Archivo de la categoría: Microbiología de Alimentos

Optimización en los análisis microbiológicos de ALIMENTOS.
Nuevos métodos de análisis microbiológicos utilizados exitosamente en los laboratorios líderes

DEXTROSE TRYPTONE AGAR (DTA) (BASE)

DEXTROSE TRYPTONE AGAR (DTA) (BASE) AGAR GLUCOSADO PARA BACILLUS. Detección de esporulados termófilos (ICUMSA, NCA) y demás Bacillus, alterativos o no. Bacillus cereus (ISO 7932).

BacillusMelenaLeonCOMPOSICIÓN
Extracto de levadura 1,500 g
Triptona 10,000 g
Glucosa 10,000 g
Cloruro sódico 5,000 g
Púrpura de bromocresol 0,015 g
Agar-Agar 12,000 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN
Disolver 38’5 g de medio en 1 litro de agua bidestilada. Calentar hasta ebullición, agitando hasta la completa homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. Para que el medio sea selectivo, añadir asépticamente 10 ml/l de Polimixina B estéril (SMS009).
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT183

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Verdoso
PREPARADO: Estéril, Violeta

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 30-37°C aproximadamente:
Bacillus cereus MKTA 10876, Excelente, colonias expandidas con intensa acidificación del medio (viraje a amarillo). Con respecto a PCAestandarizado*, recuento medio 218 %.
Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente, colonias expandidas sin acidificación del medio (sin viraje). Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 223 %.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Crece, colonias redondas y discretas. Con respecto a PCA estandarizado*, recuento medio 75 %.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 27853, Inhibido.
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido.
* El que cumple con recuperación superior al 92-125% con respecto a cepas cuantitativas
trazables a cepa tipo.

PRESENTACION: TUBOS PREPARADOS INCLINADOS, FRASCOS 100
ml, MEDIO DESHIDRATADO.
DEXTROSE TRYPTONE AGAR (DTA) es un medio para la detección de esporulados termófilos acidificantes en alimentos, incluido Bacillus coagulans. Y para detección y recuento de  esporulados aerobios del aire, de las superficies y de otras muestras.
DTA
SIEMBRA
Para aerobios esporulados, a fin de germinar las esporas,. calentar el tubo con dilución madre y el de dilución –1 en un baño a 80ºC durante un minuto exacto, sacar y poner en un baño de agua con hielo durante 1 hora.
Sembrar 0,1 ml de la muestra y su serie de diluciones decimales en superficie de placas duplicadas; o bien sembrar en estría en los tubos inclinados. O bien sembrar por impacto en placa de contacto con un muestreador tipo MICROFLOW.
Incubar 2-3 días a 30 ºC aproximadamente, o bien 36-48 horas a 55 ºC aproximadamente en un incubador húmedo para prevenir la desecación del medio. Para detectar también la población de cepas termófilas puede ser necesario realizar un duplicado, e incubarlo tras darle a la placa sembrada un shock térmico de 1-4 horas a 55°C aproximadamente. Para confirmar B.cereus, según Norma ISO 7932, incubar sólo 24 h a 30°C aproximadamente y observar el viraje del medio lila a amarillo.

BThuringiensisINTERPRETACIÓN
B. coagulans forma colonias en “flat sour” amarillo-verdosas. B.cereus crece en sólo 24 horas a 30°C con colonias amarillas que viran el medio a amarillo.
La mayoría de especies de Bacillus crecen selectivamente en este medio. Use KUS700 para identificar la especie de acuerdo con el Manual Berggey.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro DEXTROSE TRYPTONE AGAR (DTA) o cualquier otro producto no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

DESOXICOLATO CITRATO AGAR (D.C.A.)

DESOXICOLATO CITRATO AGAR (D.C.A.) es un Agar selectivo para el aislamiento de Salmonella spp. y Shigella spp. en medicamentos, alimentos, ambiente y muestras clínicas, asi como de otras enterobacterias y coliformes.
Pharmacopea medio J.

COMPOSICIÓN
Extracto de carne 10,0 g
Peptona de carne 5,0 g
Lactosa 10,0 g
Citrato Sódico 20,0 g
Tiosulfato sódico 5,0 g
Citrato Férrico 1,0 g
Desoxicolato Sódico 5,0 g
Rojo neutro 0,02 g
Agar-Agar 13,5 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN
Disolver 69,5 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta ebullición. No Autoclavar! No sobrecalentar! El color final del medio es rosa pálido, traslúcido, con un fino precipitado de desoxicolato. No refundir!

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT037

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, rosado
PREPARADO: Estéril, rosa pálido

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2
(Aplicando el método ISO 6579, ISO 12824, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado), 24-48 h a 37 ºC:
Salmonella abony MKTN 6017, Colonias transparentes, amarillentas, con centro negro. PR > 0,5, en concreto >50-96% de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA; esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Si procede de enriquecimiento, buen crecimiento en estría.
Shigella flexneri MKTA 12022, colonias incoloras/rosadas.
Citrobacter freundii MKT 8090, Crece con colonias rojas-rosas con centro negro y precipitado en el medio.
Proteus mirabilis MKT 14153, Crece con colonias amarillas, invasivas, con centro gris-negro y olor a pescado.
E. coli MKTA 25922, Inhibición parcial o total, colonias grandes, rosas-rojas con precipitado en el medio.
Enterococcus faecalis MKTN 775, Inhibición completa: Ni una sola colonia.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibición completa: Ni una sola colonia. Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO, TUBOS inclinados con pico largo.
NOTA: Se utiliza para diferenciar enterobacterias y coliformes y en particular para detectar S.paratyphi. El desoxicolato sódico reduce el crecimiento de gram positivos. La degradación de lactosa en ácidos se detecta por el color rosa-rojo del rojo neutro. Los no fermentadores de lactosa crecen con colonias incoloras. La formación de sulfuro de hidrógeno se detecta por la aparición de óxido de hierro negro en el centro de las colonias.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN DESOXICOLATO CITRATO AGAR (D.C.A.)
Sembrar en estría, para aislar colonias, a partir del caldo enriquecido. Incubar 18-24 horas a 37°C.
Colonias rosas-rojas, con o sin centro negro: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella. Colonias incoloras, con o sin centro negro: Salmonella, Proteus.
Colonias incoloras sin centro negro: Shigella, Pseudomonas. Identificar las colonias mediante galerías adecuadas (KBH260).

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

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ASPARAGINE PSEUDOMONAS BROTH

ASPARAGINE PSEUDOMONAS BROTH es un caldo APHA y CENAN para la detección y enumeración NMP presuntivas de Pseudomonas aeruginosa en aguas embotelladas, refrescos, aguas de baño y otros líquidos. Tambien útil para detectar y enumerar las bacterias gram negativas no fermentadoras.

COMPOSICIÓN
Fosfato monopotásico 10,0 g
Fosfato dipotásico 1,0 g
Asparagina 2,0 g
Sulfato magnésico 0,5 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,2

PREPARACIÓN
Disolver 13,5 gramos en 1 litro de agua bidestilada que contenga 8 ml de glicerol. Agitar hasta su completa disolución. Autoclavar a 121° C durante 15 minutos. Para obtener el caldo a doble concentración, disolver 27 g en 1 litro de agua bidestilada que contenga 16 ml de glicerol. El color final del medio es paja-verdoso.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS COMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CODIGO: DMT346

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO:
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema
PREPARADO: Estéril, Paja-verdoso

CONTROL DE CRECIMIENTO 24-48 h a 35-37°C aproximadamente:
Pseudomonas aeruginosa MKTA 27853, Correcto, turbidez.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 10145, Correcto, turbidez.
Staphylococcus aureus MKTA 6538P Inhibido

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

SIEMBRA E INTERPRETACIÓN
Medio que permite el correcto enriquecimiento de Pseudomonas aeruginosa por ser estrictamente mineral, con la Asparagina como única fuente de nitrógeno y la glicerina como única fuente de hidratos de carbono. Los demás componentes tamponan y proporcionan minerales. En principio, sólo los Gram negativos no fermentadores pueden crecer en estas condiciones.
Se recomienda para la enumeración NMP mediante 5 tubos/series inoculando 10 ml, 1 ml y 0,1 ml de muestra.
Los tubos se incuban a 35 °C durante 24-48 horas.
Pseudomonas aeruginosa hidroliza la asparagina, convirtiéndola en ácido aspártico. La aparición de crecimiento mediante turbidez (aparezca o no pigmentación fluorescente) se considera presuntiva de la presencia de Pseudomonas aeruginosa. y/o de otros Gram negativos No fermentadores. Mediante el NMP se determina su concentración en la muestra.

Confirmar los tubos turbios añadiendo una alícuota de cada uno en sendos tubos de caldo Acetamida (DMT003) que virarán, tras incubarse y añadir reactivo Nessler (SDA002), a amarillo-pardo, si la presencia de Pseudomonas aeruginosa es auténtica.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

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ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH

ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH para recuento total de microorganismos acidotermófilos y osmotolerantes en alimentos. Detecta los heterotrofos osmoacidotolerantes que fermentan la glucosa con producción de gas.

BOTE 500COMPOSICIÓN
Peptona de Carne 5,0 g
Extracto de Levadura 5,0 g
Glucosa 40,0 g (Fórmula por litro)
pH final: Ajustar hasta 3,8 ± 0,2

PREPARACIÓN
Disolver 50 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Ajustar pH a 3,8. Calentar, agitando, hasta ebullición, para su total homogeneización.
Añadir 10 ml por tubo con campana Durham. Autoclavar a 121ºC durante 15 minutos. Incubar 2-7 días a la temperatura óptima para los microorganismos buscados, en general 20-35°C. Contar por el método NMP o bien, para detección, dar como positivo todo tubo turbio con gas retenido en la campana.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR. DESHIDRATADO
CODIGO: DMT223

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO ACIDOTERMÓFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).
DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema Zygosaccharomyces pombe MKTA 24751, Correcto, turbidez y producción de gas.

PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

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CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO

CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO Recuento total con máxima recuperación en alimentos, aguas y cosméticos, basado en PCA (FIL,IDF,AOAC,APHA,ICMSF), diferenciando las colonias, incluso las más diminutas, de las partículas y del medio.
Recuperación superior (122%) al PCA y 116% respecto al TSA.Cromokit Maxim-agar
COMPOSICIÓN
Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g
Glucosa 1,0 g
Factores doping MICROKIT 8,0 g
Agar-agar 10,5 g
Cromógeno termoestable c.s.
(Fórmula por litro)
pH final: 6,8 ± 0,2
PREPARACIÓN
Disolver 27 g de medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar hasta ebullición, agitando para su completa disolución.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 min o preferiblemente a 116°C durante 15 minutos. No sobrecalentar ni mantener fundido mucho tiempo. Refundir sólo una vez. El color final del medio es blanco-crema. A veces, por sobrecalentamiento, adquiere un tono rosado que retorna al crema cuando se vuelve a enfriar el medio, lo cual no afecta los resultados.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO.
MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.
DESHIDRATADO CODIGO: BCD515

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…). DESHIDRATADO: Polvo grueso, Crema PREPARADO: Estéril, Crema EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2 24-48 h a 37 ºC o mejor 72 h a 30 ºC, aplicando el método ISO 4833, ISO 2293, o el indicado en el Manual MICROKIT: E. coli MKTA 25922, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 90-184 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.

Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-164 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA. Bacillus subtilis MKTA 6633, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-129 % * de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Micrococcus luteus MKTA 9341, Excelente, Colonias rojas en 48 h, crecen mucho más rápido y mejor que en TSA, y mejor a temperatura ambiente.
Enterococcus faecalis MKTA 29212, Excelente, colonias rojas, PR >70% en concreto 99-191 % *de colonias respecto al número de ufc certificadas e inoculadas en TSA.
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027, Excelente, colonias rojas. * Esta variabilidad de la productividad depende de la composición y carga de la flora acompañante inoculada. Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.
PRESENTACIÓN: TUBOS 20 ml, FRASCOS 100 ml, MEDIO DESHIDRATADO.
Recuento total standard de bacterias aerobias en alimentos, aguas, productos farmacéuticos, cosméticos y otros productos. Las colonias crecen en distintos tonos del rojo: rosa, naranja, purpura…. sobre el tono crema del medio (excepto ciertos acidolácticos y ciertas levaduras, que crecen con colonias blancas, sin viraje, por lo que este medio los distingue de los aerobios). El color no afecta a las pruebas de identificación posteriores que quisiera realizar.
MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Inocular 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales, en masa. Incubar a 30 ºC aproximadamente durante 48 horas. Con flora psicotrofa, incubar a 6 ºC aproximadamente durante 10 días y con flora termófila, incubar a 55 ºC aproximadamente durante 48 horas.
Contar todas las colonias. La recuperación supera el 20% por encima de la obtenida en PCA y el 16% por encima de la obtenida en TSA, gracias a ciertos factores doping de aerobios descubiertos y agregados por MICROKIT. Esta fórmula, con menos agar, aumenta la sensibilidad del medio frente a los aerobios más lábiles, al permitir una mejor oxigenación del fondo. Este medio está diseñado para siembra en masa. Si desea sembrar en superficie, añada 3-5 g/l de Agar-Agar (BCB006), o utilice 30-32 g/l de este mismo medio. Para minimizar la desecación en muestreos de aire y superficies, o para siembra en Spiral, añadir 2 gotas de antiburbujas (SBL001) por cada litro de agua, antes de añadir el medio y antes de autoclavar. Para contar por separado las bacterias, de las levaduras y mohos, añadir a un duplicado, enfriado a 45°C, 0,05-0,5 g/l de Cicloheximida (SKM200): En la placa con CEX sólo crecerán las bacterias y en la placa sin CEX , la suma de bacterias + levaduras y mohos.
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro CROMOKIT MAXIM-AGAR CROMOGÉNICO o cualquier otro producto no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

AEROMONAS AGAR (BILE SALT IRGASAN BRILLIANT GREEN AGAR)

AEROMONAS AGAR (BILE SALT IRGASAN BRILLIANT GREEN AGAR) es un Agar selectivo para el aislamiento y la enumeración de Aeromonas spp. en alimentos, aguas,  ambiente y muestras clínicas.

PREPARACIÓN
Disolver 45,5 gramos en 1 litro de agua bidestilada. Agitar calentando hasta ebullición. No  autoclavar! No sobrecalentar! El color final del medio es púrpura. No refundir!

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR, PARA ASEGURAR LA HOMOGENEIZACIÓN DE LOS EVENTUALES GRADIENTES DE DENSIDAD DE LOS  OMPONENTES. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT316

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª,  cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…).

DESHIDRATADO: Polvo grueso, púrpura PREPARADO: Estéril, púrpura
CONTROL DE CRECIMIENTO 18-24 horas a 37°C aproximadamente: Aeromonas hydrophila MKTA 49140, Excelente, colonias rosas traslúcidas de 0,5-3 mm. Pseudomonas aeruginosa MKTA 10662, Excelente, colonias rosas traslúcidas de 0,5-1 mm. Staphylococcus aureus MKT 6571, Inhibido. E.coli MKT 9001, Inhibido.

PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO.

NOTA: Basando su selectividad en el verde brillante e irgasan, no inhibe las cepas de Aeromonas sensibles a la ampicilina que es empleada en otros medios.
SIEMBRA E INTERPRETACIÓN: En muestras clínicas, sembrar en superficie, en estría para aislar colonias. En muestras ambientales de agua, sembrar la membrana filtrada evitando la aparición de burbujas o de pliegues.
En muestras de alimentos incubar previamente 18-24 horas a 37°C en agua de peptona alcalina (DMT151) y sembrar después un inóculo enriquecido en estría. El uso de este enriquecimiento en la investigación de Aeromonas spp. aumenta su frecuencia de detección hasta en un 40% de los casos.
Incubar 18-24 horas a 37°C.
Examinar las colonias típicas de Aeromonas: rosas y transparentes de 0,5-3 mm de diámetro. Identificarlas mediante la oxidasa (KOT050) y el medio O/F (DMT095): Aeromonas es oxidasa  positiva y muestra ambos metabolismos (oxidativo y fermentativo), mientras Pseudomonas, que también es oxidasa positivo, no tiene metabolismo fermentativo. También pueden diferenciarse mediante TSI Agar (DMT127) porque Aeromonas crece con fondo ácido (amarillo) y pico alcalino (rojo) o inalterado (naranja), mientras Pseudomonas crece con fondo y pico inalterados (naranja).
Identificar la especie con galerías adecuadas.
NOTA: Por lo general, las Aeromonas pueden crecer bien sobre los medios de cultivo convencionales en el laboratorio, tales como agar MacConkey, agar Hektoen, agar xilosa-lisina-desoxicolato (XLD), agar Salmonella-Shigella (SS) y agar nutriente sin adición de sales. Sin embargo estos medios no son selectivos para ellas y los coliformes acompañantes enmascaran y dificultan su detección. Diferentes medios de cultivo y métodos para el aislamiento de Aeromonas sp. de aguas se han propuesto: (APHA, 1989; Havelaar et al., 1987; Nishikawa y Kishi, 1987; Kersters et al., 1996), Agar Ampicilina Dextrina (ADA), Agar Sangre con Ampicilina (ASA), Agar CIN (Cefsulodina-Irgasan- Novobiocina, originalmenter creado para Yersinia enterocolitica). Este ultimo
permite el crecimiento de la mayoría de las especies y, en algunos estudios, consigue un incremento del 35% en las tasas de aislamiento. Sin embargo lo ideal para el estudio de las bacterias pertenecientes a la familia Aeromonadaceae es seguir los esquemas de Janda y col. y Satcher: se inocula un tubo con agua peptonada alcalina a pH 8,4 (Ref: DMT151), con el fin de incrementar el desarrollo de especies de los géneros Aeromonas y Plesiomonas, este caldo se incuba a 37°C durante 4 a 6 horas en condiciones de aerobiosis, al cabo de ese tiempo se siembra en Agar Nutritivo, Agar Ampicilina-Almidón, Agar Almidón-Sales Biliares-Verde Brillante (BBGS) según Nishikawa y Kishi o mejor el presente agar Aeromonas Irgasan-Sales Biliares-Verde Brillante (Ref: DMT316), incubando a 37°C, en condiciones de aerobiosis durante 24 a 48 horas. Se valoran las colonias obtenidas y se purifican las colonias de interés para su identificación bioquímica o molecular (Ref: SFI004+).
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Si desea más información sobre nuestro AEROMONAS AGAR (BILE SALT IRGASAN BRILLIANT GREEN AGAR) no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o en nuestro teléfono 91-897 46 16.

SALMOQUICK

Detección rápida y fiable de Salmonella spp. en alimentos

INTRODUCCIÓN
El método ISO 6579 tiene como desventajas la lentitud de obtención de resultados y la no
neutralización de los conservantes de la muestra, que conlleva a resultados falsamente negativos. En dicha Norma se realiza un pre-enriquecimiento revitalizador de 25 g de la muestra, 18-24 h a 35-37ºC en 225 ml de Agua de Peptona Tamponada (BPW). Al día siguiente se toma una alícuota y se incuba por duplicado en un post-enriquecimiento selectivo en 10 ml de Rappaport VS Broth y en 10 ml de MK Tetrationato Broth otras 18-24 h. Y de ahí se estría por duplicado, en XLD y en otro medio de elección por el laboratorio, incubando otras 18-24 h. De modo que todas las muestras (incluso las negativas) llevan un mínimo de 3 días (72 h) de demora en la obtención de los resultados presuntivos. Se emplean en total 5 medios, de los cuales uno (Rappaport) es tan selectivo que inhibe muchas cepas de Salmonella, por lo que se ha de usar otro en paralelo (MK Tetrationato). Otro, el BPW, no inactiva los conservantes, ni los metabolitos creados por la flora acompañante, permitiendo la aparición a menudo de resultados falsamente negativos.
SALMOQUICK ha sido diseñado por Laboratorios MICROKIT, basándose en la Norma ISO 6579 pero optimizándola; el método varía, ahorrando un medio y acortando el tiempo de obtención de resultados a la mitad: sólo 36 horas! En este caso se realiza el pre-enriquecimiento revitalizador (e inactivador de conservantes y de metabolitos generados por el resto de la flora acompañante, que podrían interferir en el crecimiento de Salmonella en un sinfín de matrices alimentarias) de 25 g de la muestra en 225 ml de Agua de Peptona Tamponada Neutralizante (BPNW), 2-20 minutos a temperatura ambiente. Se añaden al mismo 18 ml de SS Broth a [x5], se mezcla y se incuba el conjunto 18 h a 35- 37ºC, constituyéndose así en un solo paso la revitalización de las Salmonella dañadas, la inactivación de los graves problemas que no contempla la ISO 6579 y el aumento de la selectividad para la multiplicación de las Salmonella presentes. En este medio mixto, las muestras con Salmonella ennegrecen el caldo, por lo que de entrada en las primeras 18h ya tenemos una alerta de posible presencia de Salmonella si el caldo está negro. Pero algunas otras enterobacterias también pueden ennegrecer, por lo que hay que continuar con el segundo paso: Al día siguiente se estría por duplicado, en XLD y en Cromosalm, incubando otras 18h. De modo que las muestras sin crecimientos típicos de Salmonella (colonias negras en XLD y colonias verdes en Cromosalm) son liberadas en sólo 36h.
La validación de SALMOQUICK ha sido realizada con los cuatro medios indicados, y de la marca Microkit. Cualquier variación sobre los medios o la marca invalida nuestra validación.

SALMOQUICK es una herramienta simple, rápida y fiable, diseñada especialmente para simplificar y agilizar al máximo el control de alimentos con contaminación por Salmonella, que es uno de los puntos más críticos y que más retrasan la liberación del lote en la industria alimentaria.

SIMPLE: Ahorra un medio de cultivo de dudosa utilidad (Rappaport) y cambia dos medios mediocres (BPW y MK-T Broth) por los más modernos y eficientes (BPNW y SS Broth)

RÁPIDA: De la muestra a la liberación del lote en sólo 36 horas (frente a las 72 h habituales); además alerta de la posible presencia de Salmonella en las primeras 18 h (vira a negro).

FIABLE: Validado en base a la Norma UNE-EN-ISO 16140 por el método de pares frente a la Norma ISO 6579, con inóculos muy bajos de distintas cepas de Salmonella, variada flora interferente, matrices inhibitorias y 100% de eficiencia (ver publicación en bibliografía).

Se presenta de dos formas: como kit preparado y listo para usar y como un conjunto de los 4 medios de cultivo deshidratados necesarios para que el mismo laboratorio se lo pueda preparar.

a) SALMOQUICK-Estéril, kit listo para emplear: los 3 medios neceSalmoquicksarios para detección rápida de Salmonella (en sólo 36h), en presentación estéril y lista para su uso. 3×20 Tubotes prepesados y estériles BPNW para añadir a 225 ml de agua estéril (Ref: KBB002), 3×20 tubos SS Broth 18 ml [x5], 60 DryPlates-SAL preparadas con Agar Cromosalm. No se incluyen las placas XLD, para no acortar su año de caducidad. No necesita nevera. Conservar en lugar fresco y seco, con una temperatura de entre 5ºC y 25ºC, eso sí, al abrigo de la luz. No congelar. Kit de 60 test, ref: KMT037.

b) SALMOQUICK-Iniciación, conjunto de  los 4 medios deshidratados necesarios para detección rápida de Salmonella (en sólo 36 h), para que cada laboratorio se lo prepare: 1x 500g BPNW (para hacerse 62 frascos o bolsas Stomacher con 225 ml), 1x500g SS Broth (para hacerse 111 tubos de 18 ml a [x5], 1x500g XLD Agar (para hacerse 522 placas) y 1×100 g Cromosalm (para hacerse 156 placas).
En conjunto es mucho más económico (entre 2 y 3 €) que la adquisición de cada uno de los 4 medios por separado, para que el laboratorio se inicie en este método y pueda pedir después por separado los medios conforme vaya necesitando cada uno. Ref: KMT038.

MODO DE EMPLEO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
1.- Tomar 25 g del alimento en una bolsa Stomacher o en un frasco
2.- Añadir 225 ml de Agua Peptonada Tamponada Neutralizante (Microkit DMT011)
3.- Homogeneizar durante 2 minutos y dejar reposar hasta un máximo de 20 minutos
4.- Añadir 18 ml de SS Broth (Microkit DMT067) a concentración [x5]
5.- Homogeneizar e incubar 18 h a 35-37ºC
6.- Pueden leerse los resultados presuntivos desde las primeras 18 horas: el viraje del caldo a negro es presuntivo de presencia de Salmonella; pero debe confirmarse con el siguiente paso:
7.- Estriar sobre placas de XLD Agar (Microkit DMT142) y de Cromosalm Agar (Microkit DMT500)
8.- Incubar ambas placas 18 h a 35-37ºC
9.- La aparición de colonias negras, rojas o incoloras en XLD, o bien de colonias verdes en Cromosalm, es altamente presuntiva de presencia de Salmonella. Las colonias sospechosas deben confirmarse en laboratorio mediante los kits bioquímicos e inmunológicos habituales (Referencias a elegir: Enterotubos 49578619, Antisueros ZC01, ZC02, PL6100, Látex KMB501, Látex que serogrupa KWD096…). Muchas colonias presuntivas de la mayoría de medios de aislamiento de Salmonella (incluidos la mayoría de medios cromogénicos) acaban siendo confirmadas como Proteus o Citrobacter; esto no sucede en Cromosalm, donde Salmonella crece con colonias verdes, Proteus con colonias incoloras y Citrobacter con colonias negras.

BIBLIOGRAFÍA:
Norma ISO 6579: Microbiología de los alimentos para consumo humano y alimentación animal. Método horizontal para la detección de Salmonella. Sanchis, J. Doble enriquecimiento simultáneo para detección rápida de Salmonella. XIX Congreso SEM de Microbiología de los alimentos. Zaragoza, X-2014.
El usuario es el único responsable de la destrucción de los microorganismos generados en el interior del kit durante su uso, de acuerdo con la legislación medioambiental vigente. Sumerja en lejía o alcohol, o mejor autoclávelos, antes de desecharlos a la basura. Mantener fuera del alcance de los niños. No ingerir. Diseñado y fabricado por MICROKIT desde el 27 de Octubre de 2014.

Si desea más información sobre nuestro SALMOQUICK no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o  en nuestro telefono 91-897 46 16.

SEILAMBIENTE

SEILAMBIENTE: detección de microorganismos en Superficie+Aire

Laboratorios MICORKIT les ofrece el Primer servicio intercomparativo microbiológico diseñado, elaborado y coordinado en España, desde Enero de 2006, bajo Norma UNE 66543-1:1999 IN sobre Ensayos de Aptitud por Intercomparación de Laboratorios, para el  “Control de ambientes interiores, Industria Farmacéutica, Quirófanos…” SEILAMBIENTE.

Sabíamos cómo apreciarían este servicio los clientes de Control de ambientes interiores, Industria Farmacéutica, Quirófanos… que precisan de herramientas externas de control de calidad para sus validaciones, y aquellos que desean tener mayor confianza en sus resultados analíticos, y que hasta ahora estaban desamparados por la ausencia de servicios comparativos microbiológicos para estas matrices (aire y superficies). Lamentamos no poder ofrecer este servicio fuera de la Union Europea ni en Canarias, Ceuta o Melilla. Nuestra experiencia desde 1999 en este tipo de servicios para otras matrices (alimentos, aguas y cosméticos), el conocimiento profundo de la UNE 100012 sobre higienización de sistemas de climatización y el de la Norma ISO 17025 sobre acreditación de laboratorios, creemos nos hace candidato ideal para coordinar este servicio. Máxima confidencialidad: Sólo cada laboratorio conoce su código secreto

El Servicio Intercomparativo MICROKIT para muestras ambientales, SEILAMBIENTE, incluye el recuento total (SIN PATÓGENOS) de los siguientes indicadores:

SELAMBIENTE

Este servicio es anual: Recibirá sus muestras la tercera semana de Noviembre.

En cada muestra hay varios productos, además del folleto actualizado con protocolo  y tabla de presentación de resultados:

  • 6 botes de desinfectante ambiental Airesano (almacenar entre 15 y 25°C).
  • FRASCO pulverizadorSELAMBIENTE 2
  • 1 TUBO con LENTÍCULAS CUANTITATIVAS de 1os microorganismos inoculados “INÓCULO SEILAMBIENTE”. No se incluyen patógenos.
  • FRASCO con Solución Ringer

(No incluye las placas Rodac ni los laminocultivos necesarios)

 

INSCRIPCION.

Adjunte el comprobante de la transferencia que realice a la cuenta que le proporcionaremos si no trabaja a través de distribuidor ni es cliente habitual de MICROKIT, por el valor indicado en nuestra lista de precios vigente + 7% IVA, junto con sus datos (empresa, persona, dirección completa, teléfono, fax, CIF…), al fax 91-897 46 41 o al email microkit@microkit.es. Fecha límite de la inscripción: finales de Octubre. Las solicitudes posteriores se tramitarán para el siguiente año. REF: SMT006. Déjese becar fidelizando su consumo de medios y kits MICROKIT. A solicitud de los estimados usuarios, en vez de uno podemos realizar 2 ó 3 circuitos SEILAMBIENTE al año, siempre que haya suficientes participantes.

Si usted está interesado en inscribirse a nuestro programa SEILAMBIENTE 2014, dese prisa y póngase en contacto con nosotros, aún está a tiempo de inscribirse.

Si desea más información sobre nuestro Servicio SEILAMBIENTE, rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

 

 

M-IDENT®- Rhamnosa/Xylosa Listeria

M-IDENT®- Rhamnosa/Xylosa Listeria es un Kit de confirmación de Listeria monocytogenes en alimentos s/Norma UNE 11290:2004.

Rhamnosa-1 Rhamnosa2

 

 

 

 

 

 

 

PRESENTACION DEL PRODUCTO:
KIT DE 10 TEST para la confirmación de colonias sospechosas de Listeria monocytogenes crecidas en Agar Ottaviani & Agosti (Chromocytogenes).
– 10 tubos Rhamnosa Broth (TPL014)
– 10 tubos Xylosa Broth (TPL015)

EL KIT NO INCLUYE:
– Medio Ottaviani & Agosti (Chromocytogenes)
–  Cepas de reserva (CRIOSTRAINS o SALVAJES), de trabajo o cuantitativas para validar los reactivos una vez llegados a fábrica o tras almacenamientos prolongados o inadecuados.
– Participación en servicios intercomparativos como SEILALIMENTOS, SEILAGUA® y SEILAPARFUM para validar los procedimientos y los operarios

VENTAJA: Su extremadamente larga caducidad, de 1 año asegurado.

Si desea más información sobre nuestro M-IDENT®- Rhamnosa/Xylosa Listeria no dude en contactar con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es, o por teléfono en nuestro telefono 91-897 46 16.

 

MICROSTICK-SALMONELLA

Microstick- Salmonella es un Test rápido de Inmunocromatografía para la detección cualitativa de Salmonella spp. en muestras alimentarias: Microstick-Salmonella.

Los síntomas  clínicos causados por infección de Salmonella typhimurium, en seres humanos, se dividen en la fiebre tifoidea, causada por S. typhimurium serotipos typhi y paratyphi y una variedad de síntomas clínicos, incluyendo las enfermedades diarreicas, causadas por las Salmonellas no tifoideas (NTS), de las cuales hay unos 2.500 serotipos, como la S. enteritidis.  La fiebre tifoidea es restringida a humanos y está  altamente adaptada como enfermedad invasiva sistémica de adultos y niños, mostrando una leve asociación con la inmunosupresión. En contraste, las cepas NTS tienen una amplia gama de  huéspedes  vertebrados  y una epidemiología que a menudo incluye alimentos animales, al menos en los países industrializados donde normalmente se manifiesta en forma de gastroenteritis. Las cepas NTS pueden producir una grave enfermedad invasiva si va asociada a estados  inmunodeprimidos. También es común en niños africanos que presentan afecciones, desnutrición y anemia.

MICROSTICK-SALMONELLA es un kit de tres componentes diseñado para proporcionar una rápida detección de Salmonella spp. en muestras de alimentos. MICROSTICK-SALMONELLA combina un doble enriquecimiento optimizado de la muestra, con un inmunoensayo cromatográfico para la detección cualitativa de Salmonella spp. en muestras de alimentos contaminados, para así evitar el consumo y por  tanto, la salmonelosis.

A continuación destacamos las siguientes ventajas del kit:

1-Rápidez de resultados: 5-10 minutos tras el enriquecimiento ISO 6578. Ahorro en la obtención de resultados, conseguidos en sólo 36 horas (incluidos los enriquecimientos).

2-Robustez: se ahorran los puntos críticos de otros métodos como los látex o los ELISAs; el inmunocromatograma es el método inmunológico más duro en toda circunstancia ya que puede almacenarse fuera del refrigerador y transportarse a temperatura ambiente sin verse alterado.

 3-Sensibilidad extraordinaria: 99,9%, lo que limita la proporción de resultados falsamente negativos, convirtiendo el método en un correcto screening de barrido de muestras negativas.

 4-Especificidad excelente: >90%, lo que limita adecuadamente la proporción de resultados falsamente positivos y permite ahorrar las posteriores confirmaciones de los presuntos positivos a menos del 10%.

 5-Seguridad operativa: las muestras pueden hervirse una vez concentradas y justo antes de realizar el test, ya que éste detecta los antígenos de Salmonella, no las células, por lo que no es necesario que éstas sigan vivas tras el enriquecimiento selectivo

 6-Comodidad de uso: No necesita aparato adicional para su interpretación ya que es simplemente visual. El kit es compacto, al incluir los dos caldos de enriquecimiento ISO 6579 optimizados y los Sticks confirmativos.

 7-Flexibilidad: test unitarios, no siendo necesario agrupar muestras. Se pueden analizar de 1 a 20 ó más

 8-Estabilidad: se mantiene, incluso sin necesidad de refrigeración (4-30ºC), durante muchos meses

 9-Ahorro económico: Dada la rapidez de resultados, la muestra alimentaria  puede ser liberada para su comercializacion varios días antes que si hubiera sido analizada con el método clásico.

10-Validado: estudio realizado en todo tipo de muestras alimentarias por los mayores especialistas en España en validación de métodos microbiológicos: carne de ternera, leche pasteurizada, pescado, vegetales, ovoproductos, especias y aperitivos, harina de cereales, pollo, alimentos infantiles, alimentos dietéticos, salsas, paella, postres, pastelería, helados, embutidos loncheados, queso, mariscos, comida animal, espaguettis. Límite de detección demostrado desde 10-16 ufc Salmonella /25 g de alimento con un nivel de acompañantes e interferentes muy diversos 102-103 veces superior que las dianas!

 Cada kit contiene:

– 20 tubotes (ref: DPA001) con polvo estéril del caldo de revitalización APT-MICROKIT para 25 g de alimento (pre-enriquecimiento).

– 20 tubos (ref: TPL401) con 10 ml del caldo de enriquecimiento selectivo SS-MICROKIT, de color rojo (post-enriquecimiento)

– 20 tarjetas inmunocromatográficas para Salmonella Ag (Sticks)

– Instrucciones de uso

Microstick Salmonella

Para más información sobre Microstick-Salmonella no dude en ponerse en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16.