LACTOSE SULFITE BROTH BASE, caldo para la confirmación bioquímica de Clostridium perfringens (ISO y Farmacopea)
PHARMACOPEA MEDIO R
Confirmación bioquímica de Clostridium perfringens (ISO 7937:1997, UNE- EN 13401:2000, ISO/CD 6461-2:2002).
COMPOSICIÓN
Digestato enzimático de caseína 5.00 g
Extracto de Levadura 2.50 g
Cloruro Sódico 2.50 g
Lactosa 10.00 g
L-Cisteína 0.30 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7.1 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 20,3 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Repartir en tubos con campana. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Añadir 0,75 g de Metabisulfito de sodio (SDA006) y 0,63 g de Citrato-ferro-amónico (SDA007), o bien dos viales estériles de suplemento de ambos componentes (VMT136). Para elaborar menor cantidad de medio, se pueden realizar alícuotas de un vial disuelto en agua estéril (los precipitados negros son normales, agitar inmediatamente para repartir lo más homogéneo posible), pero éstas no se deben autoclavar, todo lo más calentar un instante a 87°C para que pierdan su oxigenación tras su almacenamiento e inmediatamente antes de añadir al medio.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT140
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Color marfil
PREPARADO: Paja-ámbar
CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 44-46°C aproximadamente, sin aerobiosis:
- Cl. perfringens MKTA 13124, perfecto, SH2 + (ennegrecimiento), con producción de gas
- Cl. sporogenes MKTA 11437, perfecto, SH2 + (ennegrecimiento), sin producción de gas
- Staphylococcus aureus MKTA 6538P, inhibido
- Bacillus subtilis MKTA 6633, Inhibido
PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS PREPARADOS CON CAMPANA DURHAM.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular, en cada tubo, 5 gotas del cultivo crecido en FTM (DMT122) con una pipeta estéril. Incubar a 46 ºC aproximadamente, durante 18-24 h. La aparición de precipitado negro y la formación de gas que queda retenido en la campana Durham, es prueba positiva. Las bacterias que formen colonias características en TSC Agar (DMT175, TPL137) o TSN Agar (DMT175) y que den resultado positivo en este medio se consideran Clostridium perfringens.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura
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