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informacion, novedades, nuevos métodos relacionados con los medios de cultivo, Microbiología de alimentos, aguas, medicamentos, cosméticos y ambiente:

USO DEL SALMOQUICK Y EL LISTERIQUICK EN OTRAS MATRICES

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¿PUEDO USAR  SALMOQUICK Y /O LISTERIQUICK EN OTRAS MATRICES?

LISTERIA: LISTERIQUICK, uso en otras matrices que no son alimentos; SALMONELLA: SALMOQUICK, uso en otras matrices que no son alimentos

https://www.microkit.es/pdf/LISTERIQUICK.pdf

https://www.microkit.es/pdf/Salmoquick-2016.pdf

Aunque SALMOQUICK y LISTERIQUICK han sido diseñados para alimentos (25 g de muestra), se puede extender su uso a otras matrices:

  • AGUAS

Dado que en aguas puede requerirse, para la búsqueda de Salmonella o Listeria, una muestra mínima muy superior a 25 mL (normalmente de 100 mL, 250 mL e incluso de 1 L) se debe filtrar por membrana de 0,45 µm la cantidad de muestra de agua necesaria, extremando la precaución de no dejar la membrana con la bomba encendida una vez se ha filtrado toda la muestra de agua, para evitar estresar las posibles Salmonella o Listeria presentes. Se añade la membrana filtrada a 25 ml de agua y con esta muestra concentrada (membrana en agua) se procede como explica el folleto SALMOQUICK ó LISTERIQUICK en alimentos, como si de una muestra de 25 g de alimento se tratase.

  • COSMÉTICOS

Se debe sustituir el Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante (PBNW) por el caldo LPT Neutralizing Broth de MICROKIT. Por lo demás, el protocolo es idéntico al de alimentos explicado en los folletos SALMOQUICK y LISTERIQUICK.

  • ALIMENTOS INFANTILES

Dado que las legislaciones de numerosos países exigen la ausencia de Salmonella y/o de Listeria en alimentación infantil, no en 25 g sino en cantidades mucho mayores (hasta 5 Kg en algunos casos), deberemos emplear la cantidad de Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante que sea necesaria para crear la dilución 1:10 con la cantidad de muestra requerida. Y el caldo SS o LEB también a la concentración necesaria para mantener el mismo ratio Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante/ SS Broth o LEB que indican los folletos SALMOQUICK y LISTERIQUICK.

  • SUPERFICIES

Tanto Salmonella como Listeria se multiplican en las superficies de ciertos puntos críticos, formando biofilms, los cuales además incrementan su patogenicidad. Estos biofilms las encapsulan en grandes poblaciones (monoespecíficas o no) que suelen pasar desapercibidas al método de contacto (Rodac, laminocultivos) e incluso al rascado del método de barrido con escobillón o balleta. Se necesitan esponjas realmente abrasivas (MICROKIT VMT037) para arrancar las células y poder así detectarlas. Pulverice la superficie a analizar con agua estéril, espere 60 segundos, rasque con fuerza con una esponja abrasiva estéril MICROKIT, devuélvala a su bolsa original, llévela al laboratorio y trate dicha esponja como si de los 25 g de alimento se tratase, pasándola completa a los 225 ml de BPNW y siguiendo las instrucciones de los folletos SALMOQUICK y LISTERIQUICK.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A PSEUDOCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LISTA DE MEDIOS ESPECIALES MICROKIT – ALIMENTOS

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ALIMENTOS: MEDIOS DE CULTIVO ESPECIALES DE LAS NORMAS ISO 

medios ISO alimentos

MEDIOS DE CULTIVO ISO ESPECIALES, PARA ALIMENTOS

Muchos de los medios (sobre todo de confirmación) que aparecen en Normas ISO son difíciles de encontrar y los laboratorios que desconocen esta particularidad de MICROKIT, se los han de formular a partir de sus componentes o emplear suplementos de difícil esterilización. Es el caso de: Listeria X/R Broth, Shigella Broth, Buffeerd Nitrate-Movility Medium, Lactose-Gelatin Medium, Vibrio TSAT Agar, O/F Glucose Medium, Listeria TSB-YE Agar y Broth, Caldo Acetamida, las diferentes fórmulas de Nutrient Agar según sean para Enterobacterias, Vibrio, Pseudomonas…

MEDIOS DE CULTIVO ALTERNATIVOS MEJORADOS POR MICROKIT

Otros de los medios de la lista son raros por haber sido creados por nuestro departamento de I+D ante las necesidades de algunos de nuestros clientes. Es el caso del Buffered Peptone Neutralizing Water para neutralizar el efecto matriz de la mayoría de muestras alimentarias, del Salmonella-Shigella Broth para sustituir al Rappaport (que provoca falsos negativos) y al Selenito (que es muy tóxico) en la búsqueda de Salmonella spp., del Brochothrix STAA Agar para detectar este alterativo de productos cárnicos antes de que sea demasiado tarde, del Clostridium botulinum agar para ahorrarse estabularios y la muerte de ratones, del Agar Tributirina para mantequilla, del Vibrio cholerae MPT Broth que provoca el milagro de la revitalización en este microorganismo tan delicado, del PCA cromogénico que mima la vista del analista y además ofrece resultados un día antes que el PCA clásico, de decenas de medios cromogénicos…

medios ISO especiales alimentos

https://www.microkit.es/monograficos/22-Monograf–a-Neutralizaci–n-de-conservantes-y-aditivos-en-producto-final–para-minimizar-falsos-negativos-en-alimentos.-Otras-soluciones.pdf 

LISTAS MEDIOS ESPECIALES MICROKIT AGUAS

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AGUAS: MEDIOS DE CULTIVO ESPECIALES PARA SEGUIR NORMAS ISO 

medios ISO especiales aguas

https://www.microkit.es/pdf/medios-cultivo-microkit-a-la-carta-2013.pdf

MEDIOS DE CULTIVO ESPECIALES ISO PARA AGUAS

Muchos de los medios (sobre todo de confirmación) que aparecen en Normas ISO y otras normativas son difíciles de encontrar y los laboratorios que desconocen esta particularidad de MICROKIT, se los han de formular a partir de sus componentes o emplear suplementos de difícil esterilización. Es el caso de: Bacteriófagos (colífagos) Scholten media, Acetamida Broth, Buffered Nitrate Motility Medium, Lactose-Gelatin Medium, Heterotrophic HPC Agar, Alkaline y Alkaline-Saline Broth, Endo Agar y Broth, Enterococcus EPA Agar, Vibrio TSAT Agar, Sulfate API Agar …

MEDIOS DE CULTIVO HABITUALES ISO PARA AGUAS

Por supuesto contamos con los medios ISO más Normales: PCA-YEA (= Nutrient Agar ISO 6222, = PCA-water), CCA (nuestro MugPlus Agar de toda la vida), Slanetz-Bartley Agar, Bilis Esculina Azida Agar, TSC Agar, TSC MUP Agar, Bacteriófagos (colífagos) Scholten Agar, Broth y semisolid Medium, Coliform sustrato definido NMP Broth…

MEDIOS DE CULTIVO MEJORADOS POR MICROKIT PARA AGUAS

Otros de los medios de la lista son raros por haber sido creados por nuestro departamento de I+D ante las necesidades de algunos de nuestros clientes. Es el caso del CCA (que ya es el medio oficial de E.coli y demás Coliformes en aguas), del Vibrio cholerae MPT Broth que provoca el milagro de la revitalización en este microorganismo tan delicado, del PCA-YEA cromogénico que mima la vista del analista y además ofrece resultados un día antes que el PCA-YEA clásico, de decenas de medios cromogénicos…

medios ISO especiales aguas

CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR

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BURKHOLDERIA AGAR CROMOGÉNICO

Burkholderia Agar Cromogénico, medio CROMOKIT para la detección de Burkholderia cepacia complex, más eficiente que el BCSA, BCPT y CBCSA

Agar cromogénico para aislamiento selectivo y diferencial de Burkholderia cepacia en aguas, cosméticos y otras muestras, con base BCPT Agar.

COMPOSICIÓN

  • Polipeptona bacteriológica      6.00 g
  • Piruvato sódico                          6.00 g
  • Dihidrógeno fosfato potasio    4.35 g
  • Hidrógeno fosfato sodio          1.42 g
  • Sales biliares                               1.50 g
  • Amonio sulfato                          1.00 g
  • Magnesio sulfato                      0.20 g
  • Sulfato férrico amónico          0.01 g
  • Rojo fenol                                  0.02 g
  • Cristal violeta                            0,01 g
  • Agar-agar                                   12.0 g
  • Mezcla cromogénica               c.s
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: ajustar a  6.2 ± 0.2

Detección en las primeras 24 horas. Izda: Pseudomonas aeruginosa, colonias rojas grandes. Dcha: Burkholderia cepacia, colonias rojas pequeñas. Medio salmón-crema.

Crecimiento a las 48 h: medio fucsia. Izda: Pseudomonas aeruginosa, colonias rojas grandes y con márgenes lobulados. Dcha: Burkholderia cepacia, colonias rojas menores y con márgenes redondos

PREPARACIÓN

Disolver 32,5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando hasta la total homogeneización. No sobrecalentar. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Si se desea hacer el medio más selectivo para análisis en aguas, enfriar a 45-50 °C y añadir 14 ml de solución BCPT Suplemento estéril selectivo (SMT301, que contiene Polimixina B (150.000 UI/L) y Ticarcilina (500,0 mg/L). Para máxima selectividad y evitar falsos positivos de Sphingomonas spp. y Moraxella spp., se puede añadir Gentamicina, aunque forman colonias diminutas y diferentes a las típicas de Burkholderia cepacia. En cambio Ochrobactrum anthropi y Delftia acidovorans sólo resultan distinguibles mediante identificación molecular, ya que las galerías comerciales dan, igual que este medio, falso positivo de B.cepacia.

Los antibióticos polimixina y ticarcilina del suplemento SMT301 restringen la productividad de algunas cepas de B.cepacia, por lo que no conviene usarlos para recuentos. Además todas las colonias crecidas en estos medios (base BCPT) sin suplemento, que han sido enviadas a nuestro servicio de identificación molecular, han sido siempre de patógenos emergentes como lo es Burkholderia. Para detección por estría tras enriquecimiento (para analizar muestras cosméticas de escasa carga microbiana), si se deben usar con los antibióticos, porque no hay que contar colonias y así se evitan muchos falsos positivos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CÓDIGO: DMT555

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

NOTA: 

Antes Pseudomonas cepacia, Burkholderia cepacia es una especie muy resistente que agrupa numerosas cepas de bacilos Gram negativos, Oxidasa positivos (a menudo oxidasa-lentos), No Fermentadores de Glucosa, Móviles. Algunas cepas pueden crecer en Agar Cetrimida sin fluorescencia y en Agar CN. Muchas cepas no crecen a más de 35°C. En TSA algunas cepas crecen con colonias regulares, redondeadas, blanquecinas, crema o amarillas. Deben identificarse molecularmente (MICROKIT SFI004), ya que las galerías bioquímicas no son nada fiables en este tándem de cepas denominado B.cepacia. Debe el nombre genérico a su descubridor y el específico, a haber sido descubierta infectando cebollas (Allium cepa), aunque se encuentra también en aguas y biofilms. Es una de las bacterias más versátiles que se conocen, capaz de usar más de 200 compuestos como nutrientes, entre los cuales se encuentran antibióticos, desinfectantes, pesticidas, hidrocarburos aromáticos policíclicos (HPA), tricloroetileno, policlorobifenilos, ftalatos… además de producir sus propios antibióticos para suprimir el crecimiento de otros competidores, así como matrices especiales para generar biofilms, lo que la hace extremadamente difícil de erradicar. Es frecuente como saprófito en aguas, ambientes húmedos y suelos. Se emplea en biorremediación de contaminaciones y en control de plagas fúngicas agrícolas,  pero tambien algunas cepas son serios patógenos oportunistas en infecciones nosocomiales. Parece que junto a otros Pseudomonadinos esta bacteria fué, desde el Arcaico, corresponsable del paso de la vida a Tierra, al sintetizar ciertas macromoléculas que actúan como inductores de la lluvia.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).                    DESHIDRATADO:Polvo, rosado

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros del hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 35°C aproximadamente:

  • Burkholderia cepacia MKTA 25416, Crece con colonias rojas, pequeñas (<2 mm en 24 h), algunas cepas viran el medio bajo las colonias a rosa-fucsia, sobre todo a las 48h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 75-294 %.
  • Burkholderia cepacia MKTN 10743, Crece con colonias rojas, vira el medio de debajo de las colonias a rosa-fucsia, desde las primeras 24h. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 75-294 %.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Crece con colonias rojas, pero son muy grandes (>5 mm a no ser que haya tantas que compitan por el sustrato) e irregulares, además son fluorescentes bajo luz UVA de 366 nm.
  • Pseudomonas fluorescens MKTA 13525, Inhibido o lento y sin viraje, fluorescentes bajo 366 nm.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a cepa tipo.

Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 24 h una de ellas es más salmón que roja.

 

 

 

 

 

 

Polimorfismo de 3 cepas TIPO de Burkholderia cepacia en BCPT cromogénico: en 48 h todas son fucsia-rojas, pero de diferentes tonalidades. Y el viraje del medio salmón a fucsia es muy diferente de unas a otras cepas tipo.

MODO DE EMPLEO Y LECTURA DE RESULTADOS

Sembrar en estría sobre la placa preparada una alícuota del cosmético (previamente diluido y enriquecido en LPT Neutralizing Broth u otro caldo similar que sea neutralizante de todos los conservantes empleados actualmente y a la vez enriquecedor). En agua, sembrar una membrana por la que se hayan filtrado 100 ml). Incubar a 30-35°C durante 24-72 horas, ideal 48 h. Verificar el crecimiento de una estría roja intensa o de colonias rojas de 1,5-2 mm de diámetro, con o sin halo fucsia en el medio. Identificar por ID molecular (MICROKIT SFI004). El recuento/ml será la suma de los recuentos de las tres placas (por filtración, el recuento será el número de colonias/los 100 ml filtrados). De todas formas, no debe aparecer ni una sola colonia confirmativa en 1 g de cosmético enriquecido ni en 100 ml de agua farmacéutica o cosmética.

El recuento a 24h y a 48 h es similar, solo unas pocas colonias más a las 48h (11% en la cepa de NCTC, 7% en la cepa de DSMZ) y significativo: 70% en la cepa de ATCC.

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO 500g (DMT555) y suplemento opcional en frasco pinchable estéril 100 ml (SMT301) c.s.p.7 litros de medio final. DryPlates-BCPT (DPP015), que en realidad son el origen de este medio cromogénico que ahora también ofrecemos deshidratado. Placas preparadas 90 mm con (PPLM56, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPLM56NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de antibióticos. Plaquis herméticas 55 mm con (PPL942, mejor para detección por estría tras enriquecimiento) o sin (PPL942NS, mejor para recuentos en aguas) suplemento de Abb.

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los organismos que se hayan desarrollado, según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar en la basura.     

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT BURKHOLDERIA AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

Prepárese para más de una sorpresa informativa cuando vea nuestro video sobre los medios Cromogénicos: https://www.youtube.com/watch?v=-JVPVWxY8ZE&t=271s

MICROKIT® P/A PSEUDOCULT

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Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Pseudomonas aeruginosa en 100 (250) ml de agua

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/fichas/P-A-PSEUDOCULT-UE2-2019.pdf

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril PSEUDOCULT Cromofluorogénico diseñado por MICROKIT muchos años antes que otros (sólo fluorogénicos) más conocidos,  para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP-Racks Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Pseudomonas aeruginosa (viraje del agua a rosa-rojo y además fluorescente azul bajo luz de 366 nm VMT050 e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL302 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA908 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u. Para 250 mL d agua, ref: FPA903

DMTI908- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test

SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir dos cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. Incubar 24-72 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 1 vial FPA903 ó 4 cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL302 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar a 5 cucharaditas

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color rosa-rojo demuestra la Presencia de P.aeruginosa en la muestra de agua. La Fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que se trata de P.aeruginosa (además con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, NO hay anillo rojo de Indol en superficie). Ya que hay otros microorganismos  capaces de virar a rosa, pero no son fluorescentes ni indol -.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 250 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable.

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de esta fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-72 h a 37°C aproximadamente:

  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026, vira a rosa, da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y no genera anillo rosa de indol, en las primeras 24h si el inóculo es alto y no procede de muestras estresadas, en 48-72h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013, vira a rojo, no da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y genera anillo rosa de indol.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A PSEUDOCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

TOTAL OCEANOGRAPHIC MICROKIT®AGAR (MARINE AGAR)

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TOTAL OCEANOGRAPHIC MICROKIT®AGAR (MARINE AGAR ZOBELL)

AGAR MARINO ZOBELL (TOTAL OCEANOGRAPHIC MICROKIT® AGAR) fué diseñado para recuento total de microorganismos en productos del mar y aguas marinas.

Por ello, en su composición se emula el contenido en sales del agua de mar, al que se añaden peptonas, factores dopping de oligoelementos y agar-agar

En la imagen: Photobacterium phosphoreum, bioluminiscente, en Marine Agar. Foto en oscuridad con 1 minuto de exposición

 

COMPOSICIÓN

Mezcla de peptonas     6,000 g

Citrato Fe                     0,100 g

Cloruro Sódico            19,450 g

Cloruro de Magnesio   8,800 g

Sulfato Sódico             3,200 g

Fosfato Disódico         0,008 g

Glucosa                       2,000 g

Cloruro de Calcio        1,800 g

Cloruro de Potasio       0,550 g

Bicarbonato Sódico     0,160 g

Bromuro potásico    0,080 g

Cloruro de Estroncio   0,034 g

Silicato de Sodio         0,004 g

Fluoruro de Sodio        0,002 g

Acido Bórico               0,022 g

Nitrato amónico           0,020 g

Factores dopping          c.s.

Agar-Agar                   15,000 g

 

(Fórmula por litro)

pH: 7,6 ± 0,2

 

PREPARACIÓN

Disolver 56 gramos en 1 litro de agua bidestilada, calentando hasta ebullición y agitando hasta la completa homogeneización.

Es preferible añadir 5 g/L de glicerol (SDA073) para retrasar la precipitación de las sales.

Autoclavar a 121 ºC, durante 15 minutos. No sobrecalentar.

Para que el medio sea selectivo para bacterias y no crezcan hongos, añadir 0,2 g/L de Cicloheximida (SKM200 no estéril, o mejor SKM255 estéril).

PARA USO EXCLUSIVO  EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT334

 

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Tostado

PREPARADO: Estéril, Ambar, Precipitado

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente), ya que los microorganismos marinos son termolábiles:

Staphylococcus aureus WDCM00033, Correcto.

Listeria monocytogenes WDCM 00021, Correcto.

Aeromonas hydrophila MKTA49141**, Excelente.

Pseudomonas aeruginosa WDCM00026, Correcto, Colonias verde-amarillentas.

Escherichia coli WDCM00013, Correcto.

**Las colecciones TIPO prohíben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

 

PRESENTACIÓN:

MEDIO DESHIDRATADO, MEDIOS PREPARADOS A CONVENIENCIA DEL USUARIO

 

NOTA:

Medio optimizado para recuento total de bacterias, (y levaduras y mohos si no se añade cicloheximida) procedentes de ambiente marino. Es por ello, ideal como sustituto del PCA en agua de mar y productos de la pesca. Para anaerobios y microbiota marina especial, solicite nuevos diseños a MICROKIT.

La placa preparada de este medio debe consumirse cuanto antes, para evitar la precipitación de su alto contenido en sal marina.

 

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

Sembrar la membrana de filtración en la superficie de una placa preparada, o bien 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en placas en masa, o bien en estría en superficie. Incubar en condiciones adecuadas para saprófitos (72 h a 25°C aproximadamente) o para psicotrofos (10 días a 6°C aproximadamente). Contar todas las colonias (no filamentosas: bacterias no autótrofas y levaduras; filamentosas: hongos).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1994  bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Nov-2025

Para más información y precios actualizados contacte con microkit@microkit.es

TRIBUTIRIN AGAR (BASE)

2 respuestas

TRIBUTIRIN AGAR LIPOLÍTICOS MANTEQUILLA: Detección de microorganismos lipolíticos en mantequilla y otros productos lipídicos https://www.microkit.es/fichas/TRIBUTIRIN-LIPOLITIC-AGAR.pdf

COMPOSICIÓN

  • Peptona untuosa      5,5 g
  • Extracto de levadura 3,5 g
  • Agar‑agar                15,0 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,5 ± 0,2

Tributirin Agar (Base). Nótese el aspecto graso del medio deshidratado.

Tributirato de glicerilo (Tributirina) en frasco suplemento 100 ml

EL ASPECTO GRASO Y GRUMOSO DEL MEDIO ES NORMAL, a causa de la «Peptona untuosa».

PREPARACIÓN

Disolver 24 gramos del polvo en 1 litro de agua destilada que contenga 10 ml de tributirina (SDA078), llevando a ebullición y agitando vigorosamente hasta la completa suspensión.

Autoclavar a 121 ºC durante 10 minutos.

Agitar para eliminar grumos y verter en placas a unos 50 ºC sobre la muestra

halos de lipolisis de ambas especies, vistos por debajo

St.aureus y Yarrowia lypolitica.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.  MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT125

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Untuoso, crema

PREPARADO: Estéril, Crema opalescente

CONTROL DE CRECIMIENTO 48-72 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Bacillus subtillis MKTA 6633, Bueno, No forma halo.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Bueno, dorado, en 48 horas forma halo.
  • Staphylococcus epidermidis MKTA 12228, Bueno, en 48 horas no forma halo.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, pigmenta en 48 horas y  forma halo.
  • Yarrowia lypolitica MKTC 1468, Bueno,  Forma halo.

PRESENTACIÓN: FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO BASE (UNTUOSO) Y SUPLEMENTO.

NOTA: Medio de cultivo diseñado para detectar microorganismos lipolíticos (bacterias: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa…. y levaduras: Candida lypolitica, Yarrowia lypolytica….) en productos lácteos, cosméticos y otros productos. Se trata de una base nutritiva sencilla con el sustrato graso tributirato de glicerilo (tributirina). Este producto puede substituirse por mantequilla, pero los resultados en tal caso serán lentos y poco claros.

SIEMBRA

Inocular 1 ml de la muestra y su serie de diluciones decimales en placas preparadas o, mejor aún, en placas Petri sobre las que se añaden 20 ml del medio en frasco, fundido y enfriado a unos 45‑50 ºC. Incubar a 30 ºC aproximadamente, durante 2‑3 días

INTERPRETACIÓN

Contar las colonias que hayan producido un halo transparente de lipolisis a su alrededor. Los microorganismos que han atacado la tributirina también lo harán sobre la mantequilla.

TRIBUTIRIN AGAR LIPOLÍTICOS MANTEQUILLA

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TRIBUTIRIN AGAR (BASE) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TOMATO JUICE BROTH (BASE) (MODIFICADO)

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TOMATO JUICE BROTH (BASE) (MODIFICADO), caldo para el enriquecimiento o para el recuento en placa con cartón de flora acidoláctica

Detección y recuento M.F. de flora acido-láctica

 COMPOSICIÓN Tomato Juice Broth

  •  Polisorbato Tween 80 1,00 g
  • Extracto de carne        20,00 g
  • Extracto de levadura   5,00 g
  • Glucosa                       20,00 g
  • Fosfato dipotásico       2,00 g
  • Acetato de sodio          5,00 g
  • Citrato triamonio        2,00 g
  • Sulfato de Magnesio    0,20 g
  • Sulfato de Manganeso 0,05 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 5’5 ± 0,5

 PREPARACIÓN 

 Disolver 55 g en 1 litro de agua destilada que contenga 50 ml del suplemento SDA500 (suero de tomate). Si es necesario ajustar el pH a 5’5  ± 0’5.

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Evitar el sobrecalentamiento.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT222

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO Tomato Juice Broth

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar, Turbio

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a 37°C aproximadamente, en microaerofilia:

  • Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Excelente.
  • Lactobacillus casei MKTA 7830, Excelente.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (BASE), FRASCOS PREPARADOS 100 y viales de 2 ml.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS 

Añadir 2 ml de medio a cada cartón para la técnica M.F. y depositar la membrana sin que se formen burbujas. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 2-3 días o bien a 30 ºC aproximadamente, durante 3-5 días. Todas las colonias blancas son de Lactobacilos y demás flora acidoláctica. Identificar con M-Acidificantes (KUS801).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/MRS-LACTOBACILLUS-BROTH.pdf

Si desea más información sobre nuestro TOMATO JUICE BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TOMATO JUICE AGAR (BASE) (MODIFICADO)

2 respuestas

agar zumo de tomate TOMATO JUICE AGAR, medio de cultivo sólido para el recuento de bacterias acidolácticas en productos ácidos

Medio especialmente mejorado por nuestros laboratorios para la detección y recuento rápidos de flora acidoláctica en alimentos, cerveza, vinagres, …

COMPOSICIÓN

  • Tween 80                   1,00 g
  • Extracto de carne      20,00 g
  • Extracto de levadura 5,00 g
  • Glucosa                     20,00 g
  • Fosfato dipotásico     2,00 g
  • Acetato de sodio        5,00 g
  • Citrato triamonio      2,00 g
  • Sulfato de Magnesio  0,20 g
  • Sulfato de Manganeso   0,05 g
  • Agar‑agar                  15,00 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 5’5 ± 0,5

 

 

Lactobacillus plantarum

PREPARACIÓN

Disolver 70 g en 1 litro de agua destilada que contenga 50 ml del suplemento SDA500 (suero de tomate).

Calentar agitando hasta ebullición. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Evitar el sobrecalentamiento.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT079

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar opalescente

CONTROL DE CRECIMIENTO 72 h a 37°C aproximadamente, en microaerofilia:

  • Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento >99%.
  • Lactobacillus casei MKTA 7830, Excelente.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO (BASE), FRASCOS PREPARADOS 100 y 250 ml,

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Fundir al baño María e inocular en superficie o mejor en profundidad. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 2-3 días o bien a 30 ºC aproximadamente, durante 3-5 días. Todas las colonias blancas son de Lactobacilos. Este medio da unos resultados mucho más rápidos y exuberantes que otros medios desarrollados para flora acidoláctica.

NOTA: La adición de 0,5 g/l de L- Cisteína (tubos inclinados en pico largo, ref: TPL814) hace el medio más nutritivo y selectivo para Leuconostoc.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TOMATO JUICE AGAR (BASE) (MODIFICADO) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TOTAL CHARCOAL MICROKIT® PLATE COUNT AGAR CARBÓN

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TOTAL CHARCOAL MICROKIT PLATE COUNT AGAR CARBÓN, medio de cultivo para recuento total en superficies con residuos de desinfectantes

Recuento total optimizado para superficies y en Filtración de Membrana (M.F.)

COMPOSICIÓN

  • Peptomix                25,5 g
  • Cloruro Sódico         5,0 g
  • Fosfato Disódico      2,5 g
  • Glucosa                     2,0 g
  • Carbón activado       3,0 g
  • Agar-agar                15,0 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,1 ± 0,2

 

Recuento de superficies. Flora mixta en ENVIROCOUNT y en DESINFECTEST® con Total Charcoal Agar. Véase la distribución contagiosa, aún más patente a la derecha, típica de superficies.

 

PREPARACIÓN

Disolver 52  gramos en 1 litro de agua bidestilada.

Calentar y agitar hasta la completa homogeneización.

Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. No sobrecalentar.

 

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, CODIGO: DMT180

 

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

 DESHIDRATADO: Polvo grueso, negro.  PREPARADO: Estéril, Negro mate.

CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24-48 h a 37°C aproximadamente (o bien 72 h a temperatura ambiente 21-28°C aproximadamente) y por siembra en superficie:

  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*,  recuento >150%.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*,  recuento >150%.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*,  recuento >150%.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*,  recuento >150%.

* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas trazables a la cepa tipo.

NOTA: La singular mezcla de peptonas, extractos y demás componentes, ayudada por el efecto neutralizante del carbón (que elimina no sólo conservantes y desinfectantes de la muestra, sino además los metabolitos inhibitorios  segregados por las cepas de crecimiento rápido, con lo que las cepas lentas y menos vitales también crecen) permite un crecimiento magnífico de prácticamente cualquier cepa ambiental, incluidas bacterias, levaduras y mohos. La opacidad otorgada por el carbón permite contrastar las colonias con el fondo; y es el factor limitante para que el uso de este medio se haya de restringir a siembras en superficie (control de superficies, Filtración de Membrana y aislamientos en superficie). ESPONERA & Co, Técnicas de laboratorio, Junio-92. La recuperación con respecto a PCA es, como media, del 200% (Estudio intercolaborativo, Tecnicas de Laboratorio, Nov.2001)

SIEMBRA

Aplicar la placa de contacto sobre la superficie problema, sin restregar, durante un par de segundos. O bien depositar la membrana de filtración sobre la superficie de una placa preparada. También se puede aislar colonias sembrando por agotamiento en placa. O bien realizar recuentos de muestras sembrando 0,1 ml en la superficie de una placa y repartiendo homogéneamente con asa de Digralsky. Incubar en las condiciones adecuadas para la flora buscada.

 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Contar todas las colonias (filamentosas, mohos; no filamentosas, bacterias y levaduras).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TOTAL CHARCOAL MICROKIT® PLATE COUNT AGAR rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16