ENDO: M‑ENDO BROTH en el caldo clásico de filtración de membrana para la detección y recuento de coliformes (Incl.E.coli) en aguas naturales

Detección y enumeración de Coliformes por el método de filtración de membrana

 COMPOSICIÓN

• Triptona                             5,000 g
• Peptona de carne             5,000 g
• Triptosa                            10,000 g
• Extracto de levadura        1,500 g
• Cloruro sódico                   5,000 g
• Lactosa                             12,500 g
• Fosfato dipotásico             4,375 g
• Fosfato monopotásico      1,375 g
• Sulfito sódico                      2,100 g
• Desoxicolato sódico          0,100 g
• Lauril sulfato sódico          0,050 g
• Fucsina básica                    1,050 g

(Fórmula por litro)      pH final: 7,2 ± 0,1

PREPARACIÓN

Disolver 48 g. en 1 litro de agua destilada fría conteniendo 20 ml. de etanol. Esterilizar por filtración o bien 1 minuto a 116 ºC. NO sobrecalentar.

PRECAUCION: La Fucsina básica es potencialmente cancerígena.

Proteger rigurosamente el medio preparado de la luz.

PARA USO EN LABORATORIO. TOXICO. Ensucia fácilmente y es difícil de limpiar (J usar lejía en caliente). MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. DESHIDRATADO CODIGO: DMT168

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Púrpura

PREPARADO: Estéril, Rosa, luego Rojo vino precipitado

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

• Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Negativo.
• Escherichia coli MKTA 25922, Moderado, Colonia rojo rosadas, centro negro y brillo metálico verdoso.
• Salmonella abony MKTN 6017, Moderado, colonias incoloras sin brillo metálico.
• Pseudomona aeruginosa MKTA 9027, Moderado, colonias incoloras sin brillo metálico.

 

PRESENTACIÓN: VIALES FM, MEDIO DESHIDRATADO

 

NOTA: Medio extraordinariamente selectivo para la enumeración de coliformes en agua y otros productos por la técnica de Filtración de Membrana (FM), de acuerdo con la APHA. Los coliformes viran el medio a púrpura, con mayor o menor brillo metálico (E. coli, máximo reflejo).

 

SIEMBRA

Añadir un vial o 2 ml de medio sobre un cartón absorbente previamente colocado dentro de una placa Petri estéril de 55 mm de diámetro, depositar encima la membrana de filtración (tras filtrar la muestra) con cuidado de que no se formen burbujas entre la membrana y el cartón con medio. Incubar a 35-37 ºC aproximadamente, durante 24-48 horas.

 

INTERPRETACIÓN

Las colonias rojo‑violáceas son de coliformes; las de otros colores son de otros microorganismos.  PRECAUCIONES: 1‑ La fucsina básica es potencialmente cancerígena: no tocar ni inhalar el medio en polvo o preparado. 2‑ Conservar a 4‑25 ºC protegido de la luz, para preservar su coloración característica. 3‑ No sobrecalentar. 4- El medio es excesivamente selectivo, por lo que recomendadmos su sustitución por MUGPLUS Cfs. Broth (viales y viales pinchables, no existe deshidratado

 

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