T.B.A. Tryptone Bile Agar

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TBA Tryptone Bile Agar, medio de cultivo sólido para la detección y recuento confirmativos de Escherichia coli en aguas según ISO 9308-1

Medio para la detección y recuento confirmativo de Escherichia coli en aguas, por el método de Filtración de Membrana, mediante ensayo rápido según Norma ISO 9308-1:2001, BOE 45 de 21/2/2003 de aguas de consumo humano y BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                        20,0 g
  • Sales Biliares                1,5 g
  • Agar-Agar                     15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,2 ± 0,1

E.coli crecida en T.B.A.

PREPARACIÓN

Disolver 36,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición. Repartir en envases de menos de 250 ml. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

Enfriar a 55°C aproximadamente y verter en placas formando una capa de espesor no inferior a 5 mm.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PRESENTACIÓN: DESHIDRATADO CODIGO: DMT135. MEDIO COMPLETO PREPARADO EN PLAQUIS ® HERMÉTICAS MF: PPL914. FRASCOS PREPARADOS.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL MEDIO PREPARADO A 15-21°C, EN TOTAL OSCURIDAD.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar el laboratorio, tras conservar a alta Tª por fallos de refrigeración, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de su etiqueta…)

DESHIDRATADO: Polvo crema. PREPARADO: Agar crema, homogéneo, traslúcido.

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 44°C aproximadamente:

  • E.coli  MKTA 25922, Crecimiento correcto, colonias rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 95-150 %, pero de forma selectiva.
  • Klebsiella oxytoca  MKTA 13182, Crecimiento correcto, nunca colonias rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 141 %, pero de forma selectiva.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P,  inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Sembrar la membrana filtrada (procedente de incubación de 4-5h a 34-38 °C, en TSA) evitando la formación de burbujas entre el filtro y el medio. Incubar 19-20 horas a 44 ± 0,5 °C.

Colocar la membrana sobre un cartón saturado en reactivo de Indol Kovacs (SBH056) e irradiar con luz ultravioleta entre 10 y 30 minutos. Se cuentan todas las colonias rojas, considerándolas como E.coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar o inundar en lejía antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro T.B.A. Tryptone Bile Agar rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR NUEVA FÓRMULA (ISA)

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SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR para la detección y recuento de Clostridios sulfito-reductores en alimentos (fórmula anterior a la del SPS Agar)

Detección de Clostridios sulfito-reductores (ISO 15213:2003 en alimentos, UNE 26461-2:1995 para recuento en aguas por Filtración de Membrana)

COMPOSICIÓN

  • Extracto de levadura   5,0 g
  • Triptona                   15,0 g
  • Peptona de soja         5,0 g
  • BiSulfito disódico               1,0 g
  • Citrato Fe-amónico     1,0 g
  • Agar-Agar                15,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,6 ± 0,2

Colonias negras diminutas y artefactos de Hierro, grandes e irregulares

PREPARACIÓN

Disolver 42 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición, para su completa homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Utilizar de inmediato a su preparación para evitar su oxigenación letal.

NOTA: Para mejorar el desarrollo de colonias negras de Clostridios, añada 1 vial del suplemento estéril VMT136 a cada 100-1000 ml de medio estéril, hervido para desoxigenarlo y una vez enfriado a unos 45-50 ºC.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

LAS PARTÍCULAS PARDAS-NEGRAS, IRREGULARES QUE PUEDEN VERSE, PRECIPITAN AL ENFRIARSE EL MEDIO Y SON BUENAS PARA EL AUMENTO DE SU SENSIBILIDAD, DE ACUERDO CON LAS NORMAS UNE 13401  y UNE-EN-26461. NO CONFUNDIR CON COLONIAS!!!

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT551. TUBOS Y FRASCOS PREPARADOS.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso,Amarillo

PREPARADO: Estéril, Beige

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO  24 h a 37°C aproximadamente, en anaerobiosis:

  • Clostridium sporogenes MKTA 11437,  colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >114%, pero de forma más selectiva y diferencial.
  • Clostridium perfringens MKTA 13124,  colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >270%, pero de forma más selectiva y diferencial.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Crece con colonias blancas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

NOTA: Es más rápido pero menos selectivo que el SPS Agar.

Medio de Wilson Blair (no confundir con el Bismuth Sulfite Wilson Blair Agar para Salmonella) para la detección y recuento de clostridios sulfito reductores, mejorado para disminuir los falsos negativos.

SIEMBRA

Calentar la muestra 15 minutos a unos 70-80 ºC. Filtrar 100 ml de agua a través de 0,22 µm (VAC022). Añadir en la placa Petri  y verter 18 ml del medio enfriado a unos 50 ºC (y  si se desea, preparado a doble concentración), sin que se formen burbujas. Para siembra directa sin filtración de aguas cloradas, añadir 0,6 g de Tiosulfato sódico para inactivar el cloro. Incubar 16-24 h y 40-48 horas a 36-38 ºC aproximadamente (es más rápido que el SPS)., en anaerobiosis si no se ha quedado la membrana en profundidad.

 INTERPRETACIÓN

Contar las colonias (no nubes) negras. Las colonias blancas o grises son presuntivas si la anaerobiosis no es correcta.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/SULFITE-IRON-WILSON-BLAIR-CLOSTRIDIUM-ISA-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SULFITE-IRON-SOLUCION-MADRE-Y-DILUCIONES-CLOSTRIDIUM-AGAR.pdf

Medio similar al SPS Agar

https://www.microkit.es/fichas/SPS-AGAR-polvo.pdf

Si desea más información sobre nuestro SULFITE IRON WILSON BLAIR CLOSTRIDIUM AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

 

SULFATE API AGAR (MODIFICADO para acelerar el crecimiento)

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detección reductoras sulfato petroleras: Kit según API (American Petroleum Institute) para detectar biocorrosión en cañerías

Detección de bacterias anaerobias reductoras del sulfato (Desulfovibrio…) y flora asociada.

COMPOSICIÓN

  • Lactato sódico                        4,000 g
  • Extracto de levadura              1,000 g
  • Acido ascórbico                      0,100 g
  • Sulfato magnésico                  0,200 g
  • Di‑Potasio hidrogenofosfato  0,010 g
  • Sulfato amonio‑hierro (II)      0,200 g
  • Cloruro sódico                       10,000 g
  • Resazurina sódica                   0,001 g
  • Agar‑agar                               12,000 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,1

De izquierda a derecha: Sulfate API sin inocular,
Cl. perfringens y Desulfovibrio desulfuricans.

PREPARACIÓN

Disolver 27,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar, agitando hasta hervir para su disolución. Autoclavar a 121 ºC  durante 15 minutos. Enfriar en agitación para minimizar el precipitado que sin remedio se formará.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT118

TUBOS PREPARADOS CÓDIGO: TPL048

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Rosado nebuloso

CONTROL DE CRECIMIENTO 2-7 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente) en anaerobiosis:

  • Desulfovibrio desulfuricans MKTN 8301, Excelente, colonias o nubes negras.
  • Clostridium perfringens MKTA 13124, Correcto, colonias negras.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS 15 ml (VER SULFATOKIT API EN KITS)

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 2 ml de muestra en el fondo de un tubo con 15 ml de medio fundido y enfriado a unos 50 ºC. O bien clavar un capilar o un escobillón con el que se haya rascado el recipiente de la muestra, hasta el fondo de un tubo. Extraer y cerrar. En estas condiciones no es necesario incubar en anaerobiosis, pero debe cerrarse el tapón a fondo. Incubar a 21-35 ºC aproximadamente, durante 2-21 días. Se consideran positivos los tubos con puntos o nubes negras, demostrando mayor contaminación cuanto menos tiempo tarden en virar a negro.

 Esquema elaborado en 1989.

Ver también FERROKIT para detección de las bacterias del hierro.

detección reductoras sulfato petroleras

https://www.microkit.es/fichas/SULFATE-API-AGAR.pdf

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura. 

Si desea más información sobre nuestro SULFATE API AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SPS (SULFITE POLIMIXIN SULFADIACIN) AGAR POLVO FÓRMULA MEJORADA

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SPS AGAR (Sulfite Polimixin Sulfadiacin Agar)

Medio selectivo para la detección y recuento de Clostridium sulfito-reductores en alimentos y aguas
Métodos AOAC – ICMSF – UNE 13401 – UNE-EN 26461

 

Clostridios sulfito-reductores en SPS Agar

DESCRIPCIÓN GENERAL

El SPS Agar (Sulfite Polimixin Sulfadiacin Agar) es un medio selectivo diferencial utilizado para la detección, aislamiento y recuento de Clostridium sulfito-reductores, incluyendo Clostridium perfringens y Clostridium sporogenes, en alimentos, aguas y muestras ambientales.

Basado en las recomendaciones de la AOAC y del ICMSF, este medio permite la identificación visual de los clostridios por la reducción de sulfito a sulfuro, que reacciona con el citrato férrico produciendo colonias gris-negras características.

Es un medio de alta selectividad y sensibilidad, gracias a la acción combinada de Polimixina B y Sulfadiacina, que inhiben flora acompañante no clostridial.

COMPOSICIÓN (por litro)

Componente Cantidad
Peptona de caseína 15,00 g
Extracto de levadura 10,00 g
Citrato de hierro 0,80 g
Sulfito sódico 0,50 g
Polimixina B (sulfato) 0,01 g
Sulfadiacina sódica 0,12 g
Agar-agar 13,90 g

pH final: 7,0 ± 0,1

PREPARACIÓN DEL MEDIO

  1. Disolver 40 g de medio en 1 litro de agua destilada.

  2. Calentar agitando hasta ebullición para su completa disolución.

  3. Repartir en tubos o frascos.

  4. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos, o preferiblemente a 116 ºC durante 15–30 minutos.

  5. Enfriar rápidamente en baño de agua fría.

Recomendación: El autoclavado a 116 ºC es preferible, ya que preserva la sensibilidad del medio.
Utilizar inmediatamente tras la preparación para evitar su oxigenación, que resulta letal para los clostridios.

Suplemento opcional: Para potenciar la formación de colonias negras, añadir 1 vial del suplemento estéril VMT136 por cada 100–1000 ml de medio estéril, hervido y enfriado a 45–50 ºC.

Nota: Las partículas negras que pueden aparecer al enfriar son normales y aumentan la sensibilidad del medio, conforme a las normas UNE 13401 y UNE-EN 26461.

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO

  • Uso exclusivo en laboratorio.

  • Mantener el bote bien cerrado, en lugar seco, fresco y oscuro.

Código: BCD901
Aspecto del producto:

  • Deshidratado: Polvo beige.

  • Preparado: Medio estéril, color crema-blanquecino.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

El control de calidad se realiza en nuestro laboratorio. Se recomienda repetirlo en el suyo si han cambiado las condiciones ambientales (tiempo prolongado sin uso, altas temperaturas, desinfección reciente, etc.).

Ensayo de rendimiento (24 h a 37 ºC en anaerobiosis)

Microorganismo Resultado esperado Recuento relativo (PCA estándar*) Observaciones
Clostridium sporogenes MKTA 11437 Colonias gris-negras 240–347 % Selectivo y diferencial.
Clostridium perfringens MKTA 13124 Colonias gris-negras 110–420 % Selectivo y diferencial.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P Inhibido — Sin crecimiento.
Escherichia coli MKTA 25922 Inhibido — Sin crecimiento.

* PCA estandarizado con recuperación ≥92–125 % respecto a cepas trazables a la colección tipo.
Las variaciones detectadas entre lotes se deben principalmente a las cepas inoculadas, no al medio.

PRESENTACIÓN DISPONIBLE

  • Tubos preparados (parafinados de 9 ml o sin parafina de 18 ml)

  • Frascos parafinados de 50 ml (doble concentración)

  • Frascos de 100 ml y 250 ml

  • Medio deshidratado

  • Tubo y frasco de SPS Agar parafinado

SIEMBRA Y CONDICIONES DE INCUBACIÓN

Método recomendado: Siembra en profundidad (placas, tubos o frascos).

  1. Para detectar esporas, calentar la muestra a 98 ºC, enfriar a 75 ºC y añadir 1 ml al tubo o frasco con el medio fundido.

  2. Mezclar suavemente (sin agitar) para evitar oxigenación.

  3. Enfriar en posición vertical (en tubos parafinados, la parafina solidifica en la superficie, creando anaerobiosis).

  4. Para detección en aguas, usar frascos parafinados a doble concentración e inocular 20–50 ml de muestra.

  5. Incubar a 35–37 ºC durante 24 horas en anaerobiosis.

Alternativa práctica: Inocular 1 ml sobre un tubo hervido y enfriado a:

  • 75 ºC → detección de esporas

  • 45 ºC → detección de formas vegetativas

Cerrar, voltear sin agitar, incubar en vertical y contar directamente las colonias negras que crecen en anaerobiosis (excepto los 3–5 mm superiores, oxigenados).

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

  • Colonias negras: Clostridium sulfito-reductores confirmados.

  • Colonias blancas: Presuntivas (anaerobiosis insuficiente).

El ennegrecimiento del medio se debe a la reducción del sulfito sódico a sulfuro, que precipita con el citrato férrico, generando un color gris o negro característico.

GESTIÓN DE RESIDUOS

El usuario final es responsable de eliminar los microorganismos conforme a la legislación medioambiental vigente.
Autoclavar los materiales antes de su eliminación.

INFORMACIÓN ADICIONAL

Monográfico sobre Clostridium perfringens y clostridios sulfito-reductores (PDF)
Correo: microkit@microkit.es
Teléfono: 91 897 46 16

Esquema sobre el uso de los tubos de SPS Agar parafinados, realizado en 1989

SPS (SULFITE POLIMIXIN SULFADIACIN) AGAR GRANULADO

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SPS (SULFITE POLIMIXIN SULFADIACIN) AGAR GRANULADO es el medio más empleado para recuento de clostridios sulfito-reductores en alimentos

Detección de clostridios sulfito‑reductores (AOAC,ICMSF)

SPS Agar granulado

COMPOSICIÓN

  • Peptona de caseina    15,00 g
  • Extracto de levadura 10,00 g
  • Citrato de Hierro       0,50 g
  • Sulfito sódico            0,50 g
  • Polimixina‑B sulfato 0,01 g
  • Sulfadiacina sódica    0,12 g
  • Agar‑agar                  13,90 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,1

Clostridium perfringens

PREPARACIÓN

Disolver 40 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición para su completa disolución.

Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos, o mejor a 116 ºC durante 15-30 minutos. Enfriar rápidamente el medio en un baño de agua fría. El uso a [2] es más recomendable. Utilizar de inmediato a su preparación para evitar su oxigenación letal.

NOTA: Para mejorar el desarrollo de colonias negras de Clostridios, añada 1 vial del suplemento estéril VMT136 a cada 100-1000 ml de medio estéril,  hervido para eliminar la oxigenación y una vez enfriado a unos 45-50 ºC.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENER EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT116

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Granulado, Beige

PREPARADO: Estéril, Crema-blanquecino

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24 h a 37°C aproximadamente, en anaerobiosis:

  • Clostridium sporogenes MKTA 11437,  colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 240-347%, pero de forma más selectiva y diferencial.
  • Clostridium perfringens MKTA 13124,  colonias gris-negras. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 110-420%, pero de forma más selectiva y diferencial.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS (PARAFINADOS-9 ml O NO-18 ml), FRASCOS 50 ml A DOBLE CONCENTRACION PARAFINADOS, FRASCOS 100 y 250 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

Selectivo para aislamiento/recuento de clostridios sulfito reductores. La reducción del sulfito ennegrece las colonias

SIEMBRA

En profundidad en placa con tubos y frascos fundidos, o en el propio tubo/frasco; incluso las membranas de MF, que se depositan entre 2 capas. Para esporas inocular tubos parafinados, calentando a unos 98 ºC, dejando enfriar a unos 75 ºC y añadiendo entonces 1 ml de muestra. Voltear sin agitar para mezclar con el medio y enfriar en posición vertical (para que la parafina solidifique en superficie en los tubos parafinados). Para buscar esporas en aguas, actuar igual pero con frascos parafinados a doble concentración y añadiendo 20‑50 ml de muestra. Incubar en anaerobiosis (los tubos, tubos parafinados y frascos parafinados no lo necesitan) a 35‑37 ºC aproximadamente, durante 24 horas.

INTERPRETACIÓN

Contar los puntos negros que aparezcan como clostridios sulfito‑reductores. Las colonias blancas son presuntivas si la anaerobiosis no es correcta.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.        

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https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

 

SLANETZ-BARTLEY TTC M-ENTEROCOCCUS AGAR

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SLANETZ-BARTLEY TTC M-ENTEROCOCCUS AGAR es el medio de cultivo ISO 7899 para recuento de enterococos fecales en aguas

Selección de enterococos por filtración de membrana (ISO 7899-2:2001, UNE 77-076:1991, BOE 45 de 21/2/2003 de aguas de consumo humano, BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas)

Enterococcus faecalis, rosa-púrpura según la cepa

COMPOSICIÓN

  •  Triptona                        20,00 g
  • Extracto de levadura              5,00 g
  • Glucosa                         2,00 g
  • Fosfato dipotásico        4,00 g
  • Azida sódica                 0,40 g
  • TTC                              0,10 g
  • Agar-agar                      12,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,2 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 43.5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición para su total homogeneización. Evitar el excesivo calentamiento y enfriar rápidamente. No autoclavar. El color final del medio es incoloro-paja. El medio rojo indica que ha sufrido exceso de calor..

 PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN

LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT115

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

 Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Amarillo      PREPARADO: Estéril, Rosado

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48 h a 37°C aprox.:

  • E.coli MKTA 25922, Inhibido.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Inhibido.
  • Enterococcus durans MKTA 10541, Bueno, Colonias rosas-granates, pequeñas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 133%, pero de forma selectiva.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Bueno, Colonias rosas-granates, pequeñas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 107-270%, pero de forma selectiva.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

 PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. NUEVO: PLAQUIS ® PREPARADAS HERMÉTICAS PARA M.F.: Ref. PPL909

En caldo preparado: Viales 2 ml, Viales Pinchables 100 ml.

Medio selectivo indicado para aislamiento y recuento de estreptococos fecales en agua y en alimentos, con la técnica de filtración de membrana o con el método de siembra en superficie.

 SIEMBRA

Sembrar en superficie 0.1 ml de muestra y extender con asa de Digralsky,  o bien la membrana filtrada. Incubar a 36 ºC aproximadamente, 44  horas (para mejor  selectividad, a 44-45 ºC aproximadamente,  preferiblemente tras 4h a 36°C aproximadamente).

 INTERPRETACIÓN

 Las colonias rojas, rosas o castañas, elevadas y diminutas se consideran presuntivas de estreptococos fecales del subgrupo de los Enterococos. El color rojizo es menos intenso cuanto más viejo es el medio. Deben confirmarse resembrándolas en Agar Bilis Esculina Azida (MICROKIT DMT160), donde crecen con halo tostado-negro. Resembrando la membrana, se confirma el 100% de las colonias. Tambien es diferencial la prueba rápida del PYR (KWD103).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros SLANETZ-BARTLEY TTC M-ENTEROCOCCUS AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/16-Enterococos-fecales-monograf–a.pdf

 

M-ENTEROCOCCUS SLANETZ-BARTLEY TTC BROTH

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SB Enterococos SLANETZ-BARTLEY TTC BROTH es la versión líquida del SB Agar para emplear en placas con cartón absorbente

Medio preparado para recuento de Enterococos en aguas, por la técnica de Filtración de Membrana (MF)

Referencia: RPL046 (Vial pinchable 100 ml) , FPL501 (Vial 2 ml). Proteger de la luz! No existe medio deshidratado en versión caldo. Tambien disponible Slanetz-Bartley M-Enterococcus Agar en polvo, DMT115.

INTRODUCCIÓN

La nueva Directiva de las Comunidades Europeas para control de las aguas de consumo humano (3/XI/1998), establece que debe controlarse sistemáticamente la ausencia de Enterococos en todo tipo de agua de consumo humano (muestras de 100 ml en aguas de red y en aguas que intervienen en la fabricación de alimentos, y de 250 ml en aguas envasadas).

Este parámetro es indicador de contaminación fecal más lejana en el tiempo (o en la distancia desde el foco emisor) que el parámetro E.coli, incapaz éste de sobrevivir en el agua mucho más de 24 horas. Por ello resulta de gran importancia la adición de este parámetro en el análisis rutinario de todo tipo de aguas de consumo humano.

El medio KAA,

que MICROKIT siempre ha promocionado por dar resultados en sólo 24 horas, es excelente para detectar toda clase de Estreptococos fecales-grupo D de Lancefield (los Enterococos, de origen humano, y los estreptococos fecales strictu sensu, de origen bovino y equino) por lo que resulta más rigurosa la comprobación de su ausencia que la de Enterococos y, por tanto, a nadie debe extrañar que muchos laboratorios continúen utilizándolo.

Sin embargo, los laboratorios oficiales y otros muchos vendrán obligados a utilizar medios específicos de Enterococos. Por ello, Laboratorios MICROKIT ha diseñado el medio de Slanetz-Bartley, sumamente selectivo, en caldo preparado con TTC incluido, para Filtración de Membrana con cartón absorbente (o, quien lo prefiera, para añadirle 15 g/l de agar-agar DMT001, fundido y enfriado a 50°C en el momento de dispensación en placas), a fin de que todo laboratorio pueda utilizar este medio, ya preparado, sin necesidad de preparar y fundir a 98°C el clásico Slanetz-Bartley Agar. Se ha elegido este medio, también llamado M-Enterococcus, en vez del KF por haber demostrado en numerosas publicaciones que da lugar a muchos menos falsos positivos, incluso en agua de mar.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

1-Por cada muestra que vaya a analizar, tome con una jeringa estéril 2 ml de M-Enterococcus Slanetz-Bartley TTC Broth del vial pinchable RPL046 o del vial 2 ml FPL501.

2-Añada 2 ml a cada placa estéril con cartón absorbente VDA001.

3-Deposite encima la membrana filtrante VAC073 de 47 mm de diámetro y 0,45 µm de poro por la que habrá filtrado 100 (ó 250) ml de muestra de agua (aparato de filtración VFR012).

4- Preincubar 4 horas a 37°C aproximadamente y, acto seguido, incubar 44 horas a 44-45°C aproximadamente.

5- Si aparece alguna colonia diminuta, de color rojo, rosa o pardo-rojizo, se diagnostica como procedente de Enterococos, por lo que el agua es susceptible de contener patógenos de procedencia fecal. El color rojizo de las colonias es menos intenso cuanto más viejo es el medio.

6- Para una confirmación específica más precisa utilice las galerías enzimáticas (4 h) para estreptococos KBH254, y/o bien el kit PYR (KWD103), que diferencia Enterococos del resto de Estreptococos Fecales.

Control de calidad positivo: CRIOSTRAIN Enterococcus faecalis MKTA 29212

VER TAMBIEN MUG PLUS E.COLI CHROMOGENIC MEDIUM Y M-CP CLOSTRIDIUM PERFRINGENS MEDIUM.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros M-ENTEROCOCCUS SLANETZ-BARTLEY TTC BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/16-Enterococos-fecales-monograf–a.pdf

 

SLANETZ-BARTLEY AGAR BASE (SIN TTC)

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SB Agar SLANETZ-BARTLEY AGAR (BASE SIN TTC) para detección y recuento de enterococos fecales en aguas según ISO 7899

Selección de enterococos por filtración de membrana (ISO 7899-2:2001, UNE 77-076:1991, BOE 45 de 21/2/2003 de aguas de consumo humano, BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas)

 

Enterococcus faecalis, rosa-púrpura según la cepa, tras añadir TTC

COMPOSICIÓN

  •  Triptosa                        20,00 g
  • Extracto de levadura              5,00 g
  • Glucosa                         2,00 g
  • Hidrog.Fosfato di-K               4,00 g
  • Azida sódica (Na N3)              0,40 g
  • Agar-agar                      12,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,2 ± 0,2

 PREPARACIÓN

Disolver 43.5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición para su total homogeneización y dejar 5 minutos más en agua hirviendo. Evitar el excesivo calentamiento y enfriar rápidamente. No autoclavar. Una vez enfriado a 50-60°C, añadir 10 ml de una solución de TTC al 1% (MICROKIT SDA018). El color final del medio es incoloro-paja. Este medio sustituye al Slanetz-Bartley completo, sin tener que preocuparse de los eventuales sobrecalentamientos que vuelven de color rosa a éste.

 PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT117

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Amarillo      PREPARADO: Estéril, Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 48 h a 37°C aprox.:

  • E.coli MKTA 25922, Inhibido.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Inhibido.
  • Enterococcus durans MKTA 10541, Bueno, Colonias rosas-granates, pequeñas. Con respecto a TSA estandarizado*, recuento 120-133%, pero de forma selectiva.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Bueno, Colonias rosas-granates, pequeñas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 111-270%, pero de forma selectiva.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

 PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. NUEVO: PLAQUIS ® PREPARADAS HERMÉTICAS PARA M.F. con TTC: Ref. PPL909

En caldo preparado con TTC: Viales 2 ml, Viales Pinchables 100 ml.

Medio selectivo indicado para aislamiento y recuento de estreptococos fecales en agua y en alimentos, con la técnica de filtración de membrana o con el método de siembra en superficie.

 SIEMBRA

Sembrar en superficie 0.1 ml de muestra y extender con asa de Digralsky,  o bien la membrana filtrada. Incubar a 36 ºC aproximadamente, 44  horas (para mejor  selectividad, a 44-45 ºC aproximadamente,  preferiblemente tras 4h a 36°C aproximadamente).

 INTERPRETACIÓN

 Las colonias rojas, rosas o castañas, elevadas y diminutas se consideran presuntivas de estreptococos fecales del subgrupo de los Enterococos. El color rojizo es menos intenso cuanto más viejo es el medio. Deben confirmarse resembrándolas en Agar Bilis Esculina Azida (MICROKIT DMT160), donde crecen con halo tostado-negro en sólo 2 horas adicionales. Resembrando la membrana, se confirma el 100% de las colonias. Tambien es diferencial la prueba rápida del PYR (KWD103).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros SLANETZ-BARTLEY AGAR BASE (SIN TTC) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/16-Enterococos-fecales-monograf–a.pdf

 

Simmon´s Citrate Agar MICROKIT

SIMMON’S CITRATE AGAR

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CITRATO SIMMON’S CITRATE AGAR es un medio de cultivo para diferenciar Enterobacterias en base al uso del Citrato

Diferenciación Enterobacterias en base al uso del citrato UNE-EN ISO 6579:2003, ISO 10273

COMPOSICIÓN

  • Fosfato monoamónico  0,20 g
  • Cloruro sódico              5,00 g
  • Citrato de sodio tribás. 2,00 g
  • Sulfato magnésico         0,20 g
  • Azul bromotimol           0,08 g
  • Fosfato sodio‑amónico  0,80 g
  • Agar‑agar                      15,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6,6 ± 0,2

Izquierda: E.coli (verde), Derecha: Salmonella (azul)

PREPARACIÓN

Disolver 23 g en 1 litro de agua destilada.

Calentar agitando hasta ebullición

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

NOTA: El material de vidrio a utilizar, no debe tener restos básicos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT113

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Amarillo

PREPARADO: Estéril, Verde precipitado

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Enterobacter aerogenes  MKTA 9489, Positivo, Medio azul.
  • Escherichia coli MKTA 25922, Sin viraje.
  • Salmonella abony MKTN 6017, Positivo, Medio azul.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS

NOTA: Representa la versión sólida del Koser’s Citrate Broth, con la ventaja de que la lectura del IMViC se hace por viraje del indicador en vez de por turbidez. Se basa en la capacidad de usar el Citrato como única fuente de Carbono, y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno.

SIEMBRA

Sembrar en estría en el tubo de agar inclinado a partir de una colonia, con cuidado de no inocular trazas del medio de aislamiento. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 18 horas.

 INTERPRETACIÓN

Las bacterias citrato‑positivas crecen y hacen virar el indicador a azul intenso. Son citrato positivo Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Edwarsiella, Pseudomonas, Citrobacter, Aeromonas hydrophila, Proteus rettgeri, S. arizonae, S. typhimurium… Son Citrato negativo Moraxella, Shigella, E. coli, Yersinia enterocolitica, Aeromonas salmonicida, Proteus morganii, Pseudomonas maltophilia.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros SIMMON’S CITRATE AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SHIGELLA BROTH

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detección Shigella alimentos aguas según Norma ISO 21567, caldo de enriquecimiento previo al aislamiento en placa

Caldo para enriquecimiento selectivo de Shigella spp. según ISO 21567:2004

 COMPOSICIÓN

  • Digerido enzimático de caseína                 20,00 g
  • Potasio hidrógeno fosfato (anhidro)          2,00 g
  • Potasio dihidrógeno fosfato (anhidro        2,00 g
  • Cloruro Sódico                                5,00 g
  • Dextrosa                                          1,00 g
  • Suplemento: Tween 80                     1,5 ml

(Fórmula por litro)

pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 30 g en 1 l de agua bidestilada, agitando hasta su disolución completa. Se añade el Tween 80, atemperado para evitar la formación de grumos precipitados. Ajustar el pH. Autoclavar 15 minutos  a 121°C. Una vez enfriado, se añaden asépticamente  0,5 ml de solución de Novobiocina estéril BCX150 (100 mg de novobiocina en 100 ml de agua) a cada litro de caldo Shigella.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT173

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, rosado.   PREPARADO: Estéril, rojo intenso con precipitado filamentoso que NO ES contaminación.

CONTROL DE CRECIMIENTO 16-20 h a 41,5 °C aproximadamente:

  • Shigella flexneri MKTA 12022, Correcto.
  • Salmonella abony MKTN 6017: Correcto.
  • Escherichia coli MKTA 25922: Correcto.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Inhibido.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio para el enriquecimiento selectivo de Shigella según Norma ISO 21567:2004; presenta la ventaja, sobre el Caldo Selenito-Cystina, de no ser tóxico; y sobre el Caldo Rappaport Vassiliadis, de permitir el crecimiento de las Shigella. Casi toda la flora Gram positiva queda inhibida y gran parte de la flora Gram negativa también es inhibida (excepto Salmonella, algunas cepas de E. coli, y algunas del grupo KES -Klebsiella, Enterobacter y Serratia-). Estas cepas quedarán luego descartadas en los agares selectivos XLD, SS, Hektoen y Mac Conkey y con las pruebas inmunológicas (KWD000) y bioquímicas. En los servicios intercompartivos SEILALIMENTOS de los ultimos 7 años, otro medio demuestra ser el que mejor recupera las diferentes cepas de Salmonella y de Shigella en todo tipo de matrices (lácteos, cárnicos, pescados, vegetales…), el Salmonella-Shigella MICROKIT Broth.

 SIEMBRA

Inocular x gramos o ml de medio en 9x ml de caldo Shigella con Novobiocina.  Homogeneizar en digestor. Ajustar asépticamente el pH a 7,0 ±0,2 si es necesario. Incubar 16-20 horas a 41,5 ºC aproximadamente, en ANAEROBIOSIS, con los tapones sin apretar para que entre la atmósfera anaeróbica.

 INTERPRETACIÓN

Llevar a los medios sólidos selectivos XLD Agar y Hektoen (tambien son válidos SS-Agar y Mac Conkey), sembrando en superficie por agotamiento.  Identificar las colonias sospechosas mediante pruebas bioquímicas (KBH260) e inmunológicas (KWD000).

https://www.microkit.es/fichas/SHIGELLA-BROTH.pdf

detección Shigella alimentos aguas

Si prefiere enriquecer el tandem Salmonella-Shigella, su medio de elección es el Salmonella-Shigella Broth https://www.microkit.es/fichas/SALMONELLA-SHIGELLA-MICROKIT-BROTH.pdf, diseñado por MICROKIT para evitar los falsos negativos propios del Rappaport, del Selenito Cystina o del Tetrationato

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente.

Si desea más información sobre nuestros SHIGELLA BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/5-Salmonella-y-Shigella-monograf–a.pdf