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LEGIONELLA GVPC, BCYE (con Fe y Cys), BCYE-Cys, (AGAR BASE)

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LEGIONELLA GVPC, BCYE (con Fe y Cys), BCYE-Cys, (AGAR BASE)

LEGIONELLA GVPC

Aislamiento selectivo de Legionella por el método MF o por siembra directa

(ISO 11731:2017, ISO 11731-2:2004)

COMPOSICIÓN

Medio BASE:

Carbón activado 2,0 g
Extracto de levadura 10,0 g
Agar‑Agar 22,0 g
Alfa-ketoglutarato (sal mono-K) * 1,0 g
(Fórmula por litro)
pH final: 6,9 ± 0,1

GVPC Suplemento Selectivo+Nutritivo estéril en solución 200 ml SBL604

Agite contundentemente y añada en asepsia 40 ml a 500 ml de medio enfriado a 50 ºC (o bien 8 ml a 100 ml de medio).

Puede contener precipitados por su elevada concentración pero desaparecen al diluir en el medio BCYE base. c.s.p. 2’5 l de medio.

Contiene las proporciones precisas, según ISO 11731, de: Tampón ACES, «-Cetoglutarato, KOH, Clorhidrato de L-Cisteina, Pirofosfato férrico, Vancomicina, Cicloheximida, Polimixina y Glicina.

Contiene elementos tóxicos, evitar el contacto con la piel.

NOTA 1: La ref. SBL609 es idéntica al suplemento GVPC (con Fe y Cys) pero sin los tres antibióticos del GVPC selectivo, para elaborar el BCYE (con Fe y Cys).

La ref. SBL605 es idéntica al suplemento GVPC pero sin la Cisteína, para elaborar el BCYE-Cys, aunque éste se puede sustituir por simple TSA.

NOTA 2: EL caldo GVPC para preenriquecimiento revitalizador, es idéntico al Agar GVPC pero sin Agar-Agar y con el carbón granulado (ver kit P/A Legionella en tubos preparados, ref.RPL330).

Ideal para usar antes de la ISO 11731 y encontrar de forma mucho más eficaz la Legionella tras revitalización.

PREPARACIÓN (conversión del medio deshidratado en medio preparado)

Disolver 17 gramos de medio en 500 ml de agua bidestilada.

Calentar hasta hervir para la total disolución.

Autoclavar a 121 ºC, 15 minutos.

El color final del medio es negro.

Enfriar a 45-50 ºC y, para el medio selectivo GVPC, añadir asépticamente 40 ml de Legionella Supplement-200 ml (SBL604, tampón ACES/KOH; nutritivo con α-ketoglutarato, clorhidrato de L-cisteina y pirofosfato férrico;

y selectivo, con Vancomicina, Polimixina, Cicloheximida y Glicina);

para el medio no-selectivo BCYE con Fe y Cys, añadir 40 ml de SBL609 (con Fe y Cys pero sin los antibióticos).

Para el medio BCYE-Cys, añadir 40 ml de Legionella-Cys Supplement-200 ml (SBL605, tampón ACES/KOH, α-ketoglutarato y pirofosfato férrico), aunque como es para ver que en él no crecen las Legionellas, se puede sustituir por simple TSA, donde tampoco crecen.

Mezclar muy bien y verter 20 ml/placa cuando el medio esté a punto de solidificar, para que la distribución del carbón activo sea lo más homogénea posible.

No sobrecalentar o el agar se volverá demasiado blando: Es posible que sea necesario añadir aún más Agar-agar (BCB006) para minimizar la friabilidad del agar, si se va a sembrar con asa (aceptado en ISO 11731).

PARA USO EXCLUSIVO

EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO

EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT007

CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS GVPC y BCYE + Fe + Cys

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio,

tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, Negro

PREPARADO: Estéril, Negro.

CONTROL DE CRECIMIENTO 2 semanas a 37°C aproximadamente:

Legionella pneumophila MKTN 12821 serogrupo1, Correcto, colonias gris-azuladas, cristalinas, mucosas, en 2-15 días, en medio suplementado GVPC y en BCYE+Fe+Cys.

No crece en medio BCYE-Cys, sin suplemento nutritivo de hierro y cisteína.

En el medio BCYE con suplemento nutritivo pero sin antibióticos, crece aproximadamente el doble de población que en el GVPC.

Con respecto a PCA estandarizado y suplementado,* recuento 126 %, pero de forma selectiva.

Legionella pneumophila serogrupo 2-15, MKTLeg-2, Idem.

Escherichia coli, MKTA 25922 parcialmente inhibido. Con respecto a PCA estandarizado y suplementado,* recuento 27 %.

Micrococcus luteus MKTA 9341, inhibido en el GVPC selectivo.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo. Incertidumbres detectadas entre todos los lotes a lo largo de un año (la mayoría de la incertidumbre se debe a la cepa y a la proporción de cepas acompañantes inoculadas, no al medio).

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO (BCYE BASE) Y SUPL. GVPC / BCYE+Fe+Cys,

KITS P/A caldo revitalizante,

PLAQUIS HERMÉTICAS Y PLACAS MF GVPC,

FRASCOS PREPARADOS 100 ml (BCYE-BASE) + SUPL. GVPC / BCYE+Fe+Cys.

Suplemento selectivo + nutritivo para GVPC (SBL604).

El suplemento sin Cysteina para BCYE-Cys.

Suplemento nutritivo Fe + Cys sin antibióticos para BCYE.

Nuevo: Placa preparada GVPC (con glicina, cisteína, hierro, ACES y antibióticos) pH 6,8 s/ISO 11731:2017 (Ref: PPLM60) y placa preparada BCYE (idem sin antibióticos ni glicina) pH 6,8 s/ISO 11731:2017 (Ref: PPLM61)

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACION DE RESULTADOS

Medio selectivo GVPC:

Inocular una membrana de filtración de 0’22 µm (VAC022, no usar de 0,45 µm), o mejor 0´1 ml de un extracto del fondo del tubo tras la centrifugación a 2500 r.p.m., 20′ de una muestra rascada,

o bien 0’1 ml del fondo del caldo de enriquecimiento concentrado (RPL330) sobre una placa.

O aplicar una placa de contacto sobre la superficie, o bien introducirla en un aparato de control de aire.

Preincubar estrictamente 30 minutos a 50 ºC para eliminar flora competitiva acompañante.

Incubar a 35 ºC aproximadamente, en atmósfera húmeda de 2 a 14 días.

Las colonias de Legionella pneumophila son blanco-azuladas, brillantes, mucosas, de 1-2 mm Ø, circulares, lisas, algo elevadas y con los bordes enteros,

fluorescentes (verde mate a menudo teñido de amarillo) en la oscuridad bajo luz UVA (linterna MICROKIT VMT050).

Subcultivar 3 colonias en BCYE+Fe+Cys (sin antibióticos) y en BCYE-Cys (o TSA), al menos 2 días a 36 ± 1°C.

Legionella crece en BCYE (con Fe y Cys) sin antibióticos (y en GVPC), pero no crece en BCYE-Cys (ni en medios generales tipo TSA, agar sangre, PCA, YEA, Nutrient Agar…).

Las colonias deben confirmarse con oxidasa positivo, a menudo lento (KOT050), catalasa positiva (KMT299) y serotipado (M-IDENT-LEGIONELLA-VIRAPID VR002, QUE PUEDE USARSE DIRECTAMENTE EN EL PRIMER AISLAMIENTO DE GVPC Y AHORRARSE ASÍ EL TIEMPO Y COSTE DE LAS OTRAS PLACAS DE BCYE (con Fe y Cys) y BCYE-Cys (o TSA).

Contar sólo la placa de GVPC con más colonias de Legionella pneumophila.

Si no se encuentra, expresar los resultados como “no detectada”, ya que a veces está presente y no crece.

Peligro, microorganismos de alto riesgo para inmunodeprimidos, por inhalación de aerosoles (pero no llega a considerarse de Clase III).

NOTA:

Los otros dos medios mencionados en la ISO 11731:2017 (BCYE con suplementos selectivos: BCYE+AB, Modified Wadowsky Yee: MWY) son alternativos, no son necesarios.

Esta nueva versión 2017 de la Norma describe la fluorescencia de otras especies de Legionella:

L.anisa, L.bozemanii, L.cherrii, L.dumoffii, L.gormanii, L.gratiana, L.parisiensis, L.steigerwaltii y L.tucsonensis) tienen autofluorescencia blanca brillante;

L.erythra y L.rubrilucens aparecen rojas;

L.pneumophila verde mate, a menudo teñido de amarillo .

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan multiplicado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro LEGIONELLA GVPC, BCYE (con Fe y Cys), BCYE-Cys, (AGAR BASE) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto.

O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/LEGIONELLA-GVPC-y-BCYE-AGAR-BASE.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/9-Legionella-monograf–a.pdf

Quanti-P/A Clostricult – Clostridium perfringens

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Quanti-P/A Clostricult – Clostridium perfringens KIT

Quanti-P/A Clostricult – Clostridium perfringens KIT para detección y recuento optimizados, ya que no oxigena las células durante el análisis

Recuento de Clostridium perfringens y/o de Clostridios sulfito-reductores en 1 g, 50 ml, 100 ml ó 250 ml de muestra

Quanti-P/A-Clostricult-TSC para detección y recuento fiables de Clostridium perfringens en 100 ml de muestra de aguas potables o en 1 gramo/ml de muestra de alimentos. Ref: QPA-CP (caja 20 u)

Quanti-P/A-Clostricult-SPS para detección y recuento fiables de Clostridium sulfito-reductores en 1 gramo/ml de muestra de alimentos/cosméticos o en 50 ml de muestra de aguas envasadas. Ref: QPA-CSR (caja 40 u)

Dos premisas importantes

Clostridium perfringens es un anaerobio estricto que por el método destructivo de filtración de membrana, aunque sea el método oficial, ve reducida su concentración a niveles inaceptables (baja al 10% e incluso al 1% respecto al valor inóculo, cuando debería recuperarse al menos un 50-95 % del valor inóculo) y además es incapaz de ofrecer una sensibilidad adecuada (el 49% de las aguas con este microorganismo, casi la mitad, dan falso negativo con dicho sistema, cuando deberían dar como máximo un 5% de falsos negativos; y no sólo con el medio de la Directiva 2003 de aguas de consumo, el Agar m-CP, también con el medio de la Nueva Directiva 2015 de aguas de consumo, el Agar TSC).

Por otra parte el sistema DryPlates para recuento de microorganismos, por inclusión en masa de 1 ml de muestra, sin necesidad de calentar/enfriar agares, no puede emplearse en anaerobios estrictos, porque la fina capa de medio los oxigena demasiado. Desde la invención de las DryPlates en 2014, MICROKIT ha estado intentando encontrar el método idóneo para hacer recuentos de Clostridium perfringens y de Clostridium sulfito-Reductores en 1 ml de muestra de alimento o cosmético, en 50 ml de aguas envasadas y en 100 ml de aguas de consumo humano. Y tras 3 años, en Junio de 2017 por fin lo ha conseguido!

La solución

Damos la bienvenida al futuro a los pioneros, con criterio propio, que no se dejan cegar por la ortodoxia normativa! Sin duda pasarán años hasta que este nuevo método sea el oficial, pero de ninguna manera eso significa que no deba emplearlo desde ya y adelantarse al futuro normativo, que siempre es tan lento. La fiabilidad de resultados es lo más importante. Y actualmente, esta fiabilidad está gravemente comprometida en los recuentos de anaerobios.

Empleando el mismo hidragar de las DryPlates diseñado y patentado por MICROKIT, mezclado con el medio de cultivo TSC (QPA-CP para Clostridium perfringens) o SPS (QPA-CSR para Clostridios sulfito-reductores) en bolsas transparentes, rígidas y herméticas, con tapón a rosca, se consigue una recuperación muy cercana al 100% del valor inóculo y una sensibilidad también muy cercana al 100% de las muestras realmente positivas. Hemos bautizado este nuevo método patentado por MICROKIT con el nombre Quanti P/A, porque utilizamos los mismos caldos P/A que diseñamos hace décadas, pero con el hidragar de las DryPlates para poder hacer recuentos.

Se añaden como ventajas a la fiabilidad mediante estos excelentes resultados, la comodidad del método (ahorro de filtraciones de membrana, que además son destructivas para las células subletales; siembra en masa sin necesidad de calentar y enfriar agares) y su extraordinaria caducidad (3 años desde fabricación). Además, se ahorra el empleo de jarras y de costosas atmósferas de anaerobiosis, ya que se incuba hermético en ausencia de aire (semivacío).

El Agar TSC

es el medio Normativo para análisis de Clostridium perfringens, tanto en muestras de alimentos (ISO 13401), como de aguas de consumo humano (ISO 14189).

El Agar SPS

es el medio Normativo (AOAC) para análisis de Clostridium sulfito-Reductores, tanto en muestras de alimentos, como de aguas envasadas.

¡Enhorabuena por utilizar el mejor método para recuento de anaerobios en aguas (o en alimentos y cosméticos) sin necesidad de calentar/enfriar agares, sin oxigenar por filtración y sin necesidad de atmósferas de anaerobiosis, sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados, de los medios preparados hidratados en tubo, frasco o botella y del método destructivo de Filtración de Membrana!

MODO DE EMPLEO

(ver tutorial en https://www.youtube.com/watch?v=A8WifR8mZ1k ):

**1) para detección y recuento de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 ml de muestra de aguas de consumo humano:**

A) Incluir la muestra

Tome un Quanti-P/A-CP, dele la vuelta para que el medio salga del fondo, doble el fondo de la bolsa para que no vuelva a depositarse allí, ponga la bolsa vertical con el fondo doblado, abra el tapón y añada por el orificio, con pulso para evitar derrames, 100 ml de la muestra de agua (tratada con Na TioSulfato si es clorada). Si lo que busca son esporas, caliente el agua de muestra a 75 ºC antes de añadirla al kit. Lo ideal es analizar una muestra de 100 ml a temperatura ambiente para formas vegetativas y un duplicado de 100 ml de la misma muestra a 75ºC para esporas. Los eventuales artefactos negros, púrpura o rosados no afectan los resultados: son de contorno irregular, no crecen al incubar, es más: desaparecen, a diferencia de las colonias. Apriete para que el agua llegue casi al borde del tapón y quede muy poco aire.

B) Mezclar bien

Cierre con fuerza el tapón. Amase el conjunto con las dos manos unas 10-30 veces (o bien con stomacher-masticator) para mezclar el medio con los 100 ml de muestra de agua. Si queda polvo o algún grumo de más de 1 cm, pellízquelo hasta que se disuelva o parta. No se preocupe por los pequeños grumos que queden, desaparecerán durante la incubación. Cuanto mejor amase mejores resultados obtendrá, al separar mejor las ufcs. Aplane la bolsa contra la poyata y planche el medio hidratado con la muestra, en toda la superficie interna de la bolsa, para que la capa de medio sea lo más homogénea y fina posible, y así luego pueda contar mejor las colonias al trasluz. Puede ayudarse con una caja de frascos MICROKIT llena de frascos de 100 mL (peso ideal para el mejor planchado). El agua fría se disuelve peor.

C) Incubar

Deposite la bolsa horizontal en la estufa de cultivos, verificando que el tapón sigue herméticamente cerrado. Puede apilar numerosas bolsas, alternando su posición (tapones al N en una capa, al S en otra, al E en otra, al W en otra…)

Incube 24-48 horas a 35-45ºC (a 35ºC puede haber falsos positivos de colonias negras de fermentadores facultativos: Staphylococcus, Salmonella, Proteus, Klebsiella, Citrobacter…). Si se prolonga la incubación, las colonias se agrandan, se solapan y en caso extremo todo el medio ennegrece, impidiendo así el recuento que, por este motivo, debe hacerse entre 24 y 48 h desde iniciada la incubación. Si a las 24 h no hay crecimientos, espere a leer a las 48h. Durante la incubación, en caso positivo extremo, la bolsa se podría hinchar del gas generado.

D) Interpretar resultados

Extraiga la bolsa y cuente al trasluz todas las colonias o burbujas negras, que serán el número de ufc de Clostridium perfringens en 100 ml de muestra de agua. Cuente primero por una cara y repita el recuento por la otra, ya que el medio es traslúcido: Sume los recuentos de ambas caras evitando contar dos veces la misma colonia. En este sistema se cuentan perfectamente entre 0 y 200 colonias. Puede confirmar las colonias con el kit KMT008 (ISO 6461 y FDA) pinchando a través de la bolsa.

**2) para detección y recuento de Clostridium perfringens y sus esporas en 1 g ó ml de muestra de alimentos o cosméticos (u otras matrices):**

Siga exactamente los mismos pasos descritos en el apartado anterior, con las siguientes salvedades:

Mezcle su ml ó gramo de muestra con 100 ml de medio estéril FTM (puede emplear agua peptonada tamponada, Ringer, Solución marina al 0,9 %, agua…, aunque FTM es lo ideal para conseguir los más óptimos resultados en anaerobios).
Cuente todas las colonias o burbujas negras, que serán el número de ufc de Clostridium perfringens en 1 ml ó gramo de muestra de alimento, cosmético o la matriz que sea (aumenta x10 el límite inferior). En este sistema se cuentan perfectamente entre 1 y 100 colonias.

3) para detección y recuento de Clostridium sulfito-reductores en 50-100 ml de muestra de aguas envasadas:

Siga exactamente los mismos pasos descritos en el apartado 1), con las siguientes salvedades:

En este caso use la bolsa Quanti-P/A-CSR.
Añada 100 ml del agua de muestra (o 50 ml de su agua de muestra más 50 ml de agua estéril) y amase sobre la pila para prevenir posibles derrames. Siga los demás pasos indicados en el apartado 1)
Incube 24 horas a 35ºC aprox.
Cuente todas las colonias o burbujas negras, que serán el número de ufc de Clostridium sulfito-reductores en 50-100 ml de agua envasada. En este sistema se cuentan perfectamente entre 1 y 100 colonias.

4) para detección y recuento de Clostridium sulfito-reductores en 1 g ó ml de muestra de alimentos o cosméticos (u otras matrices):

Siga exactamente los mismos pasos descritos en los apartados 1) y 3), con las siguientes salvedades:

Mezcle su ml o gramo de muestra con 100 ml de medio estéril FTM (puede emplear agua peptonada tamponada, Ringer, Solución marina al 0,9 %, agua,…, aunque FTM es la mejor opción en anaerobios). Aumenta x10 el límite inferior de cuantificación, al emplear directamente 1 g de alimento diluido en 100 ml de caldo: leerá ufc/g, no las hasta ahora habituales ufc/0,1 g.

CONSERVACIÓN Y PRECAUCIONES DE USO

Almacenar a temperatura ambiente (ideal 15-25ºC) ¡no en nevera!, ya que en ésta la humedad es más fácil que prehidrate y estropee los medios. Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro, ya que la humedad y la luz dañan irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados. Si trabaja en zonas de alta humedad atmosférica, almacene las Quanti-P/A, bien cerradas en su bolsa, dentro de una caja hermética “tupper” con sacos antihumedad (ej: VRB747).

VER FOTOGRAFIAS EXPLICATIVAS EN FOLLETO ANEXO

Con este sistema, con la destreza que da la experiencia, un analista puede controlar (de la muestra a la estufa incubadora) hasta 50 muestras por hora. Tambien en este mismo método, el Quanti-P/A-Enterocult (QPA-ETC) para recuento de Enterococos fecales (colonias pardas-negras) en 100-250 ml de muestra de agua, conseguido mezclando nuestro clásico P/A Enterocult con Hidragar en este tipo de envase. Para cuantificar Coliformes-E.coli y Pseudomonas aeruginosa emplee nuestros caldos P/A (MCC Colicult y Pseudocult, respectivamente) en las cubetas NMP. Esto ahorrará los elevados porcentajes de falsos negativos que también implica el método de filtración de membrana en estos tres parámetros (21% en E.coli-Coliformes, 6% en Enterococos fecales y 33% en P.aeruginosa).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140. Exactitud del 87,5 % al 100 % de ufcs, en función de lo correctos que sean el amasado- planchado de la muestra al mezclarla con el medio. Precisión de duplicados a 35-45ºC, medida en CV: 24,2%. Exclusividad a 45ºC: 100%. Inclusividad en muestras no calentadas a 75ºC: 100% (no disponíamos de esporas para evaluar a 75ºC). Límite inferior de cuantificación: 1-3 ufc/100 ml en muestras tanto frías como calientes (75ºC).

Si desea más información sobre nuestro Quanti-P/A Clostricult rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/7-Clostridium-perfringens-y-Clostridios-sulfito-reductores-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

CAMPYLOBACTER BLOOD FREE MEDIUM AGAR

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CAMPYLOBACTER BLOOD FREE MEDIUM AGAR

(BASE) (mCCD Agar)

Aislamiento selectivo para Campylobacter s/ ISO 10272-1:2006

Campylobacter jejuni

COMPOSICIÓN

Extracto de carne 10,00 g
Peptona de carne 10,00 g
Triptona 3,00 g
Cloruro sódico 5,00 g
Carbón activo 4,00 g
Desoxicolato sódico 1,00 g
Sulfato ferroso 0,25 g
Piruvato sódico 0,25 g
Agar‑agar 13,00 g
Fórmula por litro) pH final: 7,4 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 46 g en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitar hasta la completa disolución. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 50 ºC y añadir asépticamente 1 vial de suplemento SKIRROW (SBH020) (mejor que 2 viales de suplemento PRESTON-BOLTON -SLM131-).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT184

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Negro PREPARADO: Estéril, Negro.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 (Aplicando el método ISO 10272, 18-72 h a 42 ºC en microaerofilia o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado):

Campylobacter jejuni MKTA 29428, con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y P.mirabilis MKTA 29906). Tras estriar e incubar, aparecen colonias típicas.
Campylobacter coli MKTA 43478, tras estriar e incubar, aparecen colonias típicas.
Escherichia coli MKTA 25922, inhibido: tras incubar, estriar e incubar, no aparecen casi colonias.
Staphylococcus aureus MKTN 6571, totalmente inhibido: tras incubar, estriar e incubar, no aparece ni una colonia.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO BASE + SUPLEMENTOS , TUBOS PREPARADOS INCLINADOS.

NOTA: Campylobacter jejuni puede contaminar aguas y alimentos, provocando infecciones a menudo mal clasificadas como salmonelosis muy frecuentes en bebés y por contaminaciones cruzadas en la nevera de alimentos crudos con otros ya cocinados. Para su búsqueda en alimentos y aguas, enriquecer 25 g de alimento o 500 ml de agua en Campy Broth (DMT024) + Suplemento PRESTON-BOLTON (SLM131), o bien añadir a 225 ml de Agua de Peptona Tamponada con 25 g de alimento, o a 500 ml del agua, el contenido de un tubo de CAMPY P/A concentrado (RPL332). Incubar 14-48 h a 43°C aproximadamente y sembrar en estría en la placa de Campy Agar.

SIEMBRA

Inocular las placas preparadas sembrando la muestra o el enriquecimiento en estría a fin de aislar colonias. Incubar a durante 24‑48 horas a 43 ºC aproximadamente, en una atmósfera enriquecida en CO₂ (5% de Oxígeno y 10% de Anhídrido Carbónico) mediante KKM101 (en jarras de anaerobiosis) o KKM037 (en bolsas), o con el método de la vela de microaerofilia. Normalmente, C. jejuni crece en 24 horas, pero es oportuno reincubar las placas negativas otras 24 horas. La flora acompañante no crece a 43 ºC.

Agotamiento del oxígeno y enriquecimiento en CO2 en jarrita de microaerofilia,, en sólo unos segundos, mediante el sistema de la vela.

INTERPRETACIÓN

Las colonias de C. jejuni no son hemolíticas y pueden presentarse como grises y planas, con el borde irregular, o bien elevadas y redondas con aspecto mucoso. Este aspecto depende del grado de humedad de la superficie del agar. Confirmar con M-IDENT CAMPYLOBACTER LÁTEX (KMB001).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro CAMPYLOBACTER BLOOD FREE MEDIUM AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

M-IDENT®- Burkholderia cepacia

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M-IDENT®– Burkholderia cepacia

Burkholderia cepacia: Kit de confirmación en aguas y cosméticos

La confirmación de colonias de Burkholderia cepacia se ha convertido en el gran hándicap de los laboratorios cosméticos y a menudo la única solución era enviar las colonias a Identificación molecular (MICROKIT SFI004). Aunque ésta siga siendo la mejor opción, el mercado pedía un kit con el que poder orientarse antes de decidir.

El Agar BCPT

se basa en la asimilación del piruvato como fuente de C y el rojo fenol como indicador de la acidificación, por crecimiento de B.cepacia con viraje del medio de naranja a fucsia alrededor de las colonias diana.

El Agar OFPBL es un O/F modificado con lactosa como fuente de C y azul de bromotimol como indicador de la acidificación por crecimiento de B.cepacia con viraje de azul a amarillo. Es menos selectivo que el Agar BCPT.

El BCPT Cromogénico de MICROKIT es un BCPT al que se ha añadido un cromógeno que permite un mayor contraste de las colonias, que crecen de color rojo intenso, con los mismos virajes del medio que el BCPT clásico.

El Agar BCSA es el recomendado por USP, pero en él las colonias crecen con menos potencia que en BCPT

PASO PREVIO

Antes de emplear el kit M-Ident-B.cepacia, cercíorese que las colonias son oxidasa positivas y no son fluorescentes bajo luz UV de 366 nm

Burkholderia cepacia es citocromo-oxidasa positiva (viraje a azul de las tiras estables MICROKIT KOT050)

Burkholderia cepacia no provoca fluorescencia (luz azul-verde-amarilla) en BCPT ni en OFPBL ni siquiera cuando se observa bajo luz UVA de 366 nm (linterna MICROKIT VMT050)

BASE DE DATOS BACDIVE

Según Bacdive, estas son las pruebas que distinguen las cepas que hemos detectado capaces de crecer en BCPT o que podrían ser confundidas con B.cepacia al ser también oxidasa positivas:

El kit M-IDENT B.cepacia

distingue no solo la B.cepacia, sino además todas las Burkholderias declaradas como patógenas, con las mismas características de B.cepacia: Ox+ ADH- MNE+ PAC+ (B.ambifaria, B.arboris, B.cenocepacia, B.contaminans, B.diffusa, B.dolosa, B.gladioli, B.latens, B.metallica, B.multivorans, B.pseudomultivorans, B.seminalis, B.stabilis) y también las patógenas que a diferencia de las demás, son ADH+ (B.oklahomensis, B.thailandensis y B.ubonensis).

En nuestros controles, la prueba que distingue claramente las especies de Burkholderia de las de Pseudomonas es el ADH: Pseudomonas deja el medio rojo mientras Burkholderia lo vira a naranja o amarillo, según la cepa (por ejemplo la B.cepacia DSMZ 50181 vira a amarillo, mientras la B.cepacia ATCC™ 25416 y la B.cepacia NCTC 10743 viran a naranja, en 24 horas de incubación.

PRESENTACION:

M-IDENT®-Burkholderia cepacia, kit 4 test para confirmar 5 colonias sospechosas de este patógeno y otras Burkholderias patógenas en agares BCPT/BCSA/OFPBL. Todas ellas coinciden en estas pruebas diferenciales: Oxidasa + (azul), ADH- (amarillo), MNE+ (amarillo), PAC+ (amarillo).

Kit 4 test suficiente para confirmar 5 colonias. Caducidad 1 año

– 5 tiras estables para el test de la Citocromo-oxidasa (KOT0505)

– 5 tubos líquidos de Caldo ADH (rojo).

– Y 5 tubos líquidos de Caldo MNE (verde).

– 5 tubos líquidos de Caldo PAC (verde).

CODIGO: KMT006

EL KIT NO INCLUYE:

Cepas cuantitativas MICROKIT para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
Participación en servicios intercomparativos como SEILAGUA® y SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios
Lámpara de luz ultravioleta de 366 nm (ver Linterna MICROKIT VMT050)

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA LA CAJA CERRADA, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

VENTAJA: Su extremadamente larga caducidad, de 1 año asegurado.

CONTROL DE CALIDAD DEL KIT

TIRAS Citocromo-oxidasa: NO estéril, color rosa pálido

TUBOS PREPARADOS de Caldo ADH: Estéril, líquido, rojo, transparente.

Y TUBOS PREPARADOS de Caldo MNE: Estéril, líquido, verde, transparente.

TUBOS PREPARADOS de Caldo PAC: Estéril, líquido, verde, transparente.

CONTROL DE CRECIMIENTO a 37°C durante 24 horas, en aerobiosis:

Tiras oxidasa: Burkholderia cepacia ATCC™ 25416 vira a azul oscuro de inmediato.
Caldo ADH: Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, crece con turbidez y permanece de color rojo. Burkholderia cepacia ATCC™ 25416, crece con turbidez y vira de rojo a naranja o amarillo.
Caldo MNE: Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, crece con turbidez y permanece de color verde. Burkholderia cepacia ATCC™ 25416, crece con turbidez y permanece de color verde, igual que Burkholderia cepacia NCTC 10743. Algunas otras cepas de Burkholderia cepacia (ej: ATCC™ 17759, DSMZ 50181) viran de verde a amarillo.
Caldo PAC: Pseudomonas aeruginosa, WDCM00114 crece con turbidez y permanece de color verde. Otras cepas de Pseudomonas aeruginosa (ej: WDCM00026) viran de verde a amarillo. Burkholderia cepacia ATCC™ 25416, crece con turbidez y vira de verde a verde-amarillento o amarillo, igual que Burkholderia cepacia NCTC 10743. Algunas otras cepas de Burkholderia cepacia (ej: DSMZ 50181) permanece verde.

IZQDA: P.aeruginosa WDCM00114
DCHA: B.cepacia ATCC™ 25416

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

-Inocular una porción de la colonia sospechosa, procedente de Agar BCPT o OFPBL, en la zona reactiva de la tira de oxidasa.

-Sembrar por dilución otra porción de colonia en un tubo de caldo ADH, otra en un tubo de caldo MNE y otra en un tubo de caldo PAC.

-Incubar a 36 ± 2º C durante 20 ± 4 horas, en aerobiosis.

-Burkholderia cepacia es toda colonia típica en BCPT o en OFPBL, no fluorescente, oxidasa positiva (viraje a azul oscuro), ADH positivo (vira de rojo a naranja o amarillo). Además, según sea la cepa, virará o no de verde a amarillo en MNE y en PAC.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro M-IDENT®- Burkholderia cepacia rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

BACILLUS COAGULANS (Thermoacidurans) AGAR

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BACILLUS COAGULANS thermoacidurans agar PERMITE LA DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESTE EXCELENTE PROBIÓTICO ESPORULADO

Medio sólido diseñado para aislar y enumerar Bacillus coagulans (ahora llamado Bacillus thermoacidurans).

COMPOSICIÓN

Glucosa 5 g/L
Peptona proteosa de carne 5 g/L
Extracto de Levadura 5 g/L
K2HPO4 4 g/L
Agar-agar 20 g/L

pH final: 5 ± 0,2

Suplementos termolábiles:

MnSO4.4H2O 0,05 mg en 10 mL de agua, esterilizar por MF y añadir al medio tras autoclavarlo
CaCl2 0,045 mg en 10 mL de agua, esterilizar por MF y añadir al medio tras autoclavarlo

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

PREPARACIÓN

Disolver 39 g de medio en 990 ml de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando, para su total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 48 ºC y añadir asépticamente 10 ml del suplemento SMT041. Mezclar y repartir en placas, sin recalentar.

PRESENTACIÓN

Medio deshidratado (100 g, 500 g, 5 Kg): DMT241

Suplemento en frasco pinchable 100 mL, esterilizado por filtración, para 10 L de medio, contiene 0,05 mg MnSO4.4H2O y 0,045 mg CaCl2 cada 10 mL de agua: SMT041

NOTA
Este microorganismo es uno de los mejores probióticos que existen, porque produce ácido láctico pero, a diferencia de los lactobacilos, forma esporas resistentes. Se toma contra los trastornos intestinales (diarreas, incluyendo las diarreas de tipo infeccioso como son la diarrea por rotavirus en los niños y la diarrea del viajero; también se usa para la diarrea producida por el uso de antibióticos. El Bacillus coagulans se utiliza también para problemas digestivos en general, para el síndrome del intestino irritable (SII), para las enfermedades inflamatorias intestinales (EII, la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa), para la colitis por Clostridium difficile, contra el crecimiento excesivo de bacterias «malas» en el síndrome de intestino corto y para una infección debida al Helicobacter pylori que es el que produce úlceras. Algunas personas utilizan el Bacillus coagulans para prevenir las infecciones respiratorias y para reforzar el sistema inmunológico.

Sin embargo, puede contaminar conservas alimenticias y darles un gusto ácido. Esto incluye la comida que es normalmente demasiado ácida para la mayor parte de bacterias; el B. coagulans (thermoacidurans) puede crecer en un pH tan bajo como 4,2. Este medio también sirve para detectar Clostridios acidófilos que estropean ciertos alimentos envasados.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Color crema. PREPARADO: Estéril, Color paja.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2: 24-48 h a 30-37 ºC,

aplicando el método ISO 7932, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

Bacillus coagulans (thermoacidurans) WDCM 00002, Excelente, PR > 90% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.

Bacillus subtillis MKTA 6633, crecimiento excelente.

SIEMBRA

Sembrar 0,1 ml de la muestra y su serie de diluciones decimales, en superficie, repartiendo con el asa de Digralsky (VRR154, desechables VCL155). Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 24-72 horas. Al no ser un medio selectivo, deben identificarse las colonias que, si proceden de conservas ácidas, es muy probable que se trate de esta especie y si proceden de inóculos puros, el medio sirve para enumerar y conocer la concentración del preparado probiótico.

BACILLUS COAGULANS thermoacidurans agar PERMITE LA DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESTE EXCELENTE PROBIÓTICO ESPORULADO

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro BACILLUS COAGULANS (Thermoacidurans) AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/fichas/BACILLUS-COAGULANS-THERMOACIDURANS-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/10-Bacillus-monograf–a.pdf

TODD HEWITT BROTH

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TODD HEWITT BROTH, medio de cultivo en caldo para la detección y enriquecimiento de estreptococos hemolíticos

Detección de estreptococos hemolíticos (APHA)

COMPOSICIÓN

Infusión de corazón 10,0 g
Triptona 20,0 g
Glucosa 2,0 g
Cloruro sódico 2,0 g
Bicarbonato sódico 2,0 g
Fosfato disódico 0,4 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,8 ± 0,2

PREPARACIÓN TODD HEWITT BROTH

Disolver 36,4 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Autoclavar a 115 ºC durante 20 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT123

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

Streptococcus agalactiae (grupo B) MKTA 13813, Correcto.
Streptococcus pyogenes (grupo A) MKTA 19615, Correcto.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Ver tubos con Gentamicina y Ac.Nalidíxico, selectivos para gr.B, en el medio Todd Hewitt Selective Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1 ml de muestra en un tubo con 9 ml de medio. Incubar a 35 ºC aproximadamente, durante 18-24 horas y dar como positivos los tubos turbios.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/TODD-HEWITT-STREPTOCOCCUS-BROTH.pdf

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SULFATE API AGAR (MODIFICADO para acelerar el crecimiento)

5 respuestas

detección reductoras sulfato petroleras: Kit según API (American Petroleum Institute) para detectar biocorrosión en cañerías

Detección de bacterias anaerobias reductoras del sulfato (Desulfovibrio…) y flora asociada.

COMPOSICIÓN

Lactato sódico 4,000 g
Extracto de levadura 1,000 g
Acido ascórbico 0,100 g
Sulfato magnésico 0,200 g
Di‑Potasio hidrogenofosfato 0,010 g
Sulfato amonio‑hierro (II) 0,200 g
Cloruro sódico 10,000 g
Resazurina sódica 0,001 g
Agar‑agar 12,000 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,3 ± 0,1

De izquierda a derecha: Sulfate API sin inocular,
Cl. perfringens y Desulfovibrio desulfuricans.

PREPARACIÓN

Disolver 27,5 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar, agitando hasta hervir para su disolución. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar en agitación para minimizar el precipitado que sin remedio se formará.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT118

TUBOS PREPARADOS CÓDIGO: TPL048

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Rosado nebuloso

CONTROL DE CRECIMIENTO 2-7 días a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente) en anaerobiosis:

Desulfovibrio desulfuricans MKTN 8301, Excelente, colonias o nubes negras.
Clostridium perfringens MKTA 13124, Correcto, colonias negras.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS 15 ml (VER SULFATOKIT API EN KITS)

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 2 ml de muestra en el fondo de un tubo con 15 ml de medio fundido y enfriado a unos 50 ºC. O bien clavar un capilar o un escobillón con el que se haya rascado el recipiente de la muestra, hasta el fondo de un tubo. Extraer y cerrar. En estas condiciones no es necesario incubar en anaerobiosis, pero debe cerrarse el tapón a fondo. Incubar a 21-35 ºC aproximadamente, durante 2-21 días. Se consideran positivos los tubos con puntos o nubes negras, demostrando mayor contaminación cuanto menos tiempo tarden en virar a negro.

Esquema elaborado en 1989.

Ver también FERROKIT para detección de las bacterias del hierro.

detección reductoras sulfato petroleras

https://www.microkit.es/fichas/SULFATE-API-AGAR.pdf

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

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SIMMON’S CITRATE AGAR

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CITRATO SIMMON’S CITRATE AGAR es un medio de cultivo para diferenciar Enterobacterias en base al uso del Citrato

Diferenciación Enterobacterias en base al uso del citrato UNE-EN ISO 6579:2003, ISO 10273

COMPOSICIÓN

Fosfato monoamónico 0,20 g
Cloruro sódico 5,00 g
Citrato de sodio tribás. 2,00 g
Sulfato magnésico 0,20 g
Azul bromotimol 0,08 g
Fosfato sodio‑amónico 0,80 g
Agar‑agar 15,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 6,6 ± 0,2

Izquierda: E.coli (verde), Derecha: Salmonella (azul)

PREPARACIÓN

Disolver 23 g en 1 litro de agua destilada.

Calentar agitando hasta ebullición

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

NOTA: El material de vidrio a utilizar, no debe tener restos básicos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT113

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Amarillo

PREPARADO: Estéril, Verde precipitado

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

Enterobacter aerogenes MKTA 9489, Positivo, Medio azul.
Escherichia coli MKTA 25922, Sin viraje.
Salmonella abony MKTN 6017, Positivo, Medio azul.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS

NOTA: Representa la versión sólida del Koser’s Citrate Broth, con la ventaja de que la lectura del IMViC se hace por viraje del indicador en vez de por turbidez. Se basa en la capacidad de usar el Citrato como única fuente de Carbono, y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno.

SIEMBRA

Sembrar en estría en el tubo de agar inclinado a partir de una colonia, con cuidado de no inocular trazas del medio de aislamiento. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 18 horas.

INTERPRETACIÓN

Las bacterias citrato‑positivas crecen y hacen virar el indicador a azul intenso. Son citrato positivo Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Edwarsiella, Pseudomonas, Citrobacter, Aeromonas hydrophila, Proteus rettgeri, S. arizonae, S. typhimurium… Son Citrato negativo Moraxella, Shigella, E. coli, Yersinia enterocolitica, Aeromonas salmonicida, Proteus morganii, Pseudomonas maltophilia.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros SIMMON’S CITRATE AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SCHAEDLER AGAR

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SCHAEDLER AGAR es un medio de cultivo sólido para la detección y recuento de anaerobios en alimentos y otros productos

Detección y recuento de anaerobios

COMPOSICIÓN

Peptona de caseína-soja 8,2 g
Polipeptona bacteriológica 3,5 g
Extracto de levadura 5,0 g
Glucosa 5,8 g
Tris (hidroximetil)
amino-metano tampón 3,0 g
Cloruro Sódico 1,7 g
Hemina 10 mg
L-cisteina 0,4 g
Agar-agar 13,5 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7,6 ± 0,2

Recuento de Anaerobios en tuboen Schaedler agar. Obsévese el gas generado que se detecta en el tubo.

PREPARACIÓN

Disolver 41 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición, agitando para su disolución. Repartir en tubos o en frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. NO sobrecalentar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO,FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT108

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

DESHIDRATADO: Polvo fino, Tostado

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 37°C aproximadamente, en anaerobiosis:

Clostridium sporogenes MKTA 11437, Correcto. Con respecto a PCA standarizado*, recuento 280 %, pero de forma selectiva.
Clostridium perfringens MKTA 13124, Correcto. Con respecto a PCA standarizado*, recuento 90 %, pero de forma selectiva.
E.coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

PRESENTACIÓN: TUBOS 9 ml PARAFINADOS, TUBOS 15 ml sin parafina, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: Medio no selectivo utilizado para el recuento de bacterias anaerobias en alimentos, productos farmacéuticos y cosméticos y en muestras patológicas. A menudo el agar se cuartea por la presencia de anaerobios gasógenos.

SIEMBRA

Sembrar en la superficie de la placa, o mejor en masa con doble capa (15 ml con la muestra y, una vez solidificada la placa, otros 10 ml encima), e incubar en condiciones anaerobias a 35‑37 ºC aproximadamente, durante 48 horas. Los tubos (parafinados o no) se funden en agua hirviendo, se dejan enfriar a unos 75 ºC y se inoculan en profundidad con 1 ml de muestra, de modo que sólo resistirán las esporas de anaerobios. Para las formas vegetativas, enfriar a 45°C en vez de a 75°C antes de inocular. Voltear sin agitar para mezclar sin oxigenar, y enfriar en posición vertical. Incubar estos tubos MICROKIT sin necesidad de atmósfera anaerobia (al ser herméticos), a 35‑37 ºC aproximadamente, durante 48 horas. Si parte de medio deshidratado y sus tubos son tan herméticos como los de MICROKIT, llenarlos bastante de medio, dejando una cámara de aire de 1 cm de espesor para permitir la formación de gas.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestros SCHAEDLER AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

SALMONELLA-SHIGELLA BROTH (SS BROTH)

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SS Broth (Salmonella-Shigella Broth): enriquecimiento eficiente para la detección de Salmonella y Shigella

El SS Broth (Salmonella-Shigella Broth) es la versión líquida del clásico SS Agar recogido en la norma UNE-EN ISO 6579:2003, utilizada para la detección de Salmonella y Shigella en alimentos, aguas y otras matrices biológicas.

Este medio de enriquecimiento selectivo permite recuperar de forma óptima ambas bacterias, incluso cuando se encuentran en bajo número o compiten con flora acompañante abundante.

Ficha técnica oficial del SS Broth (MICROKIT)

De izquierda a derecha: SS Broth sin inocular, E. coli, Shigella (turbio), y Salmonella (negro).

Ventajas principales del SS Broth MICROKIT

Enriquece eficazmente tanto Salmonella como Shigella.
Compatible con todo tipo de muestras: lácteos, carnes, pescados, vegetales, aguas, etc.
No tóxico, a diferencia del Caldo Selenito-Cistina.
Permite crecimiento de Shigella, a diferencia del Caldo Rappaport-Vassiliadis.
Inhibe la mayoría de bacterias Gram positivas y Gram negativas competidoras, mejorando la selectividad.
Medio confiable, reproducible y rápido, validado en los servicios intercomparativos SEILALIMENTOS de los últimos 7 años.

En dichas evaluaciones, el SS Broth MICROKIT se ha mostrado como el medio más eficaz para la recuperación de cepas de Salmonella y Shigella en todo tipo de matrices alimentarias.

Composición y características

Polvo deshidratado de color rosado
pH final: equilibrado para máxima selectividad
Contiene sales biliares (manejar con precaución)

El medio preparado presenta un color rojo intenso, con posible precipitado filamentoso o grumoso, que no indica contaminación: es una característica normal del producto.

Preparación del medio

Disolver 48 g de SS Broth en 1 litro de agua bidestilada.
Calentar hasta ebullición (1 minuto a 100 °C).
No autoclavar. Se recomienda esterilizar por filtración para preservar la selectividad.
El aspecto filamentoso o grumoso del medio preparado es normal.

⚠️ Uso exclusivo en laboratorio.
Mantener el bote bien cerrado, en lugar seco, fresco y oscuro.
Agitar antes de usar para homogeneizar los componentes.
Precaución: contiene sales biliares.

Control de calidad

El control se realiza en los laboratorios de MICROKIT.
Se recomienda repetirlo en su propio laboratorio cuando:

Haya pasado más de 3 meses sin usar el medio.
Se haya desinfectado o reacondicionado el laboratorio.
El producto se haya almacenado a altas temperaturas.
Se observen cambios de aspecto, incluso antes de la fecha de caducidad.

Código del producto: DMT067
Presentaciones: medio deshidratado, tubos preparados, frascos preparados y kits P/A.

Ensayo de crecimiento (24–48 h a 42 °C aprox.)

Microorganismo	Resultado	Observación
Salmonella abony MKTN 6017	Correcto	Amarillento, ennegrece el medio
Escherichia coli MKTA 25922	Inhibido	Puede crecer débilmente en 48 h
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027	Inhibido	—
Proteus mirabilis MKTA 14153	Bueno	—
Shigella flexneri MKTA 12022	Bueno	—
Enterococcus faecalis MKTA 29212	Escaso	—

Procedimiento de siembra

Agitar el tubo o frasco para resuspender los precipitados y flóculos.
Inocular:
- 0,1 ml de caldo de preenriquecimiento (Buffered Peptone Water) en 9 ml de SS Broth, o
- 1 ml en un frasco de 100 ml.
Incubar 48 horas a 42 °C aproximadamente.

Los medios con flóculos o precipitado cristalino son normales y no indican crecimiento bacteriano.

Interpretación y pasos siguientes

Tras la incubación, transferir una porción de los caldos turbios o con viraje de color a medios sólidos selectivos como:

XLD Agar
SS Agar (o Chromosalm, si solo se busca Salmonella)

Sembrar en superficie por agotamiento y continuar con las pruebas inmunológicas y bioquímicas correspondientes:
Detección inmunológica de Salmonella (MICROKIT)

**Método rápido SALMOQUICK: detección de Salmonella en 36 horas**

El SS Broth forma parte del innovador método SALMOQUICK, desarrollado por MICROKIT para acelerar la detección de Salmonella en productos alimentarios.

Cómo funciona:

Combina el preenriquecimiento revitalizador y neutralizante (Buffered Peptone Neutralizing Water, ref. DMT011)
con el enriquecimiento selectivo concentrado SS Broth [x5] (ref. DMT067).
Incubando ambos medios de forma conjunta durante 18 horas, se logra una detección fiable de Salmonella en tan solo 36 horas desde la muestra inicial.

Este método acortado es ideal para industrias alimentarias que necesitan liberar lotes rápidamente, reduciendo los tiempos analíticos habituales de 3 a 5 días.

Referencia:
Sanchís, J. (2014). XIX Congreso Nacional de Microbiología de los Alimentos.
“Doble enriquecimiento simultáneo para detección de Salmonella”. MICROKIT.

Responsabilidad y gestión de residuos

El usuario final es responsable de la eliminación segura de los microorganismos cultivados, conforme a la legislación medioambiental vigente.
Se recomienda autoclavar los materiales contaminados antes de su eliminación.

Información y contacto

¿Desea más información y precios actualizados sobre el SS Broth (Salmonella-Shigella Broth) o sobre el método SALMOQUICK?

microkit@microkit.es
91 897 46 16