EUGON LT100 BROTH

EUGON LT100 BROTH es el caldo ISO para neutralización y enriquecimiento en cosmética, tan solo mejorado por LPT Neutralizing broth

Caldo para suspensión inicial y enriquecimiento en muestras con propiedades antimicrobianas, según las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética: NF T75-611 (Poder inhibitorio intrínseco), ISO 21149 (recuento de aerobios), ISO 16212 (recuento de hongos), ISO18415 (detección de microorganismos), ISO22718 (Staphylococcus aureus), ISO21150 (E.coli), ISO22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 18416 (Candida albicans)

EUGON BROTH

COMPOSICIÓN

  • Triptona                        15,0 g
  • Peptona de soja             5,0 g
  • L-Cystina                       0,7 g
  • Cloruro Sódico             4,0 g
  • Sulfito sódico                0,2 g
  • Glucosa                          5,5 g
  • Lecitina de huevo          1,0 g
  • Octoxynol 9                  1,0 g

(Fórmula en g/l)         pH: 7,0 ± 0,2

Silicite fórmula actual (Reach) en microkit@microkit.es

 

 PREPARACIÓN

Disolver 31,4 g en 1 litro de agua bidestilada que contenga 5 ml de Polisorbato-Tween 80 atemperado, calentando en agitación hasta ebullición al menos 30 minutos hasta obtener una dispersión homogénea. Autoclavar 15 minutos a 121 ºC. No sobrecalentar.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.       AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. DESHIDRATADO CODIGO: DMT204

 CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema

PREPARADO: Estéril, Ámbar, con fondo precipitado.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO s/ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 35 ºC, aplicando el método indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

  • Escherichia coli MKTA 25922, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
  • Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
  • Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en TSA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.
  • Candida albicans MKTA 10231, Excelente: Tras 25 minutos a 25°C, resiembra en SDA y obtención de >50-150% de colonias respecto al número de ufc inoculadas. Tras 24-48h, turbidez de ligera a elevada.

PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO Y PREPARADO: tubos 9 ml, frascos 90 ml y frascotes 225 ml.

 SIEMBRA E INTERPRETACIÓN

 

Incubar la suspensión inicial preparada a razón de 1 g de muestra por 9 g de caldo, a 35°C ± 2,5 °C, durante al menos 20 horas y como máximo 72 horas.

 

Según las diferentes Normas ISO de microbiología cosmética, transferir 0,1-0,5 ml a la superficie de una placa que contenga 15-20 ml de:

 

  1. TSA o Eugon LT100 Neutralizing Agar, para obtener aerobios cuando son esperables a una concentración muy baja y no es necesario contarlos. Esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 48-72 horas. Observar si hay aparición de cualquier colonia e identificarla.
  2. MacConkey Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia e identificarla por resiembra en EMB Levine Agar
  3. Cetrimide Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia e identificarla, mediante la prueba de la citocromooxidasa y por resiembra en King A Agar (P).
  4. -Baird Parker Agar (atención, medio invalidado mediante Seilaparfum para microbiología cosmética, usar el que dan como alternativo en su apéndice, Mannitol Salt Agar), esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia sospechosa e identificarla.
  5. Sabouraud Caf.Agar, esperar que se absorba e incubar invertida a 35°C ± 2,5 °C, durante 24-48 horas. Observar si hay aparición de alguna colonia sospechosa e identificarla.

 

El recuento de hongos y de aerobios se hace, según estas Normas ISO, a partir de otro caldo, el Neutralizing Diluent SCDLP20 (ref. MICROKIT DMT203).

 

NOTA 1: Como observarán los clientes habituales de MICROKIT, estas Normas ISO son un paso atrás en la eficiencia de la microbiología de cosméticos y cometen graves errores metodológicos de todo tipo (siembras en superficie que han de ser en masa, medios inválidos y obsoletos, tiempos de incubación inadecuados…) que quedan solventados siguiendo el protocolo MICROKIT y las instrucciones de sus medios (LPT Neutralizing Broth, LPT Neutralizing Agar, Sabouraud Caf.Agar, MugPlusCfs.Agar, Cetrimide Agar, Mannitol Salt Agar, Biggy Agar, o bien el conjunto de medios preparados COSMETIKIT®).

 

NOTA 2: Dados los resultados de los intercomparativos Seilaparfum de microbiología cosmética de los ultimos años, seguiremos recomendando nuestro LPT Neutralizing Broth (DMT217, RPL054, TPL053S), que tan inmejorables resultados proporciona, aunque nos veamos obligados a fabricar también este medio Eugon LT100 Neutralizing Broth con motivo de las nuevas Normas ISO de microbiología cosmética y la probable ortodoxia que éstas generarán, aunque ya hemos podido comprobar que los primeros usuarios de Seilaparfum con este medio, obtienen también calificaciones excelentes al usarlo junto al resto del protocolo MICROKIT.

Si desea más información sobre nuestro MEDIO EUGON LT 100 BRTH, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

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