BACILLUS CEREUS AGAR Detección y Enumeración de Bacillus cereus (CENAN, ICMSF, ISO 7932:2004, ISO 21871:2006)

COMPOSICIÓN

• Hidrolizado de carne   1,00 g
• Peptona de caseina    10,00 g
• D-Mannitol                   10,00 g
• Cloruro sódico             10,00 g
• Rojo fenol                    25,0 mg
• Agar-agar                    15,00 g

(Fórmula por litro)pH final: 7,2 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 46 g de medio en 900 ml de agua bidestilada.Calentar hasta ebullición, agitando, para su total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es salmón. Enfriar a 50 ºC y añadir 10 ml de Polimixina B 10⁶UI (SMS009) (reconstituidas en 100 ml de agua estéril) y 50 ml de emulsión de Yema de Huevo (SBH010) o bien 50 ml de Yema de Huevo con Polimixina B (SAJ001), asépticamente. Mezclar y repartir en placas, sin recalentar.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT015

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Rosado

PREPARADO: Estéril, Asalmonado.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2: 24-48 h a 30-37 ºC, aplicando el método ISO 7932, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

Bacillus cereus MKTA 10876, Excelente, grandes colonias céreas, rosas, con halo blanco, el medio vira a fucsia. PR > 0,7, en concreto >82-113% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada.

E.coli MKTA 25922, Inhibición completa: Ni una sola colonia.

Bacillus subtillis MKTA 6633, crecen colonias amarillas, sin halo de precipitación.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Escaso, (colonias 2mm blancas, precipitado, medio amarillo).

Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Inhibido.   Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACION:

TUBOS PREPARADOS (BASE) + SUPLEMENTO, FRASCOS PREPARADOS (BASE) + SUPLEMENTO, MEDIO DESHIDRATADO BASE + SUPLEMENTOS.

NOTA: Bacillus cereus es responsable de toxiinfecciones alimentarias (carne, arroz, vegetales…) debidas a dos toxinas, una termoestable y emética, la otra termolábil y causa de diarreas. El mannitol es el carbohidrato fermentable, el rojo fenol es el indicador de pH y la polimixina B es el agente selectivo. No confundir con el caldo Mossel para enriquecimiento de Enterobacterias.

 

SIEMBRA

Sembrar 0,1 ml de la muestra y su serie de diluciones decimales, en superficie, repartiendo con el asa de Digralsky (VRR154, desechables VCL155). Incubar a 30 ºC aproximadamente, durante (6-)18-24 (-48) horas.

 

INTERPRETACIÓN

Las colonias grandes, rosas e irregulares, con aspecto de gota de cera, con halo blanco de lísis de la yema alrededor (a veces no!), son presuntivamente, de Bacillus cereus. Identificar con M- Ident Bacillus cereus (KMT009) o, al menos, por fermentación de glucosa en DTA (DMT183, RPL086, TPL092), con viraje a amarillo tras incubar 24 h a 30 °C; por MRVP (DMT082), incubado 24-48 h a 30 °C, y tras 1 h de añadir Voges Proskauer (SRH083), viraje a rosa; y por reducción del Nitrato (DMT186), incubado 24 h a 30 °C, y tras 15 minutos de añadir los Reactivos de Nitratos (SMN001), color rojo o bien sin color rojo tras 10 minutos de añadir polvo de Zinc. O bien por hemólisis positiva.

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https://www.microkit.es/fichas/BACILLUS-CEREUS-MOSSEL-AGAR.pdf

Ver tambien su versión cromogénica:

https://www.microkit.es/fichas/CROMOKIT-B-CEREUS-AGAR.pdf

https://www.microkit.es/monograficos/10-Bacillus-monograf–a.pdf