ASPARAGINE BROTH

Caldo APHA / CENAN para detección y enumeración presuntiva (NMP) de Pseudomonas aeruginosa en aguas embotelladas, refrescos y otras bebidas

DESCRIPCIÓN GENERAL

El ASPARAGINE BROTH es un medio de enriquecimiento selectivo y mineral utilizado para la detección y enumeración presuntiva (NMP) de Pseudomonas aeruginosa en aguas envasadas, bebidas no alcohólicas y otras matrices líquidas, conforme a los métodos recomendados por la APHA y el CENAN.

Su formulación está basada en la asparagina como única fuente de nitrógeno y glicerol como única fuente de carbono, lo que permite el desarrollo selectivo de bacterias no fermentadoras Gram negativas, siendo Pseudomonas aeruginosa la más característica.

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COMPOSICIÓN (por litro)

pH final: 7,0 ± 0,2

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PREPARACIÓN DEL MEDIO

1. Disolver 13,5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada que contenga 8 ml de glicerol.

2. Agitar hasta su completa disolución.

3. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.

4. El medio presenta un color paja-verdoso tras la esterilización.

Para preparar el caldo a doble concentración, disolver 27 g en 1 litro de agua bidestilada con 16 ml de glicerol.

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CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO

• Mantener el bote bien cerrado, en lugar seco, fresco y oscuro.

• Agitar antes de usar, para homogeneizar posibles gradientes de densidad.

• Uso exclusivo en laboratorio.

Código: DMT346

Aspecto del producto:

• Deshidratado: Polvo grueso, color crema.

• Preparado: Medio estéril, color paja-verdoso.

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CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

El control de calidad se realiza en nuestro laboratorio. Se recomienda repetirlo en el laboratorio del usuario siempre que cambien las condiciones (p. ej. más de 3 meses sin uso, tras desinfección del laboratorio o exposición a altas temperaturas).

Evaluación del rendimiento (24–48 h a 35–37 ºC):

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PRESENTACIÓN DISPONIBLE

• Medio deshidratado (para preparación estándar o doble concentración).

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PRINCIPIO Y APLICACIÓN

El ASPARAGINE BROTH permite el enriquecimiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa al ser un medio estrictamente mineral.

• La asparagina actúa como única fuente de nitrógeno.

• La glicerina provee la única fuente de carbono disponible.

• Los fosfatos estabilizan el pH y aportan la capacidad tampón.

• El sulfato magnésico provee iones esenciales para el metabolismo bacteriano.

Solo las bacterias Gram negativas no fermentadoras son capaces de crecer en estas condiciones, lo que permite una detección presuntiva altamente específica.

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MODO DE EMPLEO

1. Preparar tubos o frascos con el medio estéril.

2. Inocular series de 5 tubos por dilución (Método NMP):

   • 10 ml, 1 ml y 0,1 ml de muestra.

3. Incubar a 35 ºC durante 24–48 horas.

4. Interpretación presuntiva:

   • La aparición de turbidez (con o sin pigmentación fluorescente) indica posible presencia de Pseudomonas aeruginosa o de otros Gram negativos no fermentadores.

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CONFIRMACIÓN DE RESULTADOS

• Transferir una alícuota de cada tubo turbio a Caldo Acetamida (DMT003).

• Incubar y añadir Reactivo Nessler (SDA002):

  • Viraje a color amarillo-pardo → Confirmación positiva de Pseudomonas aeruginosa.

Este procedimiento corresponde al protocolo APHA/CENAN para confirmación bioquímica de Pseudomonas aeruginosa mediante hidrólisis de asparagina.

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INTERPRETACIÓN

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APLICACIONES PRINCIPALES

• Detección y enumeración NMP de Pseudomonas aeruginosa en:

  • Aguas embotelladas.

  • Refrescos y bebidas no alcohólicas.

  • Aguas de procesos industriales y farmacéuticos.

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INFORMACIÓN ADICIONAL

Monográfico de Pseudomonas aeruginosa
Ficha técnica relacionada: Cetrimide CN Agar

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