Caldo Lauril Sulfato Triptosa (LST Broth): El Estándar para Coliformes y E. coli
El Caldo Lauril Sulfato Triptosa (LST Broth) es el medio clásico de Caldo NMP (Número Más Probable) utilizado para la detección y enumeración de bacterias coliformes en muestras de agua, lácteos y alimentos. Este medio es un estándar reconocido y se aplica en metodologías oficiales como ISO 4831:1991 e ISO 7251:1993.
- Innovación en el Recuento: Es importante destacar que el método LST tradicional, que utiliza campanas Durham, puede ser sustituido por medios más modernos como Colicult o Lauryl Broth MUG, que simplifican el proceso al eliminar la necesidad de las campanas Durham.
Izda: Sin crecimiento.
Dcha: Coliformes (turbidez y gas en la campana Durham).
1. Composición y Principio de Acción
El LST Broth proporciona un entorno nutricional rico que estimula el crecimiento de los coliformes, al mismo tiempo que inhibe la flora bacteriana acompañante.
| Componente | Cantidad por Litro (g) | Función Principal |
| Triptosa | 20.00 g | Fuente primaria de Nitrógeno de alto valor biológico. |
| Lactosa | 5.00 g | Carbohidrato fermentable, indicador de coliformes. |
| Cloruro Sódico | 5.00 g | Mantiene el equilibrio osmótico. |
| Fosfato Di/Monopotásico | 5.50 g | Sistema tampón para mantener el pH. |
| Lauril Sulfato Sódico | 0.10 g | Agente selectivo que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram positivas. |
Fórmula por Litro
pH final: 6.8 +/- 0.2
2. Preparación y Control de Calidad
Preparación del Medio Deshidratado
- Disolución: Disuelva 35.7 g del medio deshidratado en 1 litro de agua destilada.
- Esterilización: Autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
- Código Deshidratado: DMT064.
Control de Calidad y Rendimiento
Nuestra fórmula deshidratada es un Polvo grueso, Tostado, que resulta en un medio Estéril, color Paja una vez preparado.
| Cepa de Referencia | Resultado de Crecimiento | Detección de Gas (en Campana Durham) |
| Escherichia coli 25922 | Turbidez en los 9 tubos | 9 tubos con gas en1/3 de la campana) |
| Citrobacter freundii 43864 | Turbidez en los 9 tubos | 9 tubos con gas en 1/3 de la campana) |
| Salmonella abony 6017 | Turbidez en los 9 tubos | Sin producción de gas (Falso negativo de Coliforme) |
| Enterococcus faecalis 29212 | Inhibido | Sin turbidez ni gas |
3. Protocolo de Siembra e Interpretación
Siembra
Utilice el método del Número Más Probable (NMP) para la enumeración.
- Inoculación Estándar: Inocule 1 mL de la muestra (y su serie de diluciones decimales) en los tubos.
- Inoculación de Alto Volumen: Para volúmenes de muestra grandes 10 mL, utilice tubos con el medio preparado a doble concentración.
- Incubación General (Coliformes): Incubar a 32 -35 °C aproximadamente, durante 24-48 horas.
- Incubación para E. coli (Coliformes Fecales): Incubar a 44 °C aproximadamente.
Interpretación de Resultados
La reacción positiva en el LST Broth se basa en la fermentación de la lactosa:
- Resultado Positivo (Presencia de Coliformes): Se confirma por la turbidez del medio (crecimiento) acompañada de la aparición de gas retenido en la campana Durham en un periodo de 48 horas.
- Resultado Negativo (Ausencia de Coliformes): Ausencia de turbidez o presencia de turbidez sin gas.
Recomendación de Confirmación:
Se recomienda la confirmación posterior de los tubos positivos en Caldo Bilis Verde Brillante (BGBL). Una alternativa más eficiente es sustituir directamente el LST Broth por el Lauryl Broth MUG o sembrar en un un medio Cromofluorogénico (Colicult) o agar cromogénico (MugPlus), que permiten la confirmación y enumeración simultánea de E. coli y demás coliformes
Presentación y Uso
- Presentación: Tubos preparados con campana Durham 9 mL y Medio Deshidratado.
- Uso: Medio ideal para la detección y enumeración de coliformes en el control de calidad de aguas, lácteos y otros productos alimentarios.
Almacenamiento: Para mantener la integridad del producto, agite el bote antes de usar y manténgalo bien cerrado en un lugar seco, fresco y oscuro.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
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