Detección y enumeración NMP del bastoncillo de la hinchazón tardía del queso (Cl. tyrobutyricum)
COMPOSICIÓN
- Triptona 15,0 g
- Extracto de levadura 5,0 g
- Extracto de carne 7,5 g
- Acetato sódico 5,0 g
- Hidrocloruro de cisteína 0,5 g
- Resazurina 2,5 mg
- Lactato sódico 3,0 g
- Agar-Agar 0,75g
(Fórmula por litro) pH final: 5,9 ± 0,3
PREPARACIÓN
Disolver 36 g de medio en 1 litro de agua destilada. Repartir en tubos o frascos con o sin parafina. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT150
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema
PREPARADO: Estéril, Rosa/Ambar
CONTROL DE CRECIMIENTO 1 semana a 37°C aproximadamente:
- Clostridium tyrobutyricum MKTA 25755, Tubos con gas, parafina separada del caldo.
- Clostridium perfringens MKTA 13124, Tubos con gas, parafina separada del caldo.
PRESENTACIÓN: TUBOS 9 ml A DOBLE CONCENTRACION Y PARAFINADOS (VER BUTYRIKIT EN KITS), MEDIO DESHIDRATADO.
NOTA: La hinchazón tardía del queso es un problema provocado por Clostridium tyrobutiricum, huésped común del suelo seco. Es suficiente una célula en 10 ml de leche para que el queso se estropee. Por ello deben inocularse 10 ml de leche en medio selectivo, como el presente, que basa su selectividad en el Lactato Sódico, Acetato Sódico y Clorhidrato de Cisteína. La resazurina permite detectar la oxigenación del medio, letal para el bastoncillo del queso, por un viraje a color rosado. La parafina ahorra el uso de jarras y atmósferas anaerobias y permite leer.
SIEMBRA E INTERPRETACION
Calentar el medio en tubo a 100 ºC durante 10 minutos o autoclavar de nuevo, sólo una vez, para desoxigenarlo (quedará amarillo, nunca rosa). Dejar enfriar a unos 75 ºC y sembrar 10 ml de muestra en el tubo de 9 ml con parafina. Así se destruyen las formas vegetativas y se activan las esporas. Voltear sin agitar, para mezclar sin oxigenar. Enfriar en agua helada manteniendo el tubo vertical. La parafina sólida taponará la superficie impidiendo que el medio vuelva a oxigenarse. Para enumeración, sembrar de acuerdo con la técnica del NMP. Incubar 7 días a 37 ºC aprox.. Son positivos los tubos con gas que separe la parafina del medio.
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