KITS DIDÁCTICOS ENSEÑANZA: MICROCOSMOS CROMOGÉNICO

kITS DIDÁCTICOS ENSEÑANZA: MICROCOSMOS CROMOGÉNICO

¿Sabes qué es un medio cromogénico?
Es un medio enzimático. Son los medios del Siglo XXI, que son los que vas a emplear en tu futuro trabajo en los laboratorios de la industria. A diferencia de los medios clásicos de los Siglos XIX y XX, que se basaban en la
asimilación/fermentación bioquímica de fuentes de carbono o nitrógeno, con un indicador del cambio de pH producido si hay fermentación (cambio de color
del medio alrededor de las colonias); en cambio los medios cromogénicos son enzimáticos, de modo que sólo el enzima del microorganismo buscado reacciona con el sustrato específico del medio y crece con colonias de un color determinado, mientras que el medio no vira de color ni enmascara así otras colonias. Al ser enzimática, la reacción es más específica, es decir, se obtienen muy pocos falsos positivos a diferencia de lo que ocurre en los medios clásicos, que nos obligaban a perder mucho tiempo después de crecer las colonias, con confirmaciones y galerías. Gracias al medio cromogénico MugPlus CCA, inventado por MICROKIT en 1995 y que ya es el medio oficial para buscar E.coli y demás coliformes en aguas desde la Directiva UE de 2003, cambió la definición bioquímica de coliformes “bacterias entéricas que fermentan la
lactosa con producción de gas” por esta nueva definición enzimática “bacterias
beta-galactosidasa positivas”.

Prueba tu primer medio cromogénico dibujando en la placa un paisaje. Para ello debes saber que en este medio, E.coli crece con colonias azules (hay cepas turquesa, otras añil), los demás coliformes (ej: Klebsiella oxytoca) con colonias rojas (las hay rosa tenue, otras fucsia), otras bacterias pueden crecer, pero lo hacen con colonias color crema, como Pseudomonas aeruginosa, o con colonias verdes, como Shigella flexneri, con lo cual no perdemos el
tiempo con colonias no sospechosas, como nos sucedía con los medios clásicos.
Los microbios incluidos en este kit son de riesgo 2, es decir, no son inocuos, pero existe cura para ellos si accidentalmente los tragamos o los inoculamos en una herida, los ojos…
El kit para 20 alumnos consta de 20 tubos MugPlus CCA (si hay más de 20 alumnos, algunos habrán de hacer la práctica en parejas), 20 placas Petri vacías, 4 tubos BHI Broth de 9 mL, 1 lentícula de máxima concentración de cada una de las 4 cepas indicadas y 80 asas calibradas. Guardar todo FUERA DE LA NEVERA pero las 4 cepas EN EL CONGELADOR. Caducidad aprox: 1 año. Referencia KJM002

Modo de empleo:

  1. El profesor, 2 dias antes de realizar la práctica, debe abrir el tubito eppendorf y dejar caer la lentícula de E.coli en un tubo de BHI cuidando que la bolita grande, la de color, no se quede en las paredes del tubo, sino que caiga al fondo y asi se disuelva en un rato (las bolitas incoloras pueden caer sin problema, es sólo silicagel inerte). Identificar este tubo como “E.coli”, o “A” de azul. Meter la lentícula de Klebsiella oxytoca en otro tubo de BHI e identificarlo como “K.ox”, o “R” de rojo, verificando que cae al fondo. Meter la lentícula de Pseudomonas aeruginosa en otro tubo de BHI e identificarlo como “Ps” o “C” de crema. Y meter la lentícula de Shigella flexneri en el otro tubo de BHI e identificarlo como “Sh” o “V” de verde. Incubar los 4 tubos a 37ºC durante esos 2 días. Los tubos deberán estar muy turbios el día del inicio de la práctica; si no, algo ha fallado y debe pedir una nueva cepa de
    los que no hayan crecido. El profesor, 2-24 h antes de la práctica, debe fundir los tubos en agua hirviendo, enfriarlos a unos 50ºC y verter cada uno en una placa, tapándolas hasta que solidifiquen, con cuidado de no quemarse.
  2. Los alumnos, el día de la práctica, sumergirán cada una de sus 4 asas en el tubo adecuado para crear su collage de colores sembrando en estría sobre la placa del MugPlus CCA. ¡No mezclar las asas! Poner los tubos bien separados en gradilla para evitar accidentes y salpicones. Crea tu obra de arte bacteriana gracias al MugPlus CCA.
  3. Tapar las placas, darles la vuelta e incubarlas 18-48 h a 37ºC.
  4. Compara los resultados con los de los compañeros. La placa que el profesor decida que ha quedado más espectacular, puede merecer premio. Hacedle una foto, enviadla a microkit@microkit.es y participareis en el sorteo a final del curso, de un regalo sorpresa. Preguntad a este email en Junio qué Instituto ha sido el ganador del año.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Kit y práctica diseñados por MICROKIT desde 1989. Rediseñado en nuestro 30 aniversario, en Abril de 2019.

 

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