Histamina Rapid Test Strip

Histamina Rapid Test Strip

Introducción

El análisis de la histamina en pescado fresco es una estrategia de control util en el sistema APPCC para que los productores de alimentos a base de pescado puedan evitar la formación de la escombrotoxina. La histamina es un producto de la descarboxilación de la histidina causada por el metabolismo de algunas bacterias en el pescado. La cantidad de histamina producida depende de la cepa microbiana, de la temperatura y del tiempo de exposición y puede alcanzar valores superiores a 1.000 ppm.

La ingesta de pescado con altos niveles de histamina se ha relacionado con intoxicaciones escombroideas, un serio problema de salud pública. Por encima de 200 ppm de histamina se suele producir este cuadro, el problema es que estos pescados pueden encontrarse aleatoriamente dispersos dentro del mismo lote. En pescados de gran tamaño puede incluso encontrarse concentrada en una zona y dispersa en el resto. Por ello debe hacerse una buena homogeneización del lote.

Un pescado de buena calidad contiene menos de 10 ppm de histamina, mientras que 30 ppm indican un deterioro importante y 50 ppm son evidencia de putrefacción. El nivel de acción respecto a defectos (DAL) para el cual se toman las medidas reglamentarias para la histamina es de 50 ppm.

Histamina Rapid Test es un inmunoensayo competitivo con partículas de oro en nitrocelulosa, para el análisis cuantitativo de histamina en peces escómbridos (atún, caballa, sardina) y en harina de pescado.

Tras una extracción en agua, la histamina de la muestra se deriva a N-acilhistamina de forma cuantitativa. La muestra tratada es diluida y se analiza con una tira reactiva. La cantidad de anticuerpo marcado con partículas de oro que se une a la histamina, inmovilizada en la nitrocelulosa, es inversamente proporcional a la concentración de histamina en la muestra.

Límite de Detección: 50 ppm

Contenido del kit (Referencia MICROKIT: HIST24, kits para 24 Test

  1. 24 Tiras para Histamina 2. 24 reactivos para acilación (tapón azul)
  2. 24 tubos con tampón de Acilación (tapón blanco) 4. 24 tubos con tampón de lavado (tapón rojo)

Almacenamiento y vida útil

  1. Conservar a temperatura ambiente (15-30ºC). ¡NO CONGELAR!
  2. Vida útil: 24 meses desde fabricación, verificar la fecha de caducidad real indicada en la etiqueta.
  3. Número de lote, consulte la etiqueta
  4. Señales de deterioro: rotura del bote contenedor de las tiras, presencia de líneas o manchas en la membrana antes de utilizar..

Precauciones

-Evitar el contacto de material biológico con la piel y mucosas. No pipetear con la boca.

-No comer, beber, fumar, almacenar o preparar comida, o aplicar cosméticos en el área de trabajo.

-No usar componentes caducados ni mezclar componentes de diferentes lotes

Tratamiento de las muestras

Protocolo basado en el método Oficial AOAC 937.07. Muestree según la reglamentación nacional.

1.Pescado fresco ó congelado

Descongelar las muestras en un refrigerador o en agua fría. No descongelar en agua caliente. Desechar el drenaje. Una vez descongeladas, mantener las muestras a 2-8ºC hasta el análisis.

Pescado entero: Limpiar, descamar y eviscerar. Si son de pequeño tamaño, usar 5-10 pescados. Si son grandes, cortar tres rodajas transversales de 2,5 cm de ancho: una tras las aletas pectorales, una entre la rodaja anterior y la cloaca y otra tras la cloaca. Eliminar las espinas y triturar para homogeneizar.

Filete de pescado: Emplear la pieza entera, triturando para homogeneizar.

2.Pescado y otros productos del mar en conserva

Triturar todo el contenido (sólido y líquido) de la lata o bote en una licuadora para homogeneizar.

3.Productos del mar conservados en aceite, salsa, salmuera o caldo

Drenar 2 minutos con un tamiz Nº 8 o secar el líquido con papel absorbente. Triturar el sólido en una licuadora para homogeneizar.

4.Harina de pescado

Mezclar la muestra para homogeneizar.

Procedimiento

1-Atemperar todos los componentes del kit a temperatura ambiente y trabajar a dicha temperatura.

2-Pesar 10 g de la muestra tratada y añadir 240 ml de agua destilada. Homegeneizar 1-2 minutos en una licuadora o trituradora, o bien agitar durante 10 minutos.

3-Filtrar el homogenado con papel de filtro plegado. Si se forma una capa grasa, eliminarla por succión.

4-Pipetear 100 µL del homogenado filtrado dentro del tubo Tampón de Acilación.

5-Cerrar con el tapón azul (contiene el reactivo de Acilación) y agitar vigorosamente.

6-Dejar incubando el tubo a temperatura ambiente durante 5 minutos.

7-Pipetear 100 µL de la muestra acilada en un tubo de tampón de lavado (tapón rojo), cerrar y mezclar suavemente.

8-Colocar una tira (con la flecha hacia abajo) en el tubo con tampón de lavado.

9-Dejar actuar 5 minutos y sacar la tira del tubo.

10-Leer el resultado a simple vista antes de que pasen otros 5 minutos.

Lectura de resultados

Examinar la presencia de bandas coloreadas:
Resultado negativo: La línea test (abajo) es más intensa que la línea control (arriba)

Resultado positivo: La línea test (abajo) es igual o menos intensa que la línea control (arriba)

Resultado inválido: La línea de control (arriba) no es visible (sea o no visible la línea test de abajo), señal de que la muestra no ha migrado adecuadamente: repetir con una nueva tira.

Validación

Este kit ha sido validado para atún (enlatado, aleta amarillo fresco/congelado), mahí-mahí (fresco/congelado), sardinas (enlatadas en aceite) y harina de pescado, lo cual no descarta su uso en otros pescados y presentaciones.

Control de calidad

El lote de este kit ha sido controlado por el fabricante, resultando negativo para < 50 ppm y positivo para >/=50 ppm

Si desea más información sobre nuestro Histamina Rapid Test Strip rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

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