BGBL BRILLIANT GREEN LACTOSE BILE 2% BROTH (BGBB) Detección y recuento de E.coli y demás coliformes (FIL, IDF, APHA) por NMP

COMPOSICIÓN

•  Triptona              10,0 g
• Sales Biliares       20,0 g
• Lactosa                10,0 g
• V. brillante        13,3 mg

(Fórmula por litro)               pH final: 7,2 ± 0,1

PREPARACIÓN

Disolver 40 gramos de medio en 1 litro de agua bidestilada. Agitar lentamente para su completa disolución. Repartir en tubos con campana Durham. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos. El color final del medio es verde esmeralda.

PRECAUCIÓN: CONTIENE SALES BILIARES.

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO. AGITE EL BOTE ANTES DE USAR.

DESHIDRATADO CODIGO: DMT025

CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,…)

DESHIDRATADO: Granulado o polvo, Verdoso

PREPARADO: Estéril, Verde esmeralda

EVALUACIÓN DEL RENDIMIENTO ISO/TS 11133-2  24-48 h a 30 ºC, aplicando el método ISO 4831, o el indicado en el Manual MICROKIT actualizado:

• Escherichia coli MKTA 25922, 9 tubos turbios forman gas en 1/3 de la campana Durham.
• Citrobacter freundii MKTA 43864, 9 tubos turbios forman gas en 1/3 de la campana Durham.
• Salmonella abony MKTN 6017, 9 tubos turbios pero sin gas.
• Enterococcus faecalis MKTA 29212, Inhibido, no hay turbidez ni gas. Las colecciones TIPO prohiben el uso de su referencia por lo que indicamos la nuestra, directamente trazable a la colección TIPO.

 

PRESENTACIÓN: TUBOS 9 ml CON CAMPANA, MEDIO DESHIDRATADO

NOTA: El caldo lactosado biliado al verde brillante se usa para la detección y enumeración de coliformes totales y fecales. (No confundir con el Agar Verde Brillante, medio para aislamiento de Salmonella). Y de E. coli (test de Mackenzie) en leche, otros alimentos y agua por el método del Número Más Probable. La lactosa permite diferenciar los coliformes, que la fermentan produciendo gas (que queda retenido en la campana Durham). La bilis y el verde brillante inhiben el crecimiento de bacterias Gram positivas. 

SIEMBRA

Inocular cada tubo con 1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales (en NMP, 15 tubos por muestra). Incubar 24-48 horas a 35 ºC aproximadamente (coliformes totales) o 44 ºC aproximadamente (coliformes fecales-E.coli). 

INTERPRETACIÓN

La fermentación de lactosa con producción de ácido y gas en 48 horas, indica la presencia de coliformes. Verificar aislando en VRBA. Confirmar E. coli con el test de Mackenzie: Inocular 1 ml del medio con gas en un tubo BGBL y otro en un tubo de Tryptone Water (TW). Incubar a 44 ,5 ºC. E.coli crecerá con gas (BGBL) e indol positivo (TW). Ver también este medio con Mug para una más rápida confirmación de E. coli.

 

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