ALKALINE VIBRIO ENRICHMENT BROTH, ALKALINE PEPTONE WATER, caldo ISO/TS 21872-1:2007 para enriquecer muestras en busca de Vibrio cholerae
Caldo de enriquecimiento selectivo para Vibrio cholerae y otros Vibrio ligeramente halófilos (V.parahaemolyticus tras añadir otros 20 g/l ClNa s/ ISO 8914:1990). Para las especies más halófilas, añadir 20-50 g/l de ClNa o bien utilizar el Vibrio Hipersaline Broth (DMT137). Tambien muy útil en enriquecimiento de Aeromonas spp.
COMPOSICIÓN
- Peptona trípsica de caseina 10,0 g
- Cloruro sódico 10,0 g
- (Fórmula por litro)
- pH final: 8,5 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 20 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Un ajuste del pH suele ser necesario, a causa del uso de aguas de calidad no excelente.
Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos.
Para seguir la ISO/TS 21872-1:2007 usar a doble concentración.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR
DESHIDRATADO CODIGO: DMT151
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige PREPARADO: Estéril, Beige
CONTROL DE CRECIMIENTO a Tª ambiente (aproximadamente 21-28°C) ó bien aproximadamente a 37°C, durante 6-48 h:
Vibrio cholerae MKTA 14035, Correcto.
Vibrio parahaemolyticus MKTC 613, Correcto tras añadir 20-50 g/l de ClNa.
NOTA: Numerosas especies de Vibrio y de Aeromonas provocan enfermedades gastrointestinales y sistémicas en el hombre por ingesta de pescados y mariscos crudos o mal cocinados, ya que en el agua raramente alcanzan la dosis infectiva necesaria: V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.mimicus, V.fluvialis, V. hollisae, V.furnisii,, Aeromonas hidrophylla… Otros como V. alginolyticus, V.damsela, V.vulnificus, V.metscnikovii… podrían también estar implicados. Todos estos Vibrios son marinos costeros, excepto V.cholerae y V.mimicus que viven en aguas continentales. La mayor frecuencia de sus toxiinfecciones se produce en verano.
Vibrio cholerae incluye el virulento biotipo clásico (que no hemoliza los hematíes de carnero y cabra pero si los de hombre y conejo), y el menos virulento pero pandémico biotipo El Tor (que sí hemoliza los hematíes de carnero y cabra). Aunque en la actualidad la mayoría de casos de esta
enfermedad son leves, puede ser mortal por deshidratación de hasta 20 litros de agua al día en la persona contagiada. También provoca otitis e infecciones de heridas. Se difunde por el agua y alimentos contaminados con ella, sobre todo con las heces de los individuos enfermos. Pero el agua continental es su reservorio natural.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Medio de transporte y enriquecimiento para Vibrio cholerae y Aeromonas hidrophylla. La llamada reacción roja del cólera puede analizarse en este medio tras incubación a aproximadamente 37 ºC durante 24 horas, aunque dicha reacción da demasiados falsos positivos.
Previamente pre-enriquecer en TSB para eliminar el stress (este preenriquecimiento permite la detección un 50% más veces que sin él). Pasar para enriquecer en caldo Alkaline Vibrio Enrichment Broth. Sembrar este caldo, tras el enriquecimiento, en Agar TCBS. Confirmar en placa las colonias amarillas (Sacarosa positivas): A diferencia de las Enterobacterias, Vibrio cholerae es oxidasa positivo. A diferencia de los Coliformes, es lactosa negativo. A diferencia de otros Vibrio, no crece con >6% (60 g/l) de ClNa.
Ciertas cepas de Vibrio cholerae se detectan mejor incubando a aproximadamente 28°C, temperatura más acorde con su reservorio natural (peces).
El uso de este enriquecimiento en la investigación de Aeromonas spp. aumenta su frecuencia de detección hasta en un 40% de los casos.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
NOTA: Ante la desaparición del mercado internacional del Teepol, los Vibrio halófilos pueden enriquecerse en este mismo medio tras añadirle 30-50 g/l de ClNa, o mejor utilizar el caldo diferencial Vibrio Hipersaline (DMT137).
Si desea más información sobre nuestro ALKALINE VIBRIO ENRICHMENT BROTH, ALKALINE PEPTONE WATER o cualquier otro producto, no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.
https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf
Ver tambien Alkaline Saline Enrichment Broth para los Vibrios halófilos:
https://www.microkit.es/fichas/ALKALINE-SALINE-VIBRIO-ENRICHMENT-BROTH.pdf
https://www.microkit.es/monograficos/14-Vibrio-monograf–a.pdf