Aflatoxin B1 Test Strip

Aflatoxin B1 Test Strip

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Introducción

Las aflatoxinas son micotoxinas generadas en su mayor parte por el moho Aspergillus flavus cuando crece sobre maíz, otros cereales, frutos secos, especias y demás alimentos. La Aflatoxina B1 es la más común de estas micotoxinas y raramente hay otras aflatoxinas que no vayan acompañadas de la B1, por lo que detectar si ésta está por encima o por debajo de los niveles permitidos en cada país, se convierte en un screening negativo que ahorra mucho tiempo y trabajo a los laboratorios. Sólo las muestras positivas de este kit deben pasarse a HPLC, lo que ahorra ésta en la inmensa mayoría de muestras.

Aflatoxin B1 Test Strip es un immunocromatograma en tiras que detecta un nivel cualitativo de la presencia de aflatoxina B1 y se ha diseñado para emplear en granos, alimentos y materiales de uso alimentario (para buscar aflatoxina M1 en leche, solicite el kit KRBW003). La extracción es mucho más sencilla que en el método HPLC. El test completo se realiza en 15-20 minutos. Permite la realización de análisis in situ.

Límite de Detección: 5 μg/kg—20 μg/kg –50μg/kg (5-20-50 ppb

 Contenido del kit (Referencia MICROKIT: KRMY001, kits para 96 Test

  1. 96 Tiras para Aflatoxina B1 (12 tubos con 8 tiras cada tubo)
  2. Cubeta microtiter con 96 pocillos con reactive incluido contra Aflatoxina B1
  3. Solución diluyente para la muestra (2 viales por kit)
  4. NaOH 2 mol/L (1 vial por kit)

Materiales Necesarios no incluidos

  1. Balanza (sensibilidad: 0.1g) 2. Micropipeta (20µl-200µl, 100µl-1000µl)
  2. Tubos de Centrífuga (2ml, 50ml) 4. Metanol (AR)
  3. Agua desionizada o destilada 6. Vortex
  4. Centrifuga 8. Reloj avisador

Preparación de la Solución de Extracción de la muestra (80% methanol)

Mezclar 80 mL de metanol con 20mL de agua desionizada/destillada

Preparación/Extracción de la muestra (2 métodos según el nivel de detección que desee):

Método 1 (LOD: 5μg/kg-20μg/kg)

  1. Moler la muestra y pasarla a través de una pantalla de malla 20;
  2. Pesar 5,0 g de muestra molida en un tubo de centrífuga de 50 ml;
  3. Agregue 80% de solución de extracción de metanol al tubo (el volumen de adición de la solución de extracción se determina por los puntos de corte, consulte la tabla a continuación) y apriete la tapa
Línea de corte ( μg/kg) 5 10 20
Volumen de la solución de extracción (mL) 10 20 40

 

  1. Agite vigorosamente, mezcle o agite en vórtex durante 3 minutos;
  2. Centrifugue durante 5 minutos a 4,000 rpm. Si no dispone de centrífuga, puede dejar precipitar durante unas horas.
  3. Transfiera 100μL de la capa superior de extracto a un tubo nuevo y agregue 200μL de solución de dilución de muestra, mezcle bien incluido lo del fondo.

Nota: Para las muestras de DDGS, harina de germen de maíz, polvo de proteína de maíz y algunos productos de alimentación, ajuste el valor de pH del extracto, con solución de NaOH (2.0mol / l) a 7.0-8.0 antes de diluir.

Método 2 (LOD: 20μg/kg-50μg/kg)Moler la muestra y pasar a través de un pedregal de malla 20;

  1. Pesar 5,0 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml;
  2. Agregue 40 ml de solución de extracción de metanol al 80% al tubo y apriete la tapa;
  3. Agite vigorosamente, mezcle o agite en vórtex durante 3 minutos;
  4. Centrifugar durante 5 minutos a 4.000 rpm. Si no dispone de centrífuga, puede dejar precipitar durante unas horas.
  5. Transfiera 1 ml de la capa superior de extracto a un tubo nuevo y agregue 80% de solución de extracción de metanol al tubo (el volumen de adición de la solución de extracción se determina por los puntos de corte, consulte la tabla a continuación), mezcle incluso;
Línea de corte ( μg/kg) 20 30 40 50
Volumen de la solución de extracción (mL) 0 0.6 1.2 1.8

Transfiera 100μL de la capa superior de extracto a un tubo nuevo y agregue 200μL de solución de dilución de muestra, mezcle bien incluido lo del fondo.

Nota: Para las muestras de DDGS, harina de germen de maíz, proteína de maíz en polvo y algunos productos de alimentación, ajuste el valor de pH del extracto, con solución de NaOH (2.0mol / L) a 7.0-8.0 antes de diluir.

 Modo de empleo: (leer completamente antes de usar)

Todos los reactivos deben haber sido atemperados a Temperatura ambiente (20-25ºC) antes de su empleo

  1. Retire la tapa del tubo y tome la cantidad adecuada de tiras de prueba y micropocillos; coloque los micropocillos en un soporte de micropocillos e inmediatamente cierre el tubo.
  2. Usando una pipeta de un solo canal, agregue 150μL de diluyente de ensayo a cada micropocillo. Disuelva el conjugado de recubrimiento en el micropocillo pipeteando el contenido hacia arriba y hacia abajo de 5 a 6 veces.
  3. Mantenga durante 3 minutos a temperatura ambiente (20-25 ºC) y coloque una tira reactiva en un pocillo.
  4. Permita que la tira reactiva desarrolle color durante 8 minutos a temperatura ambiente (20-25 ºC).
  5. Interprete los resultados de la prueba inmediatamente dentro de 1 minuto.

Interpretación de Resultados

Siempre debe aparecer una línea de color en la sección superior de la tira reactiva para indicar que la tira reactiva está funcionando correctamente. Esta línea es la Línea de Control (C). Una línea en la sección inferior de la tira reactiva indica los resultados de la prueba. Esta línea es la línea de prueba o Test (T).

 Muestra Negativa (-): 2 lineas visibles. Esto indica que la muestra contiene menos aflatoxina B1 que el límite buscado. En cuanto aparecen dos líneas debe considerarse negative la muetsra.

Muestra Positiva (+): solo se puede ver la línea control (C). Esto indica que la muestra contiene aflatoxina B1 por encima (o igual) al límite buscado.

Resultados Inválidos:

Si no aparece la línea de Control el test es inválido y hay que repetir el análisis con otra tira y otro pocillo.

Precauciones

  1. Siga las instrucciones de los procedimientos de extracción y del test.
  2. No utilizar más allá de la fecha de vencimiento.
  3. No toque la membrana en las tiras.
  4. Levante el sellador de micropocillos suavemente, para evitar que el polvo se libere de los pozillos.
  5. No vuelva a utilizar las tiras de test o los micropocillos una vez empleados.
  6. Los micropocillos sin sellar deben usarse dentro de 1 hora.
  7. Evite la luz solar directa o dar soplidos, tos, estornudos… al realizar los test.
  8. No use agua del grifo, agua destilada o agua desionizada como control negativo.
  9. El metanol es inflamable. Se debe tener precaución en su uso y almacenamiento.
  10. Considere que todos los materiales, contenedores y dispositivos que están expuestos a la muestra están contaminados con toxina. Use guantes protectores y gafas de seguridad cuando use el kit.
  11. Los componentes en este kit de prueba han sido probados en control de calidad como una unidad de lote estándar. No mezcle componentes de diferentes números de lote.

Almacenamiento y vida útil

  1. Almacenamiento: la temperatura de almacenamiento para los kits es de 4-30 ºC. ¡NO CONGELAR!
  2. Vida útil: 12 meses desde fabricación.
  3. Fecha de producción, fecha de vencimiento y número de lote, consulte la etiqueta en el paquete.

Fabricado en exclusiva para España y para MICROKIT, desde Abril de 2018, bajo Norma ISO 9001. Origen: Canadá.

Si desea más información sobre nuestros Aflatoxin B1 Test Strip rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto . O si lo prefiere póngase en contacto con nosotros a través de nuestro correo electrónico microkit@microkit.es o por teléfono en el nº 91-897 46 16

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