
  • Ø   Zona aséptica: Portabunsen (ME2195+ME2196) y Envirostéril (VJM002) si no se dispone de cabina de flujo laminar.
  • Test confirmativos de colonias sospechosas (todos disponibles consultando en MICROKIT).
  • Cepas de referencia, de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados (Ver lentejas cuantitativas MICROKIT)
  • Participar en servicios intercomparativos de microbiología de cosméticos para validar procedimientos y analistas en sus propias instalaciones.

MODO DE EMPLEO Kit análisis microbiológico cosméticos

1.- Añadir con una jeringa estéril, asépticamente, 10 gramos o 10 ml de muestra a un Frasco 90ml LPT Neutralizing Broth con perlas. Cerrar el tapón. Mezclar agitando y dejar actuar no menos de 20 ni más de 30 minutos a 21-25°C aproximados. Así se obtiene la solución madre (muestra tratada).

2.- Con la ayuda de una Pipeta Pasteur estéril añadir de inmediato 1 ml de la muestra tratada recién agitada al centro de la base de una Dry Plates ® TC, para recuento de aerobios, en condiciones asépticas. En todas las Dry Plates ®, añadir la muestra a la placa y luego dejar caer encima el disco con medio (nunca al revés). La muestra se auto-difundirá inmediatamente sin necesidad de asas o aplicadores. Es conveniente realizar duplicados de placas de recuento de aerobios, para poder incubar una a 35°C y otra a 25°C (pida una caja adicional de la referencia DPP001). Repetir la operación en una Dry Plates ® YM, para recuento de hongos (levaduras y mohos) con la misma pipeta y para la misma muestra.

3.- Incubar las placas Dry Plates ® en posición invertida y en total oscuridad, 1-3 días a 30-35 ºC (una de las TC) y 2-4 días a 20-25 ºC (la otra TC y la YM).

4.- A la vez que esas placas, incubar el resto de muestra tratada en LPT Broth durante 48 h a 30-35°C para obtener la muestra tratada y enriquecida,  necesaria para la búsqueda de patógenos.

SEGUIMOS CON EL ANÁLISIS

5.- Tras este enriquecimiento para patógenos, añadir 1 ml de la muestra enriquecida, recién agitada, al centro de la base de una Dry Plates ® X-SA para detección de Staphylococcus aureus. Repetir la operación en una Dry Plates ®  EC para detección de E.coli y demás Coliformes, con una misma pipeta estéril. Hacer lo mismo en una Dry Plates ®  CANDI para detección de Candida albicans. Repetir la operación en una Dry Plates ® PS   para detección de Pseudomonas aeruginosa.  hacer lo mismo en una Dry Plates ®  BCPT para detección de Burkholderia cepacia, el patógeno emergente de los cosméticos. En todas las Dry Plates ®, añadir la muestra a la placa y luego dejar caer encima el disco con medio (nunca al revés).

dry plates uso

6.- Es una buena práctica sembrar además en otra placa de Dry Plates ® TC, 1 ml del enriquecimiento recién agitado para aislar colonias e identificarlas (¡no para contarlas!), a fin de aumentar la sensibilidad para cepas  estresadas, que podrían no crecer en los medios selectivos.

7.- Incubar las placas Dry Plates ® en posición no-invertida, separándolas del calor del metal de la base (o gradilla) de la estufa, con una placa vacía, durante 24-72 horas a 30-35 ºC. No apilar más de 5 placas y dejar espacio entre las pilas, y entre éstas y las paredes de la estufa. Dejar en la estufa un vaso lleno de agua para evitar la desecación de los medios DryPlates ®.

 INTERPRETACION DE RESULTADOS 

El recuento total (Dry Plates ® TC, colonias rojas 1) no conviene que sea superior a 100-1000 ufc/ml ó gramo de muestra inicial, según las exigencias (cosmética infantil-general). De modo que no deben aparecer más de 10-100 colonias por placa, dada la dilución efectuada en la solución madre. Lo mismo para recuento de levaduras (Dry Plates ® YM, colonias no filamentosas 2a) y mohos (idem, colonias filamentosas 2b). De lo contrario, y siempre que no haya patógenos, se puede reprocesar el lote. Esta precisión no se puede obtener utilizando placas preparadas clásicas, ya que éstas no absorben 1 ml y en el mejor de los casos (que absorban bien 0,3 ml), su rango inferior de detección sería excesivo para estas necesidades (3 colonias están muy por debajo de la incertidumbre mínima necesaria en un recuento en placa).

No debe aparecer ninguna colonia de Escherichia coli (colonias o manchas azules 3a en Dry Plates ®  EC; las colonias o manchas rosas 3b en este medio son indicadoras de coliformes, que sin ser patógenos, ni indicadores exclusivos de contaminación fecal, suelen provocar alteraciones en la muestra),ni deStaphylococcus aureus (colonias o manchas azules 4 en Dry Plates ® X-SA), ni de Pseudomonas aeruginosa (colonias o manchas rojas con fluorescencia 5 en Dry Plates ®-PS),ni de Burkholderia cepacia (colonias o manchas blancas o salmón, con medio virado a fucsia 6, en Dry Plates ®  BCPT),ni de Candida albicans (colonias o manchas pardas que no provoquen viraje de color del medio a pardo-negro 7 en el Dry Plates ®CANDI, patógenos procedentes de contaminación fecal (coliformes yE.coli), del agua (Pseudomonas), del biofilm del agua (Burkholderia), de operarios portadores o del aire-superficies (Staphylococcus, Candida).

cosmetikit easy

Si aparece cualquiera de los 5 patógenos, hay que destruir el lote. Para confirmar definitivamente, consúltenos sobre nuestros kits de identificación de colonias sospechosas.

Si desea más información sobre nuestro COSMETIKIT EASY-PLUS rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16 

https://www.microkit.es/pdf/COSMETIKIT-EasyPlus.pdf

Solicite además las DryPlates-CUP12A, nuevo medio para la detección de los demás patógenos que crean retiradas de mercado de cosméticos, también en formato de placas preparadas deshidratadas, y que, junto a COSMETIKIT-EASY-PLUS, le permitirá seguir a rajatabla y completamente  la legislación actual en microbiología de cosméticos.

https://www.microkit.es/monograficos/23-Monograf–a-CURSO-DE-MICROBIOLOG–A-COSM–TICA-EN-LA-TERCERA-D–CADA-DEL-SIGLO-XXI.pdf

 

ANAEROTECA (Conservación de anaerobios)

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ANAEROTECA (KPX004)

Algunas cepas de microorganismos se resisten a mantenerse en los sistemas de congelación clásicos y comerciales de las tres marcas mundiales (En España, CRIOTECA® de MICROKIT); no es un problema del producto sino de la cepa. MICROKIT diseñó hace ya tiempo una CRIOTECA® especial para hongos como las levaduras (CRIOTECA®-YM), otra para halófilos como Vibrio (CRIOTECA®-MAR) y otra para microorganismos de crecimiento difícil como las micobacterias (CRIOTECA®-SKIM MILK). Sin embargo, seguía existiendo un grupo problemático: Los anaerobios.
Tras un año de intensos estudios presentamos la solución: ANAEROTECA, basada en el mantenimiento durante meses SIN CONGELACION, que era precisamente la que impedía su viabilidad en los sistemas criogénicos.
Los anaerobios se mantienen muy mal en medios normales refrigerados o congelados. Presentamos los tubos de ANAEROTECA, rellenos con 18 ml (máxima profundidad) de un medio especialmente diseñado por MICROKIT para la conservación de la mayoría de anaerobios (sobre todo Clostridios) y que ha resultado el mejor en un estudio interno entre 8 variantes.
El medio contiene agentes reductores para que la penetración del oxígeno del aire sea mínima.
Además, la resazurina avisa de cuándo la oxidación del medio alcanza niveles peligrosos para la viabilidad de los microorganismos almacenados: Si más de la tercera parte del tubo está de color rosa, se debe regenerar hirviéndolo 10 minutos. En el caso de que la cepa esté ya inoculada, hervir otro tubo vacío e inocularlo con una gota del fondo del tubo inoculado que se ha oxidado, no agitado.

Las partículas sólidas de Cooked Meat Granules resultan un hábitat ideal para el mantenimiento de la mayor parte de los anaerobios más usuales en microbiología de alimentos y de aguas.
La infusión de cerebro y corazón permite el mantenimiento de la mayor parte de anaerobios patógenos humanos.

 

MODO DE EMPLEO

  1. Inocular la cepa pura (colonia, suspensión espesa o liófilo frescos) en el fondo. Si se trata de esporulados (Clostridium) realizar un duplicado sometido a un shock térmico adecuado (10 minutos a 75 ºC…) para permitir la germinación.
  2. Cerrar y no agitar ni voltear, para mezclar, evitando la agitación brusca que oxigenaría el medio. Registrar los datos.
  3. Mantener a temperatura ambiente (ideal 21-25 ºC).¡NO CONGELAR! ¡Ni siquiera refrigerar! El frío permitiría la rápida oxigenación del medio, comprometiendo la viabilidad de los anaerobios.¡NO AGITAR!.

Cuando necesite cepa pura, tome con una pipeta Pasteur una gota del fondo (mejor si lleva trozos particulados) e inocúlela en el medio adecuado. Incube de la forma más adecuada para la cepa en cuestión.
Algunas cepas pueden mantenerse en ANAEROTECA durante años, otras sólo algunos meses: Resiembre duplicados en ANAEROTECA hasta conocer el tiempo límite normal de viabilidad de sus cepas.
CRIOTECA®-MIX-ENANA-50 es una referencia que incluye 10 Crioviales clásicos (para todo), 10 Skim Milk (para todo y micobacterias), 10 YM (para hongos y levaduras), 10 Aquática (mejor para Legionella, Pseudomonas, Staphylococcus, E.coli…), 5 Halófilos (Vibrio parahaemolyticus…) y 5 Campy, Ref.: KPX200. Palillos estériles para tomar mejor las bolitas: VDP099.
CAJA VACIA CRIOBOX PARA 100 CRIOVIALES, y para poder tener una parte de la CRIOTECA® congelada y los viales no inoculados, sin congelar. Ref.: VPX453. Idem porexpán , Ref.VPX500.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Diseñado y fabricado por MICROKIT desde1995. CRIOTECA® es marca registrada de MICROKIT.
Revisado en Diciembre de 2019.

CRIOTECA®

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VIALES CRIOTECA® – CONSERVACIÓN AVANZADA DE CEPAS MICROBIANAS

PRESENTACIÓN

Los viales CRIOTECA® están diseñados para una conservación eficaz, segura y prolongada de cepas microbianas. Estos viales, pioneros en su fabricación en España desde 1991, incorporan criobolas de porcelana porosa especialmente tratadas y un líquido criogénico optimizado, lo que permite:

  • Minimizar resiembras, contaminaciones y mutaciones.

  • Garantizar la preservación de la primera generación inoculada.

  • Mantener las cepas vivas durante años.

Gracias a la colaboración con uno de los centros oficiales que gestiona las cepas causantes de brotes alimentarios, hospitalarios e hídricos, hemos conseguido optimizar nuestros caldos criogénicos, marcando una clara diferencia frente a otras marcas del mercado.

Ventajas destacadas

  • Mayor seguridad: tapón alto que evita el contacto directo con la muestra.

  • Alta eficiencia: mayor cantidad de criobolas (25 por vial) para asegurar la recuperación de la cepa.

  • Máxima optimización: menor volumen por vial y cajas CRIOBOX ultracompactas, ahorrando espacio en almacenamiento.

  • Fórmula mejorada: líquido criogénico especialmente desarrollado para una mayor viabilidad y recuperación de las cepas.

  • Precio más competitivo frente a kits importados similares.

  • Cierre totalmente hermético y caducidad de 5 años desde la fabricación. Si se conservan en nitrógeno líquido, este periodo puede extenderse incluso más allá.

Resultados validados con numerosos microorganismos:

  • Gram positivos: Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus plantarum, etc.

  • Gram negativos: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella abony, Campylobacter jejuni, Legionella pneumophila, entre otros.

  • Levaduras: Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, Rhodotorula glutinis…

  • Mohos: Aspergillus niger, Penicillium digitatum, Mucor racemosus, entre otros.

TIPOS DE CRIOTECA® DISPONIBLES

  • CRIOTECA® CLÁSICA (KPX006)
    Para bacterias en general, levaduras y mohos. Bolitas amarillas.

  • CRIOTECA® YM (KPX007)
    Formulada específicamente para hongos (levaduras y mohos). Bolitas blancas.

  • CRIOTECA® MARINA (KPX008)
    Especial para microorganismos halófilos como Vibrio. Bolitas marrones.

  • CRIOTECA® SKIM MILK (KPX003)
    Ideal para microorganismos exigentes, como micobacterias. También es excelente para bacterias comunes. Líquido blanco y bolitas verdes. (Es nuestra referencia más vendida, con 50 veces más demanda que la clásica).

  • CRIOTECA® CAMPY (KPX009)
    Óptima para Campylobacter y Helicobacter. Bolitas azules.

  • CRIOTECA® ACUÁTICA (KPX010)
    Especializada para bacterias presentes en el agua, incluyendo Legionella, Pseudomonas, Aeromonas, E. coli, Acinetobacter, Plesiomonas, entre otras. Bolitas rojas.

MODO DE EMPLEO – Conservación de cepas en criobolas

  1. Introduzca una suspensión espesa del cultivo (idealmente fresco, 18-24h) o una colonia directamente en el vial.

    • Para bacterias: Agar Sangre, TSA, BHI o TSB.

    • Para hongos: SDA, SDB o YMB.

  2. Si usa caldo en lugar de colonias, centrifugue y utilice el sedimento.

  3. Cierre el vial y agítelo suavemente (invertir 10 veces) para impregnar bien las bolitas.

  4. Espere un minuto, luego retire el exceso de líquido con una jeringa estéril.

  5. Etiquete el vial con rotulador indeleble.

  6. Golpee suavemente el vial contra la mesa para distribuir las bolitas a lo largo del tubo.

  7. Congele entre –20 °C y –60 °C. Se recomienda duplicar las muestras como medida preventiva.

  8. Para recuperar la cepa:

    • Extraiga una bolita con un palillo estéril (ref. VDP099).

    • Si la cepa es exigente: introducir en caldo tipo BHI antes de sembrar.

    • Si es fácil: sembrar directamente en medio sólido o líquido.

    • No espere a que la bolita se atempere.

    • No reutilice ni reintroduzca el palillo ni la bolita.

PRECAUCIONES

  • Evite cambios de temperatura: devuelva el vial al congelador inmediatamente tras su uso.

  • Uso exclusivo en laboratorio.

  • Trabaje siempre con técnicas asépticas.

  • Confirme previamente la compatibilidad de su cepa con este sistema, antes de abandonar métodos tradicionales de resiembra.

  • Deseche el material contaminado siguiendo los protocolos de bioseguridad habituales.

¿NECESITA MÁS INFORMACIÓN?