Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

M-IDENT®-Escherichia coli

M-IDENT®-Escherichia coli  es un Kit de confirmación de Escherichia coli en aguas, alimentos y cosméticos s/Normas ISO/CD 6461-2:2002 e ISO 16649-2:2001.

MODO DE EMPLEO del M-IDENT®-Escherichia coli E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular una porción de la colonia sospechosa pura, procedente, de Tergitol Chapman TTC (o del medio que sea), en estría en el Agar TBX. Incubar 24 h a 36+2ºC, en condiciones aerobias. Observar el crecimiento de colonias caracterísitcas, verde-azuladas.

EColi-1Al mismo tiempo que se inocula en el Agar TBX, inocular por dilución en el Agua de Triptona con triptófano. Incubar 24 h a 44,5°C (si se incuba a 35-37°C, se pueden obtener falsos positivos de coliformes-no E.coli para la prueba del indol). Añadir 0,5 ml de Reactivo de Kovacs. Observar la inmediata aparición de un halo rosado en superficie, prueba positiva de Indol.

Escherichia coli, según Normas ISO/CD 6461-2:2002 e ISO 16649-2:2001, es toda colonia amarilla o anaranjada procedente de Tergitol Chapman TTC Agar, que crece en TBX Agar con colonias azules-verdosas y/o que resulta indol positivo en Agua de Triptona con Triptófano a 44,5°C.

EColi-2M-IDENT®-Escherichia coli  ES PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO

Si desea  más información sobre nuestro M-IDENT®-Escherichia coli no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.eso por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.

MICROSTICK-SALMONELLA

El MICROSTICK-SALMONELLA es un test rápido de Inmunocromatografía para la detección cualitativa de Salmonella spp. en muestras de alimentos.

Los caldos de pre-enriquecimiento revitalizador y post-enriquecimiento selectivo, basados en los de la Norma ISO 6579 pero optimizados para el Stick, mejoran extraordinariamente el rendimiento de dicha norma. El MICROSTICK-SALMONELLA es un inmunoensayo cualitativo para la detección de Salmonella en muestras de alimentos. La membrana está pre-revestida con anticuerpos, en la región de banda del test, para reconocer el antígeno de Salmonella spp. Durante la prueba, la muestra puede reaccionar con las partículas rojas de látex que están recubiertas con anticuerpos anti-salmonella pre-desecados. La mezcla resultante, empuja hacia arriba la membrana por acción capilar. Como la muestra fluye a través de la membrana, el aglutinado de partículas rojas migra. En el caso de un resultado positivo, los anticuerpos específicos presentes en la membrana capturarán el aglutinado de partículas rojas, formando una banda roja. La mezcla sigue avanzando a través de la membrana con el anticuerpo inmovilizado que está en la región de banda de control. En la línea de control siempre aparece una banda de color verde, lo cual verifica que se ha añadido el volumen suficiente y que se obtuvo un flujo adecuado del caldo de post-enriquecimiento inoculado, además de servir como control interno de los reactivos.

Queda validado MICROSTICK-SALMONELLA en alimentos por su inmejorable sensibilidad (100%, no hay falsos negativos para Salmonella), por su correcta especificidad (90%, solo un 10% de falsos positivos) y por su inmejorable límite de detección (demostrado para 10 ufc/25 g, lo cual no significa que no pueda llegar a 1 ufc/25g, el problema es que es estadísticamente imposible de evaluar a causa de la incertidumbre microbiológica).

Uso exclusivo en laboratorio cualitativa de Salmonella spp. en muestras de alimentos.

MicrostickSalmonellaSi desea más información sobre nuestro MICROSTICK-SALMONELLA, no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.eso por teléfono en el nº 91-897 46 16.

 

 

 

 

 

M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX

Nuestro producto M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX  es un látex para detección y confirmación de Salmonella en caldo de enriquecimiento.

El género Salmonella contiene cerca de 2.400 serotipos, que causan gastroenteritis agudas frecuentemente asociadas a intoxicaciones alimentarias.
Gracias a su elevado valor predictivo de resultados negativos, M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX es ideal para screening de muestras en la industria alimentaria. El kit detecta la mayoría de los más comunes serotipos de Salmonella, incluidas S. enteritidis y S. typhimurium. Aunque reacciona preferentemente con los antígenos flagelares, también detecta la mayoría de cepas inmóviles de Salmonella S. pullorum y S. gallinarum. No precisa aparataje alguno, y el procedimiento es muy simple, sin manipulaciones complicadas.

La sensibilidad detectada es del 100%; es decir, no hay falsos negativos!; por tanto, el valor predictivo negativo del M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX en caldos de enriquecimiento es del 100%.

Deje que los reactivos se atemperen de la nevera al ambiente del laboratorio justo antes de usarlos. Utilice cepas de reserva (CRIOSTRAINS), de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
Participe en servicios intercomparativos como SEILALIMENTOS, SEILAGUA o SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios

El kit se suministra en cajas con todo lo necesario para realizar 50 test. Ref.: KMB501
Debe almacenarse a 4-8 ºC, sin congelar.

M-Ident SalmonellaSi desea más información sobre nuestro M-IDENT®-SALMONELLA LÁTEX, no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.eso por teléfono en el nº 91-897 46 16.

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE (BASE)

TETRATHIONATE BROTH MUELLER KAUFFMAN VERDE BRILLANTE (BASE): Enriquecimiento de Salmonella (ISO 6579)

mueller

De izquierda a derecha: Tetrationate Broth MK con Verde Brillante, y con Salmonella.

 COMPOSICIÓN

Extracto de carne (4,3 g); Dig.enzimático caseína (8,6 g); Cloruro sódico (2,6 g); Carbonato cálcico (38,7 g); Tiosulfato sódico-5-h (47,8 g); Bilis de buey (4,78 g); Verde Brillante (0,0096 g). (Fórmula en gramos por litro) pH final: 8.0 ± 0,2.

PREPARACIÓN

Disolver 106,8 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar hasta ebullición. Esterilizar a 121 ºC, 20 minutos o mejor mantener a 100 ºC durante 2 minutos y no autoclavar. El precipitado o enturbiamento de Carbonato Cálcico es normal. Distribuir en tubos estériles. No volver a calentar. Instantes antes de usar, se puede añadir 19 ml de solución yodo-yodurada (VCC4023).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGARSECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.DESHIDRATADO CODIGO: DMT177

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Polvo fino, Crema

PREPARADO: Estéril, Precipitado, blanco.

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2, 24-48 h a 37-41,5 ºC:

(Aplicando el método UNE EN ISO 6579: 2003 mejorada, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado)

Salmonella abony MKTN 6017 con acompañantes (E.coli MKTA 25922 y Ps.aeruginosa MKTA 9027). Tras estriar una alícuota en XLD e incubar, aparecen más de 10 colonias típicas.

Escherichia coli MKTA 25922, totalmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, no aparecen colonías

Enterococcus faecalis MKTA 29212, parcialmente inhibido: tras incubar, estriar en TSA e incubar, aparecen menos de 10 colonías.

Bacillus subtilis MKTA 6633, Parcialmente inhibido.

Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Parcialmente inhibido.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Medio para enriquecimiento de Salmonella en alimentos y aguas. Se utiliza en paralelo al Caldo Rappaport Vassiliadis (mejor con SS Broth) y, en  la Norma ISO 6579 (en versiones antiguas junto al Selenito Cistina Broth).

mueller2

Izda: Salmonella (turbidez y pérdida de color), Centro: Shigella (turbidez y turquesa), Dcha: otras Enterobacterias. (sin turbidez)

PRECAUCIÓN

Este medio no es válido para Salmonella typhi. Resulta más selectivo que los otros caldos Tetratrionato (DMT086 y DMT304) para las demás Salmonella. Medio alternativo recomendado por MICROKIT por sus mayores sensuibilidad y especificidad: SS Broth.

 MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Inocular 1/10 ml del caldo de pre-enriquecimiento en 10/100 ml de este medio. Incubar a 36-38 (42) ºC durante 21-27 horas. Tras agitar, sembrar en placas de medios selectivos.

Para consultas o aclaraciones sobre este o cualquier otro producto MICROKIT no dude en ponerse en contacto con nosotros en el teléfono 91-897 46 16 o en el correo electrónico microkit@microkit.

SEILALIMENTOS

Laboratorios MICROKIT les ofrece nuestro Servicio Intercomparativo Europeo de Habilidad en el Análisis Microbiológico de Patógenos en  Alimentos, Materias Primas y otras muestras sólidas. “SEILALIMENTOS”

Presentamos el primer servicio intercomparativo   microbiológico  diseñado, seilalimentos 2 elaborado y coordinado en España, desde Julio de 1998, bajo Norma UNE 66543-1:1999 IN  sobre Ensayos de Aptitud por Intercomparación  de Laboratorios, y según las directrices de las guías ENAC sobre participación en programas de intercomparación, por una empresa líder en diseño y fabricación de medios y kits, cuyo alcance de certificación internacional ISO 9001 los incluye y avala, garantizando su buen hacer en cada auditoría anual.

           Con una experiencia previa de 3 años en este tipo de servicios, Laboratorios MICROKIT aceptó el reto planteado por muchos clientes cansados de importar este tipo de servicios o de asumir otros de escasa validez técnica. En la actualidad, SEILA aparece en publicaciones, cursos y páginas Web como ejemplo de referencia de un sistema externo de calidad.

SEILA permite realizar una autoevaluación continuada de los medios de cultivo, los procedimientos y los operarios, a fin de alcanzar el nivel de calidad analítica adecuado para el cumplimiento de las normas ISO17025, ISO9001, GLP…Además, resulta una excelente herramienta de marketing de cara a clientes, inspecciones y auditorías. Quien trabaja con SEILA, mejora su calidad analítica hasta extremos insospechables a priori.

¡EN 2013 SEILALIMENTOS CUMPLIÓ 15 AÑOS y se internacionalizó!

 Un auténtico clásico que no comete los errores típicos de tantos servicios principiantes

SEILA ha permitido ya a más de 100 laboratorios re-VALIDAR  en continuo sus procedimientos de análisis microbiológicos y demostrar de rutina que la calidad de sus análisis está correctamente controlada de forma externa e independiente.

Este servicio busca la presencia (con o sin recuento, a gusto del usuario) o la ausencia de los siguientes patógenos, de los que cada laboratorio analizará sólo los que le interesen (sin rebaja de coste, al ser el inóculo e informe comunes para todos los participantes):inoculo seilaseilalimentos1

S.E.I.L.A.LIMENTOS  se convirtió así en el servicio intercomparativo más completo y económico de microbiología de alimentos:

11-13 parámetros al precio de 1-3 parámetros de otros servicios anglosajones!. Se asegura la presencia de varios grupos de patógenos en cada envío, y de todos ellos en el total de cuatro envíos seguidos (1 año). La matriz alimentaria es diferente en cada envío y al estar irradiada (estéril, pero cruda) se asegura que no aparezcan microorganismos desconocidos para el laboratorio piloto, de modo que el inóculo es idéntico para todos los participantes. Gracias a una estabilidad y a una homogeneidad sin precedentes del inóculo, el día de inicio del análisis no es una fecha crítica para la obtención de resultados. La temperatura y tiempo del transporte no es crítica, siempre que llegue antes de la caducidad del servicio.

       Desde Sept-2009, parámetros clásicos como Shigella spp, E.coli O157, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio parahaemolyticus y Staphylococcus spp-coagulasa negativos, se eliminan por la reiterada falta de participantes, pero tanto Shigella spp., como Staphylococcus spp-coagulasa negativos, siguen en realidad incluidos, al utilizarse a veces como interferentes de Salmonella spp. o de S. aureus, respectivamente.

Este servicio es de un envío por trimestre, aunque recomendamos que cada cliente se apunte al menos al año completo (4 envíos), lo mínimo para que pueda abarcar la presencia de la casi totalidad de los patógenos enumerados; y para comprobar si las Acciones Correctoras implantadas en los anteriores servicios han resultado útiles. Además, es más económico apuntarse por años completos. Cada microorganismo puede tener adscrito un falso positivo que se puede incluir también, para afinar el método a nivel muy específico. El número de lentículas del inóculo no da pistas al analista sobre el número de cepas inoculadas, ya que las hay repetidas y las hay estériles; de este modo la muestra es 100% ciega. Las fechas de envío de las muestras a los participantes son la primera o segunda semana de  Marzo, Junio, Septiembre y Diciembre de cada año. Analice la muestra que reciba (preferiblemente el día siguiente a su recepción y, como tarde, la semana anterior a su caducidad, impresa en la etiqueta) como si se tratara de una más de sus muestras, con sus protocolos, reactivos y operarios habituales. Busque sólo los parámetros que desee,  siguiendo las pautas que se adjuntan.  En los parámetros que no analiza, debe marcar la casilla de “NO BUSCADO” en la tabla del final de este documento. Si anexa a la tabla un resumen de su método de trabajo y de sus comentarios del análisis que ha realizado, el valor del intercomparativo se dispara, al poder luego recibir en el informe común más datos sobre sus puntos críticos en el análisis; y poderse plasmar después en el informe común las conclusiones sobre los mejores métodos/medios/kits empleados por los participantes. No olvide indicar su número secreto en la tabla, lo que garantiza la total confidencialidad del servicio: nadie más que Ud.sabe quien es y en el informe común sólo aparecen los números secretos de los participantes.  Devuelva sus resultados en dicha tabla actualizada, adjunta a cada envío, antes de 3 semanas transcurridas desde la recepción de las muestras, de modo que tiene nada menos que 3 semanas para realizar el análisis (por si está de vacaciones, baja…). Poco después (aproximadamente en otras 2-4 semanas)  recibirá confidencialmente EN SU EMAIL el informe con la valoración de sus resultados con respecto a los propios de control de calidad interno del laboratorio piloto y a los de los demás participantes, con los comentarios pertinentes que se deriven desde nuestro punto de vista técnico. Como mejora respecto a otros servicios, además recibirá las No Conformidades detectadas en su método (si nos lo envió), con lista de comprobación para cada parámetro y con tablas comparativas de métodos y medios,  que facilitan una visión global de la sensibilidad de cada uno de ellos, así como la calificación intercomparativa del rendimiento de su laboratorio.

REFERENCIA SMT003.

El precio por muestra incluye hasta 13 parámetros!

Contenido: Con la tabla actualizada en el folleto de instrucciones, recibirá 3 artículos:

  • 100 g de Matriz cruda pero estéril (esterilizada por rayos gamma para evitar interferencias desconocidas de la flora inicial).
  • Tubo de inóculo con los microorganismos inoculados en forma de lentículas cuantitativas, estables y seguras, con estabilidad y homogeneidad contrastadas, recuentos e incertidumbres conocidas y certificadas  (almacenar  a 4-15ºC hasta comenzar el análisis).
  • Y tubo con 10 ml de caldo revitalizador del inóculo, válido para revitalizar todos los microorganismos de SEILALIMENTOS.

Si desea repetir el análisis, tras conocer los resultados, pida un SEILAINÓCULO-reproducibilidad ALIMENTOS, ref: SRI003. Es preferible que lo pida junto al SEILA, para que podamos asegurarle que aún quedan en stock inóculos idénticos. Así, además de conocer la sensibilidad, especificidad y límite de detección de sus métodos cualitativos; y la exactitud y el componente “reproducibilidad intercomparativa” de la precisión de sus métodos cuantitativos, podrá conocer el componente “repetitividad intralaboratorio” con sus diferentes analistas o con el mismo en diferentes días (de modo que SEILALIMENTOS también le sirve como método intracomparativo).

Inscripción: Si no es cliente habitual de MICROKIT ni trabaja a través de distribuidor, adjunte el comprobante de la transferencia que realice a la cuenta que le proporcionaremos tras su confirmación de pedido, por el valor indicado + IVA, junto con sus datos (empresa, persona, dirección completa, teléfono, fax, email, CIF…), y el número/fechas de las muestras a las que se apunta, al email consultastecnicas@microkit.es o al fax (+34) 91 897 46 41. Si es cliente habitual de MICROKIT no es necesario el pago previo. Si trabaja a través de distribuidor consúltele a él; dada la naturaleza confidencial de este servicio, necesitamos sus datos para envío directo, aunque la factura siga haciéndola su proveedor. A cada nuevo cliente le enviaremos el número secreto que le hemos asignado al email que nos proporcione, tras confirmarnos su pedido; puede pedir cambio de número secreto siempre que lo desee. Fecha límite de la inscripción: 3 semanas antes del siguiente servicio (7 semanas en clientes de fuera de España). Las solicitudes posteriores se tramitarán para el siguiente servicio.

En las encuestas de valoración de SEILA®, los participantes de este servicio lo han calificado, como una herramienta  de la máxima utilidad (nota: 9/10) para la mejora continua de sus laboratorios.

” Dese prisa, aún está a tiempo de participar en nuestro servicio de DICIEMBRE-2013″