Salmonella, caldo de enriquecimiento selectivo: minimice falsos positivos y falsos negativos
Salmonella, caldo de enriquecimiento selectivo: minimice falsos positivos y falsos negativos; del Selenito-MK Tetrationato-Rappaport al SS Broth
La detección certera de Salmonella requiere de 4 pasos:
1-Preenriquecimiento
Este primer paso revitaliza las células dañadas de Salmonella y permite que después se expresen. Se suele hacer con Agua de Peptona Tamponada. Pero si además se quiere minimizar el efecto matriz debido a los conservantes alimentarios, a menos de la mitad de resultados falsamente negativos, debe emplearse un Agua de Peptona Tamponada que además neutralice los conservantes del alimento (sean naturales como las especias, sean artificiales): patente MICROKIT Agua de Peptona Tamponada Neutralizabnte (APTN, BPNW)
https://www.microkit.es/fichas/BUFFERED-PEPTONE-NEUTRALIZING-WATER.pdf
2-Enriquecimiento selectivo
En este segundo paso se favorece el crecimiento diferencial de Salmonella con respecto a la microbiota acompañante. Los caldos clásicos de enriquecimiento selectivo han sido el Selenito (cancerígeno y ya casi en desuso), Mueller-Kauffman Tetrationato (caldo verde con un gran precipitado de carbonato cálcico) y Rappaport-Vassiliadis (caldo azul que es demasiado selectivo y no permite el crecimiento de algunas cepas de Salmonella, ni de Shigella). Ante estos problemas, MICROKIT creó hace ya 3 décadas un caldo de enriquecimiento selectivo para Salmonella sin ninguno de estos problemas: el SS Broth. Tras probar la versión en caldo de todos los agares selectivos para Salmonella, MICROKIT eligió el SS Broth como el mejor, ya que no inhibe el crecimiento de ninguna de las cepas de Salmonella ni de las de Shigella (tan olvidada pero incluso más importante que Salmonella en diversos alimentos).
https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-MICROKIT-BROTH.pdf
De izquierda a derecha: SS Broth sin inocular, E. coli, Shigella (turbio), y Salmonella (negro)
3-Aislamiento de colonias en placa
En este tercer paso se busca estriar el caldo enriquecido para aislar colonias típicas. Los medios clásicos son:
XLD: excelente y elegido por la ISO, pero precipita en numerosas marcas comerciales en forma de cristales alargados, aparte de hundirse fácilmente el asa de siembra en el agar ya solidificado.
SS Agar: ideal en productos cárnicos
Bismuth Sulfite Agar: perfecto para productos del mar
Hektoen: el mejor diferencial de aislamiento primario para distinguir los acompañantes típicos (otras Enterobacterias) de Salmonella
Y de los más modernos cromogénicos, hay dos:
El elegido por casi todas las marcas de medios de cultivo, con Magenta-Gal, inventado por Rambach y con múltiples denominaciones actuales según sea la marca
El de MICROKIT, CromoSalm Agar, que aparece ya en la ultima versión de la Norma ISO como «ABC Agar», que a diferencia del anterior, distingue las colonias verdes/azules de Salmonella de las negras e incoloras de todas las demás Enterobacterias, incluidos los falsos positivos del otro agar cromogénico (numerosas cepas de Proteus y de Citrobacter)
https://www.microkit.es/fichas/ABC-CROMOSALM-MICROKIT-AGAR.pdf
4-Confirmación bioquímica e inmunológica de colonias sospechosas
Las colonias verdes en CromoSalm o negras en XLD se confirman para ver si son falsos positivos de cepas que parecen Salmonella, con medios como TSI, KIA, LIA, Urea… o bien con kits que incluyen esas mismas pruebas, como los clásicos Enterotubos creados por Roche o los modernos Rapid enzimáticos creados por ABL:
https://www.microkit.es/fichas/Enterotubos.pdf
https://www.microkit.es/fichas/Galerias-RAPID.pdf
Y además debe confirmarse toda colonia sospechosa con pruebas inmunológicas, como los antisueros o los látex:
https://www.microkit.es/fichas/ANTISUEROS-para-ANTIGENOS-COLONIALES.pdf
https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-M-IDENT-RAPID-SCREENING-LATEX-UE-2-2019-alimentos.pdf
Por fin, MICROKIT diseñó un kit, el Salmoquick, que permite realizar los pasos 1-3 en sólo 36 horas con total fiabilidad, demostrada en sus validaciones. De este modo, cualquier laboratorio puede acelerar sus resultados sin necesidad de costosos equipos y al precio más económico del mercado, ya qaue se ofrece como pack de 4 medios deshidratados: APTN, SS Broth, XLD y Cromosalm:
https://www.microkit.es/pdf/Salmoquick-2016.pdf
Haga sus consultas de SS Broth y demás temas mencionados de Salmonella en: microkit@microkit.es
Haga sus pedidos de SS Broth y demás temas mencionados de Salmonella en pedidos@microkit.es