MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia

Deja un comentario

Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Burkholderia cepacia complex en 100 ml de agua

Microkit P/A Burkholderia cepacia complex, detección de este peligroso grupo en 100 mL de agua sin los falsos negativos de la filtración de membrana

 

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril Cromogénico diseñado por MICROKIT en base al BCA (BCPT), para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Burkholderia cepacia (viraje del agua a rojo burdeos en sólo 18-24h e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL323 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

  1. FPA904 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u.DMTI904- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test.

  2. SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

  3. De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

            Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya incluyen el tiosulfato.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, ponerse guantes estériles para no contaminar el medio y usarlo en cabina de flujo laminar; añadir 3 cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. El color resultante es naranja, transparente. Incubar 18-48 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa, aun que casi siempre vira en 18h) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir hasta horas entre toma e incubación.

Monitorice todos los puntos necesarios para el análisis preventivo de tendencias.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje del agua a color rojo burdeos (vino tinto) y opaco demuestra la Presencia de B.cepacia en la muestra de agua. La ausencia de fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que no se trata de P.aeruginosa. Además, con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, no hay anillo rojo de Indol en superficie, lo que descarta falsos positivos de coliformes. Ya que hay otros microorganismos  capaces de virar a rojo, pero son más lentos, fluorescentes o indol +. Puede conseguir que el kit sea muy selectivo añadiendo a cada frasco 0,14 ml del suplemento MICROKIT SMT301 (Ticarcilina + Polimixina). Preferimos ofrecer el kit sin suplemento porque algunas cepas de B.cepacia subletales podrían no crecer (por ejemplo la DSMZ 50181 no crece bien con los antibióticos).

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a       0 ufc/100 mL. Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es aceptable para fabricación de medicamentos y cosméticos.

Como siempre en microbiología, resiembre los positivos en estría en agar selectivo BCA (BCPT) e identifique las colonias con galerías bioquímicas (MICROKIT 245000) o con nuestro servicio de identificación molecular (SFI004).

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL323, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O INCLUSO PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

Los viales FPA904 y botes DMTI904- son extremadamente higroscópicos: manténgalos bien cerrados en lugar seco, fresco y oscuro (no en nevera). Agite el bote antes de usar. En zonas de elevada humedad ambiental, guardar bien cerrados en un tupper hermético con silicagel. Los frascos RPL323 tampoco precisan nevera, sólo oscuridad.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, rosado, sólo existe versión agarizada y versión irradiada.

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros de hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 18 h a 35°C aproximadamente:

  • Burkholderia cepacia MKTA 25416, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Burkholderia cepacia MKTN 10743, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Burkholderia cepacia MKTD 50181, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (WDCM00026), Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

BACILLUS SPOROTHERMODURANS CROMOKIT AGAR (HRS CROMOGENIC AGAR)

Deja un comentario

BACILLUS SPOROTHERMODURANS AGAR HRS PERMITE LA DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESPORAS RESISTENTES A ALTAS TEMPERATURAS HRS (EJ:TETRABRICKS)

HRS BACILLUS SPOROTHERMODURANS AGAR

INTRODUCCIÓN

La presencia de esporas altamente resistentes al calor de Bacillus sporothermodurans en leche pasterizada por el método Ultra Hight Temperature (UHT) se ha convertido en un problema importante en la industria láctea.

Su presencia se considera indeseable, ya que obstaculizan los requisitos de esterilidad comercial.

En un estudio (APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Mar. 2005, p. 1480–1494), se han evaluado, mediante el uso de un selectivo tratamiento térmico de 30 minutos a 100°C, la presencia, fuentes, y naturaleza de las esporas potencialmente muy resistentes al calor en la leche cruda.

Se detectaron altos números de estas esporas en la tela del filtro del equipo de ordeño y en muestras de cultivos y forrajes verdes.

Se aislaron aproximadamente 700 cepas después del calentamiento selectivo. La colección de cepas mostró una notable diversidad, con representantes de siete géneros que forman esporas aerobias.

Las más frecuentes esporas aisladas de leche UHT han sido Bacillus sporothermodurans (aerobio facultativamente anaerobio), Brevibacillus borstelensis, Paenibacillus lactis, Bacillus sphaericus, Bacillus licheniformis, y Brevibacillus brevis.

El 23% de las 603 cepas formadoras de esporas pertenecen a 18 nuevas especies.

REDUCCIÓN DE CARGA

La reducción de esta carga de esporas por buenas medidas higiénicas durante el ordeño probablemente podría reducir aún más el nivel de contaminación de la leche cruda…

…y de esta manera reducir al mínimo el recuento aeróbico de formadores de esporas de bacterias que podrían conducir al deterioro de la leche y los productos lácteos.

Las HRS (Heat Resistant Spores) o más coloquialmente “termorresistentes”, aparecen en muestras de leche UHT, sobre todo si el método de tratamiento térmico es “indirecto” (intercambiador de calor).

Los métodos “directos” con inyección de vapor sobrecalentado son más eficaces, pero estas esporas también aparecen de vez en cuando.

No son un problema para la salud (son microorganismos de riesgo biológico 1: sin riesgo para la salud) y aparentemente no alteran la leche, de modo que nos hemos acostumbrado a beber leche contaminada por estos microorganismos.

El problema no es para el consumidor sino para la imagen de la industria.

SOLUCIONES

MICROKIT ha desarrollado un medio de cultivo cromogénico, derivado del Plate Count Agar ISO 4833, con factores “doping” que permiten la visión de estas esporas germinadas en forma de colonias, que suelen ser diminutas y rojas, gracias a un cromógeno termoestable.

El medio no es selectivo para B. sporothermodurans, de modo que también crecen en el mismo Bacillus licheniformis, Bacillus sphaericus y los demás esporulados alterativos de la leche UHT:

Las esporas termorresistentes (HRS).

Pero se denomina así por el mayor conocimiento que tiene la industria láctea de la denominación “B. sporothermodurans” que de las siglas HRS.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                                      5,0 g
  • Extracto de Levadura                  2,5 g
  • Glucosa                                       1,0 g
  • Factores doping MICROKIT          8,0 g
  • Agar‑agar                                   10,5 g
  • Cromógeno termoestable          c.s.
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 6,8 ± 0,2

Obsérvese la forma de volcán de las colonias, rojas, de Bacillus sporother-modurans

PREPARACIÓN

Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución.

Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a 116°C durante 15 minutos. No sobrecalentar ni mantener fundido mucho tiempo. Refundir sólo una vez. El color final del medio es blanco-crema.

A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna al crema cuando se vuelve a enfriar el medio, lo cual no afecta los resultados.

Si lo desea, puede añadir trazas de vitamina B12 cuando el medio se está enfriando a 47-50ºC, aunque ya están incorporadas en el medio deshidratado.

Si prefiere obtener colonias grandes, añada 37 g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022). Si desea una cierta selectividad en leche cruda, añada a 1 L de medio, cuando se está enfriando a 47-50ºC,  10 ml de un frasco pinchable de polimixina B (MICROKIT SMS009).

O mejor aún: someta a la leche cruda a un calentamiento UHT para eliminar toda la flora acompañante.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT532

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema    PREPARADO: Estéril, Crema

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2   24-72 h a 37-55 ºC  o bien 3-5 días a 30 ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT:

  • Bacillus sporothermodurans MKTD 10599, Excelente, pequeñas colonias rojas o fucsia, redondas, con forma de volcán (boina), PR >90% de colonias respecto al TSA.
  • Bacillus subtilis WDCM 00003, Excelente, colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas, PR >90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
  • Bacillus cereus WDCM 00001, Excelente, colonias céreas, fucsia, enormes, lobuladas, PR >90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009, Excelente, colonias pequeñas, rojas, redondas, con márgenes incoloros, PR >90% de colonias respecto al TSA.
  • Staphylococcus aureus WDCM 00032, Excelente, colonias rojo burdeos, grandes, redondas, mucosas, PR >90% de colonias respecto al TSA.

Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia, por lo que indicamos la Universal WDCM según ISO 11133-2:2014 y la Colección de Cepas Nativas Tropicales.

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO (100 g, 500 g, 5 Kg).

Recuento total de bacterias esporuladas en leche UHT y otros alimentos UHT (lácteos, gelatina, forraje…).

Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja, púrpura…. sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los aerobios).

El color de las colonias no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.

 MODO DE EMPLEO

Inocular 1 ml de muestra de leche y su serie de diluciones decimales, en masa, para detectar precozmente la posible contaminación del lote, con esporas de este microorganismo (o bien estriar en superficie muestras ya alteradas).

Si se desea analizar la leche antes de la UHT, añada a cada L de medio 10 ml de Polimixina B (frascos pinchables MICROKIT SMS009), cuando está enfriándose a 47-50ºC, para eliminar buena parte de la flora acompañante.

La polimixina es un antibiótico polipeptídico producido por una cepa de Bacillus polymyxa, activo frente a Gram negativos, ya que rompe violentamente su membrana plasmática. Atención: los iones Ca++ inhiben su acción.

Aunque el mejor agente selectivo es el calor UHT, para buscar sólo sus supervivientes, con este medio (sin suplementos de antibióticos).

De modo que para analizar leche cruda, es mejor someterla a un calentamiento similar a UHT antes de sembrarla en el medio de cultivo, a fin de eliminar la flora acompañante.

Incubar una placa a 30 ºC aproximadamente durante 3-5 días, e incubar otra placa a 37 y/o 55 ºC aproximadamente, durante 48-72 horas.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Buscar las colonias rojas y pequeñas típicas de B.sporothermodurans, aunque cualquier otro tipo de colonia que aparezca, también demuestra una UHT deficiente.

La recuperación supera el 20% por encima de la obtenida en PCA y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a ciertos factores doping descubiertos y agregados por MICROKIT.

Esta fórmula, con menos agar, aumenta la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación del fondo de la placa.

Este medio está diseñado para siembra en masa de productos que han sufrido esterilización UHT, de modo que los resultados no son concluyentes en productos no-UHT, con numerosos falsos positivos (sobre todo si no se añade polimixina B).

Si desea sembrar en superficie, utilice 32 g/l de este mismo medio, en lugar de 27 g/l.

Para minimizar la desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas (MICROKIT SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de autoclavar.

https://www.microkit.es/fichas/HRS-RAPID-Cromogenic-sporothermodurans-Agar.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/10-Bacillus-monograf–a.pdf

ANEXO FOTOGRÁFICO

B.sporothermodurans en Maxim Agar Cromogénico (MICROKIT BCD515) en 3 días a 35ºC

B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532). Obsérvese el mayor tamaño de las colonias en 3 días a 35ºC, que con lupa ya muestran su forma de volcán

B.sporothermodurans en HRS cromogénico (MICROKIT DMT532) al que hemos añadido 37 g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022). Obsérvese el espectacular tamaño de las colonias en 3 días a 35ºC, que muestran a simple vista su forma de volcán

Mix de Acidolácticas en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias blancas o muy ligeramente rosadas

 

 

Bacillus cereus en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias céreas, enormes, fucsia, lobuladas

 

Bacillus subtilis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, lobuladas

 

Bacillus subtilis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009) al que hemos añadido 37 g/L de BHI Broth (MICROKIT DMT022): Colonias enormes, fucsia, lobuladas

Enterococcus faecalis en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con centro rojo y borde incoloro, aspecto similar a Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias pequeñas, redondas, con centro rojo y borde incoloro, aspecto similar a Enterococcus faecalis

Staphylococcus aureus en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): Colonias grandes, rojo burdeos, mucosas, redondas

Shigella flexneri en HRS cromogénico con polimixina (MICROKIT DMT532+SMS009): único Gram negativo testado que crece, con colonias enormes, fucsia, lobuladas

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

CONCLUSIÓN

BACILLUS SPOROTHERMODURANS AGAR HRS PERMITE LA DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESPORAS RESISTENTES A ALTAS TEMPERATURAS HRS (EJ:TETRABRICKS)

https://www.microkit.es/fichas/HRS-RAPID-Cromogenic-sporothermodurans-Agar.pdf

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.       

Si desea más información sobre nuestro BACILLUS SPOROTHERMODURANS CROMOKIT AGAR (HRS CROMOGENIC AGAR) póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

TODD HEWITT BROTH

Deja un comentario

TODD HEWITT BROTH, medio de cultivo en caldo para la detección y enriquecimiento de estreptococos hemolíticos

Detección de estreptococos hemolíticos (APHA)

COMPOSICIÓN

  • Infusión de corazón 10,0 g
  • Triptona                  20,0 g
  • Glucosa                     2,0 g
  • Cloruro sódico          2,0 g
  • Bicarbonato sódico   2,0 g
  • Fosfato disódico        0,4 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,8 ± 0,2

PREPARACIÓN TODD HEWITT BROTH

Disolver 36,4 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Autoclavar a 115 ºC durante 20 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT123

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Streptococcus agalactiae (grupo B) MKTA 13813, Correcto.
  • Streptococcus pyogenes (grupo A) MKTA 19615, Correcto.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Ver tubos con Gentamicina y  Ac.Nalidíxico, selectivos para gr.B, en el medio Todd Hewitt Selective Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1 ml de muestra en un tubo con 9 ml de medio. Incubar a 35 ºC aproximadamente, durante 18-24 horas y dar como positivos los tubos turbios.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TODD-HEWITT-STREPTOCOCCUS-BROTH.pdf

Si desea más información sobre nuestro TODD HEWITT BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

THIOGLICOLATO FLUIDO CON RESAZURINA (FTM)

Deja un comentario

TIOGLICOLATO FLUIDO CON RESAZURINA (FTM), medio de cultivo fluido para detección de aerobios y anaerobios en industria farmacéutica

Control de esterilidad (USP) (UNE 13401)

COMPOSICIÓN

  • Triptona                  15,000 g
  • Glucosa                   5,500 g
  • Extracto de levadura 5,000 g
  • Cloruro sódico         2,500 g
  • L‑Cistina                  0,500 g
  • Tioglicolato sódico  0,500 g
  • Resazurina               0,001 g
  • Agar‑agar                0,750 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,1 ± 0,2

De izquierda a derecha: FTM sin inocular, transparente; con anaerobios, turbio; con aerobios, turbio y rojo.

 

 

 

PREPARACIÓN

Disolver 30 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición  (al contener agar-agar)  para su total  homogeneización. Repartir en tubos o frascos y autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es paja claro, con banda roja arriba tras agitar. Enfríe suavemente para que la gelificación del Agar-Agar no provoque aspectos grumosos u opalescentes que podrían confundirse con crecimientos microbianos.

PARA USO EXCLUSIVO EN EL LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT122

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, Beige    PREPARADO: Estéril, Paja opalescente, Fluido denso (las burbujas, al agitar, suben lentamente)

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2,  1-7 días a 37 ºC, aplicando el método ISO 7937, UNE EN 13401: 2000, 2ª Real Farmacopea Española y 4ª Farmacopea Europea, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado):

  • Clostridium perfringens MKTA 13124, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente.
  • Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente.
  • Streptococcus pyogenes MKTA 19615, Excelente.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia, por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS, FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Utilizado para el test de esterilidad bacteriana en material farmacéutico y para cultivar microorganismos anaerobios, aerobios y microaerófilos. El agar, presente en un 0,75%, permite un buen crecimiento de los anaerobios, al retardar la difusión del oxígeno en el medio y al permitir sólo una lenta liberación del medio de las sustancias reductoras producto de los microorganismos y del anhídrido carbónico.

El tioglicolato sódico, ejerce como agente reductor y elimina el oxígeno del medio, evitando la formación de peróxidos letales. Además neutraliza el efecto bacteriostático de los compuestos mercuriales que puedan estar presentes en las muestras. La resazurina es el indicador de óxido‑reducción en vez del azul de metileno, más tóxico, presente en la fórmula original de Brewer.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Desoxigenar el medio, si está rosado, calentando unos segundos a 98 ºC, enfriar e inocular la muestra con rigurosa asepsia. Incubar a 35 ºC aproximadamente, durante 7-14 días. Una turbidez mayor a la del frasco control o la presencia de colonias floculadas indica que la muestra no es estéril. Para seguimiento de la Norma UNE-EN 13401 de Cl.perfringens, se utiliza como paso previo a la confirmación de colonias procedentes de TSC Agar (DMT175+SMT252):  Incubar 5 colonias en FTM, 18-24 h a 35-37°C aproximadamente, en anaerobiosis. Confirmar inoculando 5 gotas en Caldo Lactose Sulfite (DMT140+VMT136, tubos TPL018).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.         

Si desea más información sobre nuestro THIOGLICOLATO FLUIDO CON RESAZURINA (FTM) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

THIOGLICOLATO ALTERNATIVO)

Deja un comentario

THIOGLICOLATO ALTERNATIVO, caldo como el FTM pero sin agar-turbidez, para control de esterilidad de productos farmacéuticos

Control de esterilidad en productos turbios (USP)

COMPOSICIÓN

  • Triptona                  15,0 g
  • Glucosa                   5,5 g
  • Extracto de levadura 5,0 g
  • Cloruro sódico         2,5 g
  • L‑Cistina                  0,5 g
  • Tioglicolato sódico  0,5 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,1 ± 0,2

PREPARACIÓN

 

 

 

 

 

Disolver 29 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta  su total  homogeneización. Repartir en tubos o frascos y autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es paja claro, completamente transparente y sin banda roja (al no contener resazurina). Si no se utiliza el mismo día de la preparación, volver a hervir momentos antes de usar para eliminar el oxígeno del interior del medio.

PARA USO EXCLUSIVO EN EL LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT208

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, Beige    PREPARADO: Estéril, Paja transparente.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2,  1-7 días a 37 ºC, aplicando el método Farmacopea, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado):

  • Clostridium perfringens MKTA 13124, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Streptococcus pyogenes MKTA 19615, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia, por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, FRASCOS PREPARADOS.

 NOTA: Utilizado para detectar microorganismos anaerobios, aerobios y microaerófilos en el test de esterilidad bacteriana en material farmacéutico turbio o viscoso, en el mçétodo de filtración por membrana y también para lavado del material.

El tioglicolato sódico, ejerce como agente reductor y elimina el oxígeno del medio, evitando la formación de peróxidos letales. Además neutraliza el efecto bacteriostático de los compuestos mercuriales que puedan estar presentes en las muestras.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Desoxigenar el medio, si no está recién preparado, calentando unos segundos a 98 ºC, enfriar e inocular la muestra con rigurosa asepsia. Incubar a 30-35 ºC aproximadamente, hasta 7-14 días. La turbidez, la presencia de flóculos, de artefactos flotando en superficie o de sedimento en el fondo son  indicadores de crecimiento microbiano y por tanto, la muestra no es estéril.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura. 

Si desea más información sobre nuestro THIOGLICOLATO ALTERNATIVO rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16               

TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.)

Deja un comentario

TETRATIONATO TBG BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.) es un caldo para enriquecimiento de Salmonella (Pharmacopea medio I)

COMPOSICIÓN

  • Carbonato cálcico        20.0 g
  • Tetrationato potásico   20.0 g
  • Peptona                       8.6 g
  • Cloruro sódico             6.4 g
  • Sales biliares                8.0 g
  • Verde Brillante            70 mg
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7.0 ± 0,2.

Izquierda: Tetrationate TBG Broth estéril
Derecha: con Salmonella, aclaramiento del color.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Enfriar a unos 45 ºC. Distribuir en tubos o frascos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023). Para inhibir los Proteus añadir Novobiocina al 0,4% o bien bajar el pH a 6,5.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES, IRRITANTE.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT304

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Verdoso

PREPARADO: Estéril, Precipitado, verde.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C

aproximadamente:

  • Bacillus subtillis MKTA 6633, Inhibido.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Bueno, medio azul-verdoso.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Bueno, medio azul-verdoso.
  • Salmonella abony  MKTN 6017, Bueno, medio claro.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias (sin turbidez)

 

 

 

 

 

 

 

 

PRESENTACIÓN:  MEDIO DESHIDRATADO. Tubos preparados con Verde Brillante y solución Yodo-Iodurada. Frascos preparados con Verde Brillante, pero sin solución Yodo-Iodurada, que debe añadirla el usuario instantes antes del uso definitivo del medio (s/Pharmacopea).

 NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en medicamentos, aguas y alimentos. Se utiliza en paralelo a otros caldos de enriquecimiento, para evitar falsos negativos de ciertas cepas de Salmonella. El Carbonato cálcico actúa como neutralizante que absorbe los metabolitos tóxicos. Las sales biliares, el verde brillante y la temperatura de incubación lo hacen muy selectivo ante los Gram positivos (incluso los Clostridios) y muchos Gram negativos. Los microorganismos que tienen la enzima tetrationato-reductasa se multiplican de forma preferente en este medio.

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 35-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TETRATHIONATE-TBG-BROTH.pdf

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN (BASE)

Deja un comentario

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN (BASE) es un caldo para enriquecimiento de Salmonella que se puede convertir en TBG

Enriquecimiento de Salmonella (UNE 34-818:1985, UNE 34-554:1983)

COMPOSICIÓN

  • Triptona                  7.0 g
  • Tiosulfato sódico 40.7 g
  • Peptona de soja      2.3 g
  • Cloruro sódico        2.3 g
  • Carbonato cálcico   25.0 g
  • Sales biliares           4.75 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7.0 ± 0,2.

 

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK Base, suplementado con Verde Brillante, y con Salmonella.

PREPARACIÓN

Disolver 82 g de medio en 1 litro de agua destilada. (41 gramos para menor selectividad, como Tetrationato clásico). Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Enfriar a unos 45 ºC, añadir 9.5 ml de solución de verde brillante al 0.1% (VCC4634). Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR

SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT086

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

  • Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. Tubos preparados con Verde Brillante y solución Yodo-Iodurada. Frascos preparados con Verde Brillante, pero sin solución Yodo-Iodurada, que debe añadirla el usuario instantes antes del uso definitivo del medio (s/Pharmacopea).

 NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en versiones antiguas de la Norma ISO 6579, junto al Selenito Cistina Broth.

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que el caldo tetratrionato a mitad de concentración para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado: SS Broth.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas.Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TETRATHIONATE-BROTH-MUELLER-KAUFFMAN.pdf

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

MUELLER KAUFFMAN TETRATHIONATE BROTH VERDE BRILLANTE (BASE)

Deja un comentario

MUELLER KAUFFMAN TETRATHIONATE VERDE BRILLANTE (BASE) es un caldo como el TBG pero con suplemento, para enriquecimiento de Salmonella

Enriquecimiento de Salmonella (ISO 6579)

COMPOSICIÓN

  • Extracto de carne            4,3
  • Dig.enzimático caseína    8,6
  • Cloruro sódico                2,6
  • Carbonato cálcico           38,7
  • Tiosulfato sódico-5-h      47,8
  • Bilis de buey                   4,78
  • Verde Brillante          0,0096

(Fórmula en gramos por litro)

pH final: 8.0 ± 0,2.

 

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK con Verde Brillante, y con Salmonella.

PREPARACIÓN
 

Disolver 106,8 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

 

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR

SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT177

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

  • Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

 

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 

NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en  la Norma ISO 6579 (en versiones antiguas junto al Selenito Cistina Broth).

 

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que los otros caldos Tetratrionato (DMT086 y DMT304) para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado por MICROKIT por sus mayores sensuibilidad y especificidad: SS Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TCBS VIBRIO AGAR

Deja un comentario

AGAR TCBS PARA VIBRIO

VIBRIO TCBS AGAR es el medio de cultivo más clásico para detección de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae y demás especies de Vibrio

Selección de Vibrio cholerae (ICMSF, APHA, FDA) y V.parahaemolyticus (ISO 8914:1990 modificada). ISO/TS 21872-1:2007.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                    10,00 g
  • Extracto de levadura   5,00 g
  • Tiosulfato sódico      10,00 g
  • Citrato sódico           10,00 g
  • Cloruro sódico          10,00 g
  • Bilis                            8,00 g
  • Sacarosa                   20,00 g
  • Citrato férrico             1,00 g
  • Azul de timol              0,04 g
  • Azul de bromotimol    0,04 g
  • Agar‑agar                  14,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 8,6 ± 0,2

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

                       

 

 

 

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

PREPARACIÓN   

Disolver 88 g de medio en 1 litro de agua destilada. Para vibrios hiperhalófitos ( V. parahaemolyticus, …) puede requerir la adición de otros 20-50 g/l de Agua de Mar (DMT149) o de Cl Na (BCB101).

Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Hervir 1 minuto y enfriar o bien autoclavar a 116 ºC durante 5 minutos, aunque resulta más recomendable el primer método. Añadiendo después TTC (SDA018) cuando el medio se ha enfriado a 45°C, el TCBS es más diferencial.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT119

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema-verdoso  PREPARADO: Estéril, Verde

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Escherichia coli MKTA 25922, Escaso, colonia translúcida.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Escaso, Colonias muy pequeñas y amarillas.
  • Vibrio cholerae MKTA 14035, Bueno, Colonias amarillas.
  • Vibrio parahaemolyticus MKTC 613, Bueno con 30-60 g/l de ClNa, Colonias azules.

PRESENTACIÓN:

FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS INCLINADOS CON Y SIN 30 g/l ClNa.

Medio selectivo indicado para el aislamiento y el recuento de Vibrio. (ICMSF, FDA, APHA). Por su pH alcalino y su contenido en sales, inhibe el crecimiento de la mayor parte de microorganismos, excepto los halófilos.

 NOTA 1:

-Numerosas especies de Vibrio provocan enfermedades gastrointestinales y sistémicas en el hombre por ingesta de pescados y mariscos crudos o mal cocinados, ya que en el agua raramente alcanzan la dosis infectiva necesaria: V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.mimicus, V.fluvialis, V. hollisae, V.furnisii, Otros como V. alginolyticus, V.damsela, V.vulnificus, V.metscnikovii… podrían también estar implicados. Todos ellos son marinos costeros, excepto V.cholerae y V.mimicus que viven en aguas continentales. La mayor frecuencia de sus toxiinfecciones se produce en verano.

 NOTA 2:

-La mayoría de capturas de pescado (hasta el 96%) y marisco (100% de cocinas) costeros en verano contienen V.parahaemolyticus, lo cual no ocurre el resto del año.

El agua del grifo y el vinagre destruyen gran parte de las células presentes en el pescado, por ello es conveniente lavarlos bien bajo el grifo y acidificarlo por debajo de pH 4,5.

El cocinado destruye sus células, desde 15 minutos a 60°C. La refrigeración frena su crecimiento y la congelación incluso lo hace decrecer.

Se deben prevenir las contaminaciones cruzadas de pescado cocinado con pescado crudo, ya que en sólo 10 minutos duplica su población y en unas horas pueden desarrollarse millones. Se concentra en la piel, agallas e intestino de los pescados.

También provoca otitis e infecciones de heridas. Si no se detecta en las matrices indicadas y en verano, a menudo no es por su ausencia sino porque no se pre-enriquece adecuadamente en TSB, de modo que los microorganismos estresados no se manifiestan ni en el caldo de enriquecimiento Alkaline Saline ni en el agar de aislamiento selectivo TCBS.

 NOTA 3:

-Vibrio cholerae incluye el virulento biotipo clásico (que no hemoliza los hematíes de carnero y cabra pero si los de hombre y conejo), y el menos virulento pero pandémico biotipo El Tor (que sí hemoliza los hematíes de carnero y cabra). Aunque en la actualidad la mayoría de casos de esta enfermedad son  leves, puede ser mortal por deshidratación de hasta 20 litros de agua al día en la persona contagiada. También provoca otitis e infecciones de heridas. Se difunde por el agua y alimentos contaminados con ella, sobre todo con las heces de los individuos enfermos. Pero el agua continental es su reservorio natural.

 NOTA 4:

-El TCBS Agar está diseñado para detectar la mayoría de especies de Vibrio, pero no para los otros géneros de la familia Vibrionáceas: Aeromonas spp., Plesiomonas spp. y Photobacterium spp.

 SIEMBRA

Sembrar en superficie las placas, en estria, a partir del enriquecimiento en Alkaline Vibrio Broth (para V.cholerae) o en Vibrio Hipersaline Broth-Alkaline Saline Broth (para V.parahaemolyticus y otras especies halófilas), previamente preenriquecidos en TSB para eliminar el stress (este preenriquecimiento permite la detección un 50% más veces que sin él). Incubar de 18 a 24 horas a 28-35 ºC.

INTERPRETACIÓN

Vibrio cholerae

tipo El Tor forma colonias amarillas por fermentación de la sacarosa (naranjas si se añadió TTC) con viraje del medio a amarillo.

Toda prueba posterior debe realizarse desde colonias repicadas en Nutrient Agar-Vibrio DMT126 o de lo contrario se obtendrán falsos negativos.

Para evitar falsos positivos, recordar que a diferencia de las Enterobacterias, Vibrio cholerae es oxidasa positivo, a diferencia de los Coliformes, es lactosa negativo (aunque indol +) y a diferencia de otros Vibrio, no crece con >6% (60 g/l) de ClNa, pudiendo crecer en absoluta ausencia de ClNa.

Ciertas cepas de Vibrio cholerae se detectan mejor incubando a aproximadamente 28°C, temperatura más acorde con su reservorio natural (peces).

Vibrio parahaemolyticus

no fermenta la sacarosa (excepto cepas especiales, que crecen en TCBS amarillas con centro verde) y crece con colonias verde‑azuladas sin virar el medio, incluso añadiendo TTC.

Es oxidasa +, Lactosa-, Indol +  y crece hasta con 80 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 30 g/l.

Vibrio alginolyticus

fermenta la sacarosa y crece en TCBS con grandes colonias amarillas (naranjas con TTC), virando el medio a amarillo.

Es oxidasa +, Lactosa-  y crece hasta con 100 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 40 g/l.

Se distingue de V.parahaemolyticus porque en TSAT crece con colonias blancas y pequeñas, ocasionalmente con centro rojo, mientras éste crece con grandes colonias totalmente rojas.

Vibrio vulnificus

no fermenta la sacarosa y crece con colonias verde-azuladas en TCBS. Es oxidasa +, Lactosa +  y crece hasta con 60 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia.

También se distingue de V.cholerae por ser a menudo Lactosa +.

Vibrio cholerae

 

 

 

 

 

V.alginolyticus

 

 

 

 

V.cholerae (sin y con TTC)

 

V.parahaemolyticus

 

 

 

 

 

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.    

https://www.microkit.es/fichas/TCBS-VIBRIO-AGAR.pdf

Si desea más información y precios actualizados sobre nuestro TCBS VIBRIO AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/14-Vibrio-monograf–a.pdf

 

T.B.X. Tryptone Bile X-Glucurónido Agar

Deja un comentario

TBX Tryptone Bile X-Glucurónido Agar, medio cromogénico para detección y recuento de E.coli según ISO 16649

https://www.microkit.es/fichas/TBX-E-COLI.pdf

Medio para la detección y recuento confirmativo de Escherichia coli en aguas, por el método de Filtración de Membrana, mediante ensayo rápido según Norma ISO 9308-1:2001, BOE 45 de 21/2/2003 de aguas de consumo humano y BOE 259 de 29/X/2003 de aguas de bebida envasadas. Para alimentos según Norma ISO 16649-2. Y para piensos según Norma ISO/TC 34/SC9.

COMPOSICIÓN

  • Triptona              20,0 g
  • Sales Biliares       1,5 g
  • X-Glu                  0,075 g
  • Agar-Agar           14,0 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,2 ± 0,2

E.coli en Agar T.B.X.

PREPARACIÓN

Disolver 35,6 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición. Repartir en envases de menos de 250 ml. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

Enfriar a unos 55°C aproximadamente y verter en placas formando una capa de espesor no inferior a 5 mm.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL MEDIO PREPARADO  A 15-21°C, EN TOTAL OSCURIDAD. PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO CODIGO: DMT147. Frascos preparados para fundir en placas. Tubos preparados de agar inclinado.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar el laboratorio, tras conservar a alta Tª por fallos de refrigeración, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de su etiqueta…)

DESHIDRATADO: Polvo crema.

PREPARADO: Agar crema, homogéneo, traslúcido.

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 44°C aproximadamente:

  • E.coli  MKTA 25922, Crecimiento correcto, colonias azul-verdosas, rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 95-131 %, pero de forma selectiva.
  • Klebsiella oxytoca  MKTA 13182, Crecimiento correcto, colonias a menudo azul claro, pero nunca rojas tras la prueba del indol a 44°C. Con respecto a PCA estandarizado,* recuento 121 %, pero de forma selectiva.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P,  inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Las placas no deben estar recién hechas, ya que en este medio hay que dejarlas enfriar más de una hora para que la superficie quede bien dura.

Sembrar la membrana filtrada (procedente de incubación de 4-5h a 34-38 °C, en TSA) evitando la formación de burbujas entre el filtro y el medio. O bien sembrar 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, para siembra en masa, añadiendo después 15-20 ml de medio fundido a 100°C y atemperado a 47-50°C y mezclando. Dejar solidificar del todo más de 1 hora. Incubar 19-20 horas a 44 ± 0,5 °C. Para muestras con probables células subletales, preincubar 4 horas a 37°C aproximadamente. Todas las colonias verde-azuladas son presuntos E.coli.

Colocar la membrana sobre un cartón saturado en reactivo de Indol Kovacs (SBH056) e irradiar con luz ultravioleta entre 10 y 30 minutos. Se cuentan todas las colonias que viran el reactivo a rojo, considerándolas como E.coli.

El usuario final es el único responsable de eliminar los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar o inundar en lejía antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro T.B.X. Tryptone Bile X-Glucurónido Agar rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16