Aflatoxin B1 Test Strip

Aflatoxin B1 Test Strip

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Introducción

Las aflatoxinas son micotoxinas generadas en su mayor parte por el moho Aspergillus flavus cuando crece sobre maíz, otros cereales, frutos secos, especias y demás alimentos. La Aflatoxina B1 es la más común de estas micotoxinas y raramente hay otras aflatoxinas que no vayan acompañadas de la B1, por lo que detectar si ésta está por encima o por debajo de los niveles permitidos en cada país, se convierte en un screening negativo que ahorra mucho tiempo y trabajo a los laboratorios. Sólo las muestras positivas de este kit deben pasarse a HPLC, lo que ahorra ésta en la inmensa mayoría de muestras.

Aflatoxin B1 Test Strip es un immunocromatograma en tiras que detecta un nivel cualitativo de la presencia de aflatoxina B1 y se ha diseñado para emplear en granos, alimentos y materiales de uso alimentario (para buscar aflatoxina M1 en leche, solicite el kit KRBW003). La extracción es mucho más sencilla que en el método HPLC. El test completo se realiza en 15-20 minutos. Permite la realización de análisis in situ.

Límite de Detección: 5 μg/kg—20 μg/kg –50μg/kg (5-20-50 ppb

 Contenido del kit (Referencia MICROKIT: KRMY001, kits para 96 Test

  1. 96 Tiras para Aflatoxina B1 (12 tubos con 8 tiras cada tubo)
  2. Cubeta microtiter con 96 pocillos con reactive incluido contra Aflatoxina B1
  3. Solución diluyente para la muestra (2 viales por kit)
  4. NaOH 2 mol/L (1 vial por kit)

Materiales Necesarios no incluidos

  1. Balanza (sensibilidad: 0.1g) 2. Micropipeta (20µl-200µl, 100µl-1000µl)
  2. Tubos de Centrífuga (2ml, 50ml) 4. Metanol (AR)
  3. Agua desionizada o destilada 6. Vortex
  4. Centrifuga 8. Reloj avisador

Preparación de la Solución de Extracción de la muestra (80% methanol)

Mezclar 80 mL de metanol con 20mL de agua desionizada/destillada

Preparación/Extracción de la muestra (2 métodos según el nivel de detección que desee):

Método 1 (LOD: 5μg/kg-20μg/kg)

  1. Moler la muestra y pasarla a través de una pantalla de malla 20;
  2. Pesar 5,0 g de muestra molida en un tubo de centrífuga de 50 ml;
  3. Agregue 80% de solución de extracción de metanol al tubo (el volumen de adición de la solución de extracción se determina por los puntos de corte, consulte la tabla a continuación) y apriete la tapa
Línea de corte ( μg/kg) 5 10 20
Volumen de la solución de extracción (mL) 10 20 40

 

  1. Agite vigorosamente, mezcle o agite en vórtex durante 3 minutos;
  2. Centrifugue durante 5 minutos a 4,000 rpm. Si no dispone de centrífuga, puede dejar precipitar durante unas horas.
  3. Transfiera 100μL de la capa superior de extracto a un tubo nuevo y agregue 200μL de solución de dilución de muestra, mezcle bien incluido lo del fondo.

Nota: Para las muestras de DDGS, harina de germen de maíz, polvo de proteína de maíz y algunos productos de alimentación, ajuste el valor de pH del extracto, con solución de NaOH (2.0mol / l) a 7.0-8.0 antes de diluir.

Método 2 (LOD: 20μg/kg-50μg/kg)Moler la muestra y pasar a través de un pedregal de malla 20;

  1. Pesar 5,0 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml;
  2. Agregue 40 ml de solución de extracción de metanol al 80% al tubo y apriete la tapa;
  3. Agite vigorosamente, mezcle o agite en vórtex durante 3 minutos;
  4. Centrifugar durante 5 minutos a 4.000 rpm. Si no dispone de centrífuga, puede dejar precipitar durante unas horas.
  5. Transfiera 1 ml de la capa superior de extracto a un tubo nuevo y agregue 80% de solución de extracción de metanol al tubo (el volumen de adición de la solución de extracción se determina por los puntos de corte, consulte la tabla a continuación), mezcle incluso;
Línea de corte ( μg/kg) 20 30 40 50
Volumen de la solución de extracción (mL) 0 0.6 1.2 1.8

Transfiera 100μL de la capa superior de extracto a un tubo nuevo y agregue 200μL de solución de dilución de muestra, mezcle bien incluido lo del fondo.

Nota: Para las muestras de DDGS, harina de germen de maíz, proteína de maíz en polvo y algunos productos de alimentación, ajuste el valor de pH del extracto, con solución de NaOH (2.0mol / L) a 7.0-8.0 antes de diluir.

 Modo de empleo: (leer completamente antes de usar)

Todos los reactivos deben haber sido atemperados a Temperatura ambiente (20-25ºC) antes de su empleo

  1. Retire la tapa del tubo y tome la cantidad adecuada de tiras de prueba y micropocillos; coloque los micropocillos en un soporte de micropocillos e inmediatamente cierre el tubo.
  2. Usando una pipeta de un solo canal, agregue 150μL de diluyente de ensayo a cada micropocillo. Disuelva el conjugado de recubrimiento en el micropocillo pipeteando el contenido hacia arriba y hacia abajo de 5 a 6 veces.
  3. Mantenga durante 3 minutos a temperatura ambiente (20-25 ºC) y coloque una tira reactiva en un pocillo.
  4. Permita que la tira reactiva desarrolle color durante 8 minutos a temperatura ambiente (20-25 ºC).
  5. Interprete los resultados de la prueba inmediatamente dentro de 1 minuto.

Interpretación de Resultados

Siempre debe aparecer una línea de color en la sección superior de la tira reactiva para indicar que la tira reactiva está funcionando correctamente. Esta línea es la Línea de Control (C). Una línea en la sección inferior de la tira reactiva indica los resultados de la prueba. Esta línea es la línea de prueba o Test (T).

 Muestra Negativa (-): 2 lineas visibles. Esto indica que la muestra contiene menos aflatoxina B1 que el límite buscado. En cuanto aparecen dos líneas debe considerarse negative la muetsra.

Muestra Positiva (+): solo se puede ver la línea control (C). Esto indica que la muestra contiene aflatoxina B1 por encima (o igual) al límite buscado.

Resultados Inválidos:

Si no aparece la línea de Control el test es inválido y hay que repetir el análisis con otra tira y otro pocillo.

Precauciones

  1. Siga las instrucciones de los procedimientos de extracción y del test.
  2. No utilizar más allá de la fecha de vencimiento.
  3. No toque la membrana en las tiras.
  4. Levante el sellador de micropocillos suavemente, para evitar que el polvo se libere de los pozillos.
  5. No vuelva a utilizar las tiras de test o los micropocillos una vez empleados.
  6. Los micropocillos sin sellar deben usarse dentro de 1 hora.
  7. Evite la luz solar directa o dar soplidos, tos, estornudos… al realizar los test.
  8. No use agua del grifo, agua destilada o agua desionizada como control negativo.
  9. El metanol es inflamable. Se debe tener precaución en su uso y almacenamiento.
  10. Considere que todos los materiales, contenedores y dispositivos que están expuestos a la muestra están contaminados con toxina. Use guantes protectores y gafas de seguridad cuando use el kit.
  11. Los componentes en este kit de prueba han sido probados en control de calidad como una unidad de lote estándar. No mezcle componentes de diferentes números de lote.

Almacenamiento y vida útil

  1. Almacenamiento: la temperatura de almacenamiento para los kits es de 4-30 ºC. ¡NO CONGELAR!
  2. Vida útil: 12 meses desde fabricación.
  3. Fecha de producción, fecha de vencimiento y número de lote, consulte la etiqueta en el paquete.

Fabricado en exclusiva para España y para MICROKIT, desde Abril de 2018, bajo Norma ISO 9001. Origen: Canadá.

Si desea más información sobre nuestros Aflatoxin B1 Test Strip rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TODD HEWITT BROTH

TODD HEWITT BROTH

Detección de estreptococos hemolíticos (APHA)

COMPOSICIÓN

  • Infusión de corazón 10,0 g
  • Triptona                  20,0 g
  • Glucosa                     2,0 g
  • Cloruro sódico          2,0 g
  • Bicarbonato sódico   2,0 g
  • Fosfato disódico        0,4 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,8 ± 0,2

PREPARACIÓN

Disolver 36,4 g de medio en 1 litro de agua destilada.

Autoclavar a 115 ºC durante 20 minutos.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR

DESHIDRATADO CODIGO: DMT123

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C aproximadamente:

  • Streptococcus agalactiae (grupo B) MKTA 13813, Correcto.
  • Streptococcus pyogenes (grupo A) MKTA 19615, Correcto.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Ver tubos con Gentamicina y  Ac.Nalidíxico, selectivos para gr.B, en el medio Todd Hewitt Selective Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1 ml de muestra en un tubo con 9 ml de medio. Incubar a 35 ºC aproximadamente, durante 18-24 horas y dar como positivos los tubos turbios.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TODD HEWITT BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TODD HEWITT SELECTIVE BROTH

TODD HEWITT SELECTIVE BROTH

Enriquecimiento selectivo de estreptococos del grupo B para mejora de su detección en mujeres y animales en período de gestación.

COMPOSICIÓN

  • Infusión de corazón     10,0 g
  • Triptona                      20,0 g
  • Glucosa                         2,0 g
  • Cloruro sódico              2,0 g
  • Bicarbonato sódico       2,0 g
  • Fosfato disódico           0,4 g
  • Gentamicina              0,008 g
  • Ácido Nalidíxico     0,0015 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,8 ± 0,2

Streptococcus agalactiae

PREPARACIÓN

Disolver 36,4 g de medio base en 1 litro de agua destilada.

Autoclavar a 115 ºC durante 20 minutos.

Añadir asépticamente la gentamicina y el ácido nalidíxico, previamente esterilizados por filtración.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

MANTENGA LOS TUBOS BIEN CERRADOS EN SU CAJA, EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

TUBO PREPARADO CODIGO: BCT118. No existe versión deshidratada.

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige

PREPARADO: Estéril, Ambar

CONTROL DE CRECIMIENTO:

La respuesta típica tras 24 horas de incubación a 37°C aproximadamente y resiembra en agar sangre es:

  • Streptococcus agalactiae MKTA 13813: Crecimiento excelente
  • Escherichia coli MKTA 25922: Parcial o completamente inhibido
  • Staphylococcus aureus MKTA 25923: Parcial o completamente inhibido

PRESENTACIÓN: Tubos preparados con Gentamicina y  Ac.Nalidíxico, selectivos para gr.B (BCT118).

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Atemperar los tubos antes de su inoculación. Realizar ésta con escobillón a partir de la muestra o con asa de platino a partir de colonias crecidas en medios primarios de aislamiento. Incubar 24 horas a 37 ºC aproximadamente. La muestra debe ser procesada rápidamente o transportada en medio de conservación.

Subcultivar con escobillón o asa de platino sobre agar sangre para detectar colonias de estreptococos ß-hemolíticos y poder realizar posteriores estudios identificativos (látex, pigmentación naranja en medio New GBS Fast,…).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TODD HEWITT SELECTIVE BROTH rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

THIOGLICOLATO FLUIDO CON RESAZURINA (FTM)

THIOGLICOLATO FLUIDO CON RESAZURINA (FTM)

Control de esterilidad (USP) (UNE 13401)

COMPOSICIÓN

  • Triptona                  15,000 g
  • Glucosa                   5,500 g
  • Extracto de levadura 5,000 g
  • Cloruro sódico         2,500 g
  • L‑Cistina                  0,500 g
  • Tioglicolato sódico  0,500 g
  • Resazurina               0,001 g
  • Agar‑agar                0,750 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,1 ± 0,2

De izquierda a derecha: FTM sin inocular, transparente; con anaerobios, turbio; con aerobios, turbio y rojo.

 

 

 

PREPARACIÓN

Disolver 30 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta ebullición  (al contener agar-agar)  para su total  homogeneización. Repartir en tubos o frascos y autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es paja claro, con banda roja arriba tras agitar. Enfríe suavemente para que la gelificación del Agar-Agar no provoque aspectos grumosos u opalescentes que podrían confundirse con crecimientos microbianos.

PARA USO EXCLUSIVO EN EL LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT122

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, Beige    PREPARADO: Estéril, Paja opalescente, Fluido denso (las burbujas, al agitar, suben lentamente)

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2,  1-7 días a 37 ºC, aplicando el método ISO 7937, UNE EN 13401: 2000, 2ª Real Farmacopea Española y 4ª Farmacopea Europea, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado):

  • Clostridium perfringens MKTA 13124, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente.
  • Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente.
  • Streptococcus pyogenes MKTA 19615, Excelente.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia, por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS, FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Utilizado para el test de esterilidad bacteriana en material farmacéutico y para cultivar microorganismos anaerobios, aerobios y microaerófilos. El agar, presente en un 0,75%, permite un buen crecimiento de los anaerobios, al retardar la difusión del oxígeno en el medio y al permitir sólo una lenta liberación del medio de las sustancias reductoras producto de los microorganismos y del anhídrido carbónico.

El tioglicolato sódico, ejerce como agente reductor y elimina el oxígeno del medio, evitando la formación de peróxidos letales. Además neutraliza el efecto bacteriostático de los compuestos mercuriales que puedan estar presentes en las muestras. La resazurina es el indicador de óxido‑reducción en vez del azul de metileno, más tóxico, presente en la fórmula original de Brewer.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Desoxigenar el medio, si está rosado, calentando unos segundos a 98 ºC, enfriar e inocular la muestra con rigurosa asepsia. Incubar a 35 ºC aproximadamente, durante 7-14 días. Una turbidez mayor a la del frasco control o la presencia de colonias floculadas indica que la muestra no es estéril. Para seguimiento de la Norma UNE-EN 13401 de Cl.perfringens, se utiliza como paso previo a la confirmación de colonias procedentes de TSC Agar (DMT175+SMT252):  Incubar 5 colonias en FTM, 18-24 h a 35-37°C aproximadamente, en anaerobiosis. Confirmar inoculando 5 gotas en Caldo Lactose Sulfite (DMT140+VMT136, tubos TPL018).

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.         

Si desea más información sobre nuestro THIOGLICOLATO FLUIDO CON RESAZURINA (FTM) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

THIOGLICOLATO ALTERNATIVO)

THIOGLICOLATO ALTERNATIVO)

Control de esterilidad en productos turbios (USP)

COMPOSICIÓN

  • Triptona                  15,0 g
  • Glucosa                   5,5 g
  • Extracto de levadura 5,0 g
  • Cloruro sódico         2,5 g
  • L‑Cistina                  0,5 g
  • Tioglicolato sódico  0,5 g
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7,1 ± 0,2

PREPARACIÓN

 

 

 

 

 

Disolver 29 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar, agitando, hasta  su total  homogeneización. Repartir en tubos o frascos y autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es paja claro, completamente transparente y sin banda roja (al no contener resazurina). Si no se utiliza el mismo día de la preparación, volver a hervir momentos antes de usar para eliminar el oxígeno del interior del medio.

PARA USO EXCLUSIVO EN EL LABORATORIO.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT208

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo, Beige    PREPARADO: Estéril, Paja transparente.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2,  1-7 días a 37 ºC, aplicando el método Farmacopea, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado):

  • Clostridium perfringens MKTA 13124, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Streptococcus pyogenes MKTA 19615, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente: Tras 24 h a 37°C, turbidez de ligera a elevada.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia, por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, FRASCOS PREPARADOS.

 NOTA: Utilizado para detectar microorganismos anaerobios, aerobios y microaerófilos en el test de esterilidad bacteriana en material farmacéutico turbio o viscoso, en el mçétodo de filtración por membrana y también para lavado del material.

El tioglicolato sódico, ejerce como agente reductor y elimina el oxígeno del medio, evitando la formación de peróxidos letales. Además neutraliza el efecto bacteriostático de los compuestos mercuriales que puedan estar presentes en las muestras.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Desoxigenar el medio, si no está recién preparado, calentando unos segundos a 98 ºC, enfriar e inocular la muestra con rigurosa asepsia. Incubar a 30-35 ºC aproximadamente, hasta 7-14 días. La turbidez, la presencia de flóculos, de artefactos flotando en superficie o de sedimento en el fondo son  indicadores de crecimiento microbiano y por tanto, la muestra no es estéril.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura. 

Si desea más información sobre nuestro THIOGLICOLATO ALTERNATIVO rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16               

TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.)

TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.) Enriquecimiento de Salmonella (Pharmacopoea medio I)

COMPOSICIÓN

  • Carbonato cálcico        20.0 g
  • Tetrationato potásico   20.0 g
  • Peptona                       8.6 g
  • Cloruro sódico             6.4 g
  • Sales biliares                8.0 g
  • Verde Brillante            70 mg
  • (Fórmula por litro)
  • pH final: 7.0 ± 0,2.

Izquierda: Tetrationate TBG Broth estéril
Derecha: con Salmonella, aclaramiento del color.

PREPARACIÓN

Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Enfriar a unos 45 ºC. Distribuir en tubos o frascos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023). Para inhibir los Proteus añadir Novobiocina al 0,4% o bien bajar el pH a 6,5.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES, IRRITANTE.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR  LA  HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MUY HIGROSCÓPICO: MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT304

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Verdoso

PREPARADO: Estéril, Precipitado, verde.

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 37°C

aproximadamente:

  • Bacillus subtillis MKTA 6633, Inhibido.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.
  • E.coli MKTA 25922, Bueno, medio azul-verdoso.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Bueno, medio azul-verdoso.
  • Salmonella abony  MKTN 6017, Bueno, medio claro.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias (sin turbidez)

 

 

 

 

 

 

 

 

PRESENTACIÓN:  MEDIO DESHIDRATADO. Tubos preparados con Verde Brillante y solución Yodo-Iodurada. Frascos preparados con Verde Brillante, pero sin solución Yodo-Iodurada, que debe añadirla el usuario instantes antes del uso definitivo del medio (s/Pharmacopea).

 NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en medicamentos, aguas y alimentos. Se utiliza en paralelo a otros caldos de enriquecimiento, para evitar falsos negativos de ciertas cepas de Salmonella. El Carbonato cálcico actúa como neutralizante que absorbe los metabolitos tóxicos. Las sales biliares, el verde brillante y la temperatura de incubación lo hacen muy selectivo ante los Gram positivos (incluso los Clostridios) y muchos Gram negativos. Los microorganismos que tienen la enzima tetrationato-reductasa se multiplican de forma preferente en este medio.

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 35-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BRILLIANT GREEN BROTH (T.B.G.) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN (BASE)

 

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN (BASE)

Enriquecimiento de Salmonella (UNE 34-818:1985, UNE 34-554:1983)

COMPOSICIÓN

  • Triptona                  7.0 g
  • Tiosulfato sódico 40.7 g
  • Peptona de soja      2.3 g
  • Cloruro sódico        2.3 g
  • Carbonato cálcico   25.0 g
  • Sales biliares           4.75 g

(Fórmula por litro)

pH final: 7.0 ± 0,2.

 

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK Base, suplementado con Verde Brillante, y con Salmonella.

PREPARACIÓN

Disolver 82 g de medio en 1 litro de agua destilada. (41 gramos para menor selectividad, como Tetrationato clásico). Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Enfriar a unos 45 ºC, añadir 9.5 ml de solución de verde brillante al 0.1% (VCC4634). Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR

SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT086

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

  • Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO. Tubos preparados con Verde Brillante y solución Yodo-Iodurada. Frascos preparados con Verde Brillante, pero sin solución Yodo-Iodurada, que debe añadirla el usuario instantes antes del uso definitivo del medio (s/Pharmacopea).

 NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en versiones antiguas de la Norma ISO 6579, junto al Selenito Cistina Broth.

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que el caldo tetratrionato a mitad de concentración para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado: SS Broth.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas.Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE (BASE)

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE (BASE)

Enriquecimiento de Salmonella (ISO 6579)

COMPOSICIÓN

  • Extracto de carne            4,3
  • Dig.enzimático caseína    8,6
  • Cloruro sódico                2,6
  • Carbonato cálcico           38,7
  • Tiosulfato sódico-5-h      47,8
  • Bilis de buey                   4,78
  • Verde Brillante          0,0096

(Fórmula en gramos por litro)

pH final: 8.0 ± 0,2.

 

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK con Verde Brillante, y con Salmonella.

PREPARACIÓN
 

Disolver 106,8 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

 

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR

SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT177

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

  • Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.
  • Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.
  • Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

 

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

 

NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en  la Norma ISO 6579 (en versiones antiguas junto al Selenito Cistina Broth).

 

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que los otros caldos Tetratrionato (DMT086 y DMT304) para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado por MICROKIT por sus mayores sensuibilidad y especificidad: SS Broth.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

TCBS VIBRIO AGAR

TCBS VIBRIO AGAR

Selección de Vibrio cholerae (ICMSF, APHA, FDA) y V.parahaemolyticus (ISO 8914:1990 modificada). ISO/TS 21872-1:2007.

COMPOSICIÓN

  • Triptona                    10,00 g
  • Extracto de levadura   5,00 g
  • Tiosulfato sódico      10,00 g
  • Citrato sódico           10,00 g
  • Cloruro sódico          10,00 g
  • Bilis                            8,00 g
  • Sacarosa                   20,00 g
  • Citrato férrico             1,00 g
  • Azul de timol              0,04 g
  • Azul de bromotimol    0,04 g
  • Agar‑agar                  14,00 g

(Fórmula por litro)

pH final: 8,6 ± 0,2

Vibrio cholerae (colonias amarillas)
Vibrio parahaemolyticus (colonias azul-verdosas)

                       

 

 

 

PRECAUCIÓN:CONTIENE SALES BILIARES.

PREPARACIÓN   

Disolver 88 g de medio en 1 litro de agua destilada. Para vibrios hiperhalófitos ( V. parahaemolyticus, …) puede requerir la adición de otros 20-50 g/l de Agua de Mar (DMT149) o de Cl Na (BCB101).

Calentar agitando hasta ebullición para su disolución. Hervir 1 minuto y enfriar o bien autoclavar a 116 ºC durante 5 minutos, aunque resulta más recomendable el primer método. Añadiendo después TTC (SDA018) cuando el medio se ha enfriado a 45°C, el TCBS es más diferencial.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO

DESHIDRATADO CODIGO: DMT119

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema-verdoso  PREPARADO: Estéril, Verde

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a temperatura ambiente (21-28°C aproximadamente):

  • Escherichia coli MKTA 25922, Escaso, colonia translúcida.
  • Enterococcus faecalis MKTA 29212, Escaso, Colonias muy pequeñas y amarillas.
  • Vibrio cholerae MKTA 14035, Bueno, Colonias amarillas.
  • Vibrio parahaemolyticus MKTC 613, Bueno con 30-60 g/l de ClNa, Colonias azules.

PRESENTACIÓN: FRASCOS PREPARADOS, MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS INCLINADOS CON Y SIN 30 g/l ClNa.

Medio selectivo indicado para el aislamiento y el recuento de Vibrio. (ICMSF, FDA, APHA). Por su pH alcalino y su contenido en sales, inhibe el crecimiento de la mayor parte de microorganismos, excepto los halófilos.

 NOTAS: -Numerosas especies de Vibrio provocan enfermedades gastrointestinales y sistémicas en el hombre por ingesta de pescados y mariscos crudos o mal cocinados, ya que en el agua raramente alcanzan la dosis infectiva necesaria: V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.mimicus, V.fluvialis, V. hollisae, V.furnisii, Otros como V. alginolyticus, V.damsela, V.vulnificus, V.metscnikovii… podrían también estar implicados. Todos ellos son marinos costeros, excepto V.cholerae y V.mimicus que viven en aguas continentales. La mayor frecuencia de sus toxiinfecciones se produce en verano.

-La mayoría de capturas de pescado (hasta el 96%) y marisco (100% de cocinas) costeros en verano contienen V.parahaemolyticus, lo cual no ocurre el resto del año. El agua del grifo y el vinagre destruyen gran parte de las células presentes en el pescado, por ello es conveniente lavarlos bien bajo el grifo y acidificarlo por debajo de pH 4,5. El cocinado destruye sus células, desde 15 minutos a 60°C. La refrigeración frena su crecimiento y la congelación incluso lo hace decrecer. Se deben prevenir las contaminaciones cruzadas de pescado cocinado con pescado crudo, ya que en sólo 10 minutos duplica su población y en unas horas pueden desarrollarse millones. Se concentra en la piel, agallas e intestino de los pescados. También provoca otitis e infecciones de heridas. Si no se detecta en las matrices indicadas y en verano, a menudo no es por su ausencia sino porque no se pre-enriquece adecuadamente en TSB, de modo que los microorganismos estresados no se manifiestan ni en el caldo de enriquecimiento Alkaline Saline ni en el agar de aislamiento selectivo TCBS.

-Vibrio cholerae incluye el virulento biotipo clásico (que no hemoliza los hematíes de carnero y cabra pero si los de hombre y conejo), y el menos virulento pero pandémico biotipo El Tor (que sí hemoliza los hematíes de carnero y cabra). Aunque en la actualidad la mayoría de casos de esta enfermedad son  leves, puede ser mortal por deshidratación de hasta 20 litros de agua al día en la persona contagiada. También provoca otitis e infecciones de heridas. Se difunde por el agua y alimentos contaminados con ella, sobre todo con las heces de los individuos enfermos. Pero el agua continental es su reservorio natural.

-El TCBS Agar está diseñado para detectar la mayoría de especies de Vibrio, pero no para los otros géneros de la familia Vibrionáceas: Aeromonas spp., Plesiomonas spp. y Photobacterium spp.

 SIEMBRA

Sembrar en superficie las placas, en estria, a partir del enriquecimiento en Alkaline Vibrio Broth (para V.cholerae) o en Vibrio Hipersaline Broth-Alkaline Saline Broth (para V.parahaemolyticus y otras especies halófilas), previamente preenriquecidos en TSB para eliminar el stress (este preenriquecimiento permite la detección un 50% más veces que sin él). Incubar de 18 a 24 horas a 28-35 ºC.

INTERPRETACIÓN

Vibrio cholerae tipo El Tor forma colonias amarillas por fermentación de la sacarosa (naranjas si se añadió TTC) con viraje del medio a amarillo. Toda prueba posterior debe realizarse desde colonias repicadas en Nutrient Agar-Vibrio DMT126 o de lo contrario se obtendrán falsos negativos. Para evitar falsos positivos, recordar que a diferencia de las Enterobacterias, Vibrio cholerae es oxidasa positivo, a diferencia de los Coliformes, es lactosa negativo (aunque indol +) y a diferencia de otros Vibrio, no crece con >6% (60 g/l) de ClNa, pudiendo crecer en absoluta ausencia de ClNa. Ciertas cepas de Vibrio cholerae se detectan mejor incubando a aproximadamente 28°C, temperatura más acorde con su reservorio natural (peces). Vibrio parahaemolyticus no fermenta la sacarosa (excepto cepas especiales, que crecen en TCBS amarillas con centro verde) y crece con colonias verde‑azuladas sin virar el medio, incluso añadiendo TTC. Es oxidasa +, Lactosa-, Indol +  y crece hasta con 80 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 30 g/l.  Vibrio alginolyticus fermenta la sacarosa y crece en TCBS con grandes colonias amarillas (naranjas con TTC), virando el medio a amarillo. Es oxidasa +, Lactosa-  y crece hasta con 100 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia y teniendo su óptimo crecimiento con 40 g/l. Se distingue de V.parahaemolyticus porque en TSAT crece con colonias blancas y pequeñas, ocasionalmente con centro rojo, mientras éste crece con grandes colonias totalmente rojas. Vibrio vulnificus no fermenta la sacarosa y crece con colonias verde-azuladas en TCBS. Es oxidasa +, Lactosa +  y crece hasta con 60 g/l de ClNa, no creciendo sin su presencia. También se distingue de V.cholerae por ser a menudo Lactosa +.

Vibrio cholerae

 

 

 

 

 

V.alginolyticus

 

 

 

 

V.cholerae (sin y con TTC)