Archivo de la categoría: KITS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

Kits para análisis microbiológicos (ISO 17381)

MICROKIT® P/A CLOSTRICULT

CLOSTRICULT P/A DETECCIÓN VALIDADA POR MICROKIT Y POR IELAB PARA DETECCIÓN CERTERA DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS EN AGUA

CLOSTRICULT P/A DETECCIÓN VALIDADA

Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 ml de agua

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.pdf

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril CLOSTRICULT Cromogénico diseñado por MICROKIT con base TSC y atmósfera de anaerobiosis para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-CP) de C.perfringens y sus esporas (el agua vira a negro opaco), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL308 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u
  1. FPA902 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u
  2. DMTI902- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora paraañadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 33 test

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

Recuerde que este parámetro es el único indicador de probable presencia de Enterovirus-Norovirus y protozoos (Cryptosporidium, Giardia, Entamoeba…) en el agua.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Voltear sin agitar para homogeneizar sin oxigenar. Incubar 18-48 horas a 35-37° C (según nuestras recomendaciones) ó a 42° C (según Normas ISO).

Si desea detectar sólo esporas, provocar un shock térmico: calentar la muestra de 100 ml de agua  15 minutos a 70-80 ºC antes de añadir el medio. No es necesario incubar con atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio ya la incorpora. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 50 mL, por lo que debe añadir 50 mL de agua estéril a los 50mL de agua de muestra, o bien emplear el medio a la mitad de la concentración indicada.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color negro-opaco (aunque sólo sea en el fondo, que es por donde suele empezar a virar) demuestra la Presencia de Clostridium perfringens y sus esporas en la muestra de agua.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar(muestras positivas con Clostricult P/A), utilice Quanti-P/A-TSC (Ref: QPA-CP), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío y atmósfera de anaerobiosis en una bolsa hermética.

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Clostridium perfringens WDCM 00007, vira a negro opaco desde las primeras 18h si el inóculo es elevado y no procede de muestras estresantes, en 48h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013: Inhibido
  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: Inhibido.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

Para  recuento NMP

este kit no se puede emplear con cubetas miniaturizadas, ya que la anaerobiosis quedaría comprometida. Por eso inventamos Quanti-P/A Clostricult: https://www.microkit.es/pdf/Quanti-PA-Clostricult-FOTOS2018.pdf

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A CLOSTRICULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® P/A ENTEROCULT

ENTEROCOCOS MICROKIT® P/A ENTEROCULT para la detección Presencia/Ausencia de Enterococos fecales en 100 mL de muestra de agua 

Enterococos fecales: Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

            INTRODUCCIÓN:

Medio estéril ENTEROCULT diseñado por MICROKIT con base BEA para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-ETC) de Enterococos fecales (el agua vira de ámbar a negro opaco y pierde su iridiscencia), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  • RPL301 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

 

  • FPA901 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u

 

 

  • DMTI901- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 100 test

 

 

Screening negativo

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 6% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

Festivos y fines de semana

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

 

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL301, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para mezclar. Incubar 18-24 horas a 35-37° C.

La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 2 viales ó dos cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL301 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar 2,5 viales ó 2,5 cucharaditas)

 

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje del color ámbar inicial, transparente e iridiscente, a color negro-opaco (y pérdida de la iridiscencia que adquiere el agua en este medio) demuestra la Presencia de Enterococos fecales en la muestra de agua. Puede confirmar observando al microscopio que son cadenas de cocos Gram positivos y/o que son microorganismos catalasa negativos.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar (muestras positivas con Enterocult P/A), utilice Quanti-P/A-ETC (Ref: QPA-ETC), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío en una bolsa hermética.

     Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL301, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

 

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Ámbar, transparente

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 h a 37°C aproximadamente:

Enterococcus faecalis MKTA 29212, Correcto, medio opaco y negro, sin iridiscencia en el menisco
Escherichia coli MKTA 25922, inhibido completamente.

Bacillus subtillis MKTA 6633, Inhibido completamente.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido completamente.

 

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/P-A-ENTEROCULT-UE2-2019.pdf

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A ENTEROCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

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MYCOKIT-PLUS: VIALES P/A HONGOS (CALDO CROMOGÉNICO)

MYCOKIT-PLUS: VIALES P/A CROMOGÉNICOS para la detección Presencia/Ausencia más fiable de levaduras y mohos en 100 mL de agua

HONGOS

El método P/A

(Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando numerosos

Kits P/A cromogénicos

para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir

¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!

 

MODO DE EMPLEO:

  • Se agrega 1 vial a los 100 mL de muestra de agua (ó 2 viales a los 250 mL, ya que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada), vial que contiene pre-pesado el medio cromogénico estéril adecuado para los hongos en 100 mL de muestra líquida. Agitar para homogeneizar. Si el agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.
  • Se incuba 2-3 días a 25ºC con una buena cámara de aire o con el tapón del recipiente sin cerrar, para que entre oxígeno del aire exterior

LECTURA DE RESULTADOS:

  • Si no ha cambiado de amarillo a color verdoso, se demuestra la ausencia de levaduras y mohos (sin falsos negativos) y si ha cambiado a cualquier gama del verde (depende de la actividad metabólica de cada cepa de levadura o de moho), se demuestra su presencia (sin falsos positivos, gracias al Cloranfenicol).

Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los microorganismos como sucede con la MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes. ¡Se acepta en la bibliografía internacional que cerca del 21% de las aguas que contienen coliformes-E.coli, cerca del 33 % de las aguas que contienen Pseudomonas aeruginosa y cerca del 49 % de las aguas que contienen Clostridios no son detectadas como positivas mediante el método MF!

 

 

 

 

 

Ventajas frente al clásico Hongos P/A (liquido rosa) de MICROKIT:

Mayor rapidez de resultados (2-3 días), ya que la actividad metabólica (viraje a verde) se ve mucho antes que el crecimiento celular (turbidez, flóculos en 3-7 días), crecimiento que no obstante, también sirve aquí como confirmativo y para posterior identificación de la cepa. El medio cromogénico es igual de selectivo para hongos que el clásico, al incluir la cantidad adecuada de cloranfenicol.

 

PRESENTACIÓN: 

Caja de 40 viales, cada uno con 4 gramos de caldo en polvo cromogénico estéril para hongos (levaduras y mohos) en 100 mL de muestra líquida, Ref: FPA950, con ¡3 años de caducidad!

Si desea más información sobre nuestro MYCOKIT-PLUS rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/4-Levaduras-y-mohos-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

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https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

LISTERIQUICK

Detección rápida y fiable de Listeria monocytogenes en alimentos

 

 

 

 

detección rápida Listeria alimentos

INTRODUCCIÓN:   

El método ISO 11290 tiene como desventajas la lentitud de obtención de resultados y la no neutralización de los conservantes de la muestra, que conlleva a resultados falsamente negativos.

En dicha Norma se realiza un pre-enriquecimiento revitalizador de 25 g de la muestra, 18-24 h a 30-35ºC en 225 ml de Caldo Semifraser. Al día siguiente se toma una alícuota (0,1 ó 1 mL) y se incuba en un post-enriquecimiento selectivo en 10 ml de Fraser Broth otras 18-24 h. Y de ahí se estría en placas de medio cromogénico Ottaviani & Agosti (que destronó al Oxford y al Palcam, que daban excesivos falsos positivos), incubando otras 18-24 h.

De modo que todas las muestras (incluso las negativas) llevan un mínimo de 3 días (72 h) de demora en la obtención de los resultados presuntivos.

Se emplean en total 3 medios y 4 suplementos de los cuales dos (Semifraser y Fraser) viran presuntivamente a negro con una proporción impresionante de falsos positivos y de falsos negativos, por lo que hay que seguir hasta el final.

Otro que se emplea en otros protocolos, el BPW, no inactiva los conservantes, ni los metabolitos creados por la flora acompañante, permitiendo la aparición demasiado a menudo de resultados falsamente negativos.

LISTERIQUICK

ha sido diseñado por Laboratorios MICROKIT, en 4 años de estudios tras el diseño de su homólogo Salmoquick, basándose en la Norma ISO 11290 pero optimizándola; el método varía, ahorrando 2 suplementos y acortando el tiempo de obtención de resultados a menos de dos días, sólo 36 horas!

En este caso se realiza el pre-enriquecimiento revitalizador (e inactivador de conservantes y de metabolitos generados por el resto de la flora acompañante, que podrían interferir en el crecimiento de Listeria en un sinfín de matrices alimentarias) de 25 g de la muestra en 225 ml de Agua de Peptona Tamponada Neutralizante (BPNW), 20-30 minutos a temperatura ambiente.

Se añaden al mismo 18 ml de LEB Broth a [x5] (una optimización del Fraser), se mezcla y se incuba el conjunto 18 h a 30-35ºC, constituyéndose así en un solo paso la revitalización de las Listeria dañadas, la inactivación de los graves problemas que no contempla la ISO 11290 y el aumento de la selectividad para la multiplicación de las Listeria presentes. En este medio mixto, las muestras con Listeria enturbian el caldo, por lo que de entrada en las primeras 18h ya tenemos una alerta de posible presencia de Listeria si el caldo está turbio. Pero otras bacterias también pueden crecer, por lo que hay que continuar con el segundo paso:

Al día siguiente se estría en placas de Cromocytogenes (Ottaviani & Agosti) Agar, incubando otras 18h. De modo que las muestras sin crecimientos típicos de Listeria monocytogenes (colonias verdes con halo) son liberadas en sólo 36h.

PRECAUCIÓN:

La validación de LISTERIQUICK ha sido realizada con los medios indicados, y de la marca MICROKIT. Cualquier variación sobre los medios o la marca invalida nuestra validación, de hecho este protocolo se ha probado y ¡NO FUNCIONA con BPW, ni con Fraser, ni con LEB de otras marcas, ni con Ottaviani & Agosti Agar + suplementos de otras marcas! Verificar si todo funciona bien en muestras de pollo, ya que en la validación retrasaban 18 h los resultados (también en el método ISO).

LISTERIQUICK es una herramienta simple, rápida y fiable, diseñada especialmente para simplificar y agilizar al máximo el control de alimentos con contaminación por Listeria, que es uno de los puntos más críticos y que más retrasan la liberación del lote en la industria alimentaria.

SIMPLE:

Ahorra un medio de cultivo de dudosa utilidad (Semi-Fraser) y los dos suplementos del Fraser por los más modernos y eficientes medios que no necesitan suplemento alguno (BPNW y LEB Broth).

RÁPIDA:

De la muestra a la liberación del lote en sólo 36 horas (frente a las 72 h habituales).

FIABLE:

Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140 por el método de pares frente a la Norma ISO 11290, con inóculos muy bajos de distintas cepas de Listeria, variada flora interferente, matrices de todo tipo y 100% de eficiencia (ver publicación en bibliografía). Cuidado con las muestras de pollo.

Se presenta de dos formas: como kit preparado y listo para usar y como un conjunto de los 3 medios de cultivo deshidratados y suplementos necesarios para que el mismo laboratorio se lo pueda preparar.

  1. LISTERIQUICK-Estéril,

  2. Ref: KMT040: kit listo para emplear, incluye los 3 medios necesarios para detección rápida de Listeria (en sólo 36h), en presentación estéril y lista para su uso.
  3. 4×20 Tubotes prepesados y estériles BPNW (Ref: KBB002, con Cad: 2 años desde fabricación) para añadir a 225 ml de agua estéril,
  4. 4×20 tubos LEB Broth 18 ml [x5] (Ref: TPL0335, con Cad: 1 año desde fabricación) para añadir 25 minutos después al anterior,
  5. 2×45 Plaquis herméticas Cromocytogenes suplementadas (Ref: PPL970, con 6 meses de caducidad el día de su envío, para analizar al menos 14 muestras/mes).
  6. Ninguno de los componentes necesita nevera. Conservar en lugar fresco y seco, con una temperatura de entre 5ºC y 25ºC, eso sí, al abrigo de la luz. No congelar. Kit de 80 test (Emplee las 10 plaquis que le sobran para duplicados, verificaciones… no se le han cobrado)

 

 

 

 

  1. LISTERIQUICK-Iniciación,
  2. Ref: KMT041: conjunto de los 3 medios deshidratados y doble suplemento del agar, necesarios para detección rápida de Listeria (en sólo 36 h), para que cada laboratorio se lo prepare:
  3. 1x 500g BPNW (Ref: DMT011, para hacerse 62 frascos o bolsas Stomacher con 225 ml),
  4. 1x500g LEB Broth (Ref: DMT070, para hacerse 154 tubos de 18 ml a [x5],
  5. 1x500g Cromocytogenes Agar Ref: DMT700 Ref: SMT700+ (para hacerse 355 placas de 20 mL ó 473 placas de 15 mL) y su doble suplemento SMT700+ (para hacerse 250 placas de 20 mL ó 33 placas de 15 mL).
  6. En conjunto es más económico (2,31 €/test) que la adquisición de cada uno de los 3 medios por separado (3,13 €/test),
  7. para que el laboratorio se inicie en este método y pueda pedir después por separado los medios conforme vaya necesitando cada uno
  8. (Para alcanzar el mínimo precio de 2,31 €/test, pida 10 botes de cada uno de los 3 medios y 10 suplementos).

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

detección rápida Listeria alimentos

1.- Tomar 25 g del alimento en una bolsa Stomacher o en un frasco estéril

2.- Añadir 225 ml de Agua Peptonada Tamponada Neutralizante (Microkit DMT011)

3.- Homogeneizar durante 2 minutos y dejar actuar 20-30 minutos

4.- Añadir 18 ml de LEB Broth (Microkit DMT070) a concentración [x5]

5.- Homogeneizar e incubar 18 h a 30-35ºC

6.- Pueden leerse los resultados presuntivos desde las primeras 18 horas:

la turbidez del caldo es tan presuntiva de presencia de Listeria como el ennegrecimiento del caldo ISO 11290; debe confirmarse con el siguiente paso:

7.- Estriar sobre placas de Cromocytogenes Agar (Microkit DMT700 + Suplemento SMT700+).

8.- Incubar las placas 18 h a 30-37ºC

9.- La aparición de colonias verdes, es altamente presuntiva de presencia de Listeria.

Si están rodeadas de un halo opaco, son altamente presuntivas de L.monocytogenes (sólo algunas cepas de L.ivanovii producen también halo).

Las colonias verdes (con o sin halo, igual que debería hacerse en el método ISO)  deben confirmarse en laboratorio mediante los kits bioquímicos e inmunológicos habituales,

a elegir (X/R Broth DMT167 y sus dos suplementos DMT169 y DMT171, lo mismo en kit preparado KMT012)

Muchas colonias presuntivas de la mayoría de medios de aislamiento de Listeria (Oxford, Palcam, McBride…) acaban siendo confirmadas como Micrococcus, Enterococcus o Staphylococcus ambientales;

esto no sucede en Cromocytogenes, donde Listeria spp. crece con colonias verdes, L.monocytogenes con colonias verdes con halo y los demás microorganismos no suelen crecer.

Bolsas Stomacher con 25 g de alimento, 225 ml de BPNW y 18 ml LEB Broth [x5] antes de incubar

BIBLIOGRAFÍA:

Norma ISO 11290: Microbiología de los alimentos para consumo humano y alimentación animal. Método horizontal para la detección y recuento de Listeria monocytogenes.

Sanchis, J. Doble enriquecimiento simultáneo para detección rápida de Listeria monocytogenes en matrices alimentarias.  XXI Congreso SEM de Microbiología de los alimentos. Tarragona, IX-2018.

El usuario es el único responsable de la destrucción de los microorganismos generados en el interior del kit durante su uso…

…de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Sumerja en lejía o alcohol, o mejor autoclávelos, antes de desecharlos a la basura. Mantener fuera del alcance de los niños. No ingerir.           

Si desea más información sobre nuestro LISTERIQUICK rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

 

USO DEL SALMOQUICK Y EL LISTERIQUICK EN OTRAS MATRICES

¿PUEDO USAR  SALMOQUICK Y /O LISTERIQUICK EN OTRAS MATRICES?

LISTERIA: LISTERIQUICK, uso en otras matrices que no son alimentos; SALMONELLA: SALMOQUICK, uso en otras matrices que no son alimentos

https://www.microkit.es/pdf/LISTERIQUICK.pdf

https://www.microkit.es/pdf/Salmoquick-2016.pdf

Aunque SALMOQUICK y LISTERIQUICK han sido diseñados para alimentos (25 g de muestra), se puede extender su uso a otras matrices:

  • AGUAS

Dado que en aguas puede requerirse, para la búsqueda de Salmonella o Listeria, una muestra mínima muy superior a 25 mL (normalmente de 100 mL, 250 mL e incluso de 1 L) se debe filtrar por membrana de 0,45 µm la cantidad de muestra de agua necesaria, extremando la precaución de no dejar la membrana con la bomba encendida una vez se ha filtrado toda la muestra de agua, para evitar estresar las posibles Salmonella o Listeria presentes. Se añade la membrana filtrada a 25 ml de agua y con esta muestra concentrada (membrana en agua) se procede como explica el folleto SALMOQUICK ó LISTERIQUICK en alimentos, como si de una muestra de 25 g de alimento se tratase.

  • COSMÉTICOS

Se debe sustituir el Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante (PBNW) por el caldo LPT Neutralizing Broth de MICROKIT. Por lo demás, el protocolo es idéntico al de alimentos explicado en los folletos SALMOQUICK y LISTERIQUICK.

  • ALIMENTOS INFANTILES

Dado que las legislaciones de numerosos países exigen la ausencia de Salmonella y/o de Listeria en alimentación infantil, no en 25 g sino en cantidades mucho mayores (hasta 5 Kg en algunos casos), deberemos emplear la cantidad de Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante que sea necesaria para crear la dilución 1:10 con la cantidad de muestra requerida. Y el caldo SS o LEB también a la concentración necesaria para mantener el mismo ratio Agua de Peptona Tamponada y Neutralizante/ SS Broth o LEB que indican los folletos SALMOQUICK y LISTERIQUICK.

  • SUPERFICIES

Tanto Salmonella como Listeria se multiplican en las superficies de ciertos puntos críticos, formando biofilms, los cuales además incrementan su patogenicidad. Estos biofilms las encapsulan en grandes poblaciones (monoespecíficas o no) que suelen pasar desapercibidas al método de contacto (Rodac, laminocultivos) e incluso al rascado del método de barrido con escobillón o balleta. Se necesitan esponjas realmente abrasivas (MICROKIT VMT037) para arrancar las células y poder así detectarlas. Pulverice la superficie a analizar con agua estéril, espere 60 segundos, rasque con fuerza con una esponja abrasiva estéril MICROKIT, devuélvala a su bolsa original, llévela al laboratorio y trate dicha esponja como si de los 25 g de alimento se tratase, pasándola completa a los 225 ml de BPNW y siguiendo las instrucciones de los folletos SALMOQUICK y LISTERIQUICK.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A PSEUDOCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

MICROKIT® P/A PSEUDOCULT

Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Pseudomonas aeruginosa en 100 (250) ml de agua

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/fichas/P-A-PSEUDOCULT-UE2-2019.pdf

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril PSEUDOCULT Cromofluorogénico diseñado por MICROKIT muchos años antes que otros (sólo fluorogénicos) más conocidos,  para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP-Racks Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Pseudomonas aeruginosa (viraje del agua a rosa-rojo y además fluorescente azul bajo luz de 366 nm VMT050 e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

RPL302 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

FPA908 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u. Para 250 mL d agua, ref: FPA903

DMTI908- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test

SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir dos cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. Incubar 24-72 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 250 mL, por lo que debe añadir 1 vial FPA903 ó 4 cucharaditas por muestra (no se pueden usar los frascos RPL302 para 250 mL, al haber sido diseñados sólo para 100 mL). El medio funciona correctamente desde mitad hasta el doble de concentración, por lo que no es necesario afinar a 5 cucharaditas

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color rosa-rojo demuestra la Presencia de P.aeruginosa en la muestra de agua. La Fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que se trata de P.aeruginosa (además con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, NO hay anillo rojo de Indol en superficie). Ya que hay otros microorganismos  capaces de virar a rosa, pero no son fluorescentes ni indol -.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 250 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable.

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de esta fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Paja

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-72 h a 37°C aproximadamente:

  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026, vira a rosa, da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y no genera anillo rosa de indol, en las primeras 24h si el inóculo es alto y no procede de muestras estresadas, en 48-72h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013, vira a rojo, no da fluorescencia azul en la oscuridad bajo 366 nm y genera anillo rosa de indol.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A PSEUDOCULT rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

Pseudomonas aguas detección NMP

https://www.microkit.es/monograficos/13-Pseudomonas-aeruginosa-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® P/A CLOSTRICULT

Clostridium  aguas MICROKIT® P/A CLOSTRICULT para la detección Presencia/Ausencia de Clostridium perfringens y sus esporas en 100 mL de agua

 Clostridium perfringens y sus esporas

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 (250) ml de agua

 INTRODUCCIÓN:

Medio estéril CLOSTRICULT Cromogénico diseñado por MICROKIT con base TSC y atmósfera de anaerobiosis para detección P/A (o recuento en su formato Quanti-P/A Ref: QPA-CP) de C.perfringens y sus esporas (el agua vira a negro opaco), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL308 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

 

 

 

 

  1. FPA902 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u

 

 

 

  1. DMTI902- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 33 test

 

 

 

 

 

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 21% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

Recuerde que este parámetro es el único indicador de probable presencia de Enterovirus-Norovirus y protozoos (Cryptosporidium, Giardia, Entamoeba…) en el agua.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, añadir tres cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Voltear sin agitar para homogeneizar sin oxigenar. Incubar 18-48 horas a 35-37° C (según nuestras recomendaciones) ó a 42° C (según Normas ISO).

Si desea detectar sólo esporas, provocar un shock térmico: calentar la muestra de 100 ml de agua  15 minutos a 70-80 ºC antes de añadir el medio. No es necesario incubar con atmósfera de anaerobiosis, ya que el medio ya la incorpora. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación.

Para aguas envasadas o de baño, se analizan 50 mL, por lo que debe añadir 50 mL de agua estéril a los 50mL de agua de muestra, o bien emplear el medio a la mitad de la concentración indicada.

 

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje a color negro-opaco (aunque sólo sea en el fondo, que es por donde suele empezar a virar) demuestra la Presencia de Clostridium perfringens y sus esporas en la muestra de agua.

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a 0 ufc/100 mL (ó en 50 mL). Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es potable. Si aún asi debe cuantificar(muestras positivas con Clostricult P/A), utilice Quanti-P/A-TSC (Ref: QPA-CP), que contienen este mismo medio con gelificantes en frío y atmósfera de anaerobiosis en una bolsa hermética.

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL308, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

En homenaje a nuestro querido amigo, el Dr. Juan José Marcén, que falleció antes de conocer el éxito mundial de la fantástica idea que nos regaló en los años 90, el kit de coliformes/E.coli se regala a todas las ONGs que nos los pidan junto con otros parámetros P/A.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

EXTREMADAMENTE HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. EN ZONAS DE ELEVADA HUMEDAD AMBIENTAL, GUARDAR EL BOTE BIEN CERRADO EN UN TUPPER HERMÉTICO CON SILICAGEL.

 

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo crema    PREPARADO: Crema

CONTROL DE CRECIMIENTO 18-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Clostridium perfringens WDCM 00007, vira a negro opaco desde las primeras 18h si el inóculo es elevado y no procede de muestras estresantes, en 48h en caso contrario.
  • E.coli WDCM 000013: Inhibido
  • Pseudomonas aeruginosa WDCM 00026: Inhibido.
  • Enterococcus faecalis WDCM 00009: Inhibido.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

https://www.microkit.es/fichas/P-A-CLOSTRICULT-UE2-2019.pdf

Si desea recuento fiable de Clostridium perfringens y sus esporas, olvídese radicalmente de la filtración de membrana, que tan nefastos resultados provoca en tantísimos laboratorios, y céntrese en los kits Quanti-P/A Clostricult de MICROKIT

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https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

MICROKIT® KITS P/A EN FRASCOS TOMAMUESTRAS

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 ml de muestra de agua

KITS P/A FRASCOS TOMAMUESTRAS; LA FORMA MÁS FÁCIL Y FIABLE DE ANALIZAR AGUAS EN TODOS LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS

 

INTRODUCCIÓN:

El método P/A ha sido validado para una óptima detección de patógenos en 100 mL de agua y de bebidas incoloras, cuando no se requiere recuento.

La legislación exige la ausencia absoluta de patógenos en aguas de consumo humano (extensible a todas las aguas de fabricación, no sólo de industrias alimentarias, sino también farmacéuticas y cosméticas, aguas de baño, etc), por lo que buscar patógenos por los métodos de Filtración de Membrana (MF) o de Número Más Probable (MPN) para poder enumerar colonias, carece de sentido: sería como necesitar siempre contar “cero”. Algunos laboratorios emplean los kits P/A como screening negativo y sólo en caso positivo repiten la muestra por método cuantitativo para saber cuantas ufc del patógeno hay en la muestra, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es apta.

SORPRESA

La sorpresa es que la Filtración de Membrana no es fiable en la búsqueda de patógenos, porque demuestra en los servicios intercomparativos ser un método destructivo que provoca un número inaceptable de resultados falsamente negativos: en el 21% de las muestras analizadas para Coliformes-E.coli, 33% para Pseudomonas aeruginosa, 49% para Clostridium perfringens… no son detectados dichos microorganismos cuando están presentes, cuando se comparan con el método P/A y con los inóculos diana de las muestras ciegas. El método MPN es demasiado disperso, impreciso, porque obtiene resultados a menudo bastante alejados del valor inóculo (hacia arriba o hacia abajo).

Además el método P/A en frascos tomamuestras es el más fácil de emplear y de interpretar, incluso por personal no especializado en análisis (la única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el medio con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales), por lo que muchos laboratorios empiezan empleándolos, POR COMODIDAD, para fines de semana y festivos; y acaban aplicándolo a todas las muestras, POR FIABILIDAD.

Dada la sensibilidad cercana al 100% (ausencia de falsos negativos), el método P/A sirve de screening negativo de muestras: si la muestra sale negativa, se considera negativa y sólo en los pocos casos en que salga positiva, habrá que confirmarla estriando en placa de medio selectivo adecuado, para descartar falsos positivos.

 

MODO DE EMPLEO:

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco. Agitar para homogeneizar. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir varias horas entre toma e incubación. Si el microorganismo diana es muy aerófilo, no cerrar el tapón. Incubar en las condiciones indicadas para cada parámetro/microorganismo.

 

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

Tras la incubación, el viraje  del agua al color indicado para cada parámetro, demuestra la presencia del microorganismo buscado. La ausencia de viraje demuestra su ausencia.

 

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES. GUARDAR A TEMPERATURA AMBIENTE (8-25ºC), AL ABRIGO DE LA LUZ.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

GAMA COMPLETA:

En MICROKIT disponemos de kits P/A en frascos tomamuestras para TODOS los microorganismos indeseables del agua, en cajas de 10 y de 90 test. Ya llevan incorporado el Sodio Tiosulfato para neutralizar la posible presencia de Cloro. Si analiza muchas aguas al día, consulte los formatos más económicos de MICROKIT de los mismos caldos cromogénicos, en formato vial y formato de bote de 100 g con cucharilla dosificadora. Aún así, si necesita kits P/A para otros microorganismos no contemplados en este folleto, podemos diseñarlos y fabricarlos especialmente para Ud: CONSÚLTENOS

Los kits P/A pueden convertirse en recuento MPN simplemente añadiéndolos   a   cubetas  miniaturizadas   antes  de    incubar.

 

 

 

 

 

 

 

https://www.microkit.es/pdf/KITS-PA-AGUAS-EN-FRASCOS-TOMAMUESTRAS.pdf

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® KITS P/A EN FRASCOS TOMAMUESTRAS rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

LISTA DE FRASCOS P/A

RPL303 MCC P/A COLICULT® BROTH Coliformes (vira de paja a azul) y  E. coli (fluorescente con luz de 366 nm -linterna MICROKIT- e indol + en el mismo frasco).

 

Incubar 18-48 horas a 35-37° C

RPL301 ENTEROCULT: Enterococos fecales (vira de ámbar a negro opaco y pierde la iridiscencia de la superficie)

 

Incubar 18-48 horas a 35-37° C

RPL308 CLOSTRICULT: Clostridium perfringens y sus esporas (vira de paja a negro opaco sin necesidad de anaerobiosis, a veces solo vira el fondo)

 

Incubar 18-48 horas a 44-46°C (a 35ºC para buscar Clostridios sulfito-reductores)

RPL302 PSEUDOCULT Ps. aeruginosa (vira de incoloro a rosa-rojo y da fluorescencia azul bajo luz de 366 nm -linterna MICROKIT-).

 

Incubar 24-48 horas a 35-37° C, si se prevé muy estresada, incubar otros 2-3 días

RPL323 Burkholderia cepacia (vira de naranja a rojo tinto)

 

Incubar 24-48 horas a 35-37ºC

RPL309 Aeromonas/Pseudomonas/Plesiomonas (vira de rojo a naranja o púrpura)

 

Incubar 24-72 horas a 21-37ºC

RPL320 ESTAFILOCOCOS (vira de rojo a naranja)

 

Incubar 24-48 horas a 35-37ºC

RPL312 Vibrio cholerae (vira de verde a amarillo)

 

Incubar 8-48 horas a 21-35ºC

RPL312C Vibrio cholerae Cromokit (vira  a rojizo: naranja, púrpura, ámbar)

 

Incubar 36 horas a 21-35ºC, si se prevé muy estresado, incubar otros 2-3 días.

RPL310P Vibrio parahaemolyticus (vira de azul oscuro a verdoso)

 

Incubar 24 horas a 21-35ºC

RPL307 FICOKIT: ALGAS MICROSCOPICAS (vira de incoloro a verde, pardo, dorado, rojo o verde-azulado)

 

Incubar durante 2-14 días a 21-25ºC en fotoperiodo 16h luz/ 8h oscuridad

RPL306 CIANOKIT: CIANOBACTERIAS Y BACTERIAS FOTOTROFAS (vira de incoloro a verde-azulado o rojo)

 

Incubar durante 2-14 días a 21-25ºC en fotoperiodo 16h luz/ 8h oscuridad

RPL315 MYCOKIT -LEVADURAS Y MOHOS- (enturbia o flocula)

 

Incubar 2-14 días a 21-25ºC

RPL314 FERROKIT para bacterias del hierro

 

Incubar 2-14 días a 21-35ºC

KITS P/A FRASCOS TOMAMUESTRAS; LA FORMA MÁS FÁCIL Y FIABLE DE ANALIZAR AGUAS EN TODOS LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de la otra forma de usar este método: los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

 

MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia

Detección Presencia / Ausencia (P/A) de Burkholderia cepacia complex en 100 ml de agua

Microkit P/A Burkholderia cepacia complex, detección de este peligroso grupo en 100 mL de agua sin los falsos negativos de la filtración de membrana

 

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril Cromogénico diseñado por MICROKIT en base al BCA (BCPT), para detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020 ó Quantitry de Idexx) de Burkholderia cepacia (viraje del agua a rojo burdeos en sólo 18-24h e indol – con reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

  1. RPL323 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

  1. FPA904 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u.DMTI904- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test.
  2. SCREENING PARA DESCARTAR MUESTRAS NEGATIVAS

  3. De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33% de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones artificiales.

MODO DE EMPLEO:

            Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras RPL302, que ya incluyen el tiosulfato.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los botes de 100g, ponerse guantes estériles para no contaminar el medio y usarlo en cabina de flujo laminar; añadir 3 cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. El color resultante es naranja, transparente. Incubar 18-48 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés de la cepa, aun que casi siempre vira en 18h) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir hasta horas entre toma e incubación.

Monitorice todos los puntos necesarios para el análisis preventivo de tendencias.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

El viraje del agua a color rojo burdeos (vino tinto) y opaco demuestra la Presencia de B.cepacia en la muestra de agua. La ausencia de fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A. de 366 nm (linterna VMT050) confirma que no se trata de P.aeruginosa. Además, con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, no hay anillo rojo de Indol en superficie, lo que descarta falsos positivos de coliformes. Ya que hay otros microorganismos  capaces de virar a rojo, pero son más lentos, fluorescentes o indol +. Puede conseguir que el kit sea muy selectivo añadiendo a cada frasco 0,14 ml del suplemento MICROKIT SMT301 (Ticarcilina + Polimixina). Preferimos ofrecer el kit sin suplemento porque algunas cepas de B.cepacia subletales podrían no crecer (por ejemplo la DSMZ 50181 no crece bien con los antibióticos).

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a       0 ufc/100 mL. Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay 2 ó 950, en ambos casos el agua no es aceptable para fabricación de medicamentos y cosméticos.

Como siempre en microbiología, resiembre los positivos en estría en agar selectivo BCA (BCPT) e identifique las colonias con galerías bioquímicas (MICROKIT 245000) o con nuestro servicio de identificación molecular (SFI004).

Material necesario no incluído:

Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976) excepto en los frascos tomamuestras RPL323, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml (VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC (SIL12AR ó SIL24AR).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O INCLUSO PARA ANÁLISIS DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS Y ANIMALES.

Los viales FPA904 y botes DMTI904- son extremadamente higroscópicos: manténgalos bien cerrados en lugar seco, fresco y oscuro (no en nevera). Agite el bote antes de usar. En zonas de elevada humedad ambiental, guardar bien cerrados en un tupper hermético con silicagel. Los frascos RPL323 tampoco precisan nevera, sólo oscuridad.

CONTROL DE CALIDAD:

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, rosado, sólo existe versión agarizada y versión irradiada.

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros de hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 18 h a 35°C aproximadamente:

  • Burkholderia cepacia MKTA 25416, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Burkholderia cepacia MKTN 10743, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Burkholderia cepacia MKTD 50181, Viraje a rojo burdeos, opaco
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (WDCM00026), Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
  • Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/8-Burkholderia-cepacia-complex-monograf–a.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/21-Monograf–a-M–todos-alternativos-en-Control-microbiol–gico-de-aguas.pdf

No se pierda nuestro vídeo de los viales P/A:

https://youtu.be/6OfsD7zU_8U

SCREENING-SWABBS

SCREENING-SWABBS

swabs detección microorganismos superficies: swabs con tubos de medios selectivos que viran, para diferentes microorganismos contaminantes

https://www.microkit.es/fichas/X-SWABBS-UE2-2019.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SCREENING-SWABBS-UE2-2019.pdf

https://www.microkit.es/fichas/B-CEREUS-XSWABBS-UE-2-2019.pdf

https://www.microkit.es/pdf/listeriswabbs-green.pdf

https://www.microkit.es/fichas/RAPIDSWAB-HONGOS.pdf

https://www.microkit.es/fichas/ColiformKIT-Screening-Swabs-UE-2-2019.pdf

https://www.microkit.es/fichas/SCREENING-SWABBS-SALMONKIT-SCREENINGSWABS.pdf

Tras el éxito obtenido en los ultimos años con los X-Swabbs (kits completos con hisopos para recuentos de microorganismos diversos en superficies y manipuladores, con el método de barrido), a petición de muchos clientes diseñamos estos otros kits que simplifican un paso, al buscar con ellos sólo la presencia o ausencia del microorganismo dado, no su recuento.

El método de barrido es el ideal en ambientes de alta carga microbiana (ej. países tropicales) donde el método de contacto con placa Rodac o con laminocultivos no puede tener éxito excepto en salas blancas, porque casi siempre dichas placas crecen incontables.

Cada kit consta de todo el material estéril y listo para su uso, para:

1-La toma de muestras por barrido (hisopos secos en su tubo)

2-La detección del microorganismo buscado por simple cambio de color del caldo selectivo/diferencial, tras incubarlo por la noche.

La gama es completa para los microorganismos más buscados en superficies, pero si no encuentra el Screening-Swabb del microorganismo que busca, podemos diseñarlo para Ud. para un pedido mínimo de sólo 5 kits.

Actualmente disponibles 5 tipos:

  • COLIKIT : Ver folleto X-Swabbs, ya que este es el mismo kit que el COLISWABB
  • LISTERISWABS: Ver  folleto Listeriswabbs-Green, ya que aunque el medio es sólido, también es para detección en un solo paso
  • FUNGIKIT ScreeningSWABBS:
  • SALMONKIT ScreeningSWABBS:
  • STAPHYKIT ScreeningSWABBS:
  • X-Swabs Bacillus cereus

El usuario final es el único responsable de la destrucción de los microorganismos que se hayan multiplicado con el KIT, de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Añada lejía con cuidado de no tocar ni derramar el cultivo (si al abrir los botes sale gas a presión o líquido, lavar bien las manos con agua corriente y jabón), o bien autoclavar antes de desechar a la basura. Para uso exclusivo en laboratorio por personal especializado en microbiología.

MANTENER EN POSICION VERTICAL A 4-25ºC! ¡ EN OSCURIDAD!

FUNGIKIT-Screening-SWABBS- Hongos (Levaduras y Mohos)

Kit de detección de Hongos (Levaduras y Mohos) en un solo paso en superficies y manipuladores, por el método de barrido

PRESENTACIÓN: KIT DE 20 TEST                CÓDIGO: KMT102P

–    20 hisopos en tubo.

–    20 tubos líquidos de caldo color paja del medio selectivo Sabouraud

Polimicological Caf.Broth (TPL041).

MODO DE EMPLEO: Barrer la superficie a muestrear (ideal 10 x 10 cm2) con un hisopo previamente mojado en agua estéril o, mejor aún sumergido unos segundos en caldo LPT Neutralizing (Tubos TPL053S no incluidos en el kit). Si la superficie está seca, rascar con el escobillón, para arrastrar la suciedad con el algodón. Devolver el escobillón a su tubo, cerrar y llevar al laboratorio. Introducir el hisopo en uno de los tubos de caldo Sabouraud que incluye el kit, meter y sacar varias veces en el caldo y volver a sacarlo y guardarlo en su tubo original. Cerrar el tubo con caldo e incubarlo 48-72 h a  30±5ºC.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS. Cualquier turbidez demuestra la presencia de levaduras y cualquier flóculo algodonoso demuestra la presencia de mohos sin necesidad de más confirmaciones.

swabs detección microorganismos superficies

SALMONKIT-Screeening-SWABBS- Salmonella

Kit de detección de Salmonella spp. en un solo paso en superficies y manipuladores, por el método de barrido

PRESENTACIÓN: KIT DE 20 TEST                CÓDIGO: KMT104P

–  20 hisopos en su tubo.

–  20 tubos líquidos de caldo color rojizo del medio de enriquecimiento selectivo SS Broth (TPL401).

MODO DE EMPLEO: Barrer la superficie a muestrear (ideal 10 x 10 cm2) con un hisopo previamente mojado en agua estéril, o mejor aún sumergido unos segundos en caldo LPT  Neutralizing (Tubos TPL053S no incluidos en el kit). Si la superficie está seca, rascar con el escobillón, para arrastrar la suciedad con el algodón. Devolver el escobillón a su tubo, cerrar y llevar al laboratorio. Introducir el hisopo en uno de los tubos de caldo SS incluidos en el kit, meter y sacar varias veces en el caldo y volver a sacarlo y guardarlo en su tubo original. Cerrar el tubo con el caldo e incubarlo 24-48 h a  35±2ºC.

  INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: Cualquier viaje del caldo rojo a negro indica presunta presencia de Salmonella. Confirmar estos presuntos positivos estriando en placas de Cromosalm Agar y XLD Agar (no incluidas en el kit).

STAPHYKIT-Screening-SWABBS- Staphylococcus aureus

Kit de detección de Staphylococcus aureus  en un solo paso en superficies y manipuladores, por el método de barrido

PRESENTACIÓN: KIT DE 20 TEST                CÓDIGO: KMT105P

–  20 hisopos en su tubo.

– 20 tubos líquidos de caldo color rojo del medio de enriquecimiento selectivo Mannitol Salt.Broth (TPL064).

MODO DE EMPLEO: Barrer la superficie a muestrear (ideal 10 x 10 cm2) con un hisopo previamente mojado con agua estéril, o mejor sumergido unos segundos en caldo LPT Neutralizing (Tubos TPL053S no incluidos en el kit). Si la superficie está seca, rascar con el escobillón, para arrastrar la suciedad con el algodón. Devolver el escobillón a su tubo, cerrar y llevar al laboratorio. Introducir el hisopo en uno de los tubos de caldo Mannitol incluidos en el kit, meter y sacar varias veces en el caldo y volver a sacarlo y guardarlo en su tubo original. Cerrar el tubo con el caldo e incubarlo 24-48 h a  35±2ºC.

  INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: Cualquier viraje del caldo rojo a amarillo o anaranjado indica presunta presencia de Staphylococcus aureus. Confirmar estos presuntos positivos estriando en placas de Cromokit X-Staph Agar (no incluidas en el kit).

swabs detección microorganismos superficies

El usuario es el único responsable de la destrucción de los microorganismos generados en el interior del kit durante su uso, de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Destruir por inmersión en lejía. Mantener fuera del alcance de los niños. No ingerir.

Si desea más información sobre nuestros productos rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

https://www.microkit.es/monograficos/6-Control-de-superficies-monograf–a.pdf

Así de fácil es usar estos kits:

https://youtu.be/gfGHksTSXCs